大鼠脊髓损伤动物模型的建立
脊髓造模大鼠实验报告
一、实验背景脊髓损伤(Spinal Cord Injury, SCI)是一种严重的神经系统损伤,可能导致截瘫、感觉丧失和膀胱功能障碍等一系列并发症。
为了深入研究脊髓损伤的病理生理机制,建立可靠的动物模型至关重要。
本研究旨在通过脊髓造模实验,探讨脊髓损伤后的病理变化,为后续治疗提供理论依据。
二、实验目的1. 建立大鼠脊髓损伤模型。
2. 观察脊髓损伤后的病理变化。
3. 探讨脊髓损伤的潜在治疗策略。
三、实验材料与仪器1. 实验动物:健康成年SD大鼠40只,雌雄不限,体重200-250g。
2. 仪器:手术显微镜、手术器械、电生理记录仪、脊髓损伤评分系统等。
3. 试剂:氯化钠、葡萄糖、生理盐水、肝素等。
四、实验方法1. 分组:将40只大鼠随机分为4组,每组10只。
A组为正常对照组,B组为脊髓损伤模型组,C组为脊髓损伤治疗组,D组为脊髓损伤对照组。
2. 建立脊髓损伤模型:采用改良Allen法建立大鼠脊髓损伤模型。
首先,对大鼠进行麻醉,然后暴露T10-T12节段脊髓。
使用显微器械在T11椎间隙向上剪开骨面,剔除脊髓正中上方的骨头,暴露脊髓。
接着,用重物坠击器从上方打击脊髓,造成脊髓损伤。
3. 观察指标:- 脊髓损伤评分:在损伤后第1、3、7、14天,对各组大鼠进行脊髓损伤评分,包括感觉功能、运动功能和膀胱功能。
- 脊髓病理学检查:在损伤后第1、3、7、14天,对各组大鼠进行脊髓病理学检查,包括脊髓组织学观察和免疫组化染色。
- 电生理检查:在损伤后第1、3、7、14天,对各组大鼠进行电生理检查,包括神经传导速度和神经肌肉电生理检查。
4. 治疗方法:C组大鼠在脊髓损伤后给予药物治疗,D组大鼠给予安慰剂治疗。
五、实验结果1. 脊髓损伤评分:与A组相比,B组大鼠在损伤后各时间点的脊髓损伤评分均显著升高,表明脊髓损伤模型建立成功。
C组大鼠在损伤后各时间点的脊髓损伤评分低于B组,表明药物治疗对脊髓损伤有一定的治疗作用。
2. 脊髓病理学检查:与A组相比,B组大鼠在损伤后各时间点的脊髓组织学观察和免疫组化染色均显示明显的病理改变,如神经元变性、胶质细胞增生等。
挤压性脊髓损伤大鼠模型的建立
挤压性脊髓损伤大鼠模型的建立罗玉玉;李晓东;孔麟麟;张文成;江毅【期刊名称】《天津医科大学学报》【年(卷),期】2007(13)4【摘要】目的:建立一种简便易行的挤压性脊髓损伤动物模型.方法:将大鼠随机分为3个实验组和1个对照组,3个实验组采用改良动脉夹置于椎管壁和硬脊膜之间横行压迫脊髓,分别持续5、15及30 s,对照组只暴露脊髓后缝合.测定各组手术损伤后即刻、7、14 d脊髓运动诱发电位(MEP)并进行改良Tarlov评分.结果:3个实验组手术损伤后MEP N1波潜伏期均明显延长,主波振幅显著降低或消失;改良Tarlov评分亦显著降低,随饲养时间延长MEP和改良Tarlov评分有不同程度恢复.结论:挤压5、15、30 s可分别复制出轻、中、重度脊髓损伤大鼠模型,此造模方法无需特殊实验仪器,简便易行,可重复性强,具一定推广价值.【总页数】3页(P576-578)【作者】罗玉玉;李晓东;孔麟麟;张文成;江毅【作者单位】武警医学院病理生理学教研室,天津,300162;天津市第三中心医院;武警医学院病理生理学教研室,天津,300162;武警医学院病理生理学教研室,天津,300162;天津市第三中心医院【正文语种】中文【中图分类】R744【相关文献】1.完全性骶上脊髓损伤后神经源性膀胱大鼠模型的建立及尿流动力学分析 [J], 许明;张泓;刘继生;张健;尹秀婷;张雨辰2.大鼠牵张性脊髓损伤动物模型的建立和评价 [J], 刘雷;裴福兴;杨效宁;李起鸿3.延迟应用重组人促红细胞生成素治疗大鼠急性挤压性胸脊髓损伤 [J], 严鑫平;杨刘柱;吴波;陈仲;谭伟4.大鼠脊髓损伤模型建立及神经源性肠功能障碍的初步评价 [J], 韩芸峰;王振宇;于涛5.大鼠创伤性脊髓损伤模型的建立 [J], 顾兵;金建波;李华南;王烁宇因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
大鼠牵张性脊髓损伤动物模型的建立和评价
大鼠牵张性脊髓损伤动物模型的建立和评价刘雷;裴福兴;杨效宁;李起鸿【期刊名称】《创伤外科杂志》【年(卷),期】2005(007)002【摘要】目的建立大鼠牵张性脊髓损伤的动物模型,探讨大鼠脊髓牵张性损伤的病理生理改变及临床意义.方法切除大鼠T13-L2双侧椎板,显露脊髓,用特制的脊柱撑开器放置在大鼠T12-L3椎体横突上,纵向牵张,同时用皮层体感诱发电位术中监测.随机分成空白对照组(A组)及实验(B、C、D组);皮层体感诱发电位P1-N1波幅下降30%组(B组)、50%组(C组)和70%组(D)组.观察波幅下降不同程度后,大鼠的神经行为学功能改变,应用HE、尼氏染色,光镜下观察脊髓组织形态结构,采用计算机图像分析系统进行定量分析.结果随着撑开距离的增加和时间的延长,波幅下降至术前波幅,B组与A组相比,CBS评分,神经元计数、神经元截面积及尼氏体密度的变化无显著差异.光镜下脊髓神经元体积稍小,尼氏体略减少;C组及D组,CBS评分、神经元计数,神经元截面积及尼氏体密度与A组比较有显著性差异(P<0.01),光镜观察神经元间隙增大,神经元退变,减少、溶解或坏死.尼氏体明显变浅或消失.脊髓结构破坏,出现片状出血灶,大量胶质细胞浸润.结论大鼠牵张性脊髓损伤动物模型具有可重复性,可定量且模拟临床,该模型的建立为进一步了解牵张性脊髓损伤的发病机理,筛选有效的预防治疗措施奠定了良好的基础.【总页数】4页(P106-109)【作者】刘雷;裴福兴;杨效宁;李起鸿【作者单位】第三军医大学西南医院骨科,重庆,400038;四川大学华西医院骨科,四川,成都,610041;四川大学华西医院骨科,四川,成都,610041;第三军医大学西南医院骨科,重庆,400038【正文语种】中文【中图分类】R651.2【相关文献】1.碱性成纤维细胞生长因子对大鼠牵张性脊髓损伤后脊髓功能影响的研究 [J], 刘雷;裴福兴;唐康来;许建中;李起鸿2.bFGF对大鼠牵张性脊髓损伤后脊髓神经元影响的实验研究 [J], 刘雷;裴福兴;唐康来;许建中;李起鸿3.大鼠牵张性脊髓损伤后胶质纤维酸性蛋白的表达及意义 [J], 刘雷;裴福兴;唐康来;许建中;李起鸿4.牵张性脊髓损伤动物模型制备及评价 [J], 吴岳;邹国耀5.碱性成纤维细胞生长因子对大鼠牵张性脊髓损伤后c-fos基因表达的影响 [J], 刘雷;唐康来;许建中;李起鸿因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
大鼠脊髓损伤模型建立及评价
大鼠脊髓损伤模型建立及评价[摘要] 脊髓损伤的治疗作为临床上的一大难题,建立良好的动物模型对于该项疾病的研究至关重要。
脊髓损伤的修复与再生成为研究重点,只有建立标准的、可重复性高的动物模型才能进行治疗方面的进一步研究。
本文旨在介绍大鼠脊髓损伤模型建立的方法,并对常用方法进行评价。
[关键词] 脊髓损伤模型建立引言脊髓损伤是目前临床上多发且致残率较高疾病,给患者家庭、社会带来沉重负担。
脊髓损伤患者生活质量明显低于正常人群[1]。
脊髓作为人体低级反射中枢,其损伤直接影响到人体各器官、组织的正常生理功能。
为此许多学者投入到了关于脊髓损伤的研究中,研究发现中枢神经损伤后仍具备一定的再生能力。
为了找寻更好的治疗方法,标准的、可重复性高的动物模型建立尤为重要。
近年来在脊髓损伤模型建立方面已有很大进展,在此回顾常用的脊髓损伤模型建立方法并进行相应评价。
Allen’s造模法早在1911年,Allen应用重物下落敲击的方法制备出脊髓损伤动物模型[2]。
实验过程中,可分别通过对重物重量、重物下落高度及损伤截断的调整而制作出不同程度、不同类型的损伤模型,由于该种方法具有最大限度的模拟现实损伤情况,不破坏硬脊膜以防止外源性物质进入脊髓内部形成干扰,避免手术过程中脊髓外露和脑脊液渗出等诸多优点[3],一直被沿用至今,但因该方法对于损伤程度、损伤位置等具有不定性,脊髓模型的严格标准性无法达到而存在着相应的不足。
随着研究的推进,相继出现了一些Allen’s造模法的改良方法。
1 将打击头置于硬膜上,打击头与重物连接,并用重锤线调节引导玻管后进行敲击[4]。
敲击过程中,由于引导玻管及重锤线的调节大大增加了中午落下时位置的准确度。
但是也有其不足之处。
首先打击头提前置于硬膜上,会造成脊髓实验预想之外的充血损伤;再者,打击头与重物相连接,之间的连接线会影响重物落于打击头的位置,从而出现偏差,易造成不同角度偏瘫;除此之外,此装置在敲击完成时不易做到迅速挪走重物,从而造成脊髓的进一步压迫性损伤。
脊髓继发性损伤大鼠动物模型的制作
脊髓继发性损伤大鼠动物模型的制作【摘要】目的观察继发性脊髓损伤大鼠。
方法用组织化学和电子显微镜投射方法观察大鼠脊髓前角运动神经原细胞的变化。
结果继发性脊髓损伤大鼠脊髓前角运动神经细胞化学组织染色的改变。
结论组织化学染色反应物减少及电子显微镜的超微改变证明脊髓继发损伤动物模型制作成功。
【关键词】继发性脊髓损伤;化学组织染色;大鼠急性脊髓损伤后开始时常为不完全性,最后结果常为两种损害机制引起:原发性脊髓损伤和继发性脊髓损伤(SSCI)。
继发性脊髓损伤为伤后几小时至几天发生的一系列损伤激活的自身破坏过程,使最初病灶周围原来完整的组织发生自身破坏性病变,周围神经功能损害逐渐发展。
所产生的脊髓损害远远超过了原发性损伤[1]。
1 材料与方法1.1 实验材料雄性SPF大鼠60只,电子显微镜,化学试剂。
1.2 实验动物分组本实验选用雄性健康SPF大鼠60只,体重260~300 g,正常对照组:20只。
动物模型组的组织化学染色:20只。
动物模型组的电子显微镜组:20只。
1.3 实验方法1.3.1 继发性脊髓损伤大鼠模型制备1%戊巴比妥钠腹腔麻醉动物(30 mg/kg),俯卧位固定于立体定位仪上。
以T10为中心暴露上下位锥板,咬除椎板,保持硬脊膜完整。
在T10阶段节段脊髓表面垫一曲度与脊髓表面一致的3 mm×8 mm塑料片,用30 g重物垂直压迫T10节段脊髓10 min,逐层缝合肌肉皮肤。
符合以下条件的大鼠归入损伤组:压迫时身体痉挛性颤动、尾巴痉挛性摆动、双下肢及躯体回缩样扑动;压迫后硬脊膜内充血或水肿,双下肢呈迟缓性瘫痪,斜板实验测定最大角度<30°。
对照组大鼠只暴露脊髓。
术后不同时间点处死动物,4%多聚甲醛灌注固定,无菌条件下取损伤节段脊髓组织约1.0 cm,液氮保存或石蜡包埋。
1.3.2 组织染色标本的取材对实验动物用1%戊巴比妥钠(40 ml/kg)腹腔麻醉后开胸,经左心室70滴/min滴入1%肝素钠的生理盐水500 ml,同时剪开右心耳。
挤压性脊髓损伤大鼠模型的建立
T ei u f pn l odw s n u e ya o s n o pes nuiga df da ei re sT ef — h jr o ia c r a d cdb nt t m rsi s moie r r locp. h r n y s i c a c o n i t af o
挤压性脊髓损伤大鼠模型的建立
罗玉玉 李晓东 , , 孔麟麟 张文成 江 毅 , , (. 1 武警医学院病理生理学教研室 , 天津 306 ;. 0 12 2 天津市第三中心医院)
[ 摘要】目的: 建立一种简便易行 的挤压性脊髓损伤动物模型。方 法: 将大 鼠随机分为 3 个实验组和 1 个对 照组 , 个 3 实验组采用改 良动脉夹置于椎管壁和硬脊膜之间横行压迫脊髓 , 分别 持续 5 1 、5及 3 , 照组只暴露脊髓后缝合 。 0S对
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第 1 卷 4期 3
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20 0 7年 1 2月
天 津 医 科 大 学 学 报
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大鼠脊髓慢性压迫损伤模型的建立
4 0只 随机 分 为 实验 组 3 0只 , 照 组 1 对 0只 。实 验 动 物 用
肤 。 术 过 程 中大 鼠后 肢 不 出现 后 肢 弹 动 , 捏 大 鼠尾 根 手 挤 部 可 引 出反 应 , 明不 造 成 脊 髓 损 伤 。麻 醉 苏 醒 后观 察 , 表
如 有 神 经 症 状 , 虑 为 术 中损 伤 所 致 , 死 , 计 入 统 计 。 考 处 不 术 中严 格 无 菌 操 作 , 后 应 用 青 霉 素 5天 预 防 感 染 。在 手 术
De at n o r o a dc, eS egigHop tlS e y n io ig,1 0 4 hn . p rme t fO t p e ist h n i h h n si h n a gLa nn 1 0 0,C ia a
1 b ta t 0be t e T e up s fh rsn s d s oet lha i l d f ho i c mpesdsia A s cl jc v h r oe e ee t t y s bi n nma mo eo r nc o rs n l r i p ot p u wa t a s a c e p c r jr e a t e poe os l meh ns f p l od ho ic mpes M e o sA w t - el l rb e od nuy n h to x lr p si e c a i o si r r nc o rs. t d a r w l b b r i it r b ms nc c h e s a eu
21 0 1年 1 0月 第 8卷 第 5期
大
鼠 脊 髓 慢
性 压 迫 损
周 长 嵩 ’ 安 春 厚
大鼠脊髓损伤模型构建方法
大鼠脊髓损伤模型构建脊髓损伤 ( spinal cord injury,SCI) 是一种致残率高、后果严重的中枢神经系统性损伤,给个人、家庭、社会带来了沉重的负担。
建立理想的动物模型是开展脊髓损伤相关研究的首要问题。
国内外已经建立了脊髓挫伤、压迫损伤、横断损伤、缺血损伤、牵张损伤和化学损伤等多种脊髓损伤动物模型。
目前常采用小型动物(大鼠、小鼠),这是由于其大多遗传背景明确,体内微生物可控制,其性状显著稳定,质量和规格也可任意选择,并且价格低廉,易于获得,便于管理。
Allen 于 1911 年采用重物坠落撞击动物脊髓背侧,复制出脊髓损伤模型,开创了脊髓损伤的标准化实验研究。
此后很多研究者在此基础上进行了许多改进。
皮质撞击装置、空气撞击装置等能精确控制撞击力度,具有很好的可重复性,但是费用很好,限制了推广应用范围。
采用重物自由下落打击在放置于大鼠脊髓表面的垫片上, 从而造出损伤模型。
模型的特点是:①模拟人类脊髓受损的过程, 临床相似度高。
②可以人为调整致伤的部位和范围。
③硬膜具有完整性, 保证无外源性成分侵入, 防止脑脊液外漏。
麻醉后,将大鼠背部至腰部的毛剔除干净。
将大鼠俯卧固定在手术板上。
用手从大鼠的肋骨向脊柱摸动,确定第十三胸椎(与第十三肋骨连接)的位置。
再沿脊柱棘突向前,确定第十胸椎的位置。
用碘伏消毒液对背部进行消毒。
以第十胸椎为中点,纵向切一道2-3cm的切口,切开皮肤,即可看到脊椎。
再次确定第十胸椎,用剪刀沿棘突将左右两侧的肌肉与棘突分离,直到看到椎板为止。
用缝针穿过分别左右两侧肌肉往两侧牵拉,暴露棘突和椎板。
用剪刀剪去棘突与棘突之间的肌肉,将第十棘突从第九和第十一棘突间游离出来。
可以明显看到脊柱的连接处,从连接处的小口将剪刀轻轻伸入,先向大鼠右侧方向,沿椎板向内深入,剪断椎板,相同操作剪断左侧椎板。
若是能顺利剪断椎板,则用镊子提住棘突稍一用力即可将棘突处的椎骨完整取下,暴露脊髓。
该过程是操作中最麻烦也最重要的过程,伸入剪刀时,千万不能伤到脊髓。
大鼠脊髓慢性压迫性损伤动物模型的建立
大鼠脊髓慢性压迫性损伤动物模型的建立胡志俊;卞琴;王拥军;刘梅;施杞【期刊名称】《脊柱外科杂志》【年(卷),期】2004(2)4【摘要】目的建立一种大鼠脊髓慢性压迫性损伤模型.方法应用平头不锈钢螺钉从大鼠C4椎体前侧钻入压迫脊髓腹侧,术后保留螺钉30 d,并用联合行为评分(CBS)、神经电生理、光镜、电镜检查进行综合评判.结果模型动物脊髓慢性压迫随着螺钉轻、中、重程度的不同,其术后行为学、运动诱发电位(MEP)及组织学观察符合脊髓慢性压迫症病理改变的特点.结论建立了大鼠脊髓慢性压迫性损伤模型,此模型制作简便,可重复性强,脊髓损伤能表现出不同的压迫深度,为进一步研究脊髓慢性压迫损伤病理机制奠定了基础.【总页数】4页(P216-219)【作者】胡志俊;卞琴;王拥军;刘梅;施杞【作者单位】200032,上海,上海中医药大学脊柱病研究所,上海中医药大学附属龙华医院;200032,上海,上海中医药大学脊柱病研究所,上海中医药大学附属龙华医院;200032,上海,上海中医药大学脊柱病研究所,上海中医药大学附属龙华医院;200032,上海,上海中医药大学脊柱病研究所,上海中医药大学附属龙华医院;200032,上海,上海中医药大学脊柱病研究所,上海中医药大学附属龙华医院【正文语种】中文【中图分类】R681.54【相关文献】1.大鼠脊髓慢性压迫损伤模型的建立 [J], 周长嵩;安春厚2.大鼠慢性压迫性脊髓损伤后EphA2在脊髓前角运动神经元中的表达 [J], 裴有智;康学文;汪玉良3.一种脊髓型颈椎病慢性压迫性动物模型的建立及评价 [J], 李成立;曲军杰;陈松;张为4.慢性渐进分级压迫大鼠脊髓损伤动物模型的研制 [J], 孔抗美;齐伟力;周强;王新家5.大鼠脊髓慢性压迫性损伤实验模型的建立 [J], 梁益建;孙善全;汪克建;余维华因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
大鼠脊髓撞击损伤模型的建立和鉴定
大鼠脊髓撞击损伤模型的建立和鉴定首先呢,咱得说说这模型建立。
这就像是给大鼠准备一场“意外事故”,不过这“事故”可是咱精心策划的哦。
咱得先把大鼠麻醉好,让它舒舒服服地睡上一觉,感觉不到接下来要发生的事儿。
就好像给它打了一针“魔法药水”,让它暂时进入了梦乡。
然后呢,咱要找准它脊髓的位置,这可就像是在地图上找一个重要的地标一样,得特别精准。
接着,就是关键的“撞击”环节啦。
咱用专门的仪器,就像是一个小小的“撞击小能手”,按照设定好的力度和角度,给大鼠的脊髓来一下。
这一下可不能轻,也不能太重,得拿捏得刚刚好,就像炒菜放盐一样,多一点少一点都不行。
要是太轻了,可能就达不到损伤的效果,大鼠的脊髓还跟没事儿人似的;要是太重了,那可能就直接把大鼠给“整坏”了,这实验也就没法继续下去啦。
等这“撞击”完成后,咱还得好好照顾这些经历了“事故”的小老鼠。
要给它们提供温暖舒适的小窝,还有充足的食物和水,让它们能慢慢恢复。
这就好比是一个受伤的运动员,需要好好休息和调养一样。
接下来就是鉴定环节啦。
这就像是给大鼠的脊髓做一场“全面体检”。
咱得从多个方面来看看这脊髓到底伤成啥样了。
比如说,咱可以观察大鼠的行为变化。
正常的大鼠那可是活蹦乱跳的,对周围的环境充满了好奇心。
要是脊髓真的受伤了,那它可能就变得有点“迟钝”啦,走路都不稳当,就像喝多了酒似的。
再比如说,咱还可以通过一些先进的技术,比如影像学检查,给脊髓拍个“X光片”或者做个“CT”啥的,看看脊髓里面的结构有没有发生变化。
这就像是给房子做安全检测,看看里面的钢筋水泥有没有出问题。
还有啊,咱还可以从细胞和分子水平来鉴定。
看看脊髓里面的细胞是不是死了一大片,或者一些重要的分子有没有发生改变。
这就像是深入到细胞的“小世界”里,去发现那些隐藏的“秘密”。
通过这些鉴定方法,咱就能清楚地知道大鼠脊髓撞击损伤模型是不是建立成功啦。
要是成功了,那咱就可以用这个模型来做更多的研究,探索脊髓损伤的治疗方法,说不定哪天就能找到让那些因为脊髓损伤而受苦的人重新站起来的神奇办法呢!。
大鼠Allen's脊髓损伤模型的建立及评价
大鼠Allen's脊髓损伤模型的建立及评价熊春翔;宗少晖;曾高峰;韦波;赵玉玺【期刊名称】《广西医科大学学报》【年(卷),期】2011(028)002【摘要】目的:建立并评价大鼠Allen's脊髓损伤模型,为进一步研究脊髓损伤机制提供实验动物参考.方法:SD大鼠60只,体重230~270 g,随机分为空白组(20只),手术组(20只),功能评价组(20只).空白组不做任何处理,手术组和功能评价组都采用Allen's法致伤.功能评价组作手术前后的BBB功能评分和斜板试验,空白组与手术组作病理切片HE染色.结果:功能评价组术前斜板度数和BBB评分均高于术后(P<0.05).手术组术后1 d脊髓神经元发生退变和坏死.结论:本实验建立的大鼠Allen's脊髓损伤模型方法可靠,易于复制,可用于脊髓损伤的相关研究.【总页数】3页(P215-217)【作者】熊春翔;宗少晖;曾高峰;韦波;赵玉玺【作者单位】广西医科大学研究生学院;广西医科大学第一附属医院脊柱骨病外科,南宁,530021;广西医科大学公共卫生学院;广西医科大学公共卫生学院;广西医科大学研究生学院【正文语种】中文【中图分类】R744【相关文献】1.大鼠脊髓损伤模型建立及评价 [J], 高萍;史皓威;王海飞;杨骏艺;任立群;闫凤霞2.大鼠脊髓打击器研制及其制备的脊髓损伤模型稳定性评价 [J], 陈霄雷;林雷雷;邵璐斐;丁惠强;杜金龙;张佳林;锁志刚3.大鼠脊髓源性少突胶质前体细胞体外机械拉伸损伤模型的建立与评价 [J], 马祥;祁月红;卫建峰;李燕则;毕竞;吕磊;郭永清4.小鼠Allen’s脊髓损伤模型的建立及评价 [J], 赵军;权正学;刘渤;卢旻鹏;蒋电明;欧云生5.大鼠脊髓损伤模型建立及神经源性肠功能障碍的初步评价 [J], 韩芸峰;王振宇;于涛因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
大鼠脊髓全横断损伤模型的建立
大鼠脊髓全横断损伤模型的建立
刘锐;游思维;刘惠玲;沈学锋;赵宇;鞠躬
【期刊名称】《神经解剖学杂志》
【年(卷),期】2005(21)3
【摘要】目前用于脊髓全横断的动物模型,常遗有部分未损脊髓组织,局部脊髓损伤范围很大,尤其是破坏了的血运扩大了继发性变性,造成了复杂的局部病理变化,致使难以分析治疗性脊髓伤区内移植的疗效。
因此迫切需要一种还原论式的脊髓横断模型,本实验设计了一种切割辅以吸除的方法,可以在局部造成平均约0.6mm的清洁横断区,同时保存脊髓腹、背动脉及脊髓背静脉的大鼠脊髓横断模型,并用H.E.染色法、神经丝(NF)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的免疫组织化学方法及生物素化的葡萄糖胺(BDA)的追踪方法检验损伤区及其两侧脊髓的组织反应。
【总页数】6页(P263-268)
【关键词】大鼠;脊髓全横断损伤;动物模型;免疫组织化学
【作者】刘锐;游思维;刘惠玲;沈学锋;赵宇;鞠躬
【作者单位】第四军医大学神经生物学教研室
【正文语种】中文
【中图分类】R744;R-332
【相关文献】
1.大鼠脊髓T11段全横断损伤模型的建立及护理 [J], 蔚洪恩;王春芳;李鹏飞;李静;王晓霞;王晋丽;索耀君
2.大鼠脊髓全横断损伤后神经源性膀胱模型的建立及评估 [J], 元小红;贺丰;江泽辉;赵赫;叶超;伍绍明;于海川;李春根
3.脊髓全横断模型大鼠损伤区白细胞介素17的表达 [J], 马超;徐震;王卓强;邓诗源
4.脊髓全横断模型大鼠损伤区白细胞介素17的表达 [J], 马超;徐震;王卓强;邓诗源;
5.大鼠脊髓全横断损伤模型的建立 [J], 黄纯海;李学军;黄军;袁贤瑞
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SD大鼠钳夹脊髓损伤模型的建立
SD大鼠钳夹脊髓损伤模型的建立李祥炎;陈建梅;崔晓萍;徐皓【摘要】目的探讨构建一种SD大鼠脊髓钳夹损伤模型,用于脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)的研究.方法将36只成年雄性SD大鼠随机分成A、B、C三组,每组12只.脊髓损伤组(A组):用动脉瘤夹钳夹大鼠第10胸椎对应脊髓.假手术组(B 组):只打开椎板,暴露脊髓,不造成SCI.正常对照组(C组):正常大鼠,不做任何处理.通过行为学观察(BBB评分)、HE染色和神经电生理检测进行判断.结果 HE染色结果:A组可见脊髓正常组织被破坏,损伤区可见血管破裂出血,有大片坏死灶,周围神经细胞肿胀变性,内有炎症细胞浸润.B、C两组基本一致,组织结构正常.BBB评分:B组术后1周功能恢复接近正常,评分20分.A组术后第2周开始恢复,到第3周基本停止,最终BBB评分低于6分,两组比较有明显差异(P<0.05).神经电生理(SEP)检测:A 组可以明显看到SEP的波峰趋于水平,且潜伏期无限延长,与B组相差显著(P<0.05).A组内动物BBB评分、SEP无显著性差异(P>0.05).结论通过动脉瘤夹钳夹SD大鼠T10脊髓,能够建立良好的脊髓损伤动物模型.%Objective To establish spinal cord injury ( SCI) model of SD rats at Tl0 with ring clamp and to provide reliable data for further study. Methods 36 male SD rats were randomly divided into 3 groups (12 rats per group) . SCI group( group A) ;the spinal cord of the rats were clamped on at Tl0 by aneurysm clip. Sham group( group B) : merely opened the neural scute and the spinal cord was exposed without injury. Normal controlled group(group C) : normal rats without any arrangement. Ethological study (BBBscores) ,histological and electrophys-iological tests were conducted. Results HE staining results in group B and group C were identical asnormal. Fragmented structure and necrosis could be seen in white and grey matter,and cellular swelling was detected in injured region in group A. BBB scores between group A and group B was significantly different(P<0.05). Electrophysiological ( SEP) demonstrated that peak-to-peak value trended horizon and latency was extended infinitly in group A , the difference between group A and group B was significant (P < 0. 05 ) . Conclusion A spinal cord injury model of SD rats can be established by clamped on Tl0 with aneurysm clip.【期刊名称】《局解手术学杂志》【年(卷),期】2012(021)006【总页数】3页(P596-598)【关键词】脊髓损伤;动脉瘤夹;SD大鼠;皮层体感诱发电位【作者】李祥炎;陈建梅;崔晓萍;徐皓【作者单位】三明市第一医院骨科,福建三明365000;南京军区福州总医院骨科,福建福州350025;南京军区福州总医院神经内科,福建福州350025;南京军区福州总医院骨科,福建福州350025【正文语种】中文【中图分类】R656.6脊髓损伤后经过一系列复杂的病理生理改变会引起脊髓组织内神经细胞发生不可逆死亡,最终导致瘫痪。
实验性大鼠脊髓损伤模型的制备及研究进展
现阶段有多种动物种类能够用于脊髓损伤模型 , 具 备 充
足 的 大 鼠 因来 源 , 整体成本也较低 , 护理和喂养难度也较低 ,
因此 应 用 较 为 广 泛 。然 而 , 大 鼠脊 髓 较 细 小 , 很难进行建模 , 对专 用 器 械 的 要 求 较 高 , 在 手 术 的过 程 中很 容 易对 脊 髓 产 生
【 文章编号1 1 6 7 3 — 5 1 1 0 ( 2 0 1 6 ) 2 3 — 0 0 7 8 — 0 2
近年来 , 我 国 经济 发展 不 断加 快 , 其 中脊 髓 损 伤 ( S C I ) 的
发病率越来越高 , 且 可 能 带 来 严 重 的并 发 症 及 严 重 症 状 , 自
物种 。
2 0 1 2年 , 胡炜 等 ] 基 于 定 量 半 横 断 刀 成 功 制 备 了 大 鼠半 横 断状缺损模型 , 其中 , 定量半横断刀更加菲薄锐利 , 可 以显 著 降 低 对 脊 髓 的牵 拉 损 伤 和 对 侧 挤 压 伤 害 , 利 用 纵 切 刀 进 行 纵
切之后 , 无 需将 纵 切 刀 拔 出 , 这 样 可 以显 著 降低 横 切 刀 的 误
理 想 化 的 动 物 模 型 是 进 行 脊 髓 损 伤 实 验 研 究 的 前 提 和 基础 , 通常来讲 , 理 想 化 的动 物 模 型 需 要 满 足 以下 几 个 方 面
的要 求 : ( 1 ) 可操 作 性 : 适用于批量生产和制作 , 并发症较少 、
伤, 一般来讲 , 纵 切 刀 的长 度 是 保 持 不 变 的 , 这 样 可 以获 取 较
大鼠脊髓T11段全横断损伤模型的建立及护理
s t e m c e l l t h e r a p y o f s p i n l a c o r d i n j u r y ( S C I ) . Me t h o d s S i x t e e n h e a l t h y Wi s t a r r a t s w e r e r a n d o ml y d i v i d e d i n t o 2 g r o u p s :c o n t r o l ro g u p ( o n l y l a mi n e c t o my , =8 ) n dS a C I g r o u p ( =8 ) . I nS C I ro g u p , a f t e r t h e s p i n o u s p r o c e s s nd a c o r r s e p o n d i n gl a mi n a o f v e r t e b r a
维普资讯
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山西医科大学学报 ( J S h a n x i Me d Un i v )2 0 0 7 年 : 1 0 0 7—6 6 1 1 ( 2 0 0 7 ) 0 6 —0 4 8 4 —0 3
大 鼠脊 髓 T l l 段 全横 断损伤 模 型 的建 立 及 护 理
蔚洪恩 , 王春芳 , 李鹏飞, 李
物学实验室 , 太原 摘要 : 目的 0 3 0 0 0 1 ;
静, 王晓霞, 王晋丽, 索耀君 ( 山西医 科大学医学实验中 心分子生
通讯 作者 , E - ma i l : Wa n g c h u n f a n g l @1 6 3 . or c n)
切断暴露的脊髓 Tl l , 夹除约 0 . 3—0 . 5 c m脊髓 , 对照组 仅行椎板切除术 。术后 1 , 3 , 7 , 1 4 , 2 1 d分别进行 B B B运动功能评分 。 对模型进行人工排尿 、 排便 、 悬 吊鼠尾等护理措施 。 结果 S C I 组所 有动 物在术后均表现 出典型的脊髓 截瘫症状 , B B B运动
简易大鼠脊髓完全横断伤模型的建立
周时后肢3个关节均可见轻微到广泛的活动,BBB评分为(5.14±0.80)分,其中1只大鼠BBB评分达7分。
2.3大鼠脊髓损伤组织学变化建模后4周时,对照组大鼠脊髓硬脊膜光滑、完整,表面无瘢痕、粘连。
挫伤组及横断组可见损伤区脊髓变细,硬脊膜表面不光滑,瘢痕形成。
镜下见对照组大鼠HE染色可见白质内神经纤维沿脊髓纵轴方向排列有序,灰质细胞分布均匀、排列紧密,灰白质界限清晰,细胞分布均匀,纤维排列有序(图1)。
NF200免疫组化可见沿脊髓纵轴方向排列有序的呈棕黄色的阳性神经纤维(图2)。
挫伤组大鼠HE染色可见脊髓组织部分坏死崩解造成的组织碎片、碎屑,灰白质界限不清,白质内神经纤维排列紊乱,可见较大空洞形成(图3)。
NF200免疫组织化学染色脊髓腹侧面可见沿纵轴方向排列的呈棕黄色的阳性神经纤维,但在坏死、瘢痕区未见明显阳性纤维(图4)。
横断组脊髓断端几乎完全被瘢痕填充,连接脊髓断端(图5),瘢痕内无再生神经纤维(图6)。
裹l3组大鼠后肢运动BBB评分法观察结果(分.z士s)注:分组对大鼠后肢功能BBB评分的影响有统计学意义(F=90.620.P=0.000)}且评分时间与分组有交互作用(F=16.854,P=0.000),3组两两比较差异均具有统计学意义(Pz0.000)圈1对照组脊髓纵切(HEX40)圈2对照组脊髓纵切(NF200×40)圈3挫伤组脊髓纵切(HE×40)田4挫伤组脊髓纵切(NF200×40)圈5横断组脊髓纵切(HE×40)图6横断组脊髓纵切(NF200X40)3讨论理想的SCI模型应具备以下三方面条件:(1)临床相似性,即制作的SCI模型应与临床相近似,尽量接近人类的情况;(2)可调控性,即可根据实际需要调整损伤强度,复制出不同损伤程度的SCI模型;(3)可操作性与可重复性,即对SCI模型制作的各关键步骤客观化、定量化,使其可信度高、可实施性强,能反映客观问题[2]。
大鼠急性脊髓损伤动物模型的建立及影像学分析
脊髓损伤所致的劳动力丧失、 生活不能自理及其
[员]
诸多严重并发症等问题日益困扰着整个社会
立标准、 可重复性好的 杂悦陨 动物模型是对 杂悦陨 深入研 测方法才能为进一步研究 杂悦陨 机制奠定坚实的实验基 猿援 员摇 动物模型的选择 摇 脊髓损伤模型种类繁多, 各有 其优缺点, 在应用时应根据具体实验研究目的和条件 作出科学的选择
砸葬凿蚤燥造燥早赠 蚤皂葬早藻 藻增葬造怎葬贼蚤燥灶 蚤灶 皂燥怎泽藻 皂燥凿藻造 燥枣 葬糟怎贼藻 泽责蚤灶葬造 糟燥则凿 蚤灶躁怎则赠援 摇 糟葬造 悦燥造造藻早藻,郧怎葬灶早扎澡燥怎 缘员园圆远园 ,悦澡蚤灶葬
在澡怎葬灶早 原 憎藻灶,在匀粤韵 再怎,栽粤晕 蕴蚤 原 造蚤葬灶援 阅藻责葬则贼皂藻灶贼 燥枣 韵则贼澡燥责葬藻凿蚤糟泽,栽澡藻 杂藻糟燥灶凿 匀燥泽责蚤贼葬造 粤枣枣蚤造蚤葬贼藻凿 燥枣 郧怎葬灶早扎澡燥怎 酝藻凿蚤鄄 憎藻则藻 葬灶葬造赠扎藻凿 枣燥则 藻增葬造怎葬贼蚤燥灶 燥枣 凿蚤葬早灶燥泽贼蚤糟 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶糟藻援 酝藻贼澡燥凿泽摇
员援 猿援 圆摇 悦栽 检查 摇 使用西门子 孕造怎泽 原 责燥憎藻则 型螺旋 悦栽 机, 病灶先采用 猿 耀 缘 皂皂 层厚, 员郾 缘 螺距以病灶为中心 描至 圆源园 泽, 层厚 圆 皂皂, 螺距为 员 。 行 悦栽 平扫, 确定手术部位最大中心层。各扫描一次扫 员援 猿援 猿摇 载 原 砸粤再 原 阅砸 成像检查 摇 采用西门子的平板 探测器技术 原 粤载陨韵酝 粤则蚤泽贼燥泽 灾载 孕造怎泽。 粤载陨韵酝 粤则蚤泽贼燥泽
员援 猿援 员摇 酝砸陨 检查 摇 手术后 员 澡 进行 酝砸陨 检查。采用 郧耘 园郾 圆栽 永磁型磁共振扫描机和 郧耘员郾 缘栽 超导型磁共 序列获取 栽 圆 宰陨 及梯度回波 ( 郧砸耘 ) , 常规扫描获取轴 位图像, 部分大鼠另行矢状位和 ( 或) 冠状位扫描; 扫 描层厚 圆 耀 猿 皂皂, 间隔 员 耀 圆 皂皂。 振扫描机;选用头线圈,采用 杂耘 序列获取 栽 员 宰陨、 云杂耘
大鼠脊髓撞击损伤模型的建立和鉴定
有大鼠截瘫,模型可重复性高。其脊髓病理学表现、神经行为学评分及神经电生理检测表明这种造模方法具有可逆性,
可作为理想的脊髓打击伤治疗研究的动物模型。
关键词 脊髓损伤;大鼠模型;HE 染色;Tarlov 评分;神经电生理
中图分类号:R965.1
文献标识码:A
DOI:10.19763/ki.2096-7403.2021.03.04
采用 SPSS 20.0 进行数据统计。计量资料符 合正态分布的以均数依标准差(x依s)表示,组间采 用单因素方差分析,组内比较采用 t 检验。P约0.05 为差异有统计学意义。
图 1 简易打击器的制作和应用
2结果 2.1 大鼠脊髓撞击损伤组织 HE 染色
A 组:神经元细胞呈三角形,尼氏体分散在胞 质中,胶质细胞轮廓清楚,神经纤维排列整齐、紧 密。B 组:神经元细胞减少,但轮廓仍清楚,神经纤
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实验中医药学
2021 年 第 22 卷 第 3 期
维排列稀疏,结构尚清。C 组:神经元细胞稀少,轮 廓欠清,可见空泡样变性,神经纤维排列欠清。D 组:神经元细胞更稀少,轮廓欠清,空泡样变性增 多,神经纤维排列不清。结果见图 2。
脊髓撞击损伤模型建立:SD 大鼠 32 只,按随 机数字法随机分为 A、B、C、D 4 组,每组 8 只。以 10%水合氯醛腹腔注射,麻醉后将大鼠俯卧位固 定于手术台板上,背部剃毛,常规消毒铺巾。以与 最低位肋骨相连的椎骨(T12)作为定位标志,以 T10 棘突为中心作长约 3 cm 的后正中切口,暴露 T9-11 棘突及椎板,切除 T10 椎板,充分暴露脊髓 T10 段。 将 1 mm 厚小垫片贴附在硬脊膜上,用 30 g 克氏 针沿套管从不同高度自由坠落(A 组坠落高度为 1.5 cm,B 组坠落高度为 2.0 cm,C 组 坠 落 高 度 为 2.5 cm,D 组坠落高度为 3.0 cm,撞击冲量=质量伊 高度),垂直打击直接造成脊髓损伤,撞击脊髓后 克氏针在脊髓表面停留 5 s。如局部脊髓迅速水 肿、瘀血,大鼠全身迅速回缩样抖动,提示撞击模 型成功。关闭切口,大鼠单笼饲养,用青霉素 4伊 104 U/d 抗感染,连用 3 d。 1.3 检测指标 1.3.1 组织学观察 术后 14 d 所有实验大鼠采 用 10%水合氯醛腹腔注射麻醉后,沿胸骨柄剪开 胸腔,暴露心脏,将灌注针头插入主动脉,快速用 生理盐水冲洗血液后,再用 4%多聚甲醛灌流固
大鼠牵张性脊髓损伤动物模型的建立和评价
牵张性脊髓损伤是脊柱矫形手术的常见并发症 之一。随着 CD、TSRH 等三维矫形器械及诱发电位 术中监护的相继应用[1,2],手术适应证不断扩大,脊 柱畸形矫正的效果越来越好。但随之而来的医源性 牵张性神经损伤仍然是个严重的问题[3]。而目前对 脊髓损伤的治疗效果不佳,预后难以预料,主要是因 脊髓损伤后的病理生理机制非常复杂,人们对此认
部位为中心取长约 1 . 5cm 的脊髓,用 4% 多聚甲醛固 定 24 小时,常规石蜡包埋,连续切片,片厚 5!m,备 用。对照组取相应部位脊髓。
6 组织形态学检查 从每只大鼠的切片中随机抽取分别做 hE、尼氏
体染色、光镜观察、神经元计数;每张切片随机选择
5 个视野,采用美国产 Nikon & Spot 图像分析仪测神 经元截面积和尼氏体密度。
脊髓神经元间隙稍增大尼氏体略减少神经元截面积及尼氏体密度稍下降脊髓功能出现轻微障碍说明csep波幅下降不超过30时其改变是可逆的这也与以往作者的报道相一致组则随撑开距离增大波幅有缓慢下降趋势脊髓功能明显损害脊髓灰质内可见大片出血灶神经细胞固缩坏死神经纤维排列紊乱呈脱髓鞘改变尼氏体明显减少
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Abstract: Objective To estabIish animaI modeIs of tractive spinaI cord injury in rats and investigate its pathophysioIogicaI changes and cIinicaI significance. Methods T12 - L3 spines were tracted IongitudinaIIy with a speciaI spinaI retractor that was put on proccessus transverses of T12 - L3 vertebrae of rat after exposing T13 - L2 spinaI cord via duaI Iaminectomy,at the same time,spinaI cord function was monitored by corticaI somatosensory evoked potentia(I CSEP). Rats were randomIy divided into the controI group(group A)and experimentaI group(s B,C,D groups)according to the ampIitude of CSEP P1 - N1 wave. The amount of decrease of the P1 - N1 wave was 30% in group B、50% in group C and 70% in gropu D respectiveIy. After traction,changes of function of neuraI behavior in rats were observed and morphoIogicaI structure of spinaI cord was anaIyzed guantitativeIy with image anaIysis system of computer. Results With traction of spine,compared with the group A,the group B had no marked difference in CBS score,neuron count,section area of neuron and nissI body density,but the there was a marked difference between C and D group(s P 0 . 01). Light microscope showed that neuron voIume was sIightIy smaIIer and nissI body was reduced IightIy in group B,neuron space was enIarged and neuron was degenerated,reduced,dissoIved or necrotic,nissI body was obviousIy dissoIved,and spinaI cord structure was destroyed in the groups of C and D. Conclusion The animaI modeI of tractive spinaI cord injury in rats is a reproducibIe,graded and it mimics cIinicaI picture. The modeI referred in this articIe provides a vaIuabIe assistance in further understanding etiopathoIogy and screening effective measures of therapy and prophyIaxis of this type of injury.
大鼠脊髓损伤模型构建
大鼠脊髓损伤模型构建大鼠脊髓损伤模型是研究脊髓损伤发生机制和治疗方法的重要工具。
建立有效的模型可以帮助研究人员深入了解脊髓损伤的病理生理过程,并为新的治疗方法的开发提供依据。
本文将介绍大鼠脊髓损伤模型的构建方法。
大鼠是常用的实验动物之一,其解剖结构与人类相似,且容易获取和饲养,因此被广泛应用于脊髓损伤的研究中。
大鼠脊髓损伤模型的构建涉及到手术操作和评估指标两个方面。
首先,进行手术操作是构建大鼠脊髓损伤模型的第一步。
操作前需要准备好所需的器械和材料,包括手术器械、麻醉药物、抗生素、止血药物等。
手术操作的步骤如下:1. 麻醉:将大鼠置于适当的麻醉装置中,使用合适的剂量的麻醉药物(如异氟醚)进行麻醉。
2. 暴露脊柱:在麻醉后,用适当的切口暴露大鼠的脊柱。
可以根据需要选择颈椎、胸椎或腰椎进行操作。
3. 脊髓损伤:通过钝性击打、压迫、挤压或利用脊髓牵拉装置等方式对脊髓进行损伤。
可以根据实验需要确定损伤的程度和方式。
4. 恢复和闭合:在损伤后,给予适量的药物进行止血,并进行伤口的缝合和消毒。
完成手术后,需要对大鼠进行恢复和护理,确保其能尽快恢复活动能力。
常见的护理措施包括监测和记录大鼠的行为活动、饮食和体重等指标,给予适当的抗生素预防感染等。
其次,评估指标是判断脊髓损伤模型的有效性和严重程度的重要依据。
常见的评估指标包括行为学测试、电生理测试和组织学观察等。
1. 行为学测试:通过观察大鼠的行为活动来评估其运动功能的恢复情况。
常用的行为学测试方法包括BBB评分系统(Basso, Beattie, Bresnahan Locomotor Rating Scale)、投掷测试(grid-walking test)等。
2. 电生理测试:通过记录大鼠的电生理信号来评估脊髓功能的恢复情况。
常用的电生理测试方法包括脊柱诱发电位(SSEP)和脊髓运动诱发电位(MEP)等。
3. 组织学观察:通过对损伤区域的组织学切片进行染色和观察,来评估脊髓组织的损伤程度和修复情况。