硫氧还蛋白过氧化物酶2在人结直肠癌的表达及其对HCT116细胞增殖、迁移的作用论文
《靶向c-Met的CAR-T细胞对人结肠癌细胞的作用》
《靶向c-Met的CAR-T细胞对人结肠癌细胞的作用》一、引言近年来，随着癌症治疗的不断发展，细胞治疗成为了一个热门的研究领域。
其中，CAR-T细胞疗法作为新一代的免疫治疗方式，已在某些肿瘤中显示出其独特的治疗效果。
在众多靶点中，c-Met作为一个重要的受体酪氨酸激酶，与结肠癌的发生、发展密切相关。
因此，以c-Met为靶点的CAR-T细胞在结肠癌的治疗上展现出极大的应用潜力。
本文将深入探讨靶向c-Met的CAR-T 细胞对人结肠癌细胞的作用。
二、c-Met在结肠癌中的作用c-Met是一种跨膜受体酪氨酸激酶，其在正常细胞中主要参与细胞生长、迁移和分化等生理过程。
然而，在结肠癌等肿瘤细胞中，c-Met的表达常常异常升高，并参与肿瘤的增殖、侵袭和转移等过程。
因此，针对c-Met的靶向治疗成为了一种有效的抗肿瘤策略。
三、CAR-T细胞的概述CAR-T细胞疗法是一种通过基因工程改造T细胞，使其能够识别并杀死肿瘤细胞的治疗方法。
CAR-T细胞通过表达针对肿瘤细胞的特异性受体，实现对肿瘤细胞的精确打击。
在针对c-Met 的CAR-T细胞中，通过将c-Met的单链抗体与T细胞的激活信号相结合，使得CAR-T细胞能够识别并杀死表达c-Met的肿瘤细胞。
四、靶向c-Met的CAR-T细胞对人结肠癌细胞的作用1. 识别与杀伤：靶向c-Met的CAR-T细胞能够通过其表面的特异性受体识别结肠癌细胞表面的c-Met蛋白，进而激活T细胞的杀伤机制，对结肠癌细胞进行精确打击。
2. 抑制肿瘤增殖：通过CAR-T细胞的持续作用，能够抑制结肠癌细胞的增殖，降低肿瘤细胞的数量。
3. 阻断肿瘤侵袭与转移：CAR-T细胞不仅能够杀死已经存在的肿瘤细胞，还能够阻断肿瘤细胞的侵袭与转移过程，减缓肿瘤的扩散。
4. 提高治疗效果：将靶向c-Met的CAR-T细胞应用于结肠癌患者的治疗中，能够显著提高治疗效果，延长患者的生存期。
五、结论综上所述，靶向c-Met的CAR-T细胞在结肠癌的治疗中展现出独特的应用潜力。
某科研项目拟采取的研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析
某科研项目拟采取的研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析1. 技术路线备注：蓝色背景填充部分为前期已完成工作。
2. 研究方法2.1 X、Y在结肠癌发生、发展中的作用和预后相关性1)回顾性收集肠癌临床标本500例，取手术切除的肠癌组织、匹配的肝脏转移灶手术和穿刺标本，新鲜组织液氮保存标本200例，石蜡块300例，全部病例均通过临床、影像学、病理诊断，术前未进行辅助治疗，来自某某医院2008-2013年临床收治病例，随访资料齐全。
2)免疫组化检测组织切片中X、Y蛋白的表达及定位，分别设立阴性对照、肿瘤对照、肝转移对照。
3)SPSS16.0统计软件对X、Y表达及定位与临床标本进行病理关联性分析和预后统计分析，了解X、Y表达情况与相关临床资料之间的关系，单因素生存分析对临床各项指标与结肠癌生存期进行相关性分析，建立Cox比例风险回归模型，综合探讨临床各因素和X、Y表达与结肠癌肝转移、转移灶形成及预后的相关性。
2.2 体外、体内水平研究X、Y基因在肠癌肝转移中的调节功能1)制备X-shRNA慢病毒，建立X稳定沉默的细胞株，以无义序列作为阴性对照，利用MTT实验观察X沉默后细胞的生长曲线；克隆形成实验检测X沉默后细胞的克隆形成能力；流式细胞术结合PI单染、Annexin-V双染检测细胞周期和凋亡情况；细胞划痕实验、Transwell实验观察细胞运动能力的变化。
与此同时，制备过表达X的慢病毒载体。
2)在稳定沉默X的结肠癌细胞中，导入过表达Y的慢病毒载体，利用细胞生长曲线观察X沉默且Y过表达后细胞的增殖能力变化；细胞划痕实验、Transwell实验观察细胞运动能力的变化。
同样地，在稳定沉默Y的结肠癌细胞中，导入过表达X的慢病毒载体，利用细胞生长曲线观察Y沉默&X过表达后细胞的增殖能力变化；细胞划痕实验、Transwell实验观察细胞运动能力的变化。
3)制备结肠裸鼠皮下移植瘤模型，观察肿瘤生长情况，建立生长曲线，统计分析Y和X对结肠癌细胞体内成瘤能力的影响，明确Y和X在结肠癌恶性增殖的作用。
癌细胞高gsh水平二硫键-概述说明以及解释
癌细胞高gsh水平二硫键-概述说明以及解释1.引言1.1 概述概述癌症作为一种致命性疾病，在当前社会中占据了重要地位。
研究人员不断努力寻找更有效的治疗方法，以提高患者的生存率和生活质量。
近年来，关于癌症发病机理的研究引起了广泛的关注。
其中，癌细胞内高谷胱甘肽（GSH）水平和二硫键的形成成为了研究的热点之一。
癌细胞具有异常活跃的代谢状态，使其对氧化应激具有一定的抵抗能力。
作为一种重要的抗氧化剂，GSH在癌细胞中的水平明显升高。
高水平的GSH不仅能够保护细胞免受外界的氧化性损害，还能够调节细胞内的氧化还原平衡。
因此，GSH被认为是癌细胞存活和增殖的重要因素。
在癌细胞中，二硫键的形成和断裂也具有重要的生物学意义。
二硫键是一种连接两个半胱氨酸残基的共价键，具有很强的稳定性和抗氧化能力。
正常细胞中的二硫键能够维持蛋白质的结构和功能，但在癌细胞中，二硫键的形成受到调控，并且更多地参与了癌细胞的增殖和转化过程。
就癌细胞高GSH水平和二硫键的关系而言，有研究表明高水平的GSH能够促进癌细胞中二硫键的形成。
这种形成在某种程度上增强了癌细胞的生存能力和异常增殖能力。
因此，研究人员对于癌细胞中高GSH水平和二硫键的形成机制进行深入研究，以期望找到新的治疗策略，提高癌症的治愈率。
本文将从以下几个方面进行阐述：首先，介绍高GSH水平和癌细胞增殖之间的关系；其次，分析二硫键在癌细胞中的形成与断裂的影响；最后，探讨高GSH水平和二硫键的未来研究方向。
通过对这些内容的深入研究，我们有望揭示癌症发病机理的新线索，为癌症的治疗提供新的思路和方法。
1.2文章结构文章结构部分应包括作者对于整篇文章的整体安排和组织的说明。
以下是一个可能的示例：1.2 文章结构本文分为引言、正文和结论三个部分，以清晰有条理的方式呈现关于癌细胞高GSH水平二硫键的研究内容。
在引言部分，将对本文的研究背景和意义进行概述，介绍癌细胞以及GSH水平与二硫键之间的关系。
HOXA9和FGFR1在结直肠癌组织中的表达关系及临床意义
结直肠癌是一种恶性肿瘤,多发生于中老年人,主要与人口老龄化、不良的饮食习惯、吸烟、饮酒、肥胖、体育锻炼等有关[1]。
结直肠癌早期无症状或症状不明显,随着病情进展患者出现便血、大便习惯改变、腹部疼痛、腹部包块、贫血消瘦等。
虽然针对结直肠癌已经开发了一些分子靶向治疗剂,但几乎都仅在转移性结直肠癌中有效,不能治愈患者。
因此迫切需要新的生物标志物来预测、诊断和治疗结直肠癌[2]。
同源盒(homeobox gene ,HOXA )基因是高度保守的转录调节因子家族,同源盒A9(homeobox A9,HOXA9)是其家族成员,在肿瘤发生中起关键作用[3]。
Watanabe 等[4]发现HOXA9的表达在结直肠癌患者中上调且与淋巴结转移相关。
成纤维细胞生长因子受体(fibroblast growth factor receptor ,FGFR )1是成纤维细胞生长因子受体家族一员,研究表明FGFR1在多种人类恶性肿瘤中过表达[5]。
Erdem 等[6]发现FGFR1的过表达与结直肠癌中的肝转移相关。
但HOXA9和FGFR1在结直肠癌中的表达研究较少,因此本研究通过对结直肠癌患者中HOXA9和FGFR1表达关系进行分析,并探讨其临床意义。
1资料与方法1.1一般资料收集2016年1月—2019年5月南京市六合区人民医院收治的92例结直肠癌患者进行前瞻性研究,作为结直肠癌组,男62例,女30例;年龄35~81岁,中位年龄66.8岁。
同期88例疑似结直肠癌组织活检正常的对象为对照组,男47·经验论坛·Experience Forum ·[基金项目]江苏省自然科学基金项目(BK20171109)[作者简介]端传友(1979-07~),男,江苏南京人,硕士,副主任医师,研究方向:大肠癌的综合诊治。
E-mail:***********************HOXA9和FGFR1在结直肠癌组织中的表达关系及临床意义端传友徐伟叶璆菊南京市六合区人民医院普通外科（江苏南京211500）910例,女41例;年龄34~79岁,中位年龄65.0岁。
mTORC1
mTORC1/2双重抑制剂OSI -027抑制高氧诱导的肺成纤维细胞增殖和分化*吴黎虹， 唐坤， 党红星△， 符跃强， 刘成军， 李静， 许峰（重庆医科大学附属儿童医院重症医学科，国家儿童健康与疾病临床医学研究中心，儿童发育疾病研究教育部重点实验室，儿科学重庆市重点实验室，重庆 400014）［摘要］ 目的：分析哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin ， mTOR ）复合物1/2（mTORcomplex 1/2， mTORC1/2）双重抑制剂OSI -027对高体积分数氧（高氧）所致人胚肺成纤维细胞增殖和分化的抑制作用。
方法：高氧（95% O 2）处理人胚肺成纤维细胞MRC -5建立增殖分化模型，分为对照组、高氧组、高氧+OSI -027组和高氧+雷帕霉素组。
Western blot 检测α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin ， α-SMA ）、I 型胶原蛋白（collagen type I ， Col I ）、增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen ， PCNA ）、细胞周期蛋白D1（cyclin D1）、RhoA 、Rho 相关含卷曲螺旋蛋白激酶1（Rho -associated coiled -coil -containing protein kinase 1， ROCK1）、蛋白激酶B （protein kinase B ， PKB/AKT ）、p -AKT 和mTOR 的表达； CCK -8实验检测细胞活力；流式细胞术检测细胞周期。
结果：与对照组相比，PCNA 、cyclin D1、Col I 和α-SMA 表达随高氧处理时间增加而增加（P <0.05）。
与高氧组相比，OSI -027及雷帕霉素干预后，细胞活力下降，细胞周期被抑制在G 1期（P <0.05）。
半胱氨酸代谢途径调控与肿瘤治疗新策略
Journal of China Pharmaceutical University2021，52（5）：522-528学报半胱氨酸代谢途径调控与肿瘤治疗新策略解放，刘楠*（中国药科大学生命科学与技术学院，南京211198）摘要肿瘤细胞通过代谢重编程满足其特殊的物质和能量需求。
现有肿瘤代谢重编程研究以糖代谢研究为主，而氨基酸代谢在肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭方面也发挥了重要作用，是肿瘤能量代谢研究的新兴热点。
半胱氨酸是一种生糖氨基酸，其代谢途径涉及多种酶和产物，可调节诸如氧化应激、能量代谢和细胞自噬等生理和病理过程。
本文从肿瘤细胞中半胱氨酸的外源转运和内源性转化途径、半胱氨酸代谢途径对肿瘤发生发展的多种调控机制以及基于半胱氨酸代谢途径的潜在治疗靶点等方面进行了综述，为肿瘤临床用药提供理论依据。
关键词代谢重编程；半胱氨酸；胱氨酸转运蛋白；抗肿瘤；氧化应激中图分类号R730.5文献标志码A文章编号1000-5048（2021）05-0522-07doi：10.11665/j.issn.1000-5048.20210502引用本文解放，刘楠.半胱氨酸代谢途径调控与肿瘤治疗新策略［J］.中国药科大学学报，2021，52（5）：522–528.Cite this article as：XIE Fang，LIU Nan.Regulation of cysteine metabolism and new strategies for cancer treatment［J］.J China Pharm Univ，2021，52（5）：522–528.Regulation of cysteine metabolism and new strategies for cancer treatment XIE Fang,LIU Nan*School of Life Science&Technology,China Pharmaceutical University,Nanjing211198,ChinaAbstract In order to sustain prodigious anabolic needs,tumor cells need metabolic reprogramming that differs from untransformed somatic cells.Besides glucose metabolism in tumor,amino acid metabolism also plays an important role in tumor cell proliferation,migration,and invasion.It is an emerging trend in tumor energy metabolism research.The metabolic pathway of cysteine,a glucose-producing amino acid,involves a variety of enzymes and products,regulating physiological and pathological processes such as oxidative stress,energy metabolism,and autophagy.This article focuses on the exogenous transport and endogenous conversion pathways of cysteine in tumor cells,the various regulatory mechanisms of cysteine metabolism pathways on the occurrence and development of tumors,and the potential therapeutic targets based on cysteine metabolism pathways,which can provide a theoretical basis for clinical use of drugs against tumors.Key words metabolic reprogramming;cysteine;cystine transporters;antitumor;oxidative stressThis work was supported by the National Key Research and Development Program of China(No.2018YFA0902000)自1920年奥托·瓦伯格发现瓦伯格效应，肿瘤代谢重编程的研究已经超过了一百年。
硫氧还蛋白的结构及在生物抗氧化中的功能
文章编号 : 1000-1336(2011)03-0429-05硫氧还蛋白的结构及在生物抗氧化中的功能马宇光 杨 帆 杨卫军浙江大学生命科学学院细胞与发育生物学研究所，杭州 310058摘要：硫氧还蛋白(thioredoxin, Trx)是广泛存在于原核与真核生物体内的氧化还原调节蛋白。
Trx 通过对目标蛋白质进行还原， 从而调节机体的氧化还原平衡。
Trx 与硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase, TrxR)及NADPH 共同组成硫氧还蛋白系统参与众 多生理过程。
细胞中的活性氧是导致生物氧化胁迫的一个主要方面。
Trx 可以通过对细胞内被氧化的二硫键的还原来修复机体 的氧化损伤，并通过这种方式防止机体衰老。
同时，Trx 系统可以与其它氧化还原系统如谷胱甘肽(GSH)系统协调配合，并消除 体内过多的活性氧。
关键词：硫氧还蛋白；氧化胁迫；活性氧 中图分类号：Q71硫氧还蛋白(thioredoxin , Trx)是一类广泛存在于 原核和真核生物体内的小分子蛋白质，具有维持生 物体内氧化还原平衡和调控生物信号传导等多种功 能。
Tr x 与硫氧还蛋白还原酶(thioredo xin reductase, T rx R )[1]和NADPH 构成了T rx 硫氧还蛋白系统[2]，该系 统具有修复被氧化蛋白质、消除生物体内氧自由基 的抗氧化作用并对肿瘤的生长起着促进作用。
1. 硫氧还蛋白的结构特点与硫氧还蛋白系统迄今，已有多个物种的Trx 结构得到了解析，对 比发现，在不同物种中发现的T r x 在进化上高度保 守，分子量都在12 kDa 左右，大都具有-Cys-Gly-Pro- Cys-(-CGPC-)的活性中心位点。
活性位点中两个半胱 氨酸巯基能够可逆地形成二硫键，使Trx 具有氧化态 和还原态两种存在形式，参与氧化还原反应。
Trx 具有极其牢固的三级结构(图 1)，其分子内四图 1 Escherichia coli 的T rx 三级结构[4]图中的两个实心圆代表活性中心位点中形成二硫键的两个硫原子。
消瘤藤总香豆素通过诱导铁死亡抑制小细胞肺癌H1688细胞增殖
网络出版时间：２０２３－０６－０９０８：３３：５８ 网络出版地址：ｈｔｔｐｓ：／／ｋｎｓ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ２／ｄｅｔａｉｌ／３４．１０８６．Ｒ．２０２３０６０８．１３４４．０３４．ｈｔｍｌ消瘤藤总香豆素通过诱导铁死亡抑制小细胞肺癌Ｈ１６８８细胞增殖黎 骊，陆国寿，王 丽，吕纪华，黄建猷，刘 瑛（广西中药质量标准研究重点实验室，广西壮族自治区中医药研究院，广西南宁 ５３００２２）收稿日期：２０２２－１２－２３，修回日期：２０２３－０３－２５基金项目：广西自然科学基金青年科学基金项目（Ｎｏ２０２２ＧＸＮＳＦＢＡ０３５５００）；广西自然科学基金面上项目（Ｎｏ２０２０ＧＸＮＳＦＡＡ２５９０６７）；广西壮族自治区中医药研究院自主研究项目（Ｎｏ桂中自研２０２１００３）作者简介：黎 骊（１９９０－），女，博士，助理研究员，研究方向：中药药理学，Ｅ ｍａｉｌ：ｓｎａｉｌｗｌｉｌｙ＠１６３．ｃｏｍ；刘 瑛（１９８２－），女，硕士，副主任药师，研究方向：天然产物分子药理学，通信作者，Ｅ ｍａｉｌ：ｓｈｅｎｇｈｕａｋａｉ＿１９９７＠１６３．ｃｏｍｄｏｉ：１０．１２３６０／ＣＰＢ２０２２０３０９８文献标志码：Ａ文章编号：１００１－１９７８（２０２３）０６－１１１５－０７中国图书分类号：Ｒ２８４ １；Ｒ３２９ ２８；Ｒ５９１ １；Ｒ７３４ ２摘要：目的 研究消瘤藤总香豆素（ｔｏｔａｌｃｏｕｍａｒｉｎｓｆｒｏｍＰｉ ｌｅｏｓｔｅｇｉａｔｏｍｅｎｔｅｌｌａ，ＴＣＰＴ）通过诱导铁死亡抑制小细胞肺癌（ｓｍａｌｌｃｅｌｌｌｕｎｇｃａｎｃｅｒ，ＳＣＬＣ）Ｈ１６８８细胞增殖的机制。
方法 采用梯度浓度的ＴＣＰＴ处理ＳＣＬＣ细胞Ｈ１６８８后，ＣＣＫ ８法检测ＴＣＰＴ对细胞增殖的抑制作用；利用透射电镜观察给药后线粒体形态学变化；二氯荧光素（ＤＣＦＨ ＤＡ）荧光探针检测细胞内活性氧（ＲＯＳ）水平；ＢＯＤＩＰＹ５８１／５８９Ｃ１１探针检测细胞内脂质过氧化物的生成能力；Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测细胞中铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化物酶４（ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅｐｅｒ ｏｘｉｄａｓｅ４，ＧＰＸ４）、Ｋｅｌｃｈ样环氧氯丙胺相关蛋白１（Ｋｅｌｃｈ ｌｉｋｅＥＣＨ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ，ＫＥＡＰ１）、核因子Ｅ２相关因子２（ｎｕ ｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒＥ２ｒｅｌａｔｅｄｆａｃｔｏｒ２，ＮＲＦ２）、铁蛋白重链１（ｆｅｒｒｉｔｉｎｈｅａｖｙｃｈａｉｎ１，ＦＴＨ１）的表达水平。
PD-L1和MMP2在结直肠癌组织中的表达及其临床意义
PD-L1和MMP2在结直肠癌组织中的表达及其临床意义【摘要】本研究探讨了PD-L1和MMP2在结直肠癌组织中的表达及其临床意义。
PD-L1和MMP2在结直肠癌中普遍高表达，并且其共同表达对结直肠癌的发展具有重要影响。
PD-L1和MMP2表达与结直肠癌的临床特征密切相关，预示着患者预后状况。
联合检测PD-L1和MMP2在结直肠癌治疗中具有重要意义，可为个体化治疗提供依据。
通过深入研究PD-L1和MMP2在结直肠癌中的表达及其临床意义，可以为结直肠癌患者的治疗和预后提供新的思路和方法。
未来研究应进一步探讨PD-L1和MMP2的作用机制，并开展临床试验验证其在结直肠癌治疗中的应用前景。
结语，PD-L1和MMP2在结直肠癌中的表达具有重要意义，值得进一步研究和应用。
【关键词】PD-L1, MMP2, 结直肠癌, 表达, 临床意义, 联合检测, 治疗, 特征, 研究, 应用, 展望1. 引言1.1 背景介绍深入研究PD-L1和MMP2在结直肠癌组织中的表达及其临床意义，对于探索结直肠癌的发生发展机制、寻找新的治疗靶点以及改善患者的预后具有重要意义。
本文旨在探讨PD-L1和MMP2在结直肠癌中的表达情况以及其临床相关性，为结直肠癌的精准治疗提供新的思路和策略。
1.2 研究目的以上。
本研究的目的在于探讨PD-L1和MMP2在结直肠癌组织中的表达情况及其临床意义，为临床治疗提供更有效的靶向治疗策略。
具体包括以下几点：一是分析PD-L1在结直肠癌组织中的表达水平及其与患者临床特征的关系；二是探讨MMP2在结直肠癌中的表达情况及其对肿瘤侵袭和转移的影响；三是研究PD-L1和MMP2共同表达对结直肠癌病情的影响，以及它们在结直肠癌治疗中的联合检测价值；四是总结PD-L1和MMP2在结直肠癌中的表达及其临床意义，为未来的研究和临床实践提供指导。
通过深入研究PD-L1和MMP2在结直肠癌中的表达及其临床意义，将有助于为结直肠癌患者提供更加个性化、精准的治疗方案，提高患者的治疗效果和生存率。
非甾体抗炎药综述
一．简介非甾体抗炎药( no n- steroidal ant i- inf lammatory dr ug s, NSAIDs) 是指具有解热、镇痛和消炎作用而非类固醇结构的药物。
临床应用极为广泛, 是仅次于抗感染药的第二大类药物1。
非甾体抗炎药是急、慢性风湿性疾病的非类固醇一线治疗药物, 具有抗炎、止痛和解热等作用, 主要用于炎症免疫性疾病的对症治疗, 能有效缓解肌肉、关节及炎症免疫性疾病的局部疼痛、肿胀等, 广泛用于腰背痛、牙痛、痛经、急性痛风、外伤或手术后疼痛、癌痛等的治疗, 且无成瘾性和依赖性的特点。
据不完全统计, 全世界大约有1亿多人在服用NSA ID s, 其中有一半以上是老年患者。
每天约有3 0 0 0 万关节炎患者服用NSAIDs，在我国最保守估计每年至少有500 万OA患者和4 2 0 万R A 患者在服用N S A I D s 。
在中国由于各种原因引起的急慢性疼痛的患者约占门诊总人数的1/ 5~ 1/ 4, 因此, 可以说N SA ID s 是临床医师特别是骨科大夫应用较多的药物之一2。
随着此类药物的研究进展, 其临床使用范围在不断扩展。
二．发展简史以阿司匹林为代表的N S A I D s ，具有神奇的、源远流长的历史。
追溯到公元前约460 年至377 年希波克拉底曾经使用柳树皮来治疗骨骼肌肉疼痛；1 7 6 3 年的英国传教士爱德蒙特·斯通（E d m a n dS t o n e ）第一次比较科学的描述将柳树叶煎液作为一种抗炎药；1828 年德国慕尼黑药学教授约翰·布赫勒（Johann Buchner）提取出柳树皮中的有效成分水杨苷，次年汉立·里劳西（Henri Leroux）获得其结晶；水杨酸则是意大利化学家雷非·皮立亚（Raffaele Piria）首次从水杨苷中获得，1859年德国化学家赫尔曼·柯比（Hermann Kolbe）完成了鉴定及合成其化学结构的工作，1 8 7 4 年水杨酸开始生产；鉴于水杨酸的胃肠道刺激性和不适的口感，1 8 9 7 年德国拜耳公司的化学家霍夫曼（H o f f m a n n ）成功合成了乙酰水杨酸；随后拜耳公司的首席药理学家海里希·狄里舍（H e i n r i c hDresser）通过自身实验和随后的动物实验证明乙酰水杨酸具有良好的抗炎和镇痛作用，并于1899 年注册了商品名为阿司匹林（Aspirin）。
过表达TrxR1重组HEK293细胞株的构建和鉴定
硫氧还蛋白还原酶1（TrxR1）属于吡啶核苷酸二硫化物氧化还原酶家族，作为目前已知的唯一能够还原硫氧还蛋白（Trx ）的酶，TrxR1可以将氧化型的Trx 还原成还原型Trx ［1］。
还原型的Trx 能够还原多种蛋白的二硫键，进而调控细胞的多种生物进程，如细胞增殖、分化以及凋亡等等［2］。
肿瘤细胞的代谢水平远高于正常细胞，因而在细胞内会产生大量活性氧［3］。
因此，肿瘤细胞往往会通过诱导抗氧化酶的表达来维持自身的氧化还原稳态，而TrxR1是其中一种被诱导的抗氧化酶。
近年来研究发现，TrxR1在多种肿瘤组织和细胞中高表达，如乳腺癌［4］、胃癌［5］、肺癌［6］和肠癌［7］等，并通过蛋白激酶B （PKB,又名AKT ）、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK ）及信号传导及转录激活蛋白3（Stat3）等信号通路促进肿瘤细胞增殖、抑制凋亡及诱导耐药，是一个理想的抗肿瘤药物开发靶点［3,8］。
目前靶向TrxR1的药物具有丰富的骨架结构，但尚无进入临床使用的TrxR1靶向药物，其中一大制约因素就是Construction and identification of a HEK293cell line with stable TrxR1overexpressionLÜXiaomei 1,ZHOU Zhiyin 1,ZHU Li 1,ZHOU Ji 2,HUANG Huidan 1,ZHANG Chao 1,LIU Xiaoping 11Center of Drug Screening and Evaluation,Wannan Medical College,Wuhu 241000,China;2Center for Reproductive Medicine,First Affiliated Hospital of Wannan Medical College,Wuhu 241000,China摘要：目的构建稳定过表达硫氧还蛋白还原酶1（TrxR1）的HEK293细胞株，为TrxR1的功能研究以及靶向TrxR1药物筛选提供细胞模型。
Prdx1与肿瘤
Prdx1与肿瘤高军;朱虹;高国兰【摘要】Peroxiredoxin 1(Prdx1)belongs to peroxide oxidoreductase protein(peroxiredoxin, Prdx)family,which is over-expressed in multiple cancers and it play an important role in antagonizing reactive oxygen species (ROS) therefore as works as anti-oxidations. Its expression is closely related with tumor proliferation, differentiation and metastasis as well as with sensibility to radiotherapy and chemotherapy. Its structure and biological function in tumors and regulation mechanism were reviewed in this paper. It can provide evidence to screen new therapeutic targets in the treatment of tumors.%Prdx1（peroxiredoxin 1）属于过氧化物氧化还原酶蛋白（peroxiredoxin，Prdx）家族成员，是一类在对抗活性氧簇（ROS）、抗氧化过程中发挥关键作用的蛋白质，在多种肿瘤组织中高表达，其表达与肿瘤细胞增殖、分化、转移、复发及放化疗的敏感性密切相关。
本文就Prdx1的结构、在肿瘤中的生物学功能及其信号调控机制等进行综述，为寻找新的肿瘤生物治疗靶点提供依据。
【期刊名称】《天津医药》【年(卷),期】2015(000)012【总页数】3页(P1464-1466)【关键词】Prdx1;过氧化物酶;肿瘤【作者】高军;朱虹;高国兰【作者单位】江西省人民医院妇科邮编330006;江西省人民医院妇科邮编330006;中国医科大学航空总医院妇科【正文语种】中文【中图分类】R730.2;R73-3众所周知，生命的进化经历了无氧至有氧的发展过程。
SOX2基因在结肠癌中的表达与远处转移的研究的开题报告
SOX2基因在结肠癌中的表达与远处转移的研究的开题报告一、研究背景及意义结肠癌是常见的消化系统肿瘤之一，其致死率较高。
远处转移是结肠癌死亡的主要原因之一。
SOX2基因是一个基本转录因子，参与细胞的增殖、分化和再生等过程。
SOX2的异常表达与多种肿瘤的发生和发展有关。
过去的研究发现在结肠癌组织中SOX2的表达水平明显增加。
但是目前对SOX2在结肠癌远处转移中的作用及机制相关研究还比较少。
本研究力图探讨SOX2在结肠癌远处转移中的作用并揭示其机制，为该疾病的治疗提供新思路和参考。
二、研究目的1. 探究SOX2基因在结肠癌远处转移中的表达情况及其与患者预后的关系；2. 实验比较SOX2高表达及低表达的结肠癌细胞的迁移能力和生长能力；3. 实验探究SOX2对结肠癌细胞转移的调节机制。
三、研究方法1. 病例收集及标本处理：收集结肠癌患者手术切除标本，包括原发瘤和远处转移组织。
用免疫组织化学或荧光定量PCR检测SOX2的表达情况，并进行患者预后分析。
2. 细胞培养及处理：选用SOX2表达水平高和低的结肠癌细胞系，实验比较它们的生长和迁移能力。
用Western blot和荧光定量PCR检测SOX2的表达，并用各种治疗方法调控SOX2表达并观察其对细胞的影响。
3. 机制研究：通过信号通路抑制试验及蛋白质相互作用实验探究SOX2对结肠癌细胞转移的调节机制。
四、预期结果及意义1. 结果预期能够探明SOX2在结肠癌远处转移中的作用和机制，并为该疾病的治疗提供新思路和参考。
2. 结果可指导临床医生选择更有效的治疗方案，改善患者的预后。
3. 研究结果可为结肠癌发生和发展的机制研究提供新的思路和方向，也为肿瘤细胞的迁移和转移方面的研究提供了新思路。
TROP-2在结肠癌中表达及临床意义
【 摘 要】 目的 探讨结肠癌组织中人滋养层细胞表面抗原 ２（ ＴＲＯＰ⁃２） 蛋白表达及临床意义。 方法 收集 ２０１７ 年 ３
月至 ２０１８ 年 １２ 月行手术切除并经病理组织学确诊的结肠癌组织及相应的癌旁组织 ８５ 例，采用免疫组化染色法检测组织
ＴＲＯＰ⁃２ 蛋白表达；分析其表达与结肠癌临床病理特征的关系。 采用 Ｌｏｇｉｓｔｉｃ 回归模型分析影响术后复发转移的因素。 结果
临床肿瘤学杂志 ２０２１ 年 ２ 月第 ２６ 卷第 ２ 期 Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，Ｆｅｂ． ２０２１，Ｖｏｌ．２６，Ｎｏ．２
· １５９·
ＴＲＯＰ⁃２ 在结肠癌中表达及临床意义
５１０１５０ 广州
广州医科大学附属第三医院胃肠外科
罗超元， 黄南祺， 吴小兵， 刘文明， 李志发１
ｐａｔｉｅｎｔｓ ｈａｄ ｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅ ｒｅｃｕｒｒｅｎｃｅ ａｎｄ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ， ａｎｄ ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ＴＲＯＰ⁃２ ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎ ｔｈｅ ｒｅｃｕｒｒｅｎｃｅ ａｎｄ
ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ ｇｒｏｕｐ ｗａｓ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ｔｈｅ ｎｏｎ⁃ｒｅｃｕｒｒｅｎｃｅ ａｎｄ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ ｇｒｏｕｐ ［ ７９ ４９％ （ ３１ ／ ３９） ｖｓ． ３９ ３９％ （ １３ ／ ３３） ］ ， ｗｉｔｈ
ｃｅｌｌ ｓｕｒｆａｃｅ ａｎｔｉｇｅｎ ２，ＴＲＯＰ⁃２） 是一种高表达于多种
１ 通讯作者，Ｅ⁃ｍａｉｌ：２４３８０１３２＠ ｑｑ．ｃｏｍ
上皮性肿 瘤 细 胞 表 面 糖 蛋 白 ［１］ ， 但 在 正 常 组 织 中
ＴＲＯＰ⁃２ 蛋白不表达或低表达 ［２］ 。 关于 ＴＲＯＰ⁃２ 在
硫氧还蛋白的生物学功能及与人类疾病的关系
硫氧还蛋白的生物学功能及与人类疾病的关系高建波【摘要】硫氧还蛋白是一类广泛表达于各种生物组织器官的小分子蛋白质，在调节机体的氧化还原反应和抗氧化损伤中发挥重要作用。
同时，还具有转录调节、抗凋亡等生物学功能，且与肿瘤、类风湿性关节炎、心血管疾病等多种人类疾病密切相关，具有重要的研究价值。
【期刊名称】《中国医药指南》【年(卷),期】2013(000)018【总页数】3页(P90-92)【关键词】硫氧还蛋白;生物功能;疾病【作者】高建波【作者单位】天津市药品检验所，天津 300070【正文语种】中文【中图分类】Q51硫氧还蛋白（Thioredoxin，Trx）是一类高度保守的低分子量蛋白质，参与氧化还原反应等多种生物功能，已成为国际上医学领域研究的热点[1-3]，现对其近年来的主要生物功能及与人类疾病关系方面的研究综述如下。
Trx是一种紧密结合的蛋白质，疏水核心区域由5股β折叠构成，其末端被4个α螺旋所包绕。
它调节氧化还原活性的二硫键/巯基结构位于氨基酸保守序列-Trp-Cys-Gly-Pro-Cys-。
有活性的还原型Trx（Trx-（SH）2含有巯基，可以与二硫键相互作用，还原被氧化的多种蛋白，转变为无活性的氧化型Trx（Trx-S2）。
其可在Trx还原酶（thioredoxin reductase，TrxR）及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（nicotinamide adenine dinucleotide phosphate，NADPH）作用下，转变为还原型。
Trx根据末端氨基酸序列的差异，主要分为Trx1和Trx2两种类型。
Trx1位于细胞浆和细胞核，氨基酸序列长105，分子量为12kDa；Trx2位于线粒体，氨基酸序列长166，分子量为18kDa，含有60个氨基酸组成的N末端线粒体定位信号[4-6]。
2.1 抗氧化作用Trx、TrxR、硫氧还蛋白过氧化物酶（thioredoxin peroxidase，TrxP）和NADPH构成了Trx系统，共同调节氧化还原反应。
CTHRC1在结直肠癌中的表达及作用机制
CTHRC1在结直肠癌中的表达及作用机制严力;叶耿泰;沈智勇;朱显军;刘浩;李国新【摘要】目的：检测胶原三股螺旋重叠蛋白（CTHRC1）在结直肠癌组织及细胞中的表达，探讨CTHRC1对结直肠癌细胞生物学特性的影响和作用机制。
方法应用实时荧光定量PCR和免疫印迹检测CTHRC1在结直肠癌组织和5株结直肠癌细胞的表达；将靶向作用于CTHRC1的shRNA和NC转染进LOVO细胞；CCK-8、Transwell、平板克隆检测细胞的增殖、迁移、侵袭、克隆形成能力。
Western blotting检测转染后CTHRC1、ERK1/2、P-ERK1/2、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、β-catenin表达的变化。
结果与正常黏膜组织相比，20例癌组织中的CTHRC1 mRNA的平均表达量为0.0411±0.054，显著高于正常黏膜组织P=0.016，蛋白水平的结果与之一致；同时，CTHRC1在SW620和LOVO细胞里的表达（mRNA水平和蛋白水平）均显著高于HT29细胞株；较之对照组，CTHRC1敲低组抑制了LOVO细胞的增殖、迁移、侵袭和克隆形成能力，差异均具有统计学意义P<0.05。
当CTHRC1在mRNA和蛋白水平的表达均被明显抑制时，总ERK1/2在保持基本不变的的前提下，P-ERK1/2明显降低，EMT出现逆转（即MET，E-cadherin升高，N-cadherin、Vimentin、β-catenin降低）。
结论 CTHRC1在结直肠癌组织及高转移潜能的人结直肠癌细胞株SW620和LOVO中高表达。
敲低CTHRC1抑制了结直肠癌细胞株LOVO的增殖、迁移、侵袭、克隆形成能力。
CTHRC1通过增强ERK1/2的磷酸化所介导的EMT促进结直肠癌的侵袭转移。
%Objective To explore the expression of collagen triple helix repeat containing 1 (CTHRC1) in colorectal cancer and study its rolein regulating the biological behaviors of colorectal cancer LoVo cells in vitro. Methods Real-time PCR and Western blotting were used to detectthe expressions of CTHRC1 in colorectal cancer tissue and paired adjacent nontumorous tissue and in 5 colorectal cancer cells. pGPU6-CTHRC1-shRNA was transfected into LoVo cells and the changes in cell proliferation was assessed using cell counting kit-8 (CCK8) assay;the changes in cell migration and invasion were investigated using Transwell assay; plate colony forming test was used to evaluate the adhesion and colony forming activity of the cells. Western blotting was used to analyze the changes in the expressions of the related pathway markers. Results The relative expression of CTHRC1 mRNA in the cancer tissue specimens was 0.0411 ± 0.054, significantly higher than that in the adjacent tissues (P=0.016); this result was consistent with that of the protein assay. SW620 and LoVo cells showed obviously higher expressions of CTHRC1 than HT29 and SW480 cells at both mRNA and protein levels. LoVo cells transfected with CTHRC1 shRNA exhibited significantly suppressed proliferation, migration, invasion and colony-forming ability (P<0.05) and lowered expression of phosphorylated ERK1/2 (P-ERK1/2), but the expression of total ERK1/2 showed no obvious changes. CTHRC1 inhibition caused reverse epithelial-mesenchymal transition LoVo cells shown by increased E-cadherin expression and decreased expressions of N-cadherin, vimentin, andβ-catenin. Conclusion CTHRC1 is up-regulated in colorectal cancer tissues and SW620 and LoVo cells to promote the cell proliferation, migration, invasion and colony formation. CTHRC1 can enhance epithelial-mesenchymal transition of colorectal cancer cells by activating ERK1/2 to promote tumor cell metastasis and invasion.【期刊名称】《南方医科大学学报》【年(卷),期】2015(000)005【总页数】6页(P767-771,776)【关键词】结直肠癌;胶原三股螺旋重叠蛋白;短发卡RNA;上皮间充质转化;ERK1/2【作者】严力;叶耿泰;沈智勇;朱显军;刘浩;李国新【作者单位】南方医科大学南方医院普外科，广东广州 510515;南方医科大学南方医院普外科，广东广州 510515;南方医科大学南方医院普外科，广东广州510515;南方医科大学南方医院普外科，广东广州 510515;南方医科大学南方医院普外科，广东广州 510515;南方医科大学南方医院普外科，广东广州 510515【正文语种】中文结直肠癌日益成为危害人类健康的重大杀手，于全球已成为病死率居第四的恶性肿瘤［1］。
肿瘤细胞中的过表达酶-概述说明以及解释
肿瘤细胞中的过表达酶-概述说明以及解释1. 引言1.1 概述概述肿瘤是一种异常增生的细胞群体，其发展和生长受到多个因素的调控。
过表达酶是一类在肿瘤细胞中异常高表达的酶，它们在肿瘤细胞的生长、分裂、侵袭和转移过程中起着重要的调控作用。
本文将对肿瘤细胞中过表达酶的定义、功能及其在肿瘤发展中的重要性进行详细探讨。
过表达酶是指在肿瘤细胞中表达水平异常增加的酶，与正常细胞相比，其活性和表达量明显增加。
这些过表达酶可以包括代谢酶、修复酶、信号传导酶等不同类型的酶，它们在细胞内参与了多个关键的代谢和调控过程。
由于过表达酶在肿瘤细胞中的异常高表达，其功能与调控作用也具有不同于正常细胞的特点。
肿瘤细胞中的过表达酶在肿瘤发展中起着重要的调控作用。
首先，它们参与了肿瘤细胞的增殖和生长过程。
某些过表达酶能够促进细胞周期的进程，使肿瘤细胞能够不受限地增殖，从而导致肿瘤的快速生长。
其次，过表达酶还参与了肿瘤细胞的侵袭和转移过程。
这些酶能够分解细胞外基质，促进肿瘤细胞的侵袭和转移，增加肿瘤的侵袭性和转移能力。
此外，过表达酶还与肿瘤细胞的耐药性和免疫逃逸等现象密切相关。
本文将在接下来的章节中详细探讨肿瘤细胞中过表达酶的相关知识。
首先，我们将对肿瘤细胞中过表达酶的定义和功能进行介绍，以便更好地理解它们在肿瘤发展中的作用。
接着，本文将重点讨论过表达酶在肿瘤细胞中的重要性，包括其在肿瘤细胞增殖、侵袭、转移以及治疗抗性中的作用。
最后，我们将总结本文的主要内容，并探讨过表达酶对肿瘤治疗的意义，希望通过对这一领域的研究，能够为肿瘤治疗提供新的思路和方法。
文章结构部分的内容可以包括以下内容：文章结构部分旨在介绍整篇文章的组织结构，以帮助读者了解文章的脉络和内容安排。
本文按照以下结构展开讲述肿瘤细胞中的过表达酶的相关问题。
第一部分是引言部分，旨在引入文章的主题并给出整体的背景和目的。
引言部分包括三个方面的内容。
1.1 概述：在概述部分，我们将简要介绍肿瘤细胞和酶的基本概念，以及肿瘤细胞中过表达酶的现象。
硫氧还蛋白过氧化物酶
硫氧还蛋白过氧化物酶简介硫氧还蛋白过氧化物酶（thioredoxin peroxidase）是一种催化还原剂的酶，也被称为硫氧还蛋白过氧化酶。
该酶广泛存在于细菌、植物和动物中，起着重要的抗氧化作用。
硫氧还蛋白过氧化物酶能够还原氧化的硫氧还蛋白，并降解过氧化氢、有机过氧化物等有害物质，保护细胞免受氧化应激的损害。
结构硫氧还蛋白过氧化物酶在结构上可分为两个主要类别：2-硫氧还蛋白过氧化物酶（Type 2 thioredoxin peroxidase，TPx-2）和硫氧还蛋白过氧化物酶（Type 1 thioredoxin peroxidase，TPx-1）。
两种酶的氨基酸序列和结构差异较大。
2-硫氧还蛋白过氧化物酶（TPx-2）TPx-2由单个多肽链组成，具有两个催化活性位点。
每个活性位点都包含一个催化二硫键的半胱氨酸残基。
TPx-2的二硫键会在酶催化过程中与一氧化碳互换，实现还原反应。
硫氧还蛋白过氧化物酶（TPx-1）TPx-1也是一种由单个多肽链组成的酶，但其催化活性位点只有一个。
TPx-1的催化过程与TPx-2类似，都依赖于半胱氨酸残基的还原能力。
催化机制硫氧还蛋白过氧化物酶通过催化二硫键的形成和断裂实现对硫氧还蛋白的还原。
其中，半胱氨酸残基是关键的催化物质。
硫氧还蛋白过氧化物酶的催化过程可分为如下几步：1.氧化态酶的初始状态：氧化态酶的催化半胱氨酸残基形成了一个二硫键（S-S），并处于高能状态。
2.还原态酶的生成：还原态酶中的半胱氨酸残基通过对二硫键断裂和形成的动态过程，将活性位点的半胱氨酸残基还原至单个巯基（SH）状态。
3.反应底物的催化：巯基（SH）能够与硫氧还蛋白中的半胱氨酸残基发生互换反应，将氧化态的硫氧还蛋白还原。
4.催化产物的释放：催化产物（如还原的硫氧还蛋白）被释放出来，与其他反应底物继续进行反应。
生理功能硫氧还蛋白过氧化物酶在细胞中起到重要的抗氧化作用，能够保护细胞免受氧化应激的损伤。
硫氧还蛋白过氧化物酶
硫氧还蛋白过氧化物酶硫氧还蛋白过氧化物酶（Sulfiredoxin Peroxiredoxin，SRX-PRX）是一种重要的细胞抗氧化酶，能够清除细胞内的过氧化物和ROS （Reactive Oxygen Species），维持细胞内环境的稳定。
本文将从SRX-PRX的结构、功能、调控等方面进行详细阐述。
一、SRX-PRX的结构SRX-PRX是由两个蛋白质组成的复合物，其中SRX分子量为12kDa，PRX分子量为22kDa。
SRX与PRX之间通过互相作用结合在一起。
在不同生物体系中，SRX-PRX复合物形态有所不同。
在哺乳动物中，SRX和PRX之间通过二硫键相互作用形成二聚体或四聚体。
而在酵母中，SRX和PRX之间则以1:1比例结合成一个异源三聚体。
二、SRX-PRX的功能1.清除ROSROS是代表性的自由基，其产生来源包括线粒体呼吸链、NADPH氧化酶等。
ROS对于细胞内蛋白质、核酸和脂质等生物大分子具有强烈的氧化损伤作用。
SRX-PRX能够清除ROS，从而维持细胞内环境的稳定。
2.调节细胞信号通路SRX-PRX通过对ROS的清除作用，调节了多种重要的信号通路，如NF-κB、MAPK等。
在NF-κB信号通路中，SRX-PRX通过清除ROS，抑制了IκBα的磷酸化降解和NF-κB的激活。
在MAPK信号通路中，SRX-PRX则通过清除ROS，抑制了JNK和p38 MAPK等关键因子的激活。
3.参与代谢调控SRX-PRX还参与了多种代谢调控过程。
例如，在脂质代谢过程中，SRX-PRX能够通过清除ROS保护脂质不被氧化损伤；在巨噬细胞炎症反应中，SRX-PRX则能够减少ROS对NO合成酶（iNOS）的氧化损伤作用，从而保护NO合成酶不被氧化失活。
三、SRX-PRX的调控1.转录水平上的调控在转录水平上，多种因子可以影响SRX和PRX基因的表达。
例如，在细胞内氧气浓度下降时，HIF-1α能够结合到SRX和PRX基因的启动子区域上，促进SRX和PRX的表达。
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ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ．Ｃｅｌｌｓ ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｗｉｔｈ ｅｍｐｔｙ ｖｅｃｔｏｒ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ
ｇｒｏｕｐｓ ｗｅｒｅ
ａｓ
ｃｏｎｔｒｏｌｓ ａｎｄ ｓｈＰＲＤＸ２一Ｆ３ ｗａｓ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ
ａｓ
ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ．Ｔｗｏ
（ＣＣＫ一８）ａｓｓａｙ，ａｎｄ
ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ａｎａｌｙｓｅｓ ｏｆ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ［ｂｙ ｔｈｅ ｃｅｌｌ ｃｏｕｎｔｉｎｇ ｋｉｔ一８ ｐｌａｔｅ ｃｏｌｏｎｙ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ａｓｓａｙ］，ａｎｄ ｃｅｌｌ ｍｉｇｒａｔｉｏｎ（ｗｏｕｌｄ ｈｅａｌｉｎｇ ｔｅｓｔ，Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ）． Ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ＰＲＤＸ２ ｐｒｏｔｅｉｎ ｗａｓ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｇｒａｄｕａｌｌｙ
可见棕黄色或棕褐色颗粒。
材料与方法 １．一般资料：收集１２例结直肠癌及其癌旁组织 （距癌组织＞１０ ｃｍ远端的肠黏膜）作为研究对象，均 来源于福建医科大学附属协和医院结直肠癌患者手术
【关键词】硫氧还蛋白过氧化物酶２蛋白；结直肠癌；组织芯片；增殖；转移
基金项目：福建省医学创新基金（２０１１ＣＸ３３）
Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｐｅｒｏｘｉｒｅｄｏｘｉｎ ２ ｉｎ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ
ｃａｎｃｅｒ
ａｎｄ ｉｔｓ ｅｆｆｅｃｔ ａｎｄ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ
ｏｎ
ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ
我们采用Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ和免疫组织化学技术检测
硫氧还蛋白过氧化物酶２（ＰＲＤＸ２）在结直肠癌中的表
人ＰＲＤＸ２抗体，１：１ ０００）过夜，Ｔｒｉｓ—ＨＣｌ缓冲液 （ＴＢＳＴ）洗膜３次；ＡＬＰ酶标记的羊抗鼠二抗体室温孵
育ｌ ｈ，ＴＢＳＴ洗膜４次；增强型化学发光试剂（ＥＣＬ）发 光、曝光。 ３．免疫组织化学：采用Ｅｎｖｉｓｉｏｎ二步法检测组织 芯片ＰＲＤＸ２蛋白表达。一抗浓度为１：１００，４ ｑｃ孵育
ｍｉｇｒａｔｉｏｎ ｏｆ ＨＣＴｌｌ６ ｃｅｌｌｓ
Ｈｏｎｇ
ｒａｎｆｅｎｇ，ｘｕ Ｒｏｎｇｙｕ，Ｗａｎｇ Ｑｉｎｇｌａｎ，Ｈｏｎｇ Ｃｈｅｎｇｙｅ， Ｚｈ咖ｅｎｇ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｇｅｎｅｒａｌ Ｓｕｒｇｅｒｙ，ｔｈｅ Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ Ｑｕａｎｚｈｏｕ Ｆｉｒｓｔ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｆｕｊｉａｎ Ｍｅｄ＆ａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｑｕａｎｚｈｏｕ ３６２０００，Ｃｈｉｎａ ０ Ｃｈｅｎ ＤＢ，Ｘｕ ＲＲ，Ｗａｎｇ ＱＬ，Ｈｏｎｇ ＣＹ，Ｈｏｎｇ ｚＰｌ；Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ・ ｏｇｙ，ｔｈｅ‘Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ Ｕｎｉｏｎ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｆｕｊｉａｎ Ｍｅｄ＆ａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｆｕｚｈｏｕ ３５０００４，Ｃｈｉｎａ（Ｚｈｏｕ ｙＦ）
ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｗａｓ
Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ ａｎｄ ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ｔｈｅ
ｗｉｔｈ ａｎｄ
ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ
ｏｎｅ
ｍｉｇｒａｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｕｓｉｎｇ ｏｆ ＰＲＤＸ２ ＷａＳ ｄｅｔｅｃｔｅｄ，ａｎｄ ｉｔｓ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ
ａｎｄ ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ ｏｆ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ
ｃａｎｃｅｒ
ｎｅｇａｔｉｖｅｃｏｎｔｒｏｌ（ＮＣ）ｗｅｒｅ
ｄｅｓｉｇｎｅｄ
ａｎｄ
ａｎａｌｙｚｅｄ．Ｔｈｒｅｅ ｓｈＲＮＡ ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ＰＲＤＸ２ ｉｎｆｅｅｔｅｄ ｉｎｔｏ ｔｈｅ ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ＨＣＴｌｌ６．
ＳｈＰＲＤＸ２一Ｆ３ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｓｔ ｓｉｌｅｎｃｉｎｇ ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｉｅｓ ｗａｓ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ｆｏｒ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ａｎａｌｙｓｅｓ ａｆｔｅｒ ｐｕｒｏｍｙ—
ｃａｎｃｅｒ
ｕｓｅｄ ｉｎ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ
ｔｉｏｎ
ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ
ａｎｄ ｅａｒｌｙ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ．ＰＲＤＸ２ ｇｅｎｅ ｓｉｌｅｎｃｉｎｇ ｃｏｕｌｄ ｉｎｈｉｂｉｔ ｔｈｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａ—
ｃａｎｃｅｒ
ａｎｄ ｉｎｃｒｅａｓｅ ｔｈｅ ｍｉｇｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ
・５８５・
ｐｒｏｔｅｉｎ
ｓｉｏｎ．Ａｔｉｅｒ ｓｉｌｅｎｃｅｄ．ｔｈｅ ｃｌｏｎｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ ＨＣＴｌ １６ ｉｎ ｓｈＰＲＤＸ２一Ｆ３（６９．５３±５．２０）ｃｅｌｌｓ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｌｏｗｅｒ ｔｈａｎ ｓｈＣｏｎｔｒｏｌ（９８．３３ ４－１０．６９）ｃｅｌｌｓ（Ｐ＜０．０５）．Ａｓ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ， ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ ＨＣＴｌ １６ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ ａｎｄ ｔｈｅ ｍｉｇｒａｔｉｏｎ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉ— ｃａｎｔｌｙ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｆ Ｐ＜０．０５）．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ Ｅ—ｃａｄｈｅｒｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｌｅｖｅｌ ｗａｓ ｒｅｄｕｃｅｄ．ａｎｄ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ Ｎ—ｃａｄｈｅｒｉｎ。Ｖｉｍｅｎｔｉｎ，Ｓｎａｉｌ ａｎｄ Ｓｌｕｇ
王青兰、洪成业、洪志鹏）；３５０００４福州，福建医科大学附属协和医院消化内科（周艳峰）
通信作者：陈德渡，Ｅｍａｉｌ：ｄｅｂｏｑｚ＠１６３．ｃｏｍ
ＤＯＩ：１０．３７６０／ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－９０３０．２０１６．０３．０１０ 【摘要】 目的探讨硫氧还蛋白过氧化物酶２（ＰＲＤＸ２）蛋白在结直肠癌、腺瘤及正常黏膜组
Ｉｎ ａｄｄｉｔｉｏｎ．Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ ｗａｓ ａｌｓｏ ｕｓｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｃｔ ｔｈｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏ， Ｖｉｍｅｎｔｉｎ，Ｓｎａｉｌ ａｎｄ Ｓｌｕｇ．Ｒｅｓｕｌｔｓ ｆｒｏｍ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ
ｃａｎｃｅｒ
・５８４・
主堡塞堕窆Ｅ型苤圭！Ｑ！！生！旦箜！！鲞筮！塑垦！堡』曼翌塾垡：丛！些！！Ｑ！鱼：！尘：！！：№：！
・大肠外科・
硫氧还蛋白过氧化物酶２在人结直肠癌的 表达及其对ＨＣＴｌ １６细胞增殖、迁移的作用
陈德波周艳峰许荣誉王青兰
洪成业
洪志鹏
作者单位：３６２０００泉州，福建医科大学附属泉州第一医院普外科（陈德波、许荣誉、
达，分析其表达水平与临床病理特征和患者生存率之
间的关系。此外，采用小干扰ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）技术，用慢
病毒感染结直肠癌细胞，建立沉默ＰＲＤＸ２稳转细胞 株，观察其对结直肠癌细胞ＨＣＴｌ １６增殖和迁移的影 响，探讨沉默ＰＲＤＸ２对细胞上皮一间充质转化（ＥＭＴ）
过程的影响。
过夜。二氨基联苯胺（ＤＡＢ）显色约１０ ｍｉｎ，苏木素复 染和盐酸乙醇分化后脱水、封片。用磷酸盐缓冲液 （ＰＢＳ）代替一抗作为阴性对照。由２名病理医生读片 评价表达情况。结果判读：ＰＲＤＸ２阳性信号为胞质中
ｃｅｌｌｓ ＨＣＴｌ ｌ ６．ａｎｄ ｉｔ ｍａｙ ｂｅ ｒｅｌａｔｅｄ
ｔｏ
ｔｈｅ Ｓｎａｉｌ ａｎｄ
Ｓｌｕｇ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．
【Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】Ｐｅｍｘｉｒｅｄｏｘｉｎ ２ ｐｒｏｔｅｉｎ；Ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｎｃｅｒ；Ｔｉｓｓｕｅ ｃｈｉｐ；Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ；Ｍｉｇｒａｔｉｏｎ Ｆｕｎｄ ｐｒｏｇｒａｍ：Ｍｅｄｉｃａｌ Ｉｎｎｏｖａｔｉｖｅ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ ｏｆ Ｆｕｊｉａｎ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ（２０１ １ ＣＸ３３）
Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ａｕｔｈｏｒ：Ｃｈｅｎ Ｄｅｂｏ．Ｅｍａｉｌ：ｄｅｂｏｑｚ＠１６３．ｅｏｍ
Ｃｈｅｎ Ｄｅｂｏ，Ｚｈｏｕ
【Ａｂｓｔｒａｃｔ】
ｔｅｉｎ ｉｎ
Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｐｅｒｏｘｉｒｅｄｏｘｉｎ ２（ＰＲＤｘ２）ｐｒｏ－ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｎｃｅｒ．ａｄｅｎｏｍａ ａｎｄ ｎｏｒｍａｌ ｍｕｃｏｓａ ｔｉｓｓｕｅｓ．ｔｈｅ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ＰＲＤＸ２
ｏｎ
ｐｒｏｔｅｉｎ ａｎｄ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｎｃｅｒｓ．ａｎｄ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｓｍａｌｌ ｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇ ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）一ｍｅｄｉａｔｅｄ ｓｉｌｅｎｃｉｎｇ ｏｆ ＰＲＤＸ２ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ
ｃａｎｃｅｒ
ＨＣＴｌ １６ ｃｅｌｌｓ ｐｍｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ
８３．９６％（１５７／１８７）ｌ。ａｄｅｎｏｍａ
ｐｒｏｔｅｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｗａｓ
６４．５２％（４０／６２）ｌ
ｒａｔｅ
ｔｏ
ｎｏｒｍａｌ
ｃａｎｃｅｒ
ｔｉｓｓｕｅｓ
１６．６７％
（２５／１５０）】（Ｐ＜０．０１）．ＰＲＤＸ２ ０．０１）．ａｎｄ
ｔｕｍｏｒ
ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ
ｗｅｒｅ
ｉｎｃｒｅａｓｅｄ
ｄｕｅ
ｔｏ
ＰＲＤＸ２ ｇｅｎｅ ｉｎｔｅｆｆｅｒｅｎｃｅ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ
ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ
ＰＲＤＸ２ ｐｒｏｔｅｉｎ ｍａｙ ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ．ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ
ｏｆ ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ｃａｎｃｅｒ．Ａｓ ｔｈｅ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｄｉｃａｔｏｒ．ＰＲＤＸ２ ｐｒｏｔｅｉｎ ｈａｓ ｔｈｅ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ａｂｉｌｉｔｙ ｔｏ ｂｅ
织中的差异性表达及其与结直肠癌的生物学关系；利用ＲＮＡ干扰（ＲＮＡｉ）技术，特异性沉默ＰＲＤＸ２ 基因的表达，观察沉默ＰＲＤＸ２对结直肠癌细胞ＨＣＴｌｌ６增殖与迁移的影响并探讨其机制。方法 采用Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ、免疫组织化学检测并分析ＰＲＤＸ２蛋白的表达与结直肠癌发生及预后的关系。构 建稳定沉默ＰＲＤＸ２细胞株，设立阴性对照组（ｓｈＣｏｎｔｒ０１）和沉默ＰＲＤＸ２实验组（ｓｈＰＲＤＸ２．Ｆ３），通过 细胞计数试剂盒（ＣＣＫ一８）、平板克隆形成实验检测细胞增殖能力，划痕实验和Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室检测体外 迁移能力，Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测Ｅ一钙黏蛋白（Ｅ．ｃａｄｈｅｒｉｎ）、Ｎ一钙黏蛋白（Ｎ—ｃａｄｈｅｒｉｎ）、波形蛋白（Ｖｉｍｅｎｔｉｎ）、 Ｓｎａｉｌ、Ｓｌｕｇ蛋白表达。结果ＰＲＤＸ２蛋白在结直肠癌、腺瘤和正常黏膜组织中的表达阳性率依次减 低（Ｐ＜０．０１）。其表达与结直肠癌的ＴＮＭ分期（Ｐ＜０．０１）、肿瘤分化程度（Ｐ＜０．叭）有关，ＰＲＤＸ２ 蛋白阳性表达者生存率（７１．９０％）明显低于阴性表达者（８６．２８％，Ｐ＜０．０５）。沉默ＰＲＤＸ２基因后 能抑制ＨＣＴｌｌ６细胞的增殖生长；ＰＲＤＸ２沉默后ＨＣＴ １１６细胞克隆数量［（６９．５３±５．２０）个］少于空 载对照组［（９８．３３±１０．６９）个，Ｐ＜０．０５］；沉默ＰＲＤＸ２的细胞迁移能力增强，且Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ蛋白表 达下降，Ｎ—ｃａｄｈｅｒｉｎ、Ｖｉｍｅｎｔｉｎ、Ｓｎａｉｌ、Ｓｌｕｇ蛋白表达增强。结论ＰＲＤＸ２蛋白表达参与结直肠癌的发 生、发展，并与结直肠癌的预后有关。沉默ＰＲＤＸ２可抑制结直肠癌细胞ＨＣＴｌｌ６增殖，促进迁移，其 机制可能与转录因子Ｓｎａｉｌ、Ｓｌｕｇ表达有关。