组织病理切片的制作过程
组织病理切片步骤
组织病理切片步骤全文共四篇示例,供读者参考第一篇示例:组织病理切片是临床病理学中一项非常重要的操作步骤,通过对组织标本进行切片、染色和观察,可以帮助医生准确诊断患者的疾病。
下面我们将介绍一下组织病理切片的具体步骤。
1. 标本采集:在进行组织病理切片之前,首先需要进行标本采集。
医生会根据患者的临床症状和检查结果,决定需要进行组织切片检查的部位,并采集相应的组织标本。
常见的标本包括活检标本、手术标本等。
2. 标本固定:采集到的组织标本需要进行固定处理,以保持细胞和组织的形态结构。
常用的固定剂包括福尔马林、4%的中性缓冲福尔马林等。
3. 标本包埋:固定后的组织标本需要进行包埋处理,即将组织标本置于蜡块中,以便进行切片。
包埋可以帮助维持组织的完整性和形态结构。
4. 组织切片:将包埋好的组织标本切割成薄片,即组织切片。
组织切片的厚度通常为3-5微米,切片时需要使用显微镜预先调整刀片角度和大小。
5. 组织染色:切割好的组织切片需要进行染色处理,以凸显组织细胞的形态和特征。
常用的染色剂包括伊红染、嗜酸性粒染、埃曼若染、普鲁斯染等。
6. 组织观察:染色后的组织切片可以放置于显微镜下观察,通过观察组织细胞的形态、核的大小和形态等特征,医生可以进行病理诊断。
7. 病理诊断:最终根据对组织切片的观察和分析,医生可以进行病理诊断,明确患者疾病的类型、程度和预后。
第二篇示例:组织病理切片是病理学检查中的重要步骤之一,通过组织切片的制备,医生可以观察组织的形态结构,从而对疾病进行准确的诊断和鉴别。
下面将介绍一下组织病理切片的步骤。
第一步:标本采集组织病理切片的第一步是采集标本。
医生会根据患者的症状和临床表现,选择合适的部位进行组织采集,通常是通过手术或活检的方式获取组织标本。
采集的标本要求完整、清晰,以确保后续的切片制备质量。
第二步:固定采集到的组织标本需要进行固定处理,以保持组织的结构和形态。
固定的目的是使细胞和组织中的蛋白质、核酸等不能再发生变性、氧化或降解,防止组织腐败和细胞溶解。
组织病理切片步骤
组织病理切片步骤1. 采集组织样本在进行组织病理切片前,首先需要采集患者的组织样本。
通常,医生会通过手术或活检等方式获得组织样本。
为了确保样本的准确性和完整性,医生会根据患者的情况进行选择。
2. 固定组织样本采集到的组织样本需要进行固定处理,以保持其形态结构和细胞组织的完整性。
常用的固定剂包括福尔马林等。
固定处理的时间和方法要根据不同的组织类型和病理分析的需要进行调整。
3. 预处理组织样本在进行切片之前,需要对固定的组织样本进行预处理。
这包括去除固定剂、脱水、清洗和浸泡等步骤。
通过这些预处理,可以将组织样本从固定剂中解除,并使其逐渐适应后续处理的要求。
4. 切片制备切片制备是组织病理学中非常重要的步骤。
在这一步骤中,医生会将预处理的组织样本切割成非常薄的切片。
常用的切片工具是显微切片机。
切片的厚度一般在4-6微米之间,以确保组织结构的清晰可见。
5. 染色切片制备完成后,需要对切片进行染色,以突显组织结构和细胞组分。
常用的染色方法包括血液学染色、组织学染色和免疫组织化学染色等。
不同的染色方法可以提供不同的信息,有助于医生做出准确的病理诊断。
6. 镜检染色完成后,医生会使用显微镜对染色的切片进行观察和分析。
通过观察组织结构、细胞形态和染色结果,医生可以了解组织的病理变化,并做出相应的诊断。
镜检是组织病理学中最核心的步骤之一。
7. 病理报告根据对切片的镜检结果,医生会撰写病理报告。
病理报告中包括对组织病变的描述、病变类型的确定以及可能的诊断建议等内容。
病理报告是医生向临床医生提供病理诊断的重要依据,也是指导治疗和预后评估的重要参考。
通过以上的步骤,组织病理切片可以提供丰富的病理学信息,为医生做出准确的诊断和治疗决策提供重要依据。
这一过程需要医生的精确操作和细致观察,以确保结果的准确性和可靠性。
对于患者来说,组织病理切片是了解疾病发展和制定个体化治疗方案的重要工具。
病理组织切片制作技术
病理组织切片制作技术病理组织切片制作技术病理组织切片常用的制作方法有三种。
即石蜡切片法,冰冻切片法和火棉胶切片法。
以石蜡切片法为代表,切片的基本制作过程是:组织取材→固定→冲洗→脱水→透明→浸蜡→组织包埋→组织切片→展片附贴→切片脱蜡→染色→脱水→染片透明→封固。
以上基本过程是互相联系的,任何一环节出现问题,都将使整个切片制作归于失败。
因此应细致、耐心、认真负责,并事先做好计划安排。
一、取材采取病料,要刀剪锐利,剪切时不可挤压,扯拉病料,以防人为损伤。
切取的工具要清洁。
采取病料越新鲜越好,一般不超过死后24小时。
应选择病变部与可疑病变部切取,切取时要由表及里,有浅入深并包括周围正常组织一部分。
特殊病料应根据器官的结构特点切取。
管状,囊状和皮肤组织应注意垂直切取(横切)。
带有薄膜的组织,要防止切时薄膜分离和脱落。
切取组织块大小,以1.5×1.5×0.3厘米为宜,最厚不宜超过0.5厘米。
组织块病变一面应平整光滑,另一面可不平整,以便包埋时辨认。
切取后,放入事先准备好的装有固定液的磨口玻璃广口瓶中,并做好标记。
二、固定固定的目的是迅速将组织细胞杀死,使细胞中的蛋白质,糖,脂肪等凝固,从而保持与活组织相似的结构状态。
材料取下后,应迅速固定。
固定液数量应为病理组织块的5到20倍。
由于一般把组织块浸入固定液后数小时,固定液渗入组织液的深度只达2到3厘米。
因此,可以放置冰箱内固定,使组织内酶失去作用,细菌也能停止滋生。
最常用的固定液是10%的福尔马林溶液:使用时,用40%的甲醛饱和水溶液10毫升,加水90毫升配成。
三、冲洗固定后的组织块,应将固定液洗去。
一般均用流水(自来水)冲洗12到24小时左右。
及时冲洗尚有停止固定的作用,防止固定过度,有利于制片染色。
冲洗时如不方便用流水冲洗,也可用较大容器盛装水浸洗,每隔相当时间换水一次。
整个浸洗时间比流水冲洗应稍长一些。
酒精固定的组织材料不需冲洗。
病理切片制作过程及注意事项
病理切片制作过程及注意事项简介病理切片是病理学中非常重要的工具,它能够帮助医生做出准确的诊断。
本文将详细介绍病理切片的制作过程以及需要注意的事项。
制作过程步骤1:组织取材•选择适当的组织进行切片制作;•确保组织样本取材的准确性和代表性。
步骤2:固定组织•使用合适的固定剂固定组织样本,如福尔马林;•确保固定时间和固定剂的浓度符合要求。
步骤3:脱水与清洁•将固定的组织放入酒精溶液中进行脱水处理;•清洁组织以去除固定剂和杂质。
步骤4:组织包埋•将脱水的组织置于熔蜡中进行包埋;•确保组织完全包裹,避免产生气泡。
步骤5:切片制作•使用专用的切片机将包埋的组织切成薄片;•控制切片的厚度和形状,确保质量。
步骤6:染色•使用合适的染色剂对切片进行染色,如血液样本使用血液染色剂;•控制染色时间和染色剂的浓度,确保染色效果。
步骤7:封片•将切片放在载片上,使用专用胶水将其封闭;•确保切片和载片的牢固性。
步骤8:质量控制•检查切片的质量,包括切片厚度、染色效果等;•确保切片符合病理学的要求。
注意事项注意事项1:安全•在病理切片制作过程中,要注意使用个人防护装备,如手套、口罩等;•避免接触有害化学物质,如福尔马林。
注意事项2:操作规范•按照病理切片制作的标准操作流程进行,确保结果的准确性;•遵守操作规范,减少操作失误的风险。
注意事项3:仪器维护•定期对切片机等相关仪器进行维护保养;•确保仪器的正常工作状态,减少故障的风险。
注意事项4:质量控制•对制作的病理切片进行质量控制,如切片的厚度、染色的均匀性等;•确保制作出的病理切片符合质量要求。
注意事项5:记录保存•对制作的病理切片进行记录,包括样本信息、制作过程、染色方法等;•妥善保存记录,方便后续查阅和追溯。
结论病理切片的制作过程需要经过多个步骤,每个步骤都需要严格操作和控制。
同时,要注意安全、遵守操作规范、定期维护仪器,并进行质量控制和记录保存。
只有这样,才能制作出高质量的病理切片,为病理学的研究和诊断提供可靠的依据。
组织病理切片制备
组织病理切片制备
组织病理切片的制作,首先医生取下组织病理标本,放在10%的中性福尔马林里进行固定,固定完之后标本送到病理科。
小标本需要固定4-6个小时,大标本需要固定6-12个小时,固定完之后由病理医生进行取材。
所谓的取材指把标本取出放在标本盒里,置于全自动脱水机中脱水16个小时处理标本。
处理过程包括组织进行固定、透明、脱水、浸蜡,处理完16个小时之后,病理技师把标本拿到包埋机上进行包埋,把病变组织放在蜡里,包埋成病理蜡块。
蜡块包埋完之后,病理技师把蜡块放在切片机上进行切片,切片大约需要切3-4μm的切片。
切完片子需要捞在病理玻片上,玻片再进行脱蜡,放在二甲苯中需要透明,之后放在全自动染色机中进行染色,再放在封片机里进行封片,这样才能制成病理切片,这个过程一般需要2-3天的时间。
法医学在法医学病理标本处理中的组织切片制作
法医学在法医学病理标本处理中的组织切片制作答案:法医学在法医学病理标本处理中的组织切片制作是通过将采集的组织样本固定、包埋、切片、染色等步骤,通过显微镜观察细胞结构,从而帮助法医学鉴定案件中的病理变化和死因。
在法医学病理标本处理中的组织切片制作过程中,首先需要采集病理标本,通常是通过活检或尸检获得。
随后,对标本进行固定处理,以保持组织结构的完整性。
然后,将固定后的组织样本进行包埋,即将组织置于蜡块中,使其易于切割。
接下来,使用组织切片机将标本切割成薄片,通常为几微米至几十微米的厚度。
随后,切片进行染色处理,以突出不同的细胞结构和病变特征,便于观察和分析。
通过法医学在法医学病理标本处理中的组织切片制作,法医学家可以通过观察组织切片的细胞结构、细胞核形态、染色质分布等特征,辅助判断病变类型、病理变化和死亡原因。
这对于破解案件真相、保护公共安全、维护司法公正等具有重要的意义。
深入讨论:在法医学病理标本处理中,组织切片制作是法医学鉴定的重要一环。
通过对组织切片的制作,可以帮助法医学家观察病理变化、病变类型、细胞结构等信息,从而为案件的司法鉴定提供客观依据。
不同的染色方法可以突出组织中不同的结构和物质,使得细胞和细胞器在显微镜下更清晰可见。
在实际操作中,法医学家需要严格遵循标本处理的规范和步骤,确保所得到的组织切片质量符合鉴定需求。
特别是在病理判断和诊断方面,组织切片的质量直接影响到法医学鉴定结果的准确性和可靠性。
因此,精细制备和准确染色是关键步骤,需要具备丰富的经验和专业知识。
总的来说,法医学在法医学病理标本处理中的组织切片制作是一项具有挑战性且重要的工作。
通过对病理组织样本的精细处理和观察,可以为法医学鉴定提供关键支持,促进案件的准确处理和司法公正。
组织病理切片步骤
组织病理切片步骤全文共四篇示例,供读者参考第一篇示例:组织病理学是一门研究疾病的科学,通过对组织和细胞的形态结构进行分析,可以帮助医生做出正确的诊断和治疗方案。
而组织病理切片是组织病理学的重要步骤之一,通过切割组织标本并染色,可以观察组织和细胞的形态结构,进而帮助医生做出诊断。
组织病理切片的步骤是一个繁琐而精细的过程,需要经过多个环节的处理才能得到准确的结果。
下面我们就来了解一下组织病理切片的具体步骤。
1. 标本获取:组织病理学的切片首先需要获得病理标本,这通常通过组织活检或手术取材来完成。
医生会根据患者的病情和需要进行相应的标本获取。
2. 组织固定:标本获取后,需要立即将组织标本放入10%的甲醛或其他固定剂中进行固定,以保持组织形态的完整性。
固定后的组织标本可以长期保存,并且能够在病理切片的过程中保持组织的形态结构。
3. 组织处理:固定后的组织标本需要进行脱水、清洁和浸蜡等处理,以使组织标本透明并且易于切割。
这一步通常需要用到甲醇和乙醇等有机溶剂,以及蜡浸渍处理。
4. 组织包埋:处理完的组织标本需要放入蜡液中进行包埋,以便于切割。
在包埋过程中,需要正确定位组织标本,并使其固定在蜡块中。
5. 组织切割:包埋后的组织标本需要用微切片机切成薄片,厚度通常在3-5微米左右。
切片时需要保持切割的准确性和统一性,以便后续的染色和观察。
6. 组织染色:切割后的组织标本需要进行染色,以显示组织和细胞的形态结构。
常用的染色方法包括赖氏染色、简单染色和特异性染色等。
7. 组织固定:染色后的组织切片需要进行固定,以保持染色的效果。
通常用乙醇和甲醇进行脱水和抗褪色处理。
8. 组织观察:固定后的组织切片可以放入显微镜下进行观察,医生可以通过观察组织和细胞的形态结构来做出诊断。
组织病理切片是一项非常重要的组织病理学技术,通过对组织标本的切割和染色,可以帮助医生做出准确的诊断,并为治疗提供参考。
希望通过以上介绍,您对组织病理切片的步骤有更深入的了解。
病理组织切片制作过程详解
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1.取材取材的好坏,直接影响切片的质量。
取材时,首先要有一把锋利的取材刀,在切割组织时要避免取材刀来回拖拉,切取的组织块厚薄要均匀,一般厚度以0.2 ~0.3cm 为适,较容易发脆的组织如甲状腺、肝脏、血块、淋巴结、大块癌组织等可适当厚一点,而脂肪组织、肺组织、纤维性肿瘤、平滑肌瘤等致密的或试剂不易渗入的组织应取薄一些;淋巴结应修掉两侧球冠,并尽量剔除周围的脂肪组织。
在取材中还应十分注意组织内是否有缝线或骨组织,如碰到不可避免的钙化组织,一定要非常小心。
在切取纤维组织、肌肉组织、胃肠道时,应注意纤维及肌肉的走向,取材时尽可能按与纤维平行走向切取为佳。
(1)材料新鲜:取材组织愈新鲜愈好,人体组织一般在离体后,动物组织在处死后迅速固定,以保证原有的形态学结构。
(2)组织块的大小:所取组织块较理想的体积为2.0cm ×2.0cm ×0.2cm ,以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部,但根据制片材料和目的不同,组织块的较理想体积也不同,如制作病理外检、科研切片,其组织块可以薄取0.1~0.2cm 即可,这样可以缩短固定脱水透明的时间,若制作教学切片厚取0.3 ~0.5cm ,这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。
(3)勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利,切割时不可来回锉动。
夹取组织时切勿过紧,以免因挤压而使组织、细胞变形。
(4)规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材,病理标本取材按照各病变部位、性质的不同,根据要求规范化取材。
(5)选好组织块的切面:根据各器官的组织结构,决定其切面的走向。
纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键,如长管状器官以横切为好。
组织病理切片制作流程(完整版)
组织病理切片的制作流程1.取材组织取材的方法是制作切片的一个重要程序,根据教学、科研及外检的具体要求取自人体(外科手术切除标本、活检标本、尸检标本)或动物,并确定取材的部位和方法。
取材者需要掌握解剖学、组织学、病理学的基本理论知识,还要掌握实际操作技术,每个组织器官的取材都有一定的部位和方法,不能任意切取组织作为制片材料,不然,无法达到教学、科研和临床诊断的目的,具体要求如下:(1)材料新鲜:取材组织愈新鲜愈好,人体组织一般在离体后,动物组织在处死后迅速固定,以保证原有的形态学结构。
(2)组织块的大小:所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm,以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部,但根据制片材料和目的不同,组织块的较理想体积也不同,如制作病理外检、科研切片,其组织块可以薄取0.1~0.2cm即可,这样可以缩短固定脱水透明的时间,若制作教学切片厚取0.3 ~0.5cm,这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。
(3)勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利,切割时不可来回锉动。
夹取组织时切勿过紧,以免因挤压而使组织、细胞变形。
(4)规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材,病理标本取材按照各病变部位、性质的不同,根据要求规范化取材。
(5)选好组织块的切面:根据各器官的组织结构,决定其切面的走向。
纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键,如长管状器官以横切为好。
(6)保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等,可用水冲洗干净后再放入固定液中。
(7)保持组织的原有形态:新鲜组织固定后,或多或少会产生收缩现象,有时甚至完全变形。
为此可将组织展平,以尽可能维持原形。
2.固定(1)小块组织固定法:这是最常用的方法,从人体或动物体取下的小块组织,须立即置入液态固定剂中进行固定,通常,标本与固定液的比例为1:4~20,但组织块不宜过大过厚,否则固定液不能迅速渗透。
故取组织块的大小一般为2.0cm×2.0cm×0.3cm。
组织病理切片制作流程(完整版)
组织病理切片的制作流程1.取材组织取材的方法是制作切片的一个重要程序,根据教学、科研及外检的具体要求取自人体(外科手术切除标本、活检标本、尸检标本)或动物,并确定取材的部位和方法。
取材者需要掌握解剖学、组织学、病理学的基本理论知识,还要掌握实际操作技术,每个组织器官的取材都有一定的部位和方法,不能任意切取组织作为制片材料,不然,无法达到教学、科研和临床诊断的目的,具体要求如下:(1)材料新鲜:取材组织愈新鲜愈好,人体组织一般在离体后,动物组织在处死后迅速固定,以保证原有的形态学结构。
(2)组织块的大小:所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm,以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部,但根据制片材料和目的不同,组织块的较理想体积也不同,如制作病理外检、科研切片,其组织块可以薄取0.1~0.2cm即可,这样可以缩短固定脱水透明的时间,若制作教学切片厚取0.3 ~0.5cm,这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。
(3)勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利,切割时不可来回锉动。
夹取组织时切勿过紧,以免因挤压而使组织、细胞变形。
(4)规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材,病理标本取材按照各病变部位、性质的不同,根据要求规范化取材。
(5)选好组织块的切面:根据各器官的组织结构,决定其切面的走向。
纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键,如长管状器官以横切为好。
(6)保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等,可用水冲洗干净后再放入固定液中。
(7)保持组织的原有形态:新鲜组织固定后,或多或少会产生收缩现象,有时甚至完全变形。
为此可将组织展平,以尽可能维持原形。
2.固定(1)小块组织固定法:这是最常用的方法,从人体或动物体取下的小块组织,须立即置入液态固定剂中进行固定,通常,标本与固定液的比例为1:4~20,但组织块不宜过大过厚,否则固定液不能迅速渗透。
故取组织块的大小一般为2.0cm×2.0cm×0.3cm。
组织切片
组织病理切片的制作过程1、取材取材的好坏,直接影响切片的质量。
首先要有一把锋利的取材刀,在切割组织时要避免取材刀来回拖拉,切取的组织块厚薄要均匀,一般厚度以0.2 ~0.3cm为适,较容易发脆的组织如甲状腺、肝脏、血块、淋巴结、大块癌组织等可适当厚一点,而脂肪组织、肺组织、纤维性肿瘤、平滑肌瘤等致密的或试剂不易渗入的组织应取薄一些;淋巴结应修掉两侧球冠,并尽量剔除周围的脂肪组织。
在取材中还应十分注意组织内是否有缝线或骨组织,如碰到不可避免的钙化组织,应与技术室讲明,在切取纤维组织、肌肉、组织、胃肠道时,应注意纤维及肌肉的走向,取材时尽可能按与纤维平行走向切取为佳。
具体要求如下:(1)材料新鲜:取材组织愈新鲜愈好,动物组织在处死后迅速固定,以保证原有的形态学结构。
(2)组织块的大小:所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm,以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部,但根据制片材料和目的不同,组织块的较理想体积也不同,如制作病理外检、科研切片,其组织块可以薄取0.1~0.2cm即可,这样可以缩短固定脱水透明的时间,若制作教学切片厚取0.3 ~0.5cm,这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。
(3)勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利,切割时不可来回锉动。
夹取组织时切勿过紧,以免因挤压而使组织、细胞变形。
(4)规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材,病理标本取材按照各病变部位、性质的不同,根据要求规范化取材。
(5)选好组织块的切面:根据各器官的组织结构,决定其切面的走向。
纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键,如长管状器官以横切为好。
(6)保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等,可用水冲洗干净后再放入固定液中。
(7)保持组织的原有形态:新鲜组织固定后,或多或少会产生收缩现象,有时甚至完全变形。
为此可将组织展平,以尽可能维持原形。
2.固定(1)小块组织固定法:这是最常用的方法,从人体或动物体取下的小块组织,须立即置入液态固定剂中进行固定,通常,标本与固定液的比例为1:4~20,但组织块不宜过大过厚,否则固定液不能迅速渗透。
病理切片的制作过程
1、7、1 修整组织将手术切取得乳腺肿瘤切成一个平整面,各组织块不宜太大,以便固定剂穿透与组织脱水等操作,通常以10 mm×10 mm×3mm或5mm×5mm×3mm为宜。
找到不同得部位切取2块,以备后用。
1、7、2 组织洗涤组织经修整后,组织中得福尔马林等必须冲洗干净,尤其就是含有重金属得物质存在。
因为残留在组织中得福尔马林,有得不利于染色,有得产生沉淀或结晶影响观察,所以组织修整后应冲洗12h左右。
1、7、3 组织脱水组织经洗涤后,组织中含有大量水分,由于水与石蜡不能互溶,所以必须将组织中得水分除去。
80%乙醇溶液:2h95%乙醇溶液:1h95%乙醇溶液:1h100%乙醇溶液:30min100%乙醇溶液:30min1、7、4 组织透明由于乙醇与石蜡不相溶,而二甲苯既能溶于乙醇又能溶于石蜡,所以脱水后还要经过二甲苯以过渡。
当组织中全部被二甲苯占有时,光线可以透过,组织呈现出不同程度得透明状态。
二甲苯Ⅰ:30min二甲苯Ⅱ:10min1、7、5 组织浸蜡浸蜡得目得就是除去组织中得透明剂(如二甲苯等),使石蜡渗透到组织内部达到饱与程度以便组织包埋。
浸蜡时间根据组织得透蜡时间较长,需3h左右。
浸蜡应在恒温箱内进行,并保持箱内温度在55℃左右,注意温度不要过高,以免组织发脆。
石蜡Ⅰ:1h石蜡Ⅱ:1h。
石蜡Ⅲ:1h1、7、6 组织包埋将经过透蜡得组织连同熔化得石蜡,一起倒入容器内,然后立即投入冷水中,使其立刻凝固成蜡块得过程。
包埋时,将纸盒放在温箱旁边,用镊子夹取组织平放于纸盒底部,,再用温镊子轻轻拨动组织,从温箱中取出盛放纯石蜡得蜡杯,沿壁倒入包埋用得纸盒中,速度要慢。
待石蜡凝固(约30min)后放入冰箱保鲜层内以备后用。
包埋时应根据组织材料、切片厚度、气候条件等因素,选择不同熔点得石蜡,新得石蜡一般要熬顿几次,以免石蜡固定后有气泡,影响切片。
用于包埋得石蜡得熔点在50~60℃之间。
病理切片制作的基本流程
病理切片制作的基本流程英文回答:The basic process of preparing pathological slides involves several steps. First, the tissue sample or specimen is obtained, either through a biopsy or surgical resection. This sample is then fixed in a solution, typically formalin, to preserve its structure and prevent decay. After fixation, the tissue is dehydrated using a series of alcohol solutions of increasing concentration. This removes water from the tissue, making it easier to handle during subsequent steps.Next, the dehydrated tissue is embedded in a solid medium, such as paraffin wax. This is done to provide support and facilitate the cutting of thin sections. The tissue is placed in a mold and surrounded with liquid wax, which solidifies as it cools. Once the wax has hardened, the tissue block is ready for sectioning.Sectioning involves cutting thin slices of the tissue block using a microtome. The microtome allows for precise control over the thickness of the sections, typically ranging from 3 to 5 micrometers. These sections are then mounted onto glass slides and heated to melt the wax, allowing the tissue to adhere to the slide.After mounting, the sections are stained to enhance the visibility of different cellular components. There are various staining techniques available, such as hematoxylin and eosin (H&E) staining, which is commonly used to visualize nuclei and cytoplasm. Other special stains may be used to highlight specific structures or substances, depending on the type of tissue being examined.Once stained, the slides are coverslipped to protect the tissue and prevent contamination. A coverslip,typically made of glass, is placed over the stained section and secured with mounting medium. The slides are then ready for examination under a microscope.Pathologists use these prepared slides to analyze thetissue and make diagnoses. They examine the cellular structures and patterns, looking for abnormalities or signs of disease. The findings are recorded in a pathology report, which is then used to guide patient management andtreatment decisions.中文回答:制作病理切片的基本流程包括以下几个步骤。
病理切片制作流程
固定标本。
从患者患处取下的标本应立即进行固定,通常使用10%中性福尔马林,固定时间依标本大小而定,大标本需浸泡24-48小时,小标本需浸泡6-8小时。
病理取材。
病理医生通过检查标本,找到病变部位,并切取典型病变组织,切取的组织块应放入特定的包埋盒内并编号。
脱水、透明、浸蜡。
组织经过梯度酒精脱水,以置换出组织中的水分,随后经二甲苯透明处理,最后浸泡在液体石蜡中,整个过程大约需要15小时。
组织包埋。
经过脱水、透明、浸蜡的组织被放入融化的石蜡中,待石蜡冷却凝固后,组织被石蜡包裹形成蜡块,这个过程称为包埋。
切片制备。
使用切片机将蜡块切成2~5微米厚的薄片(如300张纸的厚度),这些切片被放入45℃的温水中展平后,捞在涂有防脱剂的载玻片上,随后进行染色。
染色和封片。
对切片进行HE染色,这是一种常用的染色方法,首先进行二甲苯脱蜡,然后经过不同梯度的酒精水化,使用苏木素染液进行细胞核染色,随后用伊红进行细胞质和细胞外基质染色,最后用酒精脱去余色,二甲苯透明,完成染色过程。
封片时,在玻片上滴加一滴中性树胶,覆盖上清洁的盖玻片,避免产生气泡。
病理切片的流程范文
病理切片的流程范文病理切片是一种用于疾病诊断的重要方法,它通过将组织标本固定、处理、切片、染色和观察,从而得到组织结构的详细信息。
下面是病理切片的主要流程。
1.标本收集与固定:医生在病患进行手术或活检时,会取得病变组织标本。
标本收集应当严格遵循无菌操作原则,以保持标本的无污染状态。
收集到的组织标本需要立即放入含有适当的固定试剂的容器中,以防止组织腐败和细胞变性。
2.溶解和去水:收集的组织标本被放入一系列浓度不同的酒精中,以逐渐去除其中的水分。
此过程称为溶解和去水。
这一步通常需要一连串的酒精浓度渐变溶解过程,并配合组织处理机器进行多次处理。
3.渗透与包埋:当细胞内的水分被完全去除后,组织标本需要渗透和浸润在石蜡中,以增强其硬度和切片的稳定性。
标本首先被浸泡在组织处理机或真空滤波机中的低温石蜡溶液中,确保组织与石蜡完全接触。
然后,标本被浸入常温石蜡。
待组织,石蜡和溶剂之间的渗透平衡达到后,将标本置于标本夹中,加入液态石蜡,之后快速冷却或冷冻标本以完成固定。
4.切片:固定的组织标本被放入切片机中,使用特制的切片刀或刀片进行切割。
基本原理是标本切割面与刀片之间夹有细的临界介质,使切割更加精确。
切割的过程中,为了获取准备的切片,可以使用不同的切割模式、刀速和刀的旋转速度。
5.切片染色:切片得到后,需要进行染色以便观察细胞和组织结构。
常用的染色方法有血涂、朗格汉斯染色、文澜索尔法、肉眼观察染色法等。
这些染色方法可以突出显示细胞核、胞浆、组织结构和疾病所特有的变化。
6.显微镜观察与诊断:切片样本染色完成后,被放置在显微镜下进行观察和分析。
经验丰富的病理医生会通过观察细胞和组织结构,准确地诊断疾病类型和病情。
需要注意的是,以上流程是一个简单的概述,实际操作中可能会根据具体情况进行调整。
另外,不同的切片技术和方法也可能会在实际操作中进行选择和应用。
总之,病理切片作为一项重要的诊断方法,通过严格的操作和观察,能够为医生提供准确的组织结构和病变情况信息,为疾病诊断和治疗提供重要依据。
病理细胞学制片流程
病理细胞学制片流程
光学显微镜切片制作技术最简单的切片法是徒手切片,但是由于组织块往往十分柔软,切削很困难,而且无法得到十分菲薄的切片,因此必须先用某些特殊物质渗入组织块的内部起支持作用,并将整个组织块包住,然后再用精密的切片机制作切片,才能获得良好的效果。
这种方法称为包埋法,包埋的物质称为包埋剂。
分别有石蜡切片、火棉胶切片、冰冻切片等,它们各有长处,可以根据需要选用,但是使用得最多的还是石蜡切片技术。
石蜡切片的制作过程主要包括:取材,固定,脱水,透明,透蜡,包埋,切片,贴片,染色,透明,封藏等步骤。
组织病理切片制作步骤
组织病理切片制作步骤
本文档将介绍组织病理切片制作的完整步骤。
1. 标本收集和处理
1.1 收集患者的组织标本,并确保其完整性和准确标记。
1.2 将组织标本置于合适的中,用适当的缓冲液或固定剂进行
处理,以保持其形态结构并防止腐败。
2. 标本处理和包埋
2.1 用合适的方法将标本固定在组织处理机中,例如将其浸泡
在缓冲液中或使用组织处理机进行自动处理。
2.2 将处理后的标本转移到合适的包埋中,通常使用蜡或树脂
作为包埋材料。
3. 切片制作
3.1 使用专业的旋转切片机将包埋的组织标本切割成薄片,通
常为4-5微米。
3.2 切割后的切片应浸泡在水中,以去除任何残留的包埋材料。
3.3 将切片转移到玻片上,并确保它们平整地展开。
4. 染色
4.1 选择适当的染色方法,如常规组织染色法(H&E染色),以突出组织的形态结构。
4.2 将切片浸泡在染色液中,按照染色方法的要求进行染色处理。
4.3 染色后,通过洗涤和脱水步骤去除多余的染色剂。
5. 盖片和封口
5.1 在切片干燥后,将一小滴透明胶液滴在切片上。
5.2 轻轻放置盖片在切片上,确保无气泡和皱纹。
5.3 用封口剂封住盖片和玻片的边缘,以保护切片并防止其损坏。
6. 观察和存储
6.1 使用显微镜观察切片,检查组织的结构和病理变化。
6.2 将切片存储在干燥、阴凉和避光的地方,以确保其长期保存和保持质量。
以上是组织病理切片制作的完整步骤。
每个步骤都需要仔细操作和适当的设备来确保切片的质量和准确性。
病理切片制作过程及注意事项
病理切片制作过程及注意事项一、引言病理切片是病理学诊断的重要工具,通过对组织标本的切割和染色,可以观察组织的形态和结构,从而帮助医生做出准确的诊断。
本文将详细介绍病理切片制作的过程,并提供一些注意事项。
二、病理切片制作过程1. 标本采集医生需要根据患者的临床情况决定进行组织检查。
在手术或活检过程中,医生会取得一小块患者的组织标本。
这个标本应该是代表性的,并且应该包含足够数量的组织以供分析。
2. 样本固定为了保护组织结构并防止腐败,标本需要被固定。
常用的固定剂包括福尔马林和乙醛等。
固定时间通常为24-48小时,但不同类型的组织可能需要不同的固定时间。
3. 组织处理在固定完成后,标本将进行脱水和清洁程序。
脱水是将水从标本中逐渐去除的过程,常用的脱水剂包括乙醇。
清洁程序包括将固定剂和其他可能存在的污染物从标本中去除。
4. 标本包埋在组织处理完成后,标本需要进行包埋。
这一步骤将固定的组织浸入熔化的石蜡中,使其变得坚硬并易于切割。
标本通常通过专用工具和模具进行包埋。
5. 组织切片在标本包埋完成后,使用病理学切片机将固定的组织切成非常薄的切片。
这些切片通常为3-5微米厚,并使用玻璃载玻片收集。
6. 制作玻片切割好的组织切片需要制作成玻璃载玻片,以便于观察。
在玻璃载玻片上涂抹一层特殊的胶水或蛋白质溶液,然后将组织切片轻轻放置在上面。
7. 染色染色是病理切片制作过程中非常重要的一步。
染色可以增强对组织结构和细胞形态的观察。
常用的染色方法包括血涂片染色、组织切片染色和免疫组化染色等。
8. 封片在染色完成后,将切片封闭在玻璃载玻片上,以保护切片并延长其寿命。
封片通常使用特殊的胶水或蜡封闭。
9. 制备标签为了方便识别和管理,每个病理切片都需要制作标签。
标签上通常包含患者信息、样本编号、日期和医生签名等。
三、注意事项在进行病理切片制作过程中,有一些注意事项需要遵守,以确保结果的准确性和质量。
1.样本采集:必须确保样本的代表性和完整性。
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组织病理切片的制作过程1.取材组织取材的法是制作切片的一个重要程序,根据教学、科研及外检的具体要求取自人体(外科手术切除标本、活检标本、尸检标本)或动物,并确定取材的部位和法。
取材者需要掌握解剖学、组织学、病理学的基本理论知识,还要掌握实际操作技术,每个组织器官的取材都有一定的部位和法,不能任意切取组织作为制片材料,不然,无法达到教学、科研和临床诊断的目的,具体要求如下:(1)材料新鲜:取材组织愈新鲜愈好,人体组织一般在离体后,动物组织在处死后迅速固定,以保证原有的形态学结构。
(2)组织块的大小:所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm,以使固定液能迅速而均匀地渗入组织部,但根据制片材料和目的不同,组织块的较理想体积也不同,如制作病理外检、科研切片,其组织块可以薄取0.1~0.2cm即可,这样可以缩短固定脱水透明的时间,若制作教学切片厚取0.3 ~0.5cm,这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。
(3)勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利,切割时不可来回锉动。
夹取组织时切勿过紧,以免因挤压而使组织、细胞变形。
(4)规取材部位: 要准确地按解剖部位取材,病理标本取材按照各病变部位、性质的不同,根据要求规化取材。
(5)选好组织块的切面:根据各器官的组织结构,决定其切面的走向。
纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键,如长管状器官以横切为好。
(6)保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等,可用水冲洗干净后再放入固定液中。
(7)保持组织的原有形态:新鲜组织固定后,或多或少会产生收缩现象,有时甚至完全变形。
为此可将组织展平,以尽可能维持原形。
2.固定(1)小块组织固定法:这是最常用的法,从人体或动物体取下的小块组织,须立即置入液态固定剂中进行固定,通常,标本与固定液的比例为1:4~20,但组织块不宜过大过厚,否则固定液不能迅速渗透。
故取组织块的大小一般为2.0cm×2.0cm×0.3cm。
(2)注射、灌注固定法:某些组织块由于体积过大或固定液极难渗入部,或需要对整个脏器或整个动物体进行固定。
这时宜采用注射固定或灌注固定法。
将固定液注入血管,经血管分支到达整个组织和全身,从而得到充分的固定。
(3)蒸汽固定法:比较小而厚的标本,可采用锇酸或甲醛蒸汽固定法。
如血液涂片,则应在血片未干燥前采用锇酸或甲醛蒸汽接触固定。
最常用的固定液有10%甲醛固定液和95%乙醇固定液。
3.脱水透明标本经过固定和冲洗后,组织中含有较多的水分,必须将组织块的水分置换出来,这一过程叫做脱水。
无论是用蜡切片,还是用火棉胶切片,都必须除去组织中所含水分,因含水组织与蜡、火棉胶等包埋材料不相容,常用的脱水剂为一系列不同浓度的乙醇。
脱水的步骤是:80%、90%、95%、100%各种浓度乙醇2小时,此过程可用脱水机自控完成。
丙酮也是一种脱水能力很强的脱水剂,但因其脱水能力很强,对组织有剧烈收缩作用,在制作科研、教学切片时一般不用该试剂。
因乙醇、丙酮等不溶于蜡,还要经过一个能溶于蜡的溶剂替代过程称为透明。
常用的透明剂有二甲苯、三氯甲烷、水酸甲酯等。
4.浸蜡、包埋(1)使蜡浸入组织中,取代组织中含有的透明剂。
(2)包埋:将浸蜡后的组织置于融化的固体蜡中,蜡凝固后,组织即被包在其中,称蜡块,此过程称为包埋。
5.切片和贴片(1)修整蜡块:可视其组织的大小,在组织边缘约0.1~0.2cm处,切去余蜡部分,否则易造成组织皱缩不平。
(2)准备好切片用具:切片刀、毛笔、眼科镊子(弯)、漂烘温控仪(3)安装蜡块:将修好的蜡块安装在金属或木制持蜡器上。
(4)安装切片刀:将切片刀安装在切片机的刀台上,把刀台上的紧固螺丝旋紧,使切片时不产生振动,能保持一定的切片厚度。
(5)切片的厚度:切片机的厚度调节器上刻有0~50μm或0~25μm,可任意选择其厚度,蜡切片的厚度一般在4~6μm。
(6)切片(7)铺片:用眼科镊子镊起蜡带轻轻平铺在40~45℃的水面上,借水的力和水的温度,将略皱的蜡带自然展平。
(8)贴片、烘片:待切片在恒温水面上充分展平后,将蜡片捞到载玻片的中段处倾去载玻片上的余水,置入60~65℃恒温箱或切片漂烘温控仪的烘箱烤片15~30分钟,脱去溶化组织间隙的蜡。
6.染色和封片常用的染色法是木素-伊红(Hematoxylin-Eosin)染色法,简称H.E 染色法。
这种法对任固定液固定的组织和应用各种包埋法的切片均可使用。
木素是一种碱性染料,可使组织中的嗜碱性物质染成蓝色,如细胞核中的染色质等;伊红是一种酸性染料,可使组织中的嗜酸性物质染成红色,如多数细胞的胞质、核仁等在H.E染色的切片中均呈红色。
H.E染色程序如下:脱蜡、脱苯、复水、染色、脱水、透明、封固常规木素染色中的对比染色是用伊红,近年来在英、美的一些实验室则采用焰红(phloxine),此外也有用桔黄G(OrangeG)、比布里希猩红(Biebrich scarlet)、波尔多红(Bordeaux red)等作为对比染色。
伊红为染胞质、胶原纤维、肌纤维、嗜酸性颗粒等常用的染料。
1 . 取材取材的好坏,直接影响切片的质量。
医生在取材时,首先要有一把锋利的取材刀,在切割组织时要避免取材刀来回拖拉,切取的组织块厚薄要均匀,一般厚度以0.2 ~0.3cm为适,较容易发脆的组织如甲状腺、肝脏、血块、淋巴结、大块癌组织等可适当厚一点,而脂肪组织、肺组织、纤维性肿瘤、平滑肌瘤等致密的或试剂不易渗入的组织应取薄一些;淋巴结应修掉两侧球冠,并尽量剔除围的脂肪组织。
在取材中还应十分注意组织是否有缝线或骨组织,如碰到不可避免的钙化组织,应与技术室讲明,在切取纤维组织、肌肉、组织、胃肠道时,应注意纤维及肌肉的走向,取材时尽可能按与纤维平行走向切取为佳。
2 . 固定固定是技术室工作的第一步,也是在整个制片过程中无法补救的一步。
所谓“固定”,就是组织离体后,用各种办法使其细胞的物质尽量接近其生活状态时的形态结构和位置的过程。
固定的目的是为了防止组织细胞自溶与腐败,防止了细胞的酶对蛋白质的分解作用,使细胞的各和成分如蛋白质、脂肪、碳水化合物或酶类转变为不溶性物质,以保持原有的结构与生活时相仿。
另外,组织固定后,均呈一定的硬化状态,增加组织韧性,而且不易变形,有利于以后的组织处理。
所以组织一旦离体必需及时固定,固定液的量应为组织的5倍。
固定的关键主要与固定的及时性、固定液的选择、固定液的浓度、固定的温度和时间有关。
最常用的固定液为10%福尔马林。
笔者认为,10%福尔马林由于受到福尔马林的质量、使用时的挥发和取材时带入的水分影响,浓度被降低致组织固定不足,而高浓度的福尔马林,降低了对组织的穿透性,形成围固定好而中央固定不到的现象。
通过实践,本人认为以酸性12~15%的福尔马林最佳。
大标本(2cm厚)一般需要6~12个小时,小标本一般需要3~6个小时;当室温低18℃时,可在37℃以下的温箱加温4~6个小时。
由于HE染色最佳着色PH为3.5~4.5, 中性福尔马林对木素染色有一定影响,细胞核容易发灰,核染色质不佳。
所以, 尽管中性福尔马林对抗原有很好的保存作用,但酸性福尔马林对绝大多数抗原来说也有很好的保存作用,所以在没有特别处理的情况下常规HE用12~15%酸性福尔马林也可以(每100毫升12~15%福尔马林液加5毫升冰醋酸)。
骨髓、结缔组织固定以Bouin液为佳,经Bouin液固定后的组织必须流水冲洗4小时以上。
有条件的单位可根据不同要求选用二种或二种以上的固定液;少数单位还可建立组织冷冻库,以便适应各种特殊的处理要求。
3. 水洗固定后水洗(10~20分钟),通常被很多人所忽视,而水洗不彻底,容易造成脱片和染色不鲜艳。
对需做免疫组织化学的组织,更不应当忽视。
福尔马林不利于组织块抗原的保存4 . 脱水和透明所谓脱水就是利用脱水剂将组织的水分置换出来,以利于有机溶剂的渗入,这一过程称为脱水。
脱水是否彻底,直接关系到组织是否能充分透明,而脱水过度(原因是组织在纯酒精时间过久,发生组织质地发生变化)容易造成组织发脆。
造成组织发脆的原因还有加温(温度超过35℃)、脱水剂加有丙酮、浸蜡用的蜡中二甲苯过多等等。
一般我们总认为组织发脆跟高浓度酒精有关,而忽视了与低浓度的酒精关系,其实低浓度的酒精具有强大的穿透力,比纯酒精更容易渗透到组织块部使之脱水,组织如果在低浓度酒精里充分脱水,在高浓度酒精里只需脱去从低浓度到高浓度之间的水份,因此,仅需短时间就可完成,如果这时不缩短纯酒精的时间,便会引起组织发脆;如果脱水时加温,使用丙酮,还可引起组织收缩,并影响免疫组织化学的标记。
为了使蜡浸入到组织块,必须经过一种既能与脱水剂混合,又能与蜡相溶的媒介物质,这个过程称透明。
目前最好的透明剂是二甲苯。
很多人认为二甲苯极容易使组织发脆,这个观点很片面,在常温下,如果不是时间过长(超过24小时以上)二甲苯并不会引起组织过份发脆,相反会使某些组织结构比较质韧的组织:比如子宫肌瘤等相当好切),但是当二甲苯温度超过35℃以后,极易引起组织发脆。
所以本人认为,大小标本最好分开脱水,一般情况下,大标本脱水时间(室温18℃)以80%酒精2小时、95%酒精(2道)各1个半小时至2小时、纯酒精(3道)各1个半小时至2小时,二甲苯(2道)各30-60分钟为宜;小标本脱水时间应相应缩短。
脱水时间长短,与室温高低有密切的相关。
我们在实践中发现,室温在12~15℃时,可作为一个临界温度围。
当室温高于此温度围时,组织容易脱水,可适当缩短脱水时间;而室温低于该温度围时,应适当延长脱水时间(如能保证在一个恒定的温度下最佳)。
更换试剂,应以量为基础,定量更换,不能等到切片不好时再去更换。
否则,至少会有2~3批组织切片不好。
根据我科经验,如试剂用量为500ml,每500个蜡块更换一次为宜。
5. 浸蜡组织透明后,在熔化的蜡浸渍的过程称为浸蜡。
用其他浸透剂(如火棉胶、明胶等)渗入组织部的过程可称为浸透或透入。
浸蜡温度过高(超过60℃),在蜡加入二甲苯蜡或由于透明时带进的二甲苯过多,都会导致组织发硬,还会使组织的抗原受到破坏;所以作者主浸蜡用的蜡熔点在56℃(三道),第一道:蜡30分钟;第二道:蜡90分钟;第三道:蜡,90分钟。
浸蜡温度控制在56~58℃左右。
(第一道也可用硬脂酸蜡1:3混合浸蜡,不仅可软化组织,特别适用于比较韧、硬的组织,而且由于硬脂酸是弱酸性的,对细胞核有媒染作用,核浆比鲜明,但容易脱片;同时对疏松组织容易散片)。
有条件的可以每天打开第一道蜡的盖子,让二甲苯挥发。
浸蜡所用的蜡如有杂质尽可能过滤,以防附在组织上,造成切片刀刀口受损,或切片破碎和划痕增多。
6. 包埋用包埋剂来支持组织的过程称包埋。