红曲色素的提取工艺及其稳定性研究

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pigment extraction.It showed that two factors playing the important roles,they were the ethanol concentration and pH value.Then the path of steepest was used to determine the optimal levels and obtain a maximum result of extraction.The pigment thermostability was studied by the way of degra- dation kinetics,and the half-life of Monascus pigment was given.Moreover,the photostability of Monascus pigment was preliminary explored in different wavelength visible lights. Key words:Monaseus pigment;extraction;Plackett-Burman;thermal degradation kinetics;photostability
对红曲色素的热降解反应从温度、初始吸光度和 时间3个方面研究。在相同的初始吸光度下,分别将 红曲色素液在80℃和100℃下水浴5 h,每隔1 h取 出,测505 nm下的吸光度,计算各时间段的色素保存 率。从而考察温度对红曲色素热降解速率的影响。在 相同的水浴温度下(100℃),调节不同的色素初始吸 光度,水浴后测505 nm下的吸光度,考察不同初始吸 光度对红曲色素热降解速率的影响。
国内外的众多研究结果[8-10]表明日光的照射能 够迅速的引起红曲色素褪色,本实验在这基础上将目 光分解考察不同波长可见光对色素稳定性的影响。将
红玻点其度 2

提计 一实一

以色素色价作为响应值,利用Minitabl5.0软件 对实验结果进行分析,由表2可以看出,5个因素中乙 醇浓度、提取温度、pH均表现为正效应,料液比和提 取时间表现为负效应。其中乙醇浓度和pH值的可信 度大于99%,表现为极显著,其他因素在所考察的水 平范围内,对红曲色素的提取没有显著影响。因此将 乙醇浓度和pH值确定为主要影响因素进行下一步实 验。 2.2最陡爬坡实验设计及结果
较为深入的探索,以期为红曲色素的使用提供一些指 导。
1 材料与方法
1.1材料与设备 红曲米由本实验室通过固体发酵制得,经研磨粉
碎得红曲粉末。无水乙醇由杭州萧山购得。 实验所需仪器设备主要包括:721紫外一可见光分
光光度计,恒温水浴锅,酸度计,彩色玻璃纸,滤纸及各Biblioteka Baidu种玻璃器皿等。
实验数据处理软件为Minitabl5.0和SPSSl3.0。 1.2实验方法 1-2.1红曲色素萃取流程
红曲色素热降解动力学可被描述为如下模型: dC/dt=--kC4。其中C代表色素吸光度,t代表时间. k代表降解速率常数,n代表动力学级次[7]。将方程 变形后可分别以C—Co,lnC/Co,l/Co一1/C对时间t 的线性回归分析,分别反映零级,一级和二级动力学, 拟合程度由回归方程的相关系数r2确定。 1.2.5不同波长可见光对红曲色素稳定性的影响
文献标识码:B
文章编号:1000--9973(2010)07--0086--04
Study on extraction and stability of Monascus pigments JI Hao,J1ANG Dong-hua。,YE Yan,ZHOU Qin,WANG Chang—chun (College of Chemistry and Life Science,Zhejiang Normal University,Jinhua 321004,China) Abstract:Plackett-Burman design was used to evaluate the influence of related factors on Monascus
温度初始吸光度 零级动力学 一级动力学 二级动力学
(℃)
(co)
k(rz)h/2(h) k(r2)tl,2(h) k(,)t1,2(h)
田1不同颜色的光对红曲色素稳定性的影响
o.9 0.8 o.7 0.6
翠∞
凸 o 0.4
03 O.2 o.1

图2 pH对红曲色素穗定性的研究 2.4红曲色素热降解动力学
2010年第7期 总第35卷
中国调味品
CHINA CONDIMENT
食品添加剂
红曲色素的提取工艺及其稳定性研究
嵇豪,蒋冬花。,叶砚,周琴,王长春
(浙江师范大学化学与生命科学学院,浙江金华321004)
摘要:利用Plackett-Burman(PB)设计对乙醇萃取红曲色素过程中的诸多因素进行评价,筛选出2个有
根据PB实验的结果各显著因素效应值的大小确 定最陡爬坡实验的步长和爬坡方向,这样能快速、经济 地逼近最佳值区域。其他因素的取值则根据各因素效 应的正负和大小确定[5]。 1.2.3 pH值对红曲色素稳定性的影响
分别调节红曲色素提取液的pH为3~11,在各 pH值下测定其505 nm和410 nm下的吸光度,并计 算其色调。色调=ODm/0D。。5[6]。 1.2.4红曲色素的热降解动力学研究
红曲色素是红曲霉生长代谢过程中产生的天然色 素。近年来,由于合成色素的安全性受到挑战,天然色 素越来越受到人们的关注,尤其是具有我国传统特色 的红曲色素[1]。红曲色素的生产主要是通过红曲霉固 体发酵法(2]。相对于其他天然色素,红曲色素因为其 价格低、稳定性好、着色力强和有防腐功能等优点,故 而具有广阔的市场前景[3]。但是由于生产周期长、提 取效率差等原因限制了其大规模的工业生产,因此除 了筛选高产色素菌株、优化发酵条件之外,优化色素的 提取工艺也成为了提高色素得率,降低生产成本的重 要手段之一[‘]。本文通过Plackett-Burman设计等方 法对红曲色素的提取工艺进行了初步研究,旨在提高 红曲色素的提取率。同时对红曲色素的稳定性进行了
根据表3分析的结果,确定不显著因素的水平,表 一87一
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现为正效应的取高水平,表现为负效应的取低水平,即 料液比为1。25,提取时间2 h,提取温度60℃。根据 效应值正负、大小设定最陡爬坡实验的方向和步长。 表3中的实验3,当乙醇浓度为75%、pH值为8.0时 乙醇萃取红曲色素获得最大的效应值为1580 U/g。 由PB实验和最陡爬坡实验,最终可以确定各因素的 水平分别为乙醇浓度75%,料液比1·25,提取时间 2 h,提取温度60℃,pH为8.0。
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表6不同波长光照后红曲色素保存率
注:A505为3次测定的平均值I差异显著性经Duncan氏 新复极差法检验,不同大小写字母分别表示在P≤0.01,P≤ 0.05水平上的差异显著性。
3 讨论
红曲色素的提取是红曲色素生产过程中的一道重 要的工序,提取工艺是否恰当不仅关系到红曲色素的 产量、质量,还关系到工业生产的成本等诸多问题。生 产上选择60℃作为提取温度会使乙醇有更大量的挥 发,而在PB实验中温度的效应值较低,因此从经济效 益角度可降低提取温度减少乙醇挥发,对色素提取率 并没有太大影响。爬坡实验可以获得较为准确的因素 水平,实验结果接近最佳区域。还可以根据需要以爬 坡实验的结果为中心点进一步做响应面分析,从而更 为精确的优化提取条件。同时,经过一次提取后的滤 渣还可以经过二次提取,最大限度的降低生产成本。
收稿日期:20lo—03—25
鲁通讯作者
基金项目t浙江省重大科技专项(NO.2007C12036)I浙江省科技计划资助项目(NO.2007C32004)
作者简介:嵇豪(1986--)。男,江苏阜宁人,硕士研究生,研究方向:应用微生物学.
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红曲色素萃取流程:红曲米研磨成粉一加人乙醇 一调节pH一恒温水浴一过滤一稀释测505 nm处吸 光度。
色价一吸光度×稀释倍数。 1.2.2 PB实验设计和最陡爬坡实验
Plackett-Burman试验主要针对因子数较多,且未 确定众因子相对于响应变量的显著性时,采用的试验 设计方法。方法主要通过对每个因子取两水平来进行 分析,通过比较各个因子两水平的差异与整体的差异 来确定因子的显著性。本实验利用Minitabl5.0软件 设计了N=12的Plackett—Burman实验对红曲色素萃 取过程中5个影响因素(乙醇浓度、料液比、时间、温 度、pH)的重要性进行考察,每个因素取高低2个水 平,高水平约为低水平的1.5倍。PB实验设计见表 1,各因素水平取值见表2。
红曲色素对pH是相当稳定的,这一点上优于其主
要竞争对象胭脂虫红色裂”]。在pH 6"--'9范围内,红曲
色素色调几乎不变,呈现稳定的鲜红色。此外,众多的研 究者[1叼发现红曲色素的耐热性也是非常好的,从本实验 的结果看,红曲色素即使在浓度较低的情况下仍能够在 长时间烹饪下保持其色泽,在巴氏消毒的温度范围下有 很长的半衰期。由于乙醇易挥发,因此在色素热降解试 验中的高温条件下,具塞试管中产生的压力有可能影响 色素的降解。但Ohlssodl5]等人的研究报告指出高压蒸 汽的压力远远低于使物质改变结构的压力,因此本实验 中压力对色素降解的作用是可以排除的。
显著影响效应的因素,分别为乙醇浓度和pH值。再进行最陡爬坡实验获得最佳效应值并确定各因素 的最佳水平。从物质降解动力学的角度考察了红曲色素的热稳定性,并给出了红曲色素的热降解半衰
期。同时在不同波长可见光下,对色素的光稳定性进行了初步探索。
关键词:红曲色素;提取;PB;热降解动力学;光稳定性
中图分类号:TS202.3
利用有色玻璃纸将阳光分解为不同波长的可见 光,照射色素液2 h后结果见表6。避光组色价未发生 改变,其他组别的保存率依次为红光组>黄光组>绿 光组>蓝光组>复合光组。不同波长可见光照射的结 果具有显著差异性,其中红光组的保存率最高,达到 66.3%,蓝光组保存率最低,只有44.8%。而蓝光组 和复合光组则没有显著差异。阳光中的可见光部分由 红橙黄绿青蓝紫各色组成,波长依次变短。波长越短, 频率越高,因而具有的能量(E—hv)也越大。本实验 中蓝光具有最高的能量,色素保存率最低。
对表4的结果做红曲色素热降解动力学的研究, 以C—C。,lnC/Co,1/Co--1/C对时间t作线性回归分 一88一
注:k为反应速率常数,,为方程相关系数,t,/:为色素降解 半衰期。零级动力学tl膳=co/2kI一级动力学tl,2= 一lno.5/k;=级动力学tx/2=1/kCo. 2.5不同波长可见光对红曲色素稳定性的影响
裹3量陡爬坡实验设计及结果
析,直线斜率为热降解速率常数k。由表5可以看出, 红曲色素的热降解分别与零级、一级或二级动力学方 程有着相当高的相关性(r2=0.97~o.99)。在80℃ 和100℃下,色素热降解的半衰期分别达到12.4~ 19.6 h和8.5~8.6 h,这说明色素随着温度的升高半 衰期下降、稳定性降低。在相同的温度下(100℃),初 始吸光度为0.153的色素液半衰期为5.9~7.4 h,低 于初始吸光度为1.046的色素液。即高浓度色素具有 更强的热稳定性。引起该现象的原因可推测为:同批 次实验的样品所接受的总热能是一定的,故色素浓度 越高,单位色素分子获得的能量则越少,色素结构越稳 定,半衰期也就越长[121。
寰4不同温度和初始吸光度下红曲色素的热降解
2.3 pH值对红曲色素色价及色调的影响 在不同pH值的条件下,红曲色素的0D值表现
出一定的变化,图1中可以看出偏酸和偏碱的条件下, 红曲色素都是不稳定的。从感官上来说,当pH在6 ~9之间时,色素液呈鲜红色,而在小于6,大于9的偏 酸偏碱环境下色调大于1,色素液呈橙色、浅黄色。
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