山东省规模化猪场四种病毒性疾病的抗体检测

山东省规模化猪场四种病毒性疾病的抗体检测
张玲玲;时建立;彭喆;徐绍建;郑书轩;吴晓燕;丛晓燕;杜以军;吴家强
【摘要】为及时了解山东省规模化猪场重大病毒性疾病的抗体水平,试验采用进口ELISA试剂盒,分别对山东省不同地区7个规模化猪场分别送检的共224份血清进行猪瘟病毒、猪蓝耳病病毒、猪伪狂犬病毒及猪圆环病毒的抗体检测.结果显示:7个规模化猪场猪瘟、猪蓝耳病、猪圆环病毒病的抗体阳性率分别在20.00％～87.50％、5.00％～93.10％、38.89％～100.00％之间;猪伪狂犬病野毒感染率为0.00％～88.89％,经SPSS 19.0软件分析知7个不同猪场之间各种疾病的抗体阳性率均存在显著差异性(P＜0.05).根据以上数据对猪场四种病毒性疾病的抗体水平进行分析,为制定完善的免疫防控方案提供重要的依据.
【期刊名称】《家畜生态学报》
【年(卷),期】2016(037)003
【总页数】4页(P65-68)
【关键词】猪;病毒性疾病;ELISA;抗体检测
【作者】张玲玲;时建立;彭喆;徐绍建;郑书轩;吴晓燕;丛晓燕;杜以军;吴家强
【作者单位】青岛农业大学动物科技学院,山东青岛266109;山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室,山东济南250100;山东省农业科学院畜牧兽医研究所,山东济南250100;山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室,山东济南250100;山东省农业科学院畜牧兽医研究所,山东济南250100;山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室,山东济南250100;山东省农业科学院畜牧兽医研究所,山东济南250100;山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室,山东济南250100;山东省农业科学院畜牧兽医研究所,
山东济南250100;青岛农业大学动物科技学院,山东青岛266109;山东省畜禽疫病
防治与繁育重点实验室,山东济南250100;山东省农业科学院畜牧兽医研究所,山东
济南250100;山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室,山东济南250100;山东省农
业科学院畜牧兽医研究所,山东济南250100;山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室,山东济南250100;山东省农业科学院畜牧兽医研究所,山东济南250100;山东省
畜禽疫病防治与繁育重点实验室,山东济南250100;山东省农业科学院畜牧兽医研
究所,山东济南250100;山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室,山东济南250100;
山东省农业科学院畜牧兽医研究所,山东济南250100
【正文语种】中文
【中图分类】S811.5
随着山东省养猪业的迅速发展和规模化程度的不断提高，猪病的复杂程度也在加剧，主要表现为多病原混合感染、继发感染的情况较为多见，免疫抑制性疾病的危害加重等[1]。

目前，猪病已经成为制约山东省养猪业健康发展的重要因素之一，猪瘟、猪蓝耳病、猪圆环病毒病、猪伪狂犬病等4种病毒性疾病是目前影响较为严重的
疾病，其中猪瘟和猪蓝耳病是我国强制免疫的重大疫病，猪圆环病毒病和猪伪狂犬病也是规模化猪场常规进行疫苗免疫接种的疫病。

目前山东省乃至我国猪群疫病
中存在着繁殖障碍疾病长期困扰，免疫抑制性疾病、细菌性疾病的危害加大，猪流行性腹泻多有发生等流行特点；病种多，流行快；病原复杂化，变异快。

因此相关部门据此提出了更加健全的生物安全体系及强制免疫制度，进行合理的药物保健，加强饲养管理，制定合理的免疫程序，并树立科学的防疫观念。

经长期实践证明，疫苗免疫接种仍是有效预防和控制动物疫病的有效手段[2]，应用科学的检测方法
对猪群进行相应疫病的抗体检测，及时掌握猪群的免疫抗体水平，以实际抗体检测数据为依据制定合理的科学免疫程序，对于控制疫病的发生有至关重要的作用。

为
及时了解山东省猪场以上四种病毒性疾病的免疫抗体和感染抗体水平，选择部分规模化猪场送检的共224份血清样品进行抗体检测，并对检测结果进行综合分析，
以探寻这些疫病的发生动态和规律，对了解猪群中重要疫病抗体的消长动态与制定科学合理的疫病防控和猪群疫病净化方案具有重要意义。

1.1 试验材料
1.1.1 血清样品被检血样采自山东省内不同地区的7个规模化养猪场，共224份。

按照常规方法进行无菌采血，4～5 mL/头。

然后分离血清详细记录每份血样
来源信息和背景数据并编号，于-20 ℃保存备用。

1.1.2 检测试剂盒猪瘟抗体用CSFV Ab 检测试剂盒(批号 E491)；伪狂犬病抗
体用 PRV/ADV gB Ab(批号 LK867)和PRV/ADV gI Ab 检测试剂盒(批号LK953)；猪繁殖与呼吸综合征抗体用PRRS X3 检测试剂盒(批号E401)，以上均购自北京爱德士元亨生物科技有限公司。

2型圆环病毒抗体用VDPro PCV2 NC AB 检测试剂盒(批号107HS561)，购自北京金诺百特科技有限公司，所有试剂盒均在有效期内，置于4℃冰箱保存。

1.1.3 主要仪器设备台式离心机购自德国Eppendorf 公司；单、多道移液器购自Eppendorf 公司；酶标仪购自美国 BIO-RAD 伯乐公司，型号 680 ；CO2 培
养箱购自美国Thermo 公司。

1.2 试验方法
1.2.1 猪瘟抗体检测结果判定如果被检样本的阻断率大于或等于40%，该样本就可以判为抗体阳性；如果被检样本的阻断率小于40%，该样本就可以被判为抗
体阴性。

1.2.2 猪蓝耳病抗体检测结果判定如果被检样本的S/P值大于或等于0.4，样
品应判为抗体阳性；如果被检样本的S/P值低于0.4，样品应判为阴性。

1.2.3 伪狂犬病gB与gE 抗体检测结果判定如果被检样本S/N值小于或等于
0.6，样品应判为抗体阳性；如果被检样本S/N值大于0.6，样品应判为抗体阴性。

1.2.4 猪圆环病毒病抗体检测结果判定如果被检样品S/P值大于或等于0.4，
样品应判为抗体阳性；如果被检样品S/P值小于0.4，样品应判为抗体阴性。

1.3 数据处理
不同疾病的抗体检测结果由酶标仪以相应的波长测定获得，通过Excel 2003整理得出抗体阳性率及SPSS 19.0整理得出不同猪场间的差异性。

7个猪场4种病毒性疾病3次重复的抗体阳性率平均值及差异性结果见表1。

从表1可知，相同猪病不同地区之间抗体免疫水平参差不齐，波动范围较大，同一疾病多数猪场间抗体阳性率均存在显著性差异(P<0.05)，只有小部分猪场间的抗体阳
性率差异性不显著(P>0.05)。

由表2知，所检测的7个规模化养猪场中，猪瘟、猪蓝耳病、猪伪狂犬病和猪圆
环病毒病的群体免疫合格率分别为71.43%、57.14%、33.33%和83.33%。

从表
2知，猪圆环与猪瘟的免疫效果好于猪蓝耳病和伪狂犬病，平均免疫效果达到了国家合格标准。

疫苗免疫是防控动物疫病的重要措施，特别是对一些目前没有有效的治疗措施、具有较强的传染性、危害严重的疫病显得尤为重要[3]，对于相关疫病的防制具有重
要作用。

猪瘟作为高度传染性疾病，导致高发病率和高死亡率，是危害我国养猪业最为严重的疾病[4]。

虽然我国研制的猪瘟兔化弱毒疫苗安全有效，在预防猪瘟的
发生中起到了积极作用，得到了世界各国的认可。

但是，近年来猪瘟的发生和流行特征以慢性、非典型性、温和性、隐性等类型为主，公猪、基础母猪多表现为隐性感染，仔猪最容易经过垂直传播感染，这些感染猪群都是能够持续排毒的传染源。

我国农业部在《2013 年国家动物疫病强制免疫计划》中规定应免畜禽的免疫抗体检测合格率应在 70%以上，以国家规定的免疫抗体合格率≥70%为合格标准[5]，
各猪场不同疾病的抗体阳性率与合格标准比较可以整体上获知不同疾病的免疫状况。

本研究中，每个猪场蓝耳病的抗体水平高低不一，其中只有4个猪场达到了国家
规定的抗体水平，情况不容乐观，这可能与疫苗的保护性有关。

对7个猪场猪瘟
免疫抗体检测结果来看，除2、3、5猪场之间差异性不显著之外(P>0.05)，其余
各场之间均差异显著P<0.05。

分析认为，阳性率低的猪场可能与近年来猪群免疫抑制性疾病增多、在免疫重压下出现毒力变异株、疫苗质量不稳定、免疫程序不合理、疫苗保存不当等有关[6]。

目前由于对PRRS没有特效治疗措施，接种疫苗成为PRRS的主要防控手段，然而PRRSV会损害免疫系统引起继发感染，甚至会导致免疫失败[7]。

猪圆环与猪瘟的免疫效果优于猪蓝耳病和伪狂犬病，这可能与近年来国家相对重视猪瘟、猪圆环疫苗的免疫监控，加强疫苗质量控制以及猪场规范免疫有关，也可能与猪场各疾病的免疫程序有关，当然结果虽在一定程度上与送检猪场的随机性有关，但也在相应程度上反映出了对疾病重视程度、管理方式等一系列存在的问题。

因此，对于抗体免疫效果较差的猪场更应该高度重视蓝耳病的防控工作，建立适合自己猪场的个性化免疫程序，并配合加强日常饲养管理及合理的安排消毒工作，防止蓝耳病更大规模的发生[8]。

猪圆环病毒2型感染已成全球趋势，给世界上许多国家和地区的养猪业造成巨大
的经济损失。

加拿大、美国、法国、英国等大多数国家对于本病的发生均有报导[9-12]。

虽然由猪圆环病毒 2 型本身引发的疾病很少发生，但感染该病毒后可造
成猪的免疫力低下，易继发其它病原的感染，造成的经济损失依然严重。

本次检测只对6家猪场进行了猪圆环病毒的检测，结果表明各场之间均存在差异显著性，
其中只有2猪场的抗体水平较低。

造成该结果的原因可能是该场的免疫程序或者
是疫苗本身出现了问题。

近几年来，伪狂犬病表现感染率和发病率都呈上升趋势，给该病的防控带来了巨大困难。

本次检测结果显示，猪伪狂犬病感染率达到了56.5%，免疫抗体水平偏低，
与郑霞[13]在2014年报道的某大型猪场猪伪狂犬病33.48%的野毒感染率相比，提高了23个百分点，这使得伪狂犬疾病极具爆发的危险性，因此相关猪场及部门应加以重视，提前做好相应预防措施，避免其造成更大的经济损失。

在做好猪场生物安全措施的前提下，使用高质量的gE基因缺失苗免疫，隔离、淘汰阳性猪。

在免疫后及时进行抗体监测，保持猪群稳定的、较高的抗体水平，避免免疫的空窗期[13]。

综上所述，免疫抗体和感染抗体的高低与疫病的发生密切相关，只有科学免疫，提高免疫抗体的水平；加强消毒，杀灭病原菌，减少猪体与病毒和细菌接触的机会；提高饲养管理水平，增强猪体抵抗力，才能有效抵制病毒入侵，减少疫病发生。

猪场应根据本场的具体情况确定疫苗种类及免疫时间，避免盲目性和重复性的免疫；要使用安全性好、免疫力高的疫苗，使用疫苗时操作要规范，避免交叉感染。

对于养猪业危害较大的猪蓝耳病、猪瘟、伪狂犬病和猪圆环病毒病及时进行实验室血清学监测，确定猪群的的抗体水平，能够起到预测和预警的作用，并同时采取相应措施，将损失控制在最小范围内。

【相关文献】
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