S433D氨基酸分析仪测定水溶肥料中氨基酸的含量
氨基酸分析仪仪器验证方案
日期：
****制药股份有限公司仪器验证文件
测值 Fm（mL/min） 。每测完一次，改变泵流量，几分钟后再恢复到原设定值，稳定后按上述方法收集流动 相、称重。重复测量三次，三次结果的平均值为流量的实测值。按式（2） 、 式 （ 3）计算泵 1 的 SS 和 SR。
Fm
=
W
W ρ t
****制药股份有限公司仪器验证文件
Sykam S433D 型氨基酸分析仪 验证报告
类 别： 部 门：验证委员会 编 号： 页 码： 共 15 页，第 1 页
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� 替代： 年 年 月 月 日 日
起草部门： 审 核：
审阅会签：
（验证委员会）
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准： 年 月
年 日
月
日
实施日期：
复印数： 分发至：
（2） （3）
Fs—流量设定值； Fmax—3 次测量中流量最大值，mL/min； Fmin—3 次测量中流量最小值，mL/min。
泵 1 流量测量结束后，启动泵 2，按上述方法测量泵 1 和泵 2 的流量，由当时测得的缓冲液 B1 与印三 酮混合液的密度及流动相搜集时间，按（1）式计算泵 1 加泵 2 的流量，扣除泵 1 的流量，即得泵 2 的流 量，重复测量三次，按式（2） 、 式 （ 3）计算泵 2 的 SS 和 SR。 8.4.2 分离度 按仪器推荐的测量条件设置各种参数，启动仪器待稳定后，由进样系统注入氨基酸标准溶液（浓度 为 5nmol/L-20nmol/L）做色谱分析，由色谱图测量的数据按式（4）计算苏氨酸（Thr）-丝氨酸（Ser）、 甘氨酸（Gly）-丙氨酸（Ala） 、亮氨 酸（Leu）-异亮氨酸（Ile）的分离度 Rh。
氨基酸检验原始记录
湖南省兽药饲料监察所
氨基酸的检验记录
样品编号：182011460 检验时间：2011-09-06 温度25℃湿度60％检验方法：GB/T18246-2000
分析天平：AL204（J01-8）氨基酸分析仪：SYKAM S433D（J62-1）
样品处理方法：酸水解法
检验条件：茚三酮柱后衍生离子交换色谱法样品稀释倍数(N)：150 标准溶液：c(AA)=100 nmol/mL 标液进样量(Vs)：50μL 样品进样量(Vi)：50μL
平行1 平行2
平均含量（%）相对偏差
（%）
允许
相对偏差
（%）
样品质量（mg）138.7 116.0 原始图谱编号AS5700101AS5700111
平行1 含量（%）
平行2 含量（%）
天门冬氨酸(ASP)
见
原始图谱含量结果
见
原始图谱
含量结果
\ \ ≤4
苏氨酸 (THR) \ \ ≤4丝氨酸 (SER) \ \ ≤4谷氨酸 (GLU) \ \ ≤4甘氨酸 (GLY) \ \ ≤4丙氨酸 (ALA) \ \ ≤4半胱氨酸 (CYS) \ \ ≤4缬氨酸 (VAL) \ \ ≤4蛋氨酸(MET) \ \ ≤4异亮氨酸(ILE) \ \ ≤4亮氨酸 (LEU) \ \ ≤4酪氨酸 (TYR) \ \ ≤4苯丙氨酸（PHE) \ \ ≤4组氨酸 (HIS) \ \ ≤4赖氨酸 (LYS) 2.85 0.51 ≤4精氨酸 (ARG) \ \ ≤4脯氨酸 (PRO) \ \ ≤4
检验人：复核人：室主任：。
氨基酸分析仪(水解)
德国sykamS433D/S433（赛卡姆）氨基酸分析仪仪器主要特点：1、经典的茚三酮柱后衍生法、符合国家标准2、带制冷功能的溶液存放单元，全部试剂均有惰性气体保护，试剂瓶带独立阀门3、全自动进样器带电子制冷，进样体积可编程，无样品损失4、四元梯度泵内置在线真空脱气，优化后的洗涤梯度只需2-3种缓冲液5、检测系统包含可精确控温的柱温箱及衍生系统，双波长同时检测6、中英文、图形化软件极易操作，具有日志记录及权限管理，符合GLP/21CFR规范7、优异的定性定量重复性，超长的分离柱使用寿命仪器技术参数：1、分析柱●电子恒温（制热或制冷）●柱温 可梯度编程 20℃～99℃●温度准确度 0.1℃●柱 PEEK，4.6 x 150mm, 7um，10%交联（最适于氨基酸分析的强度）●安全保护 过热保护2、自动进样器●进样模式 100μl体积可变环进样●进样体积 可变； 1μl～5000μl，0.1μl增量●样品清洗 最高5000μl清洗液，1μl增量●记忆效应 低于0.01%（自动清洗进样回路）●重现性 10μl 变体积进样时变异低于1%●进样/样品瓶 每个系列1～9次进样，可设不同体积●样品盘 两个盘，每盘60个样品位，1.5ml样品瓶●温度控制 +5℃～70℃（电子恒温）3、溶液存放单元，带电子恒温装置●可存放所有缓冲液、再生液及茚三酮试剂●温度 4℃●内置式冷却器，可进行温度控制4、四元梯度泵（输液单元）●活塞 双活塞短行程技术，自动清洗●流速 0.000ml/min～9.999ml/min●流速稳定性 RSD<0.1%●最大压力 40MPa (400bar，6000psi)●操作方式 恒流，恒压●梯度混合室 100μl～500μl●材料 PEEK5、检测系统●检测波长 570nm, 440nm（可同时检测）●荧光检测（选配）●流动池体积 8μl●光程 10mm●试剂泵流速 0.000 ml/min～2ml/min●反应器温度范围 室温～180℃●标准反应器 1.5mm x 0.3mm x15m●安全装置 过热保护●温度准确度 0.1℃6、系统指标●缓冲液种类: 2种（水解蛋白）或3种（生理体液）●定性（保留时间）重复性RSD: 全部氨基酸RSD<0.5% (Arg精氨酸 RSD<0.1%)●定量（峰面积）重复性RSD: 全部氨基酸RSD<1% (Gly甘氨酸His组氨酸 RSD<0.5%)●分离度： 全部大于1.2, 平均大于3.3●检测极限: 8pmol（Asp天冬氨酸 3pmol, 信噪比S/N=2）●分析时间： 蛋白水解30分钟－50分钟●生理体液90分钟－180分钟S433D简要操作步骤1．开机，各模块按F1进入 “STATUS”界面，检查液面及气压；2．运行ClarityAmino，进入仪器窗口。
S433D氨基酸分析仪特点介绍
茚三酮与氨基酸的衍生反应
茚三酮 + 伯胺型氨基酸 还原茚三酮 + 仲胺型氨基酸
兰紫色化ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ物 黄绿色化合物
O OH
OH O O
OH
OH O
水合茚三酮
O
R CH COOH NH2
还原茚三酮
H OH O
RCHO
O
O
H NH3
HO
O
兰紫色化合物
N O
CO2 O O
NH3
伯 胺 型
O OH
OH O
O
仲
COOH N
➢配缓冲液更简单即使所配缓冲液的pH值或离子强度略有偏差，也只
需简单的调整梯度程序。而传统的等度洗脱则必须重新配液
➢可获得更佳的分离度如果某峰附近出现干扰峰，可针对此峰进行
局部梯度调整使其不受干扰，而传统的等度洗脱只能重新配缓冲液才可分 离干扰峰，但重新配液后又会影响其它峰的分离
➢优异的定性定量重复性理论上等度的重复性更好。然而，得益于
短 繁琐 18－26种 低
高
柱后(专用仪) 高
高
长 简单 40种以上
高
低
S-433D原理图
S-433D特点介绍
带制冷功能长时间连
续分析不受环境温差影响
全部溶液惰性保护
溶液存放期更长
溶液瓶带独立阀门
可在使用过程中加液
S-433D特点介绍
内置在线脱气消除溶
液中微小气泡的不良影响
高精度梯度混合缓冲
液种类只需2－3种，配液更 简单；可获得最佳分离度； 可调整出峰顺序及保留时间， 便于研究
义仪器的最佳工作状态
谢 谢！
出类拔萃的设计和加工，sykam采用梯度洗脱时，其重复性仍优于(至少不 低于)所有竞争对手，因而sykam会采用此成本较高但却方便用户的设计
氨基酸水溶肥的测定方法
氨基酸水溶肥的测定方法1.氨基酸的总氮测定方法：(1)氮素的酸性氧化法：此方法适用于水溶肥的总氮测定。
将样品与硫酸加热反应，将氨基酸中的氮氧化为硝酸铵，再用0.1mol/L NaOH溶液中和产生的硫酸，得到所需的草酸铵，最后用泛硼酸指示剂滴定。
优点：操作简单，结果准确可靠。
缺点：对样品的处理过程较为繁琐。
限制：只能测定总氮含量，无法区分不同种类的氨基酸。
(2)红紫作报告的测定法：此法采用红紫液直接测定水溶肥的总氮含量，是一种半定量的方法。
样品与红紫液混合，高价态还原为低价态后生成紫色或红色溶液，根据溶液颜色的深浅可以判断氨基酸的总氮含量。
优点：操作简单，结果直观。
缺点：无法准确得到氨基酸的总氮含量。
2.氨基酸的种类及含量测定方法：(1)紫外光谱法：优点：对样品的处理过程简单，测定结果准确。
缺点：只能测定少数氨基酸。
(2)色谱法：气相色谱法和液相色谱法是常用的氨基酸分析方法，在液相色谱法中最常用的是高效液相色谱法（HPLC）。
通过色谱柱对样品中的氨基酸进行分离，然后利用紫外检测器或荧光检测器进行检测和定量。
优点：可以同时测定多种氨基酸的含量。
缺点：设备成本高，操作技术要求较高。
(3)生化分析法：此法是通过酶的作用对氨基酸进行检测和定量。
常用的方法有自动氨基酸分析仪和生化试剂盒。
自动氨基酸分析仪通过酶的作用将氨基酸转化为可以被检测的物质，再通过比色法或荧光法进行测定。
生化试剂盒通过与特定酶底物反应，产生的物质与测定氨基酸的浓度成正比。
优点：操作简单，准确、快速。
缺点：设备成本较高。
综上所述，氨基酸水溶肥的测定方法包括氨基酸的总氮测定方法和氨基酸的种类及含量测定方法。
不同的方法有各自的优缺点，根据实际需求选择恰当的方法进行测定。
氨基酸总量测定方法
氨基酸总量测定方法咱今儿就来讲讲氨基酸总量测定方法，这可是个很有意思的事儿呢！你想想啊，氨基酸就像是我们身体里的小宝贝，它们的数量和状态对我们可重要啦！要说测定氨基酸总量，那方法可不少呢。
就好像我们要去一个地方，有好多条路可以走。
比如说茚三酮比色法，这就像是走一条大家都比较熟悉的大道，可靠又实用。
把样品和茚三酮试剂一混合，经过一系列反应，就能通过颜色的变化来大致知道氨基酸的量啦。
这多神奇呀！还有甲醛滴定法，这就好比是找到了一个特别的窍门。
利用甲醛和氨基酸的反应，然后通过滴定来确定数量。
是不是感觉很有意思呢？就像解开一个小小的谜题。
再说说电位滴定法吧，这就像是有个特别精准的仪器在帮我们把关，能非常准确地测量出氨基酸的量呢。
那我们在实际操作的时候可得注意一些小细节哦！就像做饭要掌握好火候一样，不能马虎。
比如试剂的选择，一定要挑质量好的呀，不然怎么能得出准确的结果呢？还有操作步骤，一步都不能错哦，不然就像走在路上迷路了一样。
你说，要是我们不认真对待这些方法，那不是就像闭着眼睛走路吗？能走到目的地才怪呢！所以呀，我们得好好琢磨这些方法，就像对待宝贝一样。
在测定的过程中，每一个环节都很关键呢。
从样品的处理到最后的数据分析，都需要我们细心再细心。
这可不是闹着玩的事儿呀！而且呀，不同的样品可能需要不同的方法来测定氨基酸总量呢。
这就好像不同的人穿不同的衣服才合适一样。
你总不能给一个大人穿小孩的衣服吧？总之呢，氨基酸总量测定方法是个很有学问的事儿，我们可得好好研究研究。
只有这样，我们才能真正了解氨基酸的奥秘，才能更好地为我们的健康服务呀！这可不是开玩笑的哦！。
肥料中氨基酸的测定方法
肥料中氨基酸的测定方法
肥料中氨基酸的测定方法主要有酸水解法、碱水解法、酸提取法等。
1. 酸水解法：分为常规水解法和氧化水解法。
常规水解法适用于检测除含硫氨基酸（如胱氨酸、蛋氨酸等）以外的蛋白水解氨基酸；氧化水解法以偏重亚硫酸钠为氧化终止剂来检测除酪氨酸以外的蛋白水解氨基酸。
另外，以氢溴酸作为终止剂时，可以检测除酪氨酸、苯丙胺细算和组氨酸以外的蛋白水解氨基酸。
2. 碱水解法：只适用于检测色氨酸。
3. 酸提取法：用于检测游离氨基酸、赖氨酸、蛋氨酸含量。
4. 利用反相液相色谱法来检测饲料中氨基酸含量也逐渐成为普通手段。
5. 其他化学方法如2，4，6-三硝基苯磺酸（TNBS法）、1-氟-2，4-二硝基苯法（FDNB法）、2-氯-3，5-二硝基吡啶法（CNPY法）等也可用于测定赖氨酸。
6. 染料结合法可用于测定样品中蛋白质的碱性氨基酸，包括赖氨酸、精氨酸和组氨酸。
如果先将样品用丙酸酐处理，丙酸酐便将赖氨酸的-NH2的酰化掩蔽，使其失去了和染料结合的能力。
然后分别测定酰化前后的DBC值，计算出差值就可得到赖氨酸的含量。
不同方法的适用范围不同，测定结果可能因具体方法而有所差异。
实际操作中，应根据具体情况选择合适的方法进行测定。
氨基酸分析仪法测定氨基酸含量
• 评价作物的营养品质，指导作物育种和栽培
• 检测农作物中的氨基酸代谢产物，研究作物生长和抗逆性
检测农业生产中的肥料和饲料
• 测定肥料和饲料中的氨基酸含量，评估肥料和饲料的营养价值
• 检测肥料和饲料中的氨基酸代谢产物，评估肥料和饲料的使用效果
谢谢观看
THANK YOU FOR WATCHING
• 通过输液泵和色谱柱实现氨基酸的分离
• 使用检测器检测氨基酸的荧光或紫外吸收信号
⌛️
数据处理
• 使用计算机和软件处理实验数据
• 计算氨基酸的含量和相对含量
• 生成实验报告，总结实验结果
03
氨基酸分析仪法的实验操作
样品前处理及氨基酸提取
样品前处理
氨基酸提取
• 研磨样品，使其均匀分散
• 使用醋酸钠或醋酸铵溶液沉淀氨基酸
氨基酸分析仪法在食品检测中的应用
测定食品中的氨基酸含量
检测食品中的食品添加剂
• 评价食品的营养价值，指导食品配方和加工
• 测定食品添加剂中的氨基酸含量，评估食品添加剂的安
• 检测食品中的氨基酸代谢产物，评估食品的新鲜度和品
全性
质
• 检测食品添加剂中的氨基酸代谢产物，评估食品添加剂
的使用效果
氨基酸分析仪法在生物医药领域的应用
谢产物，评估食品的新鲜
度和品质
农业领域
• 测定农作物中的氨基酸
生物医药领域
含量，评价作物的营养品
质
• 检测农作物中的氨基酸
代谢产物，研究作物生长
和抗逆性
• 测定生物体液中的氨基
酸含量，评价生理功能和
疾病状态
• 检测生物组织中的氨基
水溶肥 游离氨基酸含量测定标准
水溶肥游离氨基酸含量测定标准
水溶肥是一种现代化肥料，它可以直接溶解在水中，提供给植
物所需的养分。
其中，游离氨基酸是水溶肥中的重要成分之一，对
植物的生长发育起着重要作用。
因此，准确测定水溶肥中游离氨基
酸的含量，对于合理施肥、提高作物产量和质量具有重要意义。
为了保证水溶肥中游离氨基酸含量的准确性，制定了相应的测
定标准。
首先，需要选择合适的测定方法，常见的有高效液相色谱法、气相色谱法、紫外分光光度法等。
然后，根据标准操作程序，
进行样品的前处理、提取和分析，确保测定结果的准确性和可靠性。
同时，还需要建立相应的质控体系，包括仪器设备的校准、标准品
的准备和实验室操作规范等，以确保测定结果的准确性和可靠性。
标准的制定和实施，不仅有利于水溶肥生产企业提高产品质量，还可以为农民提供科学合理的施肥指导，促进农业生产的可持续发展。
因此，加强对水溶肥游离氨基酸含量测定标准的研究和推广应用，具有重要的现实意义和深远的社会影响。
希望相关部门和科研
机构能够进一步加强标准的制定和实施，推动水溶肥行业的发展，
为农业生产提供更好的支持。
氨基酸水溶肥的测定方法
氨基酸水溶肥的测定方法氨基酸水溶肥的测定方法主要是通过二磷酸盐试验，Zerenke试验以及Potassium Chloride剂量反应法三种方法进行测定。
一、二磷酸盐试验1. 根据被测物质的不同，将其分别精细粉碎到相应筛上，用水洗涤，取最细的洗涤液0.5mL，加入10mL的磷酸钠溶液（2%）于烧瓶中，然后在室温下恒温30分钟，利用离心机进行离心，将上清液移液至容量瓶，再加入2.5mL的次磷酸亚铵溶液，摇匀后，使之沉淀，放置1h，直至所有沉淀物沉积完毕。
2. 用新鲜的25mL次磷酸亚铵溶液（2％）滤过上清液，将滤液放入容量瓶中，分别用10mL和4mL的磷酸亚铵溶液加入，摇匀后，在室温下恒温20-30min，用离心机离心，取清液，然后用0.1mol /L的HCl滴定能量，用0.01mol/L的Na2CO3滴定多余的HCl，计算出原液pH值，计算其碱度。
二、Zerenke试验1. 将被测物质加入适量水中精制，其稀释液0.5mL，加入10mL的磷酸钠溶液，在室温下恒温20min，用离心机离心，将上清液移液至容量瓶中，加入2.5mL的0.2mol/L 的状囊酸钠溶液，摇匀后，放置室温恒温1h，直至所有沉淀物沉积完毕。
2. 取滤液，添加适量的4N HCl溶液，调节滴定液的pH值至3，加入适量的0.02mol/L的KMnO4溶液，恒温20min，添加适量的6N NaOH溶液，恒温至淡浅褐色无剩余沉淀，滴定液粘度为原液的4.4倍。
三、Potassium Chloride剂量反应法1. 将被测物质加入多余的水中精制，取其稀释液0.5mL，加入10mL KCl溶液，在室温下恒温20min，用离心机离心，将上清液移液至容量瓶中，再加入适量的2.5mL的次磷酸亚铵溶液，摇匀后，放置室温恒温1h，直至所有沉淀物沉积完毕。
2. 取滤液，加入适量的容量瓶中，分别加入10mL和4mL的KCl 溶液，摇匀后，放置室温恒温20min，用离心机离心，取清液，滴定pH值，计算出溶液的KCl浓度，根据计算氨基酸水溶肥的含量。
氨基酸水溶肥的测定方法
氨基酸水溶肥的测定方法
氨基酸水溶肥的测定方法主要有三种，分别是Kjeldahl分析法、
变色滴定法和多色谱法。
1、Kjeldahl分析法：Kjeldahl分析法是目前最常用的氨基酸测
定方法，它是通过氧化性氨消化，将氨基酸彻底氧化成二氧化碳和水，然后以硝酸催化的方式，将二氧化碳由消去后滴定，最后把滴定出的
氨计入最终的氨基酸含量中。
2、变色滴定法：变色滴定法是以比色板为试剂，用不同的比色剂
将氨基酸的水溶液变色，并根据变色程度来估算氨基酸含量，氨浓度
与比色板的颜色呈正比，如紫外线吸收法就是一种变色滴定法。
3、多色谱法：无论是氨基酸水溶肥，还是表示氨基酸水解产物含
量的酸值，都能够通过多色谱来快速准确测定，这种方法操作简单，
耗费的时间少，有较高的准确度，对氨基酸测定比较有效。
以上便是氨基酸水溶肥的测定方法，不仅可以使用上述的方法进
行测定，还可以根据需要，使用更现代的技术进行测定，例如高效液
相色谱仪(HPLC)、质谱仪、微波辐射谱仪、生物电阻等。
氨基酸水溶肥的测定方法
氨基酸水溶肥的测定方法
氨基酸水溶肥的测定方法主要有三种，分别是萃取-pH值法、分光
光度法和吸收光谱法。
1. 萃取-pH值法
萃取–pH值法是目前氨基酸水溶性肥料中污染物分析的常用技术。
该方法以氨基酸作为探针，不仅可以测定氨基酸水溶性肥料中有机污
染物，还可以准确测定其含量。
该方法的实施步骤如下：首先，将水
溶性肥料加入萃取剂（通常为甲醇或乙醇），并混匀；其次，在萃取
后的溶液中加入检测试纸，测量pH值；最后，对测量结果进行相应的
校正，给出最终的氨基酸含量。
2. 分光光度法
分光光度法是一种很好的测定氨基酸水溶性肥料含量的方法，主
要原理是检测氨基酸溶液中吸收紫外光的吸光度，再按照一定的计算
公式将测得的吸光度值转换为氨基酸的总和。
该法简便快捷，准确度
也较高，有效解决了传统方法耗时费力等缺陷。
3. 吸收光谱法
吸收光谱法是一种采用光学原理的技术，它是在试样中加入某种
红外吸收剂，然后采集红外光谱图，并根据光谱信号的变化来分析储
存在氨基酸水溶性肥料中的污染物含量及类型。
该技术具有准确性高、效率快、提取简单等优点，不仅可以检测氨基酸水溶性肥料中有机物
质的含量，还可以确定它们所属的化合物类型，从而使检测精度更高。
肥料氨基酸含量检测方法
肥料氨基酸含量检测方法
肥料中氨基酸含量的检测方法可以采用多种技术和方法，以下是其中一些常用的方法：
1.高效液相色谱法（HPLC）：这是一种常见的氨基酸含量检测方法。
它通过将样品中的氨基酸分离，并使用紫外检测器或荧光检测器检测各种氨基酸的浓度。
HPLC法通常具有高灵敏度和高分辨率，能够准确地测定各种氨基酸的含量。
2.气相色谱法（GC）：气相色谱法也可用于氨基酸含量的检测。
在这种方法中，样品中的氨基酸首先转化为相应的氨基酸甲酯衍生物，然后通过气相色谱柱进行分离和检测。
GC法通常需要较长的分析时间，但具有较高的精确度和可靠性。
3.红外光谱法（IR）：红外光谱法可以用于氨基酸的快速检测。
该方法通过分析样品中氨基酸分子的振动和拉伸模式来确定其含量。
红外光谱法具有快速、简便的优点，但灵敏度相对较低。
4.比色法：比色法是一种常用的定性和定量分析方法。
对于氨基酸含量的检测，可以使用特定的试剂与氨基酸反应产生显色反应，然后通过比色计或分光光度计测定溶液的吸光度来确定氨基酸的含量。
5.离子交换色谱法（IEC）：离子交换色谱法是一种常用于分析氨基酸的方法。
在这种方法中，氨基酸根据其电荷性质在离子交换树脂柱上进行分离，并通过检测器检测各个氨基酸的浓度。
在选择合适的检测方法时，需要考虑样品的性质、所需的分析精度和灵敏度、分析时间以及实验室设备和经验等因素。
常见的检测方法通常会结合使用，以确保结果的准确性和可靠性。
重量法结合氨基酸分析法测定婴幼儿配方乳粉中小分子蛋白肽含量
基金项目：广州市场监督管理局科技项目（编号：２０２０ｋｊ４７）作者简介：黄伟乾（１９８６—），男，广州检验检测认证集团有限公司，中级质量工程师。
Ｅ ｍａｉｌ：４９４３３３０６７＠ｑｑ．ｃｏｍ收稿日期：２０２２ ０４ ０３ 改回日期：２０２２ １０ ０９犇犗犐：１０．１３６５２／犼．狊狆犼狓．１００３．５７８８．２０２２．８０１４３［文章编号］１００３ ５７８８（２０２３）０３ ００４４ ０５重量法结合氨基酸分析法测定婴幼儿配方乳粉中小分子蛋白肽含量Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｓｍａｌｌｍｏｌｅｃｕｌａｒｐｅｐｔｉｄｅｓｉｎｉｎｆａｎｔｆｏｒｍｕｌａｍｉｌｋｐｏｗｄｅｒｂｙｇｒａｖｉｍｅｔｒｉｃｍｅｔｈｏｄｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈａｍｉｎｏａｃｉｄａｎａｌｙｓｉｓ黄伟乾犎犝犃犖犌犠犲犻 狇犻犪狀 霍玟希犎犝犗犠犲狀 狓犻 许丽珠犡犝犔犻 狕犺狌 何敏恒犎犈犕犻狀 犺犲狀犵吴俊发犠犝犑狌狀 犳犪 郑学殷犣犎犈犖犌犡狌犲 狔犻狀 罗 浩犔犝犗犎犪狅（广州检验检测认证集团有限公司，广东广州 ５１１４４７）（犌狌犪狀犵狕犺狅狌犜狉狌狊狋犲犱犜犲狊狋犻狀犵牔犆犲狉狋犻犳犻犮犪狋犻狅狀犆狅．，犔狋犱．，犌狌犪狀犵狕犺狅狌，犌狌犪狀犵犱狅狀犵５１１４４７，犆犺犻狀犪）摘要：目的：建立婴幼儿配方乳粉中小分子肽含量的定量分析方法。
方法：分别采用凯氏定氮法、重量法、离子交换色谱等方法测定婴幼儿配方乳粉中总蛋白、高分子蛋白和游离氨基酸含量，通过计算求得小分子蛋白肽含量。
结果：高分子蛋白检测精密度ＲＳＤ（狀＝６）为０．７４％；１７种氨基酸回收率为９１．０％～１０３．２％，检测结果的相对偏差为０．６％～２．５％；小分子蛋白肽添加回收率为９５．２％～９８．２％。
结论：所建方法精密度和回收率良好，可用于婴幼儿配方乳粉中小分子肽含量的测定。
关键词：高分子蛋白；小分子蛋白肽；氨基酸；总蛋白；婴幼儿配方乳粉犃犫狊狋狉犪犮狋：犗犫犼犲犮狋犻狏犲：Ｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌａｒｐｒｏｔｅｉｎ，ａｍｉｎｏａｃｉｄａｎｄｔｏｔａｌｐｒｏｔｅｉｎ，ａｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅａｎａｌｙｓｉｓｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｓｍａｌｌｍｏｌｅｃｕｌａｒｐｅｐｔｉｄｅｓｉｎｉｎｆａｎｔｆｏｒｍｕｌａｍｉｌｋｐｏｗｄｅｒｗａｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ．犕犲狋犺狅犱狊：Ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｔｏｔａｌｐｒｏｔｅｉｎ，ｐｏｌｙｍｅｒｐｒｏｔｅｉｎａｎｄｆｒｅｅａｍｉｎｏａｃｉｄｉｎｉｎｆａｎｔｆｏｒｍｕｌａｍｉｌｋｐｏｗｄｅｒｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙＫｊｅｌｄａｈｌｎｉｔｒｏｇｅｎｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄ，ｇｒａｖｉｍｅｔｒｉｃｍｅｔｈｏｄａｎｄｉｏｎｅｘｃｈａｎｇｅｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ａｎｄｔｈｅｎｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｓｍａｌｌｍｏｌｅｃｕｌａｒｐｒｏｔｅｉｎｐｅｐｔｉｄｅｗｅｒｅｃａｌｃｕｌａｔｅｄ．犚犲狊狌犾狋狊：ＴｈｅｐｒｅｃｉｓｉｏｎＲＳＤｏｆｔｈｅｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌａｒｐｒｏｔｅｉｎｄｅｔｅｃｔｉｏｎ（狀＝６）ｗａｓ０．７４％；Ｔｈｅｒｅｃｏｖｅｒｙｒａｔｅｓｏｆｔｈｅ１７ｋｉｎｄｓｏｆａｍｉｎｏａｃｉｄｓｗｅｒｅ９１．０％～１０３．２％，ａｎｄｔｈｅｒｅｌａｔｉｖｅｄｅｖｉａｔｉｏｎｓｏｆｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｒｅｓｕｌｔｓｗｅｒｅ０．６％～２．５％．Ｔｈｅｒｅｃｏｖｅｒｙｒａｔｅｓｏｆｓｍａｌｌｍｏｌｅｃｕｌａｒｗｅｉｇｈｔｐｅｐｔｉｄｅｓｗｅｒｅ９５．２％～９８．２％．犆狅狀犮犾狌狊犻狅狀：Ｔｈｅｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｍｅｔｈｏｄｈａｓｂｅｅｎｖａｌｉｄａｔｅｄｂｙｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ，ｗｉｔｈｇｏｏｄｐｒｅｃｉｓｉｏｎａｎｄｒｅｃｏｖｅｒｙｒａｔｅ，ａｎｄｃａｎｂｅｕｓｅｄｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｓｍａｌｌｍｏｌｅｃｕｌａｒｐｅｐｔｉｄｅｓｉｎｉｎｆａｎｔｆｏｒｍｕｌａｍｉｌｋｐｏｗｄｅｒ．犓犲狔狑狅狉犱狊：ｈｉｇｈｍｏｌｅｃｕｌａｒｗｅｉｇｈｔｐｒｏｔｅｉｎ；ｓｍａｌｌｍｏｌｅｃｕｌａｒｗｅｉｇｈｔｐｅｐｔｉｄｅ；ａｍｉｎｏａｃｉｄ；ｔｏｔａｌｐｒｏｔｅｉｎ；ｉｎｆａｎｔｆｏｒｍｕｌａｍｉｌｋｐｏｗｄｅｒ乳蛋白是重要的优质蛋白之一，其中婴幼儿配方食品是母乳的主要替代品之一［１］。
氨基酸分析仪检测卤水中铵含量
Determination of Ammonium Content in Brine by Amino Acid AnalyzerZhang Xuewen,Qiu Yaojun,Guo Yunyun,Cao Jun(Jiangsu Salt Making Industrial Research Institute Co.,Ltd.,Huai ’an,Jiangsu,223200)Abstract:This paper is to establish an method using amino acid analyzer for the determination of ammonium in brine.After constant volme with a sample solution (pH 2.2),the sample was eluted with an amino acid analyzer ,separated by cation exchange resin column,and colorimetrically derived from ninhydrin solution ,and the taurine chromatographic peaks was measured at a wavelength of 570nm ,quantification of peak area by external standard method,retention time qualitative.The results showed that ammonium had a good linear relationship in the concentration range of 0.50-3.00g/mL (r=0.999)with a recovery rate of 101.37%and a relative standard deviation of 1.7%(n=6).This method is simple,convenient,accurate and suitable for the quantitative analysis of ammonium in brine.Key words:Brin,amino acid analyzer,ammonium,content摘要:建立一种氨基酸分析仪测定卤水中铵含量的分析方法。
不同品种猕猴桃的营养品质对比分析
不同品种猕猴桃的营养品质对比分析作者：黄亚欣李秋萍朱童焦玉茹杨慧权美英吴素芳谭永元赵晓蕾牛艳艳马华李添群刘艺侯开宇来源：《中国食品》2024年第06期獼猴桃富含维生素、矿物质、氨基酸、膳食纤维等，营养价值极高。
修文县位于贵州省中部，种植猕猴桃已有30多年的历史，凭借优越的生态环境和坚实的产业基础，由贵州省农业科学院果树研究所育成的硬毛系中华猕猴桃优良品种贵长猕猴桃的种植面积不断扩大，已成为全国具有区域特色和品种特色的猕猴桃产业大县。
本研究选取来自修文县四个不同种植基地的贵长猕猴桃，与市面上常见的新西兰金果猕猴桃、新西兰绿果猕猴桃、徐香猕猴桃、东红猕猴桃和红阳猕猴桃进行各项营养指标的对比，探究修文县贵长猕猴桃的品质特点，以期提高消费者对该品种的认识和了解，推动修文县贵长猕猴桃的推广和发展。
一、材料与方法1.材料与仪器。
本研究用到的实验材料如表1所示。
本研究用到的实验仪器如下：PE900F 原子吸收光谱仪，美国PerkinElmer公司；2600紫外分光光度计，日本Shimadzu公司；CBM-20A高效液相色谱仪，日本Shimadzu公司；2695高效液相色谱仪，美国Waters公司；S433D 氨基酸分析仪，德国Sykam公司。
2.方法。
氨基酸含量：参照《食品安全国家标准食品中氨基酸的测定》（GB 5009.124-2016）；类胡萝卜素含量：β-胡萝卜素参照《食品安全国家标准食品中胡萝卜素的测定》（GB 5009.83-2016），叶黄素参照《食品安全国家标准食品中叶黄素的测定》（GB5009.248-2016）；维生素含量：泛酸参照《食品安全国家标准食品中泛酸的测定》（GB 5009.210-2016），维生素B6参照《食品安全国家标准食品中维生素B6的测定》（GB 5009.154-2016），叶酸参照《食品安全国家标准食品中叶酸的测定》（GB 5009.211-2014），维生素C参照《食品安全国家标准食品中抗坏血酸的测定》（GB 5009.86-2016），维生素K1参照《食品安全国家标准食品中维生素K1的测定》（GB 5009.158-2016）；膳食纤维含量：参照《食品安全国家标准食品中膳食纤维的测定》（GB 5009.88-2014）。
S-433 D 氨基酸分析仪测定水溶肥料中氨基酸的含量
河南农业2019年第3期（上）趋势十分明显。
为解决化肥过量施用带来的各种问题，改善农业生态环境，促进农业生产的可持续发展，开发、使用新兴的水溶肥料是今后农业生产中的必然趋势。
氨基酸水溶肥料作为一种与立体高效栽培技术、高产优质栽培技术相配套的新型肥料，是未来肥料发展的重要方g/g/L 的的柠檬酸钠缓冲液；氨基酸混合标准溶液2.5 ×109 nmol/mL。
2.仪器。
S-433 D 氨基酸分析仪；0.45μm 的微孔滤膜及过滤头、注射器等。
（二）测定方法1.样品的制备。
含氨基酸水溶肥料样品经多次缩分后，取出约100 g，将其研磨至全部通过0.50 mm 的孔径过筛，混合均匀，置于洁净、干燥的容器中。
2.测定方法。
称取试样2~10 g， 置于250 mL 的容量瓶中。
充分溶解后，加水至刻度，混匀，过滤后吸取上清液2 mL 于10 mL 的离心管中，准确加入2 mL 的磺基水样酸溶液，混匀，放置1 h。
准确加入1 mL 的S-433 D 氨基酸分析仪测定水溶肥料中氨基酸的含量河南省土壤肥料站 王敏EDTA-Na 溶液和1 mL 的盐酸溶液，混匀，用0.45μm 的微孔滤膜过滤。
吸取滤液1 mL，蒸干。
准确加入1~5 mL 的柠檬酸钠缓冲液溶解，使氨基酸浓度处于仪器最佳检测范围内，供仪器测定用。
3. S-433 D 氨基酸分析仪的色谱条件。
色谱柱：SYKAMLCAK06/Na。
流动相A：柠檬酸钠= 0.12 N，pH 值为 3.45；流动相B：柠檬酸钠= 0.2 N，pH 值为10.85。
流速：茚三酮溶液流速0.25 mL/min，洗脱液流速0.45 mL/min。
检测器1：570 nm， 双极的，12 123 mV，6.25样品数每秒；检测器2 ：440 nm，双极的，12 123 mV，6.25样品数每秒。
反应温度：138 ℃。
（三）数据分析本文运用IBM SPSS Statistics20.0进行数据统计分析，用Microsoft Office Excel 2010制图。
氨基酸分析仪检测氨基酸水溶肥中游离氨基酸可行性分析
氨基酸分析仪检测氨基酸水溶肥中游离氨基酸可行性分析【摘要】通过酸水解法测定含氨基酸水溶肥料中17种氨基酸含量，采用sykam全自动氨基酸分析仪，水合茚三酮柱后衍生，结果表明：同一个样品测得的氨基酸峰面积相对标准偏差小，峰面积的回收率在97.8%～101.3%，用此方法测氨基酸具有良好的重复性、准确性。
【关键词】含氨基酸水溶肥；酸水解；氨基酸；柱后衍生0.前言我国是一个缺水的农业大国，化肥的使用在农业生产中占重要地位，而传统肥料存在利用率低、养分损失率高而且耗水量大的缺点，水溶肥料由于其迅速溶于水中、养分更易被吸收而且吸收利用率高并可应用于滴灌、喷施、喷灌的节水特点，在我国农业中有广阔的发展前景[1]。
氨基酸水溶肥作为水溶肥中的一员，其原理：氨基酸存在肥料中，易于被作物吸收的特点；亦有提高施肥对象抗病性，改善施肥作物品质的功能；补充植物必须的氨基酸，刺激和调节植物快速生长，促使植物生长健壮，促进对营养物质的吸收；增强植物的代谢功能，提高光合作用，促进植物根系发达，加快植物生长繁殖[2]。
目前，对于氨基酸的检测大多采用液相色谱、气相色谱-质谱联用、毛细管电泳、凯氏定氮法和光谱法等方法。
这些方法或试剂费用昂贵，或分离效率低，或不能同时测多种氨基酸。
运用氨基酸分析仪能解决以上问题，并且操作简单方便，重复性好。
1.方法原理含氨基酸水溶肥用磺基水杨酸沉淀蛋白质后，用EDTA络合金属元素释放氨基酸，氨基酸经离子交换色谱分离、测定。
脯氨酸在440 nm波长处有最大吸收峰，除脯氨酸外，其他各氨基酸均在570nm波长有最大吸收峰。
因此，在440nm 检测计算脯氨酸含量，而在570nm检测计算其它各氨基酸含量。
2.试剂与仪器2.1试剂6.0mol/l盐酸溶液、茚三酮溶液、50g/L磺基水杨酸溶液、10g/L EDTA溶液、流动相：柠檬酸钠缓冲液A=0.2N，pH=3.45；柠檬酸钠缓冲液B=0.2N，pH=10.85；C=超纯水；D=20g/L氢氧化钠溶液。
氨基酸水溶肥的测定方法
氨基酸水溶肥的测定方法
氨基酸水溶肥是检测土壤能量的重要参数，其测定方法主要有热
分解法和氯化物法。
1. 热分解法
该方法的原理是通过对电气灰分（ECP）或总氮（TN）进行热解，焚烧
至固态，测定所得碳和氮百分率来计算氨基酸水溶肥含量。
样品取1g，加入20ml硝酸银试剂（AgNO3），以烘箱加热至200℃，持续烘烤加热2小时，浓度为10%的硫酸镍（NiSO4）溶液溶解
固态，用稀盐酸滴定硝基氮（硫氰酸盐法），继而用铬酸钾滴定未热
解的电气灰分（ECP）或总氮（TN），计算所得碳和氮百分率，以此计
算氨基酸水溶肥含量。
2. 氯化物法
该方法是通过将电气灰分（ECP）或总氮（TN）添加相应量的氯化钠（NaCl），加热，然后用稀盐酸滴定硝基氮（硫氰酸盐法），继而用
铬酸钾滴定未热解的电气灰分（ECP）或总氮（TN），计算所得碳和氮
百分率，以此计算氨基酸水溶肥含量。
样品取1g，加入5N NaCl，以95℃加热约30min，浓度为10%的硫
酸镍（NiSO4）溶液溶解固态，用稀盐酸滴定硝基氮（硫氰酸盐法），
继而用铬酸钾滴定未热解的电气灰分（ECP）或总氮（TN），计算所得
碳和氮百分率，以此计算氨基酸水溶肥含量。
在氨基酸水溶肥的测定中，热分解法和氯化物法均是常用的方法，其原理都是热分解样品至固态，然后根据碳和氮百分率计算氨基酸水
溶肥含量，但两者的添加剂、加热温度和时间均有所不同。
需要根据
具体实验要求进行选择，保证测定结果的准确性。
氨基酸含量酸度计法
氨基酸含量酸度计法
一、酸度计的校准
在开始测定氨基酸含量之前，首先需要对酸度计进行校准。
校准过程中，需要使用标准缓冲溶液，按照酸度计的操作说明进行操作，以确保酸度计的准确性。
二、氨基酸标准溶液的制备
制备氨基酸标准溶液时，需要选用高质量的氨基酸试剂，并将其溶解在适量的水中。
然后，将溶液稀释至一定浓度，作为标准溶液。
三、试样溶液的制备
将待测样品溶解在适量的水中，制备成试样溶液。
在制备过程中，需要避免引入其他杂质离子，以保证测量的准确性。
四、试样溶液的滴定
使用酸度计对试样溶液进行滴定，记录滴定过程中的pH值变化。
在滴定过程中，需要保证滴定速度均匀，避免误差的产生。
五、计算结果
根据试样溶液的滴定结果，以及氨基酸标准溶液的浓度，可以计算出试样中氨基酸的含量。
具体计算方法可以参考相关的化学分析方法。
注意事项：
1.在制备标准溶液和试样溶液时，需要保证所用试剂的质量和纯度。
2.在滴定过程中，需要保证滴定速度均匀，避免误差的产生。
3.在计算结果时，需要保证数据的准确性和可靠性。
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河南农业2019年第3期（上）
河南省土壤肥料站 主办
随着我国农业的不断发展，化学肥料的大量施用，我国的土壤肥力，特别是有机质质量分数的下降趋势十分明显。
为解决化肥过量施用带来的各种问题，改善农业生态环境，促进农业生产的可持续发展，开发、使用新兴的水溶肥料是今后农业生产中的必然趋势。
氨基酸水溶肥料作为一种与立体高效栽培技术、高产优质栽培技术相配套的新型肥料，是未来肥料发展的重要方向之一。
采用S-433 D 氨基酸自动分析仪测定含氨基酸水溶肥料中氨基酸的含量，可对目前人们所关注的所有氨基酸进行定性定量检测。
目前，该方法已被《水溶肥料 游离氨基酸含量的测定》（NY/T 1975-2010）推荐使用，并列为仲裁法。
但是标准中没有规定氨基酸分析的型号和样品含量的检测范围，因此，本文采用此方法测定水溶肥料中游离氨基酸的含量，分别研究了进样浓度和进样体积对氨基酸分离度的影响，以确定适宜的进样浓度和体积，然后对氨基酸自动分析仪法进行验证。
一、材料与方法
（一）试剂与仪器
1.试剂。
0.06 mol/L 的盐酸溶 液；500 g/L 的氢氧化钠溶液；50 g/L 的磺基水杨酸溶液；10 g/L 的EDTA-Na 溶液；pH 值为
2.2的柠檬酸钠缓冲液；氨基酸混合标准溶液2.5 ×109 nmol/mL。
2.仪器。
S-433 D 氨基酸分析仪；0.45μm 的微孔滤膜及过滤头、注射器等。
（二）测定方法
1.样品的制备。
含氨基酸水溶肥料样品经多次缩分后，取出约100 g，将其研磨至全部通过0.50 mm 的孔径过筛，混合均匀，置于洁净、干燥的容器中。
2.测定方法。
称取试样2~10 g， 置于250 mL 的容量瓶中。
充分溶解后，加水至刻度，混匀，过滤后吸取上清液2 mL 于10 mL 的离心管中，准确加入2 mL 的磺基水样酸溶液，混匀，放置1 h。
准确加入1 mL 的
S-433 D 氨基酸分析仪测定水溶肥料中氨基酸的含量
河南省土壤肥料站 王敏
EDTA-Na 溶液和1 mL 的盐酸溶液，混匀，用0.45μm 的微孔滤膜过滤。
吸取滤液1 mL，蒸干。
准确加入1~5 mL 的柠檬酸钠缓冲液溶解，使氨基酸浓度处于仪器最佳检测范围内，供仪器测定用。
3. S-433 D 氨基酸分析仪的色谱条件。
色谱柱：SYKAMLCAK06/Na。
流动相A：柠檬酸钠= 0.12 N，pH 值为 3.45；流动相B：柠檬酸钠= 0.2 N，pH 值为10.85。
流速：茚三酮溶液流速0.25 mL/min，洗脱液流速0.45 mL/min。
检测器1：570 nm， 双极的，12 123 mV，6.25样品数每秒；检测器2 ：440 nm，双极的，12 123 mV，6.25样品数每秒。
反应温度：138 ℃。
（三）数据分析
本文运用IBM SPSS Statistics
20.0进行数据统计分析，用Microsoft Office Excel 2010制图。
二、结果与分析
（一）进样浓度和进样体积对氨基酸分离度的影响
为确定进样浓度和进样体积对氨基酸峰分离度的影响，试验按照 双因素布置，进样浓度分别设为 5nmol/mL、25 nmol/mL、100 nmol/mL 3个水平，进样体积分别设为5μL、25μL、100μL 3个水平，共9个处理，每个处理重复3次。
按照测定方法进行测定。
经过校准、积分后，考察苏氨酸和丝氨酸峰形的分离度（R h ），计算公式为：
式中，H 0为苏氨酸和丝氨酸平均峰高，单位为mm；H 为苏氨酸
校正模型截距C V C * V 误差总计校正的总计
140 199.27185.1171 329.888298.84268.237141 981.3551 782.084
140 199.27142.558664.94474.7113.791
36 982.48911.226175.40219.708
0.0000.0010.0000.000
1224182726
图1 苏氨酸-丝氨酸分离度随进样量的趋势
氨基酸进样量/nmol
苏氨酸-丝氨酸分离度/%
R h =
×100%
H 0
H 0-H
河南农业2019年第3期（上）
Gly Ala Cys Val 30 576±83
15 322±60
405±6
10 801±33
His
Lys
Arg
总量
1554±10
3459±41
6630±92
142 785±321
0.64
1.18
1.39
0.23
0.27
0.39
1.42
0.30
15%的氨基酸水溶肥料，按照测定方法进行测定。
由表2可知，24 h 内17种氨基酸的RSD值均在1.5%以下。
其中蛋氨酸的RSD最高，为1.43%；甘氨酸的RSD最低，为0.27%。
总峰面积的RSD为0.23%。
2.重复性。
按照测定方法测定氨基酸含量的RSD值。
如表3所示，各氨基酸含量结果的RSD值
均＜1.5%。
组氨酸的稳定性最差，RSD为1.44%；天冬氨酸的稳定性最好，RSD为0.76%。
总峰面积的RSD为0.51%。
三、结论
本文探讨了S-433D氨基酸分析仪的进样浓度和进样体积对分离度的影响，明确了适宜的进样浓度和进样体积，对测定方法进行了验证，得到以下结论：Thr
Ser
Glu
Pro
Gly
Ala
Cys
Val
8171±102
23 146±224
6258±47
4780±60
30 497±186
15 384±136
406±6
10 839±82
Ile
Leu
Tyr
Phe
His
Lys
Arg
总量
5010±41
6010±50
1172±14
5599±48
1544±22
3476±49
6655±94
14 3104±728
0.81
0.83
1.17
0.85
1.44
1.40
1.42
0.51
1.25
0.97
0.75
1.25
0.61
0.88
1.42
0.75。