治疗药物监测HPLC分析方法建立探讨(精选)
高效液相色谱在中草药质量控制中的应用
高效液相色谱在中草药质量控制中的应用一、本文概述随着现代科技的进步，中草药的质量控制已成为中医药领域研究的热点和难点。
高效液相色谱（HPLC）作为一种高效、精确的分析技术，在中草药质量控制中发挥着越来越重要的作用。
本文旨在探讨高效液相色谱在中草药质量控制中的应用，包括其原理、方法、优势以及在实际操作中的案例分析，以期为提高中草药质量控制水平提供理论支持和实践指导。
本文将对高效液相色谱技术的基本原理和特点进行简要介绍，以便读者对该技术有一个初步的了解。
接着，将重点分析高效液相色谱在中草药质量控制中的应用，包括中草药的成分分析、质量标准制定、以及质量控制过程中的关键环节等。
同时，还将探讨高效液相色谱技术在中草药质量控制中的优势，如分离效果好、分析速度快、灵敏度高等。
本文还将通过具体案例分析，展示高效液相色谱在中草药质量控制中的实际应用效果。
通过对不同中草药样品的分析和比较，揭示高效液相色谱技术在中草药质量控制中的潜力和前景。
本文将总结高效液相色谱在中草药质量控制中的优势和挑战，并提出相应的建议和展望，以期为中草药质量控制领域的进一步发展提供参考和借鉴。
二、高效液相色谱技术原理及特点高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography, HPLC）是一种重要的分离分析技术，广泛应用于中草药质量控制领域。
其技术原理基于不同物质在固定相和流动相之间的分配平衡，通过高压泵将流动相推动通过固定相，使样品中的各组分因分配系数的差异而实现分离。
高分离效能：HPLC具有高分辨率和高灵敏度，能够实现对中草药中复杂成分的有效分离和检测，为质量控制提供了准确的数据支持。
高选择性：通过选择合适的固定相和流动相，以及调整分离条件，HPLC能够实现对特定组分的选择性分离，有助于中草药中特定活性成分的定量分析。
快速分析：HPLC的分析速度快，通常能在较短时间内完成样品的分离和检测，提高了分析效率。
左乙拉西坦治疗药物监测的研究进展
·综述·左乙拉西坦治疗药物监测的研究进展Δ高畅1，2＊，倪斌1，陈芳辉1，郭春钰1，魏桂林1 #（1.赣南医学院第一附属医院药学部，江西赣州 341001；2.赣州市儿童白血病肿瘤免疫治疗药物研发重点实验室，江西赣州 341000）中图分类号 R971+.6；R969文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2024）02-0251-06DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2024.02.23摘要左乙拉西坦（LEV）是第二代广谱抗癫痫药物，具有起效快、半衰期短、疗效确切、耐受性好、药物相互作用少等优点。
为提高LEV的临床效果，减少不良反应的发生，应对儿童、妊娠期妇女、老年人、肾功能不全等特殊人群予以治疗药物监测（TDM）。
临床上LEV监测样本常选择血浆或血清，监测方法多选择免疫分析法或色谱分析法。
LEV的有效浓度范围目前尚无统一意见，血药浓度与不良反应的相关性也不明确。
影响LEV血药浓度的因素主要有年龄、妊娠及患者用药依从性等。
如何解读TDM结果并根据结果调整给药剂量是今后工作的重点。
关键词左乙拉西坦；治疗药物监测；合理用药；血药浓度Research progress in therapy drug monitoring of levetiracetamGAO Chang1，2，NI Bin1，CHEN Fanghui1，GUO Chunyu1，WEI Guilin1（1. Dept. of Pharmacy，the First Affiliated Hospital of Gannan Medical University，Jiangxi Ganzhou 341001，China；2. Ganzhou Key Laboratory of Immunotherapeutic Drugs Developing for Childhood Leukemia， Jiangxi Ganzhou 341000， China）ABSTRACT Levetiracetam （LEV）is the second generation of broad-spectrum anti-epileptic drug. LEV has the advantages of rapid absorption， short half-life， precise efficacy， good tolerance and few drug interactions. In order to improve the clinical efficacy of LEV，and reduce the occurrence of adverse reactions，children，pregnant women，the elderly，and patients with renal insufficiency should receive therapeutic drug monitoring （TDM）. Clinically，the samples are usually plasma or serum，and the TDM methods are mostly immunoassay or chromatography. There is currently no consensus on the effective concentration range of LEV，and the correlation between plasma concentration and adverse reactions is also unclear. The main factors affecting LEV plasma concentration include age， pregnancy， and patient compliance. How to interpret TDM results and adjust dosage based on the results will be the focus of future work.KEYWORDS levetiracetam； therapeutic drug monitoring； rational drug use； plasma concentration左乙拉西坦（levetiracetam，LEV）是比利时优时比制药公司研发的一种吡咯烷酮衍生物，与吡拉西坦有类似结构，化学名为（S）-α-乙基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺，是第二代广谱抗癫痫药物（anti-epileptic drug，AED），临床多用于癫痫部分发作和全面强直阵挛性发作以及肌阵挛发作的治疗[1]。
HPLC在血药浓度测定和药代动力学研究中的应用
7
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HPLC特点
“三高一广一快 ” ①高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的
阻力较大，须对载液加高压。 ②高效：分离效能高。 ③高灵敏度：紫外检测器可达0.01ng，进样量在
uL数量级。 ④应用范围广：百分之七十以上的有机化合物可
用高效液相色谱定量或定性。 ⑤分析速度快、载液流速快，通常分析一个样品在
5~15分钟。
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应用广泛
HPLC由于其独特的优点已经广泛应用于化学、 医学、工业、农学、商检和法检等学科领域。
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几种检测方法比较
分析方法
优点
缺点
紫外分光光度法（UV）
简单、经济、省时
对于多个成分混合样品不易 分离、定量
专属性较差
气相色谱法（GC）
分离效率高，分析速度快
样品必须在气化的状态下检
高效液相色谱在血药浓度测定及 药代动力学研究中的应用
宁德市医院
临床药学室
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介绍内容
临床药学室简介 HPLC原理、特点 HPLC与其他仪器的对比 HPLC临床应用
2
临床药学室
成立于2004年 是宁德地区最早开展的 人员组成：6人 职称：副主任药师1人 主管药师2人 药师3人 学历：硕士1人 本科5人
样品用量少，检测灵敏度高， 测，样品必须有挥发性，能
操作简单
耐热
高效液相色谱（HPLC）
可测定大部分药品，还可测 对样品要求有一定的预处理 定代谢物，且干扰相对较小。 在新药研究中又不需要免疫 试剂盒，价格相对便宜
荧光偏振免疫分析法（FPIA） 快速方便、微量准确
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费用昂贵，能被检测的物质 有限
临床应用
分类 强心甙 抗癫痫药
HPLC法测定玉屏风颗粒中黄芪甲苷及甘露醇的含量
HPLC法测定玉屏风颗粒中黄芪甲苷及甘露醇的含量【摘要】本研究利用HPLC法测定了玉屏风颗粒中黄芪甲苷和甘露醇的含量。
首先进行了样品处理，并通过优化色谱条件建立了标准曲线。
然后分别测定了黄芪甲苷和甘露醇的含量。
结果显示，玉屏风颗粒中黄芪甲苷和甘露醇的含量分别为X和Y。
对测定结果进行了分析，并探讨了研究结果的意义。
研究结果表明，该方法可准确测定玉屏风颗粒中黄芪甲苷和甘露醇的含量，为该药物的质量控制提供了依据。
未来的研究可以进一步完善该测定方法，提高测定的准确性和灵敏性，以及探讨玉屏风颗粒中其他成分的含量及其药效成分的相互作用。
【关键词】HPLC法、玉屏风颗粒、黄芪甲苷、甘露醇、含量测定、样品处理、色谱条件、标准曲线、结果分析、研究意义、研究展望。
1. 引言1.1 研究背景玉屏风颗粒是一种常用的中药制剂，具有清热解毒、祛风排湿的功效，广泛应用于临床治疗。
黄芪甲苷和甘露醇是玉屏风颗粒中重要的活性成分，对其含量的准确测定具有重要意义。
黄芪甲苷是一种有效的生物活性成分，具有增强人体免疫功能、抗疲劳、抗氧化等多种药理作用。
甘露醇是一种重要的化学成分，具有保湿、滋润、镇静等功效。
准确测定玉屏风颗粒中黄芪甲苷和甘露醇的含量，对研究其药效成分和质量控制具有重要意义。
目前，高效液相色谱法（HPLC）已被广泛应用于中药成分的分析和检测。
本研究旨在借助HPLC技术，建立准确、快速的测定玉屏风颗粒中黄芪甲苷和甘露醇含量的方法，为其质量评价和临床应用提供科学依据。
通过本次研究，可以更好地了解玉屏风颗粒的药效物质基础，推动其在临床治疗中的应用。
1.2 研究目的研究目的：本研究旨在利用HPLC法测定玉屏风颗粒中黄芪甲苷及甘露醇的含量，为其质量控制提供有效手段。
具体而言，通过确定最佳的样品处理方法、优化色谱条件、建立合适的标准曲线，测定黄芪甲苷和甘露醇在玉屏风颗粒中的含量水平，从而为该中药制剂的质量评价和控制提供依据。
通过本次研究，还可探讨黄芪甲苷和甘露醇对玉屏风颗粒药效的贡献，为进一步研究中药复方的药效成分及其相互作用提供借鉴。
柱前衍生化高效液相色谱法测定普瑞巴林中的光学异构体-概述说明以及解释
柱前衍生化高效液相色谱法测定普瑞巴林中的光学异构体-概述说明以及解释1.引言1.1 概述本文旨在探讨柱前衍生化高效液相色谱法在普瑞巴林中光学异构体的测定中的应用。
普瑞巴林是一种常用的药物成分，广泛用于疼痛和炎症等疾病的治疗。
然而，普瑞巴林存在光学异构体的问题，这意味着药物中可能存在两种或多种形式的分子结构。
由于光学异构体的生物活性和药效可能存在差异，因此准确快速地测定普瑞巴林中的光学异构体是非常重要的。
传统的光学异构体的分离方法如手性高效液相色谱法（Chiral-HPLC）对于普瑞巴林的测定具有一定的局限性，如分离时间长、操作复杂等。
因此，本文引入基于柱前衍生化的高效液相色谱法，在普瑞巴林的光学异构体分析中具有很大的潜力。
柱前衍生化是一种将分析物与特定试剂在分离柱之前进行反应，形成稳定的荧光衍生物的方法。
该方法能够提高色谱分离的选择性和灵敏度，并且具有操作简单、分析速度快的优点。
本文将详细介绍柱前衍生化高效液相色谱法的原理和操作步骤。
通过对普瑞巴林样品的预处理和柱前衍生化反应，成功实现了对普瑞巴林中光学异构体的分离和测定。
同时，本文还将对柱前衍生化高效液相色谱法在普瑞巴林中的应用前景进行探讨，总结其在药物分析领域的重要性和潜在的发展方向。
通过本文的研究，我们希望能够为普瑞巴林的质量控制提供一种新的分析方法，并为相关药物的研究和开发提供有力的支持。
同时，本文的研究结果也有望为其他药物中光学异构体的测定提供借鉴和参考。
最终，我们希望通过本文的发表，能够为相关领域的研究者提供有益的信息和启发，推动科学研究的进一步发展。
1.2 文章结构本文分为三个主要部分：引言、正文和结论。
在引言部分，将会对本文的主题进行概述，介绍普瑞巴林及其在医药领域的应用，以及目前存在的问题和挑战。
接下来，将详细阐述本文的研究目的，即通过柱前衍生化高效液相色谱法测定普瑞巴林中的光学异构体。
正文部分将分为两个主要部分。
首先，将介绍柱前衍生化高效液相色谱法的基本原理、操作步骤和优势。
色谱分析在药物分析中的运用
检测器的选择
HPLC检测中，当样品有紫外吸收时，常选用紫外检测器，在药物分析文献中，用紫外检测器的占95%以上，使用时要注意溶剂的使用波长，即溶剂的极限波长必须低于检测波长。若使用荧光检测器或电化学检测器，可使灵敏度提高2～3个数量级，但不是所有化合物都有荧光，无荧光的物质可经衍生化作用形成荧光的化合物。电化学检测适用于有氧化还原性的药物。
三、微柱色谱实用性进展
微柱液相色谱法与普通液相色谱法的比较 微柱液相色谱的应用范围
微柱液相色谱法的实用性进展
微柱液相色谱法与普通液相色谱的比较 分类 应用 快速药物分析 在药物分析中，复方制剂分析和治疗药物监测非常适合用微柱，进行快速分析。分析APC片中的3种主药，用100mm×1mm微柱，填充3µm的ODS，用乙腈-5mmol/L辛基磺酸钠溶液（18:20）为流动相，20s内分离即完毕，50个样品15min内即完成。流动相只需14ml，为常规柱的1/21。
微柱液相色谱法的实用性进展
微柱液相色谱法与普通液相色谱的比较 分类 应用 快速药物分析 在药物分析中，复方制剂分析和治疗药物监测非常适合用微柱，进行快速分析。分析APC片中的3种主药，用100mm×1mm微柱，填充3µm的ODS，用乙腈-5mmol/L辛基磺酸钠溶液（18:20）为流动相，20s内分离即完毕，50个样品15min内即完成。流动相只需14ml，为常规柱的1/21。
液相色谱目前在常规分析 仪器中的排列
在2000年版一、二部药典中，用高效液相色谱法测定的品种比1995年版药典成倍地增加，2005年版一、二部药典又增加几倍。而高效液相色谱法在几种仪器分析方法中，其分析数量的排列为第二，因其分离效率高，又能准确地反映所测成分的真实含量。中国药典应用高效液相色谱法的情况，目前仅次于美国药典，而优于英国药典和日本药局方。
液相色谱在中药分析中的应用
液相色谱在中药分析中的应用摘要液相色谱法的发展非常迅猛，许许多多的新方法不断涌现，它具有分离效率高，选择性好，分析速度快，操作自动化和应用范围广的特点。
本文主要简单介绍液相色谱的知识及其在药物分析中的广泛应用，通过实例描述了液相色谱法的优点。
液相色谱(HPLC)是结合经典液相色谱及气相色谱的分离原理。
由于与气相色谱法相比，液相色谱法具有下列主要优点：①不受试样的挥发性和热稳定性的限制，应用范围广②可选用不同性质的各种溶剂作为流动相，而且流动相对分离的选择性有很大作用，因此分离选择性高；③一般在室温条件下进行分离，不需要高柱温。
因而广泛应用于生物化学，生物医学，石油化工，合成化学，环境监测，食品卫生，以及商检，法检和质检等许多分析检验部门。
液相色谱不仅仅是一种有力的分析工具，而且越益成为分离制备和纯化的手段。
液相色谱在国内和国外已被广泛地应用于药物分析，尤其在我国，近十几年来HPLC方法越来越受到重视。
中国药典1985年版才规定使用，该版只有8个品种规定使用HPLC方法检测，到了1995版达到113个品种，2000版药典的应用达到了282种，2005版仅药典一部的应用达到了479种，涉及518项；药典二部中采用液相色谱法的品种有848种，较2000年版增加了566次，其中复方制剂、杂质或辅料干扰因素多的品种多采用液相色谱法。
2010年药典则更多的用液相色谱法取代了某些药物含量测定的薄层法，并引入了各式各样的检测器。
由此可见，我国液相色谱法在药物分析中的重要性。
关键词：液相色谱；气相色谱；药物分析1液相色谱的简介液相色谱简称HPLC，又称高速或高压液相色谱。
该法吸收了普通液相层析和气相色谱的优点，经过适当改进发展起来的，既有普通液相层析的功能，又有气相色谱的特点（即高压，高速，高分辨和高灵敏度）。
HPLC是近年来迅速发展起来的一项新颖的分离技术，不仅适用于很多不易挥发，难热分解物质（如蛋白质，肽类，氨基酸及其衍生物等）的定性定量分析，而且也适用于上述物质的制备和分离。
治疗药物监测汪荣军
治疗药物检测常用标本及预处理
一、常见标本及收集 （一）血清/血浆
TDM中通常以血清为监测标本，但表观分 布容积远远大于0.6L/kg的药物应检测全血。 要考虑血清中蛋白对游离药物浓度的影响 采血时要远离用药部位
传统的临床用药:
将剂量与药理作用强度直接相联系
实际上:
药物的药理作用与剂量在一定范围内成比例 药理作用是药物与特异性受体相互作用的结果 作用部位(受体)组织液中的药物浓度决定药物的药 理作用强度 (受体)组织液中的药物浓度与血药浓度呈快速平衡 药物疗效与副反应
更多的取决于血药浓度而非剂量
药物剂量与效应的关系 dose-effect relationship
治疗药物检测常用标本及预处理
一、常见标本及收集 （二）唾液
已知唾液药物浓度与血浆药物浓度比值较 恒定的药物 在唾液与血浆间能较快达到分布平衡的药 物 本身或同时用药不能有抑制唾液分泌的情 况发生
治疗药物检测常用标本及预处理
一、常见标本及收集 （三）尿 饮食、尿液PH值应严格控制 可适用于泌尿道感染治疗或肾毒性较大药 物的监测
样品预处理
（一）去蛋白
1. 沉淀离心法 2. 层析法 3. 超滤法 4. 超速离心法
（二）提取
1．液-固提取 2．液-液提取
治疗药物监测与给药方案个体化
给药方案个体化的实施
（四）治疗药物浓度测定的常用方法
在TDM中常用的分析方法主要有 光谱法 色谱法 免疫化学法
光谱法
紫外/可见分光光度法 荧光分光光度法
丙戊酸钠
本品主要用于单纯或复杂失神发作、肌阵 挛发作，大发作的单药或合并用药治疗，有时 对复杂部分性发作也有一定疗效。口服胃肠吸 收迅速而完全，约1 ～ 4小时血药浓度达峰值， 生物利用度近100%。丙戊酸钠有效血药浓度的 参考值为50 ～ 100 μg/ml。
体内药物分析方法的建立和验证
气相色谱-质谱联用法（GC-MS）
GC-MS结合气相色谱和质谱技术，可用于药物 的定性和定量分析。
毛细管电泳法（CE）
CE方法基于电解质溶液中的荧光物质的运移差 异，对药物进行定量分析。
液相色谱-质谱联用法（LC-MS）
体内药物分析方法的建立 和验证
在本次演讲中，我将介绍体内药物分析方法的重要性以及建立与验证这些方 法的步骤。我们还将探讨常见的分析方法，并分享一些实际样品分析的案例 研究。
研究目的和背景
我们的研究旨在提高体内药物分析的准确性和可靠性。了解药物在体内的代谢和排泄过程对药物疗效评估至关 重要。
建立药物分析方法的重要性
1 提高药物治疗效果
通过建立准确和可重复的药物分析方法，我们可以优化药物的剂量和给药方式，以提高 治疗效果。
2 保证药物安全性
合适的药物分析方法可以帮助我们检测潜在的药物代谢产物和有害副作用，确保药物的 安全性。
3 促进新药开发
通过建立高效的药物分析方法，我们可以更好地评估新药的代谢特性和药代动力学特征， 从而推动新药的研发。
质量控制和质量保证
我们使用建立和验证的分析方法， 在血浆样品中测定药物的浓度， 以评估药物的相应效应和剂量控 制。
通过分析代谢产物，我们可以进 一步了解药物的代谢途径和体内 转化过程，为合理用药提供支持。
使用建立和验证的分析方法，我 们能够监控药物制剂的质量并确 保合格产品的生产。
总结和展望
通过建立和验证准确可靠的药物分析方法，我们能够更好地理解药物在体内 的代谢和作用机制，并为药物治疗提供科学依据。
建立与验证方法的步骤
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多组分生化药注射剂HPLC特征图谱研究思路探讨
多组分生化药注射剂HPLC特征图谱研究思路探讨任丽萍;范慧红【摘要】The existing literature on fingerprint chromatography at home and abroad and the quality control of biochemical injection with multiple components were reviewed in this bined with the laboratory research, It is proposed that the strategy for HPLC specific chromatography of biochemical injection with multiple components in order to provide the basis for effectively promoting the establishment and development of HPLC specific chromatography of biochemical injection with multiple components.%本综述在系统总结近年来国内外有关指纹图谱研究文献和多组分生化药注射剂质控现状的基础上，结合实验室工作积累，探索性地提出了多组分生化药注射剂HPLC特征图谱的研究思路，以期进一步推动多组分生化药注射剂特征图谱相关研究工作的开展。
【期刊名称】《中国生化药物杂志》【年(卷),期】2015(000)006【总页数】4页(P161-164)【关键词】多组分生化药注射剂;指纹图谱;特征图谱;研究思路;质量控制【作者】任丽萍;范慧红【作者单位】中国食品药品检定研究院，北京100050;中国食品药品检定研究院，北京 100050【正文语种】中文【中图分类】TQ460.72多组分生化药是一类原材料来源于人、动物的组织或者体液，或者通过发酵而来的非单一成分的药品。
国家重点监控药品合理用药的监测与数据分析方法研究
国家重点监控药品合理用药的监测与数据分析方法研究合理用药是保障公众健康的重要举措，而国家重点监控药品合理用药的监测与数据分析方法的研究，对于推动合理用药政策的制定和实施具有重要意义。
本文将探讨国家如何通过监测与数据分析来提高药品合理用药水平，以达到最佳的医疗效果和经济效益。
首先，对于国家重点监控药品合理用药的监测方法研究，可以从多个角度进行。
一方面，可以通过建立药品合理用药监测系统，完善数据采集、分析和反馈机制，实时监测药品的使用情况和合理用药指标的达成情况。
另一方面，可以利用大数据和人工智能等技术手段，对医院、医生和患者等方面的用药行为进行全面、准确的分析，发现存在的问题，并提出解决方案。
其次，对于药品合理用药的数据分析方法研究，可以从不同层面进行探索。
首先，可以从宏观角度分析，比如利用统计学方法，对不同地区、不同医院的用药行为进行比较与评估，发现药品使用的差异性和问题所在。
同时，还可以结合患者的个人信息和用药数据，进行人群分析，寻找不同群体的用药偏好以及存在的问题，为进一步改善药品合理用药提供科学依据。
进一步地，国家重点监控药品合理用药的监测与数据分析方法的研究需要重点关注以下方面。
首先，要加强数据质量和隐私保护，确保数据的真实可靠性和隐私安全。
其次，要建立科学的评价体系，明确合理用药的各项指标和标准。
此外，还需要加强国家间的合作与信息共享，利用全球合理用药监测的经验和技术成果，提高我国合理用药水平。
此外，在国家重点监控药品合理用药的监测与数据分析方法研究中，还要强调多元参与。
合理用药是一个涉及医生、患者、药师和政府等多方面的领域，在监测和数据分析的过程中，需要各方面的共同努力。
在实施过程中，需要加强对医生的教育和培训，提高他们对合理用药的认识和重视程度，使他们在临床实践中更加注重合理用药。
同时，患者也应该被纳入合理用药监测的范畴，通过宣传教育的方式提高患者对合理用药的认知和遵从度。
另外，药学专业人员应发挥专业优势，为医生和患者提供合理用药方面的咨询和指导。
高效液相色谱法测定阿司匹林和阿华法林的方法学研究
RP-HPLC法测定人血清中阿司匹林和华法林的方法学研究陈纭1,黄晓晖1,唐海沁2,王夏芹2,金涌1,李俊1(1.安徽医科大学药学院,安徽合肥 230032;2.安徽医科大学第一附属医院心内科,安徽合肥 230022)摘要：目的建立一种简易的方法测定成人血清中阿司匹林和华法林的含量,便于临床药物浓度监测。
方法采用Hypersil ODS C18色谱柱(150mm×4.6mm，5μm)，流动相为(0. 01 mol·L - 1 )磷酸二氢钾溶液-甲醇(40:60)，流速为1. 0m l·m in - 1，检测波长为279nm。
结果阿司匹林和华法林的线性关系良好，保留时间分别为3.0min，6.3min。
标准曲线的线性范为0.25～16 mg·L- 1，0.1～8 mg·L- 1，r =0.99942和r＝0.99954，阿司匹林和华法林的高、中、低日间、日内变异系数均在10%以下，回收率> 90%。
结论本法简便、快速重现性好，灵敏度高，可用于人血清中阿司匹林和华法林药物的含量检测及应用于临床治疗药物监测。
关键词：阿司匹林；华法林；反相高效液相色谱法;血清浓度Determination of aspirin and warfarin in human blood serum by RP-HPLC CHEN Yun,HUANGXiao-hui,TANGHai-qin,W ANG Xia-qin,JIN Y ong,LI Jun(College of Phamacy,Anhui Medical University,Hefei 230032)Abstract：Aim To establish an method for determination of aspirin and warfarin. Methods RP-HPLC method was used with C18 column at the standard of 150 mm×4.6 mm ，0.01 mol·L – 1 KH2PO4：methanol solution ( 40：60) as mobile phase. The flow rate was 1.0 m l·min- 1. UV detection was determined at 279nm.Results The reserve time of warfarin and aspirin was 3.0 min and 6.3 min. The linearity range of standard curve was between 0.25 and 16 mg·L -1，0.1 and 8 mg·L -1.The average recovery was 90%.RSD of three consistencies including the high，middle and low varied in less than 10%.Conclusion The method is simple，fast andaccurate for the analysis of warfarin and aspirin in human blood serum.Key words：Aspirin；Warfarin；RP-HPLC阿司匹林（乙酰水杨酸）抗血栓的机理是使血小板的环氧合酶，即前列腺素合成酶乙酰化，抑制环内过氧化物的生成，减少血栓素A2(TXA2)的生成，从而抑制血小板的聚集，减少血栓的形成。
HPLC综述
高效液相色谱在药物分析中的应用进展谢秋红邵大志（四平市中心人民医院吉林四平 136000）摘要:高效液相色谱法(High—Performance Liquid Chromatography，HPLC)是以液体作为流动相，并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。
高效液相色谱对样品的适用性广，不受分析对象挥发性和热稳定性的限制，因而弥补了气相色谱法的不足。
在目前已知的有机化合物中，可用气相色谱分析的约占20%，而80%则需用高效液相色谱来分析。
高效液相色谱已经广泛应用于药物的含量测定、组成分析、质量控制等方面，在药物分析中占主要地位。
其特点是分析速度快、分离效率高、检测灵敏度高、检测自动化、适用范围广、组分易回收、样品处理较简单。
本文从以下几个方面综述了高效液相色谱法在药物分析中的研究进展。
关键词：高效液相色谱法药物分析应用现代药学的迅速发展促进药物及其代谢物在机体内处置过程的研究不断深入，一方面对体内药物分析研究方法和手段提出了越来越高的要求，另一方面也推动了体内药物分析研究方法的蓬勃发展[1]。
HPLC具有分离效能好、分析速率快，应用范围广等诸多优点，已成为药物分析中最重要的分析方法及医学研究与诊断常用的方法之一。
如今，HPLC已成为反映世界各国药典水平先进性的指标之一[2]。
1. 高效液相色谱作为常规分析方法在药物分析中的应用高效液相色谱法作为药物分析中的最主要的分析方法，常被作为常规分析检验方法而广泛应用[3]。
近年来在这个方面的研究比较多，康自华等[4]针对近几年国际奥委会医学委员会公布的禁用表中新增药物及一系列利尿剂的相关化合物进行了研究，比较了不同的提取方法及回收率，建立了同时分析13种利尿剂的高效液相色谱测定方法，检出限小于5ng。
张晓青等[5]采用反相离子对高效液相色谱法研究了唑来膦酸及其有关化合物的色谱分析与分离方法。
该方法简单快速，不需进行复杂的样品处理，唑来膦酸与有关化合物的分离良好，适用于唑来膦酸的常规分析。
HPLC方法建立与验证
2022/1/19
第体8页内，药共7物0页分。析
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第四章 分析方法的建立与验证
第一节 分析方法的设计依据
三、生物样品的类型与预处理方法
生物样品的类型与预处理方法——决定分析方法的应用
以血浆或血清为分析样品 采用蛋白沉淀-溶剂萃取预处理技术 ——分析样品较为“干净”，可用HPLC检测
用RIA分析 ——样品的预处理方法可较为粗放 ——经过简单的蛋白沉淀或不经任何预处理直接测定
定量限与检测限、溶液稳定性
其次为生物基质中待测药物稳定性的验证 ——室温放置、冷冻（或冷藏）、冻-融循环
2022/1/19
第体24页内，药共7物0页分。析
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第四章 分析方法的建立与验证 第三节 分析方法的验证与要求
验证的效能指标与基本要求
1．特异性——避免干扰
2．标准曲线与线性范围——覆盖所有浓度范围
——预处理——待测物从结合物或缀合物中释放
选择样品预处理方法——首先应考虑
——待测药物的理化性质
——药物在生物体内的存在状况
——药物在生物体内的生物转化(代谢)途径
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(一)待测药物的理化性质
第四章 分析方法的建立与验证 第一节 分析方法的设计依据
药物的pKa值、亲脂性、溶解度、分配系数等——预处理及检测方法
——避免受到代谢产物的干扰适用于实际生物样品测定
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二、分析方法的建立
第四章 分析方法的建立与验证 第二节 分析方法的建立步骤
➢ 初步拟定分析方法后 进行一系列试验工作——选择最佳分析条件 同时验证分析方法的可行性——确认是否适用于实际生物样品
高效液相色谱法在药品检验中的应用
高效液相色谱法在药品检验中的应用摘要：药品的质量和安全性对于患者的治疗效果至关重要，药品制造商和监管机构必须确保药品的成分和含量符合规定的标准，杂质和不纯物的含量低于允许的水平。
高效液相色谱法作为一种精确、可靠且广泛应用的分析技术，已经成为药品检验领域的重要工具。
本文介绍了高效液相色谱法技术的原理，分析了高效液相色谱法在药品检验中的多方面应用，为药品检验中合理高效应用高效液相色谱法技术提供了参考性意见。
关键词：高效液相色谱；HPLC；药品检验；应用前言：药品的质量、安全性和有效性对患者的健康和治疗效果至关重要。
因此，药品制造商、监管机构和研究人员必须采取一系列措施来确保药品的质量和合规性。
随着新药物的不断研发和老药物的生产，对药品的分析和检验需求不断增加。
药品包含多种成分，且需要在不同的制剂中进行制备，开发精确、可靠的分析方法以确保药品的质量、稳定性和生物利用度变得尤为重要。
高效液相色谱法是一种高分辨率、高选择性和高灵敏度的分析技术，已被广泛用于药品检验领域，基于分离原理，通过将样品与液相和柱填料相互作用，实现了不同成分的有效分离。
1高效液相色谱技术的概述高效液相色谱技术（High-Performance Liquid Chromatography，以下称HPLC）是一种广泛用于分离、鉴定和定量化合物的分析方法，在化学、生物化学、药学、环境科学等领域中被广泛应用。
HPLC基于物质在液相（通常是有机溶剂或水）和固定填料（柱填料）之间的分配和分离。
样品在高压下由高压泵系统输送到柱中，样品分子与填料相互作用并随着流动液一同在柱内移动，不同分子在填料上的相互作用导致它们以不同速度移动，从而实现分离，并在此基础上选择不同类型的填料以实现不同分子的分离。
常见的填料类型包括反相填料（C18、C8等）用于分离疏水性化合物，正相填料用于分离极性化合物，离子交换填料用于分离带电分子等。
一方面，HPLC系统通常配备检测器来检测样品分子。
高效液相色谱法
《现代分离科学》课堂讨论
1. 简介
高效液相色谱法 （HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速 液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高 效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用 高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合 溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成 分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。 该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领 域中重要的分离分析技术。HPLC在国内和国外的药物分析领域 的应用范围很广，发展速度也很快，尤其在我国，近十几年来 HPLC方法越来越受到重视。尤其在药物分析应用方面，高效液 相色谱法有着不可替代的作用，它对于药物的鉴别、分离、定 量测定都有着较高的准确度，本文对高效液相色谱法在药物分 析的各方面进行了简单的综述。
兽药饲料.2016(502):169-171.
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3.2 临床治疗药物的监测
HPLC法不需要对样品进行高温汽化，一般不必进行
衍生化处理；并且其固定相种类较多，流动相通过改变
其组成成分及比例，可以对绝大多数有机化合物药物进
行分离测定。因此，HPLC法是一种比较成熟的，临床药
物监测方法。
效学。同时随着药物分析技术的不断进步和发展，可对人体和
动物体内（体液、组织和血中）药物及其代谢物的浓度进行定 量分析，它对药品的评价、指导临床合理用药和药代动力学研 究均具有重要的意义和现实需要。
《现代分离科学》课堂讨论
冯素香等建立芦荟大黄素在大鼠血浆中的固相萃取-高效液相 色谱分析方法,研究大鼠体内的药代动力学过程。SD大鼠,按50和 20mg.kg-1剂量灌胃给药,不同时间点尾静脉取血,以SPE处理血浆样 品,用HPLC内标法测定血药浓度,甲醇-0.1%磷酸水(70∶30)为流动 相,柱温为30℃,检测波长254 nm,以DAS2.0软件计算药代动力学参 数。结果:血浆中芦荟大黄素在0.016～19.53μ g.mL-1(r=0.998 1) 范围内线性关系良好,提取回收率为88.7%～94.6%,最低检测限为 0.008μ g.mL-1,定量限为0.016μ g.mL-1,日内和日间精密度RSD均 <6%.建立的测定大鼠体内芦荟大黄素含量的方法具有良好的准确 度、精密度以及专属性,适用于芦荟大黄素在大鼠体内的药代动力 学研究。
HPLC法测伏立康唑的血药浓度
·临床药学·ＨＰＬＣ法测伏立康唑的血药浓度刘香芳，滕文兵，蔡 捷，倪穗琴（广州市第一人民医院临床药学科，广东广州５１０１８０）摘要：目的 建立ＨＰＬＣ法测定人血中伏立康唑浓度的方法，并应用于患者的个体化治疗。
方法 以ＡｇｉｌｅｎｔｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓＺＯＲＢＡＸＳＢ Ｃ１８（１５０×４ ６ｍｍ，５μｍ）色谱柱分离，柱温３０℃，流动相为甲醇∶水＝５３∶４７，流速１ ０ｍＬ·ｍｉｎ－１，检测波长为２５６ｎｍ，进样量为３０μＬ，卡马西平为内标。
结果 伏立康唑浓度在０ ３１～１９ ８４μｇ·ｍＬ－１范围内，呈良好的线性关系，最低检测限０ ３１μｇ·ｍＬ－１（Ｓ／Ｎ≥１０）。
结论 本方法快速、简便、稳定，适合用于伏立康唑血药浓度的测定。
伏立康唑血药浓度个体差异大，开展治疗药物监测有利于保证患者安全、有效用药。
关键词：伏立康唑；高效液相色谱法；血药浓度中图分类号：Ｒ９６９ １ 文献标识码：Ｂ 文章编号：１００６ ３７６５（２０２０） ０７ ００４７ ０３作者简介：刘香芳，女。
学历：硕士。
职称：主管药师。
Ｅ ｍａｉｌ：ｌｉｕｘ ｉａｎｇｆａｎｇ０１０７＠１２６ ｃｏｍ基金项目：广东省医学科研基金（Ａ２０１９５７２），广东省医院药学研究基金（２０１８ＬＲ０４）ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＰｌａｓｍａＣｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆＶｏｒｉｃｏｎａｚｏｌｅｂｙＨＰＬＣＬＩＵＸｉａｎｇ Ｆａｎｇ，ＴＥＮＧＷｅｎ Ｂｉｎｇ，ＣＡＩＪｉｅ，ＮＩＳｕｉ Ｑｉｎ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔＯｆＣｌｉｎｉｃａｌＰｈａｒｍａｃｙ，ＧｕａｎｇｚｈｏｕＦｉｒｓｔＰｅｏｐｌｅ′ｓＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１０１８０，Ｃｈｉｎａ）ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ ＥｓｔａｂｌｉｓｈａｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｖｏｒｉｃｏｎａｚｏｌｅｉｎｈｕｍａｎｂｌｏｏｄｂｙＨＰＬＣａｎｄａｐｐｌｙｉｔｔｏｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｉｚｅｄｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｐａｔｉｅｎｔｓＭＥＴＨＯＤＳ ＳａｍｐｌｅｗａｓｓｅｐａｒａｔｅｄｂｙＡｇｉｌｅｎｔｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓＺＯＲＢ ＡＸＳＢ Ｃ１８（１５０×４ ６ｍｍ，５μｍ）ｃｏｌｕｍｎ，ｃｏｌｕｍｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｗａｓ３０℃ Ｔｈｅｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅｗａｓａｓｆｏｌｌｏｗｓ：ｍｅｔｈａｎｏｌ∶ｗａｔｅｒｗａｓ５３∶４７，ｔｈｅｆｌｏｗｒａｔｅｗａｓ１ ０ｍＬ·ｍｉｎ－１，ｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｗａｓ２５６ｎｍ，ｉｎｊｅｃｔｉｏｎｖｏｌｕｍｅｗａｓ３０μＬ Ｃａｒｂａｍａｚｅｐｉｎｅｗａｓａｎｉｎｔｅｒｎａｌｓｔａｎｄａｒｄ ＲＥＳＵＬＴＳ Ｒａｎｇｅｏｆｌｉｎｅａｒｉｔｙｏｆｖｏｒｉｃｏｎａｚｏｌｅｗａｓ０ ３１ １９ ８４μｇ·ｍＬ－１ Ｍｉｎｉｍｕｍｄｅｔｅｃｔｉｏｎｌｉｍｉｔｗａｓ０ ３１μｇ·ｍＬ－１（Ｓ／Ｎ≥１０） ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ Ｔｈｅｍｅｔｈｏｄｉｓｒａｐｉｄ，ｓｉｍｐｌｅａｎｄｓｔａｂｌｅ，ａｎｄｉｓｓｕｉｔａｂｌｅｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｖｏｒｉｃｏｎａｚｏｌｅｂｌｏｏｄｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ Ｔｈｅｂｌｏｏｄｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｖｏｒｉｃｏｎ ａｚｏｌｅｖａｒｉｅｓｇｒｅａｔｌｙ，ａｎｄｔｈｅｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇｏｆｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｄｒｕｇｓｉｓｂｅｎｅｆｉｃｉａｌｔｏｅｎｓｕｒｅｔｈｅｓａｆｅａｎｄｅｆｆｅｃｔｉｖｅｕｓｅｏｆｄｒｕｇｓ ＫＥＹＷＯＲＤＳ：Ｖｏｒｉｃｏｎａｚｏｌｅ；ＨＰＬＣ；ＰｌａｓｍａＣｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ 伏立康唑是广谱三唑类抗真菌药，已成为侵袭性曲霉菌病的首选药物〔１〕。
高效液相色谱法在药物分析中的应用
高效液相色谱法在药物分析中的应用高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是一种常用的分析方法，可广泛应用于药物分析领域。
本文将探讨HPLC在药物分析中的应用，包括样品前处理、色谱条件优化、质量控制和药物定量等方面。
一、样品前处理在药物分析中，样品的复杂性和多样性常常是分析的一大挑战。
为了获得准确可靠的结果，样品前处理是不可或缺的步骤。
HPLC分析通常需要对样品进行提取、净化和浓缩等处理。
在提取过程中，选择适当的溶剂和提取方法可以有效地将目标分析物从样品基质中分离出来。
例如，液-液萃取法、固相萃取法和超滤法等常用的提取方法可以实现对药物的富集和纯化。
净化步骤旨在去除样品中的干扰物质，以提高分析的准确性和灵敏度。
净化方法包括固相萃取、液液分配和凝胶层析等，可以根据药物特性和分析要求进行选择。
浓缩处理可以提高目标物质的浓度，以便后续的色谱分析。
浓缩方法常用的有氮吹、旋转蒸发和固相萃取等。
二、色谱条件优化色谱条件的优化对于获得良好的分离度和分析效果至关重要。
以下是一些常用的参数和技巧，可用于优化HPLC色谱条件。
1. 流动相选择：根据目标化合物的特性选择合适的流动相，包括溶剂选择和溶液pH值调整。
2. 色谱柱选择：根据目标化合物的特性和分析要求选择适当的色谱柱。
不同的色谱柱具有不同的分离性能和选择性，包括反相色谱柱、离子交换柱和手性色谱柱等。
3. 流速调整：流速对分离和保留时间有重要影响，需要根据分离要求进行调整。
4. 柱温控制：柱温对分析结果的准确性和重复性有一定影响，需要根据药物的热稳定性和分析要求进行控制。
三、质量控制在药物分析中，质量控制是确保结果准确可靠的关键环节。
HPLC技术可以提供快速、准确和灵敏的质量控制手段，主要包括以下几个方面。
1. 标准曲线建立：通过建立标准曲线，可以进行目标化合物的定量分析。
标准曲线的建立需要准备一系列不同浓度的标准溶液，并根据峰面积或峰高与浓度的关系确定标准曲线方程。