大叶凤兰原球茎诱导技术研究

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兰花种子的原球茎诱导及其生长分化研究

摘要 [ 目的]从培养基方面优化兰花快速繁殖的技术体系。[ 方法]将石斛兰和秋花独蒜兰的干种子培养于 MS、B5 、KC 液体培养基上 , 诱导原球茎形成 ,再将原球茎培养于 MS、KC 及 B5 固体培养基中 ,研究原球茎分化苗在不同培养基上的生长发育情况。[ 结果]石斛兰和秋花独蒜兰种子在 B5 液体培养基中诱导产生的原球茎最多 ,萌发率分别为 3. 1 %、7. 3 %。秋花独蒜兰原球茎在 KC 固体培养基上的成活率最高 ,为 71. 9 % ,且幼苗生长发育状况最好 ,原球茎直径为 (5. 8 ±0. 3) mm ;石斛兰原球茎在 B5 固体培养基上的成活率最高 ,为 65. 0 % ,在 KC 固体培养基上的生长发育状况最好 ,原球茎直径为(3. 8 ±0. 6) mm。[ 结论]根据不同的组培快繁目标 ,可在兰花的不同生长发育阶段选用合适的培养基。
图 1 石斛兰不同发育时期的原球茎 Fig. 1 Protocorms of Dendroblium nobile in different growth periods
由表 1 可知 , 不同培养基对秋花独蒜兰成熟干种子原球茎诱导的效果表现出很大的差异。B5 液体培养基中种子萌发率达 7. 3 % ,KC 为 3. 4 % ,而 MS 只有 1. 1 %。可见 ,B5 培养基更适合秋花独蒜兰无菌种子的萌发。但总体上的萌发率偏低 ,可能是由于种子存放太久的缘故。石斛兰干种子在 B5 培养基中的萌发率为 3. 1 % ,在 MS 培养基上未见原球茎产生 ,而在 KC 培养基上只见个别的原球茎出现。 2. 2 不同培养基对原球茎生长的影响原球茎接种在固体
ห้องสมุดไป่ตู้
萌发率 ∥% Germination rate

用种子类原球茎诱导四倍体秋石斛兰新品种的方法[发明专利]

专利名称：用种子类原球茎诱导四倍体秋石斛兰新品种的方法专利类型：发明专利
发明人：李秀兰,陈力,陈成彬,宋文芹,陈瑞阳
申请号：CN200710061226.2
申请日：20070928
公开号：CN101124889A
公开日：
20080220
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及用种子类原球茎(PLBs)培育四倍体秋石斛兰新品种的方法。

采用人工授粉后胚龄的未成熟秋石斛兰种子，在1/2MS液体培养基中进行非共生萌发培养60天，换入含有
0.02％Oryzalin的1/2MS液体培养中处理后转入1/2MS固体培养基上继续培养，直至秋石斛兰苗形成，按常规的方法进行秋石斛兰栽培移植和管理，直至开花。

本发明可以克服通常多倍体诱变频率低的缺点，具更好的欣赏性。

方法简单易行，而且大幅度地提高了多倍体诱变频率(60％以上)，一次就可获得足够数量的多倍体群体(数百株以上)，供选种之用，应用价值高。

本发明可以规模化生产，具有投入少，产出高的优势。

申请人：南开大学
地址：300071 天津市卫津路94号南开大学生命科学学院
国籍：CN
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大花蕙兰原球茎的诱导、增殖及植株再生研究

大花蕙兰原球茎的诱导、增殖及植株再生研究作者：季华吴伟剑吴华等来源：《湖北农业科学》2012年第15期摘要：从大花蕙兰（Ｃｙｍｂｉｄｉｕｍｈｙｂｒｉｄｕｍ）试管苗取材，诱导原球茎，建立植株再生体系，分析了不同激素及其浓度对原球茎诱导、增殖和植株生根的影响。

结果表明，不定芽比叶片更容易诱导出原球茎；生长素ＮＡＡ对原球茎的诱导效果好于２，４－Ｄ，最适合原球茎诱导的激素组合为１．０ｍｇ／ＬＢＡ＋１．０ｍｇ／ＬＮＡＡ；原球茎增殖培养基中添加１．０ｍｇ／ＬＢＡ＋０．５ｍｇ／ＬＮＡＡ增殖效果较好，增殖系数可达７．９0；最适生根培养基为１／２ＭＳ＋０．５ｍｇ／ＬＮＡＡ＋３０ｇ／Ｌ蔗糖。

关键词：大花蕙兰（Ｃｙｍｂｉｄｉｕｍｈｙｂｒｉｄｕｍ）；原球茎；组织培养；植株再生中图分类号：Ｓ６８２．３１；Ｓ６０３．６文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０12）15－3369-03Ｓｔｕｄy ｏｎＰrotocorm Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ，ＰｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄＰｌａｎｔｌｅｔＦｏｒｍａｔｉｏｎｏｆＣｙｍｂｉｄｉｕｍｈｙｂｒｉｄｕｍＪＩＨｕａ１，ＷＵＷｅｉ－ｊｉａｎ２，ＷＵＨｕａ１，ＣＨＥＮＬｏｎｇ－ｑｉｎｇ１（１．ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＨｏｔｉｃｕｌｔｕｒａｌＰｌａｎｔＢｉｏｌｏｇｙ，ＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎ／ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＨｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒｅａｎｄＦｏｒｅｓｔｒｙ，ＨｕａｚｈｏｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｗｕｈａｎ４３００７０，Ｃｈｉｎａ；２．ＷｕｈｕＦａｒｍ，ＨｕａｎｇｐｉＤｉｓｔｒｉｃｔ，Ｗｕｈａｎ４３０３４５，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＥｘｐｌａｎｔｓｗｅｒｅｄｒａｗｉｎｇｆｒｏｍＣｙｍｂｉｄｉｕｍｈｙｂｒｉｄｕｍｐｌａｎｔｌｅｔｆｏｒｐrotocorm ｉｎｄｕｃｔｉｏｎａｎｄｐｌａｎｔｌｅｔｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ．Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｔｈｅｋｉｎｄａｎｄｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｐｌａｎｔｇｒｏｗｔｈｒｅｇｕｌａｔｏｒｓｏｎｐrotocormｓｉｎｄｕｃｔｉｏｎ，ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄｒｏｏｔｆｏｒｍａｔｉｏｎｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｉｎｔｒｏｄｕｃｉｎｇｐrotocorm ｆｒｏｍａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓｂｕｄｗａｓｍｏｒｅｅａｓｉｌｙｔｈａｎｆｒｏｍｌｅａｆｐｒｉｍｏｒｄｉａｌ．ＮＡＡｗａｓｍｏｒｅｅｆｆｅｃｔｉｖｅｆｏｒｐrotocorm ｉｎｄｕｃｔｉｏｎｔｈａｎ２，４－Ｄ．Ｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｈｏｒｍｏｎｅｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｆｏｒｐrotocorm ｉｎｄｕｃｔｉｏｎｗａｓ１．０ｍｇ／ＬＢＡ＋１．０ｍｇ／ＬＮＡＡ．Ｔｈｅｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｏｆｐrotocorm ｗａｓｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔ（７．９0）ｉｎｍｅｄｉｕｍａｄｄｉｎｇ１．０ｍｇ／ＬＢＡ＋０．５ｍｇ／ＬＮＡＡ．Ｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｍｅｄｉｕｍｆｏｒｒｏｏｔｆｏｒｍａｔｉｏｎｗａｓ１／２ＭＳ＋０．５ｍｇ／ＬＮＡＡ＋３０ｇ／Ｌｓｕｃｒｏｓｅ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｃｙｍｂｉｄｉｕｍｈｙｂｒｉｄｕｍ；ｐrotocorm；ｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅ；ｐｌａｎｔｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ大花蕙兰（Ｃｙｍｂｉｄｉｕｍｈｙｂｒｉｄｕｍ）是兰科兰属中大花型附生种类的杂交种，具有花大色艳、花多且花期长的特点，深受大众喜爱［１］。

蝴蝶兰原球茎诱导及辐射对原球茎增殖和分化的影响

蝴蝶兰原球茎诱导及辐射对原球茎增殖和分化的影响
本文以蝴蝶兰GC-209品种为材料,采用离体培养和统计学分析的方法,研究了不同灭菌时间、基本培养基种类、外源激素（6-BA、NAA）和营养添加物（椰乳、香蕉汁）的种类与剂量对蝴蝶兰的花梗腋芽、试管苗的叶片、茎尖和根尖等外植体的原球茎诱导率和增殖率的影响。

建立了适宜蝴蝶兰花梗腋芽诱导的培养体系,筛选出了适宜不同外植体诱导原球茎产生和增殖的培养基。

这对于蝴蝶兰离体快繁生产工艺体系的建立具有一定的参考价值。

其中,①蝴蝶兰花梗腋芽诱导为营养芽的最适宜培养基为:花宝一号3g/L+6-BA5.0
mg/L+CM 150ml/L+蔗糖15g/L+活性炭0.1g/L, pH5.4;②蝴蝶兰叶片原球茎诱导的最适培养基为花宝一号3g/L+6-BA 5.0mg/L+NAA 0.1mg/L+ CM 150ml/L+蔗糖15g/L+活性炭0.1g/L, pH5.4;③蝴蝶兰叶片原球茎增殖的最适培养基为:花宝一号3g/L+6-BA 5.0mg/L +NAA 0.3mg/L+CM 150ml/L+活性炭0.1g/L, pH5.4;④诱导原球茎最适合的外植体是无菌苗的幼嫩叶片。

另外,本文还结合辐射诱变育种技术,对蝴蝶兰原球茎进行了15-120Gy剂量的60Co-γ射线处理,观察并分析了γ射线对蝴蝶兰原球茎存活率、增殖率和分化率的影响,初步确定了60Co-γ射线对蝴蝶兰原球茎的半致死剂量(LD50=50-68Gy),为蝴蝶兰辐射育种提供了重要的参考依据。

蝴蝶兰原球茎诱导及转基因方法[发明专利]

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910635341.9(22)申请日 2019.07.15(71)申请人上海师范大学地址 200234 上海市徐汇区桂林路100号(72)发明人明凤　娄玉霞　王文鑫　张雪琦　陈甜甜　盖若男　(74)专利代理机构上海精晟知识产权代理有限公司 31253代理人董强(51)Int.Cl.A01H 4/00(2006.01)(54)发明名称蝴蝶兰原球茎诱导及转基因方法(57)摘要本发明涉及植物组织培养领域，尤其涉及一种蝴蝶兰原球茎诱导及转基因方法，具体包括从种子诱导蝴蝶兰原球茎发生和增殖，及转基因平台的建立。

本发明提供了蝴蝶兰原球茎的诱导方法和培养基，并将通过农杆菌介导法和基因枪法查尔酮合酶基因(PhCHS5)和类黄酮-3’5’-羟化酶基因(PhF3’5’H)导入蝴蝶兰植株中，为蝴蝶兰花色研究提供了理论基础，并对植物花色花型改良具有指导作用。

权利要求书2页说明书11页序列表3页附图2页CN 110250002 A 2019.09.20C N 110250002A1.一种确定蝴蝶兰原球茎诱导培养基的方法，其中，所述方法包括：将蝴蝶兰种子接种于添加有不同浓度6-BA、NAA的MS培养基上；根据原球茎的诱导情况确定最佳6-BA、NAA配比；其中，6-BA的浓度范围为2～3mg/L，NAA的浓度范围为0.1～2mg/L，所述诱导培养基还包含0.25％植物凝胶、3％蔗糖、0.5％活性炭，且pH为5.8。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，6-BA的浓度为3mg/L，NAA的浓度为0.1mg/L。

3.一种蝴蝶兰原球茎的诱导和增殖方法，其中，所述方法包括以下步骤：3.1 处理接种材料：取长势良好的蝴蝶兰的长茎，制成1cm长的切段，用流水冲洗所述切段后自然晾干，用70％酒精对所述切段消毒30秒，用无菌水冲洗所述切段3～5次，然后用0.1％HgCl2对所述切段浸泡消毒20分钟，间隔摇动使其消毒充分，最后再用无菌水洗涤所述切段4次；3.2 诱导：将所述切段接种于灭菌的诱导培养基上，所述诱导培养基包含2～3mg/L的6-BA、0.1～2mg/L的NAA、0.25％植物凝胶、3％蔗糖和少量活性炭，且pH为5.8；每个三角瓶接种3～5段所述切段；3.3 增殖：从步骤3.2的所述三角瓶中挑选大小为2.5-3.5mm、即将要萌发成苗的原球茎，将所述原球茎接种到加有增殖培养基的培养瓶中，所述增殖培养基含有大量元素、微量元素及其他促进所述原球茎增殖的因子。

一种纯色万代兰叶片诱导类原球茎的方法[发明专利]

专利名称：一种纯色万代兰叶片诱导类原球茎的方法
专利类型：发明专利
发明人：韦坤华,王晓峰,李林轩,黄宝优,肖冬,缪剑华,韦莹,李翠,王一诺,韦范
申请号：CN201510659360.7
申请日：20151012
公开号：CN105145372A
公开日：
20151216
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：一种纯色万代兰叶片诱导类原球茎的方法，包括如下步骤：(1)取纯色万代兰无菌试管苗接种到MS繁殖培养基上培养获得无菌丛生芽叶片；(2)用解剖刀在所述无菌丛生芽叶片背面划伤后置于MS繁殖培养基中培养，诱导获得类原球茎。

采用本发明得到的纯色万代兰类原球茎繁殖系数高，类原球茎粗壮，经复壮后获得健壮植株，在短期内提供健壮的纯色万代兰优质种苗，有效解决了纯色万代兰的规模化育苗问题。

申请人：广西壮族自治区药用植物园
地址：530023 广西壮族自治区南宁市兴宁区长堽路189号
国籍：CN
代理机构：广西南宁公平专利事务所有限责任公司
代理人：黄永校
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蝴蝶兰原球茎诱导条件的筛选研究

２ｇ（４；Ｂｍ／＋Ａｍ／（￣；一Ａ３ｇ＋ＡＬＣ）６Ａ３ｇＮＡ１ｇＣ）６Ｂｍ／ＮＡｍ－ＬＬＬ
２ｍｇ（６；－Ａ４ｍｇ＋Ａ１／（７；一Ａ４ｍｇ＋Ａ／Ｃ）６Ｂ／ＮＡｍｇＣ）６Ｂ／ＮＡＬＬＬＬ２ｍｇ（８；－Ａ５ｍｇ＋Ａｌ／（９；－Ａ５ｍｇ＋Ａ／Ｃ）６Ｂ／ＮＡｍｇＣ）６Ｂ／ＮＡＬＬＬＬ
腋芽所得到的无菌苗，无菌苗增殖后产生丛生芽，丛生芽在上摘取无菌苗叶片作为外植体。
１２试验设计．
中选取植株中上部的叶片，并切分为２部分，即叶片－靠近上（
顶端的１／片）叶片（近叶柄部位的１叶片）并将２叶、靠／２，完整叶片、片叶片一作为外檀体栽种于制备好的培养叶、Ｆ均基中。．．试验中，成熟胚在各处理下培养４左右，１１２未０ｄ所播种的未成熟胚已长出ＰＢ此时开始统计其诱导率。Ｌ，因为蝴蝶兰种子非常细小，无法计数，只能根据播种面积和ＰＢ面积进行计算。Ｌ由于所播种的外植体包括３个部分，即完整叶片、片叶片，叶、因此首先进行培养基和外植体
芽萌发，规分株繁殖较困难；蝶兰种子细小，果荚成常蝴在熟后种胚尚未发育完全，不含有为种子萌发提供营养的胚

大花蕙兰幼苗叶片诱导类原球茎

大花蕙兰幼苗叶片诱导类原球茎吴开云;黄敏仁;王明庥【期刊名称】《分子植物育种》【年(卷),期】2007(5)3【摘要】以大花蕙兰无菌幼苗叶片为外植体,成功诱导类原球茎(PLB)。

叶片部位是影响诱导的关键,只有叶片基部片段能成功诱导出PLB。

不同激素配比以及外植体来源对PLB诱导有重要的影响。

低浓度的2,4-D和较高浓度的6-BA对于拟球茎诱导PLB具有显著的促进作用。

当2,4-D浓度高于0.6mg/L时,PLB诱导受到显著抑制。

较高的2,4-D水平可能有利于PLB诱导初始阶段,但不利于PLB诱导中后期的进一步发育。

不同基因型有不同的最佳激素组合。

添加0.2mg/L的NAA对大花蕙兰PLB诱导没有显著影响,但在有的基因型中对PLB诱导有促进作用。

以叶片基部片段诱导大花蕙兰PLB是可行的,为转基因研究提供了再生技术基础。

【总页数】6页(P341-346)【关键词】大花蕙兰;类原球茎;诱导【作者】吴开云;黄敏仁;王明庥【作者单位】南京林业大学森林资源与环境学院【正文语种】中文【中图分类】S682.31【相关文献】1.有机添加物对大花蕙兰原球茎及幼苗生长发育的影响 [J], 张超;张茜茜;楼楠男;荣松2.大花蕙兰类原球茎薄切片高频诱导体系的建立 [J], 孙崇波;刘玫;谢鸣;蒋桂华;施季森;郭方其3.激素对大花蕙兰原球茎增殖与幼苗分化的影响 [J], 黄君红;黄晓彬;郭志4.大花蕙兰原球茎诱导、增殖与分化影响因素研究 [J], 徐萌;郭绍霞;孙丽;张颖5.大花蕙兰(Cymbidium hybridum)试管苗基部切块诱导类原球茎研究 [J], 吴开云;黄敏仁;王明庥因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

应用正交设计法探讨蝴蝶兰叶片类原球茎的诱导

应用正交设计法探讨蝴蝶兰叶片类原球茎的诱导
李成慧;蔡斌;单丽丽;顾铭洪
【期刊名称】《扬州大学学报：农业与生命科学版》
【年(卷),期】2004(25)2
【摘要】6-BA是蝴蝶兰诱导类原球茎必不可少的因素,本试验在明确6-BA剂量(10 mg·L-1)的前提下,利用正交设计方法L16(45)探讨培养基中NAA、肌醇、维生素B1、维生素B6、琼脂粉等5种因素对蝴蝶兰叶片诱导类原球茎的影响。

结果表明:NAA是影响蝴蝶兰叶片诱导类原球茎的主要因素,维生素B1、维生素B6及琼脂粉次之,肌醇的影响程度较弱。

蝴蝶兰叶片诱导类原球茎的最优组合是NAA 1 mg·L-1、肌醇100 mg·L-1、维生素B15 mg·L-1、琼脂粉8 g·L-1。

【总页数】4页(P76-78)
【关键词】蝴蝶兰;正交设计;叶片;类原球茎
【作者】李成慧;蔡斌;单丽丽;顾铭洪
【作者单位】扬州大学农学院;扬州市扬平园艺有限公司
【正文语种】中文
【中图分类】S682.32;Q813.12
【相关文献】
1.蝴蝶兰叶片诱导类原球茎初探 [J], 张玉;李艳敏;张和臣;王利民;王慧娟;张鸽香
2.蝴蝶兰花梗离体培养及叶片诱导类原球茎研究 [J], 卜朝阳;蒋慧萍;满若君
3.蝴蝶兰叶片诱导类原球茎的研究 [J], 张雯頩;张晓波;潘刚;刘宪虎
4.切割方式和外植体大小对蝴蝶兰叶片诱导类原球茎的影响 [J], 黄磊;陈之林;吴坤林;段俊
5.应用反应面设计法探讨蝴蝶兰类原球茎的增殖 [J], 李成慧
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大叶风兰组培快繁技术体系的研究

ＮＡＡ
／ｍｇ．Ｉ
０
接种数
个
１００
出芽数
／个
３．１５
出芽率
／
３１５ｄ．
求。应用组织培养技术，以加快繁殖速度，可进行工业
化生产］。。以新引进的大叶风兰优良品种为材料，大将叶风兰的花梗腋芽诱导培养生成无菌植株，利用无菌再
１材料与方法
１１试验材料．
选取大叶风兰未开花的带腋芽花梗为供试材料。１２试验方法．
注：写字母代表Ｐ．５的显著水平，Ｆ同。小＜００以
２２原球茎诱导．
１２１消毒．．
选取大叶风兰未开花的带腋芽花梗，用流
０５．
０５．０５．０５．
１００
１０ｏ１００１００
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
６３
９４４５３４
６ｂ３
９ａ４４ｃ５３ｃ４
２结果与分析
２１花梗腋芽启动培养．
第一作者简介：王裕（９８）女，东潍坊人，士，要研究方向１７－，山硕主
ｈｄ／。
表２不同激素种类和浓度对诱导原球茎的影响
代号
Ｂｌ
／ａＬＪ／ｇ．Ｌｎｇ・ａ・一ｒ１
．
／个
１００
／个
３２
／Ｎ
３ｃ２

植物原球茎诱导与分化培养

植物原球茎诱导与分化培养（蝴蝶兰）组员：戴金剑黄玲艳丁露卢峰年陈文雅实验目的：由于蝴蝶兰是单茎性植物，很少生长侧芽，所以无法进行传统的分生等无性繁殖的方法。

目前生产中广泛应用的蝴蝶兰的繁殖方式主要是种子的无菌播种及组织培养。

实验原理：原球茎繁殖(protocorm-like body)是兰花植物组织培养的特有现象,是其组培快繁的主要形式。

通常情况下从兰花成苗的叶片和根等成熟组织很难进行脱分化形成原球茎,而以兰花的茎尖分生组织为外植体可以诱导原球茎。

但因茎尖深埋于叶丛之中,易被污染,成功率低,而且会牺牲母株,一般先取花梗侧芽,经常规消毒后接种于MS+ 6-BA 3~6mg/L培养基上,在较高温度(25~30℃)下待侧芽萌发成花梗苗,再其组织诱导原球茎。

这样既可以避免对母株造成损失,又可以免去消毒这一环节,诱导分化的成功率高。

实验材料：: 1/2 MS+0.4 mg/L IBA+1mg/LNAA +30 g/L蔗糖+50 mL/L 椰汁+50 g/L香蕉泥+0.5 g/L活性炭+4 g/L琼脂。

锥形瓶、烧杯、接种套件、无菌操作台、酒精灯、玻璃棒、微波炉、药品、牛皮纸等。

实验步骤：1.培养基配制：取0.2mgIBA、0.5gNAA 、15g蔗糖、25g椰汁、25g 香蕉泥、0.25g活性炭、2g琼脂粉煮沸配成500ml培养基，分装在20个锥形瓶培养瓶中，并对无菌操作所需要的仪器进行120℃高压蒸汽灭菌处理。

2.外植体的预处理:将取回的花梗材料，先用75%酒精棉球擦拭一遍，尤其是腋芽部位缝隙等，进行仔细的擦拭，将花梗以每个腋芽为单位切割为3一4cm的节段，在洗洁精液中浸泡10min后，用毛笔蘸着洗洁精液将腋芽部位小自地刷洗一次，最后再在自来水下冲洗30min 后置入超净工作台待灭菌处理。

3.外植体的灭菌接种:在超净工作台中，用75%酒精对花梗进行表面灭菌3后，用无菌水浸洗一次，再用0.1%HgCI:消毒7一1smin，无菌水浸洗5一6次，用解剖刀将花梗两端接触过HgCI:的部位切去大约lmm左右，按其生长方向接种于灭菌后的MS培养基中，处理接种20瓶，每瓶接种3个外植体。

大花蕙兰原球茎的诱导增殖及植株再生研究

大花蕙兰原球茎的诱导增殖及植株再生研究大花蕙兰（Cymbidium grandiflorum）是一种著名的兰花，具有观赏价值和药用价值。

为了满足市场需求，研究人员开始致力于大花蕙兰的诱导、增殖及植株再生研究。

大花蕙兰的原球茎可以用作外植体进行诱导和增殖研究。

首先，从成熟植株中选择健康的原球茎作为试验材料。

将原球茎表面进行消毒处理，然后将其切片或切割为小块。

这些切片或小块可以直接培养在含有适当激素的培养基上，以诱导其分化为植株。

利用不同激素的组合和浓度，可以调节培养基对大花蕙兰原球茎的分化和增殖过程。

在诱导和增殖的过程中，光照和温度条件也十分重要。

大花蕙兰是一个喜光植物，因此在培养过程中需要提供足够的光照。

适当的光照能够促进植株的生长和发育，提高诱导和增殖的成功率。

此外，温度对大花蕙兰的生长也有显著影响。

一般来说，适宜的培养温度为20-25摄氏度，可以促进植株生长和再生。

在诱导和增殖的过程中，适当的培养基组成和添加物也起着重要作用。

常用的基础培养基包括MS培养基和B5培养基，它们能够提供植物生长所需的营养物质。

此外，还可以添加一些植物生长调节剂，如激素和生长素，以促进细胞分化和增殖。

在大花蕙兰的诱导和增殖研究中，还可以利用组织培养技术进行植株再生。

组织培养是通过细胞和组织的培养来实现植株再生的方法。

通过调节培养基中的激素浓度和组织类型，可以成功地诱导大花蕙兰的植株再生。

总之，大花蕙兰原球茎的诱导、增殖及植株再生研究是一个复杂而有趣的研究方向。

通过调节培养基组成、激素浓度和温度等条件，可以成功地诱导和增殖大花蕙兰的原球茎，从而实现大花蕙兰的植株再生。

这些研究对于大花蕙兰的繁殖和种质保存具有重要意义，同时也为兰花研究领域提供了有益的参考。

蝴蝶兰原球茎状体的诱导及增殖

2005 年 2 月
蝴蝶兰原球茎状体的诱导及增殖
+ 53 +
茎状体的增殖效果起主导作用, 从表 4 可知, 原球茎状体进行增殖培养的适宜培养基为改良 MS + 6 BA 5. 0mg L + NAA 0. 5mg L+ CM 15% + AC 0. 3% , 增殖速度快, 且成苗率也高。
培养天数
接种数量
产生原球茎状体数
诱导率%
序号
培养天数
接种数量
产生原球茎状体数
45
10
45
17
45
16
45
18
0
0
#
45
15
6
5
29. 4
∃
45
18
13
3
31. 3
%
45
16
11
7
38. 9
&
45
19
13
诱导率%
40. 0 72. 2 68. 8 68. 4
序号
! ∀
表 3 不同培养基对蝴蝶兰茎尖原球茎状体诱导的影响
摘要: 利用蝴蝶兰的植株的不同部位, 采用不同培养基对其进行诱导和增殖效果比较。结果表明, 香蕉泥和椰胚
乳( CM ) 对于蝴蝶兰外植体原球茎状体的形成具有明显的促进作用。在 M S + 6 BA 5. 0mg L +
NA A 2. 0mg L + 香蕉泥 10. 0% + AC 0. 3% 的培养基中, 叶片原球茎状体的诱导率可达 48. 6% ; 花梗腋芽
第 23 卷第 1 期 2005 年 2 月

秋水仙素处理兰花原球茎对其生长和诱变效应的影响

文章编号:100028551(2005)012019205秋水仙素处理兰花原球茎对其生长和诱变效应的影响张志胜　谢　利　萧爱兴　何琼英　姜　蕾(华南农业大学农学院,广东广州　510642)摘　要:本研究表明,秋水仙素处理对原球茎生长和分化起抑制作用;浓度越高,抑制作用越强,处理时间不同,抑制作用也不同。

秋水仙素处理后的再生植株群体中,平均变异植株的百分率为9106%,是对照材料的317倍。

变异植株的类型包括植株粗壮、多叶、叶片变宽、变厚、叶片墨绿色、矮化、线艺和叶艺等。

处理浓度为0110%、时间为48h 时,植株变异率最高。

关键词:兰花;原球茎;多倍体;秋水仙素;分化EFFECTS OF COLCHICINE TREATMENT ON GR OWTH,DIFFERENTIATIONAN D MUTAGENSEIS OF PR OTOCORM 2LIKE 2BODY (P LB)OF ORCHIDZH ANG Zhi 2sheng XIE Li XI AO Ai 2xing HE Qiong 2ying J I ANG lei(College o f Agriculture ,South China Agricultural University ,Guangzhou ,Guangdong ,510642)Abstract :The effects of colchicine treatment on the growth ,differentiation and mutagenesis of orchid P LBs were studied 1The results showed that colchicine treatment had inhibition effects on the growth and differentiation of P LBs ,and the higher concentration colchicine was ,the stronger the inhibition effect was 1Different treatment time caused the different effects.Regenerated plants were found mutant in sturdy ,variegation ,dark color and s o on.The ratio of variants regenerated from P LBs treated with colchicine was obviously higher than that of control.The high variants happened in treatment of 0110%colchicine and 48h.K ey w ords :in contra Orchid ;protocorm 2like 2body ;polyploid ;colchicine ;differentiation收稿日期:2003212226基金项目:广东省“九五”重点攻关课题(9622033210),横向联合课题(41002H02052)作者简介:张志胜(1965-),男,江苏睢宁人,博士,副教授,从事花卉遗传育种方面的研究。