木麻黄小枝总RNA提取方法的比较与优化

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云南栘[木衣]叶片总rna提取方法的比较与改进

西北林学院学报2020!35)3*+95-99JournalofNorth=estForestry?niversitydoi+103969,jissn1001-746120200315云南栘［木衣&十片总RNA提取方法的比较与改进慈晓彤12!石辰12!王大玮12%!沈莲文12!何承忠12!蔡年辉12!段安安12)1西南林业大学!云南省高校林木遗传改良与繁育重点实验室!云南昆明650224#2西南林业大学!西南山地森林保育与利用省部共建教育部重点实验室!云南昆明650224*摘要：高质量RNA的提取是开展云南栘+木衣］分子生物学研究的前提$采用OMEGA(Plant RNA Kit50)试剂盒、TIANGEN(TRNzo-A+Reagent)试剂盒、CTAB法、Trizol法、SDS法及其改良法6种方法提取云南栘+木衣，叶片的RNA#并用琼脂糖凝胶电泳、核酸蛋白检测仪及RT-PCR技术比较了6种不同方法提取的总RNA样品的质量$结果表明，2种试剂盒法和trizol 法不适合云南栘+木衣］RNA提取，无法得到28S、18SrRNA条带，CTAB法和SDS法虽能得到RNA的3条带，但拖带现象严重,A260(A230的比值较低，对SDS法进行改进，提高.-巯基乙醇的量，在缓冲液中增加PLP，使用HiBind RNA Mini柱，有效地抑制多酚多糖的污染，得到了较高质量、可用于RT-PCR扩增的云南栘+木衣］的RNA$对其开展分子生物学研究提供技术支撑$关键词：云南栘+木衣,；叶片；RNA；比较与改进中图分类号:S722.39文献标志码:A文章编号：1001-7461(2020)03-0095-05ComparisonandImprovementofTotalRNA E xtraction MethodsfromA)0=n/a;ela?a=/Leaves=*X-7G.AG0112!+3*=,E012!O4:;V7.FE-12%!+3L:)-70.FE012!3L=,E01.\,G0112!=4*:-70.,9-12!V>4:40.7012(19Qe=7a2)rat)r=3)r<)re t Genet/0an;TreeR4pr)?e4entL(r)pagat/)n/n>n/?er/t/e)3M+nnan(r)?/n0e!#)+t-Ce t<)re t r=>n/?er/t=!Q+n4/ng650224!M+nnan!C-/na#29Qe=7a2)rat)r=3)r<)re t Ge)+r0eC)n e r?at/)nan;>t/l/Pat/)n/nt-e#)+t-Ce t I)+nta/n)3C-/na!#)+t-Ce t<)re t r=>n/?er/t=!Q+n4/ng650224!M+nnan!C-/na)4?@AB7CA+RNAextractionisaprerequisitefor molecularbiologyresearchof A)0=n/a;ela?a=/!aprecious treespeciesoccurringinsouth=esternChinaInthisstudy!OMEGA(PlantRNA Kit50)kit!TIANGEN (TRNzol-A+Reagent)kit!andthemethodsofCTAB!Trizol!SDS!andimprovedSDS=ereusedtoextract totalRNAfrom A9;ela?a=/leaves The amounts of total RNA extracted by di f erent methods=ere com-paredbygelelectrophoresis!nucleicacidprotein meterandRT-PCR Theresultssho=edthatthet=okits andtrizolmethod=erenotsuitableforRNAextractionbecause28Sand18SrRNAbandscouldnotbeob-tained CTABandSDSmethodscouldobtainthreebandsofRNA!butthetailingphenomenon=asserious! theratioofA260,A230=aslo=er SDS methodcouldbeimprovedbyincreasingtheadditionof.-mercapto-ethanol!addingPLPinthebu f er!andusingHiBindRNAMinicolumn!=hiche f ectivelyinhibitedthecon-tamination of polyphenol polysaccharide!and a higherquality RNA to be used for RT-PCR amplification couldbeobtainedItlaidthefoundationforitsmolecularbiologyresearchDE/FGBH@+A)0=n/a;ela?a=/#leaf#RNA#comparisonandimprovement云南栘［木衣%(Aoc=nia；elava=i)为蔷薇科(RosBceeie)栘［木衣］属(Doc=nia)植物，主要分布于收稿日期2019-08-17修回日期2019-11-27基金项目：国家林业和草原局林业科技发展项目（KJZXSA2019036*云南森林资源培育与利用协同创新中心开放基金。

不同温度处理对两种木麻黄单宁提取的影响

定了基础．
关键词：温度；黄；宁木麻单
中图分类号：４．４Ｑ９６８
文献标识码：Ａ
文章编号：４８４９２０）４０８—４０３— ７（存在于植物中的水溶性多酚类物质，是
１１材料．
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第４６卷
第４期
厦门大学学报（自然科学版）
Ｊｕｎｌｏａｅｉｅｓｔ（ｔｒｌＳｉｎｅｏｒａｆＸｉｍｎＵｎｖｒｉｙＮａｕａｃｅｃ）
Ｖｏ．６ＮＯ４１４．
摘要：研究了在不同的烘干温度（０６、０１５）件下，木麻黄（ａｕｒａｇａｃ）４、８、０￣条０Ｃ粗枝Ｃｓａｉｌｕａ和细枝木麻黄（．ｕｎｎ — ｎｃｃｎｉｇ
ｈｍｉｒ）可提取的总酚、溶态缩合单宁、维素结合态缩合单宁、白质结合态缩合单宁含量的变化．果表明：ａａａ中ｉ可纤蛋结粗枝木麻黄在６＂可提取的总酚含量最多；枝木麻黄在８￣提取的总酚含量最多．枝木麻黄中的可溶态缩合单０Ｃ时细０Ｃ可粗
量１０．１购自中国医药（团）海化学试剂公司．７１８，集上
ＵＶ－１０紫外可见分光光度计．２０
１２样品前处理．
将样品清洗干净，放人１５中杀青５ｍｉ，先０℃ ｎ分别置于４、Ｏ８、０ ℃ 的烘箱中烘干，Ｏ６、０１５然后将样品随机称取０１ｇ左右，入５ｍＬ丙酮提取液研磨，．加浸提

植物组织RNA提取的难点及对策

植物组织RNA提取的难点及对策从植物组织中提取RNA是进行植物分子生物学方面研究的必要前提。

要进行Northern 杂交分析，纯化mRNA以用于体外翻译或建立cDNA文库，RT-PCR及差示分析等分子生物学研究，都需要高质量的RNA。

因此，从植物组织中提取纯度高、完整性好的RNA是顺利进行上述研究的关键所在。

从文献报道上看，有许多植物就是由于未能有效地分离纯化其组织中的RNA，而阻碍了其分子生物学方面研究的进展。

一般认为在这些植物组织中，或富含酚类化合物，或富含多糖，或含有某些尚无法确定的次级代谢产物，或RNase的活性较高。

在完整的细胞内这些物质在空间上与核酸是分离的，但当组织被研磨，细胞破碎后，这些物质就会与RNA 相互作用。

酚类化合物被氧化后会与RNA不可逆地结合，导致RNA活性丧失及在用苯酚、氯仿抽提时RNA的丢失，或形成不溶性复合物；而多糖会形成难溶的胶状物，与RNA共沉淀下来；萜类化合物和RNase会分别造成RNA的化学降解和酶解。

对于这些植物材料，用常规的RNA提取方法（如胍法、苯酚法和十六烷基三甲基溴化胺法等）难以提取出其RNA。

如Lбpez-Gбmez等在用常规的方法提取芒果果实的RNA时未能成功，他们的结果分为三种情况：提出的RNA已被降解；RNA的得率很低；得到的RNA不能进行体外翻译。

他们认为在果实成熟时各种酶的活性增强，其中也包含RNase，不溶性的淀粉转化为可溶性的多糖，芒果果实细胞壁中特殊的成份，以及果实中高含量的多酚化合物都是干扰RNA 提取的因素。

Tesniere等在用苯酚法和胍法提取葡萄果实的RNA时，发现RNA与某种未知化合物凝聚成不溶性的复合物，并且这种未知化合物在230nm和270nm处有强的光吸收，从而干扰了RNA紫外吸收的测定。

因此能否有效地去除多糖、酚类化合物、RNase和干扰RNA提取的其它代谢产物是提取高质量植物RNA成败的关键。

本文根据文献综述了解决上述植物RNA提取过程中难点的相应对策。

木麻黄树皮中活性成分的分离与鉴定

木麻黄树皮中活性成分的分离与鉴定木麻黄树（学名Ephedra sinica Stapf）是一种常见的藤本灌木，广泛分布于中国北方地区和我国西北地区。

其树皮一直以来被广泛应用于民间药物，并且在现代医药领域中也有一定的应用。

木麻黄树皮作为中药材，被广泛用于治疗哮喘、感冒、咳嗽等呼吸系统疾病。

其药理作用主要归功于其活性成分，因此分离和鉴定木麻黄树皮中的活性成分对于深入了解其药理作用以及开发具有更好疗效的药物具有重要意义。

首先，对于木麻黄树皮中活性成分的分离，研究者可以采用以下方法。

传统的方法是采用溶剂提取、分液和纯化分离等方法，然后通过色谱技术（如薄层色谱、柱层析等）进一步纯化。

同时，也可以借助现代方法如液相色谱技术、气相色谱技术等进行分离和纯化。

这些分离技术可以帮助研究者将混合物中的活性成分逐步分离出来，便于进一步研究其结构和药理作用。

在分离得到木麻黄树皮中的活性成分后，下一步是鉴定这些活性成分的化学结构。

针对不同类型的物质，可以采用不同的鉴定方法。

对于有机化合物，常用的鉴定方法包括核磁共振（NMR）技术、红外光谱（IR）技术、质谱（MS）技术等。

通过这些技术的综合应用，可以确定木麻黄树皮中活性成分的化学结构。

此外，为了进一步了解木麻黄树皮中活性成分的药理作用，可以进行一系列的活性测试。

常用的活性测试包括体外抗氧化活性测试、抗炎活性测试、抗菌活性测试等。

这些活性测试可以帮助研究者评估木麻黄树皮中活性成分的生物活性，并为进一步药物开发和临床应用提供科学依据。

总之，木麻黄树皮中的活性成分分离与鉴定是对其药理作用进行深入研究的重要步骤。

通过分离出活性成分并鉴定其化学结构，可以为进一步了解木麻黄树皮的药理作用、开发新药物等提供重要的理论基础。

同时，通过活性测试评估其生物活性，也可以为临床应用提供参考依据。

Wooden Ephedra bark acts as a widely usedtraditional Chinese medicine and has also found applications in modern medicine for various respiratory ailments such as asthma, cold, and cough.To isolate the active components present in Wooden Ephedra bark, researchers can utilize various methods. Traditional methods involve solvent extraction, partitioning, and purification techniques, followed by chromatographic techniques such as thin-layer chromatography and column chromatography to obtain purified compounds. Modern techniques like liquid chromatography and gas chromatography can also be employed for separation and purification. These techniques aid in separating the active components from the mixture, facilitating further investigation into their structure and pharmacological properties.Once the active components are isolated from Wooden Ephedra bark, the next step is to identify their chemical structure. Different identification methods can be employed depending on the type of compound. Common identification methods for organic compounds include nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy, infrared spectroscopy (IR), and mass spectrometry (MS). Through the integrated application of these techniques, the chemical structures of the active components in Wooden Ephedra bark can be determined.Furthermore, to further understand the pharmacological properties of the active components in Wooden Ephedra bark, a series of bioactivity tests can be conducted. Common bioactivity tests include in vitro antioxidant activity tests, anti-inflammatory activity tests, and antimicrobial activity tests. These tests help assess the biological activities of the active components in Wooden Ephedra bark and provide scientific evidence for further drug development and clinical applications.In conclusion, the isolation and identification of active components in Wooden Ephedra bark is an essential step in understanding its pharmacological properties. By isolating and identifying the active components and determining their chemical structures, it lays a theoretical foundation for the further exploration of the pharmacological effects of Wooden Ephedra bark and the development of novel drugs. Additionally, evaluatingtheir biological activities through bioactivity tests provides a reference for clinical application.。

一种适用于木本植物RNA提取的方法

作者简介:李晓毓(1979-),女,硕士,山西大同人,从事植物分子生物学研究。

3通讯作者收稿日期:2007-12-06一种适用于木本植物RNA 提取的方法李晓毓1,2　赵德刚13　李丰伯2(1贵州大学农业生物工程省级重点实验室,贵州贵阳　550025;2黄山学院生命与环境科学学院,安徽黄山　245041)摘　要:木本植物富含酚类、多糖等代谢物质,用普通方法提取RNA 时很难将其除去。

选取杜仲叶片做材料,通过比较研究Trizol 、改良CT AB 法和热硼酸盐法三种RNA 提取方法,发现改良CT AB 法提取效果好且简单易行,单位鲜重材料获得的RNA 产量高,电泳条带清晰完整,OD 260/OD 280=1184,是一种适于木本植物RNA 提取的方法。

关键词:木本植物;杜仲;RNA 提取中图分类号　O657 文献标识码　B 文章编号　1007-7731(2007)23-42-01 高质量RNA 的获得是开展分子生物学研究的必要前提,由于RNA 不稳定、易降解,提取的RNA 质量不好,在反转录时往往无法合成c DNA 或是合成的c DNA 链长短不一,给研究带来很多的不便。

因此从植物组织中提取纯度高、完整性好的RNA 尤为重要。

一般来说,草本植物细胞内成分简单,较易提取纯度高的RNA;而有些木本植物富含酚类、多糖等次生代谢物质,这些物质在提取RNA 时很难将其去除,所得的RNA 往往纯度很低,严重影响后续的操作。

杜仲(Euco mm ia ul m oides O live )是一种名贵的经济植物,其细胞内成分复杂,不仅含有酚类、多糖等次生代谢物质,整个植株还布满胶丝———杜仲胶,这些物质的存在给提取纯度高、完整性好的RNA 带来许多不便。

酚类物质在细胞破碎后很容易被氧化为棕红的醌,然后和核酸不可逆的结合,从而引起核酸的降解或形成较难溶于水的沉淀。

多糖的很多理化性质也和核酸相似,往往在去除多糖时也会带走部分的RNA,造成产量的减少。

木本植物老根老叶总RNA的提取方法

关键词木本植物；二次代谢产物；老根；老叶；取ＲＡ提Ｎ中图分类号Ｑ４．９３２文献标识码Ａ文章编号ｏ１６ｌ（０）Ｏ０８１０５７— ６１２７１一２３ — ２０
ＥｘｒｃｉｎｏｔａｔｏｆＲＮＡｒｍｌＯｌｅ【ｓａｄｏｓｏｆｔｄｒＬｖｎＲｏｔｆＷｏｄａｔｅｏｙＰｌｎ
中，加入６ｌ提取缓冲液，ｍ振荡２ｍｎ充分混匀，ｉ，使细胞充分
裂解。然后把样品管放入６ｏ的水浴中保温２ｉ，不时５ｃ０ ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱｎ并
择分离ｍＮ、ＮＲＡｃＡ合成及体外翻译等试验的成败，Ｄ在很大程度上取决于ＲＡ的质量。常用ＲＡ的提取方法大多适用ＮＮ
沉淀，ＮＲＡ则留在上清中，出上清液放入另一离心管中，取加入２体积乙醇和１１体积ＮＡ，分混匀，／０ａｃ充混匀后放人一２０ｏ保温１ｃｈ或更长时间，降ＲＡ沉Ｎ。取出样品管，１３以２００ｒｍｎ４℃离心１ｍｎ去除上清液，Ｎ／ｉ，５ｉ，ＲＡ沉淀滞留管底。加入７％的冷乙醇（２０一０℃ ）ｌ清洗管底的ＲＡ以１００２ｍ，Ｎ，２３ｒｒｎ４ｏ／ｉ，ａＣ离心５ｍｎ去除上清液，Ｎｉ，ＲＡ留在管底。ＲＡ沉Ｎ淀于室温下干燥２ｍｎＲＡ为半干状态，印ＤＰ０ｉ到Ｎ用ＥＣ处理过的ＴＥ溶解ＲＡ沉淀，要时可在印ｏ水浴中助溶，Ｎ必ｃ然后把ＲＡ放入一８条件下可长期保存或用于分析。Ｎｏｏｃ１２３电泳分析。２ＲＡ样品，．．Ｎ点样于０８＿％琼脂糖凝胶上，１ｌ胶含有２溴化乙啶，Ｖ恒压电泳２，每０凝０ｍ５８０在ｈ紫外灯下观测ＲＡ条带，相记录。Ｎ并照１２４分光光度计定量测定和统一纯度分析。取１ＲＡ．．Ｎ样品，测定２０Ｄ６ｉ２０Ｄ波长的Ｏ值。ＲＡ含量用公ｎ和８ｎｉＤＮ式Ｄ２ × ０计算，Ｄ６Ｄ２用于纯度分析，种重复多Ｄ６４ｏＤ２／Ｄ８ｏ０每次。纯的ＲＡ样品其Ｄ２／Ｄ８在１７～２０若ＮＤ６Ｄ２应ｏ０．．，Ｄ２／Ｄ８于１７说明样品中有蛋白质或酚杂质；Ｄ６Ｄ２小ｏ０．，

木本植物组织总RNA提取的要点与原理_王玉成

木本植物组织总RNA提取的要点与原理1)王玉成杨传平姜静(东北林业大学,哈尔滨,150040)摘要根据提取木本植物组织RNA时所获得的知识和经验,对木本植物组织总RNA提取时所遇到的提取产量低、RNA降解、多酚物质干扰、DNA干扰、多糖干扰、蛋白质干扰及杂质干扰等问题进行了探讨,并提出了具体的解决方法。

同时,对各种常用的RNA提取方法进行了分类,并对它们的原理及优劣进行了论述与评价。

关键词木本植物;RNA提取;总RNA分类号Q522The M ain Points and Principles of Isolating Total RNA from Ligneous Plant Tissues/Wang Yucheng,Yang Chuanping, Jiang Jing(Northeast Forestry University,Harbin150040,P.R.China)//Journal of Northeast Forestry University.-2002,30 (2).-1~4According to the knowledge and experiences acquired in isolating total RNA from ligneous plan t tissues,the authors probe in and discuss the problems that often occur in i solating total RNA from ligneous plant tissues,such as low RNA ou tput,RNA de-grading,the interference of hydroxybenzenes,DNA,amylose,protein and other i mpuri ties,then bring forward the resolvable ways of these problems in particular.Meanwhile,sort the RNA isolating ways in common use into some categories,and also di s-cuss their principles and evaluate their strongpoints and inferiors.Key words Ligneous plant;RNA isolation;Total RNA提取木本植物完整的总RNA,是对其进行分子水平遗传分析及基因克隆的重要一环。

植物组织RNA提取的难点及对策

植物组织RNA提取的难点及对策植物组织RNA提取是分子生物学实验的关键步骤之一，它的准确性和高质量对于后续的研究非常重要。

然而，植物组织RNA提取也存在一些难点，如RNA的完整性、污染物的干扰和样品数量的限制等。

本文将对这些难点进行详细讨论，并提出相应的对策。

首先，植物组织RNA提取的难点之一是RNA的完整性。

RNA易于降解，在提取过程中容易受到外界因素的影响而失去完整性。

为了解决这个问题，可以在提取过程中采取一系列的措施。

首先，应在低温环境下进行样品处理和提取操作，以减缓RNA的降解速度。

其次，应使用含有RNase抑制剂的试剂，如Trizol试剂或RNA保护剂，以防止RNA在提取过程中受到RNase的降解。

此外，还可以尽量缩短提取过程的时间，避免反复冻融和机械破碎等操作，以保持RNA的完整性。

其次，污染物的干扰也是植物组织RNA提取的难点之一、植物组织中含有丰富的多酚类物质、多糖和多样的宿主RNA，它们可能会干扰RNA的提取和纯化。

为了减少这些污染物的干扰，可以采取一些对策。

首先，可以在提取过程中添加含有高浓度盐的试剂，如高盐缓冲液，以帮助沉淀多酚类物质和多糖。

其次，可以使用热酚酸法，将RNA溶液与酚酸混合，使RNA与多样的宿主RNA形成沉淀，并将混合物中的杂质去除。

此外，还可以使用DNA消化酶或RNase去除宿主RNA和DNA的污染。

第三，由于植物组织通常具有较高的纤维素含量和丰富的抗氧化物质，样品量的限制也是植物组织RNA提取的难点之一、为了克服这个问题，可以采取一些策略。

首先，可以选择合适的提取试剂和方法，如使用高盐浓缩法或硅胶膜柱纯化法，以增加RNA的提取效率。

其次，可以将不同的组织样品混合提取，以增加RNA的总量。

此外，还可以通过PCR扩增技术，对RNA提取后的样品进行增幅，以获得足够的RNA量进行后续实验。

除了上述难点外，植物组织RNA提取还存在其他一些问题，如低RNA 浓度、RNA的质量不佳或存在一些强烈的抑制剂等。

天女木兰不同组织总RNA提取方法的筛选与优化

天女木兰不同组织总RNA提取方法的筛选与优化侯哲;陆秀君;张晓林;梅梅;魏俊;李昂【摘要】Six extraction methods, including modiifed CTAB, Trizol, modiifed Trizol, TIANGEN extraction kit, were studied in the RNA extraction from Magnolia sieboldii buds, leaves, mature leaves, flower buds, petals and seeds. Integrity, purity and concentration of total RNA were examined by agarose gel electrophoresis and nucleic acid analyzer. Of these six methods, the method of modiifed Trizol was better for buds isolation, the method of modiifed CTAB was better for lfower buds and petals isolation, Trizol method can be used to extract mature leaves, while the RNA extracted by TIANGEN kit is effective to the leaves and seeds. High quality total RNA obtained by different extraction methods through RT-PCR analysis indicated that the RNA satisifed the standard for gene cloning and other molecular biological experiments.%试验以天女木兰叶芽、幼叶、成熟叶、花芽、花瓣、种子为材料，分别采用Trizol法、改良Trizol法、CTAB-异丙醇法、CTAB-NaAc和无水乙醇法、CTAB-LiCl法、天根试剂盒法对其各器官进行总RNA的提取。

一种适用于木本植物RNA提取的方法

（１贵州大学农业生物工程省级重点实验室，贵州贵阳
摘
要：木本植物富含酚类、多糖等代谢物质，用普通方法提取ＲＡ时很难将其除去。选取杜仲叶片做材料，Ｎ通过比
较研究Ｔｉｌ改良ＣＡＢ法和热硼酸盐法三种ＲＡ提取方法，现改良ＣＡｒｏ、ｚＴＮ发ＴＢ法提取效果好且简单易行，单位鲜重
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安徽农学通报，ｎｕＡｎＳｉＢｌ２０，３２）Ａｈｉｇ．ｃｕ１０７１（３．．
一
种适用于木本植物ＲＡ提取的方法Ｎ
李晓毓赵德刚李丰伯
２５４）４０１５０２２黄山学院生命与环境科学学院，５０５；安徽黄山
度高、完整性好的ＲＡ尤为重要。一般来说，Ｎ草本植物细胞内成分简单，较易提取纯度高的ＲＡ；Ｎ而有些木本植物富含酚类、等次生代谢物质，些物质在提取ＲＡ时多糖这Ｎ很难将其去除，所得的ＲＡ往往纯度很低，重影响后续Ｎ严
逆的结合，从而引起核酸的降解或形成较难溶于水的沉
淀。多糖的很多理化性质也和核酸相似，往往在去除多糖
时也会带走部分的ＲＡ，成产量的减少。本研究试图Ｎ造
溶性的沉淀，将上清液转移至新管。加人２０ｌ１１０ｕ（／０体积）的２Ｍ醋酸钾（Ｈ．，浴３ｍｎ４Ｃ下以ｐ５５）温０ｉ，￣１００ｐ２０ｒｍ离心１ｍｎ０ｉ。将上清液转移至新管，加人２５倍．ｓ

几种植物组织总RNA提取方法的特点及疑难对策

(1) Promega公司的 Promega S V Total RNA Isolation Sys2 tem。其特点是快速、高效 ,用高浓度的亚硫氰胍稀释细胞 , 使 Rnase失活 ,并沉淀蛋白 ,乙醇沉淀核酸 , DNA 酶消化残留的 DNA,去除杂质 ,并将 RNA 吸附到硅化膜上 ,用 DEPC2 H2 O 洗脱膜上的 RNA 即可。
[3 ] WAN C Y,W ILKINS T A. A modified hot borate method significantly en2 hance the yield of high2quality RNA from cotton ( Gossyp ium hirsutum l) [ J ]. Anal B iochem, 1994, 223: 7 - 12.
Character istics of Severa l Extraction M ethods on Tota l RNA in Plan t T issues and Stra teg ies to Problem s YANG Zhan2jun et a l (B iology Department of Huaiyin Normal College, Huai′an, J iangsu 223300) Abstract There were many extraction methods on total RNA in p lant tissues and more p roblem s in extraction p rocess, such as the interfer2 ence of phenolic compounds, polysaccharides and p rotein and the pollution of RNase. The author briefly introduced the characteristics of sev2 eral extraction methods on total RNA in p lant tissues, the p roblem s in extraction p rocess and the strategies to p roblem s. Key words Plant tissues; RNA; Extraction methods

木本植物组织总rna提取的要点与原理

木本植物组织总rna提取的要点与原理木本植物的组织RNA提取需要注意以下几点：
1.样品准备：样品应当避免受到外界污染，同时保持绿色和新鲜的状态以保证RNA的完整性。

2.细胞破碎：样品需要完全破碎以释放RNA。

一般而言，用组织研磨器或液氮粉碎器破碎都可以。

3. RNA提取：RNA可以用多种方法提取，如TRIzol法、Qiagen RNAeasy kit等。

其中TRIzol法适用于大样品量，但要注意该试剂易溶解于有机溶剂，应当注意储存条件。

4. RNA清洗与分离：RNA提取后，需要清洗以去除杂质并分离出所需的RNA。

一般可以使用RNase-free DNase I消除DNA污染，同时也可以使用RNA纯化柱进行纯化和分离。

RNA的提取原理主要基于RNA的特性。

RNA是由核苷酸组成的，其核苷酸顺序的不同可控制蛋白质的合成。

RNA在细胞中的主要功能是在转录过程中将DNA编码信息转移到蛋白质合成机构上。

RNA提取的目标是从样品中分离出RNA，并去除杂质。

RNA的提取包括细胞破碎、沉淀、清洗、分离等步骤，常常要利用试剂或仪器进行加工。

木麻黄鞣质提取工艺的初步研究

木麻黄鞣质提取工艺的初步研究
木麻黄（Rhamnus zizyphoides L.）是一种具有较高药用价值的中草药，其中含有多种有益成分，如次糖、氨基酸、类黄酮、单宁酸及维生素等。

因此，木麻黄鞣质提取工艺的研究对于开发利用木麻黄的药效物质具有重要意义。

木麻黄鞣质的提取主要考虑的因素有：原料的采集、选择、加工处理；提取剂的选择；提取条件的设计；提取模式的优化；提取设备的选择和使用；提取过程中的操作流程等。

首先，在原料采集时应选择木麻黄的合适生境，并根据木麻黄的生长情况选择采收时间，在采收后应及时将原料进行加工处理，以保证原料的质量。

其次，在选择提取剂时，应根据木麻黄鞣质的特性，结合相关文献和实验数据，综合评估多种提取剂的性能，以便选择最佳的提取剂。

接下来，在提取条件的设计时，需考虑木麻黄鞣质提取的物理化学性质，选择合理的提取参数，如提取温度、提取时间、提取次数等，以保证木麻黄鞣质的最佳提取效果。

然后，在优化提取模式时，可根据不同的提取条件，采用单因素试验或多因素试验法，对木麻黄鞣质的提取效率进行优化，以便找出最佳的提取方案。

最后，在选择提取设备时，应根据木麻黄鞣质的特性，选择具有较高提取效率的提取设备，并在提取过程中严格按照操作流程进行操作。

总之，木麻黄鞣质提取工艺的初步研究，应考虑原料的采集、选择、加工处理；提取剂的选择；提取条件的设计；提取模式的优化；提取设备的选择和使用；提取过程中的操作流程等因素，以便找出最佳的木麻黄鞣质提取工艺。

木麻黄树皮中生物碱类物质的筛选与鉴定

木麻黄树皮中生物碱类物质的筛选与鉴定木麻黄（Ephedra）是禾本科木麻黄属植物的总称，包括约50多种不同的树种。

木麻黄树皮中含有丰富的生物碱类物质，具有广泛的药用价值。

本文将着重介绍木麻黄树皮中生物碱类物质的筛选与鉴定。

首先，我们需要从木麻黄树皮中提取生物碱类物质。

提取方法主要有传统煮沸提取法和现代化学提取法两种。

传统煮沸提取法是将木麻黄树皮加入水中煮沸，以水提取木麻黄树皮中的生物碱类物质。

现代化学提取法则是采用有机溶剂（如醇类或醚类溶剂）来提取木麻黄树皮中的生物碱类物质。

两种方法各有优劣，可根据需求选择适合的提取方法。

接下来，我们需要对提取得到的物质进行筛选。

筛选方法可以采用色谱法、光谱法和比色法等。

其中，色谱法是最常用的筛选方法之一。

色谱法包括薄层色谱、柱层析和高效液相色谱等。

通过色谱法，可以将复杂的生物碱混合物分离成单一的化合物，并得到各个化合物的相对含量。

同时，也可以使用光谱法（如紫外-可见光谱、红外光谱和质谱等）对分离得到的化合物进行鉴定。

根据各个化合物的特征光谱图谱，可以确定其结构和性质。

在筛选和鉴定过程中，有两个常用的生物碱类物质需要特别关注。

第一个是麻黄素（ephedrine），它是木麻黄树皮中最主要的生物碱类物质，具有兴奋神经系统和收缩血管的作用，被广泛应用于治疗哮喘和感冒等疾病。

第二个是伪麻黄碱（pseudoephedrine），它与麻黄素具有类似的生物活性，但效果较弱。

麻黄素和伪麻黄碱常被用于制备非处方药物和治疗肥胖症。

最后，我们需要对筛选出的生物碱类物质进行鉴定。

鉴定过程主要包括物理鉴定和化学鉴定两个方面。

物理鉴定包括外观、熔点和溶解性等方面的测试，以确定其性质和纯度。

化学鉴定则通过进行化学反应或检测特定的官能团来确定化合物的结构和功能基团。

此外，还可以通过核磁共振（NMR）谱和质谱（MS）谱等先进技术对化合物进行更准确的鉴定。

总结起来，木麻黄树皮中的生物碱类物质具有丰富的药用价值，但提取、筛选和鉴定过程并不简单。

木本植物老根老叶总RNA的提取方法

木本植物老根老叶总RNA的提取方法
周春娥;段红英;齐力旺
【期刊名称】《安徽农业科学》
【年(卷),期】2007(035)010
【摘要】对于含有大量多糖、酚、酯、萜类等其他二次代谢产物的木本植物的老
根和老叶,要从它们的组织中提取高质量的RNA一般都比较困难.以小叶杨的老根、麻黄的老根、沙冬青的老叶、梭梭老根为材料提取出质量比较好的RNA.
【总页数】2页(P2831-2832)
【作者】周春娥;段红英;齐力旺
【作者单位】河南师范大学生命科学学院,河南新乡,453007;河南师范大学生命科
学学院,河南新乡,453007;中国林业科学院林业研究所细胞生物学实验室,北
京,100091
【正文语种】中文
【中图分类】Q943.2
【相关文献】
1.适用于转录组测序的大豆根总RNA的提取方法研究 [J], 谢钰珍;覃鸿妮;张宇;梅啸;吴凡
2.一种木本植物RNA和DNA的简捷提取方法 [J], 黄真池;余秋梅;欧阳乐军;曾富
华
3.玄参新鲜根和干燥根总DNA提取方法的比较研究 [J], 沈志雯;刘蕾;徐瑾;杨业然;何聪芬
4.木本植物根系总RNA提取方法的比较和分析 [J], 余发新;孙小艳;徐立安;黄敏仁;孟伟伟
5.黄芪干燥根与鲜品总DNA提取方法评价 [J], 崔莹;李静辉;姜明;马德志;王婷;李慧
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木麻黄小枝水培出根率主要影响因子的研究

木麻黄小枝水培出根率主要影响因子的研究
柯玉铸
【期刊名称】《防护林科技》
【年(卷),期】2000(0)S2
【摘要】对11个影响木麻黄小枝水培出根率的主要因子研究结果表明:木麻黄的不同品系、采枝母树年龄、采枝部位、小枝粗壮程度等内在因子,光照强度、水培气温、水培容器等外部因子对水培出根率有显著的影响;药品浓度等外部因子促进生根必须通过木麻黄小枝的内在因子而起作用;小枝上有无侧枝、漫药高度、换水间隔时间等对出根率的影响不显著。

在生产实践中要充分利用各内、外因子中有利的方面来提高木麻黄小枝水培出根率。

【总页数】5页(P64-67)
【关键词】木麻黄;小枝;水培;出根率
【作者】柯玉铸
【作者单位】福建省林业科学研究院
【正文语种】中文
【中图分类】S792.93
【相关文献】
1.影响水稻花药培养出愈率的多因子正交试验研究 [J], 魏芳勤;沙志鸿;张选明;王胜宝;王艳龙;赵胜利;周凯
2.影响日本结缕草成熟种子愈伤组织诱导率和出愈时间的相关因子研究 [J], 刘雅
丽;费永俊;曾会明
3.桉木单板出材率与价值影响因子研究 [J], 任世奇;罗建中;谢耀坚;彭彦;陈健波;卢万鸿;姜英
4.影响高脂马尾松扦插成活率的主要因子研究 [J], 刘晚传;连辉明;罗敏;覃冀;潘庆优;王肖颖
5.木麻黄水培苗出根条数与出根率关系研究 [J], 柯玉铸
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