紫外光谱法测定食品中多种合成色素的研究

紫外光谱法测定食品中多种合成色素的研究
金一萍;肖全松;陶瑞民;刘波
【摘要】采用基于紫外光度计的单波长、双波长分析测定方法,对食品中常用的胭脂红、苋菜红、柠檬黄、日落黄、亮蓝五种合成色素进行定量分析.实验表明:该方法样品处理简单,准确度较高,线性相关性好(R＞0.9996),精密度较高(RSD％＜
2.5％),加标回收率(94％～102％)之间,检出限较低,可用于五种合成色素的常规快速分析.
【期刊名称】《新余学院学报》
【年(卷),期】2017(022)006
【总页数】3页(P22-24)
【关键词】合成色素;紫外光谱法;分析检测
【作者】金一萍;肖全松;陶瑞民;刘波
【作者单位】江西新能源科技职业学院光伏材料学院,江西新余338004;新余学院,江西新余338004;江西新能源科技职业学院光伏材料学院,江西新余338004;江西新能源科技职业学院教务处,江西新余338004;江西新能源科技职业学院光伏材料学院,江西新余338004
【正文语种】中文
【中图分类】O657.3
人工合成食用色素是以改善食品色泽为目的食品添加剂，在我国食品中普遍使用,但是在实际生产中不规范使用的现象屡见不鲜，如在肉制品、饮料、果冻等食品中
常有超标使用[1-3]。

国家标准测定食用合成色素的方法主要有高效液相色谱法和薄层色谱法，前者灵敏且准确，可同时对多种合成色素进行分析，但仪器较贵，测定、处理样品复杂耗时，后者用于定量分析灵敏度，但准确度较差[4,5]。

本研究采用基于紫外光度计的单波长、双波长分析测定方法[6-8]，对食品中常用的胭脂红、苋菜红、柠檬黄、日落黄、亮蓝五种合成色素进行了一些探索，初步建立了同时测定多种常用合成色素简单、快速的方法，可用于合成色素的常规快速分析。

UV2550紫外光度计，砂芯过滤装置；胭脂红、苋菜红、柠檬黄、日落黄、亮蓝GBW(国家标准物研究中心)；无水乙醇、甲醇、甲酸、氨水等为分析纯，聚酰胺粉、柠檬酸为化学纯(天津大茂试剂厂)。

1.2.1 标准溶液配置
准确称取五种合成色素0.0500g，用蒸馏水溶解并定容50.00mL，得到浓度为1.00g/L的储备液(或用1000mg/L标准品)。

用时稀释至0.10g/L，亮蓝稀释至
0.0lg/L作标准工作液。

1.2.2 样品处理
(1)饮料类：准确称取30.00g样品,放入100ml烧杯中，加热去除二氧化碳。

饮料中含有乙醇，在烧杯中放入玻璃珠加热去除乙醇。

若溶液无油脂类杂质，用滤膜抽滤后可直接用于测定。

(2)肉类、糖果、蜜饯类：准确称取10.00g样品,粉碎，放入100ml烧杯中，加30ml蒸馏水,温热溶解，过滤，收集滤液。

若溶液有油脂类杂质，可用少量乙醚处理，乙醇-氨水-水混合液提取。

若pH值较高，用柠檬酸溶液调至pH=6左右。

(3)色素提取(聚酰胺吸附法)：对杂质较多、颜色深的样品可采用聚酰胺吸附法提取色素。

在溶解液加柠檬酸(20%)调至pH=6左右，加热至60℃，将1.0g聚酰胺粉用水调成粥状加入溶液中，搅拌片刻，抽滤；用60℃溶液(pH=4)的洗剂3次，然后用甲醇-甲酸(3：2)溶液洗涤3次，再用水洗涤至中性；用乙醇-氨水-水(7：2：
1)混合液5～10ml冲洗解吸3～5次，收集解吸液，加乙酸中和，加热蒸发近干；加水溶解，定容在50ml容量瓶中。

(1)合成色素紫外标准吸收谱图(以胭脂红和苋菜红为例)，其主色峰:胭脂红
(508±3nm)、苋菜红(522±3nm)、柠檬黄(426±3nm)、日落黄(482±3 nm)、亮蓝(630±3 nm)。

取样品溶液于lcm石英比色皿中，用水作参比，在190nm～
700nm间连续吸收扫描,与标准谱图比较,可初步判断样品中所含色素种类。

(2)柠檬黄与日落黄，胭脂红与日落黄，胭脂红与苋菜红之间的紫外吸收峰有部分
重叠，存在一定的干扰，而柠檬黄与胭脂红、苋菜红，日落黄与苋菜红，亮蓝与其他四种色素重叠部分少，可以分别在主色峰波长条件下测定，误差较小。

分别移取(胭脂红、苋菜红、柠檬黄、日落黄0.lg/L)标准工作液0.05 m1、0.10
m1、0.50 m1、1.00 m1、2.00 m1、4.00 m1、5.00m1；移取(亮蓝0.0lg/L)标
准工作液0.20m1、0.50m1、1.00m1、2.00 m1、4.00 m1、6.00ml于l0ml比
色管中，用水稀释至刻度，lcm石英比色皿，在对应用主色峰波长下，测定五种合成色素的标准曲线。

表1为胭脂红、苋菜红、柠檬黄、日落黄0.lg/L的线性范围
与检出限检出限情况，图1、图2分别为胭脂红和苋菜红的标准曲线。

选定五种样品提取溶液各测定一种色素的回收率。

于l0ml比色管中准确移取
8.00ml和5.00ml (酒饮料) 提取液，分别加入标准工作液1.00ml、2.00ml(苋菜红)、2.00ml(亮蓝),用蒸馏水定容。

在对应用波长下,平行测定8次，测定其回收率和精密度，结果见表2。

(1)五种常见合成色素在食品中大部分是添加一种或两种,添加三种以上的比较少。

食品中合成色素种类可通过在190nm～700nm间扫描紫外吸收谱线，与标准谱
图比较来判断样品色素种类。

对于添加一种合成色素样品或添加两种合成色素样品，如柠檬黄与胭脂红、苋菜红，日落黄与苋菜红，亮蓝与其他四种色素，可分别在主色峰波长条件下测定，实验中实际样品测定误差一般小于5%。

(2)添加两种及以上合成色素的样品，如柠檬黄与日落黄，胭脂红与日落黄，胭脂红与苋菜红等,由于吸收峰有部分重叠实，干扰较大，可采取双波长紫外光度法,选定等吸收点波长为参比波长，测定标准溶液的吸光度差ΔA和标准曲线ΔA-C，可消除大部分干扰。

选取六种样品，按照上述方法进行样品处理和测定，按分析方法，均检出有合成色素，其结果见表3。

五种样品用高效液相色谱法测定，并与紫外吸收光谱法测定结果比较，含多种色素样品的偏差稍大,但也可用于常规测定。

设备采用HPLC-20A(日本岛津)，YWG-C18不锈钢柱，甲醇为流动相，乙酸铵溶液(0.02mol/L)梯度洗脱，流速：
1mL/min。

(1)研究结果表明, 紫外吸收光谱法可用于食品中五种合成色素的定量分析，测定结果与高效液相色谱法比较偏差总体不大，可满足食品中常用的胭脂红、苋菜红、柠檬黄、日落黄、亮蓝五种合成色素的常规快速分析。

(2)通过紫外光谱在190nm～700nm间连续吸收扫描，与标准谱图比较，可初步判断样品中所含色素种类。

再根据样品中所含合成色素的多少，采用在主色峰波长条件下直接测定；或采取双波长紫外光度法，选定等吸收点波长为参比波长进行测定，可消除大部分干扰。

(3)紫外吸收光谱法测定五种合成色素时测量的线性范围(0.50～50.0mg/L),检出限为(0.1～0.6mg/L)，精密度(RSD%<2.5%)，回收率(94%～102%)。

该方法有单波长、双波长测定方法，样品处理简单，具有快速且准确度较高的优点，可满足食品中常用五种合成色素的常规快速分析。

【相关文献】
[1]于立青,彭蜀晋.食品色素和人体健康[J].化学教育,2005(6):3-5.
[2]赵晓燕,李维生.食用色素的使用安全问题及发展[J].中国食物与营养,2014(6):10-13.
[3]成黎.天然食用色素的特性、应用、安全性评价及安全控制[J].食品科学，2012(23):399-404.
[4]周宏霞,韩喜东,于军强,等.食用色素及其检测方法的研究进展[J].检验检疫学刊,2009(4):74-76.
[5]宋丹萍，张宏，李琪.国内外食用色素标准的比较及检测方法的研究进展[J].食品科
学,2014(3):295-300.
[6]陆晓红.饮料中合成着色剂高效液相测定预处理方法的研究[J].中国卫生检验杂志,2007(8):56-57.
[7]李必斌,张海霞,潘连富.紫外一可见吸收光谱法定性定量测定食用合成色素[J].中国卫生检验杂志,2001(1):58-60.
[8]高丽芳,王艳伟,赫春香.双波长分光光度法测定饮料中亮蓝和胭脂红[J].煤炭与化工,2013(5):65-67.。