2019年高考生物查漏补缺复习精品课件:21微生物的实验室培养1人教版选修1
2019_2020学年高二人教版生物选修一课件:2.1 微生物的实验室培养(一)
专题2 微生物的培养与应用第4课时 微生物的实验室培养(一)学习导航 1.阅读教材P14“(一)培养基”,掌握培养基的作用、分类及营养成分。
2.阅读教材P15“(二)无菌技术”,区分消毒和灭菌,掌握不同物品的灭菌方法。
重难点击 1.了解培养基的基本知识。
2.学会无菌操作的基本知识。
内容索引一、培养基二、无菌技术当堂检测一、培养基基础梳理1.概念:人们按照微生物对 的不同需求,配制出供其_________的营养基质。
2.种类3.成分(1)主要成分:水、、氮源、 。
(2)其他成分:还需要满足微生物生长对 、特殊营养物质以及 的要求。
培养基 ↓加入______培养基氧气营养物质生长繁殖液体凝固剂固体碳源无机盐pH(3)填表完成牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成培养基组分提供的主要营养牛肉膏___________________________蛋白胨___________________NaCl ________H 2O氢元素、氧元素碳源、氮源、磷酸盐和维生素碳源、氮源和维生素无机盐(4)某些微生物生长还需要特殊的条件,填表完成培养下列微生物时所需要的特殊条件培养的微生物需要满足的其他要求乳酸杆菌培养基中添加_______霉菌将pH 调至_____细菌将pH 调至_____________厌氧微生物需要提供条件维生素酸性中性或微碱性无氧1.培养基的成分与作用(1)试根据微生物的同化作用类型将微生物进行分类。
问题探究答案 分为自养型微生物和异养型微生物。
(2)试从碳源和氮源的角度分析不同类型的微生物所需的培养基成分的特点。
自养型微生物异养型微生物碳源CO 2、NaHCO 3等无机物_____________氮源__________________________________________尿素、蛋白质等有机物糖类等有机物NH 3、硝酸盐等无机物2.牛肉膏蛋白胨培养基(1)牛肉膏蛋白胨培养基中提供碳源和氮源的物质各是什么?答案 牛肉膏和蛋白胨都可以为微生物提供碳源和氮源。
人教版高中生物选修一课件:2.1微生物的实验室培养 (共43张PPT)
⑴概念 :凡是能为微生物提供碳元素的营养物质。
⑵来源: ①无机碳源:CO2;NaHCO3等 ②有机碳源:糖类、脂肪酸、石油等
⑶作用: ①构成细胞物质和一些代谢产物 ②异养微生物的能源
2.氮源
⑴概念: 凡是能够为微生物提供N元素的营养物质。
不加氮源的无氮培养基 分离固氮菌
不加含碳有机物的无碳培养基 分离自养型微生物
加入青霉素等抗生素的培养基 分离导入了目的基因的受体细胞 back
——
伊 红 美 蓝 培 养 基
(四)无菌技术
1.概念
无菌操作泛指在培养微生物的操作中,所有防 止杂菌污染的方法。 2.消毒与灭菌
⑴消毒定义: 利用化学或物理方法,杀死部份微生物的过程。
培养基的种类
划分标准
培养基种类
液体培养基
半固体培养基
物理性质
固体培养基
特点 不加凝固剂
加凝固剂,如琼脂
用途
工业生产 观察微生物的运 动、分类鉴定
微生物分离、 鉴定、活菌计 数、保藏菌种
化学成分 用途
天然培养基 合成培养基
选择培养基
含化学成分不明确的天然物质
培养基成分明确 在培养基中加入某种化学物质, 以抑制不需要的微生物的生长, 促进所需要的微生物的生长
鉴别培养基
在培养基中加入某种指示剂或 化学药品,用以鉴别不同种类的
微生物
工业生产 分类、鉴定 培养、分离出 特定微生物
鉴别不同种 类微生物
液体培养基:
表面生长 均匀混浊生长 沉淀生长
半固体培养基:
无动力
固体培养基:菌落
高中生物选修1课件:2.1微生物的实验室培养(共40张PPT)
(3) 为 避 免 周 围 环 境 中 _微__生__物___ 的 污 染 , 实 验 操 作 应 在 ___酒__精__灯__火__焰__附__近___进行。
(4) 实 验 操 作 时 应 避 免 已 经 灭 菌 处 理 的 材 料 用 具 与栏目
周__围__的__物__品__相接触。
链 接
2.消毒和灭菌
包括某些大量元素
无机化合物
特别 提醒
①对异养微生物来说,含C、H、O、N的化合物既是碳 源又是氮源、能源。
②一些天然营养物质,如酵母膏、蛋白胨、动植物组织
提取液等可为微生物提供生长因子。
栏 目
链
接
③不同微生物对营养的需求不同,因此,首先根据不同
微生物的营养需求配制针对性强的培养基。
④营养物质过少不能满足微生物的营养需要,过多对微 生物的生长有抑制作用。
花生饼、石油等
接
氮源
能为微生物的代谢提供 氮元素的物质
无机氮源:N2、NH3、 NO、NH有机氮源:蛋 白胨、尿素、蛋白质等
生长因子
生长必不可少的微量有 机物
维生素、氨基酸、碱基 等
在生物体内含量很高, 水 在低等生物体内含量更
高
外界摄入
栏
目
链
接
为微生物提供碳源、氮 无机盐 源以外的各种重要元素,
目
分利用营养物质;氮源主要是作为微生物合成蛋白质和核酸 链
接
的原料;牛肉膏主要为微生物提供碳源、磷酸盐和维生素。
答案:B
变式 训练
1.下列制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述,错误的是 ()
A.操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌
B.将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯
人教版高中生物选修一2.1《微生物的培养与应用--微生物的实验室培养》ppt课件
该增加的成分
。
琼脂(或凝固剂)
一、课题目标: 了解有关微生物及培养基的基础知识,
进行无菌技术的操作,进行微生物的培养。
二、课题重点和难点:
无菌技术的操作。
三、技能目标:
掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和平 板划线法等基本操作技术,熟练、规范地 进行无菌操作,成功地培养微生物。
倒平板技术
1.培养基灭菌后,需要冷却到50 ℃左右时, 才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的 温度?
菌种的保存
1、临时保藏: 接种到固体斜面培 养基,菌落长成后 置于4℃冰箱保存。
2、长期保存: 甘油冷冻管藏法
本课题知识小结:
四、课题成果评价
(一)培养基的制作是否合格 如果未接种的培养基在恒温箱中保温1~2 d后无 菌落生长,说明培养基的制备是成功的,否则需要重新 制备。 (二)接种操作是否符合无菌要求 如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基 本一致,并符合大肠杆菌菌落的特点,则说明接种操作 是符合要求的;如果培养基上出现了其他菌落,则说明 接种过程中,无菌操作还未达到要求,需要分析原因, 再次练习。 (三)是否进行了及时细致的观察与记录 培养12 h与24 h后的大肠杆菌菌落的大小会有明 显不同,及时观察记录的同学会发现这一点,并能观察 到其他一些细微的变化。这一步的要求主要是培养学生 良好的科学态度与习惯。
例3.右表是某微生物培
养基成分,请据此回答: 编号
(1)右表培养基可培养 ① 的微生物类型
是 自养型微生。物
②
(2)若不慎将过量 NaCl加入培养基中。
③
如不想浪费此培养基, ④
可再加入含碳有机.物
⑤
⑥
⑦
成分 粉状硫 (NH4) 2SO4 K2HPO4 MgSO4 FeSO4 CaCl2 H2O
2019-2020学年高中生物人教版选修1课件:2.1微生物的实验室培养
知识梳理
重难聚焦
典例透析
一
二
三
四
五
六
2.纯化大肠杆菌操作过程中的注意事项 (1)平板划线法中多次灼烧接种环进行灭菌
灼烧时期 目的
取菌种前 杀死接种环上原有的微生物
杀死上次划线后接种环上残留的菌种,使下次划线 每次划线前 的菌种直接来自于上次划线末端,使每次划线后的
菌种数目减少,达到分离菌株的目的
接种结束后
-18-
课题1 微生物的实验室培养 目标导航
知识梳理
重难聚焦
典例透析
一
二
三
四
五
六
六、微生物的纯化
1.纯化大肠杆菌 (1)原理:在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞,使其长成单 个的菌落,这个菌落就是纯化的细菌菌落。 (2)纯化微生物的接种方法
平板划线法
稀释涂布平板法
通过接种环在琼脂固体培
养基表面连续划线的操作,
-14-
课题1 微生物的实验室培养 目标导航
知识梳理
重难聚焦
典例透析
一
二
三
四
五
六
四、几种消毒和灭菌方法及其适用范围
适用范围
操作方法
煮沸消毒 法
日常食品,罐装食品
100 ℃煮沸 5~6 min
巴氏消毒 牛奶、啤酒、果酒等不宜
70~75 ℃煮 30 min
法
进行高温灭菌的液体
或 80 ℃煮 15 min
-10-
课题1 微生物的实验室培养 目标导航
知识梳理
重难聚焦
典例透析
一
二
三
四
五
六
类别 概念
主要来源
最常利用 作用
2019-2020学年高中生物人教版选修1课件:2.1 微生物的实验室培养
探究点一 探究点二 探究点三
归纳提升 倒平板操作注意事项 (1)培养基灭菌后,需冷却至50 ℃左右时才能倒平板,原因是温度 过高,易造成冷凝水过多,落入培养基,造成污染,温度过低,琼脂会凝 固。 (2)培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,不要完全打开。 (3)整个操作过程要在酒精灯火焰旁进行,避免杂菌污染。 (4)平板冷凝后要倒置的原因:防止皿盖上的冷凝水落入培养基, 造成污染。 (5)若倒平板时,培养基溅在皿盖和皿底之间的部位,这个平板应 弃用。
探究点一 探究点二 探究点三
(2)在培养基上划线操作中,操作的第一步及每次划线之前都要 灼烧接种环。在第二次及以后的划线,总是从上一次划线的末端开 始。这样做的原因是什么?划线后,线条末端细菌的数目比线条起 始处要少,每次从上一次划线的末端开始,能使细菌的数目随着划 线次数的增加而逐步减少,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 同时注意最后一区(图中5区)的划线与第一区(图中1区)不要相连。
答案:D
类型一
类型二
类型三
变式训练1 下表为某培养基的配方,下列叙述正确的是( )
成分 蛋白胨 葡萄糖 K2HPO4 伊红 美蓝 蒸馏水
含量 10 g 10 g 2 g
定容至 0.4 g 0.065 g 1 000 mL
A.从物理性质看该培养基属于液体培养基,从用途看该培养基属 于选择培养基
B.该培养基中属于碳源的物质是葡萄糖和蛋白胨,属于氮源的物 质是蛋白胨
水
在生物体内含量很高,在 不仅是优良的溶剂,而且是细胞 低等生物体内含量更高 结构的重要组成成分
无机 盐
为微生物提供除碳、氮元 素以外的各种重要元素, 包括某些大量元素
细胞的组成成分,生理调节物 质;某些化能自养菌的能源,酶 的激活剂等
21微生物的实验室培养课件人教版选修一
微生物培养的基本技术 1.配制培养基 称量―→混合―→溶化―→调 pH―→分装―→包扎 2.灭菌 加水―→加培养基―→密封―→排冷气―→维持压力―→ 取出倒平板(或搁置斜面)
3.接种 (1)接种过程:洗净双手→点燃酒精灯→接种→贴标签。 (2)接种工具:包括___接__种__环_____、涂布器。 (3)接种方法:平板划线法、___稀__释__涂__布__平__板_______法。 (4)注意事项:整个操作过程要在_酒__精__灯__火__焰___旁完成。 4.培养 接种后的培养皿放入恒温箱内培养。
【答案】:D
【配对练习 1】下列有关碳源的叙述不正确的是( ) A.碳源主要用于构成微生物的细胞物质和一些代谢产物 B.某些碳源可以作为微生物的主要能源物质 C.蛋白质一定不能做碳源 D.不同种类的微生物的碳源可能不同 解析:蛋白质也能做碳源。 答案:C
培养基的种类 【例 2】下列有关培养基的叙述正确的是( ) A.培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质 B.培养基只有两类:液体培养基和固体培养基 C.固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基 D.微生物在固体培养基上生长时,可以形成肉眼可见的 单个细菌
3.平板划线操作时每次灼烧的目的如下表:
第一次灼烧
目 的
避免接种环上可 能存在其他微生 物污染培养物
每次划线之前灼烧 划线结束后灼烧
杀死上次划线结束 后残留在接种环上 的菌种,使每次划线 的菌种来自上次划 线的末端
杀死接种环上残 留的菌种,避免细 菌污染环境和感 染操作者
4.实验后,所有用过的培养基、培养液等都需要统一进行
高压蒸汽灭菌后再丢弃,否则将会造成环境污染。
微生物所需的营养要素 【例 1】下列关于微生物营养的说法,正确的是( ) A.同一种物质不可能既作碳源又作氮源 B.凡是碳源都能提供能量 C.除水以外的无机物仅提供无机盐 D.无机氮源也能提供能量
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三、实验操作
(一)制备牛肉膏蛋白胨培养基(用于 培养细菌)
2020/6/14
操作 1.计算、称量 步骤 2.溶化
3.调pH: pH7.6 4.过滤:这一步可以省去。 5.分装:分装过程中注意不要使培 养基沾在管口或瓶口上,以免沾污 棉塞而引起污染。分装锥形瓶的量 以不超过锥形瓶容积的一半为宜。 6.加塞 7.包扎
朊病毒(蛋白质病毒)
2020/6/14
病毒的增殖:
2020/6/14
原核生物:一藻二菌三体
2020/6/14
一、细菌
细菌的营养类型
• 根据细菌所利用的能源和碳源的不同, 将细菌分为两大营养类型。
• 自养菌: 光能自养型:光合细菌 化能自养型:硝化细菌,铁细菌,硫细菌
• 异养菌: 腐生菌、寄生菌
10.无菌检查: 将灭菌的培养基放入37℃的温室 中培养24—48小时,以检查灭菌是 否彻底。
二、放线菌
1、结构: ➢单细胞原核 ➢分支状的菌丝(基内菌丝、气生菌丝)
2020/6/14
应用:
微生物中发现了几千种抗生素, 其中2/3是由放线菌产生的。
如:链霉素、土霉素、四环素、 氯霉素、红霉素、庆大霉素
2020/6/14
三、真菌(真核细胞)
酵母菌、霉菌、大型真菌(蘑菇、木耳等) 1.单细胞真菌——酵母菌:
B固体培养基:菌落,菌苔
2020/6/14
B.半固体培养基:
无动力 有动力(弥散)
2020/6/14
(是否运动)
培养基的用途
液体培养基:增菌、工业生产 固体培养基:分离、鉴定、计数、保藏 半固体培养基:观察运动、分类、计数 天然培养基:工业生产 合成培养基:分类、鉴定 选择培养基:分离出特定微生物 鉴别培养基:鉴别不同种类的微生物
2020/6/14
三、真菌(真核细胞)
2.丝状真菌——霉菌
2020/6/14
直立菌丝 营养菌丝
2020/6/14
腐生生活
2020/6/14
各种类型的 霉菌菌落
酵母菌和霉菌
2020/6/14
青霉
3.大型真菌
2020/6/14
放各 线种 菌类 菌型 落的 酵各 母种 菌类 菌型 落的
2020/6/14
2020/6/14
选择培养基
加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌
加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌
不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌
不加有机物的培养基: 分离自养型微生物
2020/6/14
固体培养基与液体培养基 A.液体培养基:
表面生长 均匀混浊生长 沉淀生长
2020/6/14
2020/6/14
基本结构:
细胞壁、细胞膜、细胞质、拟核
特殊结构:
荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢等
2020/6/14
1.细菌的结构
①细胞壁:肽聚糖;与细菌的致病能力 有关;溶菌酶作用对象。 ②荚膜:细胞壁外多糖类物质——或 称为粘液层;荚膜与致病菌的致病力 有关。(如S型肺炎双球菌) ③鞭毛:主要用于运动,数目多少不一。
2020/6/14
(2)灭菌的定义: 以强烈的化学剂或物理方法消灭所 有微生物,包括所有细菌的繁殖体、芽 孢、霉菌及病毒,而达到完全无菌之过 程。 灭菌与消毒技术是微生物有关工作 中最普通也是最重要的技术。
2020/6/14
3.常用的消毒与灭菌的方法
(1)消毒的方法:
1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min 2、巴氏消毒法:70-75 ℃下煮 30min
如上图所示。
2020/6/14
无菌技术
分类
定义
方法
灭菌法
高程度 消毒法 中程度 消毒法
低程度 消毒法
2020/6/14
杀灭一切微生 物
杀灭一切致病 微生物 杀灭除芽孢外 的致病微生物
杀灭细菌繁殖 体、亲脂病毒
物理法:热力、辐射、 微波、等离子体 化学法:醛类、烷化剂
紫外线、微波、热力、 含氯剂、臭氧等
2020/6/14
芽孢——休眠体,不是繁殖体
2020/6/14
孢子——生殖细胞
2020/6/14
5.细菌的群体特菌征落—— • 由单个微生物在适宜的固体培养基表面
或内部生长、繁殖到一定程度后,形成 肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞 生长群体叫菌落。
• 菌落是鉴定菌种的重 要依据。
2020/6/14
2020/6/14
④纤毛:比鞭毛短、直、细,主要用于 细菌之间的粘附或附着于宿主细胞。菌 毛:数量少,参与细菌的接合,也是噬 菌体入侵的受体。
⑤质粒:环状DNA小分子,通过接合作 用,质粒可以在不同细胞之间迁移,使 质粒上的耐药性基因可以在细菌之间传 播,质粒可用作基因工程的载体。
2020/6/14
答:无菌技术还能有效避免操作者 自身被微生物感染。
2020/6/14
2.请你判断以下材料或用具是否需要 消毒或灭菌。如果需要,请选择合适 的方法。
(1) 培养细菌用的培养基与培养皿 (2) 玻棒、试管、烧瓶和吸管 (3) 实验操作者的双手
答:(1)、(2)需要灭菌;(3)需 要消毒。
2020/6/14
霉菌:菌丝细长,菌落疏松,成绒毛状、蜘蛛 网状、棉絮状,无固定大小,多有光泽, 不易挑起。
同类微生物的不同物种,菌落的特点 也不相同。
2020/6/14
原生生物界:藻类、原生动物类、原生菌类
草履虫
2020/6/14
原核生物
(原核细胞构成)
有细胞结构
真菌
微 生
真核微生物 (真核细胞构成) 原生生物
2020/6/14
加棉塞 最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌,它 可以杀灭所有的生物,包括最耐热的某些 微生物的休眠体,同时可以基本保持培养 基的营养成分不被破坏。 有些玻璃器皿也可采用高温干热灭菌 。为了防止杂菌,特别是空气中的杂菌污 染,试管及玻璃烧瓶都需采用适宜的塞子 塞属口、塑,料通及常硅采胶用培 加 染帽棉养 一 ,,花基 个 保分 棉 证它塞装 塞 通们,完 。 气也只毕 棉 良可可以塞好采让后能,用空,防加各气在止棉种通管杂塞金过口菌时污上, ,而空气中的其应他使微棉塞生长物度不的能2通/3过在。试管口内,
物
的
种
类 没有细胞结构 病毒
2020/6/14
微生物的共同特点
(小、多、快、强、广))
• (2)吸收多,转化快 • (3)生长旺,繁殖快 如大肠杆菌 • (4)适应强,易变异 如感冒病毒 • (5)分布广,种类多
2020/6/14
(二)培养基 人们按照微生物对营养物质的
专题2 :微生物的培养与应用
2020/6/14
一、基础知识: (一)微生物
是一切肉眼看不见或看不清楚的微 小生物的总称.
病毒界
原核生物界
微生物包括
真菌界
2020/6/14
原生生物界
病毒:动物病毒、植物病毒、细菌病毒
2020/6/14
病毒
2020/6/14
SARS冠状病毒、 禽流感病毒
2020/6/14
体内外所有的 灼烧 微生物,包括 芽孢和孢子 干热
培养基、玻璃仪器 、棉塞、牛皮纸等 接种环、涂布器
玻璃仪器
2020/6/14
微生物实验室培养的基本操作程序
1、培养基的配制 2、器具、培养基的灭菌 3、倒平板 4、微生物接种 5、恒温箱中培养 6、菌种的保存
2020/6/14
1.无菌技术除了用来防止实验室的培 养物被其他外来微生物污染外,还有什 么目的?
2020/6/14
鉴别培养基与选择培养基
A.鉴别培养基 利用细菌分解糖类和蛋白质的能力及其代
谢产物的不同,在培养基中加入特定的作用底 物和指示剂,观察细菌生长过程中分解底物所 释放的不同产物,通过指示剂的反应不同来鉴 别细菌。例如 伊红-美蓝培养基鉴别水中大肠
杆菌(带金属光泽深紫色菌落);又如:淀粉
⑥细胞膜、⑦拟核、⑧核糖体 2.细菌的形态:杆菌、球菌、弧菌、
螺旋菌 3.细菌的生殖方式:分裂生殖 4.细菌的休眠体——芽孢
2020/6/14
有些细菌在一定的条件下,细胞里面形成一 个椭圆形的休眠体,叫做芽孢。芽孢的壁很厚, 对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵 抗力。芽孢又小又轻,可以随风飘散。当环境 适宜(如温度、水分适宜)的时候,芽孢又可 以萌发,形成一个细菌.
2020/6/14
8.灭菌: 将100ml培养基用玻棒转移至三 角锥瓶中,塞上棉花塞,包上牛皮纸, 再放入高压蒸气灭菌锅,在压力为 100kPa、温度为121℃,灭菌15~ 30min。将培养皿用旧报纸包裹,放 入干热灭菌箱内,在160~170 ℃下 灭菌2h。
2020/6/14
9.倒平板: 待培养基冷却到50 ℃左右时, 在酒精灯附近倒平板。(倒平板操作 见课本)2d后观察平板,无杂菌污染 才可用来接种.
• 四大类微生物区分要点 • 菌落形态: 1.若菌落表面湿润 薄而小——细菌 厚而大——酵母菌 2.若菌落表面干燥 密而小——放线菌 松而大——霉菌
2020/6/14
不同微生物菌落的特点
细菌:湿润,粘稠,易挑起
放线菌:干燥,多皱,难挑起,菌落较小,多 有色素
酵母菌:湿润,粘稠,易挑起,表面光华, 比细菌的菌落大而厚.
2020/6/14
培养基的成分
⑴各种培养基的共有成分 ①水、②碳源、③氮源、 ④无机盐等 营养物质。
⑵不同微生物所需要的特殊成分 微生物生长对pH、特殊营养物质,以及氧 气、二氧化碳、渗透压等的要求。 例如:生长因子(即细菌生长必需,而自身不
能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌
呤、嘧啶)
2020/6/14
超声波、碘类、醇类、 酚类