2020高考生物二轮复习 优编增分练：非选择题特训15 微生物的利用及传统发酵等技术的应用
2020年高考生物原创专题卷：微生物的利用和生物技术在食品加工中的应用及酶的应用和生物技术在其他方面应用
原创生物专题卷专题微生物的利用和生物技术在食品加工中的应用及酶的应用和生物技术在其他方面的应用考点54 微生物的利用 3颗星 (1题)考点55 传统发酵技术 3颗星（２题）考点56 酶的应用 4颗星（３题）考点57 生物技术在其他方面的应用 3颗星（5-6题）考点58 植物组织培养 4颗星（4题）考试时间：90分钟满分：90分说明：请将选择题正确答案填写在答题卡上，主观题写在答题纸上。
（共6题每题15分）1．【来源】2017届贵州省黔东南州高三下学期高考模拟考试中难(15分)氯嘧磺隆是一种常用于除大豆田地阔叶杂草的有机物除草剂，长期使用氯嘧磺隆造成土壤和水体的污染。
某同学将从污染的土壤中筛选出高效降低氯嘧磺隆的分解菌。
用已学知识回答下列问题：考点54（1）培养微生物的培养基一般都含有水、______和碳源、氮源。
考点54（2）在筛选高效分解菌过程中，应将土壤样品稀释液接种到以__________为唯一碳源的固体培养基上，该培养基从功能上看属于__________培养基。
考点54（3）培养微生物的培养基常采用___________方法进行灭菌。
考点54（4）统计样品活菌数目时，常采用的方法是 ___________。
将10g土样进行浓度梯度逐步稀释后，在4个培养基平板上均接种稀释倍数为103的土壤样品液0.1ml，培养一段时间后，平板长出的菌落数分别为189、210、204和434，由此得出每克土壤样品中的分解菌数量为________个。
用该方法统计的活菌数往往比真实值低的原因是______________________________________。
（3分）2．【来源】2017年新课标II卷理综高考试题易(15分)豆豉是大豆经过发酵制成的一种食品。
为了研究影响豆豉发酵效果的因素，某小组将等量的甲、乙两菌种分别接入等量的A、B两桶煮熟大豆中并混匀，再将两者置于适宜条件下进行发酵，并在32 h内定期取样观测发酵效果。
2019高考生物二轮复习 优编增分练：非选择题特训15 微生物的利用及传统发酵等技术的应用
特训15 微生物的利用及传统发酵等技术的应用1．(2018·东北五校联考)图甲是某学生重复艾弗里证明DNA是遗传物质实验的其中一组实验；图乙是基因工程中运用影印法将培养基A上的菌落按原来方向印在培养基B上，以检测重组质粒是否导入大肠杆菌的示意图。
请回答下列问题：(1)图甲、图乙的培养结果显示，两实验中使用的均为________(填物理状态)培养基。
(2)在配制图乙中的培养基时，除考虑营养、pH、渗透压等条件外，还要考虑在培养基A和B中加入____________(填“相同”或“不同”)种类的抗生素。
在配制培养基和倒平板的过程中，下列选项需要的有__________(填序号：①酒精灯，②接种环，③培养皿)。
(3)培养基灭菌是避免杂菌污染的有效途径之一。
适用于图甲、图乙所示培养基的灭菌方法是______________；接种前还需检测灭菌效果，方法是将未接种的培养基置于恒温箱中，在适宜温度下培养一段时间，观察培养基上________________。
(4)实验证明，上述两项实验中R型细菌和大肠杆菌的转化率都很低，为获得图甲、图乙所示的培养结果，一是要设法提高图甲中S型细菌的____________；二是要使用恰当的方法接种。
两实验都不能用稀释涂布平板法接种，而应采用菌液直接涂布平板和影印法接种肺炎双球菌和大肠杆菌，理由是__________________________________________________。
接种培养4天后，可通过观察菌落的形态特征来识别肺炎双球菌和大肠杆菌。
答案(1)固体(2)不同①③(3)高压蒸汽灭菌是否有菌落产生(4)DNA纯度稀释会导致菌种数量极少而无法观察到转化成功的菌落解析(1)图甲和图乙的培养结果显示，实验中使用的是固体培养基。
(2)根据题图可知，培养基A、B中可生长的菌落不一样，在配制图乙中的培养基时，除了考虑营养、pH、渗透压等条件外，还要考虑在培养基A和B中加入不同种类的抗生素，以判定目的基因是否随重组质粒导入大肠杆菌；在配制培养基和倒平板的过程中，需要用到酒精灯和培养皿。
高考生物考前冲刺复习第部分专题突破方略专题十五生物技术实践
(2)推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有
乳泡酸菜菌 滤在液_无中_氧菌_鉴的的_环浓_别境度_下高_乳大，_量直_酸繁接_殖培_菌，养_将很_葡难_萄分和糖离分得_解到中_成单_乳菌和_酸落_产__生__的__乳__酸__(_或__酸__)___。分离纯化时应
牛奶的营养成分不被破坏 化学性质稳定，难溶于水，易挥发
食析盐出浓 豆度腐(为中15的)%该水的分泡培，菜使中养豆亚硝基酸盐中含量微变化生最快物，说所明乳需酸菌的代谢氮最旺来盛，源到发于酵1_1天牛_后_亚_肉硝_酸_膏盐_含_、量_降_蛋到_最_白低_值_胨___。
泡菜滤液中菌的浓度高，直接培养很难分离得到单菌落
专题十五 生物技术实践 为乳酸菌发酵提供无氧环境
7化0～学7性5质℃③稳煮定3设0，分难钟置溶(8于0空℃水煮，白1易5分挥对钟发) 照组和若干实验组，进行相关操作；
泡菜滤液中菌的浓度高，直接培养很难分离得到单菌落 乳酸菌在无氧的环境下大量繁殖，将葡萄糖分解成乳酸
中 泡和菜产滤生 液④的 中乳 菌将酸 的浓(或各度酸高)组，直平接培板养很置难分于离得到3单7菌落℃恒温箱中培养一段时间，统计各组
化纤维素分解为还原性的葡萄糖，根据这一特性，可用 ___斐___林____试剂判断提取物是否起到了降解纤维素的作用。
[解析] (1)马胃中的纤维素分解菌需要无氧、酸性的生存环 境。对培养基需进行高压蒸汽灭菌处理后，才能够进行接种。 从功能上看，用于分离某种细菌的具特殊条件的培养基属于 选择培养基。(2)为防止杂菌污染，接种时需要在酒精灯火焰 附近进行，对操作中所用的玻璃器皿需进行干热灭菌处理。 (3)使用划线法分离纯化菌株时，若接种环灼烧后未冷却，会 导致培养一段时间后，有的线上无菌落。(4)将筛选培养的纤
高考生物二轮复习 专题十一微生物的利用及在传统发酵技术中的应用学案
考点31 微生物的利用及在传统发酵技术中的应用[直击考纲] 1.微生物的分离和培养。
2.某种微生物数量的测定。
3.培养基对微生物的选择作用。
4.利用微生物进行发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用。
5.从生物材料中提取某些特定的成分。
6.运用发酵加工食品的基本方法。
7.DNA的粗提取与鉴定。
1．微生物的培养(1)无菌技术：主要包括消毒和灭菌。
①消毒方法：常用煮沸消毒法、巴氏消毒法。
②常用灭菌方法：灼烧灭菌——接种环、接种针等金属器具；干热灭菌——主要针对玻璃器皿等；高压蒸汽灭菌——主要针对培养基等。
(2)倒平板操作操作过程如图所示，操作时要待培养基冷却至50 ℃左右时，在酒精灯火焰附近进行。
制备固体培养基最后要将平板倒置，其主要目的是防止培养皿皿盖上的水珠滴入培养基造成污染。
(3)平板划线操作(4)稀释涂布平板法：先将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落。
如图所示：2．某种微生物的分离与计数(1)分离——选择培养基①培养基中加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌。
②培养基中加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。
③培养基中缺乏氮源时，可以分离得到固氮微生物。
④当培养基的某种营养成分为特定化学成分时，也具有分离效果。
⑤改变微生物的培养条件，也可以达到分离微生物的目的，如将培养基放在高温环境中培养能得到耐高温的微生物。
(2)计数①土壤中分解尿素的细菌的分离与计数a．筛选菌株：利用以尿素为唯一氮源的选择培养基筛选菌株。
b．计数方法：活菌计数法和显微镜直接计数法。
前者为了增强实验的说服力和准确性，需设置重复组，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。
c．过程：土壤取样→样品的稀释→微生物的培养与观察。
②分解纤维素的微生物的分离a．实验原理即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。
2020版高考生物二轮复习第18讲微生物的利用和生物技术在食品加工中的应用练习(含解析)
微生物的利用和生物技术在食品加工中的应用一、选择题1．下图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，下列说法错误的是（）A．①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行B．步骤①中,待倒入的培养基冷却后盖上培养皿的皿盖C．步骤③中，每次划线前后都需对接种环进行灼烧处理D．划线接种结束后，将图④平板倒置后放入培养箱中培养解析：选B。
由图可知，步骤①是倒平板,步骤②是用接种环蘸取菌液，步骤③是进行平板划线，步骤④是培养。
①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行，防止被杂菌污染，A项正确；倒完平板后应立即盖上培养皿的皿盖，冷却后将平板倒过来放置，B项错误；每次划线前后灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，使下一次划线时,接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到单菌落,C项正确;划线接种结束后，将平板倒置放入培养箱中培养,有利于培养基表面的水分更好地挥发和防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染，D项正确。
2(2019·高考北京卷)筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。
接种培养后，若细菌能分解淀粉,培养平板经稀碘液处理,会出现以菌落为中心的透明圈(如图），实验结果见下表。
菌种菌落直径：C（mm)透明圈直径：H(mm)H/C细菌Ⅰ5.111。
2 2.2细菌Ⅱ8。
113.01。
6A．培养基除淀粉外还含有氮源等其他营养物质B．筛选分解淀粉的细菌时，菌液应稀释后涂布C．以上两种细菌均不能将淀粉酶分泌至细胞外D．H/C值反映了两种细菌分解淀粉能力的差异解析：选C.微生物培养基含有四类营养物质:水、无机盐、碳源、氮源，A项正确；常用稀释涂布平板法筛选淀粉分解菌，涂布前需将菌液稀释，B项正确;由题图可知，细菌Ⅰ和Ⅱ形成的菌落周围都出现了透明圈，说明两种细菌都能将淀粉酶分泌至细胞外，C项错误；淀粉分解菌可分解淀粉，导致菌落周围的淀粉被分解,不能与碘液反应生成蓝色，故而出现透明圈,透明圈直径与菌落直径的比值越大，说明细菌分解淀粉的能力越强，D项正确.3。
2020年高考生物二轮专题测试 生物技术实践
2020年高考生物二轮专题测试生物技术实践一、微生物的培养与利用1.（2020·济宁模拟）下列关于葡萄酒、葡萄醋、腐乳和泡菜制作的叙述，正确的是（）A. 在葡萄酒、葡萄醋和腐乳制作的全过程中，都要严格灭菌B. 葡萄酒、葡萄醋发酵过程中温度分别控制在18-25℃、30-35℃C. 腐乳制作过程中，卤汤中酒的含量应控制在20%左右D. 泡菜制作过程中易形成致癌物质亚硝酸盐2.（2020·浙江模拟）下列关于无菌操作的叙述正确的是（）A. 制作棉塞的棉花可以选择用脱脂棉B. 配制培养基时，需在酒精灯火焰旁操作C. G6玻璃砂漏斗使用后需用lmol/L的HCl浸泡D. 利用高压蒸气灭菌法对含有葡萄糖的培养基灭菌时，需将压强调整为500g/cm2，其他条件不变3.（2019·丰台模拟）大熊猫主食竹子，但自身不能产生分解纤维素的酶，主要依靠肠道菌群消化纤维素。
下列说法不正确的是（）A. 用以纤维素为唯一碳源的培养基筛选产纤维素酶的菌株B. 从加入刚果红的鉴别培养基中可筛选出纤维素酶活性高的菌株C. 大熊猫肠道内多种纤维素分解菌之间是寄生关系D. 大熊猫与其肠道内微生物间相互选择，共同进化4.（2019·城中模拟）下图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的过程示意图，有关叙述错误的是（）A. 在配制步骤②、③的培养基时，应先调pH值后髙压蒸汽灭菌B. 步骤③纯化分解尿素的原理是将聚集的细菌分散，可以获得单细胞菌落C. 步骤③采用涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素D. 步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，比较细菌分解尿素的能力5.（2020高三下·长沙模拟）菌株甲为大肠杆菌的甲硫氨酸（Met）营养缺陷型，菌株乙为苏氨酸（Thr）营养缺陷型，分别受a、b基因控制，在基本培养基（M）上不能生长，但可在添加相应氨基酸的培养基上生长。
将上述两菌株的菌液混合一段时间后，从中筛选出4种菌株，4种菌株在不同培养基上的培养结果见表。
高考生物二轮专题复习第一部分专题突破篇第八单元专题1微生物的培养应用及传统发酵技术课件
酵母膏 无机盐 淀粉 纤维素粉 琼脂 CR溶液 水
培养
＋ ＋＋
＋
－
＋＋
基甲
培养
＋ ＋＋
－
＋
＋＋
Hale Waihona Puke 基乙注：“＋”表示有，“－”表示无。 据表判断，培养基甲________(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别 纤 维 素 分 解 菌 ， 原 因 是 ____________________ ； 培 养 基 乙 ________(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因 是_______________________________________________。
答案 (1)苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ) 萃取法 (2)油脂 (3)血细胞计数
板 稀释涂布平板 (4)45 40
2.(2014·全国课标Ⅰ，39)植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分 解。回答下列问题。 (1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种 组 分 组 成 的 复 合 酶 ， 其 中 的 葡 萄 糖 苷 酶 可 将 ________ 分 解 成 ________。 (2)在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)时，CR可与纤维素 形成________色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素 分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的________。 (3)为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落， 某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表)：
解析 (1)纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物， 是含量最丰富的多糖类物质。纤维素能被土壤中某些微生物分解 利用，如下图：
(2)刚果红与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后， 红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我 们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 (3)分离和鉴别纤维素分解菌的培养基为固体培养基，且需以纤维 素为唯一碳源。
全国高考生物二轮复习非选择题特训15微生物的利用及传统发酵等技术的应用
特训15 微生物的利用及传统发酵等技术的应用1．(2018·东北五校联考)图甲是某学生重复艾弗里证明DNA是遗传物质实验的其中一组实验；图乙是基因工程中运用影印法将培养基A上的菌落按原来方向印在培养基B上，以检测重组质粒是否导入大肠杆菌的示意图。
请回答下列问题：(1)图甲、图乙的培养结果显示，两实验中使用的均为________(填物理状态)培养基。
(2)在配制图乙中的培养基时，除考虑营养、pH、渗透压等条件外，还要考虑在培养基A和B中加入____________(填“相同”或“不同”)种类的抗生素。
在配制培养基和倒平板的过程中，下列选项需要的有__________(填序号：①酒精灯，②接种环，③培养皿)。
(3)培养基灭菌是避免杂菌污染的有效途径之一。
适用于图甲、图乙所示培养基的灭菌方法是______________；接种前还需检测灭菌效果，方法是将未接种的培养基置于恒温箱中，在适宜温度下培养一段时间，观察培养基上________________。
(4)实验证明，上述两项实验中R型细菌和大肠杆菌的转化率都很低，为获得图甲、图乙所示的培养结果，一是要设法提高图甲中S型细菌的____________；二是要使用恰当的方法接种。
两实验都不能用稀释涂布平板法接种，而应采用菌液直接涂布平板和影印法接种肺炎双球菌和大肠杆菌，理由是__________________________________________________。
接种培养4天后，可通过观察菌落的形态特征来识别肺炎双球菌和大肠杆菌。
答案(1)固体(2)不同①③(3)高压蒸汽灭菌是否有菌落产生(4)DNA纯度稀释会导致菌种数量极少而无法观察到转化成功的菌落解析(1)图甲和图乙的培养结果显示，实验中使用的是固体培养基。
(2)根据题图可知，培养基A、B中可生长的菌落不一样，在配制图乙中的培养基时，除了考虑营养、pH、渗透压等条件外，还要考虑在培养基A和B中加入不同种类的抗生素，以判定目的基因是否随重组质粒导入大肠杆菌；在配制培养基和倒平板的过程中，需要用到酒精灯和培养皿。
2021届高考生物二轮复习专题十五微生物的利用与传统发酵技术作业含解析
专题十五微生物的利用与传统发酵技术1．传统发酵技术丰富了人们的餐饮生活，请回答下列相关问题：(1)利用带盖的发酵瓶制作葡萄酒的过程中，每隔12 h左右将瓶盖拧松一次，然后再将瓶盖拧紧，目的是________________________。
如果将瓶盖完全打开，不久酒就会变酸，原因是________________________________________________________________________。
(2)腐乳制作过程中，毛霉产生的蛋白酶将豆腐中的蛋白质水解成______________，脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸，从而使豆腐变为味道鲜美的腐乳。
制作腐乳的实验流程是：让豆腐上长出毛霉→______________→加卤汤装瓶→密封腌制，卤汤中酒的含量过低产生的影响是________________________________________________________________________。
(3)制作泡菜过程中，泡菜坛需要密封的原因是___________________________。
发酵后期，乳酸含量继续增加，当浓度达到1.2%以上时，发酵速率逐渐变缓甚至停止，主要原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。
解析：(1)酵母菌无氧呼吸产生酒精和CO2，将瓶盖拧松的目的是排出瓶内CO2，以防瓶子爆裂，然后拧紧瓶盖是防止杂菌侵入和保证无氧环境。
酒变酸是因为在瓶盖完全打开时，空气中的醋酸菌进入发酵瓶，在有氧条件下将酒精氧化为醋酸。
(2)毛霉产生的蛋白酶能将豆腐中蛋白质水解成易于吸收的小分子的肽和氨基酸。
2021届高考生物二轮复习 专题十五 微生物的利用与传统发酵技术学案
2021届高考生物二轮复习专题十五微生物的利用与传统发酵技术学案年级：姓名：专题十五微生物的利用与传统发酵技术[考纲要求]1．微生物的利用：(1)微生物的分离和培养；(2)某种微生物数量的测定；(3)培养基对微生物的选择作用。
2.生物技术在食品加工和其他方面的应用：(1)利用微生物进行发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用；(2)运用发酵加工食品的基本方法；(3)测定食品加工中可能产生的有害物质。
授课提示：对应学生用书第96页细节拾遗1．教材选修1 P4“旁栏思考”：你认为应该从哪些方面防止发酵液被污染？提示：需要从发酵制作的过程进行全面的考虑。
例如，榨汁机、发酵装置要清洗干净；每次排气时只需拧松瓶盖、不要完全揭开瓶盖等。
2．教材选修1 P8“侧栏小资料”：影响腐乳种类的因素有哪些？举例说出加入的辅料与腐乳种类的关系。
提示：豆腐含水量的不同、发酵条件的不同、加入的辅料的不同。
红方加入了红曲，糟方加入了酒糟，青方不加辅料。
3．教材选修 1 P10“旁栏思考”：为什么泡菜坛内有时会长一层白膜？你认为这层白膜是怎么形成的？提示：形成白膜是由于产膜酵母的繁殖。
酵母菌是兼性厌氧微生物，泡菜发酵液营养丰富，其表面氧气含量也很丰富，适合酵母菌繁殖。
4．教材选修1 P17“倒平板操作讨论”：平板冷凝后，为什么要将平板倒置？提示：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
5．教材选修1 P18“侧栏小资料”：微生物的接种方法只有平板划线法和稀释涂布平板法吗？微生物接种的核心是什么？提示：不是。
微生物的接种方法还包括斜面接种、穿刺接种等，其核心是防止杂菌污染，保证培养物的纯度。
易错诊断1．在果酒的制作中，榨出的葡萄汁需要经过灭菌后才能发酵(×)2．用大白菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化是先增加后减少(√)3．亚硝酸盐不是致癌物质，但可转变成致癌物质亚硝胺(√)4．培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌(×)5．培养基必须含有碳源、氮源、水、无机盐及生长因子(×)6．在培养基中加入青霉素能抑制真菌生长，但不影响细菌生长(×)7．平板划线和涂布平板这两种接种方法都可对微生物进行计数(×)8．接种前后，接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧(√)9．菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基(√)10．检验以尿素为唯一氮源的培养基是否分离出了分解尿素的细菌，方法是在培养基中加入刚果红指示剂，若指示剂变红，则可初步鉴定该细菌能分解尿素(×)授课提示：对应学生用书第97页考点微生物的培养、分离与计数1．图解微生物的培养、分离与计数2．微生物分离与计数的两个实例(1)土壤中分解尿素的细菌的分离与计数①筛选菌株：利用选择培养基筛选菌株。
2020版高考生物二轮复习 专题十一微生物的利用及在传统发酵技术中的应用学案
考点31 微生物的利用及在传统发酵技术中的应用[直击考纲] 1.微生物的分离和培养。
2.某种微生物数量的测定。
3.培养基对微生物的选择作用。
4.利用微生物进行发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用。
5.从生物材料中提取某些特定的成分。
6.运用发酵加工食品的基本方法。
7.DNA的粗提取与鉴定。
1．微生物的培养(1)无菌技术：主要包括消毒和灭菌。
①消毒方法：常用煮沸消毒法、巴氏消毒法。
②常用灭菌方法：灼烧灭菌——接种环、接种针等金属器具；干热灭菌——主要针对玻璃器皿等；高压蒸汽灭菌——主要针对培养基等。
(2)倒平板操作操作过程如图所示，操作时要待培养基冷却至50 ℃左右时，在酒精灯火焰附近进行。
制备固体培养基最后要将平板倒置，其主要目的是防止培养皿皿盖上的水珠滴入培养基造成污染。
(3)平板划线操作(4)稀释涂布平板法：先将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落。
如图所示：2．某种微生物的分离与计数(1)分离——选择培养基①培养基中加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌。
②培养基中加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。
③培养基中缺乏氮源时，可以分离得到固氮微生物。
④当培养基的某种营养成分为特定化学成分时，也具有分离效果。
⑤改变微生物的培养条件，也可以达到分离微生物的目的，如将培养基放在高温环境中培养能得到耐高温的微生物。
(2)计数①土壤中分解尿素的细菌的分离与计数a．筛选菌株：利用以尿素为唯一氮源的选择培养基筛选菌株。
b．计数方法：活菌计数法和显微镜直接计数法。
前者为了增强实验的说服力和准确性，需设置重复组，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。
c．过程：土壤取样→样品的稀释→微生物的培养与观察。
②分解纤维素的微生物的分离a．实验原理即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。
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特训15 微生物的利用及传统发酵等技术的应用1．(2018·东北五校联考)图甲是某学生重复艾弗里证明DNA是遗传物质实验的其中一组实验；图乙是基因工程中运用影印法将培养基A上的菌落按原来方向印在培养基B上，以检测重组质粒是否导入大肠杆菌的示意图。
请回答下列问题：(1)图甲、图乙的培养结果显示，两实验中使用的均为________(填物理状态)培养基。
(2)在配制图乙中的培养基时，除考虑营养、pH、渗透压等条件外，还要考虑在培养基A和B中加入____________(填“相同”或“不同”)种类的抗生素。
在配制培养基和倒平板的过程中，下列选项需要的有__________(填序号：①酒精灯，②接种环，③培养皿)。
(3)培养基灭菌是避免杂菌污染的有效途径之一。
适用于图甲、图乙所示培养基的灭菌方法是______________；接种前还需检测灭菌效果，方法是将未接种的培养基置于恒温箱中，在适宜温度下培养一段时间，观察培养基上________________。
(4)实验证明，上述两项实验中R型细菌和大肠杆菌的转化率都很低，为获得图甲、图乙所示的培养结果，一是要设法提高图甲中S型细菌的____________；二是要使用恰当的方法接种。
两实验都不能用稀释涂布平板法接种，而应采用菌液直接涂布平板和影印法接种肺炎双球菌和大肠杆菌，理由是__________________________________________________。
接种培养4天后，可通过观察菌落的形态特征来识别肺炎双球菌和大肠杆菌。
答案(1)固体(2)不同①③(3)高压蒸汽灭菌是否有菌落产生(4)DNA纯度稀释会导致菌种数量极少而无法观察到转化成功的菌落解析(1)图甲和图乙的培养结果显示，实验中使用的是固体培养基。
(2)根据题图可知，培养基A、B中可生长的菌落不一样，在配制图乙中的培养基时，除了考虑营养、pH、渗透压等条件外，还要考虑在培养基A和B中加入不同种类的抗生素，以判定目的基因是否随重组质粒导入大肠杆菌；在配制培养基和倒平板的过程中，需要用到酒精灯和培养皿。
(3)培养基灭菌的方法是高压蒸汽灭菌；将未接种的培养基置于恒温箱中，在适宜温度下培养一段时间后，观察培养基上是否有菌落产生，以检测灭菌的效果。
(4)R型细菌和S型细菌的DNA混合培养后，有一小部分R型细菌会摄取S型细菌的DNA，实现自身DNA和S型细菌DNA的重组，这一部分R型细菌就有可能转化为S型细菌。
若要提高图甲中R型细菌转化为S型细菌的转化率，要设法提高S型细菌DNA的纯度，让更多的R型细菌有机会摄取S型细菌的DNA，来实现自身DNA和S型细菌DNA的重组；要提高图甲和图乙中细菌的转化率还要注意接种方法都不能采用稀释涂布平板法，而应采用菌液直接涂布平板和影印法接种肺炎双球菌和大肠杆菌，原因是菌液被稀释后会导致菌种数量极少而难以观察到转化成功的菌落。
2．(2018·福建四市联考)葡萄种类较多，为了满足不同人群对葡萄的需求，可以将葡萄加工制作成果汁、果酒、果醋等。
下面是简单的生产果汁、果酒、果醋的流程。
请结合所学知识，回答下列问题：(1)葡萄的皮、籽中含有原花青素和大量具有葡萄风味的物质等，这些物质易溶于乙醇和乙酸乙酯，因此，常采用________的方法来分离提取。
(2)在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用的微生物是________________________。
若想对初步筛选得到的酵母菌进行纯化并计数，可采用的接种方法是____________________。
(3)若葡萄汁中含有醋酸菌，在葡萄酒发酵旺盛时，醋酸菌能否将酒精转变成醋酸？________，原因是_______________________________________________________________________________________________________________________________。
答案(1)萃取(2)(附着在葡萄皮上的野生型)酵母菌稀释涂布平板法(3)不能醋酸菌是好氧菌，葡萄酒发酵旺盛时的无氧条件会抑制醋酸菌的生长解析(1)根据题意分析可知，题述物质易溶于乙醇和乙酸乙酯，因此，常采用萃取的方法来分离提取。
(2)在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用的微生物是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。
若想对初步筛选得到的酵母菌进行纯化并计数，可采用的接种方法是稀释涂布平板法。
(3)因为在葡萄酒发酵旺盛时是无氧条件，而醋酸菌是好氧菌，该时期的无氧条件会抑制醋酸菌的生长，所以醋酸菌不能将酒精转变成醋酸。
3．(2018·东北四市联考)某个实验小组对微生物的培养和五种香辛料萃取提取的精油(编号为A、B、C、D、E)抑菌能力进行了研究。
首先制备了直径为8.5 mm的圆滤纸片若干，灭菌后分别放入各组精油中浸泡2 h。
然后取各种待测菌悬液0.15 mL分别在相应的固体培养基上均匀涂布，制成含菌平板。
再取浸泡过精油的滤纸片贴在含菌平板上，每个培养皿贴浸过同一种精油的滤纸3片，放培养箱中培养一定时间。
测定抑菌圈直径，结果取三次重复实验的平均值，其数据如表所示，请回答下列问题：精油种类抑菌圈直径(mm)菌种A B C D E大肠杆菌21.1 26.0 15.1 24.0 23.2白葡萄球菌14.7 22.0 19.1 12.0 29.1黑曲霉24.6 33.0 26.0 24.5 49.6青霉25.3 38.2 24.3 25.1 42.8(1)不同微生物培养的温度和时间往往不同，在培养箱中培养时细菌培养温度________(填“高于”“低于”或“等于”)霉菌培养温度，培养时间________(填“长于”或“短于”)霉菌培养时间。
在特定条件下，根据不同微生物在固体培养基上形成的菌落的______________(答出2项即可)等特征可以区分不同的微生物。
(2)在腐乳的制作过程中为了______________________，在______________(步骤)时需要添加香辛料，可见从香辛料中提取有效成分作为食品天然防腐剂具有广阔的前景。
(3)本实验中采用了____________法接种。
结果可见不同精油对不同种类的微生物杀伤作用不同，C和E对细菌的杀伤作用________(填“大于”或“小于”)对真菌的杀伤作用。
(4)有同学认为缺少是否抗病毒的实验结果，提出在营养琼脂培养基上接种常见的病毒进行实验。
你认为可以吗？为什么？______________________________________________。
答案(1)高于短于形状、大小、隆起程度、颜色(2)调制风味、防腐杀菌加卤汤装瓶(配制卤汤) (3)稀释涂布平板小于(4)不可以，病毒为寄生生物，在该培养基上不能生长解析(1)细菌一般在30～37 ℃的温度下培养1～2 d，霉菌一般在25～28 ℃的温度下培养3～4 d。
可以根据菌落的形状、大小、隆起程度、颜色等特征来区分不同微生物。
(2)在腐乳制作过程中，在配制卤汤时加入一定量香辛料，香辛料能使腐乳具有独特的风味，还有防腐杀菌作用。
(3)本实验中需制成含菌平板，测定抑菌圈大小，故用稀释涂布平板法接种。
从表中数据可知，C和E处理不同菌种时，在细菌平板上形成的抑菌圈直径小于在真菌平板上形成的抑菌圈直径，即对细菌的杀伤作用小于对真菌的杀伤作用。
(4)病毒只能在特定的宿主细胞中生长，不能在一般培养基上生长。
4．(2018·重庆二调)以往，北方每年在小麦丰收的季节，焚烧秸秆，火焰四起，烟雾弥漫，不但导致严重的雾霾而且造成资源的浪费。
科学家为了解决这个问题，努力寻找分解秸秆中纤维素的微生物，他们做了如下实验，据图回答下列问题：(1)根据图甲，选择培养纤维素分解菌要用__________；为了鉴别纤维素分解菌，常在培养基中加入__________。
为了统计样品中活菌的数目，常用方法除稀释涂布平板法外，还有__________________的方法。
(2)图乙是培养出的单菌落示意图，最适合分解秸秆的两个菌落是________(填数字)，纤维素分解菌将纤维素最终分解为__________。
从图中可以看出培养基上菌落数较少，推测可能的原因是________________________________________________________________________。
(3)为了长期保存该微生物，可以采用________________的方法。
答案(1)选择培养基刚果红(CR) 显微镜直接计数(血细胞计数板计数) (2)1和4 葡萄糖土壤中纤维素分解菌较少，稀释的倍数太大(或接种量太少，培养时间太短) (3)甘油管藏解析(1)选择培养纤维素分解菌的培养基为选择培养基；刚果红可以与纤维素形成红色复合物。
当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红—纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。
统计样品中细菌的数目，除了用稀释涂布平板法外，还可以用显微镜直接计数的方法。
(2)最适合用于分解秸秆的菌落是分解纤维素能力强的菌落，即菌落周围形成的透明圈较大而菌落直径相对较小的1和4。
培养基上菌落数较少的原因可能是土壤中纤维素分解菌较少，稀释的倍数过大。
(3)长期保存微生物菌种的方法是甘油管藏法。
5．(2018·安阳一模)中央电视台《舌尖上的中国》栏目介绍了我国各地的美食，其中利用发酵技术制作的各类特色食品，如果醋、腐乳、泡菜等，很好地展现了广大人民群众的智慧。
请回答下列问题：(1)“天地一号”苹果醋是我国著名的果醋。
工业上酿制苹果醋通常有两条途径，一条途径是向捣碎的苹果汁中直接接种__________(填微生物名称)，经过一次发酵制成，在发酵过程中需要持续向发酵液中通入__________；另一条途径需经过先后两次发酵获得，即________________________________________________________________________________________________________________________________________________。
(2)“王致和”腐乳是我国的著名品牌，通过发酵，豆腐中营养物质的种类________(填“增多”或“减少”)。
制作腐乳时加盐腌制后需要加入卤汤，若卤汤中的酒精含量过高，则会导致腐乳________________。
(3)泡菜具有独特的风味，在我国的泡菜品种中，东北酸菜和四川泡菜都非常有名，它们的制作过程基本类似，都是利用________(微生物名称)发酵。
向坛中注入盐水前，煮沸所用盐水的目的是____________。