细胞数的测定(血球计数板的使用方法)
细胞计数方法细胞计数板法
细胞计数方法——---—细胞计数板法实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中得细胞得数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞得细胞数目。
具体操作:1. 将计数板及盖片擦拭干净,并将盖片盖在计数板。
2、将细胞悬液吸出少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片与计数板之间,静置3min,注意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中。
3。
计算板四大格细胞总数,压线细胞只计左侧与上方得。
然后按公式计算:细胞数/mL=四大格细胞总数/4×10个/ml(注:当细胞很多时,可在四个格中选一定数目较平均得小格,由于每大格中有16个小格,然后计左侧与上方得细胞数,求出每小格得细胞数,取平均值m,m×16即每个格得平均值。
所以,细胞密度=m×16×10个/ml)说明:公式中除以4,因为计数了4个大格得细胞数。
公式中乘以10因为计数板中每一个大格得体积为:1。
0mm(长)×1.0mm(宽)×0。
1mm(高)=0.1mm 而1ml=1000ul=1000mm (注意:镜下偶见有两个以上细胞组成得细胞团,应按单个细胞计算,若细胞团10%以上,说明分散不好,需重新制备细胞悬液。
)================================================细胞计数板得使用一、血球计数板-基本构造血球计数板就是一块特制得厚型载玻片,载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间得平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各刻有一小方格网,每个方格网共分九个大格,中央得一大格作为计数用,称为计数区。
计数区得刻度有两种:一种就是计数区分为16个大方格(大方格用三线隔开),而每个大方格又分成25个小方格;另一种就是一个计数区分成25个大方格(大方格之间用双线分开),而每个大方格又分成16个小方格。
但就是不管计数区就是哪一种构造,它们都有一个共同特点,即计数区都由400个小方格组成、计数区边长为1mm,则计数区得面积为1mm2,每个小方格得面积为1/400mm2。
细胞计数方法------细胞计数板法
细胞计数方法------细胞计数板法实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞的数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。
具体操作:1. 将计数板及盖片擦拭干净,并将盖片盖在计数板。
2. 将细胞悬液吸出少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片和计数板之间,静置3min,注意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中。
3. 计算板四大格细胞总数,压线细胞只计左侧和上方的。
然后按公式计算:细胞数/mL=四大格细胞总数/4×104个/ml(注:当细胞很多时,可在四个格中选一定数目较平均的小格,由于每大格中有16个小格,然后计左侧和上方的细胞数,求出每小格的细胞数,取平均值m,m×16即每个格的平均值。
所以,细胞密度=m×16×104个/ml)说明:公式中除以4,因为计数了4个大格的细胞数。
公式中乘以104因为计数板中每一个大格的体积为:1.0mm(长)×1.0mm(宽)×0.1mm(高)=0.1mm3而1ml=1000ul=1000mm3(注意:镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团,应按单个细胞计算,若细胞团10%以上,说明分散不好,需重新制备细胞悬液。
)================================================细胞计数板的使用一、血球计数板-基本构造血球计数板是一块特制的厚型载玻片,载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间的平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各刻有一小方格网,每个方格网共分九个大格,中央的一大格作为计数用,称为计数区。
计数区的刻度有两种:一种是计数区分为16个大方格(大方格用三线隔开),而每个大方格又分成25个小方格;另一种是一个计数区分成25个大方格(大方格之间用双线分开),而每个大方格又分成16个小方格。
但是不管计数区是哪一种构造,它们都有一个共同特点,即计数区都由400个小方格组成。
细胞计数方法------细胞计数板法.
细胞计数方法------细胞计数板法实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞的数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。
具体操作:1. 将计数板及盖片擦拭干净,并将盖片盖在计数板。
2. 将细胞悬液吸出少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片和计数板之间,静置3min,注意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中。
3. 计算板四大格细胞总数,压线细胞只计左侧和上方的。
然后按公式计算:细胞数/mL=四大格细胞总数/4×104个/ml(注:当细胞很多时,可在四个格中选一定数目较平均的小格,由于每大格中有16个小格,然后计左侧和上方的细胞数,求出每小格的细胞数,取平均值m,m ×16即每个格的平均值。
所以,细胞密度=m×16×104个/ml)说明:公式中除以4,因为计数了4个大格的细胞数。
公式中乘以104因为计数板中每一个大格的体积为:1.0mm(长)×1.0mm(宽)×0.1mm(高)=0.1mm3而1ml=1000ul=1000mm3(注意:镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团,应按单个细胞计算,若细胞团10%以上,说明分散不好,需重新制备细胞悬液。
)================================================细胞计数板的使用一、血球计数板-基本构造血球计数板是一块特制的厚型载玻片,载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间的平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各刻有一小方格网,每个方格网共分九个大格,中央的一大格作为计数用,称为计数区。
计数区的刻度有两种:一种是计数区分为16个大方格(大方格用三线隔开),而每个大方格又分成25个小方格;另一种是一个计数区分成25个大方格(大方格之间用双线分开),而每个大方格又分成16个小方格。
但是不管计数区是哪一种构造,它们都有一个共同特点,即计数区都由400个小方格组成。
血球计数板的计数方法
血球计数板的计数方法血球计数板是临床实验室中常用的一种计数工具,用于进行血细胞计数。
正确的计数方法对于获得准确的结果至关重要。
下面将介绍血球计数板的计数方法。
首先,准备工作。
在进行血球计数之前,需要准备好所需的实验器材和试剂。
包括血球计数板、显微镜、计数用盖玻片、血细胞计数液等。
确保实验器材的清洁和完整,以免影响计数结果。
其次,取样。
取适量的血液样品,使用吸管或注射器将血液滴在计数板的计数室中。
注意避免气泡的产生,以确保计数的准确性。
然后,计数。
将计数板放置在显微镜上,调节镜头至适当倍数。
在计数室的九个小方格中,选择几个进行计数。
根据所选小方格的面积和深度,计算出所选小方格的体积。
然后在显微镜下观察所选小方格中的血细胞数量,并进行计数。
接着,计算。
根据所选小方格的体积和计数结果,计算出每升血液中的血细胞数量。
通常情况下,计数板上的每个小方格代表的体积是已知的,根据这一体积和计数结果,可以得出血细胞的浓度。
最后,记录。
将计数结果准确记录下来,包括所选小方格的数量、计数板的倍数、计数室的体积等信息。
这些记录对于结果的准确性和可复现性具有重要意义。
在进行血球计数板的计数方法时,需要注意以下几点,首先,要保持耐心和细心,避免因匆忙而导致计数错误。
其次,要进行多次计数,并取平均值,以提高结果的准确性。
最后,要严格按照操作规程进行,避免操作失误。
总之,血球计数板的计数方法是临床实验室中常用的一种技术。
正确的计数方法能够确保结果的准确性,对于临床诊断和治疗具有重要意义。
希望本文介绍的计数方法能够对相关人员有所帮助,提高血球计数的准确性和可靠性。
细胞计数方法------细胞计数板法汇总
细胞计数方法------细胞计数板法汇总细胞计数方法------细胞计数板法实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞的数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。
具体操作:1. 将计数板及盖片擦拭干净,并将盖片盖在计数板。
2. 将细胞悬液吸出少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片和计数板之间,静置3min,注意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中。
3. 计算板四大格细胞总数,压线细胞只计左侧和上方的。
然后按公式计算:4细胞数/mL=四大格细胞总数/4×10个/ml(注:当细胞很多时,可在四个格中选一定数目较平均的小格,由于每大格中有16个小格,然后计左侧和上方的细胞数,求出每小格的细胞数,取平均值m,m 4×16即每个格的平均值。
所以,细胞密度=m×16×10个/ml) 说明:公式中除以4,因为计数了4个大格的细胞数。
4公式中乘以10因为计数板中每一个大格的体积为:331.0mm(长)×1.0mm(宽)×0.1mm(高)=0.1mm 而 1ml=1000ul=1000mm(注意:镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团,应按单个细胞计算,若细胞团10%以上,说明分散不好,需重新制备细胞悬液。
)================================================细胞计数板的使用一、血球计数板-基本构造血球计数板是一块特制的厚型载玻片,载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间的平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各刻有一小方格网,每个方格网共分九个大格,中央的一大格作为计数用,称为计数区。
计数区的刻度有两种:一种是计数区分为16个大方格(大方格用三线隔开),而每个大方格又分成25个小方格;另一种是一个计数区分成25个大方格(大方格之间用双线分开),而每个大方格又分成16个小方格。
血球计数板细胞计数法
血球计数板细胞计数法
细胞计数法是用来计数细胞悬液中细胞数量的一种方法。
一般利用计数板(血球计数板)进行。
即可用于分离(散)细胞培养接种前计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,也可用于对培养物的细胞数量进行计数。
不论计数的对象如何,均须制备分散的细胞悬液。
一、步骤
1、制备细胞悬液:对于悬液培养的细胞,可直接进行下面的步骤2(计数与计算过程)。
如果计数对象为贴壁生长的细胞,首先需将培养物按如下步骤制备成细胞悬液。
1)、终止培养,将培养液吸出,用PBS洗培养物一次。
2)、给培养瓶内加入1ml 0.25%胰蛋白酶溶液,于37℃消化3~5min 。
期间不断在镜下观察。
当细胞变圆接近脱壁时,弃消化液。
3)、加入一定量的培养液(如果这些培养细胞不再有用,可加PBS),用吸管吹打,使细胞脱壁而制成细胞悬液。
2、计数与计算过程
1)、在细胞计数板中央放置计数专用的盖玻片。
2)、用玻璃虹吸管吸取细胞,让虹吸管在盖玻片上或下侧的计数板凹蹧处流出悬液,至盖玻片被液体充满为止。
3)、置显微镜下计数四角大方格内的细胞总数。
对于压线的细胞只计数在上线和左线者,对于细胞团按单个细胞计数。
4)、按下式计数细胞悬液的密度:细胞密度=(4个大格细胞总数/4)×104个/ml 。
二、注意事项:
1)、务必使分散成单个细胞,取样计数前,充分混匀细胞悬液。
2)、显微镜下计数时,遇到2个以上细胞组成的细胞团,应按单个细胞计算。
如果细胞团>10%,说明细胞分散不充分。
三、显微镜下血球计数板如下图:。
细胞数的测定(血球计数板的使用方法)
细胞数的测定一、目的与要求了解血球计数板计数的原理,学会测定细胞总数方法。
二、原理用血球计数板在显微镜下直接计数是一种常用的微生物计数方法。
血球计数板是一块特制的厚载玻片,其上由四条槽构成三个平台,中间较宽的平台又被一短横槽隔成两半,每一边的平台上各刻有一个方格网,每个方格网共分为9个大方格,中间的大方格即为计数室。
计数室的刻度一般有两种规格,一种是一个大方格分成16个中方格,每个中方格又分成25个小格(即16x25),另一种是一个大方格分成25个中方格,每个中方格又分为16个小方格(即25×16),但无论是哪一种规格的计数板,每一个大方格中的小方格都是400个,每一个大方格边长为1 mm,则每一个大方格的面积为1 mm2,盖上盖玻片后,盖玻片与载玻片之间的高度为0.1mm,所以计数室的容积为0.1 mm3三、血球计数板的使用方法(一)菌悬液的制备为便于计数,对样品进行适当稀释,稀释程度以每小格内含5~10个酵母为宜,可采用10倍系列稀释法。
(二)加菌悬液样品将清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片,再用无菌的毛细滴管将摇匀的菌悬液由盖玻片边缘滴一小滴,让菌液沿缝隙靠毛细渗透作用自动进入计数室,用吸水纸吸去多余水液。
由盖玻片边缘或槽内加入计数板来回推压盖玻片,使其紧贴在计数板上,计数室内不能有气泡。
静置5-10分钟。
(三)显微镜计数在低倍镜下找到小方格网后更换高倍镜观察计数,上下调动细螺旋,以便看到小室内不同深度的菌体。
位于分格线上的菌体,只数两条边上的,其余两边不计数。
如数上线就不数下线,数左边线就不数右边线。
当芽孢菌体达到母细胞大小的二分之一时,可记作两个细胞。
(四)计数时若使用刻度为25×16(大格)的计数板,则数四角的4个大格(即100小格)内的菌数。
如用刻度为16×25(大格)的计数板,除数四角的4个大格外,还需数中央1个大格的菌数(即80小格)。
每小格中菌数以5-10个为宜,如菌液过浓可适当稀释。
细胞计数方法-细胞计数板法
细胞计数方法--—--—细胞计数板法实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中得细胞得数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞得细胞数目。
具体操作:1、将计数板及盖片擦拭干净,并将盖片盖在计数板.2、将细胞悬液吸出少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片与计数板之间,静置3min,注意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中。
3、计算板四大格细胞总数,压线细胞只计左侧与上方得。
然后按公式计算:细胞数/mL=四大格细胞总数/4×10个/ml(注:当细胞很多时,可在四个格中选一定数目较平均得小格,由于每大格中有16个小格,然后计左侧与上方得细胞数,求出每小格得细胞数,取平均值m,m×16即每个格得平均值。
所以,细胞密度=m×16×10个/ml)说明:公式中除以4,因为计数了4个大格得细胞数。
公式中乘以10因为计数板中每一个大格得体积为:1、0mm(长)×1、0mm(宽)×0、1mm(高)=0、1mm 而1ml=1000ul=1000mm(注意:镜下偶见有两个以上细胞组成得细胞团,应按单个细胞计算,若细胞团10%以上,说明分散不好,需重新制备细胞悬液。
)================================================细胞计数板得使用一、血球计数板-基本构造血球计数板就是一块特制得厚型载玻片,载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间得平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各刻有一小方格网,每个方格网共分九个大格,中央得一大格作为计数用,称为计数区.计数区得刻度有两种:一种就是计数区分为16个大方格(大方格用三线隔开),而每个大方格又分成25个小方格;另一种就是一个计数区分成25个大方格(大方格之间用双线分开),而每个大方格又分成16个小方格。
但就是不管计数区就是哪一种构造,它们都有一个共同特点,即计数区都由400个小方格组成。
血球计数板的使用方法
血球计数板的使用方法
一、注意事项
1. 血球计数板只能用于血液检查,不能用于测量其他物质;
2. 将血球计数板放置于平面上,确保平稳,防止晃动和碰撞;
3. 在开始测定之前,要根据靶点的电极安装完整;
4. 滴血时要涂抹几种抗凝剂,防止血液沉淀。
如果血液较深,可在计数前用刨子将血液挖出。
二、步骤
1. 将血液精确滴在血球计数板上;
2. 连接血球计数板上的接头,打开电源;
3. 根据靶点调整电位器;
4. 将光学镜头的焦距调节到节点最佳状态;
5. 通过镜头观察血液样本,一次性计数红细胞、白细胞和血小板的数量;
6. 通过刀片移动的方式,进行血球的细致观察和计数;
7. 计数结束后,关闭电源,清理血球计数板上的血液,清洗各个部分,涂抹上抗菌剂。
血球计数板的使用方法
血球计数板的使用方法血球计数板是临床实验室中常用的一种设备,用于进行血细胞计数和形态观察。
正确的使用方法对于获得准确的结果至关重要。
下面将详细介绍血球计数板的使用方法。
首先,准备工作。
在进行血球计数之前,需要准备好所需的工具和试剂,包括血球计数板、显微镜、横纹管、生理盐水、乙醇等。
确保这些工具和试剂都是清洁的,并且没有污染。
接下来,进行样本制备。
首先,将一滴血液加入到横纹管中,然后用生理盐水进行稀释,直到样本达到合适的稀释倍数。
将稀释后的样本加入到血球计数板的计数室中,确保填满计数室的每一个小格。
然后,进行计数和观察。
将血球计数板放置在显微镜上,调整倍数和焦距,观察计数室中的血细胞。
使用显微镜的目镜和物镜进行细胞计数和形态观察,记录所观察到的细胞数量和形态特征。
最后,进行数据分析和结果记录。
根据观察到的细胞数量和形态特征,进行数据分析,计算出各种血细胞的数量比例。
将结果记录在实验记录表中,并进行结果的验证和复核。
在使用血球计数板的过程中,需要注意以下几点。
首先,确保血球计数板和显微镜的清洁和干燥,避免污染和误差。
其次,稀释样本时要注意控制稀释倍数,以确保观察到合适数量的细胞。
最后,进行计数和观察时,要认真细致,避免遗漏或重复计数。
血球计数板的使用方法并不复杂,但需要严格按照操作规程进行,以确保结果的准确性和可靠性。
正确的使用方法不仅可以提高实验效率,还可以避免误差和污染,保证实验结果的科学性和可信度。
希望以上介绍对于血球计数板的正确使用有所帮助。
细胞计数方法细胞计数板法
细胞计数方法------细胞计数板法实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞的数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。
具体操作:1. 将计数板及盖片擦拭干净,并将盖片盖在计数板。
2. 将细胞悬液吸出少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片和计数板之间,静置3min,注意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中。
3. 计算板四大格细胞总数,压线细胞只计左侧和上方的。
然后按公式计算:细胞数/mL=四大格细胞总数/4×104个/ml(注:当细胞很多时,可在四个格中选一定数目较平均的小格,由于每大格中有16个小格,然后计左侧和上方的细胞数,求出每小格的细胞数,取平均值m,m×16即每个格的平均值。
所以,细胞密度=m×16×104个/ml)说明:公式中除以4,因为计数了4个大格的细胞数。
公式中乘以104因为计数板中每一个大格的体积为:1.0mm(长)×1.0mm(宽)×0.1mm(高)=0.1mm3而1ml=1000ul=1000mm3(注意:镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团,应按单个细胞计算,若细胞团10%以上,说明分散不好,需重新制备细胞悬液。
)================================================细胞计数板的使用一、血球计数板-基本构造血球计数板是一块特制的厚型载玻片,载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间的平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各刻有一小方格网,每个方格网共分九个大格,中央的一大格作为计数用,称为计数区。
计数区的刻度有两种:一种是计数区分为16个大方格(大方格用三线隔开),而每个大方格又分成25个小方格;另一种是一个计数区分成25个大方格(大方格之间用双线分开),而每个大方格又分成16个小方格。
但是不管计数区是哪一种构造,它们都有一个共同特点,即计数区都由400个小方格组成。
血球计数板的使用方法
血球计数板的使用方法
血球计数板是一种用于测量血液中各种血球数量的实验室工具。
下面是使用血球计数板的一般步骤:
1. 准备工作:
- 清洁血球计数板:使用酒精或其他适当的清洁剂将血球计
数板彻底清洁,并确保完全干燥。
- 准备血液样本:采集血液样本,并将其置于抽血管中。
2. 充填血液样本:
- 将橡胶管连接至抽血管的一端,并将另一端放入含有适当
稀释液(例如乙醇,盐水等)的试管中。
- 轻轻压抽血管,让血液与稀释液混合,确保样本适当稀释。
3. 填充计数室:
- 将计数室的一角放入混合好的血液样本液中。
- 逐渐放松手指,使液体自然充满整个计数室。
4. 观察计数室:
- 使用显微镜,在10倍或40倍放大倍数下观察计数室的血
球图像。
- 记录计数室内的血球数量。
5. 计算血球数量:
- 将计数室中各种血球的数量进行计算和统计。
- 根据计数室内的面积和深度,计算总血球数量。
- 可以使用计数室所覆盖的血球数量与已知的面积,以得出
总血球数量的近似值。
6. 清洗和储存:
- 使用适当的清洁剂彻底清洗计数室,确保无血液残留。
- 将计数室储存在干燥,洁净的地方,以防止污染和损坏。
请注意,使用血球计数板可能需要一定的实验室训练和技巧,以确保准确性和可靠性。
在进行血液分析时,应遵循实验室的操作指南和安全规定。
细胞计数方法------细胞计数板法
细胞计数方法------细胞计数板法实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞的数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。
具体操作:1. 将计数板及盖片擦拭干净,并将盖片盖在计数板。
2. 将细胞悬液吸出少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片和计数板之间,静置3min,注意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中。
3. 计算板四大格细胞总数,压线细胞只计左侧和上方的。
然后按公式计算:细胞数/mL=四大格细胞总数/4×104个/ml(注:当细胞很多时,可在四个格中选一定数目较平均的小格,由于每大格中有16个小格,然后计左侧和上方的细胞数,求出每小格的细胞数,取平均值m,m ×16即每个格的平均值。
所以,细胞密度=m×16×104个/ml)说明:公式中除以4,因为计数了4个大格的细胞数。
公式中乘以104因为计数板中每一个大格的体积为:1.0mm(长)×1.0mm(宽)×0.1mm(高)=0.1mm3而 1ml=1000ul=1000mm3(注意:镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团,应按单个细胞计算,若细胞团10%以上,说明分散不好,需重新制备细胞悬液。
)================================================细胞计数板的使用一、血球计数板-基本构造血球计数板是一块特制的厚型载玻片,载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间的平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各刻有一小方格网,每个方格网共分九个大格,中央的一大格作为计数用,称为计数区。
计数区的刻度有两种:一种是计数区分为16个大方格(大方格用三线隔开),而每个大方格又分成25个小方格;另一种是一个计数区分成25个大方格(大方格之间用双线分开),而每个大方格又分成16个小方格。
但是不管计数区是哪一种构造,它们都有一个共同特点,即计数区都由400个小方格组成。
细胞计数方法------细胞计数板法
细胞计数方法------细胞计数板法实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞的数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。
具体操作:1. 将计数板及盖片擦拭干净,并将盖片盖在计数板。
2. 将细胞悬液吸出少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片和计数板之间,静置3min,注意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中。
3. 计算板四大格细胞总数,压线细胞只计左侧和上方的。
然后按公式计算:细胞数/mL=四大格细胞总数/4×104个/ml(注:当细胞很多时,可在四个格中选一定数目较平均的小格,由于每大格中有16个小格,然后计左侧和上方的细胞数,求出每小格的细胞数,取平均值m,m ×16即每个格的平均值。
所以,细胞密度=m×16×104个/ml)说明:公式中除以4,因为计数了4个大格的细胞数。
公式中乘以104因为计数板中每一个大格的体积为:1.0mm(长)×1.0mm(宽)×0.1mm(高)=0.1mm3而 1ml=1000ul=1000mm3(注意:镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团,应按单个细胞计算,若细胞团10%以上,说明分散不好,需重新制备细胞悬液。
)================================================细胞计数板的使用一、血球计数板-基本构造血球计数板是一块特制的厚型载玻片,载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间的平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各刻有一小方格网,每个方格网共分九个大格,中央的一大格作为计数用,称为计数区。
计数区的刻度有两种:一种是计数区分为16个大方格(大方格用三线隔开),而每个大方格又分成25个小方格;另一种是一个计数区分成25个大方格(大方格之间用双线分开),而每个大方格又分成16个小方格。
但是不管计数区是哪一种构造,它们都有一个共同特点,即计数区都由400个小方格组成。
细胞计数方法------细胞计数板法
细胞计数方法------细胞计数板法实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞的数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。
具体操作:1. 将计数板及盖片擦拭干净,并将盖片盖在计数板。
2. 将细胞悬液吸出少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片和计数板之间,静置3min,注意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中。
3. 计算板四大格细胞总数,压线细胞只计左侧和上方的。
然后按公式计算:细胞数/mL=四大格细胞总数/4×104个/ml(注:当细胞很多时,可在四个格中选一定数目较平均的小格,由于每大格中有16个小格,然后计左侧和上方的细胞数,求出每小格的细胞数,取平均值m,m ×16即每个格的平均值。
所以,细胞密度=m×16×104个/ml)说明:公式中除以4,因为计数了4个大格的细胞数。
公式中乘以104因为计数板中每一个大格的体积为:1.0mm〔长〕×1.0mm〔宽〕×0.1mm〔高〕=0.1mm3而1ml=1000ul=1000mm3〔注意:镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团,应按单个细胞计算,假设细胞团10%以上,说明分散不好,需重新制备细胞悬液。
〕================================================细胞计数板的使用一、血球计数板-根本构造血球计数板是一块特制的厚型载玻片,载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间的平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各刻有一小方格网,每个方格网共分九个大格,中央的一大格作为计数用,称为计数区。
计数区的刻度有两种:一种是计数区分为16个大方格〔大方格用三线隔开〕,而每个大方格又分成25个小方格;另一种是一个计数区分成25个大方格〔大方格之间用双线分开〕,而每个大方格又分成16个小方格。
但是不管计数区是哪一种构造,它们都有一个共同特点,即计数区都由400个小方格组成。
血细胞测试方法
血细胞测试方法(血细胞计数板)1 RBC测试方法小鼠尾静脉取血20ul,吹入盛有3.98ml红细胞稀释液的试管内,充分混匀,显微镜下计数。
将血细胞计数板5个中方格内的红细胞总数乘以10000,即得1mm3血液内的RBC数量。
2 TWBC测试方法取小鼠尾静脉血20ul,吹入盛有0.38ml 白细胞稀释液的试管内,充分混匀,显微镜下计数。
将血细胞计数板4个大方格内的白细胞总数乘以50,即得1mm3血液内的WBC数量。
3 PC测试方法取小鼠尾静脉血20ul,吹入盛有038ml血小板稀释液的试管内,充分混匀,显微镜下计数。
将血细胞计数板5个中方格内的血小板总数乘以1000,即得1mm3血液内的PC数量。
用自动血液分析仪应该是可以的,只是要注意采血过程中避免混入其它杂质及凝血,造成仪器堵孔!可以稀释,用生理盐水也可以用自动血液分析仪测定血细胞需要的最少容积是多少?这就要看你是什么样的仪器了,一般都在50uL以下,另外,抗凝可以考虑使用EDTA,用生理盐水应该不会影响到测定的稳定性,只是注意在测定前一定要混匀。
一般医院都有用微量血的血液分析仪,只需要用毛细吸管是20uL血。
只要注意将血打入时一定要充分和凝剂混匀,避免凝集。
一般的医院可能用的是枸橼酸钠抗凝。
你可以到医院检验科看一下,仪器是什么型号的的,现在用的什么抗凝剂并且加多少抗凝剂动物血液标本阻塞是标本采集质量问题,和动物本身的细胞没有关系。
还有现在有成品的稀释液购买,很便宜的。
采用预稀释模式,需要更少的血量,我们一般是采用20ul。
测定RBC ,WBC(TWBC),PLT( PC) 三个指标,如果用血液分析仪测定,一般100微升就可以了,也有一些仪器采用全自动进样方式可能标本量要多些,但是最好多一点,因为抗凝剂浓度过大对细胞有影响,推荐使用EDTA-K2,终浓度2-4mg/ml,我测过一些小鼠血常规,因为血难取,经常凝固,所以采血一定要顺利,可短尾取血,取血后迅速混匀。
血球计数板的计数方法
血球计数板的计数方法血球计数板是一种用于计数血液中各种细胞数量的仪器。
它是由一块玻璃板和一根计数棒组成的。
玻璃板上有许多小方格,每个小方格的大小和深度都是固定的。
计数棒是一根细长的棒状物,一端有一个小圆球,可以吸取血液样本。
使用血球计数板进行计数时,需要按照一定的步骤进行操作。
需要准备好血液样本。
通常情况下,血液样本是从患者的静脉中抽取的。
抽取血液时需要注意卫生和安全,避免感染和交叉感染的发生。
抽取的血液样本需要用抗凝剂进行处理,以防止血液凝固。
接下来,需要将血液样本放在计数棒上。
将计数棒的小圆球轻轻地放在血液样本上,让血液自然吸入计数棒中。
吸入的血液量应该是适量的,不要过多或过少。
过多的血液会使计数棒上的血液过于密集,难以进行计数;过少的血液则会导致计数不准确。
然后,需要将计数棒上的血液样本滴在玻璃板上。
将计数棒的小圆球轻轻地触碰玻璃板上的小方格,让血液样本自然滴落在小方格中。
每个小方格中应该只有一滴血液,不要让血液溢出或者混合在其他小方格中。
接着,需要进行计数。
使用显微镜观察玻璃板上的小方格,计数板上的小方格通常是由9个大方格组成的。
在显微镜下,可以看到每个小方格中的血细胞数量。
根据每个小方格中的血细胞数量,可以计算出每个大方格中的血细胞数量。
最后,根据每个大方格中的血细胞数量,可以计算出整个计数板中的血细胞数量。
在进行计数时,需要注意以下几点:1. 计数时需要仔细观察,避免漏计或重复计数。
2. 计数时需要按照一定的规律进行,避免出现计数错误。
3. 计数时需要注意计数板上的各种细胞数量,包括红细胞、白细胞、血小板等。
4. 计数时需要注意计数板上的各种细胞形态和大小,以便进行鉴别诊断。
5. 计数时需要注意计数板上的各种细胞分布情况,以便进行统计分析。
血球计数板是一种非常重要的医疗仪器,它可以帮助医生进行血液检查和诊断。
使用血球计数板进行计数时,需要仔细操作,遵循一定的规律,以保证计数的准确性和可靠性。
细胞计数板使用方法
细胞计数板使用方法
实验原理:当待测细胞悬液中细胞均匀分布时,通过测定一定体积悬液中的细胞的数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。
具体操作:
1. 将计数板及盖片擦拭干净,并将盖片盖在计数板。
2. 将细胞悬液吸出少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片和计数板之间,静置3min,注意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中。
3. 计算板四大格细胞总数,压线细胞只计左侧和上方的。
然后按公式计算:细胞数/mL=四大格细胞总数/4×104
说明:公式中除以4,因为计数了4个大格的细胞数。
公式中乘以104因为计数板中每一个大格的体积为:
1.0mm(长)×1.0mm(宽)×0.1mm(高)=0.1mm3 而 1ml=1000mm3
(注意:镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团,应按单个细胞计算,若细胞团10%以上,说明分散不好,需重新制备细胞悬液)
细胞计数板的使用
血球计数板-基本构造
血球计数板是一块特制的厚型载玻片,载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间的平台较宽,其中间又被一短横槽分隔成两半,每个半边上面各刻有一小方格网,每个方格网共分九个大格,中央的一大格作为计数用,称为计数区。
计数区的刻度有两种:一种是计数区分为16个大方格(大方格用三线隔开),而每个大方格又分成25个小方格;另一种是一个计数区分成25个大方格(大方格之间用双线分开),而每个大方格又分成16个小方格。
但是不管计数区是哪一种构造,它们都有一个共同特点,即计数区都由400个小方格组成。
血球计数板法检测方法
血球计数板法检测方法血球计数板法是一种常用的血液检测方法,用于测定人体血液中各种血球的数量。
它是通过对血液样本进行稀释和计数,从而得出血球计数的结果。
本文将介绍血球计数板法的原理和步骤,以及其在临床应用中的意义。
一、原理血球计数板法是基于显微镜观察的技术,通过将血液样本与稀释液混合后,放置在血球计数板的计数区域内进行计数。
计数区域内的小方格被称为“Thoma小方格”,每个小方格被进一步细分为16个小格。
通过计数特定数量的小格中的血细胞,再根据稀释倍数计算出血液中血细胞的浓度。
二、步骤1. 准备工作:清洗血球计数板、显微镜和盖玻片,准备好稀释液和血液样本。
2. 稀释样本:取一定量的血液样本和稀释液,按照一定的比例混合,得到一定稀释倍数的血液溶液。
3. 涂片:取一定量的稀释后的血液溶液,滴在计数区域内,用盖玻片将其完全覆盖,确保血细胞均匀分布。
4. 观察计数:将显微镜调至适当倍数,将计数区域放在显微镜视野内。
从左上角开始,逐个计数血细胞,直至计数完所有小方格。
5. 计算结果:根据计数的血细胞数量和稀释倍数,计算出血液中血细胞的浓度。
三、临床应用血球计数板法广泛应用于临床实验室中,用于评估患者的血细胞情况。
通过测定红细胞、白细胞和血小板的数量,可以判断患者是否存在贫血、感染或出血等血液疾病。
此外,血球计数板法还可以监测患者在治疗过程中的动态变化,评估治疗效果。
血球计数板法不仅可以测定血液中的血细胞数量,还可以进行其他相关指标的测定。
例如,可以通过血球计数板法测定血细胞的形态学特征,了解血细胞的大小、形状和染色性质等。
此外,还可以通过血球计数板法进行血细胞的分类计数,如淋巴细胞、中性粒细胞和单核细胞的计数。
血球计数板法在临床应用中具有许多优点。
首先,它是一种简单、快速、经济的检测方法,可以在短时间内得到血球计数的结果。
其次,血球计数板法的结果具有较高的准确性和重复性,可以满足临床实验室对血细胞计数的要求。
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细胞数的测定
一、目的与要求
了解血球计数板计数的原理,学会测定细胞总数方法。
二、原理
用血球计数板在显微镜下直接计数是一种常用的微生物计数方法。
血球计数板是一块特制的厚载玻片,其上由四条槽构成三个平台,中间较宽的平台又被一短横槽隔成两半,每一边的平台上各刻有一个方格网,每个方格网共分为9个大方格,中间的大方格即为计数室。
计数室的刻度一般有两种规格,一种是一个大方格分成16个中方格,每个中方格又分成25个小格(即16x25),另一种是一个大方格分成25个中方格,每个中方格又分为16个小方格(即25×16),但无论是哪一种规格的计数板,每一个大方格中的小方格都是400个,每一个大方格边长为1 mm,则每一个大方格的面积为1 mm2,盖上盖玻片后,盖玻片与载玻片之间的高度为0.1mm,所以计数室的容积为0.1 mm3
三、血球计数板的使用方法
(一)菌悬液的制备为便于计数,对样品进行适当稀释,稀释程度以每小格内含5~10个酵母为宜,可采用10倍系列稀释法。
(二)加菌悬液样品将清洁干燥的血球计数板盖上盖玻片,再用无菌的毛细滴管将摇匀的菌悬液由盖玻片边缘滴一小滴,让菌液沿缝隙靠毛细渗透作用自动进入计数室,用吸水纸吸去多余水液。
由盖玻片边缘或槽内加入计数板来回推压盖玻片,使其紧贴在计数板上,计数室内不能有气泡。
静置5-10分钟。
(三)显微镜计数在低倍镜下找到小方格网后更换高倍镜观察计数,上下调动细螺旋,以便看到小室内不同深度的菌体。
位于分格线上的菌体,只数两条边上的,其余两边不计数。
如数上线就不数下线,数左边线就不数右边线。
当芽孢菌体达到母细胞大小的二分之一时,可记作两个细胞。
(四)计数时若使用刻度为25×16(大格)的计数板,则数四角的4个大格(即100小格)内的菌数。
如用刻度为16×25(大格)的计数板,除数四角的4个大格外,还需数中央1个大格的菌数(即80
小格)。
每小格中菌数以5-10个为宜,如菌液过浓可适当稀释。
(五)每个样品重复计数2-3次,取其平均值,按下式计算样品中的菌数。
(六)计数完毕,将计数板在水龙头下冲洗干净,切勿用硬物洗刷,洗完后自行晾干或用电吹风吹干。
计数时,如果使用16×25的计数板,要按对角线方位取左上、左下、右上、右下上述4个中格进行计数(即计数100个小格中的细胞数),如果使用25×16规格的计数板,则除了计数上述4个中格外,还要计数中央的1个中格,即计数80个小格中的细胞数,分别按下述公式计算出细胞数。
(1)16×25格的血球计数板计算公式:
1mL 细胞数=---------------------×400×104×稀释倍数
(2)25×16格的血球计数板计算公式:
1mL 细胞数=-----------------------×400×104×稀释倍数
四,材料与仪器
菌悬液,显微镜,血球计数板,载玻片,盖玻片,接种环,吕氏美蓝
五、实验报告。