ATCC菌株操作说明-中文版(最新)

常环境，24-48 小时。 方法 11 先接种于 MRS 肉汤中-----35℃，正常环境，48 小时；
然 后 接 入 含 羊 血 的 哥 伦 比 亚 CNA 培 养 基 中 -----35℃，5％ CO2 环境，48 小时。 方法 12 马铃薯葡萄糖琼脂-----45℃，正常环境，48-72 小时。 方法 13 取 一 颗 冻干 颗 粒于 10 B 精氨 酸 肉汤 中， 若 是
方法 16 Leeming Notman 琼脂，30℃下，正常环境中培养 72
个小时。
各类菌株的推荐培 养方法见下页。
TIB. 081
MBL 技术资料
以下列出各类菌株的推荐培养方法：
A Acinetobacter sp.
Acetobacter sp.
不动杆菌属 醋杆菌属
方法 1 方法 3
注： 25℃培养3-4天。
Flavobacterium sp.
产黄菌属
方法1
注： 30℃培养。
Fluoribacter sp.
荧光杆菌属
方法 8
Fusarium sp. Fusobacterium sp.
G Gardnerella sp.
Gemella sp. Geobacillus sp.
镰刀菌属 梭杆菌属 加德纳氏菌属 兼性双球菌属 地芽孢杆菌属
操作前请仔细阅读使用说明
“KWIK-STIK Microorganisms”产品的使用说明
防范与限制 (PRECAUTIONS AND LIMITATIONS)
这类产品仅适用于体外实验。 这些设备以及后来在培养基上生长出的微生物属生物危害材料(biohazard material )。 这些设备含具有活性的微生物，在一定的环境下可能致病。需使用适当的技术避免任
肠道细菌属
Enterococcus sp.
肠球菌属
Erysipelothrix sp.
丹毒丝菌属
Escherichia coli
大肠杆菌
Exiguobacterium sp. 微小杆菌属
F Finegoldia sp.
芬戈尔德菌属
注： 厌氧环境中培养 72-96 小时。
方法 1 方法 1 方法 1 方法 4 方法 3 方法 1 方法 1 方法 2 方法 1 方法 1 方法 4
念珠菌属 噬二氧化碳菌属 纤维微细菌 金黄杆菌属 柠檬酸杆菌属 枝孢霉属 梭菌属
方法 5 方法 3 方法 1 方法 1 方法 1 方法 5 方法 4
注： Clostridium baratii(巴氏梭菌) 只在厌氧血平板上生长。
Corynebacterium sp. Cryptococcus sp.
TIB. 081
养基。在最初的 48 小时培养期内不要揭开接过种的平皿。
Candida sp. Capnocytophaga sp. Cellulosimicrobium sp. Chryseobacterium sp. Citrobacter sp. Cladosporium sp. Clostridium sp.
KWIKSTIK 则溶于自带的培养基中。作系列梯度稀 释（例如，1:10，1:100，1:1000，1:10000）。在 35℃ 下，正常环境中 培养。精氨 酸瓶中液体 一旦变成粉 红色（24-48 小时），转接 0.1 mL 到 A-8 琼脂，划线 分离。人型支原体，35℃，5-10%CO2 环境；解脲支 原体，35℃，厌氧环境，培养 96 个小时。使用显微 镜观察平板菌落。
采用适合的生物危害处理法 丢弃 KWIK-STIKTM
挤压并旋转拭子，接种于初级培 养平板，接种圈的直径约 25mm
用一无菌接种环 在先前接种区 域划线 10-20 次，促使其分离出 单菌落
立即培养接种好 的初级培养平板
注：请严格按照“操作流程”、“推荐生长条件”和“推荐培养方法” 活化标准菌株，不建议使用实验室自己的方法及文献方法活化标准菌 株，否则菌种供应商不保证菌株的质量且不提供相应的售后服务。
Aquaspirillum sp.
水螺菌属
方法 1
注： 25℃培养 6 天。
Arcanobacterium sp. Arthrobacter sp.
隐秘杆菌属 节杆菌属
方法 2 方法 1
注： 25℃培养。
Aspergillus sp.
曲霉菌属
方法 5
B Bacillus sp.
芽孢杆菌属
方法 1
注： 一些芽孢杆菌属经证明在室温下保存后的传代恢复率高于在 2-8℃
方法 8 缓冲活性炭酵母提取物琼脂-----35℃，正常环境，3-5
天。
方法 9 V 琼脂或巧克力琼脂-----35℃，5％－10％ CO2 环
境，48 小时。 方法 10 脑心浸出液肉汤，胰蛋白胨大豆肉汤，或 0.85％生
理盐水均可选用。 非选择性羊血琼脂或胰蛋白胨大豆琼脂-----35℃，正
方法 14 取 一 颗 冻 干 颗 粒 于 SP4 葡 萄 糖 肉 汤 中 ， 若 是
KWIKSTIK 则溶于自带的培养基中。作系列梯度稀 释（例如，1:2，1:4，1:8，1:16，1:32）。在 35℃下， 正 常 环 境中 培 养。 一 旦肉 汤 从红 色 变成 黄 色（ 1-4 周），转接 0.2 mL 到 SP4 葡萄糖琼脂，划线分离。 不要使用棉质拭子或木质棒。35℃，CO2 环境中， 可以使用烛缸，培养 5-15 天。使用显微镜观察平板 菌落。 方法 15
Aeromonas salmonicida(杀鲑气单胞菌 )应在 25℃培养。
Alcaligenes sp.
产碱杆菌
方法 1
Alicyclobacillus sp.
脂环酸芽孢杆菌 方法 12
Alloiococcus sp.
Method 2
Aneurinibacillus sp.
硫 胺 素 芽 孢 杆 菌 方法 1 属
方法 1 胰蛋白胨大豆琼脂，非选择性羊血琼脂，标准计数平
板，或营养琼脂-----35℃，正常环境，24-48 小时。 方法 2 非选择性羊血琼脂----- 35℃，正常环境，24-48 小时。 方法 3 巧克力琼脂（含血红蛋白和NAD）-----35℃，5％－
10％ CO2环境，24-48小时。 方法 4 厌氧血琼脂-----35℃，厌氧环境，48-72 小时； 部分专性厌氧菌可能需要 5－7 天，才能充分生长； 对于梭菌，以下新鲜配制的平板也可选用：营养琼
注： 可能需要一周的培养时间；正常环境也可。
注：Bordetella pertussis (百日咳杆菌) (MicroBioLogics 目录号 0843) 需添
加了 15%去纤维蛋白羊血的包姜氏(Bordet Gengou)培养基。
Brevibacillus sp.
短芽孢杆菌属
方法 1
Brevundimonas sp.
脂，胰蛋白胨大豆琼脂和标准平板计数琼脂(标准方 法琼脂)；只是需额外培养 24 小时。 方法 5 沙保氏葡萄糖 Emmons 琼脂-----25℃，正常环境，2-7 天； 沙保氏葡萄糖琼脂-----25℃，正常环境，2-7 天； 非选择性羊血琼脂也可选用； 以下培养基也可选用：营养琼脂，胰蛋白胨大豆琼 脂，马铃薯葡萄 糖琼脂和标 准平板计数 琼脂，只是 需额外培养 24 小时。 方法 6 巧克力琼脂（含血红蛋白和 NAD）-----35℃，微需 氧环境，48-72 小时。 方法 7 Lowenstein Jensen 琼 脂 或 Middlebrook 琼 脂 -----35℃，5％－10％ CO2 环境或正常环境，7 天。
如何选择最适合的菌种生长条件
1. 最初的生长最好是在非选择性琼脂培养基上。除非 特殊 情况或特别 推荐，最初 的生长一般 不考虑液体 培养 基。这是由 于在液体培 养基中获得 冻干菌株的 纯种比较困难，污染所带 来的杂菌可能会过度生长， 影响得到目标菌株 的纯种。
2. 以下列出可供选择的琼脂培养基和相应的生长条 件，供各实验室培 养菌种时参考。
何微生物的暴露和接触。 微生物实验室需有相关实验装备，且有可接收、处理、储存、丢弃生物危害材料的设
备。 使用这类设备的微生物实验室工作人员必须在生物危害材料的操作过程，维护，储存，
丢弃等方面接受过培训，具备一定经验，能熟练示范。 相关机构和法规对生物危害材料的处理作了规定。各实验室需了解并遵守该生物危害
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MBL 技术资料
操作流程
TI B. 0 8 1
注：请严格按照“操作流程”、“推荐生长条件”和“推荐培养方法” 活化标准菌株，不建议使用实验室自己的方法及文献方法活化标准菌 株，否则菌种供应商不保证菌株的质量且不提供相应的售后服务。
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MBL 技术资料
TI B. 0 8 1
推荐生长条件
（适用于 LYFO DISK® 和 KWIK-STI KTM 产品）
MBL 技术资料
KWIK-STIKTM 操作流程
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从凹口处撕开产品包装
撕掉标签上的拉片，将其贴于 初级培养平板或 QC 记录上
捏管帽处安瓿瓶中部(仅一次)， 使其释放水合液体
垂直握住试管并 轻拍之，使液体流 入含小球的管底
通过挤捏压碎 小球，使其与 液体混合
立即将拭 子浸于水 合悬液中
方法 5 方法 4 方法 9 方法 4 方法 1
注： Geobacillus stearothemophilus (嗜热脂肪地芽孢杆菌)需在 55℃培养。
Geobacillus stearothemophilus，MBL 货号为 0137，在羊血琼脂上不
能生长。
Geotrichum sp.
材料处理规定。
储存与有效期 (STORAGE AND EXPIRATION)