谷氨酸分子量及离解常数测定
谷氨酸(glutamic acid,Glu)含量测定试剂盒说明书
货号: QS1906 规格：50管/48样谷氨酸(glutamic acid，Glu)含量测定试剂盒说明书可见分光光度法正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：Gu广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，不仅是组成蛋白质的20种氨基酸之一，而且通过转氨基作用参与多种氨基酸合成，是生物体内主要氨基来源之一。
此外，Glu还是味精的主要有效成分，常用做食品添加剂以及香料生产。
测定原理：利用专用提取液提取，然后用显色剂进行显色，显色后在570nm下进行测定。
自备实验用品及仪器：可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水。
试剂的组成和配制：试剂一：液体100mL×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入10mL蒸馏水，充分混匀溶解，用不完的试剂仍4℃避光保存。
谷氨酸提取：1、细菌或培养细胞样品：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议1000万细菌或细胞加入2mL试剂一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 常温离心10min，取上清，置冰上待测。
2、组织样品：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.2g组织，加入2mL试剂一），进行冰浴匀浆。
8000g 常温离心10min，取上清，置冰上待测。
3、血清（浆）或细胞培养液样品：按照血清（浆）或细胞培养液体积（mL）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议取0.2mL血清（浆）或者细胞培养液加入2mL试剂一），进行冰浴匀浆。
8000g 常温离心10min，取上清，置冰上待测。
测定操作1、分光光度计预热30min以上，调节波长至570nm，蒸馏水调零。
测定管-A对照管。
对照管只要做一管。
氨基酸序列 相对分子量
氨基酸序列的相对分子量是根据序列中各个氨基酸的分子量进行计算的。
每种氨基酸都有一个特定的分子量，这个值是由该氨基酸的化学结构决定的。
要计算氨基酸序列的相对分子量，你需要将序列中每个氨基酸的分子量加在一起。
例如，考虑一个简单的氨基酸序列“Met-Gly-Glu”（甲硫氨酸-甘氨酸-谷氨酸）。
甲硫氨酸（Met）的分子量约为149.21，甘氨酸（Gly）的分子量约为75.07，谷氨酸（Glu）的分子量约为147.13。
因此，这个氨基酸序列的相对分子量将是149.21 + 75.07 + 147.13 = 371.41。
然而，值得注意的是，在实际的生物学研究中，通常不会直接计算氨基酸序列的相对分子量，而是会关注其他更复杂的属性，如蛋白质的三维结构、功能域、翻译后修饰等。
相对分子量更多地是在化学合成或某些特定的实验条件下才会被重视。
此外，氨基酸序列的相对分子量与蛋白质的相对分子量（通常称为分子量）不同。
蛋白质的分子量是指整个蛋白质分子的质量，而不仅仅是其氨基酸序列的质量。
蛋白质分子量通常通过质谱等实验方法测定，而不是通过计算氨基酸序列的分子量来得出。
谷氨酸的检测方法
谷氨酸的检测方法
谷氨酸是一种非必需氨基酸，广泛存在于生物体内。
以下是常用的谷氨酸检测方法：
1. 高效液相色谱法（HPLC）：该方法使用高效液相色谱仪来分离和定量谷氨酸。
样品经过前处理后，通过色谱柱进行分离，然后使用紫外检测器检测谷氨酸的峰面积或峰高度，与标准曲线进行定量分析。
2. 毛细管电泳法（CE）：毛细管电泳是一种高效的分离和测定方法，可以用于谷氨酸的分离和定量。
样品经过前处理后，通过毛细管进行电泳分离，然后使用紫外检测器检测谷氨酸的峰高度或峰面积，与标准曲线进行定量分析。
3. 酶促法：谷氨酸可以通过酶促反应转化为其他物质，然后测定转化物的浓度来间接测定谷氨酸的浓度。
常用的酶促反应包括谷氨酸脱氢酶法、谷氨酸氨基转移酶法等。
4. 免疫测定法：免疫测定法利用特异性抗体与谷氨酸结合，形成抗原-抗体复合物，通过测定复合物的反应强度来定量谷氨酸。
常用的免疫测定法包括酶联免疫吸附测定法（ELISA）、放射免疫测定法等。
这些方法各有优缺点，具体选择哪种方法取决于实验要求、设备条件和样品性质等因素。
谷氨酸检测方法
酸度计法( 1 )原理利用氨基酸的两性作用，加入甲醛以固定氨基的碱性，使羧基显示出酸性，用Na OH标准溶液滴定后定量，以酸度计测定终点。
( 2)操作步骤称取O ．5 g 试样于2 0 O r aL烧杯中，加入6 0 mL水，用Na O H标准溶液滴定至酸度计指示p H = 8 ．2后，加入1 0 ．0 mL甲醛。
再用Na O H标准溶液滴定至p H- - 9 ． 2 ，记下消耗的氢氧化钠标准溶液体积数，同时做空白试验。
旋光法为味精国标GB ／T 5 0 0 9 ． 4 3 —1 9 9 6测定谷氨酸钠第一法，当酸度计法滴定终点p H控制在9 ．6 7时，测定结果与旋光法基本一致，表明此法最佳终点p H值为9 ．6 7是可行的。
1 ．2 ．1高氯酸滴定法…方法原理：在乙酸存在下，用高氯酸滴定样品中的谷氨酸钠，以a 一萘酚苯基甲醇为指示剂，滴定溶液至绿色为终点。
操作步骤：称取样品0 ． 1 5 g ，精确至0 ．0 0 0 1 g ，加甲酸3 mL ，再加乙酸3 0 mL 、 a 一萘酚苯基甲醇一乙酸指示剂 1 0滴，用高氯酸标准溶液滴定试液，直至颜色变绿即为终点，记录消耗高氯酸标准溶液的体积，同时做空白试验。
1 ．2 ．2 旋光法【! 】原理：谷氨酸钠分子结构中含有一个不对称碳原子，具有光学活性，能使偏振光面旋转一定角度，所以，可用旋光仪测定其旋光度。
根据旋光度换算成谷氨酸钠的含量。
操作步骤：称取 1 0 g ，精确至0 ．0 0 0 1 g ，加少量水溶解并移人1 O O mL容量瓶中，加盐酸2 0 m L ，混匀，待冷却至2 0 ~ C，加水至刻度，摇匀。
将试液置于旋光管中，测其旋光度，同时测度试液温度。
在实际工作中旋光法操作简便、快捷，数据稳定，相对标准偏差很小，不失为首选的方法。
但是，根据文献报导，如果产品中掺有蔗糖时，会干扰和影响旋光法对谷氨酸钠含量的测定因为蔗糖和谷氨酸钠一样具有旋光性。
谷氨酸
谷氨酸发酵综述谷氨酸（glutamic acid）化学式为C5H9O4N，是一种酸性氨基酸，化学名称为α-氨基戊二酸，是20种常见α-氨基酸之一。
谷氨酸为无色晶体，结晶状态是稳定的，微溶于水但溶于盐酸溶液，密度为1.538（kg/m3），等电点为3.22，谷氨酸有左旋体，右旋体，和外消旋体。
谷氨酸的解离常数：pK’1(COOH)为2.19，pK’2(NH3+)为4.25(γ-COOH),pK’3为9.67（NH3+）。
谷氨酸是非必需氨基酸的一种，大量存在与谷类中，谷氨酸有鲜味，谷氨酸钠是味精的主要成分，用于增加食物的鲜味。
正文：一：谷氨酸发酵在谷氨酸发酵中，改变细胞膜的通透性，使谷氨酸不断地排到细胞外面，就会大量生成谷氨酸。
研究表明，影响细胞膜通透性的主要因素是细胞膜中的磷脂含量。
因此，对谷氨酸产生菌的选育，往往从控制磷脂的合成或使细胞膜受损伤入手，如生物素缺陷型菌种的选育。
生物素是不饱和脂肪酸合成过程中所需的乙酰CoA的辅酶。
生物素缺陷型菌种因不能合成生物素，从而抑制了不饱和脂肪酸的合成。
而不饱和脂肪酸是磷脂的组成成分之一。
因此，磷脂的合成量也相应减少，这就会导致细胞膜结构不完整，提高细胞膜对谷氨酸的通透性。
1，谷氨酸发酵是典型的代谢控制发酵，环境条件对谷氨酸发酵具有重要的影响，控制最适宜的环境条件是提高发酵产率的重要条件。
（1）碳源目前使用的谷氨酸生产菌均不能利用淀粉只能利用葡萄糖和果糖等。
在一定的范围内，谷氨酸产量随葡萄糖浓度的增加而增加，但若葡萄糖浓度过高，由于渗透压力大对菌体生长很不利，谷氨酸对糖的转化率降低。
国内谷氨酸发酵糖浓度为125—150g/L，但一般采用流加糖工艺。
（2）氮源常见无机氮源：尿素，液氮，碳酸氢铵。
常见有机氮源：玉米浆，豆浓，糖蜜。
当氮源的浓度过低时回事菌体细胞营养过度贫乏，形成“生理饥饿”，影响菌体繁殖和代谢，导致产酸率低。
随着玉米浆的浓度增高，菌体大量增殖使谷氨酸非积累型细胞增多，同时又因生物素过量是代谢合成磷脂增多，导致细胞膜增厚不利于谷氨酸的分泌造成谷氨酸产量下降。
谷氨酸
谷氨酸科技名词定义中文名称：谷氨酸英文名称：glutamic acid;Glu定义：学名：2-氨基-5-羧基戊酸。
构成蛋白质的20种常见α氨基酸之一。
作为谷氨酰胺、脯氨酸以及精氨酸的前体。
L-谷氨酸是蛋白质合成中的编码氨基酸，哺乳动物非必需氨基酸，在体内可以由葡萄糖转变而来。
D-谷氨酸参与多种细菌细胞壁和某些细菌杆菌肽的组成。
符号：E。
应用学科：生物化学与分子生物学（一级学科）；氨基酸、多肽与蛋白质（二级学科）本内容由全国科学技术名词审定委员会审定公布编辑本段下游产品开发三光气将有一定反应活性的双功能基试剂氯乙醇和L—谷氨酸直接酯化保护羧基，用三光气活化成其相应的N—羧酸酐，可直接得到侧链具有一定反应活性的聚L—氯乙基谷氨酸酯。
谷氨酸的结构中有一个氨基和两个羧基，在光气的作用下，羧基和氨基会形成环状N—羧酸酐，由于羧基也较为活泼，可能会参与成环反应，因此在成环反应之前，通常用苄醇将羧基进行保护，这样得到的聚合物的侧链活性极低，一般需经进一步氢化脱苄或胺解脱苄，才能得到有反应活性的侧链，我们选用双功能基试剂氯乙醇作保护基因，在聚合之后可直接得到有反应活性的侧链，可有效地简化合成路线。
谷氨酸苄酯侧链酯化过程是一个可逆反应，随着体系内水含量的不断增加，反应速度会降低，导致产率不高。
在形成谷氨酸苄酯时，采用分子筛脱水，操作大大简化。
新型的聚合氨基酸，含有氨基的药物或靶向基因，可以方便的接入聚谷氨酸的分子中，形成大分子前药或靶向大分子载体，接入特异性的基因，可进行特殊的分离或提纯，这一聚合物在医药领域会有很广泛的应用前景。
谷氨酸可生产许多重要下游产品如L—谷氨酸钠、L—苏氨酸、聚谷氨酸等。
食品业氨基酸氨基酸作为人体生长的重要营养物质，不仅具有特殊的生理作用，而且在食品工业中具有独特的功能。
构成蛋白质的氨基酸主要有20多种。
在食品工业中应用较多的氨基酸有谷氨酸、赖氨酸、半胱氨酸、胱氨酸、苏氨酸、精氨酸、缬氨酸、色氨酸、丙氨酸等。
谷氨酸(Glu)检测
谷氨酸（Glu）检测
谷氨酸（Glutamic acid, Glu），又称麸氨酸，是一种酸性氨基酸，分子内含两个羧基。
大量存在于谷类蛋白质中，动物脑中含量也较多。
谷氨酸在生物体内
的蛋白质代谢过程中占重要地位，参与动物、植物和微生物中的许多重要化学
反应。
L-谷氨酸主要用于生产味精、香料，以及用作代盐剂、营养增补剂和生
化试剂等。
迪信泰检测平台采用高效液相色谱(HPLC)和液质联用(LC-MS)法，可高效、精准的检测谷氨酸的含量变化。
此外，我们还提供其他氨基酸及其代谢物检测服务，以满足您的不同需求。
HPLC和LC-MS测定谷氨酸样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期：2~3周
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报
告包括：
1. 实验步骤（中英文）
2. 相关质谱参数（中英文）
3. 质谱图片
4. 原始数据
5. 谷氨酸含量信息
迪信泰检测平台可根据需求定制其他物质测定方案，具体可免费咨询技术支持。
LC-MS氨基酸测定项目样本报告，点击查看>。
氨基酸分子量及解离常数测定
实验六 氨基酸分子量及解离常数测定实验目的1.掌握酸度计的基本结构及操作。
2.掌握玻璃电极的基本结构、保存和是使用。
3.掌握缓冲溶液在测定溶液酸度上的应用。
4.掌握电位滴定曲线的绘制及滴定终点的确定方法。
5.掌握电位滴定在测定物质物理常数上的应用。
实验原理玻璃电极属于以玻璃薄膜作为敏感膜的一类选择电极，可对溶液中的氢离子产生选择性响应，其电极电位与被测氢离子浓度之间符合能斯特关系，可应用于氢离子浓度或溶液酸度值的测定。
本实验采用玻璃电极为指示电极，饱和甘汞电极为参比电极与被测溶液组成电池，利用酸度计测定溶液酸度值，电池如下：Ag ∣AgCl(s),内参比溶液∣玻璃膜∣待测溶液∣∣KCl(饱和)，Hg 2Cl 2（s ）∣Hg在构成的电池中，饱和甘汞电极的电极电位保持不变，玻璃电极的电极电位仅随待测液中的H +浓度变化而变化，可表示如下： E=K+nF RT 303.2lg[H +]=K-nFRT 303.2pH 谷氨酸是分子内含羧基的二元酸，其分子式为C 5H 9O 4N,分子量为147.13，第二解离常数很小，采用一般滴定分析不容易观察到滴定突跃。
在谷氨酸与NaOH 溶液的滴定过程中，随着NaOH 的不断加入，溶液中的H +浓度不断变化，由此引起的溶液的酸度值（电池的电动势）也不断变化，达到滴定化学计量点附近，将产生H 离子浓度的突跃，从而可以根据溶液酸度值的变化确定滴定第一化学计量点，以此为根据，可推算谷氨酸与NaOH 溶液滴定的第二化学计量点（V 终点2=2V 终点1），可根据反应摩尔比求出谷氨酸的分子量。
谷氨酸在水溶液中的电离平衡为：H 2A=HA -+H + Ka1=][]][[2A H HA H -+=6.31×10-5………………① HA -=A 2-+H+ Ka2=][]][[2--+HA A H =2.57×10-10 从中可以看出，当滴定进行到计量点的一半（即0.5V 终点）时，溶液中[H 2A]=[HA -],代入①式，则看、Ka1=[H +],即pKa1=pH,因此只要确定滴定的终点，并在滴定曲线上找到0.5V 终点所对应的pH,就可以求出谷氨酸的第一级解离常数；同理，在滴定曲线上找到1.5V 终点对应的pH ，就可以求出谷氨酸的第二级解离常数，而根据谷氨酸与NaOH 滴定至第一化学计量点时的反应摩尔比，就可以计算出谷氨酸的分子量。
dl-谷氨酸氢谱,
dl-谷氨酸氢谱,
谷氨酸（Glutamate）是一种氨基酸，其分子式为C₅H₉NO₄，分子量为147.13。
谷氨酸具有两个离子化的羧基，可以失去一个质子成为谷氨酸阴离子（谷氨酸负离子）。
其氢谱可以通过核磁共振（NMR）技术来研究。
根据谷氨酸的分子结构，其氢谱中有许多不同的质子，分别位于不同的化学位移（Chemical Shift）位置。
常见的谷氨酸氢
谱峰包括α-氢（Alpha hydrogen）、β-氢（Beta hydrogen）、
γ-氢（Gamma hydrogen）和酰基羟氢（Acyl hydrogens）等。
谷氨酸的氢谱可以提供谷氨酸分子结构的信息，例如不同质子的化学位移和相对强度可以用来确定谷氨酸的分子结构和连接方式。
同时，氢谱还可以提供谷氨酸的相对含量信息，从而用于定量分析。
需要注意的是，谷氨酸的氢谱可能会受到外界因素的影响，如溶剂效应、温度等。
因此，在进行谷氨酸的氢谱测定时，需要控制好实验条件，以确保结果的准确性和可靠性。
纸色谱实验报告谷氨酸
纸色谱实验报告谷氨酸
通过纸色谱实验，研究和分离谷氨酸（glutamic acid）。
实验原理：
纸色谱是通过纸层与移动相的相互作用来分离混合物中的不同成分的一种分离方法。
谷氨酸是一种氨基酸，其在纸上的迁移速度与纸上吸附性质有关，可以通过纸色谱实验来分离。
实验步骤：
1. 准备纸色谱材料：将纸层剪成适当的大小，然后在纸层上画上一个起始线和一个终点线。
2. 准备样品：将谷氨酸溶解在适量的溶剂中，制备样品溶液。
3. 在起始线上滴上样品溶液，并允许其渗透进入纸层。
4. 将纸层放入移动相中，使其与纸上的样品反应。
5. 当移动相渗透到终点线附近时，取出纸层并将其干燥。
6. 将纸层暴露在紫外灯下，观察样品的迁移情况，并记录。
实验结果：
通过纸色谱实验，我们观察到谷氨酸在纸上迁移的位置，通常为终点线上方的一个或多个斑点。
不同的谷氨酸衍生物可能会在纸上迁移的位置有所不同，因此可以通过纸色谱实验来鉴定和分离不同的化合物。
实验结论：
纸色谱实验可用于分离谷氨酸以及其他氨基酸等化合物。
通过观察纸上样品的迁移位置，可以对混合物中的化合物进行分离和鉴定。
纸色谱实验是一种简单、经济且有效的分离方法，在实际应用中有着广泛的应用价值。
谷氨酸分子量及离解常数测定
谷氨酸分子量及离解常数测定实验六谷氨酸分子量及离解常数测定实验目的和要求：1.掌控酸度计的基本结构及操作方式；2.掌握玻璃电极的基本结构、保存和使用；3.掌握标准缓冲溶液在测定溶液酸度上的应用；4.掌握电位滴定曲线的绘制及滴定终点的确定方法；5.掌握电位滴定在测定物质物理常数上的应用。
实验原理：玻璃电极属于以玻璃薄膜作为敏感膜的一类离子选择电极，可对溶液中的氢离子产生选择性响应，其电极电位与被测氢离子浓度之间符合能斯特关系，可应用于氢离子浓度或溶液酸度值的测定。
本实验使用玻璃电极为命令电极，饱和状态甘汞电极为参比电极与被测溶液共同组成电池，利用酸度计测量溶液酸度值，电池共同组成如下：ag｜agcl(s),内参比溶液｜玻璃膜｜待测溶液‖kcl(饱和)，hg2cl2(s)｜hg在形成的电池中，饱和状态甘汞电极的电极电位维持维持不变，玻璃电极的电极电位仅随着等待随+溶液中的h溶液变化而变化，可以则表示如下：e?k?2.303rt2.303rtlg[h?]?k?phnfnf谷氨酸就是分子附带两个羧基的二元酸，其分子式为c5h9o4n,分子量为147.13，其第二离解常数不大，使用通常电解分析不难观测至电解滴定。
+在谷氨酸与naoh溶液的电解过程中，随着naoh的不断重新加入，溶液中的h浓度不断变化，+由此引发溶液的酸度值也不断变化，达至电解化学终点附近就是，将产生h浓度的滴定。
因此只要确认也扭住终点，并在电解曲线的找到0.5v终点所对应的ph值，就可以谋出来谷氨酸的第一级解离常数，在电解曲线上找到1.5v终点所对应的ph值，就可以谋出来谷氨酸的第二级解离常数；而根据谷氨酸与naoh电解至第一化学计量点时的反应摩尔比，可以排序出来谷氨酸的分子量。
实验仪器与试剂：1.phs-3cw酸度计2.naoh标准溶液（0.1000mol/l）3.谷氨酸标准溶液4.ph复合电极一只5.系列标准缓冲溶液6.磁力搅拌器一台7.25ml移液管一只8.100ml玻璃烧杯1个实验步骤：1.滴定前准备按照仪器建议，加装phs-3cw酸度计，分别接通玻璃电极、ph无机电极。
L-谷氨酸的测定
自2011年4月起生效的日本药典第16版中，在药品各条部分追加了超过100种药品的试验方法。
在此，我们向您介绍新收录品种之一L-谷氨酸的检查项目(有关物质) 的测定例。
L-8900全自动氨基酸分析仪通过安装总长80 mm 的高分离度色谱柱即可满足药典规定的试验条件。
仅满足药典规定的系统适用性时，存在无法检测出与主成分相邻洗脱的微量有关物质的情况，因此本次开发的高分离度方法不仅能够满足药典规定的试验条件，更能够保证与主成分相邻物质的分离度。
另外，测定条件中记载的市售试剂（流动相、反应液）与药典中规定的组成一致，因此无需配制，可直接使用。
■标准样品测定例(系统适用性的确认)■日本药典第16版收录药品的测定例(L-谷氨酸)【药典规定浓度的标准溶液测定例】【L-谷氨酸(Glu) 的结构式】系统适用性项目0.3 nmol/20 μL的要求值0.3 nmol/20 μL 的测定结果系统性能Gly-Ala 的分离度1.2 以上2.8系统的重现性各氨基酸的保留时间的相对标准偏差(n = 6) 1.0 % 以下0.05 ～0.16 %各氨基酸的峰高的相对标准偏差(n = 6)5.0 % 以下0.14 ～0.85 %■L-谷氨酸药品模型样品测定例(有关物质的测定)【各氨基酸添加量相当于0.2 % 的谷氨酸测定例】【系统适用性】相对于要求值，分离度、相对标准偏差均获得了充分满足要求的结果。
【L-谷氨酸(Glu)的有关物质的确认】在日本药典第16版中，作为检查(7) 有关物质的确认，规定“Glu 以外的各氨基酸的量应在0.2 % 以下”。
在此向按照药典规定浓度配制的Glu 中分别添加约相当于其0.2 % 的氨基酸，作为模拟样品。
结果，得到了理想的峰高和分离度，可见本方法适用于有关物质的试验。
对于有关物质的测定，保证药典的系统适用性所规定的(Gly-Ala) 分离度自不待言，主成分与其前后峰的良好分离度也非常重要。
本方法以药典为基准，有效利用粒径3 μm 离子交换树脂/ 柱长80 mm 的高分离度色谱柱的性能，除L-谷氨酸(Glu)外，也可适用于日本药典第16版药品各条中收录的L-丙氨酸(Ala)、L-赖氨酸醋酸盐(Lys)、L-脯氨酸(Pro)的有关物质的试验。
化验谷氨酸基本操作
化验谷氨酸的基本操作1、纯度的测定：（1）原理：有机化合物具有的不对称原子均有旋光性，当偏振光通过时能使偏光旋转，旋转程度以角度表示。
谷氨酸含有不对称碳原子，具有旋光性，不用旋光仪观察测定。
（2）试剂和仪器：①分刻度0.01旋光仪（光源为纳光）②浓盐酸、烧杯、容量瓶、漏斗、玻璃棒。
（3）测定手续：称取10.0000g样品，加少许水和浓盐酸16ml，用玻璃棒搅拌溶解，加水定容至100ml。
摇匀后，倾入干燥烧杯中，加0.5g活性炭，搅拌，脱色，并用滤纸过滤，滤液注入2分米的旋光管中，以589ml纳光灯为光源，在旋光仪中观测旋光度，记下滤液温度。
（4）计算方法：GA=〔∝〕d t×V/L×G×〔32+0.06×(20℃-t℃)〕*100% V——样品稀释的体积〔∝〕d t ——t℃时测定样品的旋光度L——旋光管的长度（dm）G——样品重量（g）32+0.06×(20℃-t℃)——纯GA在t℃时旋光度.2、透光率：称取试样5g（精度0.1g）,x n1:5Hcl 20-30ml,放电炉上加热至沸后，放置室温，以1：5Hcl定容至100ml,以蒸馏水作空白，以波长590nm光测出试样的透光率。
3、硫酸盐的测定：（1）药品：① 0.1mg/ml 硫酸盐② 40%的NaOH③ 6.4—8.0试纸④活性炭⑤Bacl⑥10%的盐酸0.1mg/ml硫酸盐的配制方法：称取0.148g于105—110℃干燥恒重的无水硫酸钠，溶于水定容至1000ml.( 2 ) 样品的制备：称5g试样（精度0.1g）于烧杯中，加蒸馏水50ml,加热溶解，用40%NaOH调PH6.7—7.0，再定容至100ml，加1g活性炭搅匀，过滤。
( 3 ) 吸取上述滤液10ml于纳氏比色管中，再加10%盐酸2ml,同时向另一支比色管中加2ml10%Hcl，向两支比色管中同时各加5%Bacl 5ml,向空白比色管中滴加硫酸盐标液；直到其浑浊程度与样品管中的浑浊程度相一致，记下所用硫酸盐标液的体积。
谷氨酸——精选推荐
⾕氨酸⾕氨酸发酵综述⾕氨酸（glutamic acid）化学式为C5H9O4N，是⼀种酸性氨基酸，化学名称为α-氨基戊⼆酸，是20种常见α-氨基酸之⼀。
⾕氨酸为⽆⾊晶体，结晶状态是稳定的，微溶于⽔但溶于盐酸溶液，密度为1.538（kg/m3），等电点为3.22，⾕氨酸有左旋体，右旋体，和外消旋体。
⾕氨酸的解离常数：pK’1(COOH)为2.19，pK’2(NH3+)为4.25(γ-COOH),pK’3为9.67（NH3+）。
⾕氨酸是⾮必需氨基酸的⼀种，⼤量存在与⾕类中，⾕氨酸有鲜味，⾕氨酸钠是味精的主要成分，⽤于增加⾷物的鲜味。
正⽂：⼀：⾕氨酸发酵在⾕氨酸发酵中，改变细胞膜的通透性，使⾕氨酸不断地排到细胞外⾯，就会⼤量⽣成⾕氨酸。
研究表明，影响细胞膜通透性的主要因素是细胞膜中的磷脂含量。
因此，对⾕氨酸产⽣菌的选育，往往从控制磷脂的合成或使细胞膜受损伤⼊⼿，如⽣物素缺陷型菌种的选育。
⽣物素是不饱和脂肪酸合成过程中所需的⼄酰CoA的辅酶。
⽣物素缺陷型菌种因不能合成⽣物素，从⽽抑制了不饱和脂肪酸的合成。
⽽不饱和脂肪酸是磷脂的组成成分之⼀。
因此，磷脂的合成量也相应减少，这就会导致细胞膜结构不完整，提⾼细胞膜对⾕氨酸的通透性。
1，⾕氨酸发酵是典型的代谢控制发酵，环境条件对⾕氨酸发酵具有重要的影响，控制最适宜的环境条件是提⾼发酵产率的重要条件。
（1）碳源⽬前使⽤的⾕氨酸⽣产菌均不能利⽤淀粉只能利⽤葡萄糖和果糖等。
在⼀定的范围内，⾕氨酸产量随葡萄糖浓度的增加⽽增加，但若葡萄糖浓度过⾼，由于渗透压⼒⼤对菌体⽣长很不利，⾕氨酸对糖的转化率降低。
国内⾕氨酸发酵糖浓度为125—150g/L，但⼀般采⽤流加糖⼯艺。
（2）氮源常见⽆机氮源：尿素，液氮，碳酸氢铵。
常见有机氮源：⽟⽶浆，⾖浓，糖蜜。
当氮源的浓度过低时回事菌体细胞营养过度贫乏，形成“⽣理饥饿”，影响菌体繁殖和代谢，导致产酸率低。
随着⽟⽶浆的浓度增⾼，菌体⼤量增殖使⾕氨酸⾮积累型细胞增多，同时⼜因⽣物素过量是代谢合成磷脂增多，导致细胞膜增厚不利于⾕氨酸的分泌造成⾕氨酸产量下降。
实验二离子交换法提取谷氨酸分析解析
实验二离子交换法提取谷氨酸一、实验目的掌握离子交换装置的结构和使用方法。
掌握离子交换法提取谷氨酸的工艺流程。
掌握等电点沉淀法提取谷氨酸。
了解认识离子交换树脂的处理和再生。
二、实验原理谷氨酸是两性电解质，是一种酸性氨基酸，等电点为pH3.22,当pH> 3.22时，羧基离解而带负电荷，能被阴离子交换树脂交换吸附；当pH< 3.22时，氨基离解带正电荷，能被阳离子交换树脂交换吸附。
也就是说，谷氨酸可被阴离子交换树脂吸附也可以被阳离子交换树脂吸附。
由于谷氨酸是酸性氨基酸，被阴离子交换树脂的吸附能力强而被阳离子交换树脂的吸附能力弱，因此可选用弱碱性阴离子交换树脂或强酸性阳离子交换树脂来吸附氨基酸。
但是由于弱碱性阴离子交换树脂的机械强度和稳定性都比强酸性阳离子交换树脂差，价格又较贵，因此就都选强酸性阳离子交换树脂而不选用弱碱性阴离子交换树脂。
目前各味精厂均采用732#强酸性阳离子交换树脂，本实验就是采用732#树脂。
谷氨酸溶液中既含有谷氨酸也含有其他如蛋白质、残糖、色素等妨碍谷氨酸结晶的杂质存在，通过控制合适的交换条件，在根据树脂对谷氨酸以及对杂质吸附能力的差异，选择合适的洗脱剂和控制合适的洗脱条件，使谷氨酸和其他杂质分离，以达到浓缩提纯谷氨酸的目的。
三、实验装置1、离子交换装置本实验采用动态法固定床的单床式离子交换装置。
离子交换柱是有机玻璃柱，柱底用玻璃珠及玻璃碎片装填，以防树脂漏出。
2、树脂本实验用苯乙烯型强酸性阳离子交换树脂，编号为732#，其性能如下表：732#树脂的主要性能常数3、树脂的处理对市售干树脂，先经水充分溶胀后，经浮选得到颗粒大小合适的树脂，然后加3倍量的2mol/L HCL溶液，在水浴中不断搅拌加热到80C, 30min后自水溶液中取出，倾去酸液，用蒸馏水洗至中性，然后用2mol/L NaOH溶液，同上洗树脂30min后，用蒸馏水洗至中性，这样用酸碱反复轮洗，直到溶液无黄色为止。
谷氨酸的解离公式
谷氨酸的解离公式
解离方程式：HOOC-CH2-CH2CH(NH2)-COOH+CH3-CH(CH3)-CH(NH2)-COOH+NH2CH2COOH=HOOC-CH2HNOC-CH2-CH2CH(NH2)-CONH(COOH)CH-
CH(CH3)CH3+2H2O。
甘氨酸的解离常数是PK1＝2.34，PK2＝9.60，等电点
pI=(pK1+pK2)/2=(2.34+9.60)/2=5.97。
扩展资料：
等电点是一个分子或者表面不带电荷时的pH值。
是针对带电荷的物质而言，不只限于两性电解质如氨基酸和蛋白质。
当然，蛋白质是两性电解质，其等电点和它所含的酸性氨基酸和碱性氨基酸的数量比例有关。
各种蛋白质因氨基酸残基组成不同，等电点也不一样。
当溶液在某一特定pH值的条件下，蛋白质所带正电荷与负电荷恰好相等（总净电荷为零）时，在电场中既不向阳极移动，也不向阴极移动。
因此利用电泳的方法可以确定蛋白质的等电点，也可以将不同带电性质和不同大小、形状的蛋白质分子进行分离纯化。
蛋白质在等电点时，因为没有相同电荷而互相排斥的影响，所以最不稳定，溶解度最小，极易借静电引力迅速结合成较大的聚集体，因而沉淀析出。
同时蛋白质的黏度、渗透压、膨胀性以及导电能力均为最小。
谷氨酸检验操作规程
谷氨酸检验操作规程1．目的：建立谷氨酸检验操作规程，便于检验人员规范操作。
2．范围：适用于配制各种氨基酸注射液谷氨酸测定。
3．责任：质检科检验员对实施本规程负责。
4．程序：4.1性状：本品为白色结晶或结晶性粉末，味微酸。
4.2鉴别试验4.2.1 本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集958图）一致。
4.3 酸度（pH）值测定4.3.1测定范围：3.0～3.54.3.2配制溶液：称取本品0.2g，加新沸过的冷水20ml溶解。
4.3.3操作步骤：同亮氨酸。
4.4溶液的透光度测定4.4.1测定范围：>99.0%4.4.2试剂和试液：2mol/LHCl：取18ml盐酸用水稀释至100ml，即得。
4.4.3溶液配制；称取本品1.0g溶于2mol/L盐酸20ml中。
4.4.3操作步骤：同亮氨酸。
4.5比旋度测定4.5.1测定范围：+31.50～+32.504.5.2试剂和试液：2mol/LHCl溶液：吸取18ml盐酸，加水稀释至100ml。
4.5.3操作步骤：取样品，精密称定，加2mol/LHCl溶液溶解并稀释成每1ml中含70mg的溶液，依法测定（见旋光度测定操作规程）。
4.6氯化物4.6.1测定范围：<0.02%4.6.2试剂和试液：同亮氨酸4.6.3操作步骤：同亮氨酸4.7硫酸盐4.7.1测定范围：<0.02%4.7.2试剂和试液：同亮氨酸4.7.3操作步骤：同亮氨酸4.8铵盐4.8.1测定范围：<0.02%4.8.2试剂和试液：同亮氨酸4.8.3操作步骤：同亮氨酸4.9铁盐4.9.1测定范围：<0.0005%4.9.2试剂和试液：同亮氨酸4.9.3操作步骤：取本品2.0g ,加稀盐酸6ml与水适量，加热使溶解，放冷，加水至25ml，依法检查（见铁盐检查操作规程），与标准铁溶液1.0ml制成的对照液比较，样品管颜色应浅于对照管颜色。
4.10重金属4.10.1测定范围：<百万分之十。
谷氨酸钠的分子量
谷氨酸钠的分子量介绍谷氨酸钠是一种无色结晶性固体，化学式为C5H8NNaO4，属于氨基酸类化合物。
它在生物体内起着重要的生理功能，是蛋白质合成和能量代谢的关键成分之一。
本文将详细介绍谷氨酸钠的分子量及其在生物体内的作用。
谷氨酸钠的分子量计算谷氨酸钠的分子量可以通过对其化学式中各元素的原子量进行求和来计算。
谷氨酸钠的化学式中包含5个碳原子（C），8个氢原子（H），1个氮原子（N），1个钠原子（Na）和4个氧原子（O）。
根据各元素的原子量，可以得到谷氨酸钠的分子量计算公式如下：分子量 = 5 * 原子量（碳） + 8 * 原子量（氢） + 原子量（氮） + 原子量（钠）+ 4 * 原子量（氧）根据国际纯净化学与应用化学联合会（IUPAC）提供的元素的原子量数据，可以得到谷氨酸钠的分子量计算结果如下：分子量 = 5 * 12.01 g/mol + 8 * 1.01 g/mol + 14.01 g/mol + 22.99 g/mol +4 * 16.00 g/mol分子量≈ 147.13 g/mol因此，谷氨酸钠的分子量约为147.13 g/mol。
谷氨酸钠在生物体内的作用谷氨酸钠在生物体内具有多种重要的生理功能。
下面将详细介绍谷氨酸钠在蛋白质合成、能量代谢和神经递质合成等方面的作用。
1. 蛋白质合成谷氨酸钠是蛋白质合成的重要组成部分。
在生物体内，谷氨酸钠可以通过转氨基酶的作用将其氨基团转移给其他氨基酸，从而参与新的蛋白质合成。
谷氨酸钠的氨基团可以与其他氨基酸的羧基进行缩合反应，形成肽键，进而构建蛋白质的多肽链。
因此，谷氨酸钠在细胞内起着至关重要的蛋白质合成作用。
2. 能量代谢谷氨酸钠在能量代谢中也发挥着重要的作用。
在生物体内，谷氨酸钠可以通过一系列代谢途径参与三羧酸循环（也称为克恩环）的过程。
在三羧酸循环中，谷氨酸钠与其他代谢产物相互作用，通过氧化反应释放能量，并最终转化为细胞所需的三磷酸腺苷（ATP）。
发酵过程中谷氨酸含量的测定
发酵过程中谷氨酸含量的测定发酵过程中谷氨酸含量的测定 [适用对象] 生物工程专业 [实验学时] 8学时一、实验目的了解华勃氏呼吸仪的使用方法，熟悉用华勃氏呼吸仪测定谷氨酸含量。
二、实验原理发酵液中谷氨酸含量的测定，普遍使用华勃氏呼吸仪，利用专一性较高的大肠杆菌L-谷氨酸脱羧酶，在一定温度(37?)、一定pH值(4.8,5.0)和固定容积下，使L-谷氨酸脱羧生成二氧化碳。
通过测量反应系统中气体压力的升高，可计算出反应生成的二氧化碳的体积，然后换算成试样中谷氨酸的含量。
三、仪器设备华氏呼吸仪，1毫升移液管，检压管，反应瓶。
四、相关知识点大量形成谷氨酸是生产的目的，目前均采用华勃氏呼吸仪测定法。
一般从发酵12小时开始，每隔2-4小时测定一次。
五、实验步骤(一)检压管及反应瓶的准备将标定完反应瓶常数的检压管及反应瓶磨砂口上的高真空油脂用毛边纸擦试干净，再用棉花用少量二甲苯擦一次，用自来水清洗净后再用稀洗液浸泡约3小时，用自来水洗净，蒸馏水淋洗2次，去水后低温烘干。
在检压管下端按上一干净的短橡皮管，橡皮管末端用玻璃珠塞住。
小心将检压管固定在金属板上，在橡皮管内注入检压液。
打开三通活塞，旋动螺旋压板，检压液应能上升到最高刻度处，液柱必须连续，不能有气泡，两边高度应一致。
(二)发酵液的稀释本法要求试样含谷氨酸0.05,0.15,，否则反应生成二氧化碳太多，压力升高太大以致超过检压管刻度而无法读数。
一般发酵终了发酵液含谷氨酸6,8,，故应稀释50倍:吸取发酵液2mL，注入100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀即可。
(三)加液分别吸取上述发酵稀释液1mL，pH5.0醋酸-醋酸钠缓冲液0.2mL和蒸馏水1.0mL，置入反应瓶主室，另吸取0.3mL 2,大肠杆菌谷氨酸脱羧酶液置于反应瓶侧室内，使总体积为2(5mL。
主侧二室瓶口均以活塞脂涂沫，旋紧瓶塞，将反应瓶用小弹簧紧固在检压管上，将检压计装在仪器的恒温水浴振荡上(四)预热将仪器的电源接通，调节水浴温度为37?，打开三通活塞，旋动螺旋压板，调节液面高度达250mm以上，开启振荡;使在37?水浴中平衡约10分钟。
氨基酸的测定方法
食物中氨基酸的测定方法测定食物中的胱氨酸使用过甲酸氧化-氨基酸自动分析仪法，测定色氨酸使用荧光分光光度法，测定其它氨基酸使用氨基酸自动分析仪法。
一、氨基酸自动分析仪法1.原理食物蛋白质经盐酸水解成为游离氨基酸，经氨基酸分析仪的离子交换柱分离后，与茚三酮溶液产生颜色反应，再通过分光光度计比色测定氨基酸含量。
一份水解液可同时测定天冬，苏，丝，谷，脯，甘，丙，缬，蛋，异亮，亮，酪，苯丙，组，赖和精氨酸等16种氨基酸，其最低检出限为10pmol。
2.适用范围GB/T14965-1994食物中氨基酸的测定方法。
本法适用于食物中的16种氨基酸的测定。
其最低检出限为10pmol。
本方法不适用于蛋白质含量低的水果、蔬菜、饮料和淀粉类食物的测定3.仪器和设备3.1真空泵3.2恒温干燥箱3.3水解管：耐压螺盖玻璃管或硬质玻璃管，体积20～30ml。
用去离子水冲洗干净并烘干。
3.4真空干燥器（温度可调节）3.5氨基酸自动分析仪。
4.试剂全部试剂除注明外均为分析纯，实验用水为去离子水。
4.1浓盐酸：优级纯4.26mol/L盐酸：浓盐酸与水1：1混合而成。
4.3苯酚：需重蒸馏。
4.4混合氨基酸标准液（仪器制造公司出售）：0.0025mol/L4.5缓冲液：4.5.1 pH2.2的柠檬酸钠缓冲液：称取19.6g柠檬酸钠（Na3C6H5O7.2H2O）和16.5ml浓盐酸加水稀释到1000ml，用浓盐酸或50%的氢氧化钠溶液调节pH至2.24.5.2 pH3.3的柠檬酸钠缓冲液：称取19.6g柠檬酸钠和12ml浓盐酸加水稀释到1000ml，用浓盐酸或50%的氢氧化钠溶液调节至pH至3.3。
4.5.3 pH4.0的柠檬酸钠缓冲液：称取19.6g柠檬酸钠和9ml浓盐酸加水稀释到1000ml，用浓盐酸或50%的氢氧化钠溶液调节pH至4.0。
4.5.4 pH6.4的柠檬酸钠缓冲液：称取19.6g柠檬酸钠和46.8g氯化钠（优级纯）加水稀释到1000ml，用浓盐酸或50%的氢氧化钠溶液调节pH至6.4。
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六．体会 1．在读数时要等读数稳定后（三秒不变为准）才能进行记录，搅拌要均匀快速； 2．滴定开始前，要用标准系列缓冲溶液进行校正，调节斜率以及温度等，校正时顺序一定 要正确，一旦校正好后，不能再改变这些值； 3．PH 复合电极在每次放入不同的溶液前都要用蒸馏水进行清洗，用完后要放在 3mol/lKCL 溶液中保存； 4．用滴定管滴定时一定要注意用量的准确，因为每一次滴的量比较小，而次数多，尽量减 小误差。
谷氨酸分子量及离解常数测定
班级：2010 检本 x 班 姓名：陈 xx 学号：201022xxxx 合作者：xx 一．实验目的 1. 掌握酸度计的基本结构及操作； 2. 掌握玻璃电极的基本结构.保存和使用； 3. 掌握标准缓冲溶液在测定测定溶液酸度上的应用； 4. 掌握电位滴定曲线的绘制及滴定终点的确定方法； 5. 掌握电位滴定在测定物质物理常数上的应用。 二．实验原理 用玻璃电极做为指示电极，玻璃电极的电极电位仅随着待测溶液中的 H+浓度变化 而变化； 在谷氨酸与 NAOH 溶液的滴定过程当中，随着 NAOH 的不断加入，溶液中 的 H+浓度不断变化， 由此引起溶液的酸度值也不断变化， 达到滴定化学计量点附近时， 将产生 H+浓度的突跃，从而可以根据溶液的酸度值变化确定第一化学计量点，以此为 根据，可推算谷氨酸与 NAOH 溶液滴定的第二化学计量点，并可根据反义摩尔比求出 谷氨酸分子量。 三．实验仪器与试剂 PHS—3CW 型酸度计，NAOH 标准溶液（0.1000mol/L） ，谷氨酸标准溶液，PH 复合电 极，系列标准缓冲溶液，磁力搅拌器一台，25ml 移液管 1 只，100ml 玻璃烧杯 1 个 四．实验步骤 1．校正：.将酸度计调节于测定“PH”位，按照仪器操作程序分别用系列标准溶液完成仪 器各项调节 2．装液：分别用烧杯盛装谷氨酸溶液，放在磁力搅拌器上，插入 PH 复合电极，用碱式 滴定管盛装 NAOH 标准溶液 3．操作：酸碱中和滴定，读取不同滴定体积时所对应的 PH 值 V(NAOH)ml PH V(NAOH)ml PH V(NAOH)ml PH V(NAOH)ml PH V(NAOH)ml PH V(NAOH)ml PH V(NAOH)ml PH V(NAOH)ml PH 0.00 2.75 3.50 3.42 7.00 3.93 10.50 4.72 14.00 8.05 17.50 8.81 21.00 9.37 24.50 10.01 0.05 2.85 4.00 3.49 7.50 4.00 11.00 5.10 14.50 8.22 18.00 8.88 21.50 9.43 25.00 10.14 1.00 2.96 4.50 3.58 8.00 4.08 11.50 6.30 15.00 8.35 18.50 8.95 22.00 9.51 25.50 10.25 1.50 3.05 5.00 3.65 8.50 4.18 12.00 7.10 15.50 8.45 19.00 9.06 22.50 9.60 26.00 10.35 2.00 3.15 5.50 3.72 9.00 4.26 12.50 7.36 16.00 8.54 19.50 9.14 23.00 9.69 26.50 10.46 2.50 3.24 6.00 3.79 9.50 4.37 13.00 7.60 16.50 8.63 20.00 9.20 23.50 9.77 27.00 10.53 3.00 3.32 6.50 3.86 10.00 4.55 13.50 7.82 17.00 8.73 20.50 9.28 24.00 9.90 27.50 10.60
五．实验数据处理 1．滴定曲线绘制 在坐标纸上以测定的 PH 值为纵坐标，滴加的 NAOH 标准溶液体积为横坐标制图，绘 制滴定曲线。
滴定曲线 12
PH
10
PH=pka2
8 6
PH=pka1
4 2 0
-5
0
5
10V 终点
15
20
25 NaOH体积
பைடு நூலகம்
30
2．采用作图法求出滴定终点 3．谷氨酸的分子量计算 V 终点=11.80ml W 谷氨酸=6.9536（g/l） C（NAOH）=0.1000mol/l 谷氨酸分子量=W 谷氨酸×25.00÷（C(NAOH)×V 终点）=147.32 4．结果比较 第一化学计量点（V 终点） 第二化学计量点 0.5V 终点 1.5V 终点 谷氨酸分子量计算值 谷氨酸 PKA1 谷氨酸 PKA2 11.80ml 23.6ml 5.90ml 17.70ml 147.32 3.97 9.15 —— —— —— —— 理论值=147.13 谷氨酸 PKA1=4.20 谷氨酸 PKA2=9.59