山葵黑根病拮抗菌的筛选和应用
向日葵菌核病根际拮抗菌的筛选与鉴定及其拮抗机理的初步研究
为 AY 225317, AY 365256, AF546871, X57279, AY 383603, AY160109 的
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因 , 根据该 基 因保 守 区域 设 计 引物 P JTM 3 和 P JTM 4 , PCR 扩 增 XRK4 -1, 3-1, 4 -葡 聚 糖酶 基 因保 守 区 域。 分 析 所 得 序 列 , 设 计 特 异 引 物 P JTM 5 和 P JTM 6, PCR 扩 增 XRK4 的 葡聚糖酶基因完整开放阅读 框架。 1 8 序列测定 1 8 1 DNA 序列测定 将经纯化的 PCR 产物与 p MD18 -T 载体连接, 转化 E. coli DH 5 感受态细胞, 采用蓝白斑筛选法和菌落 PCR 的方法筛选重组子, 选取阳性重组子送上海生工生物工程技术服务有限 公司进行测序。 -1 , 3-1, 4-
m sunflow er rh izosphe re , w hich is resistant to Sclero tinia sclerotioAbstrac:t E igh teen an tagon istic bacte ria w ere screened fro rum. O ne of the iso lated strains na m ed as XRK 4 w as identified as Bacillus licheniform is based on the m orpho log ic characte ristics and phy logene tic ana lys is of 16S r DNA. T he resu lts show ed that XRK 4 ha s -1, 3-1, 4-g lucanase activ ity . T he open read ing fram e o f -1, 3-1 , 4-g lucanase gene is 732 bp encod ing 243 am ino ac ids . XRK 4 m ight have antagonistic activ ity based on its -1 , 3-1, 4 -g lucanase g ene .
作物病原真菌的拮抗菌筛选及其活性物质初步鉴定
作物病原真菌的拮抗菌筛选及其活性物质初步鉴定作者：胡洪涛张亚妮张舒李金泉张佑宏汪本福曹春霞任淑惠朱志刚姚经武龙同黄大野杨自文来源：《绿色科技》2017年第23期摘要：从湖北、安徽等地的水稻、小麦、豇豆、西瓜等种植区采集土壤，进行了微生物分离和培养。
采用对峙培养法，筛选到20株对11种重要作物病原真菌，如水稻稻瘟菌、小麦赤霉菌、豇豆根腐菌、西瓜枯萎菌等，具有不同拮抗活性的细菌，其中2株具有广谱抗真菌活性。
利用高效液相色谱和质谱对其中一株菌株的代谢产物进行了制备和结构初步鉴定，发现其主要活性成分为多烯类物质，分子量为803.67。
继续深入研究抗菌物质结构和抑菌机理，将有助于新型生物源杀菌剂的开发。
关键词：生防菌；稻瘟菌；赤霉菌；抑菌活性；高效液相色谱；质谱中图分类号：S476文献标识码：A 文章编号：1674-9944（2017）23-0164-041 引言作物真菌性病害，如水稻稻瘟病（Rice blast）、小麦赤霉病（Fusarium head blight）、西瓜枯萎病（Fusarium wilt of watermelon）、豇豆根腐病（Cowpea root rot）等，是世界性重要作物病害，全球每年仅因稻瘟病和赤霉病流行导致的经济损失就高达数十亿美元[1，3]，同时，赤霉菌所产生的真菌毒素严重威胁着食品安全[4]；西瓜枯萎病和豇豆根腐病是重要土传性病害，常导致西瓜和豇豆大面积死亡。
目前，防治真菌性病害的方法众多，但多以化学药剂防效最好，然而，化学药剂大量施用，不仅导致农药残留超标，也给环境和食品安全带来极大隐患。
生物农药环境兼容性好、对生物安全，是作物病害绿色防控技术体系的关键。
供药筛选的化合物主要由3种获取途径，购买已知化合物库、分离和提取天然产物以及化学合成，其中微生物来源的天然产物因其种类众多、易扩大和再生，而成为药物开发的最主要来源[5]。
由于前人研究多关注放线菌和真菌，因而在过去所发现的2万多种微生物来源的活性物质中，绝大部分来源于放线菌和真菌[5]，只有小部分约7%来源于细菌，说明细菌来源的活性物质亟待研究和开发。
植物病原真菌拮抗细菌的筛选鉴定及活性成分分析
Ｊ ｉ ａ ｎ ｊ ｕ ｎ （ Ｂ ｅ ｉ ｊ ｉ ｎ ｇ Ｆ ｏ ｒ ｅ ｓ ｔ ｒ ｙ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ，Ｂ ｅ ｉ ｊ ｉ ｎ ｇ １ ０ ０ ０ ８ ３ ， Ｐ，Ｒ ．Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ） ；Ｓ ｈ ｉ Ｇ ｕ ａ ｎ ｇ ｌ ｕ ，Ｇ ａ ｐ Ｍｅ ｉ ｊ ｕ ａ ｎ （ Ｂ ｅ ｉ ｊ ｉ ｎ ｇ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ｏ ｆ
褐 腐 病 菌 的抑 制 率 较 大 ， 分别为 ８ ７ ． ３ １ ％和 ８ ０ ． １ ５ ％（ Ｐ ＜ ０ ． ０ ５ ） ； 对棉 花 红 腐病 菌 、 辣椒炭疽病菌的抑制率低 于 ４ ０ ％ （ Ｐ＜ Ｏ ． ０ ５ ） 。Ｒ Ｎ 一 ６ １与枯 草芽孢杆 菌相似 度 最高， 为９ ９ ％， 确 定其为 芽孢杆 菌属 的枯草 芽孢杆 菌 （ Ｂ ａ ｃ ｉ ｌ ｌ ｕ ｓ ｓ ｕ ｂ ｔ ｉ ｌ ｋ Ｒ Ｎ一 ６ １ ） ， Ｎ Ｃ Ｂ Ｉ 登 录号为 Ｇ ｅ ｎ Ｂ ａ ｎ ｋ ａ ｃ ｃ ｅ ｓ ｓ ｉ ｏ ｎ ｎ ｏ ．Ｋ Ｃ ８ ４ ０ ６ ６ ８ 。菌株 Ｒ Ｎ 一 ８ ８与 Ｐ ｓ ｅ ｕ ｄ ｏ ｍｏ ｎ ａ ｓ ， ｚ ∞ ｓ ｃ ｅ 瑚Ｆ １ １ ３等相似度 为９ ９ ％， 确定其为假 单胞菌属 的荧光假 单胞 杆菌（ Ｐ ｓ ｅ ｕ ｄ ｏ ｍ ｏ ｎ ａ ｓ ｌ ｆ ｕ ｏ ｒ ｅ ｓ ｃ ｅ ｎ ｓ Ｒ Ｎ 一 ８ ８ ） 。对不 同盐浓度提取 的菌株 Ｒ Ｎ 一 ６ １ 抗 茵蛋 白 活性 研 究发 现 ， 效果最好的是饱和度为 ８ ０ ％的（ Ｎ Ｈ ） ， Ｓ ０ 溶 液 提 取 的 蛋 白。 蛋 白原 液 对 桃 褐 腐 病 菌 的抑 茵 活 性 最 强 ， ９ ６ ｈ后 的 病 原 真 菌 直 径 为 ２ ９ ． ０ｍｍ（ Ｐ ＜ ０ ． ０ ５ ） 。 关键 词 拮抗 细菌 ； 枯草 芽孢杆菌 ： 荧光假 单胞 菌杆 菌； 抑菌蛋 白 分 类号 ￥ ７ ６ ３ ． １ ３
山葵黑根病菌拮抗菌的筛选、鉴定及防治研究的开题报告
山葵黑根病菌拮抗菌的筛选、鉴定及防治研究的开题报告一、研究背景与意义山葵是我国传统的叶菜类蔬菜之一，具有风味独特、口感鲜美等优点，受到消费者的喜爱。
然而，近年来，由于气候变迁、种植密度过大、虫害病害的侵袭等因素，山葵栽培中出现了一些病害问题，其中黑根病是山葵的一种重要病害，它能够造成山葵根部组织腐烂，影响山葵生长发育，严重时会引起植株死亡。
传统的控制方法主要是采用化学药品进行喷洒土壤消毒，但长期使用化学药品会对环境造成污染，同时也会导致病菌产生耐药性，因此需要寻找新的病害防治方法。
利用拮抗微生物进行农业生产中的病害防治已经成为了一个热门的研究方向，因为相比于传统的化学药品，利用拮抗菌进行生物防治的方法更加环保、安全，而且不会对土壤产生负面影响。
二、研究内容和目的该研究的主要内容是：筛选出能够有效抑制山葵黑根病菌的拮抗菌，并对其进行鉴定，寻找其中具有较好效果的菌株，并进行进一步的研究。
研究的目的如下：1.筛选出适合防治山葵黑根病的拮抗菌，为黑根病的防治提供微生物防治的新方案。
2.确定最适合的防治方法，为山葵产业健康发展提供保障。
三、研究方法1.采集山葵黑根病菌样本进行分离纯化，并进行形态特征观察和生理生化指标检测，对其进行鉴定。
2.从山葵根际土壤中分离和筛选出潜在的拮抗菌株，通过体外和体内试验验证其对山葵黑根病菌的拮抗效果。
3.较好效果的拮抗菌株进一步进行生物学特性及遗传多样性等方面的研究。
四、预期成果本研究主要的预期成果如下：1.筛选出具有较好黑根病防治效果的拮抗菌株。
2.确定最适合的拮抗菌菌剂制备方法和处理方案，为山葵黑根病防治提供科学依据。
3.对具有拮抗效果的菌株进行初步的生物学研究，为其后续的推广应用提供理论基础和技术支持。
五、研究进度和计划本研究的工作计划如下：1.前期工作（3个月）：采集山葵黑根病菌的样本，并进行分离纯化和鉴定；同时，对山葵根际土壤中分离和筛选出的拮抗菌进行初步评估。
2.中期工作（6个月）：对具有较好拮抗效果的菌株进行体外试验和体内试验，筛选出具有较好效果的菌株，并对其进行生物学特性研究。
山葵组培中抗褐化剂的筛选及其对增殖和生长的影响
２ 结果与分析
２．１ 不同抗褐化剂对山葵组培苗褐化的控制效果 由表 １可见，继代培养第 １个月时，山葵组培苗褐化程度
相对较轻且缓慢，除 ＤＴＴ０．０３５ｇ／Ｌ处理显著高于对照（Ｐ＜
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江苏农业科学 ２０１８年第 ４６卷第 ７期
０．０５）外，其他处理间差异不显著；继代培养第 ２个月时，不同 抗褐剂对山葵组培苗的抗褐化效果表现出一定差异，除活性 炭处理和 ＡｇＮＯ３２个低浓度处理没有出现褐化外，其他处理 均出现不同程度的褐化，其中，仅 Ｎａ２Ｓ２Ｏ３ ２．０００ｇ／Ｌ处理的 组培苗褐化指数显著高于对照（Ｐ＜０．０５）；继代培养第 ３个 月时，不同抗褐化剂的整体抗褐化效果依次为 ＡｇＮＯ３ ＞活性 炭 ＞维生素 Ｃ＞ＤＴＴ＞柠檬酸 ＞ＰＶＰ＞Ｌ－半胱氨酸 ＞清水 ＞ Ｎａ２Ｓ２Ｏ３，其中，ＡｇＮＯ３３个浓度处理的组培苗褐化指数为 ０， 抗褐化效果显著优于对照（Ｐ＜０．０５），抗褐化效果相对最好， 活性炭抗褐化效 果 次 之，３个 浓 度 处 理 中，０．２００、０．８００ｇ／Ｌ 处理的组培苗褐化指数为 ０，低浓度的 ＰＶＰ、Ｌ－半胱氨酸、维 生素 Ｃ、ＤＴＴ及高浓度的柠檬酸也表现出较好的抗褐化效果， 但均没能完全消除褐化；继代培养第 ３个月时，Ｌ－半胱氨酸
山葵［Ｗａｓａｂｉｊａｐｏｎｉｃａ（Ｍｉｑｕｅｌ）Ｍａｔｓｕｍ］别 称 山 嵛 菜，为 十字花科山嵛菜属多年生草本半阴生植物，原产于中国和日 本，是一种名贵珍稀的香辛蔬菜，其浓辛辣味郁，具有利尿、清 热、发汗、解毒、杀菌、增进食欲、预防血栓、抑制癌细胞生长等 功效，被誉为“绿色黄金”，在日本、东南亚国家及港澳台地区 深受欢迎，是一种重要的出口创汇蔬菜［１－２］。目前，山葵主要 采用种子和分株繁殖，但繁殖速度慢、品性易退化，而山葵组 织培养技术可为山葵快速繁殖、复壮提供技术支持［３］。
2013植物病原菌拮抗性山药内生菌的筛选和特性研究
山 药 （Dioscorea batatas Decne） 为 薯 蓣 科 （Dioscoreaceae）薯蓣属（Dioscorea）多年生草质藤本植物薯 蓣的块根，在河南主产区为河南焦作温县、商丘虞城县，是 我国传统的药食同源植物。 它含有丰富的 DHEA （青春因 子，环戊烷多氢菲的一种衍生物）、蛋白质、糖类、粘液质、皂 苷、维生素、脂肪、胆碱、淀粉酶、糖蛋白、自由氨基酸、多酚 氧化酶等成分，还含有碘、钙、铁、铜、锌、锰、磷等人体不可 缺少的无机盐和微量元素。 因山药这些复杂的成分赋予其 特殊的功能，如抗衰老、抗肿瘤、抗疲劳、抗有害物质刺激、 调节代谢、增强免疫机能、促进生长等。 我国从棉花、水稻、 马铃薯、番茄、辣椒等[5]植物中分离到内生菌，并出现了证明 某些内生菌对植物病害具有防治效果的报道。 而山药作为 一种药用植物，赵龙飞等[6]对惠楼山药内生细菌 进行了分 离，张志东等[7]对新疆石河子山药内 生菌进行了分离和鉴 定，张建新等[2]对铁棍山药内生菌进行分离及对白菜软腐菌 拮抗菌的筛选等，詹寿发等[8]对野生山药与栽培品种内生真 菌多样性进行研究。但是，对河南山药植物病原菌拮抗性内 生菌系统地研究鲜见报道。本试验以河南山药为试验材料， 分离其内生菌，并筛选对植物病原真菌烟草赤星，棉花枯萎 病的拮抗菌，以期获得这些内生菌的基本信息进行，为山药 拮抗菌的利用提供基础资料和科学依据。
于 4℃冰箱备用。 （2）拮抗菌的初筛。 分离到内生菌共 34 株，在无菌条
件下挑取打孔器打下的病原真菌的菌饼接种到 PDA 平板 中间，在距离平皿边缘 2.5 cm 处接上 3 种不同的内生菌， 并作好标记，28℃恒温培养。 烟草赤星的操作方法和棉花 枯萎病一样，置于培养箱 30℃恒温培养，观察并记录培养 生95
植物病原菌拮抗性山药内生菌的筛选和特性研究
人参黑斑病菌拮抗菌的筛选及抑菌活性测定
吉林农业科技学院学报 Ｖ １ ０Ｎ ． ｏ． ， ｏ３ ２ Ｊｕｎ ｌ ｇｃｌｒ ｃ ｎｅａｄＴｃｎｌ ｙ ｎ ｅｓｙＳｐｅ ｂｒ２ １ ｏｒａ ｏ Ｊ ｎＡ ｒｕｕａ Ｓｉ ｃ ｎ ｅｈｏ ｇ ｉ ｒｔ ｅｔ ｅ，０ １ ｌ ｆｉ ｉ ｉ ｔ ｌ ｅ ｏ Ｕ ｖ ｉ ｍ
Ａｂ ｔａ ｔ Ｉ ｒｅ ｔ ｅｅｏ ｅ ｍｉｒｂａ ｐ ｓ ｃｄ ｓ ｉ ｔ ｌ ｎａ ｏ ｓｃｅ ｅｔ ｉＧｉｓｎ ｌｃ ｐ ｔ ｓｒ ｃ ：ｎｏｄ ｒ ｏｄ ｖ ｌｐｎｗ ｃｏ ｉ ｅｔ ｉｅ ｗ ｔ ｓ ｂｅａ ｔｇ ｎ ｔ ｆ ｃ ｌ ｎｅ ｇＢ ａｋＳ ｏ，ｍｉ ｌ ｉ ｈ ａ ｉ ｉ Ｏ — ｃ ｂａ ｔ ｉＳｗ ｔ ｅｔ ｎａ ｔｇ ｎｓｃｅ ｅ ｔ ｗｅｅｉ ｌｔ ｎ ｕｔｅ ｒｍ ｏｌ ｎ ｎｅ ｇｏｇ ｉ ｔ ｎ ｏ ｌ ｋ ｏ ｌ ｌ ｌ ｈ ｒ ｉ Ｓ￣ｌ ｉ ｃ ｒ ｉ ｎａ ｏ ｔ ｆ ｓ Ｉ ｓ ａｅ ａ ｄ ｐ Ｓ￣ｄｆｏ ｓｉ ａ ｄ Ｇｉｓｎ ｒａ ｚ ｉ ｆｂａ ＆ ａ ｉｉ ｃ ｏ ｄ ｉ ｎ ａｏ ｃ
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人参 黑斑病菌拮抗菌 的筛选及抑菌活性测定
崔立萍 丁元元 刘天鹤 何成龙 高郁芳２ ， ， ， ，
（． １ 吉林农业科技学院 ２Ｏ 级 中药学专业学生 ， Ｏ７ 吉林 １２ １２ 吉林 农业科 技学 院中药学院 ， ３１ ；． ０ 吉林 １ １１ ３ ０） ２
土壤中拮抗放线菌的筛选与鉴定
土壤中拮抗放线菌的筛选与鉴定一、培养基1 放线菌培养基高氏一号液体培养基：可溶性淀粉20g，KNO3 1g，K2HPO4 0.5g，NaCl 0.5g，MgSO4.7H2O 0.5g，FeSO4·7H2O 0.01g，H2O 1000mL，pH 7.2～7.4。
黄豆粉固体培养基：大豆粉20g（沸水煮30min，过滤保留滤液），蔗糖10g，可溶性淀粉5g，蛋白胨2g，酵母膏2g，NaCl 2g，CaCO31g，MgSO4·7H2O 0.5g，KH2PO40.5g，琼脂15g，H2O 1000mL，初始pH7.0。
放线菌发酵培养基：大豆粉20g（沸水煮30min，纱布过滤后保留滤液），蔗糖10g，可溶性淀粉5g，蛋白胨2g，酵母膏2g，NaCl2g，CaCO31g，MgSO4·7H2O 0.5g，KH2PO40.5g，H2O 1000mL，初始pH7.0。
2 放线菌形态及培养特征研究用培养基察氏培养基（ISP1）：蔗糖30g，NaNO32.0g，K2HPO41.0g，MgSO4.7H2O 0.5g，KCl 0.5g，FeSO4·7H2O 0.01g，H2O 1000mL，pH 7.2～7.4。
麦芽膏－酵母膏培养基(ISP2)：酵母膏4.0g，葡萄糖4.0g，麦芽膏10.0g，微量盐溶液1mL，H2O 1000mL，琼脂20g，pH 7.0～7.4。
燕麦片培养基（ISP3）：燕麦片20g（加1000mL 水煮20 分钟，然后用离心或过滤得澄清滤液并补足1000mL），微量盐溶液1mL，pH 7.2（微量盐溶液：FeSO4.7H2O 0.1g，MnCl2.4H2O 0.1g，ZnSO4.7H2O 0.1g，H2O 100mL）。
甘油-天门冬酰胺培养基（ISP5）：L-天门冬酰胺1.0g，甘油10.0g，K2HPO41g，微量盐溶液1mL，琼脂20g，pH 7.0～7.4。
山葵黑入病及其防治
植物， 又名 山蓊菜 、 日本辣 根 等［ ］是 芥末 加 工 的上 等原料． １ ， 其根 、 和 叶的主要 成 分有芥 茎
辣油、 多种 酵 素及 维 生 素 等 ， 促 进 食 欲 、 有 防腐 、 杀菌 之功 效 ． 因此 ， 日本 人 常 将 其 作 为 吃 生鱼
片 的佐 料 ． 山葵 原 产 中 国和 日本 ， 我 国过 去 未 加 栽 培 ． Ｏ世 纪 ８ 但 ２ Ｏ年 代 末 至 ９ Ｏ年 代 初 开 始
该 菌 适 宜 的生长 温 度 为 １ ～ ２ ９ ５℃ ， 适 温 度 为 ２ 最 ２℃ ； 宜 生 长 的 ｐ 值 为 ６ Ｏ ９０ 适 Ｈ ．～ ．， 最适 Ｐ 值为 ７ ｌ ． Ｈ ～８］ ＿ 人工 接 种 试 验 和 田间调 查 结 果 表 明 ， 病 仅 侵 染 十字 花 科 的 白菜 、 卜等 部 分 植 物 ， 该 萝 在
人工接种试验和田间调查结果表明该病仅侵染十字花科的白菜萝卜等部分植物在自然条件下没有发现侵染本属的其它植物及其它科属植物i1315i3发病规律及条件?山葵黑人病在山葵全生育期都可发病随苗龄的增加发病株率增加发病程度加重是典型的维管束病害
维普资讯
第 ３卷 ０
第 ２ 期
时从外部看 不 出任何 症状． 发病严重时 ， 根茎带 暗黑色 ， 植株矮 化 ， 照强 、 光 气温 高时 叶片出
现 萎 蔫症 状 ， 重 时 种 荚 和 种 子 也 会 受 害． 严
收 稿 日期 ： Ｏ ８ ４ ２ ２ Ｏ 一Ｏ — ２
基金项 目： 边州科技计划项 目 延
作 者 简 介 ： 伍 荣 （９ １ ）男 （ 鲜 族 ） 吉林 舒 兰 人 。 权 １６ 一 ， 朝 ， 延边 大 学 农 学 院 食 品 科 学 系 副 教 授 ．
人参病原拮抗菌的筛选及抑菌活性的鉴定
人参（ＰａｎａｘｇｉｎｓｅｎｇＣ．Ａ．Ｍｅｙ）是生长缓慢的 多年生的名贵药用植物，主要产于中国东北、朝鲜、 韩国、日本、俄罗斯东部。目前，人参根病是在生产 中危害最大的一种土传病害［１］，因其在人参表面形 成病斑甚至造成大量死苗现象进而影响人参的产量 及品质，产量损失率达 ２０％～５０％［２］，严重削弱了我 国人参产品在国际市场上的竞争力。目前在实际生 产中关于人参根病的防治主要依托化学防治。然 而，长期并高剂量使用多菌灵、托布津等农药可导致 病原菌抗药性强、土壤农药残留大、土壤微生物生态 失衡等一系列问题［３］。近年来，生物防治因其抑制 植物病害的发生并具有环保、安全和可持续的特点 受到广泛关 注［４］，因 此，筛 选 出 可 抑 制 人 参 病 害 并 促进人参生长的菌株，对人参的生长及人参病害土 修复具有重要意义。目前控制人参根病的主要生防 菌为木霉属 （Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｓｐｐ．）［５］的真菌和芽孢杆
１）国家自然科学基金项目（４１８７７０２７）。 第一作者简介：李晓雯，女，１９９３年 １０月生，吉林农业大学资源 与环境学院，硕士研究生。Ｅ－ｍａｉｌ：２５４１７０８８３１＠ｑｑ．ｃｏｍ。 通信作者：王继红，吉林农业大学资 源 与 环境学 院，教授。Ｅ－ ｍａｉｌ：ｗｊｈ４８９＠１２６．ｃｏｍ。 收稿日期：２０１９年 ３月 １３日。 责任编辑：程 红。
菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）［６］。 放线菌 广 泛 存 在 于 自 然 生 态 环 境 中，种 类 繁
多［７］，代谢功能各异，其中链霉菌属 （Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ） 及其相关类群是抗生素的主要来源之一，在人类对 抗由致病菌产生的感染性疾病的过程中发挥了不可 替代的防 治 作 用［８］，有 些 放 线 菌 不 仅 可 以 抑 制 病 害，还 有 促 进 作 物 生 长、改 善 作 物 品 质 的 功 能［９］。 目 前 国 内 外 利 用 放 线 菌 对 棉 花 （Ｇｏｓｓｙｐｉｕｍ ｓｐｐ．）［１０］、茄子（Ｓｏｌａｎｕｍ ｍｅｌｏｎｇｅｎａＬ．）［１１］等植物生 物防治的研究已经取得了较大的进展，但对人参根 病的生物防 治 鲜 有 报 道。 王 呈 玉 等 ［１２］从 人 参 根 际 土壤中分离得到 １株具有抑制植物病害作用的淡紫 灰链霉菌菌株 ＤＣ－Ａ。姜云等［１３］从人参根际土壤 中分离得到具有抑制人参锈腐病作用的链霉属菌 １ａ－３。本研究以连作人参根际土中筛选出的 １株 对人参致病菌有拮抗作用的菌株 Ｆ３为研究对象，采 用对峙法对拮抗菌进行抑菌试验，对筛选出的菌株 进行了 １６ＳｒＤＮＡ序列测定、抑菌活性和促生性试 验，探究拮抗菌对人参病原菌病的菌丝生长和孢子 萌发的抑制效果，并对拮抗菌对人参种子促生性进 行探究，以期为人参根病的防治提供参考。
《胡麻枯萎病生防菌拮抗物质的筛选和分离纯化研究》范文
《胡麻枯萎病生防菌拮抗物质的筛选和分离纯化研究》篇一一、引言胡麻枯萎病是一种常见的植物病害，对胡麻的生长发育产生严重影响，导致产量和品质的显著下降。
近年来，随着生物防治技术的不断发展，利用生防菌的拮抗物质来控制植物病害已成为一种有效的生物防治策略。
本文旨在研究胡麻枯萎病生防菌拮抗物质的筛选、分离纯化及其作用机制，以期为胡麻枯萎病的生物防治提供理论依据和实践指导。
二、材料与方法1. 材料（1）菌种：从土壤中分离出的具有拮抗活性的生防菌。
（2）培养基：胡麻枯萎病菌和生防菌的培养基。
（3）试剂：用于拮抗物质提取和纯化的试剂。
2. 方法（1）拮抗物质的筛选：采用平板对峙法，将胡麻枯萎病菌与生防菌进行共培养，观察其生长情况，筛选出具有拮抗活性的生防菌。
（2）拮抗物质的提取：将筛选出的生防菌进行培养，提取其细胞外或细胞内的拮抗物质。
（3）拮抗物质的分离纯化：采用薄层层析、高效液相色谱等手段，对提取的拮抗物质进行分离纯化。
（4）作用机制研究：通过生物化学、分子生物学等方法，研究拮抗物质的作用机制。
三、结果与分析1. 拮抗物质的筛选结果通过平板对峙法，我们筛选出多株具有拮抗活性的生防菌。
其中，菌株X-1的拮抗效果最为显著，可作为后续研究的重点对象。
2. 拮抗物质的提取与分离纯化通过细胞破碎、溶剂萃取等步骤，成功提取了菌株X-1的拮抗物质。
经过薄层层析和高效液相色谱等手段的分离纯化，我们得到了纯度较高的拮抗物质。
3. 拮抗物质的作用机制研究通过生物化学和分子生物学等方法，我们发现该拮抗物质主要通过抑制胡麻枯萎病菌的生长和繁殖来达到防治效果。
具体作用机制包括破坏病菌细胞膜的完整性、抑制病菌的代谢等。
此外，该拮抗物质还可能诱导胡麻产生抗病性，从而提高其自身的抗病能力。
四、讨论本研究成功筛选出具有显著拮抗活性的生防菌株X-1，并对其拮抗物质进行了提取、分离纯化和作用机制研究。
研究结果表明，该拮抗物质在控制胡麻枯萎病方面具有潜在的应用价值。
《胡麻枯萎病生防菌拮抗物质的筛选和分离纯化研究》范文
《胡麻枯萎病生防菌拮抗物质的筛选和分离纯化研究》篇一一、引言胡麻枯萎病是一种常见的植物病害，对胡麻的生长发育产生严重影响，进而影响农作物的产量和品质。
因此，研究有效的生物防治方法对于控制胡麻枯萎病的流行具有重要意义。
生防菌拮抗物质是生物防治中的一种重要手段，具有环境友好、不产生抗药性等优点。
本研究旨在通过筛选和分离纯化胡麻枯萎病生防菌拮抗物质，为生物防治胡麻枯萎病提供新的思路和方法。
二、材料与方法1. 材料（1）菌种：胡麻枯萎病病原菌、生防菌等。
（2）培养基：LB培养基、PDA培养基等。
（3）试剂：各种生化试剂、层析介质等。
2. 方法（1）生防菌的筛选：从土壤、植物根际等环境中筛选具有拮抗胡麻枯萎病病原菌的生防菌。
（2）拮抗物质的提取与分离：采用适当的方法提取生防菌中的拮抗物质，利用层析、薄层扫描等技术进行分离纯化。
（3）纯化物质的鉴定：通过光谱分析、质谱分析等方法鉴定纯化物质的化学结构。
三、实验结果1. 生防菌的筛选结果经过对土壤、植物根际等环境的筛选，我们成功获得了几株具有拮抗胡麻枯萎病病原菌的生防菌。
这些生防菌在实验室条件下表现出良好的拮抗效果，具有较高的应用潜力。
2. 拮抗物质的提取与分离纯化我们采用适当的提取方法从生防菌中成功提取了拮抗物质。
通过层析、薄层扫描等技术，我们成功地将这些拮抗物质进行了分离纯化。
纯化后的拮抗物质在光谱分析和质谱分析等方面表现出良好的化学特性。
3. 纯化物质的鉴定结果经过光谱分析和质谱分析，我们鉴定出纯化物质的化学结构。
这些物质主要包括多肽、脂肪酸等具有生物活性的化合物。
这些化合物的发现为进一步研究其生物活性及作用机制提供了重要的基础。
四、讨论本研究通过筛选和分离纯化胡麻枯萎病生防菌拮抗物质，成功获得了具有生物活性的化合物。
这些化合物可能通过不同的作用机制对胡麻枯萎病病原菌产生抑制作用，从而控制病害的发生和流行。
此外，这些化合物还具有环境友好、不产生抗药性等优点，为生物防治胡麻枯萎病提供了新的思路和方法。
人参黑斑病菌拮抗菌的筛选及抑菌活性测定
人参黑斑病菌拮抗菌的筛选及抑菌活性测定崔立萍;丁元元;刘天鹤;何成龙;高郁芳【期刊名称】《吉林农业科技学院学报》【年(卷),期】2011(020)003【摘要】为了筛选出对人参黑斑病菌具有稳定拮抗作用的微生物,开发新型微生物源农药,本试验用稀释分离法和病组织分离法,从土壤和人参黑斑病菌组织中分离和纯化具有一定拮抗作用的微生物菌株。
结果共筛选对人参黑斑病菌有拮抗作用的菌株22个,其中细菌16株,放线菌5株,木霉1株。
由此可见,土壤及人参黑斑病组织中均含有对人参黑斑病菌有拮抗作用的微生物菌株,细菌中Xc1、Xd5和Xc4菌株,放线菌中Fd2和Fw1菌株及木霉Zh1都具有开发为防治人参黑斑病微生物源农药的价值。
【总页数】4页(P4-7)【作者】崔立萍;丁元元;刘天鹤;何成龙;高郁芳【作者单位】吉林农业科技学院2007级中药学专业学生,吉林132101;吉林农业科技学院2007级中药学专业学生,吉林132101;吉林农业科技学院2007级中药学专业学生,吉林132101;吉林农业科技学院2007级中药学专业学生,吉林132101;吉林农业科技学院中药学院,吉林132101【正文语种】中文【中图分类】S435.6【相关文献】1.水稻纹枯病拮抗菌的筛选、鉴定及抑菌活性测定 [J], 彭迪;朱哲远;李祖任;王立峰;刘洋;柏连阳2.水稻稻曲病菌拮抗菌的分离、筛选与抑菌活性测定 [J], 朱哲远;彭迪;李祖任;王立峰;柏连阳3.人参根腐病拮抗菌的筛选、鉴定及其抑菌活性 [J], 勾长龙;王雨琼;孙朋;毕彦晖;娄玉杰;高云航4.烟草青枯病拮抗菌的筛选及抑菌活性的测定 [J], 张深;吴洪田;霍沁建;梁永江;薛小平;张洁;黄建国5.人参病原拮抗菌的筛选及抑菌活性的鉴定 [J], 李晓雯; 王继红; 王柯坛因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
辣椒根腐病拮抗细菌的筛选、鉴定及其抑菌促生作用
辣椒根腐病拮抗细菌的筛选、鉴定及其抑菌促生作用曲春鹤;何付丽;刘培福;纪明山;赵长山;高黎力【期刊名称】《东北农业大学学报》【年(卷),期】2012(000)007【摘要】采用平板对峙-胚根试验-盆栽试验系统筛选方法，以Fusarium solani为指示菌，从黑龙江省辣椒根际土壤中筛选得到4株拮抗细菌，分别命名为菌株D221、II621、15-1-1、19-2-3.菌株D221对大豆疫病菌(Phytophthora sojae)、大豆菌核病菌(Sclerotinia sclerotinorum)、黄瓜枯萎病菌(F. oxysporum)、黄瓜立枯病菌(Rhizoctonia solani)、小麦根腐病菌(Bipolaris sorokiniana)、棉花黄萎病菌(Verticillium dahliae)、水稻恶苗病菌(F. moniliforme)具有明显拮抗作用，对辣椒胚根生长具有促进作用.经形态学、生理生化鉴定及16S rDNA分析，将菌株D221鉴定为枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)，并在GenBank中注册，序列号为JF495161【总页数】6页(P89-94)【作者】曲春鹤;何付丽;刘培福;纪明山;赵长山;高黎力【作者单位】东北农业大学农学院，哈尔滨150030;东北农业大学农学院，哈尔滨150030; 沈阳农业大学植物保护学院，沈阳110161;东北农业大学农学院，哈尔滨150030;沈阳农业大学植物保护学院，沈阳110161;东北农业大学农学院，哈尔滨150030;黑龙江省农药管理检定站哈尔滨150090【正文语种】中文【中图分类】S436.418.1+9【相关文献】1.番茄疫霉根腐病拮抗细菌FC12-05的筛选、鉴定及其抑菌活性初探 [J], 冯志珍;李金岭;陈太春;马志远;段军娜;安德荣2.草莓根腐病拮抗真菌筛选鉴定及其防病促生作用 [J], 申光辉;薛泉宏;张晶;段佳丽;王东胜;杨兴华3.辣椒根腐病内生拮抗细菌筛选及菌株Hj33-7的鉴定和抗菌活性 [J], 祁之秋;李兴海;王英姿;谷祖敏;纪明山4.丹参根腐病拮抗细菌筛选、鉴定及生防机理研究 [J], 许乐;王子强;张爽;邢倩;刘丽娜;洒荣波5.丹参根腐病拮抗细菌筛选、鉴定及生防机理研究 [J], 许乐;王子强;张爽;邢倩;刘丽娜;洒荣波因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
山葵墨入病的综合防治技术
山葵墨入病的综合防治技术杨祚斌;郑家文【摘要】山葵墨入病，又称黑斑病、黑胫病、黑腐病、黑心病、叶墨斑病等，病原体为山葵茎点霉（Phoma wasabiae Yokogi），病菌以分生孢子器在病部越冬，翌年相对湿度大于97％和适宜的气温时产生分生孢子，借飞溅的雨水和风夹雨滴或灌溉溅起的水传播。
调查发现，保山山葵墨入病大田田间叶发病率25％-70％，病株率90％～100％，损失达30％-70％，发病田块率100％，严重时可毁园。
该病是制约山葵发展的重要因素。
【期刊名称】《长江蔬菜》【年(卷),期】2007(000)003【总页数】2页(P9-10)【关键词】山葵茎点霉;综合防治技术;分生孢子器;相对湿度;黑斑病;发病率;黑胫病;黑腐病【作者】杨祚斌;郑家文【作者单位】云南保山市山葵实业开发有限责任公司专家组,678000;云南保山市山葵实业开发有限责任公司专家组,678000【正文语种】中文【中图分类】S4山葵墨入病，又称黑斑病、黑胫病、黑腐病、黑心病、叶墨斑病等，病原体为山葵茎点霉（Phoma wasabiaeYokogi），病菌以分生孢子器在病部越冬，翌年相对湿度大于97%和适宜的气温时产生分生孢子，借飞溅的雨水和风夹雨滴或灌溉溅起的水传播。
调查发现，保山山葵墨入病大田田间叶发病率25%～ 70%，病株率90%～100%，损失达30%～70%，发病田块率100%，严重时可毁园。
该病是制约山葵发展的重要因素。
山葵墨入病以微伤口感染发病为主，还可通过种子、苗、土壤远距离传播。
全生育期都可发病，随苗龄的增加发病株率增加，发病程度加重，是典型的维管束慢性病害。
其分生孢子可从农事操作或害虫造成的微伤口传播，可随病苗远距离传播，夏季发生重，受太阳直射或干湿不均、温差大发生重。
菌丝发育的温度范围是4～34℃，适温26℃，杀灭温度孢子为50℃，菌丝为55℃，各需5 min。
侵入的适温是25℃，可侵入的最低温度相当低，但准确数据目前还不清楚。
山葵黑根病拮抗菌的筛选和应用
山葵黑根病拮抗菌的筛选和应用
陈静鸿;向晶晶;丁成翔;张斌;葛绍荣
【期刊名称】《四川大学学报（自然科学版）》
【年(卷),期】2007(044)003
【摘要】从山葵种植土壤中分离到一株对山葵墨入菌(Phorna wasabiae Yokogi)有强拮抗作用的菌株SA2.通过形态观察、生理生化实验及16S rDNA同源性序列分析,鉴定SA2为一株苏云金芽孢杆菌.盆栽和田间小区实验表明,SA2对山葵黑根病有较好的防治效果,田间防效最高达78.98%.
【总页数】5页(P687-691)
【作者】陈静鸿;向晶晶;丁成翔;张斌;葛绍荣
【作者单位】四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都,610064;四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都,610064;四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都,610064;四川大学科技处,成都,610065;四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都,610064
【正文语种】中文
【中图分类】Q93
【相关文献】
1.烟草黑胫病拮抗菌XF10的筛选与鉴定 [J], 杨艺炜;黎妍妍;张安盛;周建云;李斌;王静;陈德鑫
2.烟草黑胫病拮抗菌的筛选鉴定及其发酵工艺优化 [J], 张涛;雷帮星;何劲;文晓鹏
3.烟草黑胫病拮抗菌XA-1的筛选·鉴定及其抑制作用研究 [J], 李娜;陈胜;程书锋;祃志明;彭建
4.橡胶籽苗黑根病防治药剂筛选试验 [J], 蒋桂芝;田海;孙小龙;梁国平
5.烟草黑胫病拮抗菌的筛选、鉴定和防病潜力 [J], 陆新莉;雷庭;邱克刚;江彤;丁婷;黄衍章;齐永霞
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拮抗菌在果蔬采后病害生物防治中的应用_王静
生物技术进展2013年第3卷第6期393 398Current Biotechnology ISSN 2095-櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅殯殯殯殯2341贮藏与保鲜Storage and Preservation收稿日期：2013-10-11；接受日期：2013-11-06基金项目：国家自然科学基金项目（31172003）资助。
作者简介：王静，博士研究生，主要从事农产品贮藏与加工研究。
E-mail ：2011208027@njau．edu．cn 。
*通信作者：郑永华，教授，博士生导师，主要从事农产品贮藏与加工研究。
E-mail ：zhengyh@njau．edu．cn 拮抗菌在果蔬采后病害生物防治中的应用王静，郑永华*南京农业大学食品科技学院，南京210095摘要：果蔬在运输和贮藏过程中，采后病害造成了巨大的经济损失，如何有效控制果蔬采后病害，延长货架期成为日益关注的焦点。
随着人们对健康和环保的重视，化学防腐剂等传统保鲜技术已经不能满足人们的需要，通过生物防治技术来控制采后病害已成为研究热点，其中，拮抗菌的使用越来越受到人们的关注，有望成为取代传统保鲜技术的有效途径。
目前，人们已经从自然界中分离得到多种拮抗菌，并将其应用到果蔬采后病害防治中，取得了显著效果。
本文综述了拮抗菌在果蔬采后病害生物防治中的应用现状，对其可能的作用机理进行了探讨，并提出了未来可能的研究方向，为拮抗菌在果蔬采后病害防治中的研究和商业化应用提供参考。
关键词：果蔬；采后病害；生物防治；拮抗菌DOI ：10．3969/j．issn．2095-2341．2013．06．03Application of Microbial Antagonists as Biocontrol Agents Against Postharvest Diseases of Fruits and VegetablesWANG Jing ，ZHENG Yong-hua *College of Food Science and Technology ，Nanjing Agricultural University ，Nanjing 210095，ChinaAbstract ：Postharvest diseases cause considerable losses to harvested fruits and vegetables during transportation and storage．How to control postharvest decay loss and prolong shelf-life has become the focus．Concerned with healthy and environment-friendly products ，traditional approaches such as chemical fungicides cannot meet our need．More and more attention is paid on biocontrol agents against postharvest diseases of fruits and vegetables．Of them ，the use of antagonistic microorganisms becomes popular which is regarded as promising alternatives to control postharvest pathogens．Nowadays ，quite number of microbial antagonists has been isolated and defined as effective in postharvest disease control．This paper focuses on microbial antagonists in postharvest biological control．Possible principle of microbial antagonists was also discussed and explored new possibilities in biology control to provide reference in postharvest decay control research and commercial use．Key words ：fruits and vegetables ；postharvest disease ；biocontrol ；microbial antagonists水果蔬菜富含大量的维生素、氨基酸、微量元素和抗氧化物质等营养成分，在人类膳食结构中占有重要地位，深受人们的青睐。
山葵愈伤组织诱导的最佳条件筛选
山葵愈伤组织诱导的最佳条件筛选王跃华;何新友;刘洪明;任三军;刘鑫【摘要】[目的]获得诱导山葵愈伤组织的最佳条件.[方法]通过L16 (44)正交试验法考察了外植体种类、消毒时间、培养基配方和培养温度等四方面因素对山葵愈伤组织诱导率的影响.[结果]试验结果显示,各因素与山葵愈伤组织的诱导率密切相关,影响大小为:外植体种类＞培养温度＞培养基配方＞消毒时间.[结论]诱导山葵愈伤组织的最佳组合为,选择胚轴为外植体,经5 min消毒后接种于MS+2,4-D 1 mg/L+ 6-BA 0.5mg/L培养基中,在20℃条件下培养25d,山葵愈伤组织的诱导率可迭100％.【期刊名称】《种子》【年(卷),期】2017(036)004【总页数】3页(P124-125,128)【关键词】正交试验;山葵;愈伤组织【作者】王跃华;何新友;刘洪明;任三军;刘鑫【作者单位】成都大学生物产业学院,四川成都610016;成都大学生物产业学院,四川成都610016;成都大学生物产业学院,四川成都610016;广元市玺府开发有限公司,四川广元648017;成都大学生物产业学院,四川成都610016【正文语种】中文【中图分类】S567.23+9山葵(Wasabi japonica Matsum)为十字花科山嵛菜属多年生草本植物，又名山嵛菜，是一种珍稀名贵的香辛蔬菜[1]；目前山葵主产日本、东南亚国家及港澳台地区，除地区消费外，其产品主要用于出口创汇，市场价值显著，极具发展前景[2]。
山葵植物中所含有的异硫氰酸酯类物质，具有很好的抗菌、抗癌、抗感染、防腐、抑制血小板凝聚和增进食欲等功效[3-5]，具有广泛的应用前景。
然而，目前山葵植物资源极其匮乏，一直处于供不应求的状况。
这主要是因为山葵植物的生长对环境要求极为苛刻，仅适于在海拔高度为1 000～2 000 m的高山地区种植，生育温度超过30 ℃易发生软腐病，但低于-3 ℃时又易受冻害；另外，山葵植物生长过程中病虫害也严重,尤其是墨入病的严重危害,极大的影响山葵的产量和质量[6-8]。