鸡新城疫高免血清的制备
兔抗鸡新城疫高免血清的制备与检测
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成 ｌ％红 细胞 悬 液 。 鸡新 城疫 血 凝 抑制 试 验抗 原 按使 用 说 明稀 释 （ 每瓶 加 入 １ ０ｍＬ生理 盐 水 ） ，并 通 过 红细 胞凝 集 试 验 ， 定病 毒 的红 细 胞 凝 集 价 为 ７ １ｇ ）ＨＩ 测 （ ２ ， 试 ｏ 验 时稀 释抗 原 为 ２ １ ２ ， ４个 血凝单 位 。 （ ｇ）即 ｏ
复 ３次 ， 得 到 的红 细 胞液 加 Ｏ８ 将 ．５％生 理 盐 水 配
收 稿 日期 ：０ ５ ｌ— ３ ２ ０ 一 １０ 中 图分 类 号 －８ ２５ ￥ ５ ． １ ． 文 献 标 识 码 ： ￥ ５ ． ； ８ ８３ ５３ Ａ 文 章 顺 序 编 号 ：６ ２ ５ ９ （０ ６ ０ — ０ ２ ０ １７ — １０ ２ ０ ）３ ０ ４ — ２
１ 材 料 与 方 法 １１ 材 料 ． １１ ．． 试 验 动 物 ：试 验 兔 购 于 安 徽 省 六 安 市 朝 阳 １
１２２ 兔抗 体水 平 监测 ： 验兔 饲 养 ３ ．． 试 进行 第 ｄ后
１ 采血 ， 次 然后 每 隔 ７ｄ采血 １ 。当血 清 Ｈ 效 价 次 ｌ
１１ 药 品 ： ．． ２ 鸡新 城 疫血 凝 抑制 试 验 阳性 血 清 （ 批
号 ：０ ２ ４ ８ 和 鸡 新 城 疫 血 凝 抑 制 试 验 抗 原 （ ２ ００ ０ ） 批 号 ：０ ３ ５ ７ 均 由 中 国农 业 科 学 院哈 尔 滨兽 医研 ２０ ０ １）
究 所 提 供 。 鸡 新 城 疫 中 等 毒 力 活 疫 苗 ，批 号 ：
药厂 ， 鸡购 于安 徽省 六安 市 马巷孵 坊 。 雏
康试 验 兔 ，用 鸡新 城疫 中等 毒力 活疫 苗 （Ｉ ） 系 免
鸡新城疫高免血清的制备
参考内容二
基本内容
鸡新城疫是一种高度接触性的传染病毒性疾病，对养鸡业和家禽业造成巨大的 经济损失。为了有效预防和控制鸡新城疫的传播，生产高质量的鸡新城疫灭活 疫苗至关重要。本次演示将详细介绍鸡新城疫灭活疫苗生产的关键环节质量控 制，包括生产流程、工艺参数、质量控制标准等，旨在提高生产厂家的责任意 识，确保疫苗的质量和安全性。
为了更好地说明鸡新城疫灭活疫苗生产关键环节的质量控制，我们以某生产厂 家的生产流程为例进行阐述。该生产厂家在生产过程中严格遵循了上述关键环 节的质量控制要求。在病毒培养环节，他们选择了合格的种毒，并在适宜的培 养基质和培养条件下进行了病毒的培养。在灭活处理环节，他们选择了有效的 灭活剂，并在适当的灭活时间和温度下进行了灭活处理。
3、静置30分钟后，观察结果，记录待检样品是否出现血凝现象。
二、阳性血清国家标准品的研制
为了提高鸡新城疫血凝抑制试验的准确性，我们需要制备阳性血清国家标准品。 首先，我们需要挑选具有代表性的鸡新城疫康复鸡，并采集其血液样本。将血 液样本通过特定工艺处理后，制备成国家标准品。制备过程中需要注意以下几 点：
鸡新城疫灭活疫苗是一种利用病毒灭活株生产的疫苗，具有高度的安全性和有 效性。疫苗的生产流程包括病毒培养、灭活处理、纯化、配制和包装等环节。 每个环节都需要严格的质量控制，以确保疫苗的质量和安全性。
1、病毒培养
病毒培养是鸡新城疫灭活疫苗生产的第一步，也是关键环节之一。培养病毒的 目的是为了获得足够数量的病毒，以便进行后续的灭活处理。在这个环节中， 病毒的种毒、培养基质和培养条件都需要进行严格的质量控制。种毒必须来自 于已经建立了毒种库的合格供应商，同时培养基质也需要经过严格的检验和灭 菌处理。另外，培养条件也需要进行严格的控制，以确保病毒的正常生长和繁 殖。
新城疫血凝试验操作方法
新城疫血凝试验操作方法新城疫血凝试验是一种常用的实验方法，用于检测禽新城疫病毒在禽类血清中的抗原抗体反应。
以下是新城疫血凝试验的操作方法，详细描述每一步骤：1. 材料准备：- 禽类血清：收集禽类的血样，将其离心分离血清，并将其保存在零下20摄氏度的冰箱中备用。
- 新城疫病毒液：购买或自行制备新城疫病毒，将其制备成1：128滴度的新城疫病毒液。
- 血凝片：将干净的玻片剪成适当大小的片状，准备足够数量的血凝片。
- 吸管、滴管、离心管、冰箱、恒温箱等实验器材。
2. 血清试管反应：- 取出血清样本：将保存在冰箱中的禽类血清取出，解冻在室温下。
- 样本稀释：用吸管或滴管将血清样本稀释，一般使用1:10、1:20、1:40、1:80等倍数的稀释比例。
- 血清样本投放：用吸管或滴管将稀释好的血清样本分别滴在血凝片上，每滴20-30微升。
- 血凝片孵育：将血凝片放在恒温箱中，一般在37摄氏度下孵育2小时，以供病毒与抗体结合，形成血凝线。
3. 补体添加与孵育：- 添加补体：血凝片孵育2小时后，将其冷藏，并将血凝片上的稀释好的新城疫病毒液均匀地滴在每一孔中，每孔滴1滴，滴液与血清充分混合。
- 孵育：将滴有血清和新城疫病毒液的血凝片放入恒温箱中，继续孵育12-24小时，以待反应产生。
4. 反应结果的观察与判断：- 结果观察：观察血凝片上是否形成血凝线，血凝线清晰可见，形状均匀、连续。
- 结果判断：根据血凝线的形成情况进行反应结果的判断。
如果出现血凝线，则说明该禽类血清中存在对新城疫病毒的抗体，可判断为阳性；如果没有血凝线出现，则说明该禽类血清中不存在对新城疫病毒的抗体，可判断为阴性。
5. 结果记录与分析：- 结果记录：记录每一个滴管孔的结果，标注每个孔的血凝线情况，包括阳性或阴性反应。
- 结果分析：根据阳性和阴性的反应情况，分析该批次禽类血清样本中是否存在对新城疫病毒的抗体，以评估疫情的发展情况和禽类的抗体水平。
需要注意的是，在操作过程中要严格遵守实验的安全规范，并按照操作方法进行操作，确保实验结果的准确性和可靠性。
用新城疫高免蛋黄液治疗鸡新城疫
高 免 蛋 全 蛋 保 存 或 成 品 高 免 蛋 黄 液 都 可 在 １ ～４ ￣ Ｃ的 冰 箱 内 保 鲜 保 存 １ 个月， 其 抗 体 效 价 不 变， 免 疫效果十分理想 ； 或保存 于相对湿度 ７ ０ ％～ ８ ０ ％的 １ ～ ｌ ０ ℃ 的室 内 １ 个 月 ，其 抗 体 效 价 保 持 不变 ； 放 在＿ ２ ０～一 ３ ０ ℃ 冰 柜 内冷 冻 保 存 可 达 １ 年，
８ ９只 ， 分 别 占本鸡 群 的 １ ９ ％和 ４ ％。 肌注 １ ｍＬ ／ 只 进 行 第 ２次 注 射 ， 按ｌ ０倍 剂 量 新 城 疫 油 乳 剂 灭 活 １ ｍＬ ／ 只 在 鸡 群 病 死 数 上 无 显 著 差 异 。 经 第 疫 苗分 点胸肌注 射 。再 间隔 １ ５ ｄ采 血 测 定 ， 或 用 和 ２ ｄ在 病 鸡 群 中 仍 有 ５ ０ ０多 只 鸡 尚未 好 蛋 黄 一 测 定 新 城 疫 抗 体 效 价 ，若 达 到 １： １ ２ ８ ０～ １次 肌 注 ３ 转 。 为 了 巩 固 疗 效 ， 对 仍 未 见 好 的 病 鸡 重 复 肌 ６ ４ ０倍 即可 。 若 在 二 次 注 射 后 达 不 到 １： ６ ４ ０倍 时 ，
笔者 在 随后 的四年 里 ， 用 以上 方 法 ， 分 别 对
黄 生理 盐 水混 合液 １ ０ ０ ｍＬ， 青霉素 ８ ０ 万单位， 链 本 地 发 生 鸡 新 城 疫 的 三 个 鸡 场 ， 分９ 批 次 肌 注 高 霉素 １ ０ ０万 单 位 ， 充 分 搅 匀 。有 条 件 的 用 高 速 组 免 蛋 黄 液 进 行 治 疗 ， 均 取 得 了显 著 疗 效 。其 中 织 捣碎 机 处 理 １ ｍｉ ｎ ， 用 双 层 纱布 过 滤 ， 分装 、 密 治 疗 要 点 是 ：及 早 发 现 疫 情 并 及 早 肌 注 高 免 蛋 封 于 葡 萄糖 瓶 中， 贴 上 瓶签 。 黄 液 。目
用新城疫高免蛋黄液治疗鸡新城疫
用新城疫高免蛋黄液治疗鸡新城疫作者：李俊昭来源：《吉林农业》2013年第05期1.新城疫高免蛋黄鸡群的制备1.1 鸡群的选择可选择临开产日龄（18周龄的最好）或产蛋期的鸡群（最好避开产蛋盛期），避免因强化免疫而影响鸡的生长和产蛋量，并做鸡白痢净化处理。
1.2 强化免疫接种对选好的鸡只进行2～3次新城疫Ⅰ系冻干疫苗强化接种。
第1次按疫苗常规量5倍剂量的新城疫油乳剂灭活疫苗做分点胸肌注射。
间隔10天进行第2次注射，按10倍剂量新城疫油乳剂灭活疫苗分点胸肌注射。
再间隔15天采血测定，或用蛋黄液测定新城疫抗体效价，若达到1∶1280～640倍即可。
若在二次注射后达不到1∶640倍时，按第2次注射的剂量和方法进行第3次强化接种。
至达到1∶640倍以上为止。
2.新城疫高免蛋黄液的制备将收集的新鲜的高免蛋或备用蛋，在无菌室内，用0.1%新洁尔灭液浸泡高免蛋15分钟，取出用灭菌纱布擦干；用75%酒精棉球消毒蛋壳后，打开蛋壳将蛋黄取出盛于灭菌容器中，加入等量生理盐水稀释；双抗处理，剂量为：高免蛋黄生理盐水混合液100mL，青霉素80万单位，链霉素100万单位，充分搅匀。
有条件的用高速组织捣碎机处理1分钟，用双层纱布过滤，分装、密封于葡萄糖瓶中，贴上标签。
3.新城疫高免蛋和高免蛋黄液的保存高免蛋全蛋保存或成品高免液都可在1℃～4℃的冰箱内保存1个月，其抗体效价不变。
免疫效果十分理想；或保存于相对湿度70%～80%的1℃～10℃的室内1个月，其抗体效价保持不变；放在-20℃～-30℃冰柜内冷冻保存可达1年，但其抗体效价逐日下降，直接影响免疫效果。
4.新城疫高免蛋黄液的应用2000年初秋，本地某鸡场有58～72日龄的蛋鸡群先后发病。
根据其临床症状、血清学诊断方法，确诊为鸡新城疫，遂用鸡新城疫高免蛋黄液进行治疗。
第一群鸡于发病第5天，第二群鸡于发病第2天，分别做胸肌注射新城疫高免蛋黄液，剂量分别是1mL/只和2mL/只。
一种治疗鸡新城疫病的免疫球蛋白制剂及其制备方法[发明专利]
![一种治疗鸡新城疫病的免疫球蛋白制剂及其制备方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/c974381e7c1cfad6185fa780.png)
专利名称：一种治疗鸡新城疫病的免疫球蛋白制剂及其制备方法
专利类型：发明专利
发明人：刘长太,刘军伟,郭文龙,王浩
申请号：CN201310587096.1
申请日：20131121
公开号：CN103585628A
公开日：
20140219
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及一种治疗鸡新城疫的针对性治疗药物，特别涉及一种治疗鸡新城疫病的免疫球蛋白制剂及其制备方法。
该治疗鸡新城疫病的免疫球蛋白制剂及其制备方法，其主要组分体积比为：柠檬酸溶液0.02%-0.1%，冰乙醇10%-30%，胰蛋白酶0.2%-0.8%，生理盐水0.5%-1%。
其有益效果是：本产品通过对提取的球蛋白进行水解、包被后可用作口服使用，大大提高了产品在现代养鸡业使用过程中的可操作性，有效的解决了鸡的新城疫疾病发生后肉鸡精神沉郁、采食量低下、出栏时间延长和蛋鸡产蛋下降的现象，避免因鸡的新城疫疾病导致鸡大批死亡而带来的经济损失，填补了行业空白。
申请人：青岛润达生物科技有限公司
地址：266200 山东省青岛市即墨市通济街道海尔路266号
国籍：CN
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211127523_抗鸡新城疫病毒特异性血清制备的研究与鉴定
抗鸡新城疫病毒特异性血清制备的研究与鉴定张 娜，张文芳，李晓静，崔松奇，田春利，马通通通信作者，刘兴刚（豪威生物科技有限公司，天津３０１７００）摘 要：目的 探索最优免疫程序制备出效价较高的抗鸡新城疫病毒特异性血清的方法。
方法 试验选用４周龄ＳＰＦ鸡，采用不同免疫剂量、免疫周期、免疫方法、免疫部位等进行分组，共分为７组免疫程序，每组１０只ＳＰＦ鸡，每组均从首免后３周开始测抗体。
结果 第４组和第５组抗体表现最好，为首免用鸡新城疫病毒液（ＬａＳｏｔａ株）进行基础免疫，首免后１～２周进行２免，２免至４免均为鸡新城疫病毒灭活疫苗（ＬａＳｏｔａ株）加倍剂量（２羽份）多点免疫，每次灭活疫苗加强免疫间隔２～３周，最终可使抗体水平达到１３ｌｏｇ２，中和效价均大于１ １３００。
结论 先用活疫苗进行基础免疫，１～２周后进行２～３次加倍剂量的多点、加强免疫效果最好，同时从环境控制、ＳＰＦ鸡筛选、免疫、中间监测、冻干、检测等建立了血清制备及鉴定方法。
关键词：鸡新城疫；特异性血清；检验；制备方法ｄｏｉ：１０．１９５６７／ｊ．ｃｎｋｉ．１００８－０４１４．２０２３．０４．００１ 引言根据现行《中华人民共和国兽药典》三部规定，鸡新城疫（ＮＤ）疫苗或毒种必须进行外源病毒检验。
此项检验需要用抗鸡新城疫病病毒特异性阳性血清对样品进行中和后接种ＳＰＦ鸡胚和ＣＥＦ细胞进行培养。
因此抗血清的中和效价和特异性对检验起着至关重要的作用。
实验通过设计几组免疫程序［１］，免疫前后对环境进行控制，筛选出最佳免疫程序来制备抗鸡新城疫病病毒特异性阳性血清，从而建立血清制备及鉴定方法，为研发新兽药血清制备奠定基础。
材料１．１ 病毒液及灭活疫苗鸡新城疫病毒（ＬａＳｏｔａ株）病毒液（效价１０９．３８ＥＩＤ５０／０．１ｍＬ），鸡新城疫病毒（ＬａＳｏｔａ株）灭活疫苗，由豪威生物科技有限公司提供。
１．２ ＳＰＦ鸡胚、ＳＰＦ鸡ＳＰＦ鸡胚、ＳＰＦ鸡均购自北京勃林格殷格翰维通生物技术有限公司。
精品文档鸡新城疫灭活疫苗的制备
鸡新城疫灭活疫苗的制备制备油佐剂灭活苗1 材料1.1毒种：鸡新城疫病毒弱毒La sota株。
1.2实验动物：9-10日龄鸡胚若干。
1.3主要试剂：碘酊，1%硫柳汞溶液，7号白油，司盘-80，硬脂酸铝，吐温-80，甲醛等。
主要仪器：孵化箱、1ml注射器、蛋架、打孔器、蜡烛、胶体。
2.实验步骤2.1种毒繁殖：将毒种用灭菌生理盐水作适当稀释，尿囊内接种10日龄SPF鸡胚，每胚0.1mol.选种后72-120小时之间死亡且病痕明显的鸡胚，分别收获鸡胚液，装于灭菌器内定量分装于安领瓶，冷冻保存。
2.2接种前准备；种毒稀释，照蛋，打孔。
2.3接种；取生产用毒种，用灭火理盐水适当稀释（10-4或10-5），每胚尿囊内接种0.1ml.接种。
后密封针孔，置36-37继续孵育。
2.4孵育和观察；鸡胚接种后，每日照室1次，将24小时内死亡的鸡胚弃去，此后，每天照蛋2次，死亡的鸡胚随时取出，4摄氏度保存，冷却24小时。
2.5收获：将冷却的鸡胚取出，用碘酐消毒气室部位，然后以无菌手术剥除气室部卵壳，捐去卵壳膜。
剪破绒毛尿至膜及羊膜(谨防卵黄破裂)。
吸取胚液。
对每个鸡胚在吸取胚液前均应注意检查、凡胎儿腐败、胚液混浊及有任何污染可疑者，弃去不用。
吸取胚液放于同一灭菌的容器内。
（凝集试验和无菌试验）2.6 灭活：可以过滤，再加甲醛溶液，甲醛溶液的最终浓度为0.1％。
然后在37℃灭活16小时，期间振摇3~4次，在4℃保存，应不超过1个月。
（无菌检验和灭活检验）2.7 制苗2.7.1 油相制备：将7号白油与司盘- 80 ( Span - 80)按94 ∶6比例混合再加总量2%的硬脂酸铝溶液混匀后,121 ℃高压灭菌15 min即为油相。
2.7.2 水相制备：将灭活胚液(抗原液)和吐温- 80 ( Tween - 80)以96 ∶4的比例混合，充分搅拌，使吐温-80完全溶解为止，作为水相。
2.7.2 水相制备：将灭活胚液(抗原液)和吐温- 80 ( Tween - 80)以96 ∶4的比例混合，充分搅拌，使吐温-80完全溶解为止，作为水相。
动物免疫血清的制备
动物免疫血清的制备
1.选择合适的动物：通常选择小型哺乳动物如兔、小鼠、豚鼠等，或禽类如鸡、鸭等。
2. 免疫：将特定的抗原注射到动物体内，刺激其免疫系统产生相应的抗体。
免疫时间和抗原剂量需要根据具体情况进行调整。
3. 收集血清：在免疫后一段时间内，通过静脉采血的方式收集动物的血清。
4. 分离免疫球蛋白：将血清进行离心分离，得到免疫球蛋白。
5. 纯化免疫血清：通过不同的分离和纯化方法，如盐析、离子交换层析、凝胶过滤层析等，得到纯化的免疫血清。
6. 保存和贮存：将制备好的免疫血清进行冻干或冷冻保存，以便长期保存和使用。
动物免疫血清的制备不仅需要科学的技术和操作方法，还需要严格的质量控制和标准化生产流程，以确保其有效性和安全性。
- 1 -。
高免血清制作方案
高免血清制作方案
免疫对象：最好是准备淘汰的经产母猪
免疫剂量：4mL/头口蹄疫合成肽苗
免疫程序：首免后15天二免，二免后15天三免，三免后28天取血。
血清制备：三免后28天后，先将猪只消毒，再倒挂起来，在脖子动脉处取血，下面用消毒好的大盆接着，放到室温
（18℃-25℃）过夜，次日将盆中的血块用消毒好的铲子
铲出来，此时可能有少量的溶血，这没关系。
最后1mL
血清中加入2000单位的青霉素和200单位的链霉素。
分装：将制备好的血清放入500 mL或250 mL的消毒好的葡萄瓶。
贮存：-20℃保存，或制备好直接使用。
注射剂量：2mL/kg。
使用对象：各日龄的仔猪。
注意事项：1、铲子、刀子、盆子可先用消毒液消好毒，最后一定要用酒精消毒。
2、采血时母猪可先用乙醚将其麻醉，猪只也应消毒，最
后也用酒精消毒。
实验二 鸡新城疫弱毒疫苗的制备
实验二鸡新城疫弱毒疫苗的制备新城疫又称亚洲鸡瘟，是由新城疫病毒引起的鸡的一种高度接触性传染病，其主要特征为呼吸困难、腹泻、神经紊乱及黏膜和浆膜出血，一年四季均可发生，为我国养鸡业的头号疾病。
预防和治疗所用的新城疫疫苗种类很多，大致包括灭活疫苗和弱毒疫苗两类。
下面以新城疫弱毒疫苗为例讲述其制备过程。
一、目的与要求1．掌握鸡新城疫弱毒疫苗的制备方法。
2．熟悉鸡新城疫弱毒疫苗制备的操作过程。
二、材料与试剂材料：种蛋、鸡胚孵化箱、冰箱、无菌操作台、手术镊子、注射器、蜡烛、酒精灯、酒精棉和碘酊等。
试剂：灭菌PBS液/生理盐水；青、链霉素溶液。
三、制备前准备1、种毒的选择：种毒属于弱毒力毒株，包括HB1株、F株、LaSota 株、LaSota-Clone30和N79株。
必须符合：①种毒对鸡胚的毒力。
以10倍稀释的种毒0.1ml尿囊腔接种10日龄鸡胚，鸡胚应于接种后24-120h内死亡70%以上，胎儿有明显病变，血凝价在1：640以上，胎儿有明显病变，血凝价在1：640以上。
②种毒对1月龄雏鸡滴鼻免疫的最小免疫量应不大于10-3/1滴。
③种毒对10日龄鸡胚半数感染量（EID50）应不大于10-7/0.1ml。
④种毒对初生雏鸡不致病。
2、种毒的稀释：用灭菌PBS液或0.85%生理盐水10-4～10-6稀释种毒，稀释时最好加入适当双抗溶液，并在4℃作用约4小时。
3、鸡胚的选择：最好选用SPF胚、其次选用非免疫胚，再次选用普通胚。
四、操作过程1、将购买的种蛋放于37℃温箱中孵育，加入适量水调节湿度。
2、孵育至9～11日龄时，将鸡胚置于黑暗的环境下，在照蛋器下，可观察到明显的胚体运动、丰富的血管和气室，用铅笔划出接种部位和气室部位。
划线时要尽量避开胚头和血管（尤其是大血管）。
3、将划好的鸡胚置于经紫外线消毒过的超净台中，先用碘酊消毒，再用酒精棉脱碘；4、用手术镊子在标记部位打孔，打孔时要在接种部位和气室各打一孔。
5、用灭菌注射器吸取0.1ml～0.2ml稀释病毒液，经接种孔注入鸡胚尿囊腔中；6、用石蜡先将接种孔封口后，在将气室孔封口；7、做好标记（时间，名称），置37℃温箱中继续孵育，增殖病毒。
高免血清及卵黄抗体的制备技术
高免血清及卵黄抗体的制备技术免疫血清1.动物的选择可作为免疫用的动物多为哺乳类和禽类，主要有家兔、绵羊、马、猪、驴、豚鼠和鸡等，其中实验常用家兔、绵羊、鸡和豚鼠。
选择动物时要注意以下几个方面：a.抗原与动物种系动物性抗原的免疫原性，随动物种系远近而有差别。
近缘动物的蛋白质免疫原性弱，反之则强。
因此选择动物时应选用亲缘关系较远的动物。
b.免疫血清的用量所需要的免疫血清，如是经常大量地使用，选择免疫动物时则应选择大动物；如所需的免疫血清量不大，则以选择小动物为宜。
c.动物的个体状态用于免疫的动物必须是适龄、健壮、无感染的动物。
免疫过程中应特别注意营养和卫生管理。
注射抗原1个月后，动物仍无良好的抗体反应，或在规定注射日程后抗体效价不高，可再注射l～2次，若仍不佳者立即弃去．2.抗原制备与接种制造抗血清，根据产品不同,所用抗原、制法亦有所不同。
病毒性抗血清，一般是用本动物的含毒组织作抗原，首先把强毒接种本动物，使其发病，采取其含毒性组织作为抗原，注射于免疫动物。
细菌性血清，是用抗原性好的强毒或弱毒菌种，接种于规定培养基内，于37℃培养，细菌发育良好者，以纯粹检验后用作抗原。
抗原接种：动物在免疫过程中分为基础免疫及高度免疫。
基础免疫一般是注射疫苗，然后连续多次注射强毒进行高度免疫，每次注射剂量，要随着注射次数的增加而增加。
接种抗原的次数和剂量，应根据制造抗血清的品种和动物健康情况加以调整。
为了获得效价高的抗血清，动物饲养条件必须保持良好。
3.血清抗体的检测免疫程序接近结束时，测定血清的抗体效价，如果效价已达规定的要求，即可视作免疫成功，开始采血。
若经试血，血清效价不合格，则可继续增加注射抗原次数或剂量，如再试血仍不合格，应将动物淘汰。
测定免疫血清效价是及时掌握采血时机的重要步骤。
常用的有环状沉淀反应(包括抗原稀释法和抗体稀释法)和双向琼脂扩散试验。
用琼脂扩散试验测定血清效价时，如果在抗原孔与抗体孔之间出现沉淀线者，即为阳性。
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２ １ ４个 血凝 单位 抗原 按常 规方 法 制备 。 ． ２ ２ 制备 鸡 新 城 疫 高 免血 清 免 疫 程 序 １ ． ２只 １ ２ 周龄 Ｓ Ｆ公 鸡分为 ６组 ， 组 ２只 ， Ｐ 每 以免疫 用抗 原和 免疫 用灭活疫 苗分别按表 １的免疫程 序进行免疫 。 ２３ 鸡新 城 疫抗体 水平 监 测 免疫 前 试验 鸡 进 行 ． 第 １次采 血 ， 疫 后 每 隔 １天 采 血 １次 ， 免 以注 射 器 于翅 静脉采 血 １ｍ ４ ｃ 冰 箱 静 置 过 夜 后 ，０００ Ｌ， Ｉ ＝ １ ０ ｒｍｎ离心 分离 血 清 ， 红 细 胞 凝集 抑 制 （ Ｉ试 验 ／ｉ 按 Ｈ） 逐只鸡进行抗体效价测定 。 Ｊ
维普资讯
中国兽药杂志
２０ ，２ ２ ：０～ １ 李 翠 ， ０ ８ ４ （ ）３ ３ ／ 等
鸡 新 城 疫 高 免 血 清 的制备
李 翠 ， 王在 时， 关孚 时， 李俊平 ， 杉 ， 璐 冯 徐
（ 中国兽医药品监察所 ， 北京 １０ ８ ） ００ １ ［ 收稿 Ｅ期 ］２０ ｌ ０７—１ ２—０ ［ ３ 文献标识码］Ａ ［ 文章编号 ］１０ ０ ２—１８ （ ０８ ０ ０ ３ ２ ０ ２０ ） ２— ０ ０—０ ［ ２ 中图分类号］￥ ５ ．３ ８ ２４
Ｌ ｕ ，Ｗ ＡＮ Ｚ ｉ ｈ ，Ｇ ＩＣ ｉ Ｇ ａ —ｓ ｉ ＵＡＮ Ｆ ｕ—ｓ ｉ Ｉ ｕ ｈ ，Ｌ ｎ—ｐｎ ，Ｆ ＮＧ ｈ ｎ，ＸＵ Ｌ Ｊ ｉｇ Ｅ Ｓａ ｕ
（ ｈｎ ｍｔｎ ｅ ｒ ｒ ｒｇＣ ｎｒｌ Ｂ ｉｎ ００ １ ｈｎ ） Ｃ ｉａｌ ￣ ｅｏ ｔｉ ｙＤｕ ｏｔ ， ｅ ｇ１０ ８ ；Ｃ ｉ ｔ ｆＶ ｅ ｎ ａ ｏ ａ Ａｂ ｔ ａｃ ： ｅ ｈ ｐ ｒｉ ｓ ｒ ｔ Ｔｈ ｙ ｅ ｍｍｕ ｚ ｄ ｓ ｒ ｍ ｎ ｃ ｃ ｅ ｗｃ ｓｌ ｓ ａ ｅ ｗｅ ｅ ｐ ｅ ａ ｅ ｓｎ ｎｉｅ ｅ ｕ ｏ ｈｉｋ ｎ ｎｅ ａ ｔｅ ｄｉｅ ｓ ｒ ｒ ｐ ｒ ｄ ｕ ｉｇ ＮＤＶ ａ ｏａ ｓｒ ｉ ｉｕ Ｌ ｓ ｔ ｔａ ｎ ｖ ｒ ｓ ａ ｄ ｉａ ｔｖ ｔ ｄ ｖ ｃ ｉｅ ａ ａ ｎ ｔ ＮＤＶ ａ ｎ ｉｅ ｏ ｍｍｕ ｅ ｗｅｖ ｎ ｎ ｃｉ ａｅ ａ ｃｎ ｇ ｉ ｓ ｓ ａ ｔｇ ｎ ｔ ｉ ｎ ｔ ｌｅ ＳＰＦ ｃ ｉｋ ｎ ． Ｉ ｏ ｄ ｒ ｔ ｅ ａ ｆｅ ｔｖ ｈ ｃ ｅ ｓ ｎ ｒ ｅ ｏ ｇ ｔ ｎ ｅ ｃｉ ｅ ｍｅｈｏ ｏ ｐｒｐａ ｅ ｔ ｅ ｈ ｐ ｒｉ ｔ ｄ ｔ ｅ ｒ ｈ ｙ ｅ ｍｍｕｎｚ ｄ ｓ ｒ ｍ ，ｗｅ ｄ ｄ ｉ ｂ ｉ ｅｅ ｔｉ ｉｅ ｅ ｕ ｉ ｔ ｙ ｄ ｆ ｒ ｎ ｍｍｕｎ ｒ ｇ ａ ．Ｔｈ ｅ ｕ ｔ ｈｏ ｄ ｔ ａ ｅ ｐ ｏ ｒ ｍｓ ｅ ｒ ｓ ｌｓ ｓ ｗｅ ｈ ｔ ｈ ｉ ｒ ｎ ｍｍｕｎ ｏ ａ ｅ ｏ ｔ ｅ ｄｆｅ ｅ ｔｉ ｅ ｄ ｓ ｇ ｆＮＤＶ ｆｅ ｔｄ ｔ ｅｉ ｃ ｅ ｓ ｆｔ ｅ ａ ｔｂ ｙ，ｍｏ ｅ ｄ ｓ ｅ ｍｏｅ ｆｓ ．Ａｎ ａ ｃｅ ｎ ｒ ａ ｅ ｏ ｎ ｉ ｏ ｈ ｈ ｄ ｒ ｏ ａ ｒ ａ ｔ ｇ ｄ ＮＤＶ ｄ ｍａ ｅ ｈ ｅ ｅ ｆａ ｔｂ ｄ ｎ ｒ ａ ｄ ｔ ０ １・ ｔ ｅ ｌ ｖ ｌｏ ｎ ｉ ｏ ｙ ｉ ｃ ｅ ｅ ｏ １ ｏ ２，ｂ ｔｔ ｎ ｃ ｉａ ｅ ａ ｃｎ ｄ ｔｉ ｒ ａ ｅ ｔ ４ ｏ ２． ｓ ｇ ｕ ｈｅ ｉ ａ ｔｖ ｔｄ ｖ ｃ ｉｅ ｍａ ｅ ｉ ｎｃ ｅ ｏ １ １ｇ ｓ Ｋｅ ｒ ｙ ｗｏ ｄｓ：ＮＤＶ；ｈｙ ｅ ｍｍｕ ｉｅ ｅ ｍ ｐ ｒｉ ｎｚｄ ｓ ｒ ｕ
［ 摘 要 ］ 采 用鸡 新城 疫 Ｌｓｔ ａｏａ株病 毒（ Ｄ 和 鸡新 城疫 灭 活疫苗 按 ６组不 同的免 疫程 序 免疫 Ｎ Ｖ） １ ２只 １ 龄 Ｓ Ｆ公鸡 ， ２周 Ｐ 以探 索快速 制备 效价 较 高 的鸡新 城 疫 高 免血 清 的方 法。 结 果表 明 ， 同 不 的 Ｎ Ｖ剂 量 可 以影 响抗体 水 平增 长 的速度 ， Ｄ 免疫 剂量 越 大 ， 抗体 水 平增 长越 快 ； 是 Ｎ Ｖ 两次 免 但 Ｄ 疫 后只 能使 抗 体水平 增 长到 １ ｇ 而再 以灭活疫 苗 免疫可使 抗 体水 平达 到 １ ｇ。 ０ｌ ２， ｏ ４ｌ ２ ｏ ［ 关键 词 ］ 鸡 新城 疫 ； 免血 清 高 Ｐｒ ｐ ｒ ｔｏ ｏ ｙ ｒ Ｉ ｍ ｕｎ ｚ ｄ Ｓ ｒ ｎ ｉｋｅ ｗｃ ｓｌ ｓ ａ ｅ ｅ ａ ａ ｉ ｎ ｆＨ ｐｅ ｍ ｉｅ ｅ ｕｍ ｏ Ｃｈ ｃ ｎ Ｎｅ ａ ｔｅ Ｄｉｅ ｓ
１ 试 验 材料
１６ 其 他材 料 ． １ 龄 Ｓ Ｆ公 鸡 ， 于 北 京 实验 ２周 Ｐ 购
２ 试验 方法
按 常规 方法 … 制备 的鸡 红 细 胞悬
１ １ 试 验 动物 ． 动 物 中心 。
液 和 ０ ８ ％ 灭菌 生理 盐水 。 ．５
１２ 免疫 用 Ｎ Ｖ 乾 元 浩 公 司 ２０ ． Ｄ ０７年 ０ ２月 ０ ５ 日制备 的新 城疫 Ｌｓｔ株 生产 用种 毒 （ ａｏａ 湿毒 ） 批 号 ， 为 Ｂ ２０００ ， Ｓ０７２ １病毒含 量 为 １ Ｉ５ ０ １ 。 ０ ＂ＥＤｏ ． ／ ｍＬ １３ 免 疫用鸡 新城 疫 灭 活疫 苗 （ ａｏ ． Ｌｓｔ ） 北 京 ａ株 市兽 医生物 药 品厂 ２ ０ ０７年 ｏ ６月 ０ 日制 备 的新 城 ５ 疫 Ｌｓｔ ａｏａ株油剂 灭 活疫 苗 ， 号 为 ００ 。 批 ７４ １４ 检 测 用 抗 原 中 国兽 医药 品监 察 所 ２０ ． ０７年 ０ ５月生 产 ， 凝价 Ｈ 血 Ａ≥１３ ０ ：２ 。 １５ 阳性血 清标 准 品 中 国兽 医药 品监察 所 ．