园林植物组织培养复习资料
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1.植物组织培养按培养对象分为______ 、 _______ 、________ 、 ________ 、________ 等几种类型。
2.一个己停止分裂的成熟细胞转变为分生状态，并形成耒分化的愈伤组织的现象称为n tv3.不同的灭菌剂其灭菌的机理一般不一样，次氯酸钙和次氯酸钠都是利用分解产生 _________ 来杀菌的；升汞是靠 ________ 来达到灭菌日的。
4.去除植物病毒的主耍方法是 _____ 和_______ 两种方法，当把二者结合起來脱毒效果最好5.在通过微茎尖培养脱毒时，外植体的大小应以成苗率和脱毒率综合确定，一般以 __________ mm、带 ________ 个叶原基为好。
6.White培养基________ 浓度低，适合生根培养。
7.一个已停止分裂的成熟细胞转变为_________ 状态，并形成_________ 的现象称为“脱分化”。
8.BA/NAA的高低决定了外植体的发育方向，比值低时促进 ________ 的生长，这时_________ 占主导地位；比值高促进_________ 的生长，这时 _________ 占主导地位。
9.进行植物组织培养最基本的前提条件是 _____ 。
1、植物组织培养的理论基础是植物细胞全能性。
2、组织培养实验室必要的设备有超净工作台、高压灭菌器、空调机、夭平、显微镜、蒸饱水发生器等。
3、糖在植物组织培养中是不可缺少的，它不但作为离体组织赖以生长的碳源，而且还能维持培养菇渗透压4、培养基灭菌一般在-108 kPa的压力下,锅内温度达121 °C ,维持20-30 min o5、在离体叶培养中，6・BA和KT利于芽的形成:24D利于愈伤纟FI织的形成6、在离体叶组织脱分化和再分化培养屮，茎和芽的分化主要有4个途径：方•接产生不泄芽、由愈伤组织产工不定芽、胚状体形成、形成球状体或小鳞茎等途径。
7、目前培育无病毒苗最广泛和最重要的一个途径是茎尖培养脱毒。
植物组织培养复习重点
组培复习材料一、名词解释1、培养基：是离体植物（外植体）赖以生长、分化的基础，是根据植物的需求，人工配制的含有各种营养成分的营养液。
2、液体培养：把细胞或生物体的一部分，置于液体培养基中使其发育，并不断振荡，使之均匀地在悬浊液中进行培养的一种方法。
3、种子培养：是成熟种子和发育不全的未成熟种子的无菌培养。
4、叶培养：从母体植株上将叶组织（包括叶原基在内）切下，放在无菌的人工条件下使其生长发育形成植株的技术。
5、热处理脱毒：在一定范围内，用高温处理可部分或完全钝化植物组织中的某些病毒而不伤害或很少伤害植物本身的脱毒方法。
6、花药培养：是把花粉发育到一定阶段的花药接种到培养基上，来改变花粉的发育程序，使其分裂形成细胞团，进而分化成杯状体，然后再生植株，或形成愈伤组织，由愈伤组织再分化成植株。
7、连续培养：是利用特别的培养容器进行大规模细胞培养的一种培养方式。
（培养过程中，不断注入新鲜培养基，排掉等体积用过的培养基，或者抽取悬浮培养物，使培养物的营养物质得到不断补充，从而保持其恒定体积的培养。
——8、分批培养：指把细胞分散在一定容积的培养基中进行培养，建立单细胞培养物的培养方式。
（细胞生长在固定体积的培养基中，当主要营养物质耗尽时，细胞的分裂和生长即停止。
）二、简答题1、MS培养基特点。
答：MS培养基是Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的，其特点是无机盐和离子浓度较高，是较稳定的离子平衡溶液，具有高含量的氮、钾，尤其是硝酸盐用量大，还有一定数量的铵盐，其养分的数量和比例合适，不需要添加更多的有机附加物，就能满足植物组织对矿质营养的要求，加速愈伤组织和培养物的生长，当培养物就不转移时仍可维持其生存。
目前应用最广泛。
2、植物组培生产特点。
答：①和传统的生产方式相比，具有不占耕地、生产不受季节限制而且能够整年连续进行、不受灾害性天气和病虫害影响的特点；②具有人为可控性，可采用更适合于植物生长的“培养基”代替土壤提供养分和生长调节物质；③具有很高的生产效率。
植物组织培养复习资料
植物组织培养复习资料一、名词解释。
（每个3分，共24分）１、植物组织培养：在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或发育成完整植株的技术。
又称植物离体培养。
２、细胞的全能性：指植物体的任何一个有完整细胞核的活细胞都具有该植物的全套遗传基因和产生完整植株的潜在能力。
3、脱分化：离体培养条件下生长的器官、组织、细胞，经过细胞分裂或不分裂而恢复分生状态，形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞过程。
4、外植体：从活体植物上切取下来，用以进行离体培养的那部分组织或器官。
5、单细胞培养：对分离的到的单个细胞进行培养，诱导其分裂增殖，形成细胞团，再通过细胞分化形成芽、根等器官或胚状体，直至长成完整植株的技术。
6、胚状体：亦称体细胞胚。
指在组培过程中，由植物体细胞所形成的类似于合子胚的结构。
它具有根、茎结构，能够一次性形成再生植株。
7、平板培养：是将悬浮培养的细胞接种到未固化的薄层培养基中，使其与培养基充分配合，再倒入培养皿中进行培养的方法。
8、人工种子：指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽，被包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中，从而形成能发芽出苗的颗粒状。
9、次生代谢产物：指植物生长发育正常运行的非必需的小分子有机化合物，其产生和分布通常有种属、器官、组织以及生长发育时期的特异性。
10、再分化：细胞经过脱分化形成的愈伤组织再次分化，进行器官形成，产丛生芽或胚状体，形成完整植株的过程。
11、无病毒苗:指不含该种植物主要危害病毒的苗木。
二、不定项选择1、培养室里的湿度一般保持在____C_____.A 30~40%；B 50~60%；C 70~80%；D 80~90%2. 下列不属于生长素类的植物激素是____A D____。
A Kt；B IAA；C NAA；D ZT3. 影响培养基凝固程度因素有_______A B C D__.A 琼脂的质量好坏；B 高压灭菌的时间；C 高压灭菌的温度；D 培养基的PH4. 活性炭在组织培养中的作用有_______ABC_。
组培复习资料
植物组织培养复习资料（开卷考试）第一章导论【本章知识点】1.组织培养的含义2.组织培养的理论基础（细胞全能性）3.植物组织培养的类型及特点4.植物组培在农业生产上的应用一．组织培养的含义：用无菌的方法使植物离体器官、组织和细胞在人为提供的条件下生长和发育的所有的培养技术的总称，也称为离体培养或试管培养。
二、植物组培的理论基础1、植物细胞全能性：植物体的每一个具有完整细胞核的细胞都具有该物种全部的遗传物质，在一定条件下具有发育成完整植物体的潜在能力。
2、细胞分化：导致细胞形成不同结构、引起功能改变或者潜在发育方式改变的过程。
3、脱分化：将以分化的不分裂的静止细胞放在培养基上培养，细胞重新进入分裂状态。
一个成熟的细胞转化为分生状态的过程成为脱分化。
（形成愈伤组织）4、再分化：经脱分化形成的愈伤组织在一定培养条件下可转化为不同的细胞类型，形成完整植株的过程。
5、外植体：由活体植物上切去下来的，用于植物组织培养的各种接种材料。
包括各种器官、组织、细胞和原生质体等。
6、愈伤组织：外植体离体培养下经脱分化产生的无特定结构和功能的薄壁细胞。
三、组织培养的类型及特点【类型】1.按培养材料分：愈伤组织培养、器官培养、细胞培养、原生质体培养等2.按培养器官分：叶培养、跟培养、花药培养等3.按培养成分分：固体培养、液体培养（也叫液体震荡培养）4.按是否有需要光分：光培养、暗培养5.按培养方法分：平板培养、微室培养、悬浮培养等6.按培养过程分：初代培养（外植体的最初培养）、继代培养（培养物在培养基上生长一段时间以后由于营养物枯竭，水分散失及代谢产物的积累，必须转移到新鲜的培养基上培养，这种反复多次移植的组织培养称为继代培养）【特点】1.培养条件人为可控2.培养生长周期短，繁殖效率高3.管理方便，便于工厂化生产和自动化控制四、植物组培在农业生产上的应用1．用于种苗的快速无性繁殖2．用于种苗的脱毒（EG马铃薯）3. 用于某些植物的远缘杂交4.用于突变育种5.用于单配体育种6.种质保存7.基因工程8．植物性药物和生物制品的生产第二章植物组培实验室的构建和基本操作技术【本章知识点】 1.植物组培实验室结构设计及主要实验设备2.常用培养基MS 、B5、White 、N6、KM-8P 等3.母液的配制方法4.培养基成分及其配制、分装和高压灭菌过程5.有关灭菌、接种、培养、驯化和移栽的相关技术6.接种的无菌操作程序要点7.试管苗的特点及其不能成活的原因8.试管苗的驯化和移栽应注意的问题一、植物组培实验室构建和主要实验设备【实验室构建】【仪器设备与用具】1、 仪器设备与器皿用具：超净工作台、空调、除湿机或加湿机、恒温培养箱、高压灭菌锅、冰箱、天平、显微镜、水浴锅、摇床与转床、蒸馏水发生器、酸度计、离心机等2、 各类玻璃器皿：培养器皿（试管、三角瓶、培养皿、圆形培养瓶或果酱瓶等）分注器、离心管、刻度移液管、细菌过滤器、实验器皿（量筒、烧杯、容量瓶、试剂瓶、塑料瓶、酒精灯等）3、 器械用具：镊子、尖头镊子、枪形镊子、剪刀、解剖刀、接种针、钻孔器等。
植物组织培养期末复习资料
植物组织培养期末复习资料2011.05.191、植物组织培养：是指在无菌和人工控制的环境条件下，利用人工培养基，对植物得胚胎、器官、组织、细胞、原生质体等进行离体培养，使其再生发育成完整植株的过程。
又称植物离体培养。
2、外植体：用于培养的植物胚胎、器官、组织、细胞、原生质体通常称为外植体。
3 、愈伤组织：是指在植物受伤后的伤口处或在植物组织培养中外植体切口处产生的一团不定形的薄壁组织。
4、初代培养：将外植体进行的第一次培养，称为初代培养。
5、继代培养：将初代培养得到的培养体移植于新鲜培养基中这种反复多次移植的培养，称为继代培养。
6、植物细胞全能性：一个细胞所具有的产生一个完整植株的固有能力称做细胞的全能性。
7、细胞分化：是指细胞的结构和功能从一种类型转变为另一种的过程。
8、脱分化：一个成熟细胞转变为分生状态并形成未分化的愈伤组织的现象称为脱分化也称去分化。
9、再分化：离体培养的植物细胞和组织可以由脱分化状态重新进行分化，形成另一种或几种类型的细胞、组织、器官，甚至形成完整植株，这个过程（现象）称为再分化。
10、胚状体（或体细胞胚）：在组织培养中，起源于一个非合资细胞，经过胚胎发生和胚胎发育过程形成具有双极性的胚状结构，叫胚状体或体细胞胚。
11、体细胞胚与合子胚的比较：（1）、体细胞胚是由愈伤组织或胚性细胞团的表面细胞起源的，所处的发育条件与合子胚不相同。
（2）、在自然界，不定胚早期分裂顺序与合子胚也不完全相同：即使是合子胚本身，他们的早期胚胎发育过程也常偏离正常的方式。
（3）、合子胚和不定胚一般都能发育成正常的成熟胚。
与合子胚相似，球形期后的体细胞胚呈现一种固定的极性，根极指向愈伤组织或胚性细胞团的中央，茎芽极朝外，与合子比，成熟体细胞胚的进一步发育过程及形态特征也是相当正常的。
（4）、多数情况下，体细胞胚并不具有一个明显的胚柄。
（5）、与合子胚不同的是，在培养中形成的体细胞胚常常具有两个以上的子叶。
植物组织培养复习笔记【最新】
植物组织培养复习资料第一章绪论一、概念：植物组织培养：在无菌条件下，将离体的植物器官.组织，细胞以及原生质体. 培养在人1:培养基上和人工控制的环境中，使其生长，分化，增殖，甚至长出新的植株的过程和技术。
外植体：在无菌条件下，离体培养于人工培养基上的，用于达到某种培养目的的原始植物材料C培养基：根据植物营养原理和植物组织离体培养的要求而人匚配制的营养基质即为培养基。
细胞全能性：植物体每一个细胞都含有该植物全部的遗传信息，在合适的条件下，具有形成完整植株的能力。
脱分化：一个成熟细胞恢复到分生状态或胚性细胞状态的现象。
再分化：是脱分化细胞重新恢复细胞分化能力，沿若正常的发育途径，形成具有特定结构和功能的细胞C二、组织培养的类型，不同分类依据（根据培养材料不同）可分为植株培养，胚胎培养，器官培养，组织或愈伤组织培养.细胞或原生质休培养5类：（根据培养目的）可分为试管嫁接，试管受精，试管加倍，试管育种等：（根据培养方法）可分为平板培养，微室培养，悬浮培养，单细胞培养等：（根据培养过程）可分为初代培养和继代培养：（根据培养基类型）可分为固体培养和液体培养。
三、三个发展阶段的关键人物1,haberlandt-一于1902年提出植物细胞全能性理论，被称为“组织培养之父”。
2,white—于1943年出版《植物组织培养手册》。
3,murashine和skoog -- 在1962年筛选出MS培养基。
四、植物全能性表达的过程培养一►脱分彳~再分化一培养五、组织培养的特点：1、植物基础学科研究的良好系统。
2、生物技术的基础。
3、经济高效.管理方便，利于自动化。
4、技术含量高，实验误差小，人工控制能力强。
5、生长周期短，生长速度快，实验重复性好。
6、实验材料经济，来源单一。
六、缺点：需要设备负复柴，投入资金多，电能消耗大：对人员技术水平要求高，对实验场所要求也高，不能代替田间试验。
第二章植物组织培养设备与培养条件一、实验室的组成及主要仪器和设备准备室：干燥箱，高压灭菌锅，电子天平，酸度计，水浴锅，冰箱。
组培复习资料
1、植物组织培养：在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞或原生质体等进行培养，使其生长、分化并再生成完整植株的技术2、组培苗：根据植物细胞具有全能性的理论，利用外植体在无菌和适应的人工条件下培育的完整植株。
3、外植体：凡是用于离体培养的植物组织器官、组织、细胞或原生质体统称为外植体。
4、细胞全能性：植物体的每一个具有完整细胞核的细胞都具有该物种全部遗传的物质，在一定条件下具有发育成完整植物体的潜在能力。
全能性的条件：①体细胞与完整植株分离，脱离完整植株的控制；②创造理想的适于细胞生长和分化的环境，包括营养、激素、光、温、气、湿等因子。
5、植株再生过程即为植物细胞全能性表达的过程，一般经过脱分化和再分化两个阶段。
6、脱分化: 指植物组织培养中构成离体植物器官和组织的成熟细胞或已分化的细胞转变成为分生状态的过程，即诱导成为愈伤组织的过程。
7、愈伤组织: 指在人工培养基上经诱导后外植体表面上长出来的一团无序生长的薄壁细胞。
脱分化的难易程度与植物的种类、组织和细胞的状态有关。
8、再分化:指由脱分化的组织或细胞转变为各种不同的细胞类型，由无结构和特定功能的细胞团转变为有结构和特定功能的组织和器官，最终再生成完整植株的过程。
9、一般而言，诱导外植体形成典型的愈伤组织，大致要经历3个时期：启动期、分裂期和分化期。
（1）启动期：又称诱导期，是指细胞准备进行分裂的时期。
启动期的长短，因植物种类、外植体的生理状态和外部因素而异。
诱导启动的因素主要有外源激素，最常用的有2,4-D、NAA、IAA和细胞分裂素等。
其中，2,4-D 在诱导细胞分裂过程中，效果最明显。
（2）分裂期：是指外植体细胞经过诱导后脱分化,不断分裂、增生子细胞的过程。
分裂期的愈伤组织的特点是：细胞分裂快，结构疏松，缺少有组织的结构，颜色浅或呈透明状。
愈伤组织常呈不规则的馒头状。
(3)分化期：是指停止分裂的细胞发生生理代谢变化而形成不同形态和功能的细胞过程。
植物组培复习资料
1、愈伤组织：原指植物在受伤之后于伤口表面形成的一团薄壁细胞，在组培中则指人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。
2、植物细胞全能性：任何具有完整细胞核的植物细胞，都拥有形成一个完整植珠所必须的全部遗传信息和发育成完整植株的能力。
3、胚状体：是指在组织培养中起源于一个非合子细胞，经过胚胎发生和胚胎发育过程形成的具有双极性的胚状结构。
4、体细胞杂交：完全不经过有性过程，只通过体细胞融合制造杂种的方法称为体细胞杂交。
快速繁殖(微繁殖)：用组织培养的方法，使植物的部分器官、组织迅速扩大培养，并移到温室或农田繁殖出大量幼苗的繁殖方法。
6、再分化：愈伤组织形成不定芽或不定根或胚状体。
7、原生质体融合（体细胞杂交）：就是使分离下来的不同亲本的原生质体，在离体条件下通过诱导发生的质膜融合进而细胞核融合，像性细胞受精作用那样互相融合成一体的现象。
8、脱毒苗：是指不含该种植物的主要危害病毒，即经检测主要病毒在植物内的存在表现阴性反应的苗木。
9、愈伤组织培养:是指将母体植株上的外植体，接种到无菌的培养基上，进行愈伤组织诱导、生长和发育的一门技术。
10、外植体：在植物组织培养过程中，由植物体上切取的根、茎、叶、花、果、种子等器官以及各种组织、细胞或原生质体等统称为外植体。
11、热处理脱毒：利用病毒和植物细胞对高温忍耐性不同，选择适当的高温处理染病植株，使植株体内的病毒部分或全部失活，而植株本身仍然存活。
12、平板培养法：是把单细胞悬浮液与融化的琼脂培养基均匀混合，平铺一薄层在培养基底上的培养方法。
13、消毒：指杀死、消除或充分抑制部分微生物，使之不再发生危害作用。
14、玻璃化现象：在长期的离体培养繁殖时，有些试管苗的嫩茎、叶片呈现半透明水渍状，这种现象称为玻璃化。
15、初代培养基：是指用来第一次接种外植体的培养基。
16、脱分化：一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态，并形成未分化的愈伤组织的现象。
17、液体培养：指在进行培养时，培养基中不加琼脂等凝固剂，一般需要通过振荡等方法解决培养基的通气情况。
植物组织培养复习
复习要点题型：选择、填空、名词解释、问答各章主要内容第一章组培中的各种概念、术语、分类及组培的研究及应用进展第二章组培室的构成、培养基的组成成分及作用、培养基的种类、配制（基本培养基、激素的配制、pH、琼脂、糖等的影响）；培养基灭菌基本的程序、消毒过程、接种操作过程；消毒剂的使用及作用。
第三章组培快繁过程中芽和体胚发生（再生）的方式、定芽、不定芽、体胚的概念、影响体胚发生的内外因素、体胚的辨认、人工种子的优点、污染、褐变、玻璃化的概念及影响因素、措施。
组织培养快速繁殖（芽再生）的一般程序。
第四章脱毒培养的原理、步骤，茎尖培养、病毒在植物体内分布规律、病毒的检验方法。
第五章愈伤组织类型、悬浮细胞培养特点、生长曲线、测定指标；细胞的同步培养法、单细胞的分离方法。
第六章原生质体培养：原生质体概念、细胞壁降解的酶及条件、渗透压稳定剂、原生质膜稳定剂。
主要概念1.细胞全能性：指植物体的每一个细胞都携带着一套完整的基因组，并具有发育成完整植株的潜在能力。
2.分化：细胞在分裂过程中，在形态结构和生理功能上发生稳定性的差异的过程，形成各种组织和器官。
3.脱分化：原已分化的细胞，失去原有的形态功能，又恢复到没有分化的无组织的细胞团和愈伤组织（即转变为分生状态）这个过程称为脱分化。
4.再分化：在一定的培养条件下，经脱分化的组织和细胞，经重新分化而产生出新的具有特定结构和功能的组织或器官（如由愈伤组织形成芽、根或胚状体）称为再分化。
5.外植体：从植物体上分离下来用于离体培养的材料。
6.组织培养：指通过无菌操作，把植物体的一个器官、一种组织或单个细胞（甚至原生质）接种到培养基上，在人工控制的条件下进行培养，使其成为完整植株的过程。
7.愈伤组织：在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞，多在植物体切面上产生。
8.定芽：包括顶芽、腋芽、胚芽连接处的萌蘖等均在一定部位生出的芽，称为定芽。
9.不定芽：除叶腋或茎尖以外，任何部位（非正常部位）产生出来的芽叫不定芽。
植物组织培养期末复习资料
11.细胞的全能性：指植物体的任何一个有完整细胞核的活细胞都具有该植物的全套遗传基因和产生完整植株的潜在能力。
2.分化：指细胞、组织、器官或整株植物从分生组织或幼小状态发育为成熟状态的过程，并在生理、形态上发生的变化。
其最大的特征是失去分裂能力。
3.脱分化：植物离休的器官、组织、细胞在人工培养基上，经过多次细胞分裂而失去原来的分化状态，形成无结构的愈伤组织或细胞团的过程，使其回复到胚性细胞的状态。
其特征是已失去分裂能力的细胞重新获得了分裂能力。
4.再分化：指由脱分化的细胞再度分化成另一种或几种类型的细胞、组织、器官，甚至最终再生成完整的植株的过程。
5.试管苗：指在无菌离体条件下，对植物组织、细胞、器官进行组培所获得的的再生植株。
6.根芽激素理论：根和芽的分化由生长素和细胞分裂素的比率所决定，这一比率高时促进生根，比率低时促进茎芽的分化，比率适中时，组织则倾向于以一种无结构的方式生长。
通过改变培养基中这两类生长调节物质的相对浓度可以控制器官的分化。
7.污染：批在组培过程中，由于真菌、幼苗等微生物的侵染，在培养容器内滋生大量的菌斑，使试管苗不能生长和发育的现象。
8.褐变：指在组培过程中，培养材料向培养基中释放褐色物质，致使培养基逐渐变成褐色，培养材料也随之慢慢变褐而死亡的现象。
9.玻璃化现象：指试管苗因生理失调而引起的嫩茎、叶片出现半透明状和水渍状的现象。
10.无菌操作：亦称接种。
指将经过表面灭菌后的植物材料在无菌环境中切碎或分离出器官、组织或细胞转移到无菌培养基上的过程。
由于整个过程均在无菌条件下进行，所以将这个过程称为无菌操作。
11.植物组织培养：指在无菌条件下，将离体的植物器官(如叶、花、未成熟的果实、种子)、组织(如形成层、花药组织、胚乳)、胚胎(如成熟和未成熟的胚)、细胞或原生质体，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，使其长成完整的植株或生产具有经济价值的其他产品。
这是广义的植物组织培养概念，而狭义的植物组织培养是指以植物各部分离体组织或愈伤组织为外植体的离体无菌培养。
植物组织培养理论复习资料
四、合子胚与体细胞胚发生的比较
A. 相同点：
a.
b. c. B.不同点：
胚胎发育过程一致；
发育中都有极性与生理隔离； 功能一致，都可发育成植株；
（一个胚代表一个植株）
a. 结构不同：胚状体存在多子叶现象； 无典型胚柄结构。 b. 生理特征：干物质含量不同（糖、脂、蛋白质）；
生活力不同。
五、影响体细胞胚发生的因子
2 植物激素
细胞分裂素：
常用：BA、KT、BAP、ZT、2-ip
浓度范围：0.5-30 mg/L，
一般适应浓度为1-2 mg/L
生长素
常用：NAA、IBA
适宜浓度：0.1-1 mg/L
注：2，4-D在以茎尖或腋芽诱导芽时不宜使用
2、常见问题
⑴褐变
⑵ 玻璃化苗
⑴褐变
酚类物质
多酚氧化酶
1、植物激素（P74）
（1）生长素 胚状体诱导过程分为增殖培养与成胚培养两阶段 i、增殖培养： 使用含生长素的培养基，多用2,4-D; ii、成胚培养： 去（降）生长素的培养基;
2、N源 培养基中N的供给形式对体细胞胚的发生 有重要影响。
NH4
+
—N
NO3 —N
-
①单独添加某一种N源： i. 单NO3- ，必须高浓度才能成胚，且数量少； 如：White＋2,4-D2.0 （差）； (好)。 White＋2,4-D2.0+KNO3 1700 则大量成胚；
TJ（番茄汁）、香蕉、马铃薯等。
植物激素：指一些在植物体内合成，对生长发育产
生显著作用的微量有机物
生长素（auxin）
诱导细胞分裂，促进根分化；并与细胞分裂素互作
植物组织培养 复习资料
第一章绪论植物组织培养类型根据培养材料不同分为：（1）完整植株培养：对幼苗和较大植株等的培养。
（2）胚胎培养：包括成熟胚、幼胚、子房、胚珠等的培养。
（3）器官培养：包括离体根、茎、叶、果实、种子、花器官的培养。
（4）组织培养：如分生组织、薄壁组织、输导组织培养。
（5）细胞培养：指对单细胞或较小的细胞团进行培养。
（6）原生质体培养：指对去掉细胞壁后所获得的原生质体进行培养。
根据再生途径分为：（1）器官发生途径（2）体细胞胚胎发生人工种子：是指植物离体培养产生的胚状体或不定芽被包裹在含有营养和保护功能的人工胚乳和人工种皮中，从而形成能发芽出苗的颗粒体。
作为繁殖材料。
植物组织培养技术的应用：1、优质种苗的快速无性繁殖1）无性繁殖作物及不易繁殖作物的快速繁殖2）通过茎尖培养生产脱毒健康种苗2、用于植物遗传育种包括种质资源离体保存；花粉花药培养产生单倍体；胚乳培养产生三倍体；胚培养拯救杂种胚克服远缘杂交障碍；原生质体培养进行体细胞杂交；植物体细胞无性系变异诱导和筛选；用于植物基因转移操作等。
3、大规模植物细胞、组织和器官培养生产次生代谢物质4、用于植物生长发育理论研究，包括生理学、病理学、胚胎学和细胞与分子生物学等第二章植物组织培养的基本技术组培实验室：包括化学实验室或准备室、接种室以及培养室三部分，并且按顺序排列。
在化学实验室与接种室之间应留有缓冲空间。
（1）准备室：用于培养器皿的清洗、培养基的配制、分装和灭菌、试管苗的出瓶及整理等工作。
冰箱、天平、高压灭菌锅、pH计、干燥箱、实验台、水槽、凉干架、药品柜、离心机、水浴锅、微波炉、电炉、磁力搅拌器、蠕动泵、移液器、各种玻璃器皿（烧杯、量筒、容量瓶、试剂瓶、三角瓶等）及培养基分装用品等。
（2）接种室：植物材料的灭菌、接种以及培养物的继代转接等。
超净工作台、紫外灯、小推车、搁架、磁盘、接种工具（各种镊子、解剖刀、手术剪、普通剪刀接种针、酒精灯、手持喷雾器、细菌过滤器等）等。
植物组织培养复习资料付答案(仅供参考)
植物组织培养复习材料一、名词解释。
1、植物组织培养(plant tissue culture)：植物的离体器官、组织或细胞在人工制备的培养基上进行无菌培养，并在人工控制的环境条件下，使其发育成完整植株的科学技术2、脱分化（dedifferentiation）：指失去分裂能力的细胞回复到分生性状态并进行分裂，形成无分化的细胞即愈伤组织的现象。
3、再分化（redifferentiation）：愈伤组织形成不定芽或不定根或胚状体。
4、外植体(explant)：植物组织培养过程中从活体植株上切去下来的用于离体培养的一切材料。
（如器官、组织、细胞、原生质体、种子等）5、愈伤组织(callus)：原本指植物在受伤后于其伤口表面形成的一团薄壁细胞。
在组培中，则指人工培养基上由外植体形成的一团无序生长的薄壁细胞。
6、器官发生：胚胎时期由胚层器官原基发育成器官的过程。
包括细胞分化和器官形成。
7、胚状体发生：在植物细胞、组织或器官体外培养过程中，由一个或一些体细胞经过胚胎发生和发育过程，形成的与合子胚相类似的结构。
可进一步发育成植株。
8、细胞全能性（cell totipotency）：指植物的每一个细胞都携带有一完整的基因组，并具有发育成完整植株的潜在能力。
9、细胞分化：一个尚未特化的细胞发育出特征性结构和功能的过程。
10、极性：细胞（也可指器官或植株）内的一端与另一端在形态结构和生理生化上的差异。
11、试管苗：通过组织培养产生的植株。
12、看护培养：是指用一块活跃生长的愈伤组织来看护单个细胞，使其持续分裂和增殖的一种培养方法。
这块愈伤组织被称为看护组织。
13、固相化培养：将细胞或原生质体固着在琼脂糖、藻（月元）酸盐或多聚赖氨酸中，然后将他们放入液体培养基中震荡培养。
这种培养方法既利用了振荡培养室营养物质和气体易于交换的优点，有利用了固相化使细胞免受振荡时剪切力的作用。
14、悬浮细胞培养：将单个游离细胞或小细胞团在液体培养基中进行培养增值的技术。
植物组织培养复习资料
组培复习资料第一章绪论1、植物组织培养：是指将植物的离体器官、组织、细胞以及去除细胞壁的原生质体，放在人工控制的无菌环境条件下培养，使其生长、分化并成长为完整植株的过程。
2、植物细胞组织培养：指在离体(in vitro)条件下利用人工培养基(medium)对植物器官、组织、细胞、原生质体等进行培养，使其长成完整植株的过程3、组织培养材料：◆器官：根、茎尖、叶、花、果实、种子等◆组织：形成层、表皮、皮层、胚、胚乳等◆细胞：大孢子、小孢子、体细胞◆原生质体基本特点：无菌、离体材料、人工培养基与培养环境4、根据组织培养材料分类：器官培养、茎尖分生组织培养、愈伤组织培养、细胞培养、原生质体培养5、组织、器官或细胞培养：指利用生物体各部分组织、器官或细胞进行离体培养，使之形成愈伤组织或完整有机体的技术。
6、愈伤组织: 指在人工培养基上由外植体（explant）形成的一团无序生长的薄壁细胞。
7、外植体（explant）: 在植物组织培养中，由活体（in vivo）植物体上提取下来，接种在培养基上的无菌细胞、组织、器官等。
8、脱分化（dedifferentiation）：一个成熟细胞或分化细胞转变成为分生状态的过程，即形成愈伤组织的过程。
9、再分化（redifferentiation）：植物成熟细胞经历了脱分化之后，即形成愈伤组织之后，由愈伤组织再形成完整的植株的过程。
10、原生质体培养：指将微生物或植物细胞游离成原生质体，在适宜培养条件下，依据细胞全能性使其再生细胞壁，并进行细胞分裂分化，形成完整个体的技术。
11、培养方式:固体培养、液体培养◆培养物量:大量培养、微量培养◆培养过程中是否需要光: 光培养、暗培养◆培养方法不同: 平板培养、微室培养、悬浮培养、单细胞培养◆培养器官的不同：花药培养、胚珠培养、根培养、茎尖培养12、细胞全能性（cell totipotengcy）学说：植物体的每一个细胞都携带有一套完整的基因组，在一定条件下具有发育成为完整植株的潜在能力。
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1、植物组织培养：在无菌和人工控制的环境条件下，利用人工培养基，对植物的胚胎、器官、组织、细胞、原生质体等进行离体培养，使其再生发育成完整植株的过程。
由于外植体已脱离了母体，植物组织培养又叫植物离体培养。
2、植物组织培养的特点：无菌条件下进行；多数情况下是利用成分完全不确定的人工培养基进行时；材料为离体状态；可以不断增殖，并通过调整成分控制实验的目的；在封闭的容器中进行，气体通过封口材料进行交换；环境、温度、光照强度都可人为控制。
3、植物组织培养的类型：按培养对象分：植株培养：对完整植株材料的离体无菌培养；胚胎培养：从果实或子房中分离出成熟或未成熟的胚进行离体无菌培养的技术；器官培养：以植物的根、茎、叶、花、果等器官为外植体的离体无菌培养技术；组织培养：对植物体的各部分组织如茎尖分生组织、形成层、木质部、韧皮部、表皮组织、胚胎组织和薄壁组织等，或对植物器官培养产生的愈伤组织进行培养，二者均通过再分化诱导形成植株；细胞培养：对植株器官或愈伤组织上分离出的单细胞、花粉单细胞或很小的细胞团进行培养，形成单细胞无性系或再生植株的技术；原生质体培养：对用酶、物理等方法除去植物细胞壁的、裸露的、有活性的原生质体团进行培养的技术；按培养过程分：初代培养、继代培养；按培养基的物理状态分：固体培养、液体培养。
4、植物组织培养在农林中的应用：植株离体快繁、无病毒苗木培育、次生代谢物的产生、培育新品种或创造新品种、植物种质资源的离体保存、人工种子、基因工程的应用。
5、外植体：植物组织培养中作为离体培养材料的器官或组织的片段。
在继代培养时，将培养的组织切段移入新的培养基时，这种切段也称外植体。
6、愈伤组织：指在植物受伤后的伤口处或在植物组织培养中外植体切口处产生的一团不定形的薄壁组织。
7、脱分化：指离体培养条件下生长的细胞、组织或器官经过细胞分裂或不分裂，逐渐失去原来的结构和功能而恢复分生状态，形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞的过程。
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植物组织培养复习资料植物组织培养知识点一：《植物组织培养概述》概述一、名语解释植物组织培养细胞全能性细胞分化细胞脱分化细胞再分化器官发生状体发生二、填空1、组织培养的理论依据是：（）2、植物组织培养的类型有：（）、（）、（）、（）、（）等。
3、1943年，（）提出了植物细胞（），并出版了《植物组织培养手册》，从而使植物组织培养为一门新兴学科。
答案：1、细胞全能性学说2、愈伤组织培养、器官培养、胚培养、细胞培养，原生质体培养3、white，“全能性”学说三、简答题1、简述植物组织培养的理论依据？2、植物组织培养的类型？答案：1、植物组织培养的理论依据是细胞全能性学说，即植物体的每一个细胞都携带有一套完整的基因组，并具有发育成为完整植株的潜在能力。
2、愈伤组织培养、器官培养、胚培养、细胞培养、原生质体培养。
四、论述题论述组织培养在农业上的应用。
知识点二：植物组织培养实验室的基本设备和操作技术一、名词解释植物生长调节物质外植体外植体污染外植体褐变玻璃化现象二、填空1、组织培养实验室必要的设备有（）、（）、（）、（）、（）、（）、（）、（）。
2、实验室中常用移液管容量有（）、（）、（）、（）、（）、（）。
3、培养基成分主要包括（）、（）、（）、（）、（）、（）、（）。
4、糖在植物组织培养中是不可缺少的，它不但作为离体组织赖以生长的（），而且还能（）。
5、琼脂在固体培养时，是作为培养基的（），一般用量为（）。
6、常用的生长素有（）、（）、（）、（）等，常用的细胞分裂素（）、（）、（）。
7、外植体污染原因从病源分面主要有（）和（）两大类。
8、防褐变的措施有（）、（）、（）、（）。
9、驯化的目的（）。
10、外植体灭菌一般先用（），再用（）浸泡（） min。
答案：1、超净工作台、高压灭菌器、空调机、天平、显微镜、蒸馏水发生器、酸度计等。
2、0.1ml、0.2ml、0.5ml、2ml、5ml、10ml3、无机营养、维生素类、氨基酸、有机附加物、植物生长调节物质、糖类、水和琼脂等。
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植物组织培养复习资料第一章绪论组织培养的类型植物组织培养的发展简史植物组织培养在技术上的发展植物组织培养在农业上的应用一．植物组织培养的意义(一)定义（Definition）：植物组织培养（Tissue culture）是指用无菌方法使植物体的离体器官、组织和细胞在人为提供的条件下生长和发育的所有培养技术的总称，也称之为离体培养（In vitro culture）。
是指分离一个或数个体细胞或植物体的一部分在无菌条件下培养的技术。
也可定义为：利用植物体的器官、组织或细胞，通过无菌操作接种于人工配制的培养基上，在一定的光照和温度条件下进行培养，使之生长发育的技术称为植物组织培养。
植物组织培养技术又俗称植物克隆Totipotency （细胞全能性）Each cell of a multicellular organism contains all of the genes needed to form the whole plant.——指细胞能够发展成为一棵完整植株的潜能（二）植物组织培养的意义1、植物基础学科研究良好系统2、生物技术的基础3、经济高效、管理方便、便于自动化4、生长周期短、速度快、试验重复性好5、技术含量高、实验误差小、人工控制能力强6、试验材料经济、来源单一7、缺点：设备复杂、耗费和技术要求高二、植物组织培养的类型按材料的类别分：愈伤组织培养：最为常见的组织培养细胞培养：悬浮细胞培养、单细胞培养器官培养：胚（Embryo）、胚乳（Endosperm）、珠心（Nucellus）、子房（Ovary）、根、茎、叶、花和幼果的部分组织的培养原生质体培养（Protoplast ）1、愈伤组织：愈伤组织（callus）在人工培养基上由外植体上形成的一团无序生长状态的薄壁细胞。
几个概念：外植体（Explants）由活植物体上切取下来的可以用于组织培养的组织或器官。
初代培养（Primary culture）指外植体的最初培养。
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一．填空题1.植物组培室的空间构成？培养基制备室；无菌操作室；培养室；缓冲室2.培养基的灭菌方法有哪些类型？紫外线灭菌，高压蒸汽灭菌，熏蒸灭菌，过滤膜灭菌3.如何调节渗透压？通常利用蔗糖来调节渗透压。
胚越小要求越高的渗透压；随着胚的发育啧要求逐步降低蔗糖浓度。
曼陀罗心型胚期要求的蔗糖浓度为0.8%，鱼类型要求蔗糖浓度为1%~0.5%。
也有山梨醇或甘露醇，PEG调节4.植物生长调节剂如何配置，如何溶解？a．若不溶于水，则应先把他们溶解在很少量的适当溶剂中，然后再加蒸馏水到最终容积（生长素一般溶于1mol/L的NaOH或95%酒精中，细胞分裂素一般溶于1mol/L的HCL中。
GA3溶于95%酒精中，脱落酸溶于NaHCo3中。
5.影响组培苗移栽成活的主要因素有哪些？试管苗的生长状况；移栽基质的选择；移栽的方法；移栽后的管理水平6.体细胞胚胎发生的方式有哪两种形式？a．从培养中的器官，组织，细胞或原生质体直接分化成胚，中间不经愈伤组织b．外植体先愈伤化，然后由愈伤组织细胞分化成胚7.体细胞杂种的鉴定方法有哪些？形态和育性鉴定；细胞学和分子细胞学鉴定；生化鉴定；分子生物学鉴定8.花粉培养的最佳取样时间是什么？花粉粒发育单核中晚期9.单细胞分离采用的植物材料，如何维持渗透压？叶肉细胞；机械法，酶解法；高浓度蔗糖10.园艺植物脱毒效果检测方法？直观检测法；指示植物检测法；抗血清检测法；酶联免疫吸附法；电子显微镜检测法二．名词解释1、植物组织培养：在无菌条件下，对植物组织，器官，细胞原生质体等离体活材料进行培养促使其生长发育，并再生成完整植株的过程。
2、外植体：植物组织培养过程中从活体植株上切去下来的用于离体培养的一切材料。
（如器官、组织、细胞、原生质体、种子等）3、初代培养：从母体植株上分离下来的第一次培养继代培养：初代培养后，将培养体转移到新鲜培养基中的培养。
4、胚状体发育：由植物的器官，组织和细胞培养产生类似胚状体，然后发育成完整的植株。
5、愈伤组织：在离体培养的条件下，经过植物细胞脱分化和不断增殖所形成的无特定结构的细胞团或组织。
6、原球茎发育：将外植体（种子，腋芽，花梗等）消毒后接种在培养基上，经过培养产生原球茎，然后由原球茎发育成完整的植株。
7、褐变：在组织培养过程中，外植体向培养基中释放褐色的物质（醌类）致使培养基逐渐变成褐色，培养材料也随之变成褐色而逐渐死亡的现象。
8、玻璃化现象：在组织培养过程中，培养物叶片或嫩梢呈透明货半透明的水渍状现象。
9、脱分化：一个成熟细胞转化为分生状态并形成为分化的愈伤组织的现象10、再分化：指脱分化形成的愈伤组织细胞在十一的培养条件下，又分化为胚状体，或直接分化出根和芽等器官形成完整植株的过程。
11、细胞的全能性：植物体的每一个生活细胞都具备母体的全套基因，在一定条件下可以发育成完整植株的能力。
12、人工种子：指通过组织培养技术，将植物的体细胞诱导在形态上和生理上均与合子胚相似的体细胞胚，然后将它包埋于有一定营养成分和保护功能的介质中，组成便于播种的类似种子的单位。
13、茎尖培养：是在无菌条件下剥取植物的茎尖分生组织进行培养以获得脱病毒的优质种苗。
14、体细胞胚：由植物体细胞发育成的胚就叫做体细胞胚。
15、体细胞杂交：指通过物理方法或化学方法使原生质体融合经培养获得具有双亲全部或部分遗传物质的后代的方法。
16、种质资源的离体保存：指在离体条件下，将单细胞原生质体，愈伤组织，悬浮细胞，体细胞胚，试管苗等植物组织培养物置于抑制其生长的无菌条件下，达到长期保存的目的。
三．简答题1、简述胚状体形成植株与不定芽形成植株的区别胚状体不经过根的诱导阶段，小植株是独立形成的，很容易从其他部分分离。
不定芽形成小植株，需要经过根的诱导阶段才能形成小植株，小植物与母体愈伤组织紧密联系，包括一些维管束组织皮层或表皮组织，因而不宜分离。
2、在花药培养过程中，影响花药培养诱导频率的因素是什么？a.供试材料的基因型和生理状态；b.花粉粒的发育时期；c.花药的培养过程的控制（氮源，培养条件，接种力度和诱导力成正相关）没有正确答案，从这些方面展开回答3、简述组织培养中常用植物生长调节剂的类型和作用特点？生长素和细胞分裂素生长素：a.诱导愈伤组织的产生，促使细胞脱分化；b.促进细胞的生长；c.促进茎尖或茎端生根；d.能诱导某些植物不定胚的形成；e.生长素和细胞分裂素配合使用共同促进不定芽的分化，侧芽的萌发和生长。
细胞分裂素：a.促进细胞分裂素和扩大使得茎增粗，抑制茎的伸长；b.诱导芽的分化促进侧芽和生长；c.减少叶绿素的分解，抑制顶端优势，延续离体组织和器官的衰老，有保鲜作用；d.对根的生产一般起抑制作用；e.细胞分裂素素和生长素的比值控制器官的发育模式。
4、简述植物愈伤组织继代的操作要点。
愈伤组织保存，培养基的配比，保存的环境（温度，湿度等）扩繁：速度，时间，使用材料质量改良：防止培养基的玻璃化等，应多备份5、如何调节植物组织培养室的培养条件？组织培养室是组织培养材料的生产的地方A．温度控制（正负26℃）B.培养室的大小，培养架的数量C.地面墙面灭菌D.拥有足够的电源E.杜绝盆栽植物无正确答案6、植物茎尖培养中影响脱毒效果的主要因素有哪些？a．培养基：考虑培养基的主要性质，营养成分，生长调节物质和物理状态；b．外植体的大小：外植体越大，产生再生植株的机会也就越多；c．培养条件：照光培养的效果通常比暗培好；d．外植体的状态：茎尖最好要用活跃生长的芽上切取。
7、论述组织培养过程中MS培养基的特点及配制MS母液的基本步骤。
MS母液配制：a.将大量元素贮备液，微量元素贮备液，铁盐贮备液，除蔗糖以外的有机物质贮备液内的各种成分称量出来； b.将称量出来的各种成分分别放入一个烧杯，加少量蒸馏水使之溶解，然后再一次混合，以蒸馏水定容；特点：是无机盐和离子浓度较高，为较稳定的平衡溶液。
其养分的数量和比例较合适，可满足植物的营养和生理需要。
它的硝酸盐含量较其他培养基为高，广泛地用于植物的器官、花药、细胞和原生质体培养，效果良好。
8、举例论述组织培养中出现的玻璃化现象及克服方法。
在组织培养过程中，培养物叶片或嫩梢呈透明货半透明的水渍状现象。
克服措施：降低培养基中细胞分裂素和赤霉素的用量，适当添加多效挫，矮壮素等生长抑制物质；控制培养条件，适当增加培养基中琼脂的浓度，降低培养基是水势；减少培养基中含氮化合物的用量，选用低NH4+水平的B5培养基；控制继代培养的次数。
9、植物离体快速繁殖器官形成的方式有哪些？a.芽分化型；b.愈伤组织分化形成器官；c.微型短枝扦插；d.原球茎快速繁殖；e.鳞茎发生方式；f.块茎发生方式；g.胚状体发生途径10、针对某一植物种间新品种杂交后代的选育要求，分析杂种幼胚的发育方式及幼胚组织培养成功的技术关键。
发育方式：a.按正常胚胎发育途径形成植株b.脱分化形成愈伤组织，再分化形成胚状体或幼苗c.胚“早熟”不能继续进行胚性生长，而是迅速萌发成幼苗，此幼苗畸形瘦弱d.胚性生长：幼胚生长到正常胚或超过正常胚大小时，仍不能发育成幼苗技术关键：a.需要成分复杂的人工合成的培养基b.掌握幼胚分离技术11、举例论述茎尖分生组织培养脱病毒的原理？a.用茎尖分生组织培养脱毒的理论基础是病毒在植株体内的分布是不均匀的，越接近生长点病毒浓度越低，因此植物茎尖分生组织几乎不带病毒；b．在剥离的茎尖中，病毒的复制过程被打乱了，植物分生组织的细胞生长速度快，病毒在植物体内繁殖速度相对较慢；c．病毒的传播是靠筛选组织进行转移，或通过细胞间连丝传递给其他细胞，所以病毒的传递扩散也受一定的限制；d．高浓度的生长物质抑制病毒也有助于去处病毒。
12、如何将优良园艺植物品种进行保存和应用？就地保存、圈地保存、常温、低温、超低温保存13、如果某单位培育出了一个非常珍贵的观赏品种。
想通过组织培养的方法繁殖种苗，你觉得应该通过哪几个阶段进行该品种的快速繁殖？举例论述每一个步骤的关键技术环节。
程序a.外植体的制备 b.外植体生长及分化诱导 c.芽的继代增殖培养（顶芽和腋芽的发育/诱导不定芽的产生） d.壮苗与生根 e.试管苗的移栽及管理要注意培养基，培养条件和外植体的状态14、论述超低温保存离体植物材料的原理。
也叫冷冻保存，是将植物的离体材料经一定的方法处理后，在超低温（-196℃液体氮）条件下进行种质保存的方法。
原理：保存在液氮中的植物细胞代谢活动，生长基本停止，因而，排除了遗传性状的变异，同时保存了细胞活力和形态发生潜能，达到长期保存生物材料的目的。
15、比较胚培养、胚乳培养和子房培养的异同。
胚培养：在无菌条件下对植物的胚，胚乳，胚珠和子房进行离体培养，使其发育成完整的植株。
胚乳培养：将胚乳从母体上分离出来，放在无菌人工环境条件下，让其进一步生长发育，以致形成幼苗的过程。
子房培养：指将子房从母体分离出来，在无菌条件喜爱培养成植株。
16、单细胞分离和基本培养方法有哪些？单细胞分离的方法有机械法和酶解法培养方法：液体培养法；固体平板培养法；看护培养法；微室培养法；悬浮培养。
17、什么是悬浮培养？简述成批培养和连续培养的特点。
悬浮培养：指的是一种在受到不断搅动或摇动的液体培养基里培养单细胞及小细胞团的组织培养系统。