生物分离与纯化技术模拟试卷三答案培训讲学

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生物分离参考试题及答案

一、名词解释1.助滤剂：发酵工业生产中加入的能提高过滤速率的固体物质2.第二介稳区：加入晶种结晶会生长，同时有新晶核产生3.滤饼4.纳滤5.凝聚二、填空题1.有机溶剂破碎法2.Cohn 方程Cohn 经验公式S —蛋白质溶解度，mol/L;I —离子强度 c:离子浓度；Z ：离子化合价:盐析经验式 2.Ks 盐析3.细胞回收、细胞破碎、固液分离、初级分离、高级分离的常用方法三、简答题1.生物产品对产量和纯度的要求。

注重纯度的选择注重产量的选择即注重纯度又注重产量的选择2.发酵液的预处理方式。

加热法；调pH 值；凝集和絮凝；加水稀释法；加入助滤剂法；加吸附剂或加盐法；热处理法；离子交换和活性炭吸附法等。

3.助滤剂的使用方式。

221i i Z c I ∑=（1）在过滤器的滤布上预先涂上一层助滤剂，作为过滤介质使用，过滤结束后与滤布一起除去。

该法适用于对非常细小的或可压缩的低固形物含量（≤5%）的发酵液处理。

（2）a.将助滤剂按一定的比例均匀混入发酵液中，然后一起进入过滤器或离心机，使滤层形成疏松的滤饼，降低其可压缩性，使过滤顺畅。

b.将含助滤剂的发将夜通过压缩机，形成过滤介质层，然后在进行过滤。

该法适用于菌体细小，粘度较大的发酵液。

4.根据分离机理的不同固液分离可以分为哪两种。

过滤和离心5.结晶的前提和推动力？形成新相（固体）需要一定的表面自由能。

因此，溶液浓度达到饱和溶解度时，晶体尚不能析出，只有当溶质浓度超过饱和溶解度后，才可能有晶体析出。

溶液达到过饱和状态是结晶的前提；过饱和度是结晶的推动力。

四、综合题1.生物药物（抗生素）生物分离的选择依据。

生物分离方法的选择依据1.传统生物药物（抗生素）:根据具体条件，通过小实验决定，选择时应考虑两个因素。

（1）抗生素的理化性质：极性、酸碱性、溶解度等，了解其理化性质，通常利用纸层析和纸电泳的方法。

（2）抗生素的稳定性：要了解它在什么样的pH和温度范围易受破坏。

生物分离-题库+答案

一、填充题1. 生物产品的分离包括R emoval of insolubles(固液分离)，I solation(浓缩)，Putification(纯化)和P olishing(精制)；2. 发酵液常用的固液分离方法有离心和过滤等；3. 离心设备从形式上可分为管式，套筒式，碟片式等型式；4. 膜分离过程中所使用的膜，依据其膜特性（孔径）不同可分为微滤膜，超滤膜，纳滤膜和反渗透膜；5. 多糖基离子交换剂包括葡聚糖离子交换剂和离子交换纤维素两大类；6. 工业上常用的超滤装置有板式，管式，螺旋卷式和中空纤维式；7. 影响吸附的主要因素有吸附剂的性质，温度，溶液PH值，盐浓度吸附物浓度，和吸附剂用量；8. 离子交换树脂由载体，活性基因和可交换离子组成。

9. 电泳用凝胶制备时，过硫酸铵的作用是引发剂；甲叉双丙烯酰胺的作用是交联剂；TEMED的作用是增速剂；10 影响盐析的因素有溶质种类，溶质浓度，PH值和温度；11.在结晶操作中，工业上常用的起晶方法有自然起晶，刺激起晶法和晶种起晶法；12.简单地说，离子交换过程实际上只有外部扩散，内部扩散和化学交换反应三步；13.在生物制品进行吸附或离子交换分离时，通常遵循Langmuir吸附方程，其形式为Q=q。

c/(k+c)；14.反相高效液相色谱的固定相是非极性的，而流动相是极性的；常用的固定相有和C18 C8；常用的流动相有甲醇和乙腈；15.超临界流体的特点是与气体有相似的粘度（扩散系度），与液体有相似的密度；16.离子交换树脂的合成方法有共聚（加聚）和均聚（缩聚）两大类；17.常用的化学细胞破碎方法有渗透压冲击法，增溶法，脂溶法，酶消化法和碱处理法；18.等电聚焦电泳法分离不同蛋白质的原理是依据其导电点的不同；19.离子交换分离操作中，常用的洗脱方法有 PH梯度和离子强度（（盐）梯度）；20.晶体质量主要指晶体大小，晶体性状和晶体纯度三个方面；21.亲和吸附原理包括吸附质的制备，吸附和洗脱三步；22.根据分离机理的不同，色谱法可分为吸附色谱，分配色谱，离子交换色谱和凝胶色谱；23.盐析实验中用于关联溶质溶解度与盐浓度的Cohn方程为 1gs=β-KsI ；当保持体系温度，PH值不变，仅改变溶液离子强度进行的盐析操作称为Ks盐析法；当保持离子强度不变，改变温度，PH值进行的盐析操作称为β盐析法；24.蛋白质分离常用的色谱法有金属螯合色谱，共价色谱，离子交换色谱和疏水作用色谱；25.S DS PAGE电泳制胶时，加入十二烷基磺酸钠（SDS）的目的是消除各种待分离蛋白的电荷和分子形状差异，而将分子量作为分离的依据；26.常用的蛋白质沉析方法有盐析，等电点沉析和有机溶剂沉析；27.常用的工业絮凝剂有聚丙烯酰胺和聚苯乙烯两大类；28.典型的工业过滤设备有板框式过滤机、真空转鼓过滤机和垂直片式硅藻土过滤机；29.常用离心设备可分为离心沉降和离心过滤两大类；30.根据物化理论，萃取达到平衡时，溶质在萃取相和萃余相中的化学势相等；31.根据吸附剂与吸附质之间存在的吸附力性质的不同，可将吸附分为物理吸附、化学吸附、交换吸附32.影响亲和吸附的因素有配基浓度、空间障碍、载体孔径、微环境和载体与配基结合位点；33.阳离子交换树脂按照活性基团分类，可分为强酸性~、弱酸性~和中强酸性~；其典型的活性基团分别有磺酸基团次甲基磺酸基团、羧酸基团、磷酸基团次磷酸基团；34.阴离子交换树脂按照活性基团分类，可分为强碱性~、弱碱性~和中强碱性~；其典型的活性基团分别有季铵基团、伯铵基团、兼有以上两种基团；35.DEAE Sepharose是阴离子交换树脂，其活性基团是二乙基氨基乙基；36.CM Sepharose是阳离子交换树脂，其活性基团是羧甲基；37.影响离子交换选择性的因素有水合离子半径、离子化合价、溶液PH、离子强度、有机溶剂和交联度；38.离子交换操作一般分为静态和动态两种；39.蛋白质等生物大分子，在溶液中呈稳定的分散状态，其原因是由于静电斥力作用和水化膜层；40.盐析用盐的选择需考虑盐析作用要强、有够大的溶解度、生物学上是惰性的、来源丰富、经济等41.影响有机溶剂沉淀的因素有温度、PH、样品浓度、离子强度和金属离子的助沉作用；42.常用的超滤装置有板式、管式、螺旋卷式和中空纤维式；43.依据电泳原理，现有电泳分离系统可分为区带电泳、静态电泳和移动界面电泳；44.依据建立pH梯度的原理不同，等电聚焦（IEF）可分为载体两性电解质电泳和同相电泳；45.双相电泳中，第一相是导电聚焦；第二相是SDS-PAGE；46.结晶包括三个过程过饱和溶液形成、晶核的形成和晶体生长；47.过饱和溶液的形成方法有热过饱和溶液冷却法、部分溶剂蒸发法、真空蒸发冷却法和化学反应结晶；48.晶核自动形成时，体系总的吉布斯自由能的改变ΔG由ΔGs和ΔGv组成；49.物料中所含水分可分为化学结合水、物化结合水和机械结合水三种；50.根据干燥曲线，物料干燥可分为恒速和降速两个阶段；51.工业生产中常用的助滤剂有硅藻土和珍珠岩；52.液－液萃取从机理上分析可分为物理萃取和化学萃取两类；53.基本的离子交换过程由、、和组成；54.吸附包括将待分离物料通入吸附剂中，吸附质被吸附到吸附剂表面，料液流出和吸附质解析回收后，吸附剂再生四个过程组成；55.大孔网状吸附剂有极性，非极性和中等极性三种主要类型；56.亲和吸附剂表面连接的“手臂链”的作用是降低空间位阻的影响；57.根据修饰基团的不同，离子交换树脂可分为强碱阳，强强碱阴，强酸阳和强酸阴等四大类；58.根据聚合方法，离子交换树脂的合成方法可分为加聚法和缩聚法两类；59.根据聚合单体，离子交换树脂的合成方法可分为共聚法和均聚法两类；60.影响离子交换速度的因素有颗粒大小、交联度、温度、离子化合价、离子大小、搅拌速度和溶液浓度；61.分配色谱的基本构成要素有固定相、载体和流动相；62.反相色谱常用的流动相有异丙醇和乙腈等； 63.反相色谱常用的固定相有C8和C18等；64.Sepharose系列的离子交换树脂的载体是琼脂糖凝胶；65.分子筛色谱（凝胶色谱）的主要应用是生物大分子的初级分离、脱盐；66.影响有机溶剂沉析的主要因素有温度、溶液的PH值、离子强度、样品浓度、金属离子的助沉析作用和搅拌速度；67.根据膜材料的不同，常用的膜可分为合成有机聚合物膜和无机材料膜两类；68.根据膜结构的不同，常用的膜可分为对称性膜、不对称膜和复合膜三类；69.强制膜分离过程是指超滤和反渗透过程；70.电泳系统的基本组成有电泳槽、电源、外循环恒温系统、凝胶干燥器、灌胶模具、电泳转移装置、电泳洗脱仪和凝胶扫描和摄录装置；71.电泳后，样品的主要染色方法有考马斯亮蓝和银染法；72.SDS－PAGE电泳中，SDS的加入是为了消除不同样品分子间电荷和分子形状的差异；加入二硫叔糖醇的目的是使半胱氨酸残基之间的二硫键断裂；73.电泳过程中，加入溴酚兰的目的是1.增大样品密度确保DNA均匀进入样品孔内2.使样品呈现颜色3.以0.5XTBE做电泳液时，溴酚兰的泳动率约与30的双链DNA相同；74.固体可分为结晶和无定形两种状态；75.结晶过程包括过饱和溶液的形成、晶核的形成和晶体生长三个过程；76.结晶的前提是溶液达到过饱和状态；结晶的推动力是过饱和度；77.根据晶体生长扩散学说，晶体的生长包括溶质通过扩散作用穿过靠近晶体表面的一个滞流层，从溶液中转移到晶体的表面、到达晶体表面的溶质长入晶面，使晶体增大，同时放出结晶热和结晶传递回到溶液中三个过程； 78.影响晶体生长的主要因素有杂质、搅拌和温度；二. 讨论题1.请结合图示简述凝胶排阻色谱（分子筛）的分离原理；答：凝胶排阻色谱的分离介质（填料）具有均匀的网格结构，其分离原理是具有不同分子量的溶质分子，在流经柱床是，由于大分子难以进入凝胶内部，而从凝胶颗粒之间流出，保留时间短；而小分子溶质可以进入凝胶内部，由于凝胶多孔结构的阻滞作用，流经体积变大，保留时间延长。

生物分离与纯化技术模拟试卷二答案

生物分离与纯化技术模拟试卷二答案一、名词解释（每小题3分，共15分）1．凝聚：在电解质作用下，破坏细胞菌体和蛋白质等胶体粒子的分散状态，使胶体粒子聚集的过程。

2．分配系数：在一定温度、压力下，溶质分子分布在两个互不相溶的溶剂里，达到平衡后，它在两相的浓度为一常数叫分配系数。

3．离子交换：利用离子交换树脂作为吸附剂，将溶液中的待分离组分，依据其电荷差异，依靠库仑力吸附在树脂上，然后利用合适的洗脱剂将吸附质从树脂上洗脱下来，达到分离的目的。

4．等电点沉淀：调节体系pH 值，使两性电解质的溶解度下降，析出的操作称为等电点沉淀。

5．正相色谱：是指固定相的极性高于流动相的极性，因此，在这种层析过程中非极性分子或极性小的分子比极性大的分子移动的速度快，先从柱中流出来。

二、单选题（每小题1分，共15分）1．针对配基的生物学特异性的蛋白质分离方法是（ C ）。

A.凝胶过滤B.离子交换层析C.亲和层析D.纸层析2．从组织中提取酶时，最理想的结果是（ C ）A.蛋白产量最高B.酶活力单位数值很大C.比活力最高D.Km 最小3．蛋白质分子量的测定可采用（ C ）方法。

A ．离子交换层析 B.亲和层析 C.凝胶层析 D.聚酰胺层析4．结晶过程中，溶质过饱和度大小（A ）。

A 、不仅会影响晶核的形成速度，而且会影响晶体的长大速度B 、只会影响晶核的形成速度，但不会影响晶体的长大速度C 、不会影响晶核的形成速度，但会影响晶体的长大速度D 、不会影响晶核的形成速度，而且不会影响晶体的长大速度5．洗脱体积是（C ）。

A 、凝胶颗粒之间空隙的总体积B 、溶质进入凝胶内部的体积C 、与该溶质保留时间相对应的流动相体积D 、溶质从柱中流出时所用的流动相体积6．工业上常用的过滤介质不包括（ D ）A.织物介质B.堆积介质C.多孔固体介质D.真空介质7．下列哪项不是蛋白质的浓度测定的方法（ D ）。

A 、凯氏定氮法 B.双缩脲法 C.福林-酚法 D.核磁共振8．高压匀浆法破碎细胞，不适用于（D ）A. 酵母菌 B 大肠杆菌 C. 巨大芽孢杆菌 D.青霉9．阳树脂在软化中易受Fe3+污染，可通过（C ）清除铁化合物。

生物分离与纯化技术模拟试卷一答案

生物分离与纯化技术模拟试卷一答案生物分离与纯化技术模拟试卷一答案一、名词解释（每小题3分，共15分）1．质量作用定律：化学反应的速率与参加反应的物质的有效质量成正比。

2．干燥速率：干燥时单位干燥面积，单位时间内漆画的水量。

3．反渗析：当外加压力大于渗透压时，水将从溶液一侧向纯水一侧移动，此种渗透称之为反渗透。

4．色谱技术：是一组相关分离方法的总称，色谱柱的一般结构含有固定相（多孔介质）和流动相，根据物质在两相间的分配行为不同（由于亲和力差异），经过多次分配（吸附-解吸-吸附-解吸…），达到分离的目的。

5．超滤：凡是能截留相对分子量在500以上的高分子膜分离过程称为超滤，它主要是用于从溶剂或小分子溶质中将大分子筛分出来。

二、单选题（每小题1分，共15分）1．HPLC是哪种色谱的简称（ C ）。

A．离子交换色谱 B.气相色谱 C.高效液相色谱 D.凝胶色谱2．盐析法沉淀蛋白质的原理是（ B ）A.降低蛋白质溶液的介电常数B.中和电荷，破坏水膜C.与蛋白质结合成不溶性蛋白D.调节蛋白质溶液pH到等电点3．用于蛋白质分离过程中的脱盐和更换缓冲液的色谱是（ C ）A．离子交换色谱 B.亲和色谱 C.凝胶过滤色谱 D.反相色谱4．用于蛋白质分离过程中的脱盐和更换缓冲液的色谱是（ C ）A．离子交换色谱 B.亲和色谱 C.凝胶过滤色谱 D.反相色谱5．人血清清蛋白的等电点为，在PH为7的溶液中将血清蛋白质溶液通电，清蛋白质分子向（A）A ：正极移动；B：负极移动；C：不移动；D：不确定。

6．下列哪一项是强酸性阳离子交换树脂的活性交换基团（ A ）A 磺酸基团（-SO3 H）B 羧基-COOHC 酚羟基C6H5OHD 氧乙酸基-OCH2COOH7．在液膜分离的操作过程中，（B）主要起到稳定液膜的作用。

A、载体B、表面活性剂C、增强剂D、膜溶剂8．在液膜分离的操作过程中，（B）主要起到稳定液膜的作用。

A、载体B、表面活性剂C、增强剂D、膜溶剂9．纯化酶时，酶纯度的主要指标是：（ D ）A .蛋白质浓度 B. 酶量 C .酶的总活力 D. 酶的比活力10．结晶过程中，溶质过饱和度大小（ A ）A、不仅会影响晶核的形成速度，而且会影响晶体的长大速度B、只会影响晶核的形成速度，但不会影响晶体的长大速度C、不会影响晶核的形成速度，但会影响晶体的长大速度D、不会影响晶核的形成速度，而且不会影响晶体的长大速度11．发酵液的预处理方法不包括（C）A. 加热 B絮凝 C.离心 D. 调pH12．液一液萃取时常发生乳化作用，如何避免（D）A.剧烈搅拌 B低温 C.静止 D.加热13．那一种活性碳的吸附容量最小（B）A.粉末活性碳 B锦纶活性碳 C.颗粒活性碳14．常用的紫外线波长有两种（B）A. 256nm和365nm B254nm和365nm C. 254nm和367nm D. 256nm和367nm15．进行梯度洗脱，若用50g吸附剂，一般每份洗脱液量常为（C）A. 20rnL B100rnL C. 50rnL D. 90rnL三、判断题（每小题1分，共10分）1．助滤剂是一种可压缩的多孔微粒。

2020年生物分离与纯化技术模拟试卷五答案

生物分离与纯化技术模拟试卷五答案装订线一、名词解释（每小题3分，共15分）1．离心沉降：利用悬浮液或乳浊液中密度不同的组分在离心力场中迅速沉降分层，实现固液分离2．固相析出技术：利用沉析剂使所需提取的生化物质或杂质在溶液中的溶解度降低而形成无定形固体沉淀的过程。

3．乳化液膜系统：乳化液膜系统由膜相、外相和内相三相组成，膜相由烷烃物质组成，最常见的外相是水相，内相一般是微水滴。

4．反相色谱：是指固定相的极性低于流动相的极性，在这种层析过程中，极性大的分子比极性小的分子移动的速度快而先从柱中流出。

5．等电点：是两性物质在其质点的净电荷为零时介质的pH 值,溶质净电荷为零，分子间排斥电位降低，吸引力增大，能相互聚集起来，沉淀析出，此时溶质的溶解度最低。

二、单选题（每小题1分，共15分）1．在蛋白质初步提取的过程中，不能使用的方法（C ）。

A 、双水相萃取B 、超临界流体萃取C 、有机溶剂萃取D 、反胶团萃取2．离子交换法是应用离子交换剂作为吸附剂，通过（A ）将溶液中带相反电荷的物质吸附在离子交换剂上。

A 、静电作用 B 、疏水作用 C 、氢键作用 D 、范德华力 3．丝状（团状）真菌适合采用（A ）破碎。

A 、珠磨法B 、高压匀浆法C 、A 与B 联合D 、A 与B 均不行 4．真空转鼓过滤机工作一个循环经过（A ）。

A 、过滤区、缓冲区、再生区、卸渣区B 、缓冲区、过滤区、再生区、卸渣区C 、过滤区、缓冲区、卸渣区、再生区D 、过滤区、再生区、缓冲区、卸渣区 5．阴离子交换剂（C ）。

A 、可交换的为阴、阳离子B 、可交换的为蛋白质C 、可交换的为阴离子D 、可交换的为阳离子 6．凝胶色谱分离的依据是（B ）。

A 、固定相对各物质的吸附力不同B 、各物质分子大小不同C 、各物质在流动相和固定相中的分配系数不同D 、各物质与专一分子的亲和力不同7．依离子价或水化半径不同，离子交换树脂对不同离子亲和能力不同。

生物分离与纯化技术模拟试卷三答案

生物分离与纯化技术模拟试卷三答案一、名词解释（每小题3分，共15分）1．CM-Sephadex C-50：羧甲基纤维素、弱酸性阳离子交换剂，吸水量为每克干胶吸水五克。

2．絮凝：指在某些高分子絮凝剂存在下，在悬浮粒子之间发生架桥作用而使胶粒形成粗大的絮凝团的过程3．离心过滤：使悬浮液在离心力场作用下产生的离心力压力，作用在过滤介质上，使液体通过过滤介质成为滤液，而固体颗粒被截留在过滤介质表面，从而实现固液分离，是离心与过滤单元操作的集成，分离效率更高4．膜分离：利用膜的选择性（孔径大小），以膜的两侧存在的能量差作为推动力，由于溶液中各组分透过膜的迁移率不同而实现分离的一种技术。

5．层析分离：是一种物理的分离方法，利用多组分混合物中各组分物理化学性质的差别，使各组分以不同的程度分布在两个相中。

二、单选题（每小题1分，共15分）1．适合于亲脂性物质的分离的吸附剂是（ B ）。

A．活性炭 B.氧化铝 C.硅胶 D.磷酸钙2．下列哪项酶的特性对利用酶作为亲和层析固定相的分析工具是必需的？（ B ）A.该酶的活力高B.对底物有高度特异亲合性C.酶能被抑制剂抑制D.最适温度高E.酶具有多个亚基3．盐析法沉淀蛋白质的原理是（ B ）A.降低蛋白质溶液的介电常数B.中和电荷，破坏水膜C.与蛋白质结合成不溶性蛋白D.调节蛋白质溶液pH到等电点4．凝胶色谱分离的依据是（B）。

A、固定相对各物质的吸附力不同B、各物质分子大小不同C、各物质在流动相和固定相中的分配系数不同D、各物质与专一分子的亲和力不同5．如果要将复杂原料中分子量大于5000的物质与5000分子量以下的物质分开选用（D）。

A、Sephadex G-200B、Sephadex G-150C、Sephadex G-100D、Sephadex G-506．工业上强酸型和强碱型离子交换树脂在使用时为了减少酸碱用量且避免设备腐蚀，一般先将其转变为（B）。

A、钠型和磺酸型B、钠型和氯型C、铵型和磺酸型D、铵型和氯型7．下面哪一种是根据酶分子专一性结合的纯化方法（ A ）。

生物分离考试题及答案

生物分离考试题及答案一、选择题（每题2分，共20分）1. 细胞膜的主要组成成分是：A. 蛋白质和脂质B. 蛋白质和糖类C. 脂质和糖类D. 蛋白质和核酸答案：A2. 细胞内蛋白质合成的主要场所是：A. 细胞核B. 线粒体C. 内质网D. 核糖体答案：D3. 下列哪项不是细胞器？A. 核糖体B. 线粒体C. 高尔基体D. 染色体答案：D4. 细胞分裂过程中，染色体数量加倍发生在：A. 有丝分裂前期B. 有丝分裂中期C. 有丝分裂后期D. 减数分裂第一次分裂答案：C5. 细胞膜的流动性主要取决于：A. 蛋白质的种类和数量B. 脂质的种类和数量C. 膜上的糖类D. 膜上的离子答案：B6. 细胞内能量转换的主要场所是：A. 细胞核B. 线粒体C. 内质网D. 高尔基体答案：B7. 细胞内蛋白质的合成和加工主要发生在：A. 细胞核B. 线粒体C. 内质网和高尔基体D. 核糖体答案：C8. 细胞周期中，DNA复制发生在：A. G1期B. S期C. G2期D. M期答案：B9. 细胞凋亡是由以下哪个过程控制的？A. 细胞分裂B. 细胞分化C. 细胞衰老D. 细胞程序性死亡答案：D10. 细胞膜上的受体主要功能是：A. 传递信号B. 运输物质C. 细胞识别D. 细胞间连接答案：A二、填空题（每空1分，共10分）1. 细胞膜的基本骨架是由双层______构成的。

答案：磷脂2. 细胞内负责合成蛋白质的细胞器是______。

答案：核糖体3. 细胞周期中，细胞体积增大的阶段是______。

答案：G1期4. 在细胞分裂过程中，姐妹染色单体分离发生在______。

答案：有丝分裂后期5. 细胞内负责蛋白质折叠和修饰的细胞器是______。

答案：内质网三、简答题（每题10分，共20分）1. 简述细胞膜的主要功能。

答案：细胞膜的主要功能包括：维持细胞的形状，控制物质进出细胞，进行细胞间的物质交换，以及参与细胞间的信息传递。

2. 描述细胞凋亡的过程及其生物学意义。

生物分离与纯化技术模拟试卷十答案

生物分离与纯化技术模拟试卷十答案装订线一、名词解释（每小题3分，共15分）1．化学萃取：则利用脂溶性萃取剂与溶质之间的化学反应生成脂溶性复合分子实现溶质向有机相的分配。

2．微孔膜过滤：又称“精密过滤”，是最近20多年发展起来的一种薄膜过滤技术，主要用于分离亚微米级颗粒，是目前应用最广泛的一种分离分析微细颗粒和超净除菌的手段。

3．转型：即按照使用要求人为地赋予树脂平衡离子的过程。

4．亲和层析：是利用生物活性物质之间的专一亲和吸附作用而进行的层析方法。

是近年来发展的纯化酶和其他高分子的一种特殊的层析技术。

5．选择变性沉析：是利用蛋白质、酶与核酸等生物大分子对某些物理或化学因素敏感性不同，而有选择地使之变性沉析，以达到目的物与杂蛋白分离的技术，称为选择变性沉析。

二、单选题（每小题1分，共15分）1．网格高聚物吸附剂吸附的弱酸性物质，一般用下列哪种溶液洗脱。

（ D ） A.水 B.高盐 C.低pH D. 高pH2．下列哪项不属于发酵液的预处理：（ D ） A.加热 B.调pH C.絮凝和凝聚 D.层析 3．盐析法沉淀蛋白质的原理是（ B ）A.降低蛋白质溶液的介电常数B.中和电荷，破坏水膜C.与蛋白质结合成不溶性蛋白D.调节蛋白质溶液pH 到等电点 4．分子筛层析纯化酶是根据（ C ）进行纯化。

A.根据酶分子电荷性质的纯化方法B.调节酶溶解度的方法C.根据酶分子大小、形状不同的纯化方法D.根据酶分子专一性结合的纯化方法 5．下列哪一项不是阳离子交换树脂（ D ） A 氢型 B 钠型 C 铵型 D 羟型 6．超临界流体萃取法适用于提取（B ）A 、极性大的成分B 、极性小的成分C 、离子型化合物D 、能气化的成分E 、亲水性成分 7．蛋白质类物质的分离纯化往往是多步骤的，其前期处理手段多采用下列哪类的方法。

（ B ） A ．分辨率高 B.负载量大 C.操作简便 D.价廉 8．针对配基的生物学特异性的蛋白质分离方法是（ C ）。

生物药品的分离纯化技术及其应用考核试卷

1.生物药品的分离纯化过程中，凝胶过滤层析可以根据蛋白质的电荷进行分离。（）
2.离子交换层析中，蛋白质的吸附能力随着溶液pH值的增加而增强。（）
3.亲和层析的洗脱通常可以通过改变pH值来实现。（）
4.冷冻干燥是生物药品储存的最佳方法，因为它可以完全避免蛋白质的变性。（）
5.生物药品的毒理学评价只需要检测急性毒性。（）
10.在蛋白质的等电点沉淀中，以下哪种情况会导致蛋白质沉淀？（）
A.溶液pH值低于蛋白质等电点
B.溶液pH值高于蛋白质等电点
C.溶液pH值等于蛋白质等电点
D.溶液pH值远离蛋白质等电点
11.下列哪种方法适用于蛋白质的变性？（）
A.加入盐类
B.加入有机溶剂
C.调节pH值
D.降低温度
12.以下哪种层析技术是基于蛋白质分子大小进行分离的？（）
4.影响生物药品稳定性的因素包括温度、pH值、离子强度、氧化等。通过冷冻干燥、冷藏、调节pH值和使用抗氧化剂等方法可以保持药品稳定性。
4.生物药品的稳定性对其质量和疗效至关重要。请列举影响生物药品稳定性的因素，并讨论在储存和应用过程中如何保持生物药品的稳定性。
标准答案
一、单项选择题
1. A
2. C
3. A
4. C
5. A
6. C
7. B
8. A
9. D
10. C
11. B
12. C
13. D
14. C
15. C
16. D
17. C
A.离子交换层析
B.亲和层析
C.凝胶过滤层析
D.吸附层析
13.在生物药品纯化过程中，下列哪种方法通常用于去除核酸杂质？（）
A.蛋白酶处理

生物分离与纯化技术模拟试卷九答案

生物分离与纯化技术模拟试卷九答案装订线一、名词解释（每小题3分，共15分）1．离心分离技术：是基于固体颗粒和周围液体密度存在差异，在离心场中使不同密度的固体颗粒加速沉降的分离过程。

2．物理萃取：即溶质根据相似相溶的原理在两相间达到分配平衡，萃取剂与溶质之间不发生化学反应。

3．有机聚合物沉析：利用生物分子与某些有机聚合物形成沉淀而析出的分离技术称为有机聚合物沉析。

4．平衡离子：离子交换树脂中与功能基团以离子键联结的可移动的平衡离子，亦称活性离子。

5．离子交换层析：是以离子交换剂为固定相，根据物质的带电性质不同而进行分离的一种层析技术。

二、单选题（每小题1分，共15分）1．葡聚糖凝胶可使用那种溶剂溶胀（C ） A.甲醇 B 乙醇 C.缓冲液 D.乙酸乙酯 2．不能用于固液分离的手段为（C ） A.离心 B 过滤 C.超滤 D.双水相萃取 3．最常用的干燥方法有（ D ）A 、常压干燥B 、减压干燥C 、喷雾干燥D 、以上都是 4．物理萃取即溶质根据（ B ）的原理进行分离的 A.吸附 B.相似相溶 C 分子筛 D 亲和 5．适合小量细胞破碎的方法是（ B ）A.高压匀浆法B.超声破碎法C.高速珠磨法D.高压挤压法 6．关于分配柱层析的基本操作错误(D )。

A 装柱分干法和湿法两种B 分配柱层析法使用两种溶剂，事先必须先使这两个相互相饱和C 用硅藻土为载体，需分批小量地倒入柱中，用一端是平盘的棒把硅藻压紧压平D 分配柱层析适用于分离极性比较小、在有机溶剂中溶解度大的成分，或极性很相似的成分。

7．颗粒与流体的密度差越小，颗粒的沉降速度（ A ） A.越小 B.越大 C.不变 D.无法确定8．“类似物容易吸附类似物”的原则,一般极性吸附剂适宜于从何种溶剂中吸附极性物质（ B ） A ．极性溶剂 B ．非极性溶剂 C ．水 D ．溶剂 9．关于大孔树脂洗脱条件的说法，错误的是：（ A ） A 、最常用的是以高级醇、酮或其水溶液解吸。

高中生物第一章第一节微生物的分离和纯培养课后训练图高中生物试题

化钝市安居阳光实验学校微生物的分离和纯培养练习1 对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒的方法依次是（）。

①化学消毒②灼烧灭菌③干热灭菌④紫外线灭菌⑤高压蒸汽灭菌⑥巴氏消毒法A．⑤③②①④⑥ B．①②③④⑤⑥C．⑥②③④①⑤ D．③④②①⑥⑤2 高压蒸汽灭菌的原理是（）。

A．高压使细菌DNA变性B．高压使细菌蛋白质凝固变性C．高温烫死细菌D．高温使细菌DNA变性3 有关微生物营养物质的叙述中，正确的是（）。

A．氨既能为一些微生物提供氮源也能提供能量B．NaHCO3只能为微生物提供碳源C．维生素是微生物的能源D．牛肉膏蛋白胨只能为微生物提供氮源和碳源4 有关平板划线操作正确的是（）。

A．使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌B．打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞C．将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可D．最后将平板倒置，放入培养箱中培养5 下列叙述错误的是（）。

A．培养乳酸菌时需要在培养基中添加维生素B．培养霉菌时需将培养基的pH调至碱性C．培养细菌时需将培养基的pH调至中性或微碱性D．培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件6 下列操作属于灭菌的是（）。

A．接种前用火焰灼烧接种环B．接种前用酒精擦拭双手C．将平板倒置，放入培养箱中培养D．接种在酒精灯的火焰旁完成7 牛肉膏、蛋白胨培养基中加入琼脂这一理想的凝固剂，对这一说法不正确的是（）。

A．不被所培养的微生物分解利用，对所培养的微生物无毒害作用B．在微生物生长温度范围内保持固体状态C．琼脂凝固点温度低，利于微生物的生长D．凝固剂在灭菌过程中不会被破坏，透明度好，凝固力强8 有关倒平板操作错误的是（）。

A．在火焰旁进行操作B．使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰C．将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌面上D．等待平板冷却凝固后需要倒过来放置9 含C、H、O、N的大分子有机化合物可以作为（）。

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生物分离与纯化技术模拟试卷三答案
生物分离与纯化技术模拟试卷三答案
一、名词解释（每小题3分，共15分）
1．CM-Sephadex C-50：羧甲基纤维素、弱酸性阳离子交换剂，吸水量为每克干胶吸水五克。

2．絮凝：指在某些高分子絮凝剂存在下，在悬浮粒子之间发生架桥作用而使胶粒形成粗大的絮凝团的过程
3．离心过滤：使悬浮液在离心力场作用下产生的离心力压力，作用在过滤介质上，使液体通过过滤介质成为滤液，而固体颗粒被截留在过滤介质表面，从而实现固液分离，是离心与过滤单元操作的集成，分离效率更高
4．膜分离：利用膜的选择性（孔径大小），以膜的两侧存在的能量差作为推动力，由于溶液中各组分透过膜的迁移率不同而实现分离的一种技术。

5．层析分离：是一种物理的分离方法，利用多组分混合物中各组分物理化学性质的差别，使各组分以不同的程度分布在两个相中。

二、单选题（每小题1分，共15分）
1．适合于亲脂性物质的分离的吸附剂是（ B ）。

A．活性炭 B.氧化铝 C.硅胶 D.磷酸钙
2．下列哪项酶的特性对利用酶作为亲和层析固定相的分析工具是必需的？（ B ）
A.该酶的活力高
B.对底物有高度特异亲合性
C.酶能被抑制剂抑制
D.最适温度高
E.酶具有多个亚基
3．盐析法沉淀蛋白质的原理是（ B ）
A.降低蛋白质溶液的介电常数
B.中和电荷，破坏水膜
C.与蛋白质结合成不溶性蛋白
D.调节蛋白质溶液pH到等电点
4．凝胶色谱分离的依据是（B）。

A、固定相对各物质的吸附力不同
B、各物质分子大小不同
C、各物质在流动相和固定相中的分配系数不同
D、各物质与专一分子的亲和力不同
5．如果要将复杂原料中分子量大于5000的物质与5000分子量以下的物质分开选用（D）。

A、Sephadex G-200
B、Sephadex G-150
C、Sephadex G-100
D、Sephadex G-50
6．工业上强酸型和强碱型离子交换树脂在使用时为了减少酸碱用量且避免设备腐蚀，一般先将其转变为（B）。

A、钠型和磺酸型
B、钠型和氯型
C、铵型和磺酸型
D、铵型和氯型
7．下面哪一种是根据酶分子专一性结合的纯化方法（ A ）。

A. 亲和层析
B. 凝胶层析
C. 离子交换层析
D. 盐析
8．以下哪项不是在重力场中，颗粒在静止的流体中降落时受到的力（ B ）
A.重力
B. 压力
C.浮力
D. 阻力
9．关于用氢键形成来判断各类溶剂互溶规律，下列（A）项是正确的叙述。

A、氢键形成是能量释放的过程，若两种溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大，则有利于互溶。

B、氢键形成是能量吸收的过程，若两种溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大，则有利于互溶。

C、氢键形成是能量释放的过程，若两种溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大，则不利于互溶。

D、氢键形成是能量吸收的过程，若两种溶剂混合后形成的氢键增加或强度更大，则不利于互溶。

10．关于萃取下列说法正确的是（C）
A. 酸性物质在酸性条件下萃取 B碱性物质在碱性条件下萃取
C. 两性电解质在等电点时进行提取
D. 两性电解质偏离等电点时进行提取
11．下列关于固相析出说法正确的是（B）
A.沉淀和晶体会同时生成 B析出速度慢产生的是结晶
C.和析出速度无关
D.析出速度慢产生的是沉淀
12．那一种膜孔径最小（C）
A.微滤 B超滤 C.反渗透 D. 纳米过滤
13．酚型离子交换树脂则应在（B ）的溶液中才能进行反应
A. pH＞7 B pH＞9 C. pH﹤9 D. pH﹤7
14．一般来说，可使用正相色谱分离（B）
A. 酚 B带电离子 C. 醇 D. 有机酸
15．离子交换层析的上样时，上样量一般为柱床体积的（C）为宜。

A. 2％-5％ B1％-2％ C. 1％-5％ D. 3％-7％
三、判断题（每小题1分，共10分）
1．珠磨法中适当地增加研磨剂的装量可提高细胞破碎率。

（×）
2．进料的温度和pH会影响膜的寿命。

（√）
3．应用有机溶剂提取生化成分时，一般在较高温度下进行。

（×）
4．溶剂的极性从小到大为丙醇＞乙醇＞水＞乙酸。

（√）
5．蛋白质为两性电解质，改变pH可改变其荷电性质，pH﹤pI蛋白质带正电。

（√）
6．进行水的超净化处理、汽油超净、电子工业超净、注射液的无菌检查、饮用水的细菌检查使用孔径为0.2µm的膜。

（×）
7．只有树脂对被交换离子比原结合在树脂上的离子具有更高的选择性时，静态离子交换操作才有可能获得较好的效果。

（√）
8．制备型HPLC对仪器的要求不像分析型HPLC那样苛刻。

（√）
9．Sephadex LH-20的分离原理主要是分子筛和正相分配色谱。

（√）
10．水蒸气蒸馏法是提取挥发油最常用的方法。

（√）
四、填空题（每小题1分，共15分）
1．常用的蛋白质沉析方法有（等电点沉淀），（盐析）和（有机溶剂沉淀）。

2．蛋白质分离常用的色谱法有（凝胶色谱法），（多糖基离子交换色谱法），（高效液相色谱法）和（亲和色谱法）。

3．离子交换树脂由（载体），（活性基团）和（可交换离子）组成。

4．膜分离过程中所使用的膜，依据其膜特性（孔径）不同可分为（微滤膜），（超滤膜），（纳滤膜）和（反渗透膜）。

五、简答题（每小题7分，共35分）
1．在色谱操作过程中为什么要进行平衡？
答：1、流速平衡：流速是柱层析操作当中的主要影响因素，流速的快慢直接影响着分离的效果，流速过快，混合物得不到完全的分离，流速过慢，整体分离的时间要延长，因此在分离前首先要确定留宿。

2、液体环境：为了保持被分离物质运动的均一性，以及好的吸附和解析效果，因此要保持孔隙内部和外部液体环境的一致，所以进行液体环境的平衡。

2．简述吸附色谱分离技术的原理。

答: 利用溶质与吸附剂之间的分子吸附力(范德华力，包括色散力、诱导力、定向力以及氢键)的差异而实现分离
3．何谓超临界流体萃取，并简述其分离原理
答：超临界流体萃取是利用超临界流体具有的类似气体的扩散系数，以及类似液体的密度（溶解能力强）的特点，利用超临界流体为萃取剂进行的萃取单元操作。

其特点是安全、无毒、产品分离简单，但设备投资较大。

4．膜分离过程中，有那些原因会造成膜污染，如何处理？
答：（1）膜污染主要有两种情况：一是附着层被滤饼、有机物凝胶、无机物水垢胶体物质或微生物等吸附于表面；另一种是料液中溶质结晶或沉淀造成堵塞。

（2）膜污染是可以预防或减轻的，措施包括料液预处理、膜性质的改善、操作条件改变等方式。

（3）膜污染所引起的通量衰减往往是不可逆的，只能通过清洗的处理方式消除，包括物理方法冲洗和化学药品溶液清洗等。

5．何谓免疫亲和层析，简述亲和免疫层析介质的制备过程?
答、免疫亲和层析是利用亲和技术和色谱分离集成产生的一种高效色谱分离技术，其分离原理是通过抗原-抗体之间特异性的相互作用，从而实现高效的分离。

层析介质的制备过程包括：抗体的制备、抗体提取、载体活化，手臂链的连接、抗体的连接等步骤。

六、案例分析题（共10分）
我国是啤酒生产大国,每年有大量的下脚料－啤酒废酵母泥排放，而啤酒酵母中含有丰富的营养物质，拟将其变废为宝，近年来工业上结合使用各项物理、化学或生物技术，将其破壁并降解成富含氨基酸和核苷酸的酵母抽提物，广泛使用于食品与医药行业，既减少环境污染又提高了啤酒工业效益。

请根据所学知识，提出一套经济的且技术可行的工业制备方案。

答：自由发挥，只要陈述有理有据即可得分，得分值依内容的正确性和完整性评判。