HPLC测定益母草药材及其颗粒制剂中水苏碱含量
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中国中医药咨讯
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２１ 年 ６ ００ 月下 第 ２ 第 ｌ 期 卷 ２
Ｊｎ ｕｅ ２ ０ ０１ Ｖｏ． １ ２ Ｎｏ １ ．２
２ ６・ ４
Ｊ ｕｎ ｌ ｆ ｉａＴ ａ ｉｏ ｌＣｈｎ ｓ ｄｃｎ ｎｏｍａｉｎ ｏ ｒａ ｎ ｒｄｔ ｎａ ｏ Ｃｈ ｉ ｉｅ ｅＭｅ ｉｉｅＩｆｒ ｔ ｏ
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１． “ｇ Ｏ１ ３ ／ ｍＬ的对 照 品 溶液 。
（ ａ 与其它 成分表现出 良好的分离效果 ， 峰 ） 能够满足水苏 碱 的 含量 测 定 。 ２ 标准 曲线的制备 ． ４ 吸取相应量 的储备液就可制成标准品溶液 ，浓度分别 为 ：．１５０ 、０１ 、５ ０ ２ ．６２ ．３３ ．９ ／ Ｅ 分别 １ 、． １． １． 、０ 、５３ 、０３ 仙ｇ 。 ０ ７ ３ ２ ２ ｍ 精 密吸取 ２ ． Ｌ进样 ， ０Ｏ ？ 并测定其峰 面积值 ， 以进样 浓度 并 Ｙ ｇ Ｌ对峰 面积值 Ｘ（ ＵＩ 归得 回归曲线。回归方程 （ ／ ） ｍ ｍＡ ） ／ ￣ 为 Ｙ ０ ００ ５ ０７４ ６ ， 性 关 系 良好 （Ｚ０９９ ） ＝ ． ０ ３Ｘ＋ ． ０ ９线 ０ ０ Ｒ＝ ． ７。 － ９ ２ 精密度及稳定性试验 ． ５ 日内、 日问精密度符合要求； 样品溶液在 １ｈ内稳定性 ２ 均 良好 ；水 苏碱 的平 均加 样 回 收率 为 １０９ ， Ｓ ０ ．％ Ｒ Ｄ为 １ ８ 符合规定 ， ． ％， ２ 可用于益母草流浸膏 中水苏碱的含量测
定。
２ 供试品溶液 的制备 ． ２ ２ ． 益母 草 药 材 流浸 膏 供试 品 的制 备 ．１ ２ 取 益母 草 经粉 碎 的药 材 适 量 ，分 批 次 加 入 ８ ％乙醇 ， ０ 加热 回流提取三次 ， 合并提取液。 滤液减压 回收溶剂并浓缩 至 ２ ｉｇ ｍＪ 药材 ， 浓缩液加 ２倍量水稀释 ， 置 、 静 抽滤除去不 溶性物质 。 称取 ２ ｍ ５ ｇ的益母 草流浸膏 ， ２ ｍ 于 ５ ｉ容量瓶 中， 以 甲醇溶 解 、 容 ， 定 过滤 后 即 得 。 ２ － 益 母 草颗 粒 供试 品的 制 备 ．２ ２ 称取益母草颗粒约 １ｒ ， ０ ｇ 置索氏提取器 中， ａ 加乙醇 回 流 ８， ｈ 蒸干 提 取 液 ， 残渣 以流 动相 溶 解 ， 转移 至 １０ Ｌ容 并 ０ｍ 量瓶 中 ， 以流 动相 定 容 ， 即得益 母 草 颗 粒供 试 品 。 ２３ 色 谱条 件 ． 取一定量水苏碱对照品溶液 ， 以甲醇稀 释， 紫外扫描发 现 ２ ０ ｍ处有最大吸收 ， １ｎ 故选 定检测波 长为 ２０ ｍ。色谱 １ｎ 条 件 ： ｉ ｏｓＣ ８ （６ ｍ ×２０ ｍ ；流 动 相 为 甲 醇 一 ． Ｄａ ｎｉ １ ４ ｍ ｍ ｌ ． ５ｒ ） ａ ０
中药 师 ， 究方 向 ： 研 中药 研 究
制提供依据。 １ 仪器与试药
Ｓ Ｌ ＩＡ Ｐ型 Ｓ Ｉ Ａ Ｚ （ Ｃ —Ｏ Ｖ Ｈ Ｍ Ｄ Ｕ 日本 ）Ｍ ２５ 型 电子 分 ； Ｅ １ｓ
析天平 舞多利斯）Ｋ — Ｏ Ｄ ； Ｑ ＩＯ Ｅ型数控超声波清洗器 ， 真空 干燥箱 ； 水苏碱标准品购于中国药品生 物制 品检验所（ 批号
１０ ８ — ０ ３６； 母 草 药 材 ｆ ０ ００ ２０ ０）益 毫州 药 材 市 场 ）益 母 草 颗 粒 ； （ 哈尔滨仁皇药业）甲醇 、 ； 乙醇（ 纯）水 为双蒸 水 ； 它 色谱 ； 其 试 剂 均 为分 析 纯 。 ２ 实 验方 法 与 结果 ２１ 对照品溶液的制备 ． 制备 １ １ ５ ／ ０ ． ｇ ２ ｍＬ的水苏碱标准品储备液 ， 吸取 ｌ Ｌ ｍ 储 备液 于 １ ｍ ０ Ｌ容量 瓶 中 ，用 甲醇定 容 至 刻 度 ， 即得
【 关键词 】 高效液相色谱法 ； 益母草 ； 水苏碱
益 母 草具 有 利尿 消 肿 ， 血 调经 的 功 效 ， 主要 功 效 成 活 其 分为水苏碱Ⅲ 有文献报道薄层 色谱扫描法可用 于其 中水苏 。 碱 含 量 测 定 ， 此 法 干 扰 因 素 多 ， 现 性 差 ［１ 文 采 用 但 重 ２。本 ＨＬ Ｐ Ｃ法 ， 以水 苏碱 为 参 照 物 ， 定 了益 母 草 流 浸 膏及 制剂 测 中 的水 苏 碱 含量 并 进 行 了方 法 学 考察 ，为其 精 确 的质 量 控 ．
ｔ ｉ ／ｎ ａ ｒ
Ａ对 照 品 色谱 图 Ｂ供 试 品 Ｃ阴性 对 照 品 图 １ 益母草流浸膏 Ｈ Ｌ Ｐ Ｃ色谱图（ ａ 峰 即为水苏碱 ） 由图 可见 ，在上 述 色 谱 条件 下 ，样 品溶 液 中的水 苏 碱
作者 简 介 ： 曾中强， ，１６ ． ～ 。 男 （９ ６１ ） ２ 湖南韶东人 ， 现有职称 ： 主管
ｌ ］‘ ０ ＂ ０ ］㈣ ］‘ ｃ ，
２ 含 量 测 定 ． ６ 取益母草药材流浸膏及颗粒供试品溶液 ，以流动相稀 释一定倍数 ， 过滤后 ， 精密吸取续滤液 ２ ７ 进样 ， ０Ｌ 测定水苏 碱峰 面积 Ａ， 代人标准 曲线 方程 得水苏碱浓度 ， 进而可计 算样品中水苏碱含量， 结果见表 １ 。 表 １ 品 含量 测 定 样
０ｍｌ ５ ｏＬ磷 酸 二 氢 钾 溶 液 （ ： ０； 测 波 长 ２ ０ｍ， 温 ／ ７ ３ ）检 ０ １ｎ 柱 ２℃ ， ５ 流速 １ ｍ ／ ｎ 进样 量 ２ ７ 。在此 条 件 下 ， ． Ｌｍｉ， Ｏ ０Ｌ 取适 当浓 度 的样 品 溶液 进 样 ， 录 色谱 图 ， 果 见 图 １ 记 结 。
３ 讨 论
ＨＬ Ｐ Ｃ法测 定 益 母 草 流 浸 膏 中水 苏 碱 含 量 的方 法 具 有 操作 简便 、 结果可靠 、 定量精确的特点【 ３ １ 。检测波长选择方 面 ， 苏 碱 在 ３ ５ ｍ处 也 有 一 处 吸 收峰 ， 较 弱 ， 此 选 择 水 ６ｎ 但 因 ２ ５ ｍ处 吸 收 峰作 为 检测 波长 。流动 相 的选 择 ， １ｎ 实验 发 现 ， 以甲 醇 一 ． ｍ ｌ 酸 二 氢钾 溶 液 （ ３ ） 成 的 流 动相 ， ００ ｏＬ磷 ５ ／ ７ ０： ０ 组 流动阻力小 ， 柱平衡时间短 ， 分离效果好 ， 留时问适 中， 保 效 果较 好 。 总 之 ，使 用 Ｈ Ｌ Ｐ Ｃ法 则 可 以测 定益 母 草 药 材 及 其颗 粒 制剂中水 苏碱含量 ， 可以为益母 草的提取 、 分离 、 纯化及制 剂制备等各个工艺过程 的精确质量控制提供一定标准。 参 考文 献
［】 １梁旭明， 王宇 ， 张小梅， 薄层扫描法测定益母草颗粒剂中盐酸 等． 水苏碱 的含量【Ｊ Ｊ中成药，０ ６ ２ （ ：０３ １７ ． ． ２ ０ ，８７ １７ — ０ ４ ） 『】 ２张燕 ， ２ 王文全 ， 菊． 魏 我国北方 医 国药 ，０７，８ ７ ：５４ １７ ． Ｊｌ 时 ２０ １ （ ）１７ — ５ ５ ［ 王峻梅 ， 云， ３ 】 翟海 陈缵光 ． 草药材 中水苏碱成分 的高频 电导 益母 毛细管 电泳法分 析『】 Ｊ 中山大学 学报 ： ． 自然科 学版 ，０ ５４ １ ： ２ ０ ，４（ ）
Ｈ Ｌ Ｐ Ｇ测 定 益母 草 药材 及 其颗 粒 制 剂 中水 苏碱 含 量
曾 中强
（ 怀化市中医院药剂科 ， 湖南
怀化 ， １０ ０ ４ ８０ ）
【 摘要 】 目 ： 的 建立高效液相色谱法测定益母草药材及其颗粒制剂 中水苏碱含量的方法 。方法 ： 色谱柱为 Ｄａ ｏ ｓ １ ｉ ｎｉ ８ ｍ ｌ Ｃ
ｆ． ｍ×２０ ｍ ； ４６ ａ ｒ ５ ｍ ）流动相为 甲醇 一 ． ｌ Ｏ０ ｍｏＬ磷酸二氢钾溶液（０： ０； ５ ／ ７ ３） 检测波长 ２０ｎ 柱温 ２ ￣ 流速 １ ｌｍｎ １ ｍ， ５Ｃ， ． ｍＪ ｉ。结果 ： ０ 益 母草药材及其制剂中水苏碱 的保 留时间均为 １． ｒｎ 色谱峰分离 良好 ， ５１ａ ， ｉ 对照 品水苏碱线性范 围为 １ ｌ Ｏ３ ｇ ． ～３ ． ７／ Ｒ ＝ ． ０ ９ ｍＬ（２ ０ ９ ９ ，＝ ）方法 回收率为 １０１ Ｒ Ｄ为 ｊ ３ ９ ７ ｎ ５， ０ ．％， Ｓ ． ％。结论 ： ０ 该法可用于益母草流浸膏中及其颗粒制剂中水苏碱的含量测定， 可以 用来对提取物及相关制剂进行质量控制。
・
２１ 年 ６ ００ 月下 第 ２ 第 ｌ 期 卷 ２
Ｊｎ ｕｅ ２ ０ ０１ Ｖｏ． １ ２ Ｎｏ １ ．２
２ ６・ ４
Ｊ ｕｎ ｌ ｆ ｉａＴ ａ ｉｏ ｌＣｈｎ ｓ ｄｃｎ ｎｏｍａｉｎ ｏ ｒａ ｎ ｒｄｔ ｎａ ｏ Ｃｈ ｉ ｉｅ ｅＭｅ ｉｉｅＩｆｒ ｔ ｏ
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５ ｌ ０ ｌ ２ ５ ０
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如 Ｉ ｎ
１． “ｇ Ｏ１ ３ ／ ｍＬ的对 照 品 溶液 。
（ ａ 与其它 成分表现出 良好的分离效果 ， 峰 ） 能够满足水苏 碱 的 含量 测 定 。 ２ 标准 曲线的制备 ． ４ 吸取相应量 的储备液就可制成标准品溶液 ，浓度分别 为 ：．１５０ 、０１ 、５ ０ ２ ．６２ ．３３ ．９ ／ Ｅ 分别 １ 、． １． １． 、０ 、５３ 、０３ 仙ｇ 。 ０ ７ ３ ２ ２ ｍ 精 密吸取 ２ ． Ｌ进样 ， ０Ｏ ？ 并测定其峰 面积值 ， 以进样 浓度 并 Ｙ ｇ Ｌ对峰 面积值 Ｘ（ ＵＩ 归得 回归曲线。回归方程 （ ／ ） ｍ ｍＡ ） ／ ￣ 为 Ｙ ０ ００ ５ ０７４ ６ ， 性 关 系 良好 （Ｚ０９９ ） ＝ ． ０ ３Ｘ＋ ． ０ ９线 ０ ０ Ｒ＝ ． ７。 － ９ ２ 精密度及稳定性试验 ． ５ 日内、 日问精密度符合要求； 样品溶液在 １ｈ内稳定性 ２ 均 良好 ；水 苏碱 的平 均加 样 回 收率 为 １０９ ， Ｓ ０ ．％ Ｒ Ｄ为 １ ８ 符合规定 ， ． ％， ２ 可用于益母草流浸膏 中水苏碱的含量测
定。
２ 供试品溶液 的制备 ． ２ ２ ． 益母 草 药 材 流浸 膏 供试 品 的制 备 ．１ ２ 取 益母 草 经粉 碎 的药 材 适 量 ，分 批 次 加 入 ８ ％乙醇 ， ０ 加热 回流提取三次 ， 合并提取液。 滤液减压 回收溶剂并浓缩 至 ２ ｉｇ ｍＪ 药材 ， 浓缩液加 ２倍量水稀释 ， 置 、 静 抽滤除去不 溶性物质 。 称取 ２ ｍ ５ ｇ的益母 草流浸膏 ， ２ ｍ 于 ５ ｉ容量瓶 中， 以 甲醇溶 解 、 容 ， 定 过滤 后 即 得 。 ２ － 益 母 草颗 粒 供试 品的 制 备 ．２ ２ 称取益母草颗粒约 １ｒ ， ０ ｇ 置索氏提取器 中， ａ 加乙醇 回 流 ８， ｈ 蒸干 提 取 液 ， 残渣 以流 动相 溶 解 ， 转移 至 １０ Ｌ容 并 ０ｍ 量瓶 中 ， 以流 动相 定 容 ， 即得益 母 草 颗 粒供 试 品 。 ２３ 色 谱条 件 ． 取一定量水苏碱对照品溶液 ， 以甲醇稀 释， 紫外扫描发 现 ２ ０ ｍ处有最大吸收 ， １ｎ 故选 定检测波 长为 ２０ ｍ。色谱 １ｎ 条 件 ： ｉ ｏｓＣ ８ （６ ｍ ×２０ ｍ ；流 动 相 为 甲 醇 一 ． Ｄａ ｎｉ １ ４ ｍ ｍ ｌ ． ５ｒ ） ａ ０
中药 师 ， 究方 向 ： 研 中药 研 究
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析天平 舞多利斯）Ｋ — Ｏ Ｄ ； Ｑ ＩＯ Ｅ型数控超声波清洗器 ， 真空 干燥箱 ； 水苏碱标准品购于中国药品生 物制 品检验所（ 批号
１０ ８ — ０ ３６； 母 草 药 材 ｆ ０ ００ ２０ ０）益 毫州 药 材 市 场 ）益 母 草 颗 粒 ； （ 哈尔滨仁皇药业）甲醇 、 ； 乙醇（ 纯）水 为双蒸 水 ； 它 色谱 ； 其 试 剂 均 为分 析 纯 。 ２ 实 验方 法 与 结果 ２１ 对照品溶液的制备 ． 制备 １ １ ５ ／ ０ ． ｇ ２ ｍＬ的水苏碱标准品储备液 ， 吸取 ｌ Ｌ ｍ 储 备液 于 １ ｍ ０ Ｌ容量 瓶 中 ，用 甲醇定 容 至 刻 度 ， 即得
【 关键词 】 高效液相色谱法 ； 益母草 ； 水苏碱
益 母 草具 有 利尿 消 肿 ， 血 调经 的 功 效 ， 主要 功 效 成 活 其 分为水苏碱Ⅲ 有文献报道薄层 色谱扫描法可用 于其 中水苏 。 碱 含 量 测 定 ， 此 法 干 扰 因 素 多 ， 现 性 差 ［１ 文 采 用 但 重 ２。本 ＨＬ Ｐ Ｃ法 ， 以水 苏碱 为 参 照 物 ， 定 了益 母 草 流 浸 膏及 制剂 测 中 的水 苏 碱 含量 并 进 行 了方 法 学 考察 ，为其 精 确 的质 量 控 ．
ｔ ｉ ／ｎ ａ ｒ
Ａ对 照 品 色谱 图 Ｂ供 试 品 Ｃ阴性 对 照 品 图 １ 益母草流浸膏 Ｈ Ｌ Ｐ Ｃ色谱图（ ａ 峰 即为水苏碱 ） 由图 可见 ，在上 述 色 谱 条件 下 ，样 品溶 液 中的水 苏 碱
作者 简 介 ： 曾中强， ，１６ ． ～ 。 男 （９ ６１ ） ２ 湖南韶东人 ， 现有职称 ： 主管
ｌ ］‘ ０ ＂ ０ ］㈣ ］‘ ｃ ，
２ 含 量 测 定 ． ６ 取益母草药材流浸膏及颗粒供试品溶液 ，以流动相稀 释一定倍数 ， 过滤后 ， 精密吸取续滤液 ２ ７ 进样 ， ０Ｌ 测定水苏 碱峰 面积 Ａ， 代人标准 曲线 方程 得水苏碱浓度 ， 进而可计 算样品中水苏碱含量， 结果见表 １ 。 表 １ 品 含量 测 定 样
０ｍｌ ５ ｏＬ磷 酸 二 氢 钾 溶 液 （ ： ０； 测 波 长 ２ ０ｍ， 温 ／ ７ ３ ）检 ０ １ｎ 柱 ２℃ ， ５ 流速 １ ｍ ／ ｎ 进样 量 ２ ７ 。在此 条 件 下 ， ． Ｌｍｉ， Ｏ ０Ｌ 取适 当浓 度 的样 品 溶液 进 样 ， 录 色谱 图 ， 果 见 图 １ 记 结 。
３ 讨 论
ＨＬ Ｐ Ｃ法测 定 益 母 草 流 浸 膏 中水 苏 碱 含 量 的方 法 具 有 操作 简便 、 结果可靠 、 定量精确的特点【 ３ １ 。检测波长选择方 面 ， 苏 碱 在 ３ ５ ｍ处 也 有 一 处 吸 收峰 ， 较 弱 ， 此 选 择 水 ６ｎ 但 因 ２ ５ ｍ处 吸 收 峰作 为 检测 波长 。流动 相 的选 择 ， １ｎ 实验 发 现 ， 以甲 醇 一 ． ｍ ｌ 酸 二 氢钾 溶 液 （ ３ ） 成 的 流 动相 ， ００ ｏＬ磷 ５ ／ ７ ０： ０ 组 流动阻力小 ， 柱平衡时间短 ， 分离效果好 ， 留时问适 中， 保 效 果较 好 。 总 之 ，使 用 Ｈ Ｌ Ｐ Ｃ法 则 可 以测 定益 母 草 药 材 及 其颗 粒 制剂中水 苏碱含量 ， 可以为益母 草的提取 、 分离 、 纯化及制 剂制备等各个工艺过程 的精确质量控制提供一定标准。 参 考文 献
［】 １梁旭明， 王宇 ， 张小梅， 薄层扫描法测定益母草颗粒剂中盐酸 等． 水苏碱 的含量【Ｊ Ｊ中成药，０ ６ ２ （ ：０３ １７ ． ． ２ ０ ，８７ １７ — ０ ４ ） 『】 ２张燕 ， ２ 王文全 ， 菊． 魏 我国北方 医 国药 ，０７，８ ７ ：５４ １７ ． Ｊｌ 时 ２０ １ （ ）１７ — ５ ５ ［ 王峻梅 ， 云， ３ 】 翟海 陈缵光 ． 草药材 中水苏碱成分 的高频 电导 益母 毛细管 电泳法分 析『】 Ｊ 中山大学 学报 ： ． 自然科 学版 ，０ ５４ １ ： ２ ０ ，４（ ）
Ｈ Ｌ Ｐ Ｇ测 定 益母 草 药材 及 其颗 粒 制 剂 中水 苏碱 含 量
曾 中强
（ 怀化市中医院药剂科 ， 湖南
怀化 ， １０ ０ ４ ８０ ）
【 摘要 】 目 ： 的 建立高效液相色谱法测定益母草药材及其颗粒制剂 中水苏碱含量的方法 。方法 ： 色谱柱为 Ｄａ ｏ ｓ １ ｉ ｎｉ ８ ｍ ｌ Ｃ
ｆ． ｍ×２０ ｍ ； ４６ ａ ｒ ５ ｍ ）流动相为 甲醇 一 ． ｌ Ｏ０ ｍｏＬ磷酸二氢钾溶液（０： ０； ５ ／ ７ ３） 检测波长 ２０ｎ 柱温 ２ ￣ 流速 １ ｌｍｎ １ ｍ， ５Ｃ， ． ｍＪ ｉ。结果 ： ０ 益 母草药材及其制剂中水苏碱 的保 留时间均为 １． ｒｎ 色谱峰分离 良好 ， ５１ａ ， ｉ 对照 品水苏碱线性范 围为 １ ｌ Ｏ３ ｇ ． ～３ ． ７／ Ｒ ＝ ． ０ ９ ｍＬ（２ ０ ９ ９ ，＝ ）方法 回收率为 １０１ Ｒ Ｄ为 ｊ ３ ９ ７ ｎ ５， ０ ．％， Ｓ ． ％。结论 ： ０ 该法可用于益母草流浸膏中及其颗粒制剂中水苏碱的含量测定， 可以 用来对提取物及相关制剂进行质量控制。