小鼠组织荷瘤步骤

组织荷瘤步骤

1.将新鲜肿瘤组织放到HTK液里，迅速拿到超净台内。

2.将肿瘤组织放入盛满生理盐水的6cm培养皿中，反复冲洗3-4次。每次均需换新水。

3.将肿瘤组织放入盛满三抗空培的6cm培养皿中，反复冲洗3-4次。每次均需换新培养基。

4.用镊子将肿瘤组织按在空培中，用剪刀将其剪碎，一般剪成1mm3左右的碎块即可。

5.碎块移入新培养基中清洗最后一次，用镊子夹起碎块塞入穿刺针中，不断抽吸，使其进

入多个碎块。

6.荷瘤鼠用酒精棉球擦拭全身。将其抓起，暴露侧腹部，在侧腹中部剪毛，用剪刀在其剪

毛处将皮肤剪一1mm长小口。

7.将穿刺针由小口进入皮下，向前肢或后肢端试探前行，针尖进入上肢或下肢根部停止。

将组织块注入，旋转针头拔出。

8.用棉签紧贴皮肤顺注入方向推揉，使组织碎块尽量集中于注射处。

9.用消毒棉球擦干注射处，放下老鼠，让其自由活动。