MS、B5、 N6培养基配方
MS培养基：
MS培养基：MS是人名Murashige and Skoog的缩写。
MS培养基是Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的，其特点是无机盐和离子浓度较高，是较稳定的离子平衡溶液，它的硝酸盐含量高，其养分的数量和比例合适，能满足植物细胞的营养和生理需要,因而适用范围比较广，多数植物组织培养快速繁殖用它作为培养基的基本培养基。
基于此，这种培养基就用他们的名字来命名了。
MS培养基是目前使用最普遍的培养基。
其具有较高的无机盐浓度，能够保证组织生长所需的矿质营养还能加速愈伤组织的生长。
由于配方中的离子浓度高，在配制、贮存和消毒等过程中，即使有些成分略有出入，也不会影响离子间的平衡。
MS固体培养基可用于诱导愈伤组织，也可用于胚、茎段、茎尖及花药的培养，其液体培养基用于细胞悬浮培养时能获得明显的成功。
MS培养基的无机养分的数量和比例比较合适，足以满足植物细胞在营养上和生理上的需要。
因此，一般情况下，不用再添加氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子汁等有机附加成分。
和其它培养基的基本成分相比，MS培养基中的硝酸盐、钾和铵的含量高，这是它的显著特点。
MS培养基配方单：工作液浓度单位mg/L 大量元素：NH4NO3 1 650 KNO3 1 900 CaCl2·2H2O440 MgSO4·7H2O 370 KH2PO4 170 微量元素：KI 0.83 H3BO3 6.2 MnSO4·4H2O 22.3 ZnSO4·7H2O 8.6 Na2MnO4·2H2O 0.25 CuSO4·5H2O 0.025 CoCl2·6H2O 0.025 铁盐：FeSO4·7H2O（27.8）Na2-EDTA·2H2O（37.3）有机物质：肌醇100 烟酸0.5 盐酸吡哆醇（维生素B6）0.5 盐酸硫胺素（维生素B1）0.1甘氨酸 2.0 注意：肌醇一般是要另外分开来独自配成浓缩液，因为它比较难溶，一般配成100倍，而除去肌醇后的有机，还是可以配成1000倍的。
培养基的组成、配制与灭菌
1、大量元素：
组织培养中，各种矿质营养主要从培养基中获得， N、P、K、Ca、Mg、S等6种大量元素依靠各种无机 盐提供。
不同植物种类和不同试验目的对元素的使用量要求 不同，需经试验确定。
目前已选择出多种培养基配方用于植物组织培养。 其中以MS应用最广泛。
通常激素母液浓度生长素类为0.1~0.5 mg/ml, 细 胞分裂素母液浓度为0.2~1.0 mg/ml.
四、培养基的配制：
1、量取母液：营养元素和激素。 2、称量蔗糖、琼脂，放入600ml左右蒸馏水的锅 内，电路上加热，使琼脂溶化。 3、加入母液，混合均匀，调整pH值。 4、分装入瓶，每瓶40－50ml。 5、封口：用4－6层称量纸封口，之后灭菌备用。
在植物组织培养中，主要通过植物激素 及生长调节物质对离体的组织、器官的形 态发生进行调控。包括诱导细胞分裂、愈 伤组织的生长、根芽的分化以及体细胞胚 胎发生等。
常用的植物激素及生长调节物涉及五大类植物 激素：
1、生长素类：IAA、IBA、NAA、2，4-D 2、细胞分裂类：6-BA、KT（Kin）、ZT、2ip 3、赤霉素类：GA3、GA4、GA7 4、脱落酸：ABA 5、乙烯：ETH
五、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）：
1、加热：
灭菌前检查灭菌锅内水量是否充足， 然后将培养基放于灭菌锅内，改好盖，关 闭放气阀，打开电源，加热升温。
2、排气：
当温度升至0.5kg/cm2时，打开放气阀 彻底排出锅内冷空气。然后关闭放气阀， 促使压力继续上升。
3、温度控制：
当锅内压力升至1.1kg/cm2时，计时15－20 分钟，计时结束后，关闭电源。
二、培养基的类型： 1、高盐浓度培养基：MS、B5、SH等。
MS、B5、 N6培养基配方
M S培养基大量元素成分分子量使用浓度(mg/L)硝酸钾KNO3101.211900硝酸铵NH4NO380.041650磷酸二氢钾KH2PO4136.09170硫酸镁MgSO4·7H2O246.47370氯化钙CaCl2·2H2O147.02440微量元素碘化钾KI166.010.83硼酸H3BO361.83 6.2硫酸锰MnSO4·4H2O223.0122.3硫酸锌ZnSO4·7 H2O287.548.6钼酸钠Na2MoO4·2 H2O241.950.25硫酸铜CuSO4·5 H2O249.680.25氯化钴CoCl2·6H2O237.930.025铁盐乙二胺四乙酸二钠Na2.EDTA372.2537.25硫酸亚铁FeSO24·7H2O278.0327.85有机成分肌醇100甘氨酸2盐酸硫胺素VB10.1盐酸吡哆醇VB60.5烟酸VB5 或VPP0.5蔗糖sucrose342.3130g /L琼脂agar7 g /L B5培养基成分使用浓度(mg/L)大量元素硝酸钾KNO32500MgSO4·7H2O250CaCl2·2H2O150(NH4)2SO4134NaH2PO4.H2O150微量元素KI0.75H3BO4 3.0MnSO4·4H2O10ZnSO4·7H2O 2.0Na2MoO4·2H2O0.25CoCl2·6H2O0.025CuSO4·5H2O0.025铁盐Na-EDTA37.32FeSO4·7H2O27.8有机成分肌醇100烟酸 1.0盐酸吡哆醇 1.0盐酸硫铵10N6培养基组成成分数量(mg/l）大量元素硝酸钾(KN03) 2830硫酸铵(NH4SO4) 463氯化钙(CaCl2·2HzO) 166硫酸镁(MgSO4·7H20) 185磷酸二氢钾(KH2PO4) 400 微量元素硫酸亚铁(FeSO４·7H20) 27.8硫酸锰(MnS04·4H20) 4.4硫酸锌(ZnSO4·7H20) 1.6硼酸(H2BO3) 0.8碘化钾(KI) 1.6有机成分甘氨酸 2烟酸0.5盐酸硫胺素(维B1) 1.0盐酸吡哆素(维B6) 0.5。
MS培养基
MS培养基MS培养基是目前使用最普遍的培养基。
其具有较高的无机盐浓度，能够保证组织生长所需的矿质营养还能加速愈伤组织的生长。
由于配方中的离子浓度高，在配制、贮存和消毒等过程中，即使有些成分略有出入，也不会影响离子间的平衡。
MS固体培养基可用于诱导愈伤组织，也可用于胚、茎段、茎尖及花药的培养，其液体培养基用于细胞悬浮培养时能获得明显的成功。
MS培养基的无机养分的数量和比例比较合适，足以满足植物细胞在营养上和生理上的需要。
因此，一般情况下，不用再添加氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子汁等有机附加成分。
和其它培养基的基本成1.母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是：每种母液中的几种成分称量完毕后，分别用少量的蒸馏水彻底溶解，然后再将它们混溶，最后定容到1 L。
2.母液Ⅲ的配制方法是：将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分别放到450 mL蒸馏水中，边加热边不断搅拌使它们溶解，然后将两种溶液混合，并将pH调至5.5，最后定容到1 L，保存在棕色玻璃瓶中。
3.MS培养基中还需要加入2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)、萘乙酸(NAA)、6 苄基嘌呤(6BA)等植物生长调节物质，并且分别配成母液(0 1 mg/mL)。
其配制方法是：分别称取这3种物质各10 mg，将2，4-D和NAA用少量(1 mL)无水乙醇预溶，将6BA用少量(1 mL)的物质的量浓度为0.1 mol/L的NaOH溶液溶解，溶解过程需要水浴加热，最后分别定容至100 mL，即得质量浓度为0 1 mg/mL的母液。
4.组织培养是否能够获得成功，主要取决于对培养基的选择。
不同的培养基具有不同的特点，也就适合于不同的植物种类和接种材料。
在开展组织培养项目时，首先要对各种培养基进行了解和分析，以便能从中选择合适的使用。
组培用的培养基一般包括基础培养基和激素，但是植物激素的种类和数量，随着不同培养阶段和不同材料有变化，因此各培养基配方中均不列入植物激素。
3 植物组织培养的基本技术
Ｎ6培养基
Ｎ6培养基是1974年朱至清等为水稻等禾 谷类作物花药培养而设计的。 特点：成分较简单，KNO3和（NH4）2SO4 含量高。 适用：广泛应用于小麦、水稻及其它植物 的花药培养等。
ＫＭ－８Ｐ培养基
ＫＭ－８Ｐ培养基是1974年为原生质体 培养而设计的。 特点：有机成分较复杂，它包括了所有 的单糖和维生素。 适用：原生质融合的培养。
培养基的选择
1.单因子试验 培养基中其它成分都维持在一般水平上， 只变动一个因子。 试验中各处理一般都要设有一定的重复。 随试验规模和要求不同，大多每个项目要 有4～10瓶，每瓶至少3块培养物或3丛小幼 苗。
2.多因子试验 对培养基中两个或两个以上因素进行研究 的试验称为多因子实验，试验可采用完全试 验方案，也可选用正交设计方案 。 完全试验方案具有均衡完全的特点，各个 因子的每个水平都相互搭配，构成了所有可 能的处理组合。 正交试验虽然是多因素搭配在一起的试验， 但是在试验结果的分析中，每一种因素所起 的作用却又能够明白无误地表现出来。 （4因子3水平只需9种组合；81）
KT和BA先溶于少量1mol的HCl中再加水定容。
玉米素先溶于少量95％的酒精中，再加热水到一 定浓度。
2.
母液的保存： 大量：常温 有机物：低温 激素
2.培养基的制备程序
(水、药、糖、琼脂) →混合→PH调整→ 加热溶解 分装 玻璃器皿→水洗→干燥→加棉塞 高压蒸汽灭菌→冷却→凝固→接种
培养基的制备
1.母液的配制和保存 所谓母液是欲配制液的浓缩液，这可保证 各物质成分的准确性及配制时的快速移取，并 便于低温保藏。一般配成比所需浓度高10～ 100倍的母液。母液配制时可分别配成大量元 素、微量元素、铁盐、有机物和激素类等。
MS培养基配方列表
MS培养基配方列表MS培养基是一种经典的植物培养基，广泛应用于细胞、组织和器官培养研究中。
其配方很复杂，包含多种无机盐和有机物，下面就介绍一下MS培养基的配方列表。
1. 硝酸铵 (NH4NO3)硝酸铵作为氮源，在细胞的生长和分化过程中非常重要。
2. 磷酸一氢钾 (KH2PO4)磷酸一氢钾是植物生长的主要磷源。
3. 硫酸镁七水合物(MgSO4·7H2O)硫酸镁七水合物是植物生长中的必需元素，同样也是叶绿素合成的关键。
4. 硝酸钾 (KNO3)硝酸钾是一种重要的氮源，也是蛋白质合成的必需元素。
5. 硝酸钙 (Ca(NO3)2)硝酸钙是植物生长过程中不可或缺的钙源，在细胞分裂和细胞伸长过程中起着重要作用。
6. 硫酸铁 (FeSO4)硫酸铁是植物体内铁元素的重要来源，对叶绿素和细胞色素c等生物化学过程有着至关重要的作用。
7. 乙酸 (CH3COOH)乙酸可以被植物利用作为碳源，同时还可以促进细胞发育和生长。
8. 吲哚-3-乙酸 (IAA)吲哚-3-乙酸是一种重要的生长素，能够影响细胞分裂和扩散，促进细胞分化和器官发育。
9. 6-苄氨基嘌呤 (BA)6-苄氨基嘌呤是一种核酸类似物，可以促进细胞分裂和增殖，对重组DNA和RNA的生成和转录起着关键的作用。
10. 抗生素 (G418)抗生素G418能够抑制细胞生长和增殖，用于防止其它微生物的污染。
以上就是MS培养基的配方列表，每种成分的浓度和配比都需要根据具体的实验室需求进行调整。
在制备MS培养基过程中，需要严格控制pH值和温度，以确保培养基的有效性。
MS培养基是一种经典、可靠的植物培养基，使用得当可以为细胞、组织和器官培养研究提供强有力的支持。
MSB5N6培养基配方
MSB5N6培养基配方培养基是一种用于细胞培养和生物学研究的基础培养液，可以为细胞提供必需的养分和环境条件，促进细胞的生长和增殖。
在细胞培养过程中，常用的培养基有多种配方，每种培养基都有特定的应用范围和成分要求。
下面将介绍MS、B5和N6培养基的配方和主要组分。
1. MS培养基（Murashige and Skoog培养基）是一种广泛应用于植物组织培养的基础培养基。
MS培养基的配方如下：成分（每升）- 盐类：硝酸铵（1.65g）、硝酸钙（1.85g）、硫酸镁（0.37g）、硫酸钾（1.90g）、硝酸镁（18.0mg）、硼酸（6.2mg）、镁硫酸（16.9mg）、硫酸锌（8.6mg）、硫酸钴（0.025mg）、硝酸铜（0.025mg）、硝酸亚铁（27.8mg）、硫酸亚铁（27.8mg）- 维生素：尼古丁酸（0.5mg）、吡哆醇（0.5mg）、吲哚-3-乙酸（0.1mg）、吲哚-3-丁酸（0.1mg）、维生素B1（0.5mg）-培养糖：葡萄糖（30g）- 植物激素：植物生长素（0.1-1.0mg/L）2.B5培养基是一种用于植物根系培养和营养生理研究的培养基。
B5培养基的配方如下：成分（每升）- 盐类：硝酸铵（1.65g）、硝酸钙（1.83g）、硫酸镁（0.25g）、硝酸钾（1.25g）、硼酸（6.2mg）、硫酸锌（8.6mg）、硫酸亚铁（27.8mg）- 维生素：葡萄糖（30g）、吡哆醇（0.01mg）、锦灯胺酸（0.1mg）、维生素B1（0.1mg）、维生素B2（0.1mg）、维生素B3（0.5mg）、维生素C（100mg）- 植物激素：植物生长素（0.5-3.0mg/L）3.N6培养基是一种用于细胞培养和植物芽培养的培养基。
成分（每升）- 盐类：硝酸铵（1.65g）、硝酸钙（1.83g）、硫酸镁（0.37g）、硫酸钾（1.25g）、硼酸（6.2mg）、硝酸亚铁（27.8mg）- 维生素：吡哆醇（0.5mg）、吲哚-3-乙酸（0.5mg）、吲哚-3-丁酸（0.05mg）、维生素B1（0.1mg）- 植物激素：植物生长素（1.0-5.0mg/L）、植物激动素（0.1mg/L）以上是MS、B5和N6培养基的配方和主要成分。
几种常用的植物组织培养基配方
叶酸 氨基苯甲酸
生长素
质量浓度／ （mg · L－ １ ）
０畅 ０２５ ０畅 ０２５
２８ １００ １畅 ０ １畅 ０ １畅 ０ １畅 ０ ０畅 １ ０畅 ０２ ０畅 ０１
成分
氯化胆碱 维生素 B２ 维生素 C 维生素 A 维生素 D３ 维生素 B１２
２ ，４ D 玉米素 萘乙酸
4 附
录
几种常用的植物组织培养基配方
１畅 M S 培养基配方（p H５畅 ６ ～ ５畅 ８）
成分
N H４ NO３ K N O３
CaCl２ · ２H２ O MgSO４ · ７H２ O
K H２ PO４
KI
H３ BO３
质量浓度／ （mg · L － １ ）
１ ６５０ １ ９００ ４４０ ３７０ １７０
０畅 ８３
23 1
Na２ EDT A 肌醇
质量浓度／ （mg · L－ １ ）
１０ ２畅 ０ ０畅 ２５ ０畅 ０２５ ０畅 ０２５ ３７畅 ３ ２７畅 ８ １００
成分
烟酸 盐酸硫胺素 盐酸吡哆醇
甘氨酸
质量浓度／ （mg · L－硫胺素 盐酸吡哆醇
烟酸
质量浓度／ （mg · L－ １ ）
２畅 B５ 培养基（p H５畅 ５）
成分
（N H４ ）２ SO４ K N O３
CaCl２ · ２H２ O MgSO４ · ７H２ O NaH２ PO４ · H２ O
KI
H３ BO３
质量浓度／ （mg · L － １ ）
１３４ ２ ５００ １５０ ２５０ １５０
０畅 ７５
３畅 ０
成分
MnSO４ · ４H２ O ZnSO４ · ７H２ O Na２ MoO４ · ２ H２ O CuSO４ · ５H２ O CoCl２ · ６H２ O FeSO４ · ７H２ O
细胞工程实验--培养基成分表
附表1 几种常见的培养基配方说明： [1]无机盐含量高，微量元素种类齐全，适用范围广；[2]硝酸钾含量高，适合于愈伤组织和细胞悬浮培养；[3] 中等无机盐含量；[4]低无机盐含量，一般作生根培养。
固体培养基应加入琼脂0.6-0.7%。
表2 用于离体叶肉细胞培养的培养基配方表3 适于低密度下培养原生质体的KM8p培养基（采用过滤灭菌）引自Kao和Michayluk，1975及Kao和Wetter，1977。
表4 原生质体培养的几种常用培养基单位: mg/L 成份NT DPD D2a KM8P V－KM 无机盐KNO3950 1480 1480 1900 1480 NH4NO3825 270 270 600 1444 CaCl2·2H2O 220 570 900 600 735 MgSO4·7H2O 1233 340 900 300 934 KH2PO4680 80 80 170 68 KCl －－－300 －MnSO4·H2O －－－10.0 10.0 MnSO4·4H2O 22.3 7.2 5.0 －－KI 0.83 0.25 0.25 0.75 0.75 CoCl2·6H2O －0.01 0.01 0.025 0.025 CoSO4·7H2O 0.03 －－－－ZnSO4·7H2O 8.6 1.5 1.5 2.0 2.0 CuSO4·5H2O 0.025 0.015 0.015 0.025 0.025 H3BO3 6.2 2.0 2.0 3.0 3.0 Na2MoO4·2H2O 0.25 0.1 0.1 0.25 0.25 Na2-EDTA 37.3 37.3 37.3 －37.3 FeSO4·7H2O 27.8 27.8 27.8 －27.8 Seqestrene 330 Fe －－－28 －糖类和糖醇葡萄糖－－0.4mol/L 68，400 108，900 蔗糖10,000 17,100 17100 250 250 果糖－－－250 250 核糖－－－250 250 木糖－－－250 250 甘露醇127,520 55,000 －250 250 鼠李糖－－－250 250 纤维二糖－－－250 250 山梨醇－－－250 250 甘露糖－－－－250 维生素和有机酸肌醇100 100 100 100 100 盐酸硫胺素VB1 1 4.0 4.0 1 1盐酸吡哆醇VB6 －0.7 0.7 1 －烟酸－ 4.0 4.0 － 1烟酰胺－－－ 1 －抗坏血酸－－－ 2 2氯化胆碱－－－ 1 1泛酸钙－－－ 1 1叶酸－0.4 0.4 0.4 0.4对氨基苯甲酸－－－0.02 0.02生物素－0.04 0.04 0.01 0.01维生素A －－－0.01 0.01维生素D3－－－0.01 0.01维生素B12－－－0.02 －柠檬酸－－－40 40苹果酸－－－40 40延胡羧酸－－－40 40丙酮酸钠－－－20 20氨基乙酸－ 1.4 1.4 2 －其他有机添加物椰子乳－－5% 20（ml）20（ml）水解酪蛋白－－－250 250生长调节剂2,4-D － 1.3 －0.2 －6-BA 1.0 0.4 0.6 －0.4NAA 3.0 － 1.5 1.0 1.5IAA －－－－ 1.02,4,5,-T －－0.5 －－玉米素－－－0.5 －pH 5.8 5.8 5.7 5.6 5.7注：NT：Nagata & Takebe，1971；DPD：Durand 等，1973；D2a：李向辉等，1981；KMP8：kao & Michayluk，1975；V-KM：Binding & Nehl，1979。
MS、B5、 N6培养基配方
精品文档MS培养基大量元素成分分子量使用浓度(mg/L)硝酸钾KNO3101.211900硝酸铵NH4NO380.041650磷酸二氢钾KH2PO4136.09170硫酸镁MgSO4·7H2O246.47370氯化钙CaCl2·2H2O147.02440微量元素碘化钾KI166.010.83硼酸H3BO361.83 6.2硫酸锰MnSO4·4H2O223.0122.3硫酸锌ZnSO4·7 H2O287.548.6钼酸钠Na2MoO4·2 H2O241.950.25硫酸铜CuSO4·5 H2O249.680.25氯化钴CoCl2·6H2O237.930.025铁盐乙二胺四乙酸二钠Na2.EDTA372.2537.25硫酸亚铁FeSO24·7H2O278.0327.85有机成分肌醇100甘氨酸2盐酸硫胺素VB10.1盐酸吡哆醇VB60.5烟酸VB5 或VPP0.5蔗糖sucrose342.3130g /L 琼脂agar7 g /L精品文档B5培养基成分使用浓度(mg/L)大量元素硝酸钾KNO32500MgSO4·7H2O250CaCl2·2H2O150(NH4)2SO4134NaH2PO4.H2O150微量元素KI0.75H3BO4 3.0MnSO4·4H2O10ZnSO4·7H2O 2.0Na2MoO4·2H2O0.25CoCl2·6H2O0.025CuSO4·5H2O0.025铁盐Na-EDTA37.32FeSO4·7H2O27.8有机成分肌醇100烟酸 1.0盐酸吡哆醇 1.0盐酸硫铵10N6培养基组成成分数量(mg/l）大量元素硝酸钾(KN03) 2830硫酸铵(NH4SO4) 463氯化钙(CaCl2·2HzO) 166硫酸镁(MgSO4·7H20) 185磷酸二氢钾(KH2PO4) 400微量元素硫酸亚铁(FeSO４·7H20) 27.8硫酸锰(MnS04·4H20) 4.4硫酸锌(ZnSO4·7H20) 1.6硼酸(H2BO3) 0.8碘化钾(KI) 1.6有机成分甘氨酸 2烟酸0.5精品文档盐酸硫胺素(维B1) 1.0盐酸吡哆素(维B6) 0.5。
培养基配方及配置
培养基配方及配置根据其作用不同，培养基分为：诱导培养基增殖培养基生根培养基根据其营养水平不同，培养基可分为基本培养基和完全培养基。
基本培养基（就是通常称呼的培养基）主要有MS、White、N6、B5 、改良MS、Heller、Nitsh、SH、Miller等。
完全培养基就是基本培养基的基础上，根据试验的不同需要，附加一些物质，如生长调节物质和其他复杂有机物质等。
N6培养基特点：•1974年朱至清等为水稻等禾谷类作物花药培养而设计•成分简单•KNO3 和(NH4)2SO4含量高•广泛应用于小麦、水稻及其它植物的花药培养等White培养基特点：•1943年由Ｗhite为培养番茄根尖而设计的。
1963年又作了改良，称作Ｗhite改良培养基。
•特点：无机盐含量较低•适用：生根培养。
B5培养基特点：•含较低的铵•双子叶植物尤其木本植物组培可选择MS培养基特点：无机盐、离子浓度高，硝酸盐含量较高。
MS培养基是目前应用最多最普遍的培养基。
无机盐的浓度较高，能保证组织培生长所需的矿物质营养。
并且因为离子浓度高，在配制、贮存、消毒过程中，即使有些成分略有出入，也不致影响培养基中的离子平衡培养基配方明细表：培养基成分：一、无机盐：氮枝叶生长需要氮素，缺氮老叶先发黄；氮过量，枝叶过度茂盛。
磷缺磷，植株生长缓慢，老叶暗紫色。
钾促进花卉生长健壮，增强抗性，茎秆挺拔。
缺钾，叶尖、叶缘枯焦，叶片呈皱曲状，老叶发黄或火烧状。
钴缺钴，叶片失绿而卷曲，整个叶片向上弯曲凋枯。
二、有机物碳水化合物：选用种类：蔗糖（或葡萄糖、果糖）等•蔗糖浓度：2%～3%，胚培养为4%～15%•大生产时可用白糖糖在培养基的作用：1）为细胞提供合成新物质的碳骨架2）为细胞的呼吸代谢提供底物和能量3）维持渗透压维生素种类：VB1（盐酸硫胺素）、VB6（盐酸吡哆醇）、VB3（烟酸）、Vc（抗坏血酸浓度：0.1－1.0mg/L作用：VB1 促愈伤组织产生，提高活力VB6 促根生长Vc 防组织褐变VB3 与植物代谢和胚的发育有关系氨基酸：甘氨酸、精氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、丙氨酸等等。
细胞工程实验--培养基成分表
附表1 几种常见的培养基配方化学成分培养基（单位：MG /L）MS[1]B5[2]N6[2]H[3]SH[2]ER[1]Miller[3]MorelNH4NO3165072012001000 KNO3190025002830950250019001000 CaCl2·2H2O440150166166200440MgSO4.7H2O37025018518540037035 NH4H2PO4300KH2PO417040068340300 (NH4)2SO4150463NaH2PO4.H2O150Ca(NO3)2.4H2O347 Ca3(PO4)2KCl65 FeSO4.7H2O27.827.827.827.81527.8Na2-EDTA37.337.337.337.320.037.3Fe2(SO4)3MnSO4.4H2O22.310 4.42510.0 2.23 4.4 ZnNa2EDTA15.0ZnSO4.7H2O8.6 2.0 1.510.0 1.0 1.5 H3BO3 6.23 3.0 1.610.0 5.00.63 1.6KI0.830.750.8 1.00.8 Na2MoO4.2H2O0.250.250.250.10.025CuSO4.5H2O0.0250.0250.0250.20.025CoCl2.6H2O0.0250.0250.10.025 MoO3甘氨酸22222盐酸硫胺素0.110.0 1.00.5 5.00.50.1盐酸吡哆素0.5 1.00.50.50.50.50.1D-泛酸钙生物素0.05叶酸0.5烟酸0.5 1.00.5 5.0 5.00.50.5肌醇1001001001000蔗糖30000200005000020000300004000030000pH 5.7 5.0 5.8 5.5 5.8 5.8 6.0说明： [1]无机盐含量高，微量元素种类齐全，适用范围广；[2]硝酸钾含量高，适合于愈伤组织和细胞悬浮培养；[3] 中等无机盐含量；[4]低无机盐含量，一般作生根培养。
培养基配方
ZnSO4·7H2O 2mg/L
H3BO33mg/L
Na2MoO·2H2O 0.25 m g/L
CuSO4·5H2O 0.025 mg/L
CoCl2·6H20 0.025 mg/L
KI 10 mg/L
2.有机物
维生素B1 10mg/L
维生素B6 1 mg/L
甘氨酸2.0 mg/L
KNO3950 mg／L
NH4N03720mg／L
KH2PO468 mg/L
CaCl2·2H2O 166 mg/L
MgSO4·7H2O 185mg/L
FeSO4·7H2O 27.8 mg/L
Na2-EDTA 37.3 mg/L
MnSO4·4H2O 25mg/L
H3BO310 mg/L
ZnSO4·7H2O 10mg/L
1.无机盐
KNO3200 mg／L
Ca(N03)2·4H2O 800mg／L
MgSO4·7H2O 200mg/L
KH2PO4200 mg/L
ZnSO4·7H2O 0.2mg/L
NiCl2·6H2O 0.3 mg/L
MnCl2·H2O 1.8 mg/L
CuSO4·5H2O 0.08mg/L
H2MoO4·H2O 0.02 mg/L
2.有机物
酪蛋白1 mg/L
半胱氨酸10 mg/L
腺嘌呤5 mg/L
烟酸1 mg/L
维生素B6 1 mg/L
泛酸钙10 mg/L
肌醇0.1 mg/L
维生素H(生物素) 0.01 mg/L
蔗糖20 g／L
八.木本植物用培养基(WPM,Woody Plant medium)
1.无机盐
MSB5N6培养基配方
MSB5N6培养基配方
培养基配方是指用于细菌、真菌、细胞等微生物的培养和生长的营养物质组成及其比例。
MSB5N6培养基配方，是一种常用于细菌培养的基本培养基，以下是其配方和制备过程。
1.成分：
- 蛋白胨（Peptone）：5.0 g
- 淀粉（Starch）：1.0 g
- 大豆粉（Soybean Meal）：5.0 g
-氯化钠（NaCl）：1.0g
-磷酸二氢钾（KH2PO4）：0.6g
-磷酸氢二钠（Na2HPO4）：1.0g
- 葡萄糖（Glucose）：1.0 g
-碳酸钠（Na2CO3）：0.3g
- 卵黄脱水物（Yeast Extract）：2.0 g
- 纯化水（Distilled Water）：1000 mL
2.pH调整：
使用1MHCl或1MNaOH调整pH值至7.0±0.2
3.灭菌：
将培养基装入培养瓶中，密封并加入适当的滤纸。
在121摄氏度高压灭菌器中高压下进行灭菌，常规灭菌时间为15-20分钟。
4.制备过程：
-将蛋白胨、淀粉、大豆粉、氯化钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠和葡萄糖依次加入纯化水中，充分溶解；
-加入碳酸钠，混合均匀；
-用1MHCl或1MNaOH调整pH值至7.0±0.2；
-加入卵黄脱水物，充分溶解；
-装瓶并灭菌。
需要注意的是，配方中的成分均应为分析纯级别的物质，而培养基的制备过程应在无菌条件下进行，以避免外部的细菌或真菌污染。
MS培养基的配制
MS培养基的配制1、配制几种母液（1）配制MS大量元素母液一般将大量元素分别配制成100倍的母液，使用时再分别稀释100倍。
分别称取名称重量名称重量NH4NO3165g KH2PO417gKNO3190g CaCl2·2H2O44gMgSO4·7H2O37g各自配成1L的母液。
各自倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。
（2）配制MS微量元素母液一般将微量元素配制成100倍母液。
依次称取（注：溶好一个后，再加下一个）名称重量名称重量KI0.083g Na2MoO4·2H20.025gOH3BO3 0.62g CuSO4·5H2O0.0025gMnSO4·H2O 1.69g CoCl2·6H2O0.0025gZnSO4·7H2O0.86g配成1L母液，倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。
注：CuSO4·5H2O和CoCl2·6H2O由于称取量很小，如果天平精确度没有达到万分之一，可先配成调整液。
分别称取CuSO4·5H2O 0.05g，CoCl2·6H2O 0.05g各自配成100ml的调整液，然后取5ml就还有0.0025g的量。
（3）配制MS有机母液一般配制成100倍MS有机母液。
依次称取（注：溶好一个后，再加下一个）名称重量名称重量肌醇10g盐酸硫胺素（VB1）0.01g烟酸0.05g甘氨酸0.2g盐酸吡哆醇（VB6） 0.05g配成1L母液，倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。
（4）配制MS铁盐母液一般配制成100倍MS铁盐母液。
依次称取EDTA二钠 3.73g，FeSO4·7H2O 2.78g（注：溶好一个后，再加下一个）配成1L母液，倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。
所以MS母液有5种大量元素母液，加上MS微量元素母液、MS有机母液和MS铁盐母液，共8种母液。
（5）激素母液的配制各种生长素和细胞分裂素要单独配制，不能混合在一起，生长素类一般要先用少量95%的酒精或1当量的NaOH溶解，细胞分裂素一般要先用1当量的盐酸溶解，然后再加蒸馏水定容。
MS培养基配制方法-new
MS 培养基一、大量元素母液1：大量A母液2：大量B母液3：Fe盐注：配制顺序如下1。
称取3。
73 g Na2—EDTA•2H2O溶解于200 ml去离子水中,并置于70℃预热(A）；2. 称取2.78 g FeSO4•7H2O溶解于200 ml去离子水中（B）;3. 将B缓慢倒入A中混合，边倒边搅动,置于70 ℃水浴锅中螯合2 h；4. 冷却后定容至1 L。
二、微量元素母液4：微量三、有机物质母液5：有机（不含肌醇）℃注:配固体培养基可在调pH后加适量Agar或Phytagel；肌醇也可加入有机母液。
四、抗生素和激素母液试剂名称配制方法母液浓度Amp（氨苄青霉素) 双蒸水溶解，定容，过滤灭菌50 mg/ ml Km(卡那霉素）双蒸水溶解，定容，过滤灭菌50 mg/ ml Str（链霉素）双蒸水溶解,定容，过滤灭菌50 mg/ ml Cb（羧苄青霉素）双蒸水溶解，定容，过滤灭菌250 mg/ ml 6-BA (6-苄基嘌呤) 1M NaOH或盐酸溶解，双蒸水定容，高压灭菌 1 mg/ ml NAA（萘乙酸) 1M NaOH溶解，双蒸水定容，高压灭菌 1 mg/ ml IAA 95% 乙醇溶解,双蒸水定容，过滤灭菌 1 mg/ ml五、乙酰丁香酮(Acetone—syringone，AS）称取196。
2 mg AS用10 ml DMSO溶解，母液浓度100 mM，-20℃避光保存,工作浓度100 ～200 μM六、MS溶液的混合5种母液分别依次加入到800 ml蒸馏水中,混匀后加入肌醇、蔗糖和能高压灭菌的激素（6-BA和NAA）,定溶至1000 ml，用1M NaOH调pH至5.8。
最后加Phytagel （Sigma)4.4g或Agar 10g。
灭菌完后，在培养基凝固前加入AS或抗生素及不能高压灭菌的激素(IAA）.。
ms培养基配制方法
MS培养基的配制2005-12-22 23:49:26 阅读7485次植物组织培养中常用的一种培养基是MS培养基。
MS培养基的配制包括以下步骤。
培养基母液的配制和保存MS培养基含有近30种营养成分，为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量，可将培养基中的各种成分，按原量的20倍或200倍分别称量，配成浓缩液，这种浓缩液叫做培养基母液。
这样每次使用时，取其总量的1/20(50 mL)或1/200(5 mL)，加水稀释，制成培养液。
现将制备培养基母液所需的各类物质的量列出，供配制时使用。
大量元素(母液Ⅰ) mg／LNH4NO3 33 000KNO3 38 000CaCl2·2H2O 8 800MgSO4·7H2O 7 400KH2PO4 3 400微量元素(母液Ⅱ)KI 166H3BO3 1 240MnSO4·4H2O 4 460ZnSO4·7H2O 1 720Na2MoO4·2H2O 50CuSO4·5H2O 5CoCl2·6H2O 5铁盐(母液Ⅲ)FeSO4·7H2O 5 560Na2-EDTA·2H2O 7 460有机成分(母液Ⅳ)ⅣA肌醇20 000ⅣB烟酸100盐酸吡哆醇(维生素B6) 100盐酸硫胺素(维生素B1) 100甘氨酸400以上各种营养成分的用量，除了母液Ⅰ为20倍浓缩液外，其余的均为200倍浓缩液。
上述几种母液都要单独配成1 L的贮备液。
其中，母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是：每种母液中的几种成分称量完毕后，分别用少量的蒸馏水彻底溶解，然后再将它们混溶，最后定容到1 L。
母液Ⅲ的配制方法是：将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分别放到450 mL蒸馏水中，边加热边不断搅拌使它们溶解，然后将两种溶液混合，并将pH调至55，最后定容到1 L，保存在棕色玻璃瓶中。
MS培养基及常用试剂的配制
一、MS培养基母液的配制注意：1．大量元素按照使用时高10倍的数值称取，分别将各种化合物称量后，除CaCl2·2H2O单独配制外，其余化合物混合在500ml烧杯中加适量蒸馏水溶解，用玻璃棒搅拌促溶，倒入1000ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度，置小口瓶中保存，贴上标签注明化合物名称（或编号），浓缩倍数，配制日期和配制者姓名，CaCl2·2H2O配制同上置于另一小口瓶中。
2．微量元素母液的配制按要求浓缩100倍的数值称取，分别将各种化合物称量除铁盐（FeSO4·7H2O 和Na2-EDTA.2H2O）作为一组单独配制外，其余化合物可混合置于烧杯内加少量蒸馏水溶解后，定容在1000ml容量瓶中，置小口瓶中保存，贴上标签。
3．铁盐配制将FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O分别溶于450ml蒸馏水中，加热，不断搅拌，溶解后，两液混合，调PH至5.5加水定容至1000ml，置于小口瓶中，贴上标签。
4．有机物母液配制，按母液要求浓缩50倍，除蔗糖按3%单独临时称量外，其余分别称量后，溶解，定容在500ml容量瓶中，置于小口瓶中保存，贴上标签。
5．母液最好在2~4℃的冰箱中贮存，特别是有机类物质，贮存时间不宜过长，无机盐母液最好在一个月内用完，如发现有霉菌和沉淀产生，就不能再使用。
1．制备母液和营养培养基时，所用蒸馏水或无离子水必须符合标准要求，化学药品必须是高纯度的（分析纯）。
2．称量药物采用高灵敏度的天平，每种药品专用一药匙。
．生长调节剂母液配制：为了操作方便，节约时间，生长调节剂也可如同配制母液一样，先配成原液，这样配制培养基时只要稍加计算，按需要量取即可。
不同药品在配制时若不溶于水，可用少量不同的溶剂先溶解，萘乙酸（NAA），吲哚乙酸（IAA）,赤霉素（GA3），2，4-D等生长素和玉米素（ZT）可先用少量95%酒精溶解，然后加水，如溶解不完全再加热。
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硫酸锰MnSO4·4H2O
223.01
22.3
硫酸锌ZnSO4·7 H2O
287.54
8.6
钼酸钠Na2MoO4·2 H2O
241.95
0.25
硫酸铜CuSO4·5 H2O
249.68
0.25
氯化钴CoCl2·6H2O
237.93
0.025
铁盐
乙二胺四乙酸二钠Na2.EDTA
372.25
37.25
CaCl2·2H2O
150
(NH4)2SO4
134
NaH2PO4.H2O
150
微量元素
KI
0.75
H3BO4
3.0
MnSO4·4H2O
10
ZnSO4·7H2O
2.0
Na2MoO4·2H2O
0.25
CoCl2·6H2O
0.025
CuSO4·5H2O
0.025
铁盐
Na2-EDTA
37.3
FeSO4·7H2O
硫酸亚铁FeSO24·7H2O
278.03
27.85
有机成分
肌醇
100
甘氨酸
2
盐酸硫胺素VB1
0.1
盐酸吡哆醇VB6
0.5
烟酸VB5或VPP
0.5
蔗糖sucrose
342.31
30g /L
琼脂agar
7 g /L
B5培养基
成分
使用浓度(mg/L)
大量元素
硝酸钾KNO3
2500
MgSO4·7H2O
250
27.8
有机成分
肌醇
100
烟酸
1.0
盐酸吡哆醇
1.0
盐酸硫铵
10
N6培养基
组成成分数量(mg/l）
大量元素硝酸钾(KN03)2830
硫酸铵(NH4SO4)463
氯化钙(CaCl2·2HzO) 166
硫酸镁(MgSO4·7H20) 185
磷酸二氢钾(KH2PO4) 400
微量元素硫酸亚铁(FeSO４·7H20) 27.8
硫酸锰(MnS04·4H20) 4.4
硫酸锌(ZnSO4·7H20) 1.6
硼酸(H2BO3)0.8
碘化钾(KI)1.6
有机成分甘氨酸2
烟酸0.5
盐酸硫胺素(维B1) 1.0
盐酸吡哆素(维B6) 0.5
MS培养基
大量元素
成分
分子量
使用浓度(mg/L)
硝酸钾KNO3
101.21
1900
硝酸铵NH4NO3
80.04
1650
磷酸二氢钾KH2PO4
136.09
170硫酸镁MgSFra bibliotek4·7H2O246.47
370
氯化钙CaCl2·2H2O
147.02
440
微量元素
碘化钾KI
166.01
0.83
硼酸H3BO3
61.83