急性脊髓损伤动物模型制备
脊髓损伤动物模型的制备与评价
脊髓损伤动物模型的制备与评价【摘要】脊髓损伤(SCI)的修复是医学界面临的一大难题，虽然现在还没有理想的治疗方法，但是世界各地的许多学者已对脊髓损伤的病理机制和再生修复进行了深入的研究。
脊髓损伤动物模型的制备和评价方法对脊髓损伤相关研究具有很重要的意义,本文将回顾目前常用的脊髓损伤模型制备和评价的方法。
【关键词】脊髓损伤；动物模型；评价【Abstract】Objective restore the neural function after spinal cord injury is a hard work.Though there are no promising therapies,the scientists all over the world have made great effort in studying the pathological meschasim ofspinal cord injury and spinal cord regenerate.The establishment of animal model and evaluating methods are playing an important role in these researches.This article will review applications about how to make and evluate animal models of spinal cord injury.Key words:spinal cord injury,animal model,evaluation1 脊髓损伤动物模型的制备1.1 脊髓撞击损伤模型Allen［1］建立了重物坠落致脊髓损伤的方法。
即用一定重量的重锤沿一套管垂直落下、精确打击特定脊髓节段而致伤。
这种模型比较接近人类脊髓损伤的病理生理特点及变化规律，对研究脊髓损伤后神经元、神经胶质细胞的病理变化、再生规律和相互作用，探索神经保护策略有很大帮助。
新型小鼠急性脊髓损伤模型的建立与评价
义 的 小 鼠 脊 髓 钳 夹损 伤 模 型 ； （ 钳 夹 ５秒 组 ） 具 备 较 好 的 实 验 价 Ｎ－ 。
２ ．Ｄｅ ｐ ａｒ ｔ ｍｅ ｎｔ ｏ ｆ Ｎｅ ｕ ｒ ｏ ｂｉ ｏ ｌ ｏ ｇｙ， Ｄａ ｖ ｉ ｄ Ｇｅ ｆ ｆ ｅ ｎ Ｓｃ ｈ ｏ ｏｌ ｏｆ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ｅ， Ｕ ｎｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ｏｆ Ｃａ ｌ ｉ ｆ ｏ ｒ ｎｉ ａ， Ｌｏ ｓ Ａｎ ｇｅ ｌ ｅｓ ， Ｌｏｓ Ａｎｇｅ ｌ ｅ ｓ ， Ｃａ ｌ ｉ ｆ ｏｒ ｎｉ ａ ９０ ０９ ５— —１ ７６ ３；
组 ， ｎ 一９ ） 和 钳夹 损伤 ５ ｓ组 （ Ｂ组 ， ｎ一 ９ ） ， 钳 夹 损 伤
１ Ｏ ｓ组 （ Ｃ组 ， ｎ一 ９ ） 。 术 前 每 ３只 一 笼 饲 养 ， 环 境 温
度 ２ Ｏ ℃ ～２ ３ ℃ ， 湿度 ５ Ｏ ～６ Ｏ ， 自由 饮 食 、 水 。 钳
术 前 先 定 位 Ｔ１ ０水 平 ， 术 区 碘 酒 消 毒 ３遍 （ Ｔ１ ０ 为 中心 ， Ｃ ７ 一 Ｌ５范 围 ） ， 再 酒 精 消 毒 ３遍 。 调 节 气 体 麻 醉机气 体 流量 ， 使 最小 气 体 流 量 以保 持 小 鼠麻醉 状 态 。调 整 显 微 镜 视 野 ， 自 Ｔ２ 一 Ｔ１ ２尖 刀 切 开 背 部 皮肤， 避 免损 伤皮 下脂 肪垫 ， 用 ５＃ 镊 子 小 心 分 离 皮 下 筋膜组 织 ， 显 露 肌 肉组 织 ， 可 见 浅 层 椎 旁 腱 膜 终 止
ＢＭ Ｓ评 ３ ４法 、 Ｒｏ ｔ ｏ ｒ ｏ ｄ 法 和 Ｇｒ ｉ ｄ ｗａ ｌ ｋ法 于 损 （ ０ ） ｄ 、 损 伤后 ３ ｄ 、 ７ ｄ、 １ ４ ｄ 、 ２ ８ ｄ分 别 对 各 实 验 组 进 行后肢 运 动功 能评估 ； 同 时 用 ＧＦ ＡＰ 组 织 学 法于 ７ ｄ 、 １ ４ ｄ、 ２ ８ ｄ观 察 各 组 脊 髓 组 织 切 片 的 组
急性脊髓损伤动物模型的建立与评估
髓损伤卡 Ｉ ！ ） 上 』 ［ 对比，
方法 ： 雌 ＳＤ 人 敝随 饥 分 为 ５组 ，Ｈ 口 假手术组（ Ａ 组 ６只 ） ，『 ｌ ； ｔ ｉ ｌ ： ｔ Ｊ ‘ ｌ 器５ ， １ ０ ｃ ｍ 组（ Ｂ １ ，Ｂ ２组 ） ， Ｎ ＹＵ
福建省漳州市人，汉族，
（ １ ） 行为学评 分（ Ｂ Ｂ Ｂ 和
Ｒ ｅ ｕ ｔ ｅ ｒ 评分１ ：
模 型组 ２ ４只（ 分 为 自制 打击器 ５ ，
１ ０ ｃ ｒ ｎ组 ， Ｎ ＹＵ 打 击 器 １ ． ２ ５， ２ 。 ５ｃ ｍ
组，每组 ６只） ，摘除椎扳，用两种打 击器 建立不同程度 的脊髓损 伤模 型。
（ ２ ） 观察神经元半定量计 数 分橱 以及 脊髓损伤面 积 比变化 ； （ ３ ） 进行病理学检 查。
通过 与 Ｎ Ｙ Ｕ 脊髓损伤模型 比 较， 证明 了实验 自制打击器建 立 的脊 髓损 伤模 型 是一 种稳 定性较好的脊髓损伤模型 ， 方 法简单 ， 重复性强 ，可为脊髓
损 伤机 制研 究及 药物 治 疗提 供稳定的动物模型
福 建 中医药 大学 在读硕 士、 主要从 事脊髓损伤 方
面 的研 究
通讯作者 ：张俐，博士 ，
教授 博士生导师， 福建
中 医 药 大 学 骨 伤 学 院 省
病理切片 示：
部 共 建教 育部 重点 实验 室，福建 省福 州市
｝ ｜ 矬研宠．２ ０ １ ６ ．２ ０ （ ４ ９ ） ： ７ ３ ４ １ ． ７ ３ ４ ８
Ｄ ＯＩ ： １ Ｏ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． ２ ０ ９ ５ — ４ ３ ４ ４ ． ２ ０ １ ６ ． ４ ９ ． ０ ０ ７
脊髓损伤动物模型研究现状
研究 Ｓ Ｉ 基 本 的 条 件 是 建 立 标 准 、 想 的 Ｓ Ｉ 型 。 Ｃ最 理 Ｃ 模 客观 化 、 想 化 的 Ｓ Ｉ 型 应 具 备 四 方 面 的 条 件 ： 床 相 似 理 Ｃ模 临
性 、 调控 性 、 可 可操 作 性 与 可 重 复性 。 目前 ， 验 中 最 常 用 的 实
击 ， 而 复制 出不 同 程 度 、 同 类 型 的 Ｓ Ｉ 型 。同 时 ， 法 从 不 Ｃ模 该
保持 了硬 脊 膜 完 整 ， 有 效 防 止外 源性 成 分 侵 入 Ｓ Ｉ 可 Ｃ 区域 ， 并
防止 脊 髓 外 露 与 脑脊 液外 漏 。这 种 模 型 较 接 近 人类 脊 髓 损 伤 的病 理 生 理 特 点 及 变 化规 律 ， 研 究脊 髓 损 伤后 神 经 元 、 经 对 神
胶 质 细 胞 的病 理 变 化 、 生 规 律 和 相互 作 用 、 索 神 经保 护 策 再 探 略 等有 较 大 帮 助 。 ‘
件 和受 伤 机 制 ， 型 制 作 的关 键 是 控 制 牵 拉 比率 的精 确 性 。 模
２ 神 经 功 能 的评 价 标 准 及 方 法
动 物 脊髓 损 伤 后 的 神 经 功 能 评 定 主 要 有 神 经 电 生 理 评
接 。２ ０ ０ ４年 Ｓ ｅｇ等 ＿ 制 备 了微 创 的 鼠 Ｓ Ｉ 型 ， 过 调 节 ｈｎ ６ Ｊ Ｃ模 通
压迫 时 的压 力 大 小 及 时 间 长 短 而 得 到 不 同程 度 的 Ｓ Ｉ 型 ， Ｃ 模 该 法 能 保 持硬 脊 膜 的完 整 并 具 有 很好 的可 重 复 性 。 １４ 光 化 学 诱 导 型 Ｓ Ｉ 型 静 脉 注 射 光 增 敏 剂 二 碘 曙 红 ． Ｃ 模 （ 加 拉 玫 红 ） 四碘 荧 光 素 二 钠 （ 红 Ｂ ， 后 分 别 以氩 离 孟 或 藻 ）然 子 灯 或 氙 弧灯 产 生 的 ５ ４ ５ｎ 激 光 或 ５ ０ ｍ 绿 光 照 射 拟 损 １． ｍ ６ ｎ 伤 的 脊髓 部位 ， 即 与 光 增 敏 剂 发 生 反 应 使 局 部 氧 自由基 大 光 量 堆 积 ， 伤 脊 髓 血 管 内皮 细 胞 ， 而 引 发 血 栓 ， 致 缺 血 性 损 进 导 损 伤 和水 肿 ， 此 而 制 得 光 化 学 诱 导 型 脊 髓 损 伤 模 型 ［ ］ 由 。 该 法 能保 持硬 脊 膜 的完 整 性 ， 至不 必 切 开 皮 肤 ， 为 激 光 足 甚 因
脊髓损伤模型制作及方法
脊髓损伤模型制作及方法1.化学损伤模型化学损伤模型是通过定位注射或者鞘内给药的方法损伤脊髓组织细胞。
其损伤的病理变化以神经元溃变为主，完整性不受破坏，类似于脊髓灰质炎的病变，适用于神经细胞移植的研究。
例如，通过微纤维植入谷氨酸、天冬氨酸、N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDA)或红藻氨酸盐，可建立兴奋性毒性脊髓损伤模型，引起少突胶质细胞和神经细胞死亡及诱发电位传导阻滞。
而于鞘内注射红藻氨酸盐也可引起少突胶质细胞和神经细胞死亡。
在脊髓背侧局部使用红藻氨酸盐或NMDA导致兴奋性中毒，而显微注射到灰质，可以导致脊髓灰质变性。
注射磷脂酶A2到大鼠胸部脊髓腹外侧白质可产生出血，炎细胞浸润，脱髓鞘及灰质、白质的病变和运动神经传导障碍。
2.光化学损伤模型光化学损伤模型，一般采用光增敏剂二碘曙红(孟加拉玫红)或四碘荧光素二钠(藻红B)进行静脉注射，然后分别以氩离子灯或氙弧灯产生的514.5nm激光或560nm绿光照射拟损伤的脊髓部位，光与光增敏剂发生反应，使局部自由基大量堆积，损伤脊髓血管内皮细胞，进而引发血栓，导致缺血性的损伤和水肿。
该法能保持硬脊膜的完整性，甚至不必切开皮肤。
激光足以穿透脊背表面，但应注意防止光的热效能对脊髓的直接灼伤。
3.脊髓震荡型损伤模型脊髓震荡型损伤模型采用闭合性液压装置损伤脊髓，其原理是通过向密闭的腔隙内快速注入定量的生理盐水，造成组织变形和移位，使组织损伤。
该装置在致伤的关键步骤上均定量化、客观化，操作简单、方便，不受人为因素干扰。
液体冲击硬膜后，在密闭的椎管内产生压力传导，接近人体闭合性脊髓损伤。
该模型具有稳定性和重复性好，致伤能量可以客观、定量测定，损伤情况可以分级等优点，目前广泛应用于颅脑损伤的研究。
但是，由于液体流变学特点不仅取决于液体本身，同时还受接触物体的影响，因此很难对该装置进行生物力学分析。
制造动物模型的目的是模拟人类脊髓损伤并将动物模型上的重大发现用于临床。
上述的动物模型都有其优缺点，完全理想化的模型是不存在的，各种损伤模型仅能反映临床上该类型脊髓损伤。
自制脊髓损伤动物模型实验台的结构与使用
该实验装置 ， 包括 １
个实验 台， 若干个 固定在实验 台上 由垂直滑杆和水平 滑杆构成 的支撑杆 。在其中 ２ 个支撑杆上设置挂钩 ， 个支撑杆 １
上安装有 由中空的垂直冲击通道 和冲击杆组成 的垂直冲击装置 ， １ 另 个支撑杆上安装有由水平 冲击板 、 前摆杆 、 分度
板和水平 冲击杆共 同构成并依靠 冲击开关控制的侧击打装置 ， 在侧击打装置上还附属有一个 由升降提 钩和砝码盘组
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
ｌｔ ｇｄ ｖｃ ｒ ｘ ｄｏ ｈ ｏ ｅｐ ｃｉｅｙ Ｃｏ ｃｕ ｉｎ Ｔ ｅ ｄ ｖｃ ａ ｋ ｉｇｅ ｓ ｅｉｉｒ ｎｆｏ ｔｏ ｅｓ ｉａ ｉｉ ｅ ｉｅｗｅｅｆ ｅ ｎ ｔｅ ｒｄ ｒｓ ｅ ｔ ｌ． ｎ ｌｓｏ ｈ ｅ ｉｅｃ ｎ ｍａ ｅｓｎ ｌ ｉ ｎｕｙ ｉ ｒｎ ｆｈ ｐｎ ｌ ｆｎ ｉ ｖ ｔ ｔ
其 中， 而保证 了工作 台平面的相对清洁。 从 １ 垂直 冲击装置 ： ． ２ 垂直 冲击装置 固定在实验 台后侧支撑杆 上， 包括 一根 中空 的垂直 冲击通道和一个 冲击杆 。 垂直冲击通 道通过 冲击通道导 向座竖直 固定 在支撑杆水平滑杆 的前 端 ，
一
个直径略小于垂直冲击通道 内径 的冲击杆可以放置 于垂直
ｃ ｒ ｖ ｎｒ ） ｐ ｓｅ ｏ ｄ ｒａ） ａ ｄ ａｖ ｒ ｔ ｆ ｉｅｅ ｔ ｎ ｌｓｏ ｏｈ ｓ ｅ ｆｔｅａ ｉ ｌ ｐｎ ｌ Ｏ ．ａ ｌ ａ ｋ ｏｄ（ ｅ ｔａ ， ｏ ｔｒ ｒ（ｏｓ １ ｎ ａｉ ｙｏ＇ ｆ ｒｎ ｇｅ ｎｂ ｔ ｉ ｓｏ ｎｍａ ｓ ｉａ ｒ ｓｗｅｌ ｓｍａ ｅ １ ｉ ， ｅ ｄｉ ａ ｄ ｈ Ｃｄ
脊髓损伤动物模型的制备及神经功能评价
Байду номын сангаас
液化 ， 此模型一致性 较差 。Ｂ ｎｅ等 利 用孟 加拉玫瑰 红 但 ｕｇ 激光束直接照射脊 髓 ， 造成 脊髓 缺血 损伤 ， 镜 和电镜 观察 光
综 述 ・
型 脊髓 损 伤 动 物 模 的制 备 及 神 经 功 能 评 价
徐 帆 陈 建敏 张 ， ，
（ ． 都 医学 院 ０ 级 药 学本 科 班 ， 川 成 都 １成 ３ 四
晓
６０８ ） １０ １
６ ０ ８ ；２ 成 都 医 学 院 实验 技 术教 研 室 ， 川 成 都 １０ １ ． 四
ｌ ｈ ｎ ｆ ｎ ｍ ｏ ｅ ｆ ｐｎ ｏｄ ｉ ｕ ｎ ｈ ｅｈ ｄ ｆ ｖ ｕ ｔｏ ｆ ｅｖ ｕ ｕ ｃｉ ｆ ｒｓ ｉ ｏｄ ｉ ｍｅｔ ｉ ａ ｍ ｄ ｌ ｏ ｓ ｉａ ｃ ｒ ｊｒ ａ ｄｔｅｍ ｔｏ ｓｏ ａ ａｉ ｎｏ ｒｏ ｓｆｎ ｔ ｎ ａ ｅ ｐｎ ｃ ｒ ｓ ｏａ ｌ ｓ ｌ ｎ ｙ ｅｌ ｉ ｎ ｏ ｔ ｌ ａ ｉ ｕ ｏ ｔ ｏ ｎ ｂ ｏ ｄ ｎ ｒ ｂ ｔ ａ ｍｅａ ｄａ ｒａ ． ｊｙ ｈ ｈ
ＸＵ ａ Ｃ Ｎ ｉｎｍｔ ＺＨ ＮＧＸｉｏ Ｆ ｎ， ＨＥ Ｊａ — ｎ， Ａ ａ
（ ｈｎｄ ｄｃ ｏ ｅｅＣ ｅｇ ｕ ６０ ８ ，ｈｎ ） Ｃ ｅｇ ｕＭｅｉ Ｃ Ｈ ｇ ， ｈｎｄ ０ Ｃ ｉａ ｌ ａ １ １ Ａ ｓｒｃ： Ｓ ｉａ ｃｒ ｎ ｒＩ Ｃ ）ｉ ｏｅｏ ｅｍ ｓ ｄｆｃｌ ｐｏｌｍ ｓｗ ｌａ ｅｈｔｏｉｓｉ ｍ ｄｃ ｂ ｔａｔ ｐｎ ｏｄｉ ｕ Ｉ ｓ ｎ ｆｈ ｏｔ ｉｉ ｔ ｒｂｅ ｓ ｅ ｓｔ ｏ ｔ ｃ ｅ ｉ ｌ ｊｙ Ｓ ｔ ｆｕ ａ ｌ ｈ ｐ ｎ ｌ ａ ｒｓａｃｅ ｔｈ ｒｓｎ． Ｔ ｅｅｔｂｉ ｍ ｎ ｏ ｉａ ｍ ｄｌ ｏ ｉ ｏ ｊｒ ｆ ｒａ ｉｐ ｒ ｎｅｔ ｆ ｄ— ｅｅｒｈｓａ ｔｅｐｅｅｔ ｈ ｓ ｌ ｈ ｅｔ ｆ ｎｍ ｏｅｓ ｆ ｐｎ ｃｒ ｉ ｕ ｉ ｏ ｅｔｍ ｏｔ ｃ ｎ ａ ａ ｓ ａ ｌ ｓ ａ ｌ ｄｎ ｙ ｓ ｇ ａ ｏｕ
急性脊髓外伤动物模型具体方法及步骤
急性脊髓外伤动物模型具体方法及步骤原型物种人来源手术模式动物品系SPF级ICR小鼠，健康，雄性，8~12W实验分组实验分六组：正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组。
实验周期4-6 weeks建模方法取ICR 小鼠，戊巴比妥钠麻醉后，采用椎板切除术暴露T9-T10 处脊髓。
然后采用脊髓打击器，于暴露脊髓处施加90 kilodynes 的力造成挫伤型脊髓损伤，SCI 后连续10 天每天肌肉注射庆大霉素（8mg/kg）防止术后感染，并每天两次人工膀胱按压挤尿直至恢复自主膀胱活动为止（防止尿潴留）。
处理一周后进行BBB 评分评估小鼠后肢运动能力；BBB score=0 时，则模型构建成功。
将构模成功的小鼠分为两组，每组8只，于挫伤型SCI 处理1week 后，于大鼠尾静脉处进行注射处理（模型组只注射生理盐水，治疗组注射含有受试药物的生理盐水）。
SCI 后，16 只小鼠饲养3week 时，根据SCI后3 week 结果每组取3 只效果最显著的小鼠取脊髓进行病理学检测，剩余10 只小鼠继续饲养并与5week，7week，9week进行BBB 评分和机械触诱发痛检测。
SCI后9week 时所有受损脊髓中心进行冻存或OCT 包埋。
应用疾病模型1. BBB test 于药物注射后每隔一周进行BBB test，直至移植后8 周（即SCI 后3week、5week、7week、9week）。
药物注射后2 周（即SCI 后3week）共16 只小鼠进行行为学检测数据，选择变化显著的3 只小鼠（每组3 只，即6 只小鼠）的脊髓组织进行病理学检测。
剩余5 只小鼠（每组5 只，即10 只小鼠）依旧隔一周（即SCI 后5week、7week、9week）进行BBB test。
分值范围为0-21分，其中0分代表后肢完全失去运动功能，21分代表后肢运动功能基本正常。
2. Mechanical allodynia test （机械触诱发痛检测）使用Von Frey 测痛套件，记录缩足的压力（g），2 分钟时间间隔内测量4 次，剔除最大值和最小值后获取的中间值作为痛阈（g）。
Allen,S脊髓损伤大鼠模型评价
Allen,S脊髓损伤大鼠模型评价摘要】目的观察Allen，S法脊髓损伤（SCI）后大鼠后肢功能恢复情况，以及损伤后18d脊髓内部结构的变化及意义。
方法：取雌性SD大鼠16只随机分为2组（n=8）：空白对照组、伤后18d组。
Allen，s法致伤脊髓。
用大鼠综合行为评分法（CBS）对各级神经功能评分。
用免疫荧光化学和图像分析的方法观察GFAP表达变化。
结果 1：在行为观察中，发现大鼠脊髓损伤后有自行恢复倾向，损伤后18天后肢功能恢复68%。
2：脊髓损伤后18d GFAP反应明显增强。
结论 1、急性脊髓损伤后脊髓有自我修复的倾向。
2、胶质细胞对脊髓损伤后的功能恢复起到重要作用。
【关键词】脊髓损伤 GFAP 行为学The Evaluation of Allen,s Weight-dropping Model Experiment Spinal Cord Injury 【Abstract】 Objectives:To observe the recovery of hindlimb function and the changes of structures of the spinal cord 18d after spinal cord injury （SCI）and its significance.Methods:16 female SD rats were randomity divided into the two groups:the groups of spinal cord injury (n=8) and control group (n=8). Spinal cordwas injuried with Allen,s weight-dropping model. Immunohistochemical technique and imagine analysis technique were used to detect the express of GFAP in spinal cord tissue, and the neurological function of spinal cord was graded according to Gale combined behavioral score(CBS) . Results:1. In behavior examination , there was about 68% self-recovery of hindlimb function of the injuried rats. 2. The expression of GFAP showed increased 18 day after spinal cord injury. Conclusion:1.There was a tendency of self-repairing after spinal cord injury.2.The data indicted that GFAP may play an important role in self-repairing and regeneration after spinal cord injury. 【Key words】Spinal cord injury GFAP Behavioral analysis脊髓损伤（spinal cord injury, SCI）是一种严重影响人类生命质量和生活质量的疾病。
脊髓损伤动物模型造模设备的制作技术
本技术涉及一种脊髓损伤动物模型造模装置，包括传送与控制装置、加热装置、排水装置组成，所述传送与控制装置由电脑、压力传感器、脊柱固定夹、电动钳夹器、调节旋钮、手术台、底座、电动机、滑轨、传动齿条、夹钳组成；所述排水装置由排水槽、排水孔组成；手术台底部安装了内置温控器的加热装置，加热装置一端连接有插头。
其优点表现在：(1)将钳夹损伤所有过程机械化控制，摆脱手持操作的误差；(2)精确控制所有致伤因素，使造模过程更可控、稳定；(3)对造模过程有反馈数据，使模型均一性更具有说服力。
技术要求1.一种脊髓损伤动物模型造模装置，包括传送与控制装置、加热装置(14)、排水装置，其特征在于，所述传送与控制装置含有电脑(1)、压力传感器(2)、脊柱固定夹(3)、电动钳夹器(4)，电脑(1)通过数据线(9)与电动钳夹器(4)相连接，所述电动钳夹器(4)内含有传动齿条(12)、滑轨(10)和双向电动机(11)；传动齿条(12)上端与双向电动机(11)衔接；滑轨(10)贯穿于两列传动齿条(12)之间；滑轨(10)下端连接有两个夹钳(13)；夹钳(13)内侧含有压力传感器(2)，电动钳夹器(4)上端有垂直位置调节旋钮(5)；支架将电动钳夹器(4)与手术台(7)连接起来；手术台(7)台面放置有脊柱固定夹(3)，手术台(7)两侧有水平位置调节旋钮(6)；手术台(7)下端有底座(8)；所述加热装置(14)是内置温控器的加热装置，温控器可在37℃-40℃内调节温度，加热装置(14)位于手术台(7)操作区域正下方，加热装置(14)一端连接有插头(15)；所述排水装置是由排水孔(16)、排水槽(17)组成，排水孔(16)位于手术台一侧，排水槽(17)位于手术台(7)上表面。
2.根据权利要求1所述脊髓损伤动物模型造模装置，其特征在于，所述电动钳夹器(4)共有两个，一个上端与数据线(9)连接，另一个上端与垂直位置调节旋钮(5)连接。
3.根据权利要求1所述脊髓损伤动物模型造模装置，其特征在于，所述脊柱固定夹(3)共有3-6个。
大鼠急性脊髓损伤动物模型的建立及影像学分析
脊髓损伤所致的劳动力丧失、 生活不能自理及其
［员］
诸多严重并发症等问题日益困扰着整个社会
立标准、 可重复性好的 杂悦陨 动物模型是对 杂悦陨 深入研 测方法才能为进一步研究 杂悦陨 机制奠定坚实的实验基 猿援 员摇 动物模型的选择 摇 脊髓损伤模型种类繁多， 各有 其优缺点， 在应用时应根据具体实验研究目的和条件 作出科学的选择
砸葬凿蚤燥造燥早赠 蚤皂葬早藻 藻增葬造怎葬贼蚤燥灶 蚤灶 皂燥怎泽藻 皂燥凿藻造 燥枣 葬糟怎贼藻 泽责蚤灶葬造 糟燥则凿 蚤灶躁怎则赠援 摇 糟葬造 悦燥造造藻早藻，郧怎葬灶早扎澡燥怎 缘员园圆远园 ，悦澡蚤灶葬
在澡怎葬灶早 原 憎藻灶，在匀粤韵 再怎，栽粤晕 蕴蚤 原 造蚤葬灶援 阅藻责葬则贼皂藻灶贼 燥枣 韵则贼澡燥责葬藻凿蚤糟泽，栽澡藻 杂藻糟燥灶凿 匀燥泽责蚤贼葬造 粤枣枣蚤造蚤葬贼藻凿 燥枣 郧怎葬灶早扎澡燥怎 酝藻凿蚤鄄 憎藻则藻 葬灶葬造赠扎藻凿 枣燥则 藻增葬造怎葬贼蚤燥灶 燥枣 凿蚤葬早灶燥泽贼蚤糟 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶糟藻援 酝藻贼澡燥凿泽摇
员援 猿援 圆摇 悦栽 检查 摇 使用西门子 孕造怎泽 原 责燥憎藻则 型螺旋 悦栽 机， 病灶先采用 猿 耀 缘 皂皂 层厚， 员郾 缘 螺距以病灶为中心 描至 圆源园 泽， 层厚 圆 皂皂， 螺距为 员 。 行 悦栽 平扫， 确定手术部位最大中心层。各扫描一次扫 员援 猿援 猿摇 载 原 砸粤再 原 阅砸 成像检查 摇 采用西门子的平板 探测器技术 原 粤载陨韵酝 粤则蚤泽贼燥泽 灾载 孕造怎泽。 粤载陨韵酝 粤则蚤泽贼燥泽
员援 猿援 员摇 酝砸陨 检查 摇 手术后 员 澡 进行 酝砸陨 检查。采用 郧耘 园郾 圆栽 永磁型磁共振扫描机和 郧耘员郾 缘栽 超导型磁共 序列获取 栽 圆 宰陨 及梯度回波 （ 郧砸耘 ） ， 常规扫描获取轴 位图像， 部分大鼠另行矢状位和 （ 或） 冠状位扫描； 扫 描层厚 圆 耀 猿 皂皂， 间隔 员 耀 圆 皂皂。 振扫描机；选用头线圈，采用 杂耘 序列获取 栽 员 宰陨、 云杂耘
脊髓损伤动物模型制备的研究进展
西
医
科
大
学
学
报
２ ０ １ ３ Ａｐ ｒ ； ３ ０（ ２ ）
－
Ｊ ＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＧＵＡＮＧＸＩ Ｍ ＥＤＩ ＣＡＩ ＵＮＩ ＶＥ ＲＳ Ｉ ＴＹ
脊 髓 损伤 动 物模 型 制 备 的研 究进 展
周 红海 秦 明芳
南宁
曹 明亮
５ ３ ０ ０ ０ １ ）
坏死 ， 随 后 阶段 性 部 分 修 复 、 组织重 建 ， 最 后 过 渡 到 特 征 性 的 慢 性 坏死 囊 腔 形 成 、 实质 细胞 萎缩 、 胶 质 瘢 痕 形 成 。该 模 型
对研究 神经元 、 胶 质 细 胞 的 病 理 变 化 及 再 生 规 律 和 相 互 作 用， 探 索 神 经 保 护 策 略有 历 史 性 的 帮 助 。其 缺 点 是 当 重 物 下 落撞击 时 ， 不 能 及 时移 开而 压 迫 脊 髓 造 成 新 的 损 伤 ； 同 时， 重 物 打击 时 脊 柱 脊 髓 的偏 移 常 造 成 致 伤 结 果 的 不 一 致 。Ｋｈ ａ ｎ 等 根 据 Ａｌ ｌ ｅ ｎ法 的 技 术 要 领 ，设 计 出 新 的 ＷＤ 仪 ， 即将 重 物、 垫片 、 换 能器 、 动 物 夹 等 各 种 物 件 均 附 着 于 可 移 动 的 磁 性 底座上 ， 使 动 物 的 固定 与 调 节 及 Ｓ Ｃ Ｉ 操作更 方便 、 灵 活 。Ｙｅ ｏ 等 改 良撞 击 损 伤 模 型 ， 将撞 击速 度 和频率 设 为变量 ， 并 进 行动 物 Ｓ Ｃ Ｉ 后功能评 定 ， 证 明随着 撞击 速度 和 频率 的增加 ， 脊 髓 挫 伤 程 度 随 之 增 加 。Ｆ ａ ｌ ｃ ｏ ｎ ｅ ｒ 等 将 大 鼠 四 肢 固 定 ， 以 前体定位 仪固定头 部 ， 从 而 可上 、 下、 左、 右 灵 活 移 动 以调 节 脊 髓 位 置 。研 究 中证 明 ， 冲力 、 脊髓压 缩程 度和速度 、 传 递 的 能量 等 因 素 可 以 通 过 与 传 感 器 相 连 的 反 馈 调 节 回路 进 行 精 确调节 ， 能 够 在 最 大 程 度 上 减 少 致 伤 装 置 系 统 内 的 变 异 因
大鼠脊髓损伤模型构建
大鼠脊髓损伤模型构建大鼠脊髓损伤模型是研究脊髓损伤发生机制和治疗方法的重要工具。
建立有效的模型可以帮助研究人员深入了解脊髓损伤的病理生理过程，并为新的治疗方法的开发提供依据。
本文将介绍大鼠脊髓损伤模型的构建方法。
大鼠是常用的实验动物之一，其解剖结构与人类相似，且容易获取和饲养，因此被广泛应用于脊髓损伤的研究中。
大鼠脊髓损伤模型的构建涉及到手术操作和评估指标两个方面。
首先，进行手术操作是构建大鼠脊髓损伤模型的第一步。
操作前需要准备好所需的器械和材料，包括手术器械、麻醉药物、抗生素、止血药物等。
手术操作的步骤如下：1. 麻醉：将大鼠置于适当的麻醉装置中，使用合适的剂量的麻醉药物（如异氟醚）进行麻醉。
2. 暴露脊柱：在麻醉后，用适当的切口暴露大鼠的脊柱。
可以根据需要选择颈椎、胸椎或腰椎进行操作。
3. 脊髓损伤：通过钝性击打、压迫、挤压或利用脊髓牵拉装置等方式对脊髓进行损伤。
可以根据实验需要确定损伤的程度和方式。
4. 恢复和闭合：在损伤后，给予适量的药物进行止血，并进行伤口的缝合和消毒。
完成手术后，需要对大鼠进行恢复和护理，确保其能尽快恢复活动能力。
常见的护理措施包括监测和记录大鼠的行为活动、饮食和体重等指标，给予适当的抗生素预防感染等。
其次，评估指标是判断脊髓损伤模型的有效性和严重程度的重要依据。
常见的评估指标包括行为学测试、电生理测试和组织学观察等。
1. 行为学测试：通过观察大鼠的行为活动来评估其运动功能的恢复情况。
常用的行为学测试方法包括BBB评分系统（Basso, Beattie, Bresnahan Locomotor Rating Scale）、投掷测试（grid-walking test）等。
2. 电生理测试：通过记录大鼠的电生理信号来评估脊髓功能的恢复情况。
常用的电生理测试方法包括脊柱诱发电位（SSEP）和脊髓运动诱发电位（MEP）等。
3. 组织学观察：通过对损伤区域的组织学切片进行染色和观察，来评估脊髓组织的损伤程度和修复情况。
试论脊髓损伤后疼痛的动物模型分析
的。
１ 建 立动 物模 型研 究脊 髓损 伤后 疼痛 的优 缺 点
兴奋 毒 性 脊髓 损 伤 动物 模 型 的 准确 程 度 相较 于 其 他 几种 方 法 更 高 ，是通 过 在 实验 动 物 脊髓 内注 射兴 奋 性 毒 剂来 使 得 实验 动 物
在 医学 上 ，研 究 疼 痛 的 方 法 主 要 有 三 种 ， 即视 觉模 拟 评 分 产生 持 久性 的疼 痛 ，这 种 疼痛 更 加 接 近脊 髓 损 伤后 疼 痛 ，因此 更 法 、功能 成像 法 以及 动物 模 型法 三种 ，这 三种 方法 的具 体情 况 如 为准 确 。 下： ３ ． ５ 钳 夹性 脊髓 损 伤动 物模 型
伤 ， 轻 则 产 生 大 量 的疼 痛 ，重 则 会 造 成 运 动 困难 ，甚 至 完全 瘫 境 条件 的变 化 而变 化 ，便 于验证 。 痪 。 因此 ，对 于 脊髓 损 伤后 疼 痛 的研 究相 当的 重要 。在 医学 上 ， 是 ， 因为 导致 脊 髓损 伤 的 原因 以及 脊 髓损 伤 的 程度 都 不相 同， 因 从 实 际 出发 ，介 绍 了建 立 动 物 模 型 研 究脊 髓 损 伤 后 疼 痛 的优 缺 点 ， 并列 举 了几 种 常见 的 建立 脊髓 损 伤 后疼 痛 动物 模 型 的方 法 ， 希望 可 以给 他人 带来 一定 的参 考价 值 。 关键 词 ：脊 髓损 伤 ；疼痛 ：动 物模 型 通 常会 采 用建 立 符合 要 求 的动 物模 型 来研 究脊 髓损 伤 后疼 痛 ，但 ３ ． １ 挫伤 性 脊髓 损伤 动物 模 型
随 时 时 代 和社 会 的不 断 发展 ，脊 髓 损 伤 对 于 我 们 来 说 并 不 将 实 验 动 物 的 脊 髓 的 某 一 部 分 （ 分 为高位和低位两种 ） 横 向 截 是 一个 非 常 陌生 的病 症 ，很 多 从事 建 筑行 业 或 是体 育竞 技 行 业 的 断 ，根 据 实验 动物 的反 应 建立 模 型 。 人都 有 可 能会 患 有此 类 病症 ，脊髓 损 伤根 据 程 度 的不 同分 为 完 全 ３ ． ３ 光化 学性 脊 髓损 伤 动物 模型 损 伤 和部 分损 伤 两种 ，但 不论 是 哪种 程度 上 的 损伤 ，都会 在 几个 光化 学 性根 据 实 验 动物 的 反应 建 立 模 型是 近 年 来新 出现 的 … 月 以 内表 现 出剧 烈 的疼 痛 ，在 医学 上 就 被称 为 脊髓 损 伤后 疼 痛 。 种 方 法 ，一 般 用 于研 究 脊髓 缺 血 性损 伤 ，即使 用 化 学 涂料 ，通 过 脊髓 损 伤 后疼 痛 不但 会 影 响患 者 的 １ ３ 常 生 活 ，而且 由于疼 痛 的 持 系 列 的光 化 学 手段 凝 聚脊 髓 内部 的血 小 板 ，引发 脊 髓 的部 分 坏 续 性 和据 烈性 ，往 往还 会诱 发 患 者 的心 理 问题 ，甚 至 有 可能 会 引 死 ，根据 实验 动 物的 反应 建立 模 型 。 起患者的 自 杀 。因 此 ，对 于脊 髓损 伤 后 疼痛 的研究 是 十 分有 必 要 ３ ． ４ 兴 奋毒 性脊 髓 损伤 动物 模型
大鼠挫伤型急性脊髓损伤模型的制备及死亡原因分析
大鼠挫伤型急性脊髓损伤模型的制备及死亡原因分析黄怀;张旭;陈辉强;古菁;叶水林;廖晃怡【摘要】Objective To analyze and summarize the best way to establish the rat model of acute spinal cord injury (SCI), and to provide reference for the study of SCI. Methods Sixty Sprague-Dawley rats were randomly divided into group A and group B, with 30 rats in each group. Group A adopted positive nursing measures, while group B applied routine nursing. The mortality and complications were observed after one week. Results The BBB scores and slope angle values showed no statistically significant difference between the two groups on the first day after the establishment of the rat model (P>0.05), while showed statistically significant difference on the seventh day after the establishment (P<0.05). The mortality of group A was 26.67%, significantly lower than 56.67% of group B (P<0.05). Conclusion Effective nursing measures can raise the survival rate and reduce the mortality, thus is helpful to the animal experiment.%目的总结脊髓损伤(Spinal cord injury,SCI)标本成功制备需要特别注意的事项,为SCI的实验研究提供有价值的参考.方法 60只SD大鼠随机分为加强饲养组(A组)和常规饲养组(B组),两组均采用改良Allen法打击造成急性挫伤型SCI模型,分别实施预定饲养措施饲养1周,观察其并发症及死亡情况.结果模型制备后第1天A组和B组大鼠的BBB评分、斜坡试验角度值差异均无统计学意义(P＞0.05),模型制备后第7天,A 组和B组大鼠的BBB评分、斜坡试验角度值差异有统计学意义(P＜0.05).A组大鼠死亡率为26.67％,B组死亡率为56.67％,B组大鼠死亡率明显高于A组.结论严格、恰当的制备措施能够明显降低挫伤型SCI大鼠模型的死亡率,有效提高样本量.【期刊名称】《海南医学》【年(卷),期】2012(023)015【总页数】3页(P23-25)【关键词】SCI;大鼠模型;饲养【作者】黄怀;张旭;陈辉强;古菁;叶水林;廖晃怡【作者单位】广州军区广州总医院高压氧科,广东广州 510010;广州军区广州总医院高压氧科,广东广州 510010;广州军区广州总医院骨科医院,广东广州 510010;广州军区广州总医院高压氧科,广东广州 510010;广州军区广州总医院高压氧科,广东广州 510010;南方医科大学附属新会医院高压氧治疗中心,广东江门 529100【正文语种】中文【中图分类】R-332脊髓损伤(Spinal cord injury，SCI)是临床上常见的创伤，常带来无法恢复的功能障碍，对其损伤和恢复机制的研究是近年来的研究热点[1]，打击造成的挫伤型大鼠SCI模型，是目前与临床SCI相关性最好的一种[2]，制备并成功维持模型长时间存活，降低模型死亡率成为实验成功的关键。
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急性脊髓损伤动物模型制备
材料与方法
1.实验仪器及试剂
1.1实验仪器及耗材：
BL－420E+生物机能实验系统成都泰盟科技有限公司
生物信号导联电极（三向）成都泰盟科技有限公司
CZF/BZF SZC/SZB型非接触式电涡流传感器杭州华瑞仪器有限公司
信号采集针<银针>
ATZ-4,8型弹簧度盘秤永康市华鹰仪器有限公司
数字式脊髓损伤动物模型制备仪成都医学院基础医学实验技术中心
一次性注射器（1ml, 5ml, 10ml）上海双鸽实业有限公司
一次性使用无菌注射器（2ml）浙江欧健医用器材有限公司
金属骨针（克式针）上海浦东金环医疗用品有限公司
Argox Amigo 系列条形码打印机立象科技股份有限公司
常规手术器械上海医疗器械（集团）有限公司手术器械厂
缝合用针线上海医用缝合线厂、江苏省淮阴医疗器械厂
温度计江苏省无锡县标准计量管理所
棉签成都市华辉医疗器械有限公司
大鼠营养饲料华西医科大学动物供应中心
1.2 试剂
酒精 75%：自行配制
生理盐水：四川科伦药业股份有限公司产品批号：C070311 G1
碘伏：四川华天科技实业有限公司产品批号：20070202
阿司匹林肠溶片：南京白敬宇制药有限公司产品批号：061006
注射用青霉素钠80万单位：哈药集团制药总厂产品批号：A06086310 葡萄糖氯化钠：成都军区总医院产品批号：07020708
1.5%戊巴比妥钠：自行配制
1.3 主要试剂的配制
1.3.1 75% 酒精：
1.3.2 阿司匹林溶液：选取14片阿司匹林片剂，碾磨
1.3.3 青霉素溶液 8U/ml：用针筒量取10ml生理盐水，溶解80万单位1.3.4 1.5%戊巴比妥钠溶液的配制：
2. 实验方法
2.1 实验大鼠的选取及麻醉标准
该动物模型制备实验对大鼠有严格的限定，选取Spargue-Drawly 大鼠，年龄为77±1d，体重为260 ± g。
麻醉标准为雄性65mg/kg, 雌性40mg/kg。
2.2 实验大鼠手术
2.2.1 大鼠抓取、麻醉及固定：抓取手术大鼠，腹腔注射麻药。
大约三分钟左右，大鼠出现站立不稳，醉酒样步态。
四肢固定与手术台上，松紧适中，手术过程中注意观察四肢是否出现瘀血，注意按摩。
此时，可用大头针刺激大鼠尾巴，如果大鼠的反应不强烈，预示着可以开始手术。
2.2.2 大鼠打击区域的选定及手术：首先剪除大鼠胸椎区域毛，而后均匀喷洒碘伏溶液两倍备皮区域。
在大鼠背部脊柱有一个明显的凸起，经过大量的解剖实验证明该凸起为T11，从该凸起区域剖开皮肤2－3cm，逐步暴露筋膜、肌肉直到椎骨。
由该凸起出发向前数两个节段即T9，用手术刀小心刮去T9椎骨上的肌肉。
随后进行椎板切除术，移植暴露到硬脊膜。
2.2.3 打击装置的安装固定、调整及记录电极的挟持：该打击装置利用物体自由落体运动，打击金属杆从6.25mm,12.5mm,25mm,50mm四个不同的高度，以初速度为0，自由下落打击暴露的脊髓，压迫脊髓。
根据具体打击高度安装非接触式位移传感器，位于打击杆的圆盘上，距离小于30mm，并限定金属杆恰恰接触（未压缩）时为零高度。
电位变化记录夹，红色夹子挟持于T11棘突，黑色夹子挟持于T9同一水平面的肌肉和皮肤，在T13与T12椎骨之间的缝隙处，插入银针約1cm，白色夹子挟持银针顶端。
非接触式位移传感器信号输出线导入BZF-Ⅲ型电涡流式前置变换器并由此导入BL-420E+第二号通道。
电位变化记录夹采集信号导入BL－420E+第一号通道。
在BL-420实验系统软件选择实验通道输入信号，一号通道选择神经放电，二号通道选择
2.2.4 脊髓打击、金属杆和脊髓电位变化记录：从注射麻药60±1min后，释放选定高度的金属杆对脊髓进行打击。
电涡流传感器将会在空间上20微米，时间上20微秒采集金属杆在空间上物理位移所有点，并且输出一系列的电压信号，经过信号转换器输入电脑，程序将会自动生成一条能反应整个金属杆的速度－位移曲线。
电位记录将会从三个不同的地点采集脊髓受到打击时所释放的不规则的电位变化。
2.2.5 大鼠术后处理：打击完毕后，立即用消毒的手术缝合针线分别对肌肉、筋膜和皮肤进行缝合，每缝合完一层时用酒精对其消毒，缝合完皮肤
后在缝合区域均匀的喷洒碘伏。
由于大鼠在手术过程中会有一定量的血液丧失，术后会出现寒颤现象，因此需要对大鼠注射1ml（8U/ml）青霉素、5ml葡萄糖氯化钠溶液、1ml阿司匹林溶液，且在大鼠尾部固定条形码。
而后将大鼠平放于干燥的鼠笼重叠于装有45-50℃的温水中，保温7小时。
3.大鼠日常护理：大鼠急性脊髓损伤后，T9以下的神经对各个脏器及肌肉组织失去了制备，一般以瘫痪（后肢运动功能障碍）、尿潴留、大便异常和自噬症为主。
因此需要对大鼠进行细心护理，每天洗澡一次，注意对伤口的处理。
每天早晚两次对大鼠膀胱、后肢按摩，帮助排尿，记录尿量和PH 值；还需要用药，每天注射1ml（8U/ml）青霉素，前七天，1ml阿司匹林溶液，每天早晚两次5ml葡萄糖氯化钠溶液。
饲料和饮用水正常供应。