药用植物内生真菌代谢产物的活性研究进展

肿瘤活性，以鬼臼毒素为母体改造所得的一些衍生 物，如依托泊苷和替尼泊苷等已用于临床治疗。刘 仕平等＂Ｊ从中华山山荷叶的根状茎和ｉｌｉａ角莲中分 离到可产生鬼臼毒素或其类似物的内生真菌。２００６ 年Ｅｙｂｅｒｇｅｒ等旧。从盾叶鬼臼的根茎得到１株内生真 菌Ｐｈｉａｌｏｃｅｐｈａｌａ ｆｏｒｔｉｎｉｉ，从它的发酵液中得到了具有 抗肿瘤活性的鬼臼毒素。王兴红一１通过对桃儿七、云 南八角莲等７种鬼臼类植物中的３４８株内生真菌发酵 液进行抗癌活性测定，获得了抗癌活性菌株１ １２株。 １．４产其他抗肿瘤活性物质的化合物 除了上述 化合物，次生代谢产物中的抗肿瘤活性物质还有很 多。朱佳等¨训通过对槲寄生内生真菌的分离培养， 并对ＳＭＭＣ一７７２１肿瘤细胞增殖的影响研究发现，槲 寄生内生菌发酵液具有抗肿瘤作用，对人肝癌和胃 癌细胞增殖具有抑制作用。泰国学者从藤黄属植物 中分离出５１种内生真菌，并对这些内生真菌产生的 ６５种次生代谢产物活性进行了测定，其中有１１．１％ 的代谢产物具有抗人肺癌ＮＣＩ．Ｈ１８７细胞活性，有 １２．７％的代谢产物抗人口腔表皮样癌ＫＢ细胞¨¨。 ２００６年，Ｔｅｌｅｓ等ｕ２ ｏ从茎皮香木瓣树的树叶中分 离出一株内生真菌Ｐｅｒｉｃｏｎｉａ ａｔｒｏｐｕｒｐｕｒｅａ，从其代谢 产物中也得到了该二萜化合物，Ｔｅｌｅｓ发现该化合物 能够明显降低肿瘤细胞ＨｅＬａ和中国仓鼠卵巢的生 存能力，与著名的抗癌药物顺铂有类似的疗效。 ２００７年，Ｔａｎ等¨到从植物青蒿的一株内生真菌Ｈｙ．
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药用植物内生真菌产次生代谢产物的研究进展
徐范范Ａ（综述），金波，丁志山※（审校）
（浙江中医药大学，杭州３１００５３） 中图分类号：Ｒ７３－３５４ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００６－２０８４（２０１０）１７－２６６７－０３
分子生物学等基础研究方面取得了较大的进步。
１．２
产喜树碱及其衍生物的化合物
喜树碱
（ｅａｍｐｔｏｔｈｅｃｉｎｅ）是拓朴异构酶Ｉ的专属性抑制剂，在
临床上广泛应用于肝癌、胃癌、膀胱癌及白血病等的
治疗。闵长莉等一。采用组织块法从喜树果实中分离
筛选得到１３株纯化的内生菌株，经过摇瓶发酵培养
后，采用薄层色谱法与高效液相色谱法对其菌丝体 提取物进行分析，发现有１株菌株能够产生１０．羟基
肿瘤药物研制的新时代。２００６年，田仁鹏等怛。从生 长在湖北的南方红豆杉树皮中韧皮部分离出一株能 产紫杉醇的菌株ＴＰＦ６，其发酵液中紫杉醇含量为 ８４．５恤ｇ／Ｌ。２００８年，孙端方等¨１从罗汉松中分离到 了１株产紫杉醇内生真菌ＥＰＴＰ—ｌ，对Ｖｅｒｏ细胞表现 出明显的致细胞凋亡作用。赵凯等Ｈ１从东北红豆杉 中分离筛选到１株能够产生紫杉醇菌株ＨＤｌ８１－２３，
有抑制作用。倪志伟等¨列从云南美登木叶中分离筛
选到具有抗菌活性的内生真菌Ｃｈａｅｔｏｍｉｕｍ‘ｇｌｏｂｏｓｕｍ ＬｙＳ０’菌株，利用活性追踪法在其发酵产物中分离到
抗橙色青霉和抗结核分枝杆菌的化合物，经电喷雾
串联质谱法、磁共振等波谱数据确认该活性成分为 球毛壳甲素ｃｈａｅｔｏｇｌｏｂｏｓｉｎ Ａ和球毛壳乙素ｃｈａｅｔｏｇｌｏ—
ＩＦＢ一１８的代谢产物中得到２个新的
化合物轮层炭壳酮ｃ和轮层炭壳酮Ｄ。这２个化合 物对肠癌细胞ＳＷｌｌｌ６（半数抑制浓度分别为４９．５ 和４１．０ ｖＬｍｏｌ／Ｌ）具有细胞毒活性，与抗癌药物氟尿 嘧啶（半数抑制浓度为３７．０ Ｉｚｍｏｌ／Ｌ）活性相近。阮
丽军等¨４０从植物内生真菌ＨＣＣＢ００１８９的次生代谢 产物中分离出２个黄酮类化合物，分别是化合物４’，
摘要：植物内生真菌是一大类未被充分研究过的新的微生物资源，具有潜在的应用前景。随着 对药用植物内生真菌研究的深入，从药用植物内生真菌中寻找新的生物活性成分已成为研究热点。 总结近年药用植物内生真菌产生的抗肿瘤、抗菌等活性次生代谢产物最新的研究进展，内生真菌活 性成分已成为发现新颖结构化合物及新药物的重要资源。 关键词：药用植物；内生真菌；次生代谢产物
Ｒｅｃｅｎｔ Ｓｔｕｄｉｅｓ Ｏｉｌ ｔｈｅ Ｓｅｃｏｎｄａｒｙ
ｌ具抗肿瘤活性的化合物 １．１产紫杉醇及其衍生物 的化合物紫杉醇是存在于 各种紫杉属植物树皮和树叶 中的萜类化合物，被当今世 界上认为是广谱、活性最强 的抗癌药物。１９７１年美国 学者Ｗａｎｉ从短叶红豆杉的 树皮中提取出了具有独特的 抑制微管解聚和稳定微管作 用的紫杉醇，开辟了一个抗
ｗｈｉｃｈ ｆｏｕｎｄ ｔｈｅ
ｎｅｗ
ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ
ｏｆ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ
ａｎｄ ｎｗ ｄｒｕｇｓ．
Ｋｅｙ
ｗｏｒｄｓ：Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ ｐｌａｎｔｓ；Ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｉ；Ｓｅｃｏｎｄａｒｙ ｍｅｔａｂｏｆｉｔｅｓ
近年来，从天然产物中筛选生物活性成分成为 研究创制新药的有效途径之一。植物历来是筛选天 然药物最主要的原料，但药用植物的过度使用，致使 许多药用植物濒临灭绝。为解决资源问题，近年来
Ｂｏ，ＤＩＮＧ ｔｈｅ ｒｅｓｅａｒｃｈ
ｏｎ
ｎｏｖｅｌ ｏｒｉｇｉｎａｌ ｂｉｏａｃｆｉｖｅ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｆｒｏｍ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ
ｒｅｃｅｎｔ
ｆｕｎｇｉ
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ｏｎ
ｓｔｕｄｙｉｎｇ
ａｎｔｉ．ｔｕｍｏｒ
喜树碱，其１０－羟基喜树碱产量为６７７ ｐｇ／Ｌ，并将该 菌株命名为ＸＫ００１。随后用同样的方法从树皮中分
离纯化得到另一菌株ＸＫ００２，其１０－羟基喜树碱产量 为４１０
ｔｘｇ／Ｌ‘６｜。
基金项目：浙江省自然科学基金（Ｙ２０８０５８０）
１．３产鬼臼毒素及其衍生物的化合物
鬼臼毒素
万方数据
匡堂缝述！Ｑ！Ｑ堡！旦筮！垒鲞复！！翦丛地！生垦墼竖ｉ坐迪！：墨业垫！Ｑ：塑：！ｉ：№：！！ （ｐｏｄｏｐｈｙｌｌｏｔｏｘｉｎ）是存在于足叶草、桃儿七、山荷叶、 八角莲等植物中的一类天然木脂素，具有显著的抗
鬼臼毒素、脱氧鬼臼毒素和苦鬼臼毒素为标准品，采 用高效液相色谱仪法筛选得到一株可代谢产生重要
药用和杀虫活性物质鬼臼毒素类似物的内生真 菌ＳＣｌ３。
万方数据
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・２６６９・
３．３抗氧化类物质
内生真菌还能产生多种抗氧
［２］
田ｆ’：鹏．杨桥，周围玲，等．一株产紫杉醇的南方红砭杉内生真
化类物质，为了确定槐树内生真菌的抗氧化活性，史 佳琴等ｐ１利用抗氧化能力测试盒初步测定了分离自 槐树的１２个内生真菌菌株的总抗氧化活性，进而采 用碘量法比较了总抗氧化活性较高的菌株的抗氧化 能力及其动态变化。结果表明，供试的１２株槐树内 生真菌均有不同程度的抗氧化活性，４个菌株的抗氧 化活性较高，其中７号菌株最高。本研究的结果预 示着槐树内生真菌在探寻天然抗氧化活性产物中具
ＭｅｔａｂｏＨｔｅｓ Ｐｒｏｄｕｃｅｄ ｂｙ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ
Ｐｌａｎｔ Ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ
Ｆｕｎｇｉ
ＸＵ
ｎｎ和ｎ，ＪＩＮ
Ｚｈｉ・ｓｈａｎ．（Ｚｈｅｊｉａｎｇ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ ３１００５３，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｐｌａｎｔ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｉ ａｒｅ ａ ｌａｒｇｅ ｃｌａｓｓ ｏｆ ｎｅｗ ｍｉｃｍｂｉａｌ ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ ｎｏｔ ｆｕｌｌｙ ｓｔｕｄｉｅｄ，ｗｉｔｌｌ ｐｏ－ ｔｅｎｔｉａｌ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ．Ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｒｅｓｅａｒｃｈｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｆｉｅｌｄ ｏｆ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ ｆｕｎｇｉ ｏｆ ｍｅｄｉｃｉｎａｌ ｐｌａｎｔｓ，
分离到ＪＦ、Ａｌ、Ｇ６等１１株内生真，其中ＪＦ、Ａ１的发
为１００％和２６．６７％。卢亮等Ⅲｏ从砂地柏（Ｓａｂｉｎａ
ｖｕｌｇａｒｉｓＡｎｔ．）不同组织中分离到１２６株内生真菌，以
酵产物具有较广谱的抗菌活性，对革兰阳性细菌（如
表皮葡萄球菌），革兰阴性细菌（如产气肠杆菌、大肠 杆菌、伤寒杆菌等）均具有较强的抑制作用。 武金占等¨刮从苦皮藤根皮中分离的１株编号为 ２Ｋ３内生真菌代谢产物，生物测定其杀菌活性结果
发现其紫杉醇产量为２０６．３４峙／Ｌ，而且该菌株的发
酵提取纯化产物对ＨｅＬａ细胞具有较强的抑制作用。 产生紫杉醇的内生菌具有丰富的物种多样性。 这些内生真菌既有新种，如安德紫杉菌；也有新记录 种，如树状多节孢菌；更多的则是常见的真菌，如链 格孢菌、头孢菌等。当前，对产紫杉醇内生菌的开发 利用研究正在进行之中，已在菌株生产 Nhomakorabea发酵条件、
ｂｏｓｉｎ Ｂ，首次发现ｃｈａｅｔｏｇｌｏｂｏｓｉｎ Ｂ具有抗结核分枝
杆菌活性。从内生真菌中发现抗病毒活性化合物的 研究报道不多，但通过建立适当的抗病毒活性筛选 体系，还是有希望从中找到一些新型结构的抗病毒 活性物质。 ３其他作用的次生代谢产物 ３．１植物生长调节类物质 内生真菌长期和宿主 植物生活在一起，对植物的生长发育具有很重要的 作用。研究表明植物内生真菌可以产生或促进宿主 植物产牛某些植物激素。袁志林等瑚１研究发现，大 戟科植物内生真菌Ｂ３分泌吲哚乙酸和脱落酸等植 物生长调节剂。勇应辉等心¨把大戟内生真菌接种到 大戟组培苗，将建立共生后的组培苗移栽室外，生长 １年后检测生物量和萜类的量，结果发现内生真菌 Ｅ４（Ｆｕｓａｒｉｕｍｓｐ．Ｉ）和Ｅ５（Ｆｕｓａｒｉｕｍｓｐ．ＩＩ）均促进了 宿主植物生长，并能同时促进其萜类的合成。罗在 柒等。圳从野生金钗石斛和环草石斛植株中分离、纯 化得到菌株共５３株，与金钗石斛和环草石斛无菌苗 建立植物一微生物共生体系，并观测植株生长状况，结 果观测得到有２２株能促进金钗石斛生长。 ３．２杀虫物质植物内生真菌能够产生多种生物 碱，如有机胺类、吡喏里西啶类、麦角碱类等，这些生 物碱有抗病原菌、抗线虫等多种生物学活性。杨春 平等∞ｏ从新鲜苦皮藤根韧皮部分离筛选到１株内生
药用植物新资源研究的一个热点集中在药用植物内
生菌上。植物内生真菌是指生活史中的某一段生活 在健康植物组织内部，并不引起宿主植物出现明显 病害症状的一类真菌，它是生活在植物组织内的一 类微生物，是植物微生态系统中的天然组成成分。 内生真菌长期生活在植物体内的特殊环境中，并与 寄主协同进化，根据内共生理论，内生真菌可能产生 与宿主相同或相似的具有生物活性的次生代谢 产物。 研究发现，内生真菌能产生许多活性次级代谢 产物，从而能够增强植物的抗逆性，表现在非生物胁 迫（如抗高温、抗干旱等）和生物胁迫（如阻抑昆虫和 食草动物的采食、抵抗病虫害等）方面，这些活性次 级代谢产物具有抗菌、抗肿瘤等生物活性。１９９３年， 美国蒙大拿州立大学的Ｓｔｒｏｂｅｌ小组在短叶红豆杉内 生真菌Ｔａｘｏｍｙｃｅｓ ａｎｄｒｅａｎａｅ中发现紫杉醇ｕ Ｊ，国内 外掀起对药用植物和濒危植物内生真菌的研究热 潮。研究热点主要集中在新的抗肿瘤、抗菌等活性 化合物的发现，植物内生真菌已成为发现新天然活 性物质的重要资源。现对近年来药用植物内生真菌 产次生代谢产物的研究进展予以综述。
７・二羟基异黄酮和４，５，７一三羟基异黄酮。这２个化 合物对肿瘤细胞Ａ５４９和ｌ＿ｘ）Ｖｏ具有明显的抑制 作用。 ２具抗菌作用的化合物 药用植物内生真菌可产多种抗生素，能抑制病
真菌，编号为Ｈｄ３。生测结果表明，Ｈｄ３菌株菌丝乙
酸乙酯提取物对３龄黏虫、小菜蛾的胃毒活性分别
原体、细菌、真菌、病毒等。陈炎伟等Ｈ副从槲寄生中
ｐｏｘｙｌｏｎ
ｔｒｕｎｃａｔｕｎ
表明，２Ｋ３菌株菌丝体的甲醇和乙酸乙酯提取物对 多种植物病原真菌具有较强的抑菌活性。戴文君 等Ｌｌ列对７２株海南粗榧内生真菌进行了抗肿瘤和抗 菌活性筛选。结果显示，有９株内生真菌至少对一 种指示瘤株具有细胞毒活性，５株内生真菌对金黄色 葡萄球菌有较强的抑菌活性，ｌ株内生真菌对辣椒疫 霉有抑制作用。 李雅等¨副发现，杜仲内生真菌对植物病原真菌
ａｎｄ
ａｎｔｉ－ｂａｃｔｅｒｉａｌ
ａｃｔｉｖｉｔｖ
ｏｆ ｓｅｃｏｎｄａｒｙ ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ
ａｎ
ｐｒｏｄｕｃｅｄ ｍｅｄｉｃｉｎａｌ ｐｌａｎｔ ｅｎｄｏｐｈｙｔｅ．Ｔｈｅ
ｓｏｕｒｃｅ
ａｃｔｉｖｅ
ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ ｏｆ ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ
ｍ１１９ｉ
ｈａｓ ｂｑ，ｃｏｍｅ
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