专题九 生物技术实践.ppt

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尿素 稀释涂布平板法
醋酸菌
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高压蒸汽灭菌法 平板划线
碳源、氮源、水和无机盐
接种
灭菌
乳酸菌
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微专题1 微生物的培养与应用
1.培养基制备与微生物纯化技术
称量
灭菌 接种环
梯度稀释
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A.倒成平板后直接培养可判断有无污染 B.倒成平板后需要进行灭菌处理 C.图示结果表明该菌需要生长因子乙或丙 D.生长图形法还可用于某些菌种的筛选 解析 倒成平板后直接培养，若培养基有菌落，则说明培养基被污染，若无菌 落则未被污染，A正确；由题干可知，研究小组在倒平板前已经接种嗜热菌， 因此倒成平板后不能再进行灭菌处理，B错误；图中在乙和丙中存在该嗜热菌， 说明该嗜热菌生长需要生长因子乙和丙，C错误；菌种只有在所需生长因子存 在时才会生长，因此可通过生长因子的种类进行菌种的筛选，D正确。 答案 AD
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2.微生物分离与计数的两个实例
接种环灭菌
试管口灭菌
划线
接种
37 ℃恒温箱
37 ℃恒温箱 平板冷却凝固
接种
环
分区划线
变红
酚红
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题型一 微生物的培养和无菌技术 1.(2015·江 苏 卷 ， 19) 做 “ 微 生 物 的 分 离 与 培 养 ” 实 验 时 ， 下 列 叙 述 正 确 的 是
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解析 倒完平板后立即盖上培养皿，冷却后将平板倒过来放置，A正确；接种 环在每次接种前和接种结束后都要通过灼烧来灭菌，所以完成步骤④中5次划 线操作前都要灼烧灭菌，接种结束后还需灼烧灭菌1次，防止造成污染，由此可 见，完成步骤④共需灼烧接种环6次，B错误； 划线接种结束后，将平板倒置 后放入培养箱中培养，避免培养基表面的水分挥发和防止皿盖上的水珠落入培 养基造成污染，C错误；①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行，防止 被杂菌污染，D错误。 答案 A
专题九 生物技术实践
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[考纲要求] 1.进行微生物的分离和培养。2.测定某种微生物的数量。3.研究培养基 对微生物的选择作用。4.探讨微生物的利用。5.运用发酵食品加工的基本方法。活 动要求：1.用大肠杆菌为材料进行平面培养，分离菌落。2.分离土壤中分解尿素的 细菌，并计数。3.利用酵母菌、醋酸菌分别制作果酒和果醋。4.利用乳酸菌发酵制 作酸奶或泡菜。
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2.(2016·江苏卷，25改编)漆酶属于木质降解酶类，在环境修复、农业生产等领 域有着广泛用途。下图是分离、纯化和保存产漆酶菌株的过程，相关叙述错 误的是( )
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A.生活污水中含有大量微生物，是分离产漆酶菌株的首选样品 B.筛选培养基中需要加入漆酶的底物，通过菌落特征挑出产漆酶的菌落 C.在涂布平板上长出的菌落，再通过划线进一步纯化 D.斜面培养基中含有大量营养物，可在低温下长期保存菌株 解析 漆酶降解“木质”，则产漆酶菌株多存在于“木质”丰富的场所，虽然 生活污水中含有大量微生物，但不一定含有产漆酶的菌株，A错误；筛选产漆 酶微生物的培养基中应加入木质素等漆酶降解的底物，可依据不同菌种形成的 菌落的不同特点，挑选出产漆酶的菌落，B正确；在涂布平板上长出的菌落，再 通过划线进一步纯化，C正确；斜面培养基中含有大量营养物，可在低温下长 期保存菌株，D正确。 答案 A
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2.(2016·全国卷Ⅱ，39)苹果醋是以苹果汁为原料经发酵而成的，回答下列问题： (1)酵母菌的呼吸代谢途径如图所示。图中过程①和②是苹果醋生产的第一阶 段，在酵母菌细胞的________中进行，其产物乙醇与________试剂反应呈现灰 绿色，这一反应可用于乙醇的检验；过程③在酵母菌细胞的________中进行， 与无氧条件相比，在有氧条件下，酵母菌的增殖速度________。
() A.高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖 B.倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上 C.为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落 D.用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上
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解析 本题考查微生物的分离与培养的相关知识。高压灭菌加热结束时，需先 切断电源，让灭菌锅内温度降至100 °C以下，压力表的指针回到零时，再打开 锅盖，A错误；倒平板时，不能将培养皿盖完全打开，以防污染，B错误；接种 环经火焰灭菌后需待冷却后挑取菌落，C错误。 答案 D
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解析 (1)牛肉膏蛋白胨培养基中，牛肉膏、蛋白胨为微生物提供了氮源，而Ⅱ 号、Ⅲ号培养基中除X外的其他物质均不含碳，所以能为微生物提供碳源的有 机物是X。(2)因为Ⅱ号培养基中碳源只有X，相当于是选择培养基，只有能降解 X的细菌才能增殖，而不能降解X的细菌因缺乏碳源不能增殖。(3)要对菌落进行 计数，应采用稀释涂布平板法进行接种。(4)在有氧条件下，丙酮酸参与细菌的 有氧呼吸，可以为该菌的生长提供能量和合成其他物质的原料。 答案 (1)牛肉膏、蛋白胨 X (2)下降 不能降解X的细菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解X的细菌能够增殖 (3)稀释涂布平板法 (4)能量 合成其他物质的原料
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(2)若将土壤悬浮液接种在Ⅱ号液体培养基中，培养一段时间后，不能降解X的细菌 比例会____________，其原因是________________________________________ ___________________________________________________________________。 (3)Ⅱ号培养基加入琼脂后可以制成固体培养基，若要以该固体培养基培养目标菌 并对菌落进行计数，接种时，应采用的方法是________________。 (4)假设从Ⅲ号培养基中得到了能高效降解X的细菌，且该菌能将X代谢为丙酮酸， 则在有氧条件下，丙酮酸可为该菌的生长提供____________和____________。
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题型二 分离特定微生物及计数 3.(2020·山东省等级考试模拟，20)(多选)生长图形法是一种测定微生物营养需求
的简便方法。为探究某嗜热菌所需生长因子的种类，研究小组把该菌的悬浮 液与不含任何生长因子但含有其他必需营养物质的培养基混合后倒成平板， 然后在平板上划分数区，将甲、乙、丙三种生长因子分别添加到不同区域， 培养结果如图所示，下列说法正确的是( )
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4.(2019·上海普陀区二模)如图为实验室培养和纯化大肠杆菌的部分操作步骤， 下列说法正确的是( )
A.步骤①中导入培养基后立即盖上培养皿盖 B.步骤④中接种环只需在第一次划线前灼烧处理 C.将接种后的图④平板放入培养箱中培养时无需倒置 D.③步骤操作时不需要在酒精灯火焰旁进行
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题型三 微生物的分离培养与测定 5.(2019·全国卷Ⅰ，37)[生物——选修1：生物技术实践] 已知一种有机物X(仅含有C、H两种元素)不易降解，会造成环境污染。某小组 用三种培养基筛选土壤中能高效降解X的细菌(目标菌)。 Ⅰ号培养基：在牛肉膏蛋白胨培养基中加入X(5 g/L)。 Ⅱ号培养基：氯化钠(5 g/L)，硝酸铵(3 g/L)，其他无机盐(适量)，X(15 g/L)。 Ⅲ号培养基：氯化钠(5 g/L)，硝酸铵(3 g/L)，其他无机盐(适量)，X(45 g/L)。 回答下列问题。 (1)在Ⅰ号培养基中，为微生物提供氮源的是________________。Ⅱ、Ⅲ号培养 基中为微生物提供碳源的有机物是________________。
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提醒：①为了确定培养基的灭菌是否合格，微生物实验一般会设置空白对照：随 机取若干灭菌后的空白平板培养基在适宜条件下培养一段时间，观察培养基上是 否有菌落生成。 ②平板划线法只适用于微生物的纯化，不适合进行计数，并且在最后一次划线的 末端处的菌种最纯 。
末端可分离得到一个单独的细菌细胞
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3.理解乳酸菌、乳酸、亚硝酸盐的数量(含量)随时间变化的曲线
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题型一 果酒、果醋的制作 1.(2019·江苏卷，9改编)下列关于传统发酵技术应用的叙述，正确的是( ) A.利用乳酸菌制作酸奶过程中，先通气培养，后密封发酵 B.家庭制作果酒、果醋和腐乳通常都不是纯种发酵 C.果醋制作过程中发酵液pH逐渐降低，果酒制作过程中情况相反 D.果酒发酵、果醋发酵温度分别控制在30 ℃、20 ℃
糖→醋酸； 酒精→乙醛→醋酸
无氧呼吸产生乳酸