04-蛋白质的制备-牛奶中提取酪蛋白

六、注意事项
1、离心时，样品要对称平衡。误差<0.5 g。 2、使用离心机时，严格按照操作规程进行。 3、调整pH值时，越接近所需值，越用少量的 酸碱来调节。先快后慢，不要过头，防止
变性。
4、记录每一步加入酸和碱的用量。
六、注意事项
下次实验： Bradford法测定蛋白质含量（酪蛋白） 时间：4月25日下午2：00 今天值日：第7，8，9组
COOH Pr H3N
+
－
+OH－ +H+
COO
+OH－
+
COO
－
Pr H3N
Pr H2N +H+
pH ＜ pI
Hale Waihona Puke BaidupH = pI
pH ＞ pI
等电点pH（pI）时，蛋白质溶液具有： （1）不稳定，容易从溶液中沉降出来； （2）由于净电荷为零，双电层结构受到破坏， 从而容易聚集而沉淀。
二、实验原理
2. 蛋白质溶液的胶体性质；
实验四
一、实验目的 二、实验原理 三、实验器材
蛋白质的制备--牛奶中提取酪蛋白
四、材料与试剂
五、操作方法
六、注意事项
一、实验目的
1．通过实际操作加深对蛋白质理化性 质的认识。 2．利用蛋白质的等电点性质分离蛋白 质的基本操作方法。 3. 利用透析法分离蛋白质的基本操 作方法。
二、实验原理
1．蛋白质溶液的带电性质和等电点pH（pI）；
蛋白质溶液是胶体溶液；
不能通过半透膜。
胶体性质的应用：
（1）透析；
（2）超滤；
小分子溶出
三、实验器材
1. 常规的玻璃器皿。 2. 离心管和离心机。 离心机的组成： 离心机使用注意事项： （1）离心管要对称平衡； （2） 运行前速度调到零，先 调时间，然后慢慢调速度。 （3）离心结束时务必要把速 度按钮复零。 （4）时间为达规定转速后。
3. 沉淀中加入60ml水，边搅拌边用0.5 mol/L NaOH调pH至7.0，使其沉淀全部彻底溶解。 4. 用0.5 mol/L HCl溶液调pH至4.6，离心 2000rpm× 3min ，弃上清液；
五、操作步骤（方法1）
5. 重复操作3-4； 6. 沉淀中加入1 mol/L的NaOH溶液，调pH 至7.5，装入预处理过的透析袋中。 7. 4℃透析48小时，即可获得酪蛋白粗品； 8. 结束实验，完成实验报告，下次实验带来 交给指导教师。
四、材料与试剂
1．原始实验材料： 鲜牛奶（市售） 2. 其它试剂 （1）0.5 mol/L HCl溶液 （2）0.5 mol/L NaOH溶液
五、操作步骤（方法1）
1．取牛奶30ml，离心3000rpm×15min，除 去脂肪层； 2. 向脱脂奶中加入等体积的蒸馏水，用0.5 mol/L HCl溶液调pH至4.6，离心 2000rpm×3min ，弃上清液；