利用GO数据库分析与预测乳杆菌肽聚糖对小鼠免疫细胞基因表达的影响

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乳杆菌肽聚糖对结肠癌细胞的抑制作用及其免疫机制研究_马西艺

第26卷第6期营养学报Vol.26,No. 6 2004 年12 月ACTA NUTRIMENTA SINICA Dec. , 2004 乳杆菌肽聚糖对结肠癌细胞的抑制作用　及其免疫机制研究　马西艺，乐国伟，施用晖，代卉　（江南大学食品学院营养与生物技术室，江苏无锡２１４０３６）　　【摘　要】目的：　研究乳杆菌肽聚糖（ＰＧ）的抑瘤作用及其机制。

方法：利用荷瘤、细胞培养和ＤＮＡ凝胶电泳等技术，研究ＰＧ对ＣＴ２６结肠癌细胞的抑制作用及其对免疫细胞杀伤活性和细胞因子的影响。

结果：腹腔注射ＰＧ可显著抑制结肠癌细胞的生长，抑瘤率高达５４．２％，并诱导其凋亡；ＰＧ可诱导ＩＬ－１、ＴＮＦ－α、ＩＦＮ－γ和ＮＯ的产生，而对ＩＬ－２无显著影响；ＰＧ亦可使ＣＴＬ、ＮＫ、ＰＭФ的杀伤活性显著提高。

结论：乳杆菌ＰＧ通过提高机体的免疫功能抑制结肠癌肿瘤的生长。

　ＰＧ激活ＮＫ细胞、ＰＭФ产生ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－α和ＮＯ可能部分介导了它的抗肿瘤作用。

　关键词：　肽聚糖；抑瘤；免疫；细胞杀伤活性；细胞因子　中图分类号：Ｒ１５１．４１文献标识码：Ａ文章编号：０５１２－７９５５（２００４）０６－４６７－０４　　肽聚糖（ｐｅｐｔｉｄｏｇｌｙｃａｎ，ＰＧ）是乳酸杆菌细胞壁的主要组成成分［１］。

近年来，人们注意到乳酸杆菌可抵抗亚硝基胍的致结肠癌作用，增加机体免疫监视功能［１，２］。

尽管其机制尚不清楚，但迄今已报道了乳酸杆菌多种代谢产物与抗癌的关系。

其中，肽聚糖成分在提高肌体免疫监视功能方面可能起重要作用。

Ｓｅｋｉｎｅ　（１９９５）曾报道双歧杆菌完整肽聚糖能激活小鼠腹腔巨噬细胞（ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ　ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ，　ＰＭФ），使白细胞介素１（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ　１，　ＩＬ－１）、白细胞介素６（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ　６，ＩＬ－６）　及肿瘤坏死因子α（ｔｕｍｏｒ　ｎｅｃｒｏｓｉｓ　ｆａｃｔｏｒ，　ＴＮＦ－α）等细胞因子的ｍＲＮＡ表达增强［３］。

2021益生菌对肠道发育的生物调节功能及干预机制范文2

2021益生菌对肠道发育的生物调节功能及干预机制范文摘要：　肠道细胞的正常增殖分化、粘膜屏障完整性作为评价肠道发育的重要指标，很大程度上决定了人和动物的能量稳态和整体生长性能，是决定人和动物生理稳态的根本因素。

而良好的微生物-宿主通讯机制及其共生关系对肠道发育及稳态具有积极作用。

近年来国内外大量研究显示肠道微生物参与调控肠道增殖分化，其中益生菌（主要乳酸菌）发挥了极重要的益生作用。

本文详述了肠道组成及发育机制，并从益生菌的自身组分（如菌毛蛋白、细胞壁成分等）、代谢产物（丁酸及其盐类）、肠道菌群的多样性和定植状态三个方面对益生菌促进肠道上皮细胞与肠道干细胞增殖分化、增强粘膜屏障功能、维持肠道良好形态的功能及其干预机制的研究进展进行综述，旨在加深和完善关于益生菌调控肠道发育的认识。

关键词：　益生菌;肠道发育; 菌毛蛋白; 细胞壁成分; 丁酸盐; 肠道菌群 ; Abstract：　Knownas important indicators to evaluate intestinal development, normal proliferation and differentiation of intestinal cells and the integrity of mucosal barrier, largely determine energy homeostasis and overall growth performance of humans and animals, so that are considered as fundamental factors to determine physiological homeostasis of humans and animals. Good microbial-host communication mechanisms and their symbiotic relationship have positive effects on intestinal development and homeostasis. In recent years, a large number of studies at home and abroad have shown that intestinal microorganisms are involved in the regulation of intestinal proliferation and differentiation, among which probiotics (mainly lactic acid bacteria) play an extremely important probiotic role. In order to deepen and improve the understanding of probiotics regulating intestinal development, intestinal composition and developmental mechanism are described in detail. The research progress of probiotics in promoting the proliferation and differentiation of intestinal epithelial cells and intestinal stem cells, enhancing the function of mucosal barrier, maintaining good intestinal morphology and its intervention mechanism are also reviewed from three aspects, including their own components (such as pili protein, cell wall components, etc.), metabolites（butyric acid andits salts）, diversity of intestinal flora and colonization status. Keyword：　probiotics;intestinal grotht; pilin protein; cell wall components; butyrate; intestinal flora; 人与动物的肠道是一个营养丰富的环境，由大量复杂的微生物聚集而成，其中包括大量益生菌（probioticsbacteria）。

乳酸杆菌表达系统的研究进展

乳酸杆菌表达系统的研究进展丁轲程安春(四川农业大学动物科技学院四川雅安625014)乳酸杆菌是一种常见的益生菌，它的应用已有几百年的历史，是一种公认的具有GRAS(Generally Regarded As Safe)有益微生物。

该菌广泛存在于人、动物和植物中，可以产生多种物质，如短链脂肪酸、过氧化氢、细菌素、蛋白质和各种酶类等。

尤其重要的是它是人和动物肠道中最重要的优势菌群之一，对于机体的代谢、免疫调节等方面起着极其重要的作用。

但随着基因工程技术的发展日趋完善，人们已不再满足于乳酸杆菌自身固有的功能，特别是当前由于疫苗免疫和菌(毒)株的残留毒力之间的矛盾，促使人们寻求能良好表达外源抗原且安全的疫苗载体候选菌株，乳酸杆菌便自然成为最佳选择菌株之一，因此近年来在疫苗载体的研究中日益受到重视，但其研究却远远落后于病原微生物。

现就这一方面作一综述。

1 乳酸杆菌表达载体的优点乳酸杆菌作为表达载体有许多独特的优势，这主要是因为乳酸杆菌是人和动物体内最优势的益生菌株之一，许多研究都表明它的有无和多寡都对机体有着至关重要的影响，以它为表达系统有其它菌株不可比拟的优点，主要表现在以下方面：①乳酸杆菌是至今发现的唯一没有致病性的一个种；②它在人和动物体内占绝对优势，以它为表达系统，较其它菌株更易达到较高的表达量；③若选择非抗性标记，则该表达系统中的菌体、选择性标记、诱导物均为食品级，为生产绿色安全的食品提供了可能；④乳酸杆菌菌体本身就对机体有益生作用，其分泌多种物质更是机体必不可少的，若再在其载体上克隆入外源基因，这样就可集菌体、自泌物质和外源蛋白于一体；⑤乳酸杆菌对机体粘膜有极强的粘附作用，因此构建的乳酸杆菌基因工程菌就可在粘膜处不断繁殖，持续向机体释放目的蛋白；⑥乳酸杆菌可直接口服，能够耐受胃液中的强酸和小肠上段的胆盐，这样就免去了目的蛋白的体外提纯等后加工。

2 乳酸杆菌质粒1976年Chassy[1]首先发现乳酸杆菌中存在质粒，质粒在不同的乳酸杆菌中分布不均，Vescovo等[2]对159株乳酸杆菌进行质粒抽提，发现L. reuteri、L. helveticus 和L. acidophilus 含质粒的比率较高，分别为63%、27%和20%，L. casei仅有4%的菌株含有质粒，L.plantarum、L. brevis 和L. coryniformis没有发现质粒。

利用GO数据库研究乳杆菌肽聚糖对小鼠免疫细胞基因表达的调节作用

利用GO数据库研究乳杆菌肽聚糖对小鼠免疫细胞基因表达的调节作用1孙进，乐国伟，施用晖江南大学教育部食品安全与营养重点实验室，江苏无锡 (214122)E-mail：sunj@摘要：目的:探索乳酸菌肽聚糖对小鼠免疫细胞基因表达的影响。

方法: 给BALB/c小鼠腹腔注射乳杆菌肽聚糖1次或3次，从腹腔巨噬细胞和脾淋巴细胞合并细胞提取RNA，利用affiymetrix MOE 430A基因芯片分析基因表达，利用基于GO数据库的芯片数据分析工具分析乳杆菌肽聚糖诱导后的代表性GO定义。

结果: 腹腔注射刺一次乳杆菌肽聚糖（i.p.）引起了腹腔巨噬细胞和脾脏淋巴细胞基因表达的广泛变化，但特异性不强。

注射三次后表达显著改变的基因主要与免疫反应有关。

定义两次刺激引起显著变化的所有基因为肽聚糖响应基因，其代表性GO生理过程定义主要与巨噬细胞吞噬活力增强、淋巴细胞激活、炎性反应正调节有关。

结论: 肽聚糖刺激的早期反应可以概括为先天性免疫激活和抗原呈递过程。

关键词：乳杆菌肽聚糖，免疫调节，基因表达, GO数据库中国图书分类号：R392.1 文献标识码：A调节机体免疫功能是乳酸菌重要的益生作用之一，是乳酸菌防治肠炎、增强肠道免疫耐受、抵抗肿瘤发生和防止过敏症的基础[1]。

乳酸菌的免疫调节作归根结蒂是其特异性的细胞组分与宿主免疫细胞作用的结果。

这些细胞组分存在于活菌体，但也可能在菌体代谢过程中或菌体死亡后释放到外界发挥作用[2]。

细菌最重要的免疫调节成分是微生物相关保守分子（MAMP）[2]。

肽聚糖（PGN）是乳酸菌菌体含量最丰富的MAMP之一，肽聚糖是N-乙酰半乳糖胺和N-乙酰葡萄糖胺通过β（1-4）糖苷键连接的高分子物质，每个单体之间又通过肽桥连接。

肽聚糖是细菌细胞壁结构和性质的主要支持物，它也具有多种生物活性，是细菌和宿主相互作用的重要分子[3]。

但是乳酸菌肽聚糖调节宿主免疫功能的机理还不清楚。

免疫反应是一个复杂的生理反应网络体系，利用基因组表达芯片对特异免疫细胞体系进行全面分析有助于对此复杂过程的阐明[4]。

210978245_巴氏杀菌发酵乳改善DSS诱导结肠炎小鼠症状的研究

胡格格，姚梦柯，张敏，等. 巴氏杀菌发酵乳改善DSS 诱导结肠炎小鼠症状的研究[J]. 食品工业科技，2023，44（7）：367−374. doi:10.13386/j.issn1002-0306.2022060027HU Gege, YAO Mengke, ZHANG Min, et al. Study on the Improvement of Symptoms of DSS-induced Colitis in Mice by Pasteurized Fermented Milk[J]. Science and Technology of Food Industry, 2023, 44(7): 367−374. (in Chinese with English abstract). doi:10.13386/j.issn1002-0306.2022060027· 营养与保健 ·巴氏杀菌发酵乳改善DSS 诱导结肠炎小鼠症状的研究胡格格，姚梦柯，张　敏，张　健，杨贞耐*（北京工商大学食品与健康学院，北京 100048）摘　要：本研究采用3.5%的葡聚糖硫酸钠（DSS ）构建小鼠结肠炎症动物模型，旨在阐明巴氏杀菌发酵乳对结肠炎小鼠的缓解作用及可能的机制。

通过评估小鼠疾病活动指数（disease activity index ，DAI ），HE 染色观察结肠组织病理切片，气相色谱-质谱联用（GC/MS ）分析肠道短链脂肪酸含量，ELISA 检测结肠组织中的炎症因子水平，检测髓过氧化物酶（MPO ）含量和采用免疫组化进行紧密连接蛋白的表达，来研究巴氏杀菌发酵乳的作用。

结果表明，巴氏杀菌发酵乳可以降低结肠炎小鼠疾病活动指数DAI 、缓解结肠组织损伤、增加小鼠肠道短链脂肪酸乙酸、异丙酸、戊酸和总酸的含量，同时降低小鼠促炎细胞因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）的分泌、增加抗炎细胞因子白细胞介素-10（IL-10）的分泌和降低MPO 活性。

浅析肽聚糖以及其相关功能

China Science&Technology Overview/学术研究浅析肽聚糖以及其相关功能赖彤晞(广东实验中学附属天河学校，广东广州510650)摘要：肽聚糖位于细菌细胞壁上，是一层具有柔韧性和厚度、用于支撑细胞的网状组织，它具有多种有益的生物学活性，在微生物系统中扮演非常重要的角色，在信息识别方面有重要的作用。

本文简要介绍了肽聚糖的结构组成、合成与提取的方法以及免疫调节和抗肿瘤的作用，并对肽聚糖的未来应用进行展望，相信在未来生物科学研究过程中会发现肽聚糖在微生物生存过程中相关功能。

关键词：肽聚糖；免疫调节；抗肿瘤中图分类号：R446.5文献标识码：A文章编号：1671-2064(2020)14-0165-020引言细胞膜外有一层厚而有弹性的细胞壁组织。

它的坚韧性和厚度有利于保护和支撑细胞，同时能够维持细菌的固有形态。

现实生活中存在大量的真菌与细菌，现代生物科学已经聚焦到细胞水平，研究者通过显微镜观察到的细菌外层的膜状物主要是肽聚糖，其中真菌细胞壁的主要成分为肽聚糖，在革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌中肽聚糖的占比不同。

肽聚糖又称黏肽，是细菌细胞壁机械强度的基础。

N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰胞壁酸以及肽桥、肽链紧密相连，构成稳定的网状结构。

这样的网状结构使肽聚糖有着较强的机械强度。

1肽聚糖的组成结构肽聚糖在细胞膜外层起到保护细胞的作用，在植物细胞中行使此功能的是纤维素，在不具有纤维素的生物，如各种动物、微生物中，肽聚糖扮演重要的角色，它是一种具有双糖单位的多层网状大分子结构，其中双糖单位中N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰胞壁酸相互联系、交替从而构成肽聚糖骨架，使肽聚糖拥有了网状结构。

在四肽尾(又称四肽侧链)中，L型与D型交替的四个氨基酸分子相连。

在G+细菌中，四肽尾的氨基酸组成与顺序多种多样。

如金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的四肽尾为L-Ala t D-Glu t L-Lys—D-Ala,星星木棒杆菌(Cory-nebacterium poinsettiae)的四肽尾为L-Ser-*D-GluL-Orn—D-Ala,在G-细菌中，四肽尾则比较相似“。

科研Gut：肠道微生物特征推动了肥胖患者益生元干预的功效

科研Gut：肠道微生物特征推动了肥胖患者益生元干预的功效编译：小范儿，编辑：小菌菌、江舜尧。

原创微文，欢迎转发转载。

导读肠道菌群已被提出作为代谢紊乱的有治疗靶标。

菊粉作为益生元可减轻肥胖症和相关疾病。

本研究的目的是研究干预前肠道菌群的特征是否决定了对菊粉的生理反应。

在饮食干预前，从4个肥胖供体的粪便中采集不同微生物多样性和组成的粪便，并接种到经过抗生素预处理的小鼠(hum-ob小鼠;人性化肥胖老鼠)。

喂hum-ob小鼠高脂饮食并用菊粉治疗。

3个月后比较在hum-ob小鼠中菊粉治疗后与一组补充菊粉的肥胖个体的代谢和微生物变化。

结果发现，从不同肥胖个体中获得粪便菌群的hum-ob小鼠对高脂肪饮食中菊粉的补充有不同的反应。

在hum-ob小鼠中观察到几个细菌属，Barnesiella, Bilophila, Butyricimonas,Victivallis,Clostridium XIVa, Akkermansia, Raoultella 和 Blautia与代谢结果（肥胖和肝脂肪变性减少）相关。

另外，在肥胖个体中，厌氧菌，Akkermansia和Butyricicoccus的干预前水平促进对菊粉的应答导致体重指数下降。

这些发现支持在使用益生元进行营养干预之前表征肠道菌群对于增加肥胖和代谢紊乱的积极结果非常重要。

论文ID原名：Discovery of the gut microbial signature driving the efficacy of prebiotic intervention in obese patients译名：肠道微生物特征推动了肥胖患者益生元干预的功效期刊：GutIF：19.819发表时间：2020.1.17通讯作者：Nathalie M Delzenne作者单位：比利时布鲁塞尔卢凡大学卢凡药物研究所代谢和营养研究组实验设计在饮食干预前，从4个肥胖供体的粪便中采集不同微生物多样性和组成的粪便，并接种到经过抗生素预处理的小鼠(hum-ob小鼠;人性化肥胖老鼠)。

乳杆菌肽聚糖调节小鼠免疫细胞基因表达的通路分析

ｌｓａｔＡＭ：ｏｉｅｔａｅｍｃａｉａＬｃｔｃＩＴｖｓｇｔｔｅｈｎｍｔｔａ－Ａｂｒｊｎｉｅｈｓｈ
ｔｂｃｌｓｐｐｉｏｌｃｄｌｔｓｍｉｅｉｏａｉｕｅｔｇｙａｎｍｏｕａｅｃｍｍｕｅｒｓｏｓｌｄｎｅｐｎｅ．
受体，Ｃ１、Ｔ１Ｌ、如Ｄ４Ｉ／３肽聚糖识别蛋白（ＧＰ）、２ｊＰＲｓＪ肽聚糖溶解酶（溶菌酶和酰胺酶）、细胞质蛋白Ｎｄｏｌ和Ｎｄ，ｏ２Ｊ但是，乳酸菌ＰＮ调节机体免疫反应的Ｇ机制尚不清楚。从根本上讲，乳酸菌肽聚糖首先是
络水平的分析能更加具体的揭示机体组织或细胞生
理过程或状态的变化及其可能的发展趋势。本研究中，我们分析了腹腔注射乳杆菌肽聚糖对小鼠免疫细胞基因表达的影响，并在现有基因网络数据库搜索了乳杆菌肽聚糖显著相关的基因网络。
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乳杆菌肽聚糖调节小鼠免疫细胞基因表达的通路分析
孙进，常桂芳，乐国伟，用晖（施江南大学食品科学与技术国家重点实验室，江苏无锡２４２）１１２微生物相关保守分子（ＭＰ）ＭＡ是乳酸菌的主要免疫调节成分 … 。肽聚糖（Ｇ是乳酸菌含量最丰ＰＮ）
１材料和方法
富的ＭＡＭＰ之一，是乳酸菌细胞壁结构和性质的主要支持物。ＰＮ具有多种生物活性，是乳酸菌和宿Ｇ

不同乳酸杆菌肽聚糖对小鼠肠道黏膜的免疫调节作用

不同乳酸杆菌肽聚糖对小鼠肠道黏膜的免疫调节作用洪亮; 余方流; 黄月娥【期刊名称】《《皖南医学院学报》》【年(卷),期】2019(038)005【总页数】3页(P419-420,424)【关键词】乳酸杆菌; 肽聚糖; 肠道黏膜; 免疫调节【作者】洪亮; 余方流; 黄月娥【作者单位】皖南医学院基础医学院安徽芜湖 241002; 皖南医学院公共卫生学院安徽芜湖 241002【正文语种】中文【中图分类】R378.2; R-332乳酸杆菌(Lactobacillus bacillus)是一类可以发酵碳水化合物产生大量乳酸革兰阳性细菌的统称，有研究证实乳酸杆菌在抗肿瘤、抗感染、抗衰老等方面均具有明显的调节作用[1]。

Sato等[2]认为，肽聚糖(peptidoglycan，PG)可能是乳酸杆菌发挥免疫赋活作用的主要功能性物质，PG能够通过增强巨噬细胞吞噬功能和诱导细胞因子释放，对机体免疫应答发挥重要影响。

但在局部黏膜免疫中，关于乳酸杆菌PG成分的调节作用研究较少。

本实验筛选4株乳酸杆菌提取细胞壁肽聚糖，探讨其对昆明小鼠局部黏膜免疫的调节机制，旨在为乳酸杆菌的临床应用提供实验依据。

1 材料与方法1.1 实验动物与菌种健康昆明系小鼠50只，8～10周，雌雄各半，体质量20～25 g(购于南京医科大学医学实验动物中心)。

4株乳酸杆菌从正常育龄妇女阴道内分离所得(皖南医学院微生物学与免疫学教研室提供)，经API-CH 50系统鉴定。

1.2 肽聚糖提取将乳酸杆菌细菌培养后，调整菌液浓度为1010CFU/mL，迅速降温至4℃冰浴，在4℃，3000 r/min离心20 min收集菌体沉淀。

反复洗涤沉淀，收集菌体，置于100℃沸水中灭活，4℃保存使用。

釆用宋晓玲等改进的Prak三氯乙酸法提取肽聚糖[3]。

1.3 实验分组及处理将实验动物按雌雄各半随机分为5组，分别为卷曲乳酸杆菌组(Group J)、嗜酸乳酸杆菌Ⅰ组(GroupⅠ)、嗜酸乳酸杆菌Ⅱ组(GroupⅡ)、嗜酸乳酸杆菌Ⅲ组(GroupⅢ)，另设对照组(Control)，每组均为10只。

鼠李糖乳杆菌LGG 细胞壁蛋白的预测和功能分析

鼠李糖乳杆菌LGG 细胞壁蛋白的预测和功能分析作者：朱德全高峰姚嘉张跃华韩诚武卢伟栾积毅刘向东来源：《安徽农业科学》2017年第13期摘要 [目的]采用生物信息学方法预测鼠李糖乳杆菌LGG细胞壁蛋白和功能分析。

[方法]以鼠李糖乳杆菌LGG基因组编码蛋白序列为研究对象，采用Phobius和SignalP 4.0软件分析该菌株的细胞壁蛋白，同时采用COG功能数据库对预测的细胞壁蛋白进行功能分析。

[结果]鼠李糖乳杆菌LGG基因组中含有41个细胞壁蛋白，这些蛋白的功能分析结果显示，41个细胞壁蛋白中，25个蛋白没有功能注释，16个有功能注释，主要与细胞壁和细胞膜的生物合成，碳水化合物的代谢与转运，蛋白质的翻译后修饰等功能有关。

[结论]该研究从结构和功能上分析鼠李糖乳杆菌细胞壁蛋白，为分析益生菌适应环境的分子特征打下基础。

关键词鼠李糖乳杆菌LGG；基因组；细胞壁蛋白；功能中图分类号 S188+.2 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2017）13-0141-02Prediction and Functional Analysis of the Cell Wall Proteins in Lactobacillus rhamnosus LGG ZHU De-quan1， GAO Feng2， YAO Jia3， LIU Xiang-dong3* et al（1.College of Science， Jiamusi University， Jiamusi， Heilongjiang 154007；2.College of Life Science， Jiamusi University， Jiamusi， Heilongjiang 154007；3.College of Mechanical Engineering， Jiamusi University， Jiamusi， Heilongjiang 154007）Abstract [Objective]Cell wall proteins of Lactobacillus rhamnosus LGG were predicted and analyzed by bioinformatics. [Method]Cell wall proteins sequences of L. rhamnosus LGG were analyzed by SignalP 4.0 and Phobius software in this paper. At the same time， the functional annotation and clustering analysis of these predicted proteins were performed by COG functional database. [Result] There were 41 cell wall proteins which possessed cell wall motif. Function analysis of these proteins revealed that there were 25 proteins which have no function annotation and 16 proteins which have concrete function annotation. Function of these proteins was mainly involved in cell wall/membrane biogenesis， posttranslational modification， and metabolism and transport of carbohydrate， etc. [Conclusion] Structure and function of cell wall proteins of L. rhamnosus LGG were analyzed， which will provide the basic data for analyzing molecular characteristics of this strain to adopt environment.Key words Lactobacillus rhamnosus LGG；Genome； Cell wall proteins；FunctionLGG属于乳杆菌属鼠李糖乳杆菌种，肠道黏附率高，具有调节肠道菌群、预防和治疗腹泻[1]、排除毒素、预防龋齿、提高机体免疫力等益生功能[1-3]。

乳酸乳球菌表达系统的研究进展_王永刚

在医药卫生领域乳酸乳球菌主要作为疫苗递呈的活载体表达目的蛋白。李鹏成等人以［15］乳酸乳球菌肽聚糖锚钩蛋白（Protein anchor， PA）为研究对象，构建原核表达载体并进行表达，获得 PA 融合蛋白，为该蛋白多克隆抗体制备及与目的抗原的融合表达等相关研究奠定了基础。龚芳红等人成［16］功构建了表达 H. pylori HspA 的重组乳酸乳球菌 MG1363，为进一步口服疫苗的相关研究奠定了基础。李轶杰等人对［17］基因修饰乳酸乳球菌作为药物发送载体系统治疗黑色素瘤进行了初步探索，发现静脉发送携带治疗性分子的乳酸乳球菌能靶向实体肿瘤组织定殖并抑制肿瘤的生长。
图 1 NICE 系统蛋白表达示意图
2 乳酸乳球菌表达系统的应用
乳酸乳球菌是肠道内的常见菌种，其作为一种食品级的安全微生物已越来越受到科研工作者的青睐。目前对乳酸乳球菌应用最多的是食品工业和医药行业。 2.1 L. lactis 表达系统应用于食品工业
目前，构建乳酸菌乳球菌食品级载体-受体系统，寻找一些在乳酸乳球菌中的克隆和表达中有价值的基因已成为乳酸菌分子遗传学研究的趋势并在食品研究和生产领域具有重大意义。乳酸菌食品级高效表达系统（NICE）是现阶段应用最广的高效诱导表达系统，由于 NICE 系统的诱导剂、宿主菌和载体都是安全的食品级的，其应用前景相当广阔。如若在该系统中加入诱导物乳链菌肽后诱导率可达 1 000 倍以上。［12-13］因此，在可控蛋白的生产中该系统是首选表达系统，同时在生产表达时该系统具有良好的安全性，所以可用

口服含pMG36EP30重组质粒的乳酸乳球菌对小鼠免疫应答的影响

口服含pMG36EP30重组质粒的乳酸乳球菌对小鼠免疫应答的影响【摘要】目的用含pMG36E P30重组质粒的乳酸乳球菌口服免疫小鼠，观察其所诱导的小鼠细胞及体液免疫类型。

方法 BABL/C小鼠随机分成疫苗免疫组、乳球菌对照组、生理盐水组，每次分别饲喂5×109个悬浮在缓冲液中的重组乳酸乳球菌、不含重组质粒的乳酸乳球菌及等体积生理盐水。

于第27、34及48天从鼠尾静脉取血，分离血清，ELISA法检测免疫球蛋白G(IgG)、γ干扰素（INFγ）、白细胞介素4（IL4）水平。

结果疫苗免疫组IgG水平与乳球菌对照组、生理盐水组比较差异有显著性（F=134.97, q=20.33、19.90,P<0.01）。

疫苗免疫组INFγ、IL4水平与生理盐水组及乳球菌对照组比较差异均有显著意义(F=79.20、17.05，q=6.18～16.79，P<0.01)。

结论该口服疫苗能引起小鼠特异性的体液免疫反应并能促进细胞免疫应答。

【关键词】乳酸乳球菌 pMG36E P30重组质粒免疫测定小鼠［ABSTRACT］ObjectiveTo study the changes of immune response in mice after oral vaccination with recombinant lactococcus lactis expressing P30 of toxoplasma gondii.MethodsSix to eight week old BALB/C mice were randomly divided into three groups: vaccinated group, non vaccinated control group, normal saline group. They were separately given 5×109 recombinant ctis cells (vaccinated group), ctis (nonvaccinated control group) and normal saline (saline group). Serum samples of immunized mice were collected on day 27, 34, and 48, respectively. IgG, INFγ and IL 4 were measured with ELISA. ResultsCompared with the control group, the levels of INF γ, IL 4 and IgG in the serum of immunized mice showed significant increase （F=17.05,79.20；q=6.18-16.79；P<0.01）.ConclusionOral immunization with recombinant ctis can significantly induce the humoral immunity of mice and enhanced Th1 immunity response.［KEY WORDS］lactococcus lactis; PMG36E P30; immunoassay; rats乳酸口服疫苗使用安全方便，可诱导机体的体液和细胞免疫，同时能够诱导黏膜免疫[1～3]。

低聚果糖对小鼠免疫功能的实验研究

低聚果糖对小鼠免疫功能的实验研究摘要: 目的研究低聚果糖对免疫功能的作用。

方法试验设3 个剂量组灌喂小鼠低聚果糖，连续灌胃31d，进行各项免疫指标的测定，研究低聚果糖对免疫功能的作用。

结果0.75g/kg.bw组小鼠耳重差值、小鼠的腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬百分率和吞噬指数、碳廓清吞噬指数a均显著高于溶剂对照组（P<0.05）， 0.25g/kg.bw，0.75g/kg.bw组小鼠溶血素抗体积数显著高于溶剂对照组（P<0.05）。

结论低聚果糖可增强免疫力。

关键词: 低聚果糖；免疫；增强低聚果糖（Fructooligosaccharides, FOS）作为一种能促进双歧杆菌生长的益生元，其功能已得到广泛的认同。

低聚果糖具有的主要功能包括改善肠道功能，提高食物的吸收效率；通过促进益生菌的生长，抑制病原菌及有害菌生长；低聚果糖还是一种优秀的免疫佐剂，可提高机体免疫应答，因此低聚果糖对机体的免疫水平有着积极的影响[1-2]。

然而，低聚果糖在较低剂量时是否有增强免疫作用尚不可知。

为此，该文采用卫生部《保健食品检验与评价技术规范》中增强免疫力功能的检验方法[3]，评价每日试食1.5g的低聚果糖对人体免疫力的影响，以期为产品配方设计中低聚果糖的添加量提供一定的参考依据。

1材料与方法1.1受试样品低聚果糖，总含量为95%。

粉末状固体，人体服用量为1.5g/日。

1.2动物雄性昆明种小鼠,体重18-22g。

1.3试验剂量以蒸馏水作为溶剂配成所需实验浓度。

分别设溶剂对照组和 3个剂量组，按照人体服用量的5倍,10倍,30倍设计，分别为低聚果糖低剂量组0.125/kg.bw、低聚果糖中剂量组0.25g/kg.bw，低聚果糖高剂量组0.75g/kg.bw。

1.4 主要仪器与试剂二氧化碳培养箱、酶标仪、电子分析天平、半自动生化分析仪、显微镜等。

ConA 、RPMI1640培养液、绵羊红细胞（SRBC及补体（豚鼠血清）DNFB、MTT、YAC-1细胞、印度墨汁等。

乳酸杆菌基因表达系统的研究进展

乳酸杆菌基因表达系统的研究进展徐义刚1,2,崔丽春1(1.东北林业大学,黑龙江哈尔滨150040; 2.东北农业大学动物医学院,黑龙江哈尔滨150030)摘要乳酸杆菌是人及动物肠道中重要的益生菌,被公认为安全级(generall y recognized as safe,GRA S)微生物。

乳酸杆菌表达系统是近几年发展起来的一种表达系统,随着乳酸杆菌分子生物学的发展、各类表达调控元件的分离,相继发展了乳酸杆菌的克隆载体、表达载体和整合载体。

乳酸杆菌具有免疫佐剂、吸附黏膜、抗胆汁酸能力,以乳酸杆菌为载体,作为外源基因的传递和表达系统,研制口服疫苗,刺激黏膜免疫系统产生有效的免疫应答,具有重要开发前景。

关键词乳酸杆菌;外源基因;表达系统中图分类号Q939.11+7文献标识码A文章编号1005-7021(2007)03-0087-05Progress on G ene E xpressi on Syste m of Lact obacill usXU Y-i gang1,2,C U I L-i chun1(1.N ort h e a stF orest ry Univ.H arbin150040;2.C oll.of Veteri nary M e d.N ort h e a st Agric.Un i v.H arbi n150030)A bstrac t Lactobacill us is a k i nd o f i m portant prob i o ti c i n gastro-i ntesti nal tracts o f hu m an and most an i m a l s,and t hey are conside red to be safe bacter i a w it h a GRA S(generall y regarded as safe)status.T he express i on syste m s o f Lactobacillus is a k i nd of expression sy stem tha t have been deve l oped i n recent yea rs,and as t he deve l op m en t of mo-lecu l ar b i o l ogy o f Lactobacillus,and the sepa ration o f var i ous expressi on regu l a t o ry ele m ents,t he c l on i ng vector,the expressi on vector,and the i ntegrati on v ector have been deve loped one a fter ano t ctobacillus possesses many properties such as i m mune ad j uvant,adsorpti on mucosa,ant-i b ile ac i d capab ili ty;take Lactobacillus as a vector trans-fero r and expressi on syste m s o f exogenous gene to study ora l vacc i ne,sti m u l ate mucosa i m m une syste m to produce e-f fecti ve i m mune responses,a ll o f these possess i m portant deve l op m ent prospect.K eywords Lact obacillus;exogenous gene;expressi on syste m乳酸菌(Lactic ac i d bacteria,LAB)是人及动物肠道中极为重要的益生菌群之一,该菌为兼性厌氧的革兰氏阳性菌,是乳品工业发酵的重要菌类,是在食品、医药工程领域具有重要应用前景的食品级微生物,包括乳酸球菌、乳酸杆菌、双歧杆菌等十几个属。

L.plantum和E.coli细胞壁肽聚糖缓释微球对小鼠肠道菌群及机体免疫调节作用的研究

L.plantum和E.coli细胞壁肽聚糖缓释微球对小鼠肠道菌群及机体免疫调节作用的研究分类号一U D C 一密级署哦泸产篝硕士研究生学位论文L．plantum和E口D／／细胞壁肽聚糖缓释微球对小鼠肠道菌群及机体免疫调节作用的研究申请人：范佳惠学号：2121231培养单位：生命科学学院学科专业：微生物学研究方向：微生物产品开发与制备指导教师：孙庆申完成日期：2014年3月27日万方数据lI I I I I I I I I I II I I II lY2770408中文摘要中文摘要肽聚糖的生物活性越来越受到人们的关注，本课题的目的是通过比较革兰氏阳性细菌(植物乳杆菌为代表)和革兰氏阴性细菌(大肠杆菌为代表)细胞壁肽聚糖对肠道菌群组成和机体免疫调节活性的影响，为肽聚糖作为潜在疫苗的开发提供前期的数据支持。

本实验通过三氯乙酸法分离了大肠杆菌细胞壁肽聚糖，得到大肠杆菌肽聚糖的提取率为(11．2±1．35呦。

并以壳聚糖作为壁材，通过化学交联法制备了大肠杆菌肽聚糖(EPG)微球，通过扫描电镜观察证明EPG微球成球性良好，该微球载药量为(43．5l±4．66)g／lOOg，包封率为(91．20±1．82)％。

肽聚糖微球对小鼠肠道菌群及免疫功能的调节作用。

研究数据显示：肽聚糖微球组小鼠肠道中的有益菌乳酸杆菌、双歧杆菌显著高于生理盐水组(P<0．01)，条件致病菌肠杆菌、肠球菌显著低于生理盐水组(P<0．01)，血清中溶菌酶含量、IgG含量、IL．2含量、肠粘膜中SIgA的含量、肝脏指数、脾脏指数均显著高于生理盐水组(P<O．01)。

肽聚糖微球对大肠杆菌感染小鼠模型的保护作用。

结果显示，肽聚糖微球组小鼠肠道菌群中有益菌的数量显著高于生理盐水组(P<O．01)，条件致病茵数量显著低于生理盐水组(P<0．01)，血清中IgG含量、IL—10含量、肠粘膜中的SIgA的含量显著高于生理盐水组(P<0．05)。

鸭白细胞抗菌肽对小鼠免疫功能的影响

鸭白细胞抗菌肽对小鼠免疫功能的影响耿娟;王永才;陈丽颖【摘要】Crude extractions of antimicrobial peptides from Yingtaogu duck blood was administrated in Kunming strain mice for two weeks through gavage at a daily dose of 0.2 mL with the concentrations of 1.5 g/L, 7.5 g/L or 15 g/L, respectively. For negative controls, 0.2 mL of 0.01 ％acetic acid or 10 g/L BSA was separately used. The serum phagocytic rate, phagocytic index, and weight of the immune organs (spleen and thymus) were measured, whilst the total number and subgroups of tlymphocytes were counted through flow cytometry (FCM). The results showed that the extract improved the E-rosette ratio and the total number of CD3+ T cells. Compared to other groups,the extract used at a dosage of 15mg/L significantly improved the immune organ weight index (P<0.05), serum phagocytic index (P<0.01), and the percentages of both CD4+and CD8+ T cells (P<0. 01). This indicates that the immunity of mice was significantly improved by antimicrobial peptides extracted from duck leukocytes.%从樱桃谷鸭血液中提取出白细胞并制备粗提抗菌肽,分别以低、中、高3种剂量(质量浓度分别为1.5 g/L、7.5 g/L、15 g/L)灌胃清洁级昆明系小鼠,0.2 mL/(d·只),同时设0.0l%醋酸溶液对照组和蛋白对照组(10 g/L牛血清白蛋白).连续灌胃14 d后,测定小鼠的免疫器官指数、E玫瑰花环形成率、碳粒廓清指数;同时采用流式细胞术测定小鼠外周血T细胞亚群的水平.结果表明,各剂量的白细胞抗菌肽均能显著提高小鼠的E玫瑰花环形成率和CD3+水平;同时15 g/L的白细胞抗菌肽能明显提高小鼠的免疫器官指数、巨噬细胞吞噬指数、CD4+、CD4+/CD8+水平.初步说明鸭白细胞粗提抗菌肽能明显增强小鼠的免疫功能.【期刊名称】《河南农业科学》【年(卷),期】2011(040)004【总页数】4页(P142-145)【关键词】鸭;白细胞抗菌肽;免疫;流式细胞术【作者】耿娟;王永才;陈丽颖【作者单位】河南农业大学牧医工程学院,河南郑州450002;河南农业大学牧医工程学院,河南郑州450002;河南农业大学牧医工程学院,河南郑州450002【正文语种】中文【中图分类】S834研究发现,禽类血液白细胞中可分离出天然抗菌肽类物质[1]。

利用文本提取工具构建乳杆菌肽聚糖特异性免疫调节网络

利用文本提取工具构建乳杆菌肽聚糖特异性免疫调节网络1孙进，常贵芳，周婷婷，乐国伟，施用晖*江南大学食品科学与技术国家重点实验室，江苏无锡 (214122)E-mail: yhshi@摘要：目的: 探索乳杆菌肽聚糖免疫调节作用的机理。

方法：BALB/c小鼠腹腔注射乳杆菌肽聚糖，从腹腔巨噬细胞和脾淋巴细胞提取RNA，基因芯片分析基因表达情况，利用Medscan从pubmed文献摘要提取肽聚糖相关基因网络,映射芯片数据获得乳杆菌肽聚糖特异基因网络。

结果: 乳杆菌肽聚糖主要通过TLR2-NFkb信号通路激活炎性细胞因子的表达，但是PGRP-L可能通过降解肽聚糖对此通路有负调节作用，NF-κb的激活可能诱导NOD2表达，对此通路进行负调节。

结论:乳杆菌肽聚糖通过与多种受体作用诱导独特的免疫反应，维持机体免疫稳态。

关键词：乳杆菌，肽聚糖，基因网络，基因芯片中图分类号： R392.1 文献标识码：A乳酸菌是人或哺乳动物胃肠道正常菌群的重要组成部件，在维持机体免疫稳态中发挥重要作用。

通过食物摄取的某些乳酸菌具有良好的免疫调节作用，可以用于辅助治疗结肠炎、缓解过敏、辅助疫苗发挥作用。

研究表明，乳酸菌的这种免疫调节作用和其细胞壁肽聚糖（PGN）的含量具有显著的正相关关系[1]。

所以肽聚糖是介导乳酸菌免疫调节作用的重要功能分子之一。

国内外研究表明，乳酸菌肽聚糖具有显著的免疫佐剂和抗肿瘤作用，这种作用可能主要通过激活巨噬细胞而实现。

但是乳杆菌肽聚糖调节免疫细胞功能的机制还不清楚。

目前的研究已表明, 高等真核生物体中含有若干PGN识别分子, 包括肽聚糖识别蛋白家族( PGRPs) 、CD14、Toll 受体2( TLR2) 、Nod1 和Nod2 等[2] , 这些活性分子通过不同的信号传导途径诱导释放免疫调控物质, 从而刺激免疫系统发挥免疫功能。

因此, 与PGN相关的免疫识别是个极其复杂的过程, 它在免疫系统中的作用有待于更深入地探索研究。