动物单克隆抗体的研究和进展
单克隆抗体的研究进展
单克 隆抗体 的研究 进 展
邢海权 闫梦菲 赫晓燕 ， ，
（． １山西农 业 大学动 物 科技 学院 。太 谷 ０ ０ ０ ；２南 京农 业大 学动物 科 技学 院 ，南京 ３８ １ ．
摘
２０ ９ １ ０ ５）
要 ： 体 分子是 生物及 医学领 域 中用途 最为广 泛 的蛋 白质 分子 。 抗 上世 纪 ３ ～６ ０ ０年代 对抗体 的
至今 ，科 学 家们 已经 建 立众 多 鼠原性 ｍ ｂ 来 Ａｓ 诊 断 和治 疗多 种人 类疾 病 。然 而作 为在人 体 内的应
用， 鼠源性单抗 尚存 在一些问题 。鼠源性抗体作为
异 种 蛋 白应 用 于人 体 可 引起 免 疫反 应 ， 生人 抗 鼠 产 抗体 ， 很大 程度 上 限 制 了 ｍＡ ｓ 临床应 用 。此外 ， ｂ的 鼠源性 ｍＡ ｓ ｂ 不能 与人 类抗 体 ＦＲ ｃ ｎ结合 。 了克服 为 以上 这些 问题 ， 年 ， 着分 子 生物 学 的发 展 ， 们 今 随 人 已有可 能 通 过抗 体 工程 技 术制 备 人 一鼠契 合 抗体 、 人 源化 抗体 或全 人抗 体 。
术能 将 特定 分 子 的基 因型 和表 型相 统 一 的特 点 ， 即
噬菌 体 表面 表达 了特定 的蛋 白质 ， 噬 菌体 的 Ｄ Ａ 则 Ｎ
中必 然 含 有该 蛋 白质相 应 的结 构 基 因 ， 过 多 次 的 通
作 者 简 介 ： 海权 （９４ ） 山西 临 汾 人 ， 读 硕 邢 １８ ～ ， 在
发 展推 向 了高潮 ， 抗体 制备技 术进入 了一个全 新 的 时代 。 使
关 键词 ： 克 隆抗体 ； 源 ； 因工程 ； 究进 展 单 人 基 研
单克隆抗体的发展历程原理及应用
单克隆抗体的发展历程原理及应用1. 单克隆抗体的定义单克隆抗体（Monoclonal antibodies，简称mAb）是由单个重构的白细胞克隆产生的抗体。
它们具有高度特异性和亲和性，并且只与抗原的特定表位结合。
由于这种特性，单克隆抗体在医学、科研和工业领域中得到了广泛的应用。
2. 单克隆抗体的发展历程•1975年：Cesar Milstein 和 Georges Köhler 首次提出单克隆抗体的构想。
他们成功融合了癌细胞和B淋巴细胞，从而得到了第一个单克隆抗体。
•1984年：Cesar Milstein、Georges Köhler 和 Niels Kaj Jerne 因为他们在单克隆抗体研究领域做出的贡献，共同获得诺贝尔生理学或医学奖。
•1986年：通过使用转基因技术，研究人员成功地将人的免疫系统导入小鼠体内，从而生产出人类单克隆抗体。
•1990年代：人类单克隆抗体得到了进一步的发展，研究人员开发出了一种名为“人源化抗体”的技术，使得单克隆抗体可以更好地适应人体。
3. 单克隆抗体的制备原理•免疫原选择和制备：在制备单克隆抗体之前，需要选择合适的免疫原来激发免疫反应。
一般来说，免疫原应该具有高度特异性，易于制备，并且不会引起太强的免疫反应。
常用的免疫原包括蛋白质、多肽、多糖等。
•动物免疫和细胞融合：免疫原注射到动物体内，激发免疫反应，产生抗体。
然后，从动物体内获取淋巴细胞，与癌细胞进行融合，形成杂交瘤细胞。
•筛选和克隆：筛选出具有特异性和亲和性的杂交瘤细胞，以得到单克隆抗体。
常用的筛选方法包括ELISA、流式细胞术等。
•扩繁和生产：经过筛选和克隆后，选取合适的杂交瘤细胞，进行扩繁培养并生产单克隆抗体。
4. 单克隆抗体的应用单克隆抗体在医学、科研和工业领域中有广泛的应用，包括但不限于以下几个方面：•临床应用：单克隆抗体被广泛应用于临床诊断和治疗。
例如，用于癌症的诊断和治疗的单克隆抗体已经获得了FDA的批准。
单克隆抗体的研制与技术
单克隆抗体的研制与技术第一节单克隆抗体的研制一、单克隆抗体的概念抗体是机体在抗原刺激下产生的能与该抗原特异性结合的免疫球蛋白。
常规的抗体制备是通过动物免疫并采集抗血清的方法产生的，因而抗血清通常含有针对其他无关抗原的抗体和血清中其他蛋白质成分。
一样的抗原分子大多含有多个不同的抗原决定簇，因此常规抗体也是针对多个不同抗原决定簇抗体的混合物。
即使是针对同一抗原决定簇的常规血清抗体，仍是由不同B细胞克隆产生的异质的抗体组成。
因而，常规血清抗体又称多克隆抗体〔polyclonal antibody〕，简称多抗。
由于常规抗体的多克隆性质，加之不同批次的抗体制剂质量差异专门大，使它在免疫化学试验等使用中带来许多苦恼。
因此，制备针对预定抗原的特异性均质的且能保证无限量供应的抗体是免疫化学家长期梦寐以求的目标。
随着杂交瘤技术的产生，这一目标得以实现。
1975年，Kohler和Milstein建立了淋巴细胞杂交瘤技术，他们把用预定抗原免疫的小鼠脾细胞与能在体外培养中无限制生长的骨髓瘤细胞融合，形成B细胞杂交瘤。
这种杂交瘤细胞具有双亲细胞的特点，既像骨髓瘤细胞一样在体外培养中能无限地快速增殖且永生不死，又能像脾淋巴细胞那样合成和分泌特异性抗体。
通过克隆化可得到来自单个杂交瘤细胞的单克隆系，即杂交瘤细胞系，它所产生的抗体是针对同一抗原决定簇的高度同质的抗体，即所谓单克隆抗体〔monoclonal antibody〕，简称单抗。
与多抗相比，单抗纯度高，专一性强、重复性好、且能连续地无限量供应。
单抗技术的问世，不仅带来了免疫学领域里的一次革命，而且它在生物医学科学的各个领域获得极广泛的应用，促进了众多学科的进展。
Kohler和Milstein两人由此杰出奉献而荣获1984年度诺贝尔生理学和医学奖。
二、杂交瘤技术（一）杂交瘤技术的产生淋巴细胞杂交瘤技术的产生是几十年来免疫学在理论和技术两方面进展的必定结果，抗体生成的克隆选择学说、抗体基因的研究、抗体结构与生物合成以及其多样性产生气制的揭示等，为杂交瘤技术提供了必要理论基础，同时，骨髓瘤细胞的体外培养、细胞融合与杂交细胞的选择等提供了技术贮备。
单克隆抗体的应用与研究
单克隆抗体的应用与研究单克隆抗体是一种特殊的抗体，由单个克隆的浆细胞所分泌。
相比多克隆抗体，单克隆抗体具有更好的特异性和稳定性，因此在医学、生物学、分子生物学等领域有广泛的应用。
本文将介绍单克隆抗体的研究进展和应用。
一、单克隆抗体的制备单克隆抗体的制备可以分为三个步骤：免疫原制备、免疫动物及其免疫和细胞融合和筛选。
首先需要制备免疫原，这个免疫原通常是目标抗原或者抗体对其特异性的区域片段。
如果是目标抗原，通常要首先纯化得到。
其次，需要为制备单克隆抗体的动物进行免疫。
一般是选择小鼠等实验动物，将免疫原注射到动物身体内，让它们产生特异性抗体。
之后，需要从这些动物体内获取免疫细胞，即B淋巴细胞。
最后，需要使用细胞融合技术通过融合免疫B细胞和癌细胞，来获取产生单克隆抗体的杂交瘤细胞。
这些细胞能够长期分泌具有特异性的抗体，并形成混合瘤。
通常，这些细胞的混合物需要进行严格的筛选和鉴定，以确保其产生的抗体都是特异性单克隆抗体。
二、单克隆抗体的应用1. 诊断和治疗单克隆抗体在临床上的应用越来越广泛。
例如，它们可以用于诊断和治疗晚期癌症。
新兴的单克隆抗体医学治疗（Monoclonal Antibody Therapy，MAT）被评价为一种有希望的抗癌治疗方法，特别是在血液系统的癌症治疗方面。
由于单克隆抗体的特异性，可以通过将它们与药物或放射性同位素结合，使它们更好地治疗癌症。
2. 分子生物学在分子生物学领域，单克隆抗体经常用来在Western blotting和其他分析技术中检验目标蛋白质的存在。
单克隆抗体还可用于免疫共沉淀、免疫沉淀、染色和免疫组化等实验中。
3. 生物分子检测单克隆抗体也广泛应用于药品研究和开发，例如用于高度灵敏的免疫印迹，以检测蛋白质、肽和DNA序列等生物分子。
此外，单克隆抗体还用于流式细胞术、细胞分选、病毒、菌和细胞诊断。
三、单克隆抗体的未来单克隆抗体作为一种新型的生物技术，其应用领域正在不断拓宽。
单克隆抗体技术历史与发展简述
单克隆抗体技术历史与发展简述陈 光(首都师范大学生物系北京100037)1 单克隆抗体技术的研究背景单克隆抗体(monocl onal an tibody,sho rt fo r M c A b)技术(简称单抗),又被称为肿瘤"生物导弹",是能直接导向肿瘤的药物。
1975年英国科学家Koh ler和M ilstein将产生抗体的淋巴细胞同肿瘤细胞融合,成功的建立了单克隆抗体技术,因此在1984年获得诺贝尔医学和生理学奖。
单克隆抗体,顾名思义,是与“多克隆抗体”相对而言的,那么认识、理解什么是多克隆抗体对进一步明确单克隆抗体的概念就显得尤为重要。
以抗淋巴细胞多克隆抗体(po lycl onal an tilymphocyte an tibody)为例,来初步阐述多克隆抗体的定义。
这是一类特异性免疫抑制剂,直接作用于人体免疫系统中的淋巴细胞,破坏和抑制淋巴细胞及其功能,特别是T淋巴细胞的功能,可用于同种异体器官移植排斥反应的防治以及其他免疫紊乱性的自身免疫病,如重型再障等的治疗。
抗淋巴细胞多克隆抗体是通过注射人类淋巴细胞、胸腺细胞或B 淋巴细胞至马、兔、山羊或猪等动物体内所产生的抗淋巴细胞抗体。
由于淋巴细胞膜表面抗原成分复杂,免疫血清中的抗体是针对淋巴细胞多种抗原成分的抗体,即多克隆抗体。
根据所用免疫原的不同,有不同的名称,用淋巴细胞作抗原免疫称抗淋巴细胞血清(an tilympho2 cyte serum,AL S);用胸腺细胞作抗原免疫则称抗胸腺细胞血清(an titymphocyte serum,A T S)。
如果将AL S 和A T S进行吸收并提纯其免疫球蛋白则分别称抗淋巴细胞球蛋白(an ti lymphocyte gl obulin,AL G)和抗胸腺细胞球蛋白(an tithymocyte gl obulin,A T G)。
与此对应的,单克隆抗体的制备原理就是,动物受到外界抗原刺激后可诱发免疫反应,产生相应抗体。
单克隆抗体的制备方法与应用
单克隆抗体的制备方法与应用一、前言单克隆抗体是指一种具有高度特异性和亲和力的抗体，其来源于单个B细胞克隆。
相比多克隆抗体，单克隆抗体更加纯净、稳定和可靠，因此在生物医学研究、诊断和治疗等方面有着广泛的应用。
本文将介绍单克隆抗体的制备方法与应用。
二、单克隆抗体的制备方法1. 免疫动物首先需要选取适当的动物进行免疫，通常选择小鼠或大鼠。
在进行免疫前需要对动物进行预处理，例如注射低剂量的抗生素来消除潜在的感染。
2. 免疫原选择选择合适的免疫原是制备单克隆抗体的关键步骤。
常见的选择包括蛋白质、多肽、细胞表面分子等。
在选择时需要考虑到其特异性、稳定性和可重复性等因素。
3. 免疫程序在进行免疫前需要对动物进行预处理，例如注射低剂量的抗生素来消除潜在的感染。
接着，将免疫原注射到动物体内，通常需要多次免疫以增强免疫效果。
在免疫过程中需要对动物进行监测，例如采集血样检测抗体水平。
4. 融合细胞的制备在获得足够的抗体后，需要从动物体内采集B细胞并与骨髓瘤细胞进行融合。
常用的骨髓瘤细胞包括SP2/0和NS0等。
5. 单克隆抗体筛选通过限稀法或单一细胞分离法等方法将融合细胞分离为单个克隆，并通过ELISA、免疫印迹等方法筛选出特异性较高的单克隆抗体。
接着对筛选出的单克隆抗体进行扩增和纯化等处理。
三、单克隆抗体的应用1. 生物医学研究单克隆抗体在生物医学研究中有着广泛的应用，例如作为特定蛋白质或分子的检测工具、用于药物开发和治疗等。
2. 诊断单克隆抗体在诊断方面也有着重要的应用，例如用于肿瘤标志物的检测、病原体的检测等。
3. 治疗单克隆抗体在治疗方面也有着广泛的应用，例如用于治疗癌症、自身免疫性疾病等。
其中一些单克隆抗体已经被批准为药物并用于临床治疗。
四、总结单克隆抗体是一种具有高度特异性和亲和力的抗体，在生物医学领域中有着广泛的应用。
其制备方法包括适当动物选择、合适免疫原选择、多次免疫程序、融合细胞制备和单克隆抗体筛选等步骤。
单克隆抗体技术路线
单克隆抗体技术路线引言：单克隆抗体技术是一种重要的生物医学研究方法，也是生物制药领域的重要工具。
本文将介绍单克隆抗体技术的基本原理、制备步骤以及应用领域，以帮助读者更好地了解和应用这一技术。
一、单克隆抗体技术的基本原理单克隆抗体技术是一种通过克隆单个抗体细胞，制备具有相同抗原结合特异性的抗体的方法。
其主要原理是将抗原注射到实验动物体内，激发机体产生免疫应答，然后采集动物体内的B细胞，融合B 细胞与骨髓瘤细胞，形成杂交瘤细胞，最后通过筛选获得特异性抗原结合能力的单克隆抗体。
二、单克隆抗体制备步骤1. 免疫原选择：选择合适的免疫原，通常为纯化的蛋白质或多肽。
2. 免疫程序：将免疫原注射到实验动物体内，激发免疫应答。
3. B细胞采集：从免疫动物体内采集脾细胞或淋巴结细胞，富集含有目标抗体的B细胞。
4. 杂交瘤细胞制备：将采集到的B细胞与骨髓瘤细胞融合，形成杂交瘤细胞。
5. 杂交瘤细胞筛选：通过限制性稀释法或酶标记法等方法，筛选出分泌特异性抗原结合能力的杂交瘤细胞。
6. 单克隆抗体生产：将筛选出的杂交瘤细胞进行扩增培养，收集培养上清液，纯化得到单克隆抗体。
三、单克隆抗体技术的应用领域1. 生物学研究：单克隆抗体可用于特定分子或细胞的定位和鉴定，帮助研究者了解生物体内的生物过程和机制。
2. 临床诊断：单克隆抗体可用于检测和诊断疾病，如癌症、感染性疾病和自身免疫性疾病等。
3. 治疗应用：单克隆抗体可用于治疗某些疾病，如肿瘤、免疫性疾病和传染病等，具有较高的治疗效果和较低的副作用。
4. 生物制药：单克隆抗体作为生物制药领域的重要工具，可用于药物研发、质量控制和生产等方面。
结论：单克隆抗体技术是一种重要的生物医学研究方法和生物制药工具，其制备步骤简单明了，应用领域广泛。
随着技术的不断发展和完善，单克隆抗体技术在生物医学领域将发挥越来越重要的作用，为疾病的诊断和治疗提供更多的选择和可能。
相信随着对单克隆抗体技术的深入研究和应用，必将为人类健康事业作出更大贡献。
单克隆抗体的主要步骤
单克隆抗体的主要步骤
单克隆抗体的制备主要分为以下几个步骤：
首先，选定合适的抗原并进行免疫，采集含有抗原特异性淋巴细胞的动物脾脏。
运用免疫规划原则，通过周期性注射抗原刺激动物的免疫系统生成大量特异性B
淋巴细胞。
其次，通过粘膜炎症急性期反应融合技术，将抗原特异性B淋巴细胞和肿瘤细胞进行融合，得到的细胞即为混源杂交瘤细胞。
然后，对获得的杂交瘤细胞进行筛选，挑选出能稳定分泌目标抗体的杂交瘤克隆。
利用ELISA、FACS等方法，能对杂交瘤筛选进行优化。
接着，研究人员会对所选克隆进行鉴定，了解其分泌的抗体与抗原的亲和力。
结合测序和质粒制备，进一步明确杂交瘤克隆的免疫学特征。
随后，利用无菌操作技术进行体外扩增和冻存，保证抗体质量的稳定。
最后，通过体内成瘤或者体外不系细胞培养的方式进行大量抗体生产，然后提取，纯化单克隆抗体。
密集摇瓶和生物反应器培养技术是临床试验阶段常用的抗体生产策略。
单克隆抗体的研究和生产是一个复杂且需要精细操作的过程，旨在通过这些步骤高效、可靠地生产出具有特异性的单克隆抗体。
对于抗体药物研发、生物技术、诊断试剂等领域，具有不可替代的重要价值。
单克隆抗体(Monoclonal antivodies)技术在水生动物疾病上的研究进展
汪 开 毓 黄 艺 丹 黄 ． ， 卜丽 陈 德 芳
（ 四川农 业 大学 鱼病 研 究 中心 ）
中国 四川雅安 邮编 ：６ ５ １ ２ ０４
【 提要 】 单克隆抗 体的发现和使用 ， 大大提 高免疫学检测 的特异性和 临床治疗 的精 确性 ， 生物 、 对 化学 、 医学、 免疫学ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ 多
疗 的一个有力手段 。
任 四川农业 大学 动物科技学 院院长 、 教 授、 博士 生导师 。 担任 中国动物病 理 并 学会 常务理 事 ， 中国鱼 病研究 会委 员 ， 中 国农业部新兽 药评审委员会 委员 ， 四 川 省水产学会 副理事长 ， 四川省鱼病研 究 会主任 ， 四川 水产 》 《 杂志副 主编 。 主
体 的制 备与 鉴定 等一 系列实 验组 成 的实 验 系统 。 隆化 杂 克 交瘤 细胞获 得纯 一 的单 克 隆后 ， 产生 结构 与各 种特 性完全 相 同的高纯度抗 体 ， 称为单 克隆抗体 （ ｎ ｅｏ ａ ａｔ ｏｙ ｍｏ ｏｌｎ ｌ ｎｉ ｄ ， ｂ Ｍｅ ） 简称单抗 。 Ａｂ ， 这种抗 体具有 高度特异性 ， 均质性及来 源稳定 可大量生 产的优点 ， 目前 ， 单克 隆抗体 已被广泛 的应 用 于免 疫学 、 物化学 、 生 分子生物学 、 药物学 、细胞生物学 、
维普资讯
４
现 代 渔 业 信 息
运用 主要有 以下几个方 面 ： ２１ 病 原检 测 ．
第２ ３卷 第 ９ 期
体， 包括 鼠源抗体 、 合抗体 和人源化 抗体约 １０种 ， 嵌 ０ 大致 占所有 正在研制 的生物技术药 品数 目的 ３ ％。 １ 另外还有 ６０ ０
生物制品简介和研究进展-单抗
生物制品简介和研究进展-单抗单克隆抗体（Monoclonal Antibodies，简称 mAb）是生物制品的重要组成部分，也是当前生物制品研究和临床应用中的热点之一、单克隆抗体是指由同一原代细胞株分泌的、能特异性结合到一种特定抗原上的抗体分子群体。
单克隆抗体的研究进展可以从以下几个方面进行介绍：1.科研发展：自20世纪70年代以来，单克隆抗体的研究取得了长足的进展。
最初的研究方法是将抗原激发动物产生特异性抗体，随后通过细胞融合技术将这些抗体与肿瘤细胞融合，得到不含杂质的单一种类抗体。
如今，单克隆抗体的制备技术已经非常成熟，包括嵌合抗体、全人源化抗体等，这些技术为生物制品研发提供了更多的选择。
2. 临床应用：单克隆抗体在临床上的应用范围不断扩大。
它们可以用于诊断、治疗和预防多种疾病，如癌症、自身免疫性疾病等。
例如，赫赛汀（Herceptin）是一种用于治疗乳腺癌的单克隆抗体药物，能选择性地靶向HER2受体，抑制癌细胞生长。
此外，通过将药物与单克隆抗体结合，还可以提高药物治疗效果、减少副作用。
4.生产技术：随着单克隆抗体在临床应用中的广泛推广，其生产技术也得到了极大的发展。
传统的单克隆抗体制备需要大量的实验操作和时间，限制了大规模生产的效率和成本。
而现在，随着发酵工程和细胞培养技术的发展，大规模的单克隆抗体生产已经成为可能。
总之，单克隆抗体作为生物制品的重要组成部分，在科研、临床和生产技术等方面都取得了显著的进展。
未来，随着生物技术和生产技术的不断发展，相信单克隆抗体在医药领域的应用还将迎来更大的突破和创新。
单克隆抗体制备技术研究进展
单克隆抗体制备技术研究进展朱学泰1;谢 溱2;马瑞君1(1.西北师范大学生命科学学院,甘肃兰州 730070;2.兰州生物制品研究所,甘肃兰州 730046)摘 要:单克隆抗体技术是现代生命科学研究的重要工具,在基因和蛋白质的结构和功能研究方面有着不可或缺的作用。
近年来,随着分子生物学技术的发展,出现了嵌合单克隆抗体和由转基因小鼠、噬菌体展示技术、核糖体展示技术及共价展示技术所产生的单克隆抗体。
这些技术将有效解决单克隆抗体的鼠源性等问题。
本文主要对以上几种制备单抗的新技术作一综述。
关键词:单克隆抗体;人源抗体;转基因小鼠;展示技术中图分类号:R181.36 1975年,K ohler和Milstein创立了杂交瘤技术制备单克隆抗体,此后单克隆抗体迅速广泛地应用于生物学和医学的各个领域。
单克隆抗体可用于分析抗原的细微结构及检验抗原抗体未知的结构关系;生产出针对复杂生物混合物中的特定分子的抗体,可用于分离、分析及纯化该特定分子抗原;其试剂可用于临床诊断和治疗,或用于以单抗为弹头的“生物导弹”药物等。
但单克隆抗体技术自问世以来,在临床治疗方面进展缓慢,主要原因是目前单克隆抗体大多是鼠源性的,而鼠源单抗应用于人体治疗时存在诸多问题:鼠源单抗在人体中常不能有效激活补体和Fc受体相关的效应系统;被人体免疫系统所识别,产生人抗鼠抗体(HAMA)反应;且在人体循环系统中很快被清除。
因此,在保持对特异抗原表位的高亲和力的基础上人源化和全人化的改造,减少异源抗体的免疫原性成为单抗研究的重点。
此外,传统杂交瘤技术还存在制备周期较长,成本较高,杂交瘤细胞不稳定抗性会丢失等缺陷。
近年来,随着分子生物学技术的发展,出现了嵌合单克隆抗体和由转基因小鼠、噬菌体展示技术、核糖体展示技术及共价展示技术所制备的单克隆抗体。
这些技术可有效解决传统杂交瘤技术所存在的问题,为单克隆抗体的应用提供更广阔的空间。
1 嵌合单克隆抗体嵌合单克隆抗体产生于1980年代中期,是应用DNA重组技术将小鼠抗体基因上的可变区与人抗体基因的恒定区重组,再将重组后的基因导入骨髓瘤细胞中表达。
单克隆抗体的应用及原理
单克隆抗体的应用及原理单克隆抗体是一种由相同母细胞分裂而来的具有相同特异性、亲和力和效能的抗体。
它是通过体外诱导和细胞融合技术获得的，可以专门针对特定抗原进行应用和治疗。
单克隆抗体在医学、科研和生物技术等领域具有广泛的应用前景。
单克隆抗体的应用主要分为治疗应用、诊断应用和研究应用三个方面。
治疗应用方面，单克隆抗体被用于免疫治疗和抗肿瘤药物的研发。
例如，单克隆抗体可以与肿瘤细胞表面的抗原结合，通过直接杀伤肿瘤细胞或激活免疫细胞来抑制肿瘤的生长和扩散。
目前已经有多种单克隆抗体药物被批准用于临床治疗，如赫赛汀、特鲁替珠单抗等。
此外，单克隆抗体还可以用于传统药物的改进，增强药效、减少毒副作用。
单克隆抗体的应用在抗癌药物研发中具有巨大的潜力。
在诊断应用方面，单克隆抗体被用于制备特异性的抗原检测试剂盒。
通过与特定抗原的结合，单克隆抗体可以在临床实验室中用于疾病的早期检测、诊断和预后。
例如，单克隆抗体可以用于肿瘤标志物的检测，如CA125、PSA等。
此外，单克隆抗体还可以用于免疫组化、免疫印迹、流式细胞术等实验方法中，对细胞表面分子、蛋白质的检测和鉴定起关键作用。
在研究应用方面，单克隆抗体被用于分子生物学、细胞生物学和生物工程等领域的研究。
例如，单克隆抗体可以用于从复杂的混合物中纯化特定的蛋白质或细胞。
此外，单克隆抗体还可以用于研究蛋白质的结构与功能、信号转导途径等。
由于单克隆抗体拥有高度特异性和亲和力，它在研究领域具有重要的价值。
单克隆抗体的制备原理主要包括免疫克隆、细胞融合和筛选等步骤。
首先，制备单克隆抗体需要从动物体内或体外免疫获得特定的抗原刺激。
接下来，从免疫动物（如小鼠）体内采集抗体产生的淋巴细胞。
这些淋巴细胞与肿瘤细胞进行融合，形成杂交瘤细胞。
这些细胞具有强大的免疫力，并能长时间产生单克隆抗体。
然后，必须对杂交瘤细胞进行筛选和鉴定。
首先，通过双荧光筛选法、酶联免疫吸附实验等技术，选择具有特异性抗原结合能力的杂交瘤细胞。
兽药单克隆抗体的制备及其应用研究进展
文献 标 识 码 ： Ａ
文章 编 号 ：６ ３ １ ８ （ ０ ０ ０ — ０ ９ ０ １７ — ０５ ２ １ ）７ ０ ３— ４
保 留药物分子结 构特征 ， 带有活性基 团的半抗原 ， 并 通 过 共 价 键 使 半 抗 原 与 大 分 子 质 量 蛋 白 质 载 体 偶 联 ， 备 人 工 免 疫 原 ， 动 物 免 疫 程 序 制 备 针 对 半 抗 制 经 原 的 特 异 性 抗 体 ，而 目前 兽 药 单 克 隆 抗 体 的 制 备 主 要 以 Ｂ 淋 巴 细胞 杂 交 瘤 单 克 隆 抗 体 技 术 为 主 ， 此 一 在 简述其 技术要点 。 １ 半 抗 原 的设 计 与合 成 ． １ 半 抗 原 设 计 的 目的 主
３ ９
医师， 主要从 事兽 医临床和 实验 室化验 工作 。
成 就 未 来
家禽科 学 ２ １． ００ ７
完 全 抗 原 时 常 用 的 载 体 有 牛 血 清 白 蛋 白 （ｏｉｅ ｂｖ ｎ ｓＩ Ｉ ｌｕ ｉ， Ｓ ） 鸡 卵 清 蛋 白 （ｖｌ ｍ ｎ ｅＭ１ ｂ ｍｎ Ｂ Ａ 、 ３ ａ ｏａ ｕ ｉ ， ｂ Ｏ Ａ） 钥 孔 血 蓝 蛋 白 （ｅｈｌ ｌ ｐｔｈｍｏｙｎｎ Ｖ 、 ｋｙ ｏ ｉ ｅ ｅ ｃａｉ ， ｅ ｍ Ｋ Ｈ） 人 血 清 白 蛋 白 Ｌ 、 ｈ ｍ ｎ ｓｒｍ ｌ ｍ ｎ ｕ ａ ｅｕ ａ ｕ ｉ ， ｂ
相互 作 用 ， Ａ Ｍｃ ｂ可用 于兽 药 残 留分 析 及 残 留 的检
测翻 Ｍ Ａ ； ｃ ｂ可 作 为研 究 受 体 结 构 功 能 及 药 物 作 用 机 制 、 物 代 谓 酶 细 胞 色 素 Ｐ ４ ０的 功 能 、 物 导 向 药 一５ 药
治 疗 以及 药 物 的 免 疫 学 分 析 方 法 的 有 效 工 具 ，扩 展
单克隆抗体的制备及应用研究进展
单克隆抗体的制备及应用研究进展一、单克隆抗体在生物医学研究中的应用1.诊断疾病：单克隆抗体具有高度特异性，可以用于检测疾病相关抗原，如肿瘤标志物、病原体等，从而实现疾病的早期诊断。
例如，在肿瘤诊断中，单克隆抗体可以用于检测肿瘤相关抗原，如CEA、AFP等。
2.治疗疾病：单克隆抗体具有靶向性，可以用于治疗肿瘤、自身免疫性疾病等。
通过将单克隆抗体与药物、毒素等结合，可以实现对病变部位的精准打击，减少副作用。
例如，利妥昔单抗（Rituximab）用于治疗非霍奇金淋巴瘤，赫赛汀（Herceptin）用于治疗乳腺癌等。
3.免疫调节：单克隆抗体可以用于调节免疫反应，如抑制过度免疫反应导致的组织损伤，或增强免疫反应以对抗病原体。
例如，抗炎性细胞因子单克隆抗体可用于治疗风湿性关节炎、肾小球肾炎等疾病。
4.生物制品研发：单克隆抗体可作为生物制品研发的基础，用于制备疫苗、生物药剂等。
例如，基于单克隆抗体的疫苗研究，可以用于预防和治疗病毒、细菌等感染性疾病。
5.药物筛选：单克隆抗体可用于药物筛选，评估药物的靶点特异性、生物活性等。
通过筛选具有特定靶点的单克隆抗体，可以优化药物研发过程。
二、未来发展趋势1.个性化治疗：随着个体化医学的发展，单克隆抗体有望实现个体化治疗，针对患者特定突变或受体设计个性化抗体药物。
2.抗体偶联药物：抗体偶联药物（Antibody-Drug Conjugates，ADC）是将单克隆抗体与细胞毒性药物通过共价连接而成，具有高靶向性和强效性。
随着抗体偶联技术的发展，未来ADC药物在肿瘤治疗等领域具有广泛应用前景。
3.免疫治疗：单克隆抗体在免疫治疗中具有重要应用价值，如免疫检查点抑制剂、CAR-T细胞疗法等。
随着免疫治疗策略的不断发展，单克隆抗体在临床应用中将发挥越来越重要的作用。
4.生物仿生材料：单克隆抗体可用于制备生物仿生材料，如组织工程支架、生物传感器等。
这些材料在再生医学、药物递送等领域具有广泛应用潜力。
抗体在动物医学中的研究进展
１ １免疫血清 学研究 阶段 ．
在畜牧生产 中，人们有 目的 的利用特异性抗原对畜禽进行 了强制性免疫，动物体 内产生的特异性多克隆抗体 ，能有效抵 抗外界野毒感 染。同时，人们对 动物进行 多次免疫 ，提取 高免 血清，以便对某些 发病动物进行针对性治疗 。通过这些 手段 ， 在 很大程 度上减 少疾病 为畜牧 生产带 来的损 失 。但在 此过程 中， 由于多克隆抗体具有不均一性，特异性差，且动物间存在 种间差异和个体差 异，抗体注入 不同动物体内会导 致某 些动 物 产生严重的过敏反 应。这 些都限制了多克隆抗体在动物疾病诊 断和治疗 中的应用 。
法是无菌采取 支气管或鼻腔分泌物和肺部病变组织， 接种于鲜
血营养琼脂，用不溶血 大肠杆菌 或葡 萄球菌作为保姆 与株 与病
料作交叉划线，３ ￣ ７ Ｃ培养２ ４， ４＇ 时，可见在保姆株周围出现有溶 血的不菌落，菌落呈圆形 、光滑 、边缘整齐 、溶血，镜检为革 兰氏阳性 且两极着 色的杆菌， 在后将菌 落接种于 ＰＰ Ｌ０ 培养
１ 多克隆抗体
抗原免疫动物，产生 的抗体是多种抗体的混合物，所 以早
●
（ 上接 ｌ ２页） ｌ
菌作琼脂扩散 和间接血凝试验作最后的定型， 血清学 检查 能有
肺表 面有 纤维性渗 出液 ，间质增 宽，气管水肿，下颌淋 巴结肿
大充血。
单克隆抗体药物的研发及市场进展
售 的平 均增 长率 为 ２ ％ ，年 销 售 额将 超 过 ３０亿美 ０ ０
元 ， 场潜力 巨大 。 市 １ ． ２缺点
以确定 抗 同一种 靶分 子 、 至 同一 表位 的不 同抗体 药 甚 物 在 体 内 的分 布 、 谢 、 效 和 毒 副 反 应 表 现是 否 一 代 药 致， 这就 为抗 体 ” 仿制药 物 ” 的开 发 带 来很 大 的 临床 风
险， 需要 引起 高度重 视 。 （） ２ 研发 费用 、 产成本 过 高 生
（） １副作用 问题 严 重
单克 隆抗 体 是 大 分子 糖 蛋 白 ， 构 复 杂 ， 体靶 结 抗 抗原 的不 确 定性 和 抗 体 自身 的 抗 原 性 都 是单 克 隆抗
体药物 的主要 问题 。 于人 们 对 很 多存 在于靶 细胞和 由 正 常 组织上 的靶 抗 原 的确 切 分 布 和 功 能并 不 完 全 了 解 ， 而 出现 了临 床 应 用 的很 多 不 确 定 性 ， 从 由此 产生 了安全 问题 。 这一 点 在免 疫 疾病 的抗体 治疗 中表现得
部 迁移 。 严重 副作 用 的 出现可 能是 因为免 疫监 视功 能 的丧失 导 致潜伏 病 毒 活化 而致 病 。虽然 ２ ０ ０ ６年 ６月
斥反应 的逆转 。目前 上 市 的抗 体 药 物 的适应症 主要 集
中在肿瘤 和免疫 性 疾 病方 面 ， 括抗 肿 瘤 （ ％）免 疫 包 ４ ７ 、
（Ｄ５） 在 临床研 究 时 出现 了严 重 的副 作用 。 以看 Ｃ １４也 可
出抗体 药 物所存 在 的安 全风 险 ， 对 同 一靶 分子不 同 针 表 位 有可 能 介导 完 全相 反 的 生 物学 效 应（ 活或 失活 激
单克隆抗体制备原理
单克隆抗体制备原理
单克隆抗体是一种针对特定抗原的抗体，具有高度的特异性和亲和力。
其制备
原理主要包括抗原免疫、融合细胞制备和筛选、单克隆抗体生产等步骤。
首先，抗原免疫是单克隆抗体制备的第一步。
研究人员首先需要选择目标抗原，可以是蛋白质、多肽、细胞表面分子等。
然后将抗原注射到小鼠或兔子等动物体内，激发其产生特异性抗体。
在免疫过程中，动物的免疫系统会识别抗原并产生多克隆抗体，其中包括针对不同位点的抗体。
接着，融合细胞制备和筛选是单克隆抗体制备的关键步骤。
研究人员需要从免
疫动物体内获取B细胞，然后与骨髓瘤细胞进行融合，形成杂交瘤细胞。
这些杂
交瘤细胞具有B细胞的抗体产生能力和骨髓瘤细胞的无限增殖能力。
接着，通过
限稀稀释法或单细胞分选法筛选出产生特定单克隆抗体的杂交瘤细胞。
最后，单克隆抗体生产是单克隆抗体制备的最后一步。
研究人员需要将筛选出
的单克隆抗体杂交瘤细胞进行大规模培养，获取足够的单克隆抗体。
随后，通过细胞培养上清液的收集、纯化、结构表征等步骤，最终得到纯化的单克隆抗体。
总之，单克隆抗体制备原理包括抗原免疫、融合细胞制备和筛选、单克隆抗体
生产等步骤。
通过这些步骤，研究人员可以获取到具有高特异性和亲和力的单克隆抗体，为生物医学研究和临床诊断治疗提供重要的工具和药物。
单克隆抗休研究进展
繁殖 的细胞所产生的抗体 ， 具有特异性强 ， 纯度高 ， 以大规 可 模 工厂化生产等优点 ， 从而使免疫分 析技 术准确性高 ， 重复
性 好 ，பைடு நூலகம்法 简便 。 方
学者 Ｂ ｈｉ ｅ ｒ ｇ和 日本学者北里发现白喉毒素后开始的。早在 ｎ １９ ５年 Ｈ ｒ ｏｒ等就尝试应用抗体 治疗肿瘤 。本世纪 ３ ８ ｅｉ ｕｔ ｃ Ｏ～ ６ ０年代对抗体的理化性质 以及对免疫球蛋 白分子结构 与功
摘 要 ： 体 分子 是 生物 及 医学领 域 中用 途 最为 广 泛 的 蛋 白质 分 子 。 世 纪 ３ ～ Ｏ年代 对抗 体 的理 化 性 质 以及 对 免 疫 抗 本 Ｏ６
球蛋 白分子结构与功能的研 究取得 了突破性进展 。 ９ ６ １７ 年德 国学者 Ｋ ｈｅ 和英 国学者 Ｍｌ ｅ ｏｌ ｒ ｉｔｉ ｓ ｎ创建杂交瘤技术， 首次 成功地制备 了小鼠单克隆抗体（ ｝即第二代抗体。０年代早期开始 了基 因工程抗体 即第三代抗体的研究。 因工程 Ｍｃ 】 Ａ１ ８ 基
术。
国学者 Ｍｌ ｅ 创建杂交瘤技术 ，首次成功地制备 了小 鼠单 ｉｔ ｎ ｓｉ 克隆抗体（ｃ ｂ￣ 第二代抗体 。０年代早期开始了基因工程 Ｍ Ａ ）１ ］ ８ 抗体 即第三代抗体 的研究 ，至 ９ ０年代初产生 的抗体库技术
１３ 杂交瘤技 术的拓展 ．
随着杂交瘤技术在生命学科各个
领域中应用 的不断深入 ， 杂交瘤技术生产单 克隆抗体的方法 得 到了很多改进 ， 人们不断发现单克隆抗体的新用途 。 １ ． 其它 动物的杂交瘤技术 由于人或动物不 同类 间抗 ．１ ３ 体有排斥反应 ，０年代以来 ， ８ 人们在 鼠杂交瘤技术 的基础上 ， 发展 了人源杂交瘤技 术 ， 鼠与其他动物包括兔 、 、 牛 猪和绵羊 的种 间杂交瘤。 其它动物源的杂交瘤分泌 的单克隆抗体特别 适合 于兽医和食品检验领域中使用 。 ８ 如 ０年代 中期用 Ｅ Ｂ病 毒转化体外 培养的人 Ｂ淋巴细胞建立 分泌单克 隆抗 体的细 胞 系获得成功 ， 为人源单克隆抗体 的生产开辟了新的途径。 １ ． 抗体酶 技术 １８ ．２ ３ ９ ６年 ，ｃｕｔ Ｓｈ ｌ ｚ等和 Ｔａ ｏｔ ｏ 发 ｒｍ ｎａ 等 ｎ
高中生物单克隆抗体实验总结
⾼中⽣物单克隆抗体实验总结 考试是检测学⽣学习效果的重要⼿段和⽅法，考前需要做好各⽅⾯的知识储备。
下⾯是店铺为⼤家整理的⾼中⽣物单克隆抗体实验总结，希望对⼤家有所帮助! ⾼中⽣物单克隆抗体实验总结 (⼀)动物的选择 ⽬前应⽤最⼴的是⼩⽩⿏和⼤⽩⿏，尤以⼩⽩⿏为好。
就品系⽽⾔以Balb/c⼩⽩⿏应⽤最⼴，由于所有的⼩⽩⿏⾻髓瘤系均从Balb/c⼩⽩⿏系诱导出来。
Balb/c系⼩⽩⿏必须⽤纯系的，雌雄均可，以8~12周龄为宜。
⼤⽩⿏也可，能产⽣较多量的单抗体。
现在已经在⼩⿏杂交瘤的基础上，发展了⼩⿏-⼤⿏，⼩⿏-⼈以及⼈-⼈杂交瘤技术。
(⼆)免疫 ⼀般⽽⾔，抗原的纯度不很重要，特别是免疫原性较强的抗原。
免疫程序、剂量和⽅法是关系到是否能得到所需要的单抗体的关键之⼀。
正常⼩⿏脾脏含有能产⽣各种不同抗体的B淋巴细胞，⼀只纯种⼩⽩⿏估计能产⽣1.0×107~5.0×107种不同的抗体。
因此⼀只正常的⼩⽩⿏的脾细胞与⼩⿏⾻髓瘤融合，只能有千万分之⼀的机会获得某⼀种特定抗体。
所以为了进步得到某种杂交瘤的机会，必须加强免疫，使产⽣特异性抗体的B淋巴细胞⼤量增加。
B淋巴细胞的不同发育阶段对获得阳性杂交瘤也有很⼤影响。
有⼈以为处在转化时期的B淋巴细胞可能更易于融合，⽽免疫以后7~8天，固然是抗体产⽣的⾼峰时期，但形成有活⼒的杂交瘤细胞的可能反⽽减少。
故⼀般以为加强免疫后的第三天应杀⿏取脾做细胞融合。
1.可溶性抗原(蛋⽩质) 以1mg/ml～5mg/ml的溶液加等量的弗⽒完全佐剂乳化，分多点⼩⿏⽪下注射，总量为0.3ml～0.6ml，间隔3～5周再同样注射⼀次，10天后，断尾取⾎⼀滴，测抗体效价，选滴度⾼的⼩⿏做融合试验。
⼀个⽉后可以经静脉(尾静脉)给予⽆佐剂抗原0.2ml～0.4ml，3～4天后，杀死⼩⿏取脾做融适⽤。
2.颗粒性抗原如抗原来源⽅便，可以不加佐剂⽽增加免疫次数，缩短间隔时间。
鸡SIgA单克隆抗体的制备及初步应用的开题报告
鸡SIgA单克隆抗体的制备及初步应用的开题报告一、研究背景与意义鸡SIgA（Chicken Secretory Immunoglobulin A）是一种高效的抗菌物质，具有广泛的天然免疫作用，被广泛应用于食品工业、医疗卫生和兽医医疗等领域。
然而，鸡SIgA的制备和检测方法仍具有一定的难度和复杂性。
传统的制备方法多以免疫学技术为基础，受到制备时间长、成本高、质量难以控制等因素的限制。
因此，寻找高效、快速、稳定的鸡SIgA制备方法成为当前研究的热点。
在这个背景下，本研究计划通过单克隆抗体技术制备高效鸡SIgA单克隆抗体，为鸡SIgA快速检测和品质保障提供有力支撑。
二、研究进展目前，鸡SIgA的检测方法主要有酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫印迹（Western blotting）等。
然而，在实际应用中，这些方法所需的鸡SIgA单克隆抗体质量和稳定性难以保证，因此限制了检测结果的准确性和可靠性。
本研究将基于鸡SIgA序列的生物信息学分析，采用重组抗原免疫小鼠、制备杂交瘤并筛选单克隆抗体等技术，制备对鸡SIgA特异性高、稳定性良好的单克隆抗体。
三、研究内容和方法1. 鸡SIgA序列的生物信息学分析。
通过NCBI数据库等在线工具获取鸡SIgA的序列信息，分析其特征和结构，为后续重组抗原的制备提供技术依据。
2. 重组抗原克隆、表达和纯化。
根据生物信息学分析的结果，设计、合成和表达具有鸡SIgA特异性的重组抗原，纯化后用于后续免疫小鼠制备鸡SIgA单克隆抗体。
3. 免疫小鼠制备和同型分型。
选用Balb/c小鼠进行免疫后制备杂交瘤，筛选和纯化单克隆抗体，进一步对单克隆抗体进行同型分型和特异性检测。
4. 应用鸡SIgA单克隆抗体进行鸡SIgA的检测和初步应用。
采用酶联免疫吸附试验进行鸡SIgA的检测，并在某些食品安全领域、卫生保健等领域进行初步实验应用。
四、预期结果与意义1. 成功制备出高效、特异性强、稳定的鸡SIgA单克隆抗体。
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动物单克隆抗体的研究和进展【前言】由于B淋巴细胞在抗原的刺激下增殖分化转变为浆细胞产生抗体。
每一个B淋巴细胞只能接受单一的抗原刺激产生特异性抗体，从单个B淋巴细胞繁殖的细胞克隆可以得到均质的抗体叫单克隆抗体(monoclonal antibody),B淋巴细胞不能在体外无限增殖。
单克隆抗体得特点是特异性强，具有抗原结合位点的特异性；因结合位点的单一性，有时不易捕捉抗原，一株单克隆抗体与抗原不易产生凝集反应或沉淀反应；抗体性质相同，容易纯化、标记。
自从1975年Köehler和Milstein利用杂交瘤技术[1]以来，目前随着分子生物学技术的渗透,出现了各种特异的单克隆杭体,并得到广泛应用，其中包括人源单抗、基因工程单抗、双特异性单抗等同时综述了杂交瘤技术的各个环节在近年来取得的一些迸展,为研制高质量的单抗提供了更为简便而灵敏的手段。
各种单克隆抗体不断涌现。
研究最为深入的主要有：人-鼠嵌合单克隆抗体、人源单克隆抗体、基因工程单克隆杭体、双特异性单克隆抗体等。
单克隆抗体的主要技术有免疫动物脾细胞分离、骨髓瘤细胞的准备、细胞融合、融合细胞的筛选与克隆、单克隆抗体的大量制备等【研究进展】1.1人源化和人源性单克隆抗体的研究和进展由于嵌合抗体异源性仍然很大，因此需要对鼠源抗体进行人源化改造，进一步人源化的方法很多, 主要是重构抗体和表面重塑技术。
重构抗体就是互补决定区(complementarity determining region, CDR)移植，将鼠抗体的CDR 移植到人抗体的相应部位，这样人源化程度可达90%以上，目前该方法是人源化单抗最常用、最基本的方法。
而表面重塑技术，即将鼠抗体框架区表面氨基酸的残基(surface amino acid residues, SAR)进行人源化改造。
该方法是仅替换与人抗体SAR 差别明显的区域，在维持抗体活性并兼顾减少异源性基础上选用与人抗体表面残基相似的氨基酸替换。
虽然人源化抗体解决了鼠抗体的免疫原性等问题，但生产人源化抗体仍有很大的困难；人源化过程需大量繁复、昂贵的电脑模拟，需取代不同的氨基酸以恢复选择性和亲和力，工作量非常大，并且它总还含有少量鼠源性成分。
完全的人源性抗体才是用于治疗的理想抗体，目前它主要通过 3 种途径来研制：噬菌体抗体库技术、核糖体展示技术和转基因小鼠制备人源性抗体。
通过免疫的、天然的以及合成的抗体库展示技术[2] 或者是利用转基因小鼠[3] 虽然可以获得人源单克隆抗体，但是经进一步改造传统的杂交瘤技术 ,所制备的大量鼠源单克隆抗体，仍然是目前开发用于人类疾病治疗的一种可能途径和源头。
如若将这些特异性和亲和力较强的非人源单抗进行人源化改造后，仍然比从头开始以新的靶点来开发治疗性单抗制剂更有应用前景。
2006年 Staelens 等用表面重塑的方法改造了抗血管假性血友病因子鼠单抗 82D6A3 ，将抗体可变区1O个鼠源氨基酸残基替换为人源残基，获得了很好的结果[4]。
表面重塑技术优于移植重构技术，在设计人源化抗体时更简单一些，因为该技术仅需改变表面残基即可，而保留了大量内核的非人源残基。
1.2 嵌合单克隆抗体的研究和进展抗体的恒定区是抗体分子结构中免疫原性最强的部位，而决定抗体特异性的是抗体的可变区。
从杂交瘤细胞分离出功能性可变区基因，与人Ig 恒定区的基因连接,再插入适当表达载体，转染宿主细胞，表达人- 鼠嵌合抗体。
也就是将鼠源性单抗在保留其抗原结合活性的基础上，尽可能的去除鼠源化部分或代之以人源化片断，减少了鼠源性抗体的免疫原性，从而尽可能的减少单抗的异源性，同时保留了亲本抗体特异性结合抗原的能力。
但是这种抗体仍保留了30%的鼠源性，可诱发人抗小鼠反应(HAMA)。
嵌合抗体用人源抗体恒定区取代鼠单抗恒定区而构建的人-鼠嵌合抗体, 已被证实保留了其亲本鼠单抗的特异性抗原结合能力并能够降低免疫原性, 目前美国正式批准上市的 4个人2 鼠嵌合抗体产品在临床应用中取得良好效果。
嵌合抗体就是将非人源抗体可变区移植到人抗体恒定区,仍保留了原来鼠源抗体约 30 %左右的鼠源序列,其免疫原性虽有所降低, 但仍可引起不同程度的 HAMA[5]应答。
无论 CDRs 或 SDR s移植所构建的嵌合抗体与其亲本非人源单抗相比,其抗原的亲和力都有一定程度的降低,因为亲本非人源单抗框架区的某些氨基酸位点参与了抗原结合或者对维持抗原结合区构象具有重要作用。
同时在对大量的嵌合抗体研究中发现有时其生物学效应并不一定完全与预期设想相符[6]。
1.3鼠源性单克隆抗体的研究和进展自单克隆抗体制备技术问世以来，制备单抗的一般程序基本相同，从超免疫的供体中即抗原免疫的小鼠，获取脾细胞，再与骨髓瘤细胞融合，最后对单个细胞进行克隆，培养出能分泌单抗的克隆细胞。
目前生产的单抗大多是鼠源性的，但其在临床应用方面还存在着很大的弊端，主要是鼠源单抗与NK 等免疫细胞表面Fc 段受体亲和力弱,产生的抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用(ADCC)作用较弱，而且它与人补体成分结合能力低[7], 对肿瘤细胞的杀伤能力较弱，并且鼠源性抗体在人血循环中的半衰期短，它发挥ADCC作用的时间较短；其次鼠单克隆抗体还具有免疫原性，使宿主易引起过敏反应。
这样一方面降低了单抗的效价，另一方面又会给病人带来严重的后果。
因此鼠源性单克隆抗体还应进一步改善才能广泛应用于临床。
1.4杂交瘤技术的拓展随着杂交瘤技术在生命学科各个领域中应用的不断深入，杂交瘤技术生产单克隆抗体的方法得到了很多改进，人们不断发现单克隆抗体的新用途。
其它动物的杂交瘤技术由于人或动物不同类间抗体有排斥反应，80 年代以来，人们在鼠杂交瘤技术的基础上，发展了人源杂交瘤技术，鼠与其他动物包括兔、牛、猪和绵羊的种间杂交瘤。
其它动物源的杂交瘤分泌的单克隆抗体特别适合于兽医和食品检验领域中使用。
如80 年代中期用EB 病毒转化体外培养的人B 淋巴细胞建立分泌单克隆抗体的细胞系获得成功，为人源单克隆抗体的生产开辟了新的途径。
抗体酶技术1986 年，Schultz 等和Tramontano 等发现某些单克隆抗体具有酶的催化作用[8]，从而为人工设计和生产具有特定催化活性的抗体酶开辟了道路。
目前已制备出具有变位酶活性的抗体酶和水解羟基酯、羧基酯、碳酸酯和香豆素酯的酯酶活性的多种抗体酶。
抗独特型抗体的单克隆抗体独特型是指存在于抗体分子可变区及淋巴细胞受体上的抗原决定簇，由独特型抗体（第一抗体）刺激机体产生的抗体（第二抗体）能识别抗原位点的独特型抗体的抗原决定簇，由抗独特型抗体的抗体（第二抗体）刺激机体产生的抗体（第三抗体）能与抗原结合，即与独特型抗体（第一抗体）具有类似性。
抗独特型抗体作为一种探针已广泛应用于受体结构和功能的研究，还可用于鉴别和比较特异性抗体分子上的独特型抗体决定簇。
1.5我国单克隆抗体的应用研发进展情况据调查，近年来中国的单抗技术已经受到越来越多的关注和重视，单克隆抗体药物研究已被列入863计划和国家重点攻关项目。
目前，中国已有2个治疗性单抗产品获准生产，3个治疗性产品处在临床试验阶段，多个抗体药物处于临床前研究阶段，已批准的诊断性单抗有31个。
武汉生物制品研究所抗肾移植单抗OKT3（注射用鼠源性抗人T淋巴细胞CD3抗原单克隆抗体）最早批准上市，具有免疫抑制作用，可逆转对移植器官的排斥反应。
东莞宏远逸士生物技术药业开发的生物制品国家一类新药：粤宏远（0573）下属之东莞宏远逸士生物技术药业开发的生物制品国家一类新药“恩博克乳膏”（抗人白细胞介素-8单克隆抗体），用于银屑病（俗称牛皮癣），已于 2001年6月获准生产。
上海华晨治癌药业有限公司与美国南加大合作开发的碘人鼠嵌合型肿瘤细胞核单克隆抗体注射液（131I-chTNT），用于多种实体瘤，该药物为国家一类新药，目前已进入三期临床阶段。
第四军医大学基础部的国家一类新药碘［131I］肝癌单抗放免诊断剂和治疗剂，用于原发性肝癌的体内定向诊断及体内导向治疗，也处于临床研究中。
该抗体药物的中试生产下游工艺经不断优化，通过使用SREAMLINE扩张柱床吸附技术再配合疏水层析，取得了比传统工艺更为理想的结果【参考文献】[1] Köehler G & Milstein C Nature 1975; 256:59-62[2]McCafferty J,GriffithsA D, Winter G, eta1. Phage antibodies：filamentotm phage displaying antibody variable domains [J]．Nature 1990，348：552 - 554 ．[3]Green LL. Antibody engineering via genetic engineering of the mouse：XenoMouse strains are a vehicle for the facile genenalon of therapeutic hu- man monoclonal antibodies [J]．J Immuno1 ．Methods 1999, 231：11 - 23 ．[4]Staclens S ，JohanD， NgocTH， eta1．Humanization by variable doma i n resurfacing and grafting on a human IgG4，using a new aproach for det- ermination of non-h u ma n like surface accesiable framework residues based on homology modelling of variable domains[J]．Molecular Immunology 2006 ，43：1243 1257 ．[5]Beiboer SHW, Reurs A , Roovers RC, etal Guided selection of a pan carcinoma specific antibody reveals similar binding characteristics yet structural di- vergence between theori ginalmurine antibody andts human equivalent 1 J2. J Mol Bi ology 2000 , 296 :28-49 .[6]HolmesM, Foote J . Structural consequences of humanizing an antibody1 J 2. J Immunol 1997, 158: 219-222[7]Marks JD , Hoogenboom HR, Bonnert TP , etal By passing immunization humanan tibodies from vgenelibraries displayed onphage 1 J 2. JMol Biology 1991 , 222: 25-97 .[8]Newman R, Alberts J , Anderson D , etal Primatization of recombinant an ti bodies for immunotherapy of human diseases : amacaque human chimericantibody aga i nst human Biotechnology 1992 , 10: 45-52.。