产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌与大肠埃希菌qnrB基因的检测
大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产生超光谱-内酰胺酶的检测方法及其临解析
大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产生超光谱β-内酰胺酶的检测方法及其临床应用【摘要】超光谱β-内酰胺酶（BSBLs）是由质粒介导的能赋予细菌对头孢菌素类（象头孢三嗪，头孢噻肟，头孢他啶等）和单酰胺类抗生素安曲南以及青霉素类耐药的一类酶。
自1983年以来德国首次发现产ESBLs肺炎克雷伯菌以来，对ESBLs菌的检测方法，国外已有较多报道。
发现产ESBLs菌的种类越来越多，已越来越引起临床的关注。
【关键词】肺炎克雷伯菌大肠埃希菌耐药性β-内酰胺酶研究大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产生超光谱β-内酰胺酶（ESBLs）的耐药性与临床应用。
如何快速准确为临床提供产ESBLs菌株的依据，指导临床合理选择敏感抗生素，提高疗效，监控各种耐药菌是当务之急。
检测临床分离的75株大肠埃希菌和33株肺炎克雷伯菌ESBLs产生情况。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 菌株2006年1月～2007年12月临床送检各类标本中分离的大肠埃希菌75株和肺炎克雷伯菌33株。
1.1.2 药敏感纸片头孢三嗪、头孢他啶、阿莫西林/棒酸（20 μg/10 μg）头孢噻肟、安曲南和亚胺培南，头孢他啶、头孢噻肟、头孢他啶/克拉维酸、头孢噻肟/克拉维酸均由浙江省军区后勤防疫检验所生产。
1.1.3 MH肉汤和MH琼脂江省军区后勤防疫检验所产品。
1.2 方法初步筛选试验按常规纸片扩散法在MHA上涂好受试菌，先在平板中心贴上阿莫西林/棒酸（20 μg/10 μg）纸片，然后在其上下左右贴30 μg/片头孢三嗪、头孢他啶、头孢噻肟和安曲南纸片，各纸片中心距复合剂纸片中心30 mm，35 ℃，孵育18～20小时。
结果解释，如周围4个药物纸片中有任何一个抑菌环在靠近复合剂纸片一侧的边缘出现扩大或加强，说明该菌株可能产ESBLs。
表型确正试验：按常规纸片扩散法在MHA上涂好受试菌，先在平板上贴上头孢他啶、头孢噻肟、然后再贴上头孢他啶/克拉维酸、头孢噻肟/克拉维酸，在头孢他啶、头孢噻肢这两个药中加克拉维酸后抑菌环直径比不加克拉维酸大5 mm，判定为产ESBLs。
医院产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的检测及耐药性
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产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌药敏分析
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５６ ２ ・
检 验 医 学 与临 床 ２ １ ０ １年 ３月 第 ８卷 第 ５期
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产 超 广 谱 ｌ内酰 胺 酶 肺 炎 克 雷伯 菌和 大 肠 埃 希 菌 药 敏 分 析 ３ 一
马丽 萍（ 中科技 大学 同济 医学院 附属 协 和 医院西 区检 验科 ， 华 湖北武 汉 ４ ０５ ） ３ ０ ６
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产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的耐药性监测
超 广 谱 内 酰 胺 酶 （ Ｓ Ｌ ） 要 存 在 于 肺 炎 克 雷 伯 菌 ＥＢ ｓ主 （ Ｎ） ＫＰ 和大 肠 埃 希 菌 （ Ｃ 中 ，产 Ｅ Ｂ ｓ 菌 的 感 染 延 长 了 Ｅ Ｏ） ＳＬ 细
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２ １ 产 Ｅ Ｂ ｓ菌 检 出 率 ２ ０ ～ ２０ ． ＳＬ ０１ ０ ６年 检 出 Ｋ Ｎ １３ ０ Ｐ ８
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大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药性分析
大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药性分析摘要】目的：检测肺炎克雷伯菌以及大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶及其耐药性。
方法：在我院门诊以及住院患者胸腔积液、胆汁、脓液、分泌物、中段尿以及胆汁、痰、血液等标本中分离出的肺炎克雷伯菌244株和大肠埃希菌311株，全部菌株均为非重复菌株。
依照《全国临床检验操作规程》鉴定细菌及药敏试验，所用质控菌株为肺炎克雷伯菌以及大肠埃希菌。
结果：肺炎克雷伯菌共计分离出244株，检出155株肺炎克雷伯菌ESBLs阳性菌，检出率为63.52%，大肠埃希菌共计分离出311株，检出162株大肠埃希菌ESBLs阳性菌，检出率为52.09%。
结论：肺炎克雷伯菌以及大肠埃希菌产ESBLs具有较高发生率，且对多种抗生素存在多重耐药以及交叉耐药性，对产ESBLs菌株及时进行报告并确保临床用药的合理性能够使细菌耐药性产生得到延缓，可使耐药菌株播散得到有效控制。
【关键词】大肠埃希菌；肺炎克雷伯菌；超广谱β-内酰胺酶；耐药性【中图分类号】R446.5 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2018）26-0076-02超广谱β-内酰胺酶主要通过质粒介导，可使青霉素类以及单环β-内酰胺类以及头孢菌素类抗菌药物产生耐药性，能够在菌株间传播以及转移，部分超广谱β-内酰胺酶既能够对β-内酰胺类药物产生耐药性同时也会对喹诺酮类药物以及氨基糖苷类药物产生耐药性，会导致治疗难度加大[1]。
此次研究旨在分析2016年9月至2018年3月我院自临床标本中分离出的肺炎克雷伯菌以及大肠埃希菌耐药性，报道如下。
1.资料与方法1.1 基线资料在我院门诊以及住院患者胸腔积液、胆汁、脓液、分泌物、中段尿以及胆汁、痰、血液等标本中分离出的肺炎克雷伯菌244株和大肠埃希菌311株，全部菌株均为非重复菌株。
1.2 方法依照《全国临床检验操作规程》鉴定细菌及药敏试验，所用质控菌株为肺炎克雷伯菌以及大肠埃希菌。
产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌肺炎临床及基因型分析
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２１ ０ ０年 ３月 第 ９卷 第 ２期
医院产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的检测及耐药性
医院产超广谱β－内酰胺酶肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的检测及耐药性目的：了解我院产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum β-lactamase,ESBLs)肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的检出率及其耐药特征,为临床合理使用抗生素提供依据。
方法：对我院2003年1月-2005年12月住院病人分离的肺炎克雷伯菌122株、大肠埃希菌313株，采用NCCLs推荐的纸片扩散表型确证试验进行ESBLs 检测,用K-B法做药敏试验。
结果：435株肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中检出产ESBLs菌139株，总检出率31.95%，其中肺炎克雷伯菌检出率33.61%、大肠埃希菌检出率31.31%；ESBLs检出率有逐年上升趋势；呼吸道标本ESBLs检出率最高，占59.71%；产ESBLs菌对抗生素的耐药率显著高于不产ESBLs菌（P＜0.005）,并对氨基糖苷类、喹诺酮类等抗生素呈多重耐药，对含β-内酰胺酶抑制剂的复合抗生素耐药率有增高趋势，均对亚胺培南敏感。
结论：肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的ESBLs检出率逐年增加，应及时对ESBLs菌进行检测，以指导临床用药。
亚胺培南可作为ESBLs菌治疗的首选药。
标签：超广谱β-内酰胺酶；肺炎克雷伯菌；大肠埃希菌；耐药性目前超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）是革兰阴性菌耐药的主要问题，此酶具有水解广谱头孢菌素能力，并通过质粒传播，给临床抗生素应用带来一定的困难。
ESBLs最常见于肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌，这两种菌是医院常见的条件致病菌。
为了解产ESBLs菌的耐药特征及临床合理使用抗生素，笔者对2003年1月-2005年12月我院分离的122株肺炎克雷伯菌和313株大肠埃希菌产ESBLs的检测及ESBLs菌对抗菌药物的耐药情况进行分析，现报道如下：1 资料与方法1.1 菌株来源我院2003年1月-2005年12月临床送检标本（每个患者只选第1株）中，分离的313株大肠埃希菌，ESBLs阳性98株；122株肺炎克雷伯菌，ESBLs阳性41株。
产超广谱β-内酰胺酶检测标准操作程序
SOP_15-29 产超广谱β-内酰胺酶检测标准操作程序【目的】明确超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检测的意义，指导检测人员正确进行ESBLs的检测。
【适用范围】适用于大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、奇异变形杆菌。
【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动,可由任一使用本SOP的工作人员提出,并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。
【试剂】MH平板、药敏纸片。
【步骤】1.筛选试验：头孢泊肟（CPD）≤17mm 氨曲南（AZT）≤27mm 头孢噻肟（CFT）≤27mm头孢他啶（CAZ）≤22mm 头孢曲松（CAX）≤25mm提示产ESBLs的可能，需做确证试验。
2.确证试验：2.1MH培养基2.2药敏纸片：头孢他啶30ug、头孢他啶/克拉维酸30/10ug头孢噻肟30ug、头孢噻肟/克拉维酸30/10ug2.3标准纸片扩散法（KB法），35度需氧培养16-18小时；2.4结果：上述两种抗菌素中任何一个含有克拉维酸的复合抗菌素比单独抗菌素的抑菌环对增大相≥5mm，可确认大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、奇异变形杆菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)。
2.5质控：大肠埃希菌ATCC25922，单独和含有克拉维酸复合抗菌素抑菌环后者相对增大≤2mm 肺炎克雷伯菌ATCC700603头孢他啶和头孢他啶/克拉维酸，抑菌环后者相对增大≥5mm头孢噻肟和头孢噻肟/克拉维酸，抑菌环后者相对增大≥3mm【意义】产超广谱β-内酰胺酶的细菌对青霉素类、头孢菌类、氨曲南耐药。
【相关文件】2009年以后CLSI《抗生素敏感性试验执行标准》。
大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶的检测和耐药性监测分析
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菌药物 ， 防止 Ｅ Ｂ ｓ 株 的增 长 、 散 与 流 行 。 ＳＬ菌 扩
【 键 词】 埃 希 氏 菌属 ； 克 雷 伯 菌 ， 炎 ； ８内酰 胺 酶 类 ； 抗 药 性 ， 菌 关 肺 一 细
中图 分 类 号 ： ７ ； ９ ９ ４ Ｒ３８ Ｒ ６ ． 文 献标 识 码 ： Ａ 文章 编 号 ：６ ３４ ３ （０ ８０ —８—３ １ ７— １０ ２ ０ ） ６４ ４０
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产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和克雷伯菌的检测和耐药性监测
产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和克雷伯菌的检测和耐药性监测郑力【摘要】目的：监测大肠埃希菌、克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）情况及耐药状况。
方法对我院2010年1月至2011年6月送检的尿、痰、分泌物标本进行常规培养，采用纸片协同法确证试验检测产ESBLs菌株，然后以纸片扩散法测定分离菌株对抗菌药物的敏感性。
结果大肠埃希菌236株，确证试验检出产ESBLs菌66株，检出率27.9%，肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌58株，确证试验检出产ESBLs菌22株，检出率37.9%。
产ESBLs的大肠埃希菌和克雷伯菌对头孢噻吩、头孢唑啉、头孢呋辛、头孢曲松、头孢噻肟、头孢吡肟、氨曲南、庆大霉素、环丙沙星等明显耐药，耐药率达70%以上。
结论大肠埃希菌和克雷伯菌ESBLs的检出率高并呈多重耐药性，临床应加强抗菌药物的合理使用及管理。
%Objective Monitoring Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae producing extended-spectrumβ-lactamases (ESBLs) cases and drug resistance. Methods Our hospital from January 2010 to June 2011 inspection of urine, sputum, secretion specimens were routinely cultured using disc synergy confirmatory test to detect ESBLs producing strains, and then isolates the disk diffusion assay for antibacterial drugs sensitivity. Result E.coli are 236 strains,117 of them may be produce ESBLs bacteria, 66 of them are definite , out-examining rate is 27.9%;Klebsiella pneumonia are 46 strains, acid-producing Klebsiella are 12 strains, 38 of them may be produce ESBLs, 22 of them are definite , out-examining ratte is 37.9%. ConcLusion Escherichia coli and Klebsiella ESBLs detection rate andshowed multi-drug resistance, clinical management should be strengthened and the rational use of antimicrobial drugs.【期刊名称】《中国医药指南》【年(卷),期】2014(000)010【总页数】2页(P10-11)【关键词】产超广谱β-内酰胺酶;三代头孢菌素;耐药性【作者】郑力【作者单位】沈阳市第一人民医院，辽宁沈阳110041【正文语种】中文【中图分类】R978.1近年来，随着超广谱β-内酰胺酶类抗生素特别是第3、4代头孢菌素的广泛应用，导致革兰阴性菌对其耐药性增加，产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌株的检出率逐年上升[1-2]，其中最主要是大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌。
肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶及耐药性监测
肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶及耐药性监测谭萍;张松;朱平安;赖秀花【期刊名称】《河北医学》【年(卷),期】2002(008)012【摘要】目的:对本院2001年7月至2002年5月收集到的200株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中ESBLS阳性菌进行研究,了解超广谱β-内酰胺酶的三种检测技术及其产ESBLS耐药现状.方法:对200株肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌用VITEKAMS32测定ESBLS,同时用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐纸片筛选法和确认法进行对照监测.结果:仪器法、确认法、纸片筛选法检测ESBLS菌株阳性率分别为18.97%、18.58%、16.41%,产ESBLS菌对大多数抗生素的耐药率显著高于非产ESBLS菌,且多重耐药显著,但对泰能均敏感.结论:ESBLS菌阳性率高,耐药性强,耐药谱广, 临床检验室应重视对其选择准确快速的检测方法.【总页数】3页(P1071-1073)【作者】谭萍;张松;朱平安;赖秀花【作者单位】广东省深圳市盐田区人民医院,广东,深圳,518081;广东省深圳市盐田区人民医院,广东,深圳,518081;广东省深圳市盐田区人民医院,广东,深圳,518081;广东省深圳市盐田区人民医院,广东,深圳,518081【正文语种】中文【中图分类】R378.99+6【相关文献】1.产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性监测分析 [J], 马均宝;欧志彬;吴智刚;张文斌;崔东岚2.大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶及耐药性监测 [J], 刘惠萱;张浩军;朱玲;张俭3.产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的耐药性监测 [J], 罗湘蓉;李红凌;罗立;韦宝华4.产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性监测 [J], 毛敏芝5.肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶情况及耐药性监测 [J], 李洁平;宋海蓉;魏利霞因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测和耐药性分析
院感染常见致病菌。产 Ｅ Ｂ ｓ Ｓ Ｌ 菌往往携带多种耐 药基 因 ， 对多种抗 菌药物交叉 耐 药 。随着第 ３４代 、 头孢菌素广泛使用， 耐药菌株不断产生 ， 给临床治
疗产 Ｅ Ｂ ｓ Ｓ Ｌ 菌引起 感染 造 成很 大 困难 。为 了解 岱
直径与相应不加克拉维酸抑菌环相比， 增大 ５ｍ ｍ
产 ＥＢｓ Ｓ Ｌ 菌株是 目前县级医院临床常见致病菌 ， 成为 出产 Ｅ Ｂ ｓ Ｓ Ｌ 肺炎克雷伯菌 ７ ５株 ， 出率为 ３ ．％ 。结论 检 １９
主要 耐药菌株 ， 而且耐药谱广 。应 加强临床合理使用抗菌药物的管理 ， 防耐 药菌株引起 医院感染 和流行 。 严
关 键词 ： 大肠埃希菌 ； 肺炎克雷伯菌 ； 超广谱 Ｂ 内酰胺 酶 ； 产 一 耐药性
用抗菌 药物 。方法 分析 。结果
测， 用纸片扩散法 （ — ） Ｋ Ｂ 及美 国临床实验室标准化协会 （ Ｌ Ｉ 推荐 的双纸 片协 同试 验确认 ， Ｃ Ｓ） 并对 药敏结果 进行 ２ ８株大肠埃希菌 中检 出产 Ｅ Ｂ ｓ １ Ｓ Ｌ 大肠埃 希菌 ９ ７株 ， 出率 为 ４ ． ％ ；３ 检 ４ ５ ２ ５株肺炎 克雷伯菌 中检
１００ ， 次是头孢 哌 酮一 巴坦 、 喃妥 因 、 ０ ．％ 其 舒 呋 阿米
１确认 试验 ．
根 据美 国临床 实验 室标 准化 协
会 （ Ｌ Ｉ推荐的双纸片协 同试验或用头孢他啶、 Ｃ Ｓ）
卡星 ， 其敏感率为 ６ ．％ ～ ２８ ６７ ９ ．％不等， 见表 ２ 。
作者简介 ： 邱令法 ， ，９ ４年生 ， 男 １６ 主管技师 ， 主要从事 临床微生物检验工作 。
大肠 埃 希 菌 Ａ Ｃ ５ ２ Ｔ Ｃ ２ ９ ２和 肺 炎 克 雷 伯 菌 Ａ Ｃ ＴＣ
产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的临床特点及感染的危险因素分析
大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌是临床分离的常见 革兰阴性杆菌,是 产 生 超 广 谱 β-内 酰 胺 酶(ESBLs)的 主要代表菌。产 ESBLs革兰阴性杆菌的感染自20世 纪90年代初 以 来,已 成 为 住 院 患 者 感 染 的 主 要 原 因 之一[1]。ESBLs是 由 质 粒 所 介 导 的,能 水 解 青 霉 素 类、单环类等 抗 菌 药 物 的 β-内 酰 胺 酶,同 时 质 粒 携 带 的对其他药物的耐药基因 可 以 通 过 接 合、转 化 和 传 导 等形式使耐药基因在细菌 间 扩 散,常 导 致 细 菌 的 多 重 耐药,增加临床治疗 难 度 与 患 者 的 病 死 率 。 [2] 本 研 究
检验医学与临床2021年7月第18卷第13期 Lab MedClin,July2021,Vol.18,No.13
· 1857 ·
·论 著· DOI:10.3969/j.issn.1672-9455.2021.13.009
产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的临床特点及 感染的危险因素分析*ห้องสมุดไป่ตู้
王 洋,张琼元,李代昆,吴茳铃,薛建江△ 重庆医科大学附属大学城医院检验科,重庆 401331
患者完整病历资料,包括:一 般 资 料(年 龄、性 别、基 础 疾病),住院情况(住院时间、是 否 入 住ICU、是 否 出 现 休克或低蛋白血症等),侵 袭 性 操 作(手 术、机 械 通 气、 深静脉置管、胸 腹 腔 引 流 管、留 置 导 尿 管 等),药 物 治 疗(糖皮质激素、抗菌药物 的 使 用 情 况)等。 侵 袭 性 操 作收集于菌株检出前3个 月 临 床 资 料,糖 皮 质 激 素 及 抗菌药物 等 用 药 信 息 收 集 于 菌 株 前 1 个 月 临 床 资 料 [3],菌 株 检 出 后 的 临 床 资 料 不 纳 入 统 计 范 围 。 1.5 统计学处理 采用 Epidata3.02软件录入数据, 采用 SPSS20.0软件 分 析,计 数 资 料 以 例 数 或 百 分 比 表示,采用χ2 检验进行单因 素 分 析,对 差 异 有 统 计 学 意义的变量进行多 因 素 Logistic回 归 分 析,计 算 比 值 比(OR)及 95%CI,以 P <0.05 表 示 差 异 有 统 计 学 意义。
产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性监测
考 ， 报 告 如下 。 现
１ 材 料 与 方 法
表 １ Ｅ Ｂ ｓ阳性菌株在各类标本中检出率（ ） ＳＬ 株
ＡＴ Ｃ ０ ６ ３。 Ｃ ７００
表 ２ 大肠埃希菌和肺 炎克雷伯菌 的 Ｅ Ｂ ｓ Ｓ Ｌ 在主要病区的 检出率 （ ） 株
１２ 药敏纸片和培养基 ： ． 氨苄 西林 、 阿米卡星 、 哌拉 西林／ 他 唑巴坦 、 头孢吡肟 、 头孢他 啶、 氨曲南 、 头孢 曲松 、 氯霉 素、 环丙 沙星 、 大霉素 、 庆 亚胺培南 、 头孢 噻肟、 复方新诺 明 、 头孢 哌酮／ 舒 巴坦 ， 敏纸 片均为英 国 Ｏ ｏ 药 ｘｉ 司产 品， ｄ公 药敏培养 基为英
国Ｏｏ ｘｉ ｄ公司生产的 Ｍ—Ｈ琼脂培养基 。
标本
丽
１３ 方法 ： ． 对送检标本按 照 《 国临床检 验操 作规 程》 全 进行 细菌培养 和分离 ， ］ 鉴定仪器为法 国梅里埃 公司的 ＶＴ Ｅ ＩｒＫ一 ３ 自动细菌分析仪 。确证试验为美 国临床实验室标准化委 ２全 员会 （ Ｃ Ｌ ） Ｎ Ｃ Ｓ 推荐的纸片扩散确认法 ， ］药敏试验采用 Ｋ— Ｂ
别是近年来 ， 随着广 谱抗生 素尤其是第 三类 头孢菌 素在临 床
２ 结 果
２１ Ｅ Ｂ ｓ ． Ｓ Ｌ 菌株 阳性 率 ：９ ４ ８株大 肠埃 希菌 分离 出产 Ｅ Ｂ ｓ Ｓ Ｌ
菌株 １６株 ， 出率为 ３ ． ％ ；１ 株 肺炎 克雷伯菌分离 出产 ９ 检 ９４ ３ １
超广谱β内酰胺酶测定标准操作规程
超广谱β内酰胺酶测定标准操作规程1．目的规范肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、大肠埃希菌和奇异变形杆菌超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）筛选和确证试验。
2．适用范围本操作规程适用于肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、大肠埃希菌和奇异变形杆菌。
3．选药原则在本规程所列受试抗菌药物主要根据现行版本的CLSI M02和M100选择ESBLs筛选和确证试验所需的药敏纸片。
4．质控纸片药敏试验应使用大肠埃希菌ATCC 25922和肺炎克雷伯菌ATCC 700603进行质量控制，质控菌株可接受的抑菌圈范围参见现行版本的CLSI M100-A19。
肺炎克雷伯菌ATCC 700603可接受的抑菌圈范围为：头孢泊肟（10µg）抑菌环9~16mm头孢他啶（30µg）抑菌环10~18mm氨曲南（30µg）抑菌环9~17mm头孢噻肟（30µg）抑菌环17~25mm头孢曲松（30µg）抑菌环16~24mm5．材料和仪器M-H培养基、无菌生理盐水、药敏纸片、无菌棉签、35℃孵育箱、测量尺。
6．操作步骤参见《药物敏感性试验标准操作规程》。
7．判断标准见表5-53.表5-53 纸片法检测克雷伯菌、大肠埃希菌和奇异变形杆菌超广谱β-内酰胺酶方法初步筛选试验表型确证试验培养基Mueller-Hinton琼脂Mueller-Hinton琼脂抗微生物药物纸片浓度肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌和大肠埃希菌：头孢泊肟10μg或头孢他啶30μg或氨曲南30μg或头孢噻肟30μg或头孢曲松30μg奇异变形杆菌：头孢泊肟10μg或头孢他啶30μg或头孢噻30μg使用一种以上的药物进行筛选将会提高检测的敏感性头孢他啶30μg，头孢他啶/克拉维酸30/10μg和头孢噻肟30μg，头孢噻肟/克拉维酸30/10μg确认试验需要同时使用头孢噻肟和头孢他啶，单独和联合克拉维酸的复合制剂接种按标准纸片扩散法的规定进行按标准纸片扩散法的规定进行孵育条件35℃空气35℃空气孵育时间16~18h 16~18h判读结果肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌和大肠埃希菌：2个药物中有任何一个，在加克拉维酸后，抑菌环头孢泊肟抑菌圈直径≤17mm头孢他啶抑菌圈直径≤22mm氨曲南抑菌圈直径≤27mm头孢噻肟抑菌圈直径≤27mm头孢曲松抑菌圈直径≤25mm奇异变形杆菌：头孢泊肟抑菌圈直径≤22mm头孢他啶抑菌圈直径≤22mm头孢噻肟抑菌圈直径≤27mm上述抑菌环直径提示菌株可能产生ESBLs 直径与不加克拉维酸的抑菌环相比，增大值≥5mm时，判定为产ESBLs （例如，头孢他啶的抑菌环=16mm；头孢他啶/克拉维酸的抑菌环=21mm）质控意见当执行ESBL筛选试验时，肺炎克雷伯菌ATCC 700603被用于质量评估（如训练，能力或试验评价），肺炎克雷伯菌ATCC700603或大肠埃希菌ATCC 25922用于常规QC（如每周或每日）大肠埃希菌ATCC 25922（应在敏感范围）肺炎克雷伯菌ATCC 700603头孢泊肟抑菌环9~16mm头孢他啶抑菌环10~18mm氨曲南抑菌环9~17mm头孢噻肟抑菌环17~25mm头孢曲松抑菌环16~24mm 当执行ESBL确认试验时，肺炎克雷伯菌ATCC 700603和大肠埃希菌ATCC 25922用于常规QC（每周或每日）大肠埃希菌ATCC 25922：所测试药物联合克拉维酸后的抑菌环直径与单药抑菌环相比，增大≤2mm肺炎克雷伯菌ATCC 700603：头孢他啶/克拉维酸抑菌环直径增大≥5mm头孢噻肟/克拉维酸抑菌环直径增大≥3mm 8．注意事项只有确定分离到的奇异变形杆菌与临床感染性疾病有关，才需要进行ESBLs 的筛选和确证试验。
产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测及耐药性分析
１ 材 料 与 方 法
１ １ 材 料 来 源 ．
头孢 曲松 、 噻吩 （ Ｆ 、 头孢 Ｃ ）头孢 他 啶、 氨苄西 林 （ ｖ）、 Ⅱ） 美罗培南（砸Ｍ） ＾ 等抗生素标准 品和 Ｍ－ 肉汤， Ｈ琼 Ｈ Ｍ－
脂培养基均购 自北京天坛药物生物技术公司．
１ ２ 方 法 ．
１ １ １ 菌株 ．．
（． １ 宁夏 大 学 西 部 特 色生 物 资 源 保 护 与 利 用教 育部 重 点 实 验 室 ， 宁夏 银 川 ７ ０ ２ ； ２ 北 京 大 学 医 学部 ， 京 １０ ８ ） ５０ １ ． 北 ０ ０ ３
摘 要 ： 美 国 国 家临床 实验 室标 准化 委 员会 （ Ｃ Ｓ ２ ０ 按 ＮＣ Ｌ ）０ ５年制 定的 标 准 方 法 ， 筛选产 超 广 普 内酰胺 酶 （ ｘｅｄｄ Ｅ ｔｎｅ－
２ ０ 年 ５月至 ９月从 宁 夏 地 区 ２家 ０６
三级 甲等 医院 中共 收集分 离 鉴定 肠 杆 菌 科 细菌 １ ４ ０
株 ， 中 大肠 埃希 菌 ６ 其 ３株 ， 肺炎 克雷 伯 菌 ４ １株 ， 以
上菌株 均经 Ｖ ｔｋ３ ｉ 一２型全 自动 微 生 物鉴 定 仪 （ 国 ｅ 法
胺 类 抗 生 素 ， 别 是 第 ３ 头孢 菌 素 的 使 用 ． 目前 耐 药 性 监 测 来 看 ， 罗 培 南 可 作 为 治 疗 产 Ｅ Ｂ ｓ茵严 重 感 染 的 特 代 从 美 ＳＬ
有效药物．
关 键 词 ： 广谱 内酰胺 酶 ； 超 大肠 埃 希 茵 ； 炎 克 雷 伯 茵 ； 药 性 肺 耐 分 类 号 ： 中图 ） ３ （ Ｒ ７ 文献标志码 ： Ａ
ｐＬ ｃａ ｓｓ Ｅ Ｂ ｓ 以 来 ， 着 广 谱 抗 生 素 尤 其 － ａ ｔｍａｅ ， Ｓ Ｌ ） 随 是 内酰胺 类药 物 的大量 使用 ， Ｅ Ｂ ｓ的肠 杆 菌 产 ＳＬ
产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的检测及耐药性分析
产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的检测及耐
药性分析
李智山;邓三季;周乐翔
【期刊名称】《中国感染控制杂志》
【年(卷),期】2005(4)2
【摘要】近年来，由于β-内酰胺类抗生素的广泛应用，耐药菌株迅速增加，耐药菌株产生了质粒介导的超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)，很容易引起医院感染的暴发流行，所涉菌株常表现多重耐药性的特征。
多见于大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌。
为了解本地区产ESBLs菌耐药特点，以控制其传播和流行，我们对224株肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌做了产ESBLs检测，并分析其对17种抗菌药物的耐药性，现将结果报告如下。
【总页数】2页(P176,178)
【作者】李智山;邓三季;周乐翔
【作者单位】襄樊市中心医院,湖北,襄樊,441021;襄樊市中心医院,湖北,襄
樊,441021;襄樊市中心医院,湖北,襄樊,441021
【正文语种】中文
【中图分类】R969.3
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肺炎克雷伯菌超广谱β－内酰胺酶、头孢菌素酶和qnr基因检测及耐药分析张欣欣;王勇;杨庆斌【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2015(000)022【摘要】Objective To investigate the antibiotic resistance and detection of ESBLs,Ampcβ-lactamases and qnr in Klebsiella pneu-monia isolated from the sputum,and to provide reference for clinical rational use of antibiotics. Methods A total of 114 strains of Klebsiella pneumonia were selected,Agar dilution test was used in susceptibility testing. The Genotes of ESBLs,AmpC and qnr was de-tected and analyzed by three -dimensional test and PCR. Results In the 114 strains of Klebsielinsla pneumonia,58 strains(50. 88%) produced ESBLs and 14(12. 28% ) produced AmpC β-lactamases,10(8. 77% )produced both ESBLs and AmpC β-lactamases,2 strains carried qnr;The rates of resistance to most antibiotics in drug resistant enzyme strain were higher than negative counter-parts. Conclusion The Klebsiella Pneurnonia Producing drug-resistant gene isolated from the sputum are common,most of them are multiple drug resistant. Almost all strains were susceptible to Carbapenem.%目的：检测痰标本中肺炎克雷伯菌超广谱β－内酰胺酶（ESBLs）、头孢菌素酶（AmpC酶）和qnr基因的存在情况及耐药性，为临床合理使用抗菌药物提供参考。
大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药特性
大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药特性陈茶;黄彬【期刊名称】《中华医院感染学杂志》【年(卷),期】2002(12)1【摘要】目的了解中医院主要肠杆菌科细菌中超广谱β-内酰胺酶 (ESBL s)细菌的发生率和药敏情况 ,为防止产ESBL s细菌的传播和治疗提供依据。
方法产ESBL s细菌用 VITEK- 32全自动细菌分析系统检测 ,抗生素敏感测定采用 K- B琼脂扩散法。
结果 174株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中共检出 4 8株产 ESBL s细菌 ,其中大肠埃希菌 2 7株 ,肺炎克雷伯菌 2 1株 ,总检出率为 2 7.6 % ;检出的产ESBL s细菌对所有的青霉素类抗生素产生耐药 ,对三代头孢菌素、复方新诺明、喹诺酮类等其他抗生素有极高的耐药性 ,对头孢他啶、阿米卡星 (丁胺卡那 )耐药性较低 ,对亚胺培南 (亚胺硫霉素 )全部敏感。
结论在中医院产 ESBL s细菌的发生率也较高 ,产 ESBL s细菌有较高的交叉耐药性和多重耐药性 ,易引起区域性暴发流行。
【总页数】2页(P73-74)【关键词】β-内酰胺酶类;抗药性;肺炎克雷伯菌;大肠埃希菌【作者】陈茶;黄彬【作者单位】广东省中医院;中山医科大学附属第一医院【正文语种】中文【中图分类】R378.21;R378.996【相关文献】1.产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和催产克雷伯菌的耐药性分析[J], 王明达2.疑是超广谱-β内酰胺酶大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌病原学分布及耐药特性 [J], 蓝海丽;孙伯良3.产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的检测及耐药性分析 [J], 张琪; 毛莉; 冷赟4.产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测和耐药性分析 [J], 赵晨5.呼吸道感染患者产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌检测及耐药性分析 [J], 唐雯娟; 谢兰; 罗林凤因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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１ ． ｑｒ ． ３ ｎＢ基 因 的检 测 引 物 Ｆ １ ５． Ｔ Ａ Ｇ Ｃ ４ Ｑ ： Ａ Ｇ Ｃ Ｃ Ａ Ｔ＇ Ｃ Ｇ Ａ Ａ Ｉ Ｔ Ｔ Ｔ Ａ一３ Ｑ ： Ｇ Ｔ Ｇ Ａ Ｔ Ｔ Ｔ Ａ Ａ Ｆ ２ ５ 一 Ａ Ｃ Ｃ Ａ Ｇ Ｇ Ｇ ＡＧ
１１ 菌株 ．
４ ２株 产 Ｅ Ｂ ｓ 炎 克 雷 伯 菌 和 ４ ＳＬ肺 ４株 产
１ Ｔ 产物长度 ５２ｂ 。反应条件 ：４ ４ ，３ ＿ｒ ， Ｉ ．３ ６ ｐ ９ ℃ ５ｓ５ ℃ ４ ，２Ｃ１ ｎ ３ ５Ｓ７ ｏ ， ２个循 环 ［。产物 经 ２ ｍｉ ％琼脂 糖 凝胶 电泳 ， Ｂ染色 ， Ｅ 紫外透射反射分析仪下观察结果 ， 出 现 与 阳性 对 照分 子 相 当 的 目的条 带 判 为 阳性 。 １４４ 测 序 随机 取 ３份 Ｐ Ｒ产 物 回收 纯 化 ．委 托 ．． Ｃ 上海 生 工 生物 工 程技 术 服 务 有 限公 司测 序 。
环 丙沙星均耐 药。
关 键 词 克 雷伯 菌 ． 炎 肺
抗 药 性 ．细 菌 大肠 杆 菌
ｑｒ ｎＢ基 因 Ｅ Ｂ ｓ 喹 诺 酮 ＳＬ
ｑｒ 因是 一 类 质 粒 介 导 的 喹诺 酮 类 耐 药 基 因 。 ｎ基 其中的 ｑｒ ｎＢ是近来发现 的 ，它能保 护 Ｄ Ａ促旋酶 ， Ｎ 使 之不 受 喹诺 酮类 药 物 的抑 制 。目前 国 内 尚无其 在 临 床 菌株 中流 行 情况 的报 道 ， 本 文 拟 对 福 州地 区三 家 故 “ 甲”医院 ８ 株临床分 离的产超广谱 Ｂ 内酰胺酶 三 ６ 一 （Ｓ Ｌ ）肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌进行 ｑｒ 因 ＥＢｓ ｎＢ基 筛查 和 药 物敏 感 试 验 ，了解 ｑｒ ｎＢ基 因存 在 情 况 和 与 左氟沙星和环丙沙星耐药的关系。
２ 结 果
Ｅ Ｂ ｓ 肠 埃 希 菌 ． ２０ ＳＬ大 于 ０ ５年 ４月 至 ２ ０ ０６年 ４月 分 离 自福建 医科大学 附属第一医院、 福建医科大学附属 协 和医 院和 南 京军 区福 州总 医 院 。 １２ 产 Ｅ Ｂ ｓ 株 检 测 产 Ｅ Ｂ ｓ 株检 测 采 用 头 ． ＳＬ 菌 ＳＬ 菌 孢 他 啶 和头 孢他 啶一 克拉 维 酸 、 孢 噻肟 和头 孢 噻 肟一 头 克拉 维 酸 纸 片 做 确证 试 验 。 Ｋ Ｂ法 、 Ｓ Ｌ ． Ｅ Ｂ ｓ确证 试 验 均 按 美 国 国家 临 床 实 验 室 标 准 化 委 员 会 （ Ｃ Ｌ ） Ｎ Ｃ Ｓ ２０ ０４年 ［的标 准 进 行 结 果 判 断 。 所 用 药 敏 纸 片 均 为 １ ］ Ｏ Ｉ 公 司 产 品 。 质 控 菌 株 ：大 肠 埃 希 菌 （ Ｔ Ｃ ＸＯＤ Ａ Ｃ
品： 紫外透射反射分析仪为上海康禾光 电仪器有限公 司产品 ： 引物 由上海生工生物工程技术服务有限公 司 合 成 ；ａ Ｎ 聚 合 酶 ，Ｎ Ｐ ｉ ｕｅＴ ｑ Ｂ ｆ ｒ ＴｑＤ Ａ ｄ Ｔ Ｍｘ ｒ，ａ ｕ ｅ， ｔ ｆ Ｉ ａ ｉｇＢ ｆ ｒ Ｄ Ａ Ｍａｋｒ 购 自美 国 Ｐｏ ｅ ａ公 ￣ ｄｎ ｕｆ 和 Ｎ ｒｅ 均 ｅ ｒｍ ｇ
２ ９２ 。 ５ ２ ）
２１ ｑｒ ． ｎＢ基 因检 测 与 比对 １ ２株 细 菌 中检 出 ｑ ｒ ｎＢ
基 因 ，结果 见 图 １ 。其 中肺炎 克雷伯菌 ５株 （ 占产 ＥＢｓ Ｓ Ｌ 肺炎 克雷伯 菌 的 １． ％） １ ０ ．大肠 埃希 菌 ７株 ９ （ 占产 Ｅ Ｂ ｓ大 肠 埃 希 菌 的 １．１ ） 随 机 取 ３株 ＳＬ ５９％ 。 ｑｒ ｎＢ基 因 阳性 产 物 测 序 与 Ｇ ｎ ａｋ比对 结 果 完 全 一 ｅＢｎ 致。 ２２ 产 Ｅ Ｂ 菌 株 药敏 结 果 见 表 １ ． Ｓ ＬＳ 。
株 产 Ｅ Ｂ ｓ 炎克 雷伯 菌有 ５株检 出 ｑ ｒ 因， 出率 为 】 ．０ ４ ＳＬ肺 ｎＢ基 检 １ ％．４株 产 Ｅ Ｂ ｓ大肠埃 希菌 中有 ７株检 出 ｑｒ ９ ＳＬ ｎＢ
基 因． 出率 为 １ ．１ 检 ５９ ％。检 出 ｑ ｒ 因的 ５株肺 炎克 雷伯 菌和 ７株 大肠 埃希茵对 两种喹 诺酮 药物 均耐 药。结论 ： ｎＢ基 在福 州地 区产 Ｅ Ｂ ｓ的肺 炎克 雷伯 菌和大肠埃希 菌 中存在 ｑ ｒ ＳＬ ｎＢ基 因 ．携 带 ｑ ｒ ｎＢ基 因的 １ ２株 细菌对左 氟沙星和
１３ 药 敏 试 验 ．
８ ６株 产 Ｅ Ｂ ｓ菌株 对 环丙 沙 星 、 ＳＬ 左
５ ０ｂ ０ ｐ
氟 沙 星 的药 敏试 验用 Ｋ Ｂ法 检测 。 ． １ ｑｒ ． ４ ｎＢ基 因 的扩增 及 测 序 １ ． 仪 器 与 试 剂 全 自动 微 生 物 鉴 定 及 药 敏 分 析 ．１ ４ 仪 为 美 国 ＶＴ Ｋ 公 司 产 品 ； Ｎ 扩 增 仪 为 美 国 ＩＥ Ｄ Ａ Ｇ ｎＡｍ ｅｅ ｐ公 司 产 品 ： 电泳 仪 为上 海 医 用分 析 仪 器 厂产
维普资讯
实用 医学杂志 ２ ０ ０ ７年第 ２ ３卷第 ２ ４期
产 超 广 谱 Ｉ 内酰 胺 酶 肺 炎 克 雷 伯 菌 与 大 肠 埃 希 菌 ３ 一 ｑｒ ｎＢ基 因 的检 测
杨 滨 孔 祥 圣
摘 要 目的 ： 了解 临床 分 离的产超 广谱 Ｂ 一内酰胺酶 （ Ｓ Ｌ ） 炎克雷伯 菌和大肠埃 希 菌株 ｑ ｒ Ｅ Ｂ ｓ肺 ｎＢ基 因的存 在情 况及 与细 菌耐 药的 关 系。方 法 ： 集福建省 福 州市三 家“ 甲” 收 三 医院临床 分 离的 菌株 ， 菌株 药敏 试验检 测采用 Ｋ Ｂ法． — 聚合酶链反 应对 ４ 产 Ｅ Ｂ ｓ 炎克 雷伯 菌和 ４ ２株 ＳＬ肺 ４株 产 Ｅ Ｂ ｓ大肠 埃希 菌进行 ｑ ｒ ＳＬ ｎＢ基 因筛查。结果 ：２ ４