沪科版生物高中第二册6.3《基因工程与转基因生物》课件(共20张PPT)
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A．既能被E也能被F切开 B．能被E但不能被F切开 C．既不能被E也不能被F切开 D．能被F但不能被E切开
。
2．已知在质粒pZHZl中，限制酶G切割位点距限制酶E切割位点0．8kb，限制酶H切 割位点距限制酶F切割位点O．5kb。若分别用限制酶G和H酶切两份重组质粒pZHZ2样
品，据表4所列酶切结果判断目的基因的大小为1.2 kb
限制酶1：——G↓GATCC——
限制酶2：——T ↓ GATCA—— 限制酶3：——↓GATC——
限制酶4：——A ↓ AGCTT——
基因工程需要三种必要的工具
辨一辨：分析这四种限制酶的识别序列、切割位点及切割 后产生的产物 ？
限制酶1：——G↓GATCC——
限制酶2：——T ↓ GATCA—— 限制酶3：——↓GATC——
因（YR）。其中XR内部含有限制酶KasI识别序列，YR内部含有限制酶FseI 、HpaII、NaeI、NgoMIV识别序列，五种酶的识别序列如图28B（▼表示切 割位点），且这些识别序列在整个质粒上均仅有一处，目的基因内部不存在 这些识别序列。
• 1．若要将结构如图28C所示的目的基因直接插入到YR内形成重组质粒
基因工程
1 基因工程基本过程
（1）获取目的基因
【直接分离/人工合成】
（2）目的基因与运载体重 组
[通常用同种限制酶切割
运载体；DNA连接酶拼接]
2
（3）重组DNA分子导入受
体细胞
3
【微生物/动物/ 植物细胞】 （4）筛选含目的基因的受体
细胞
4
【成功表达目的基因产物】
基因工程需要三种必要的工具
1、化学剪刀——限制性核酸内切酶
重组DNA:1.6+3.1=1.2+3.5=4.7
入至3．山若羊想的在__山受__羊_精_的_卵_乳__汁细中胞收中获。上述目的基去 目因掉 的的E基-表F因达段=产重的物组质，D粒则N’=A需3-将.质7重-粒0组.2’==质43.粒.75-p3Z.H5=Z21导.2
4．上述目的基因模板链中的TGA序列对应一个密码子，翻译时识别该密码子的
三种
•目的基因——目的基因 （×）
•质粒——质粒
（×）
•目的基因——质粒 （ √ ）
完成练一练第3小题
1 基因工程基本过程
（1）获取目的基因
【直接分离/人工合成】
（2）目的基因与运载体重 组
[通常用同种限制酶切割
运载体；DNA连接酶拼接]
2
（3）重组DNA分子导入受
体细胞
3
【微生物/动物/ 植物细胞】
3.6kb(1kb=1000对碱基因)，目的基因长度为
0.4kb。 若用ECOR1和BamH1两种
0.15kb
限制酶切下质粒ECOR1—
BamH1片段（片段长度为
0.15kb）,再用ECOR1和
BamH1两种限制酶切下目
的基因替换质粒ECOR1—
BamH1片段，则重组DNA
3.6kb
长度为? 3.6kb—0.15kb+0.4kb=3.85kb
• A．XR、YR B．XR、YS C．XS、YR D．XS、YS
• 3．动物基因工程通常以受精卵作为受体细胞的根本原因是__B______。
• A．受精卵能使目的基因高效表达 B．受精卵可发育成动物个体 • C．受精卵基因组更易接受DNA的插入 • D．受精卵尺寸较大，便于DNA导入操作
• （2015年真题） • 如图28A所示，质粒pZHZ9上含有X抗生素抗性基因（XR）和Y抗生素抗性基
• You have to believe in yourself. That's the secret ofห้องสมุดไป่ตู้success. 人必须相信自己，这是成功的秘诀。
•
【真题训练】 完成2015年第1小题 完成2012年第1小题
基因工程需要三种必要的工具
2、化学浆糊——DNA连接酶
连接目的基因和运载体
练一练：已知某A质粒上有抗氨苄青霉素基因（APr ）和抗四环素基因（TCr）,且同时具备ECOR1和 BamH1两种限制酶的酶切位点。A质粒总长 3.6kb(1kb=1000对碱基因)，目的基因长度为 0.4kb。
若将用ECOR1和BamH1限 制酶切开的目的基因和质 粒混合连接后的产物导入 大肠杆菌，则如何才能筛 选出成功导入目的基因的 工程菌，请简述筛选步骤。
练一练：已知某A质粒上有抗氨苄青霉素基因（APr ）和抗四环素基因（TCr）,且同时具备ECOR1和 BamH1两种限制酶的酶切位点。A质粒总长 3.6kb(1kb=1000对碱基因)，目的基因长度为 0.4kb。
若用BamH1限制酶切开的 目的基因和质粒混合连 接，连接后获得的产物 有几种?
（假设一个质粒最多只能 连接一个目的基因）
pZHZ10，则pZHZ9需用限制酶_N_ goM_IV__切开。
• 2．将上述切开的质粒溶液与目的基因溶液混合，加入DNA连接酶连接后，进 行大肠杆菌受体细胞导入操作。之后，受体细胞的类型（对两种抗生素表现
出抗性R或敏感性S）包含_A_、_ B、_D_（多选）。
• A．XR、YR B．XR、YS C．XS、YR D．XS、YS
• 3．动物基因工程通常以受精卵作为受体细胞的根本原因是__B______。
• A．受精卵能使目的基因高效表达 B．受精卵可发育成动物个体 • C．受精卵基因组更易接受DNA的插入 • D．受精卵尺寸较大，便于DNA导入操作
1、空载
X 敏感Y敏感
2、目的基因-质粒 Y被破坏 X抗性
3、质粒-质粒 X抗性 Y抗性
三种。 质粒—目的基因 质粒—质粒 目的基因——目的基因
• （2015年真题） • 如图28A所示，质粒pZHZ9上含有X抗生素抗性基因（XR）和Y抗生素抗性基
因（YR）。其中XR内部含有限制酶KasI识别序列，YR内部含有限制酶FseI 、HpaII、NaeI、NgoMIV识别序列，五种酶的识别序列如图28B（▼表示切 割位点），且这些识别序列在整个质粒上均仅有一处，目的基因内部不存在 这些识别序列。
限制酶4：——A ↓ AGCTT——
•9、要学生做的事，教职员躬亲共做；要学生学的知识，教职员躬亲共学；要学生守的规则，教职员躬亲共守。2021/8/272021/8/27Friday, August 27, 2021 •10、阅读一切好书如同和过去最杰出的人谈话。2021/8/272021/8/272021/8/278/27/2021 1:23:16 AM •11、只有让学生不把全部时间都用在学习上，而留下许多自由支配的时间，他才能顺利地学习……（这）是教育过程的逻辑。2021/8/272021/8/272021/8/27Aug-2127-Aug-21 •12、要记住，你不仅是教课的教师，也是学生的教育者，生活的导师和道德的引路人。2021/8/272021/8/272021/8/27Friday, August 27, 2021
大肠杆菌要么空载，要么含有目的基因——质粒重组DNA分子。因 此，可以利用质粒上的标记基因筛选。因为 TCr 被破坏，所以 只能用含 有安苄青霉素 的培养基筛选。
练一练：已知某A质粒上有抗氨苄青霉素基因（APr ）和抗四环素基因（TCr）,且同时具备ECOR1和 BamH1两种限制酶的酶切位点。A质粒总长 3.6kb(1kb=1000对碱基因)，目的基因长度为 0.4kb。
3、分子运输车——运载体
常见类型：质粒 ①能在宿主细胞中自我复制并稳定保存，以使目的基 因在受体细胞中复制并稳定存在； ②.有适宜的限制酶切点,以便装载目的基因； ③.带有某些标记基因，便于鉴定和筛选。
思考：用同一种限制酶切目的基因和质粒。然 后把很多很多用同种限制酶切割得到的质粒和 目的基因混合在一起，可能产生几种连接情况？
tRNA上相应的碱基序列是_U__G__A___。
总结
基因工程基本过程
（1）获取目的基因 （2）目的基因与运载体重组 （3）重组DNA分子导入受体细胞 （4）筛选含有目的基因的受体细胞
基因工程三种工具
1、化学剪刀——限制性核酸内切酶 2、化学浆糊——DNA连接酶 3、分子运输车——运载体
作业
• 完成练习纸上未完成的练习 • 尝试自己纠错
• 1．若要将结构如图28C所示的目的基因直接插入到YR内形成重组质粒
pZHZ10，则pZHZ9需用限制酶_N_ goM_IV__切开。
• 2．将上述切开的质粒溶液与目的基因溶液混合，加入DNA连接酶连接后，进 行大肠杆菌受体细胞导入操作。之后，受体细胞的类型（对两种抗生素表现
出抗性R或敏感性S）包含_A_、_ B、_D_（多选）。
13、He who seize the right moment, is the right man.谁把握机遇，谁就心想事成。2021/8/272021/8/272021/8/272021/8/278/27/2021 •14、谁要是自己还没有发展培养和教育好，他就不能发展培养和教育别人。2021年8月27日星期五2021/8/272021/8/272021/8/27 •15、一年之计，莫如树谷；十年之计，莫如树木；终身之计，莫如树人。2021年8月2021/8/272021/8/272021/8/278/27/2021 •16、教学的目的是培养学生自己学习，自己研究，用自己的头脑来想，用自己的眼睛看，用自己的手来做这种精神。2021/8/272021/8/27August 27, 2021 •17、儿童是中心，教育的措施便围绕他们而组织起来。2021/8/272021/8/272021/8/272021/8/27
4
完成2015年第2小题
1 基因工程基本过程
（1）获取目的基因
【直接分离/人工合成】
（2）目的基因与运载体重 组
[通常用同种限制酶切割
运载体；DNA连接酶拼接]
2
（3）重组DNA分子导入受
体细胞
3
【微生物/动物/ 植物细胞】 （4）筛选含目的基因的受体
细胞
4
【成功表达目的基因产物】
完成练一练第4小题
若用BamH1限制酶切开 的A质粒，将得到什么？
一条线型DNA分子，长度为3.6kb
再在缺口处嵌入目的基 因，得到的重组DNA分 子长度为 3.6kb+0.4kb=4.0kb
3.6kb
练一练：已知某A质粒上有抗氨苄青霉素基因（APr
）和抗四环素基因（TCr）,且同时具备ECOR1和
BamH1两种限制酶的酶切位点。A质粒总长
功能：识别双链DNA分子的某种特定脱氧核苷酸序 列，并且切断其中特定部位的两个脱氧核苷酸之 间的键。
特异性的识别并切割DNA分子。 特点：专一性。
一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定 的切割点上将DNA分子切断。
基因工程需要三种必要的工具
辨一辨：分析这四种限制酶的识别序列、切割位点及切割 后产生的产物 ？
（2012年真题）回答下列有关遗传信息传递和表达的问题。(10分) 1．如图18所示，若用两种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从基因组DNA上切下目 的基因，并将之取代质粒pZHZ1(3.7kb，1kb=1000对碱基)上相应的E—F区域 (0.2kb)，那
么所形成的重组质粒pZHZ2____A_______。
。
2．已知在质粒pZHZl中，限制酶G切割位点距限制酶E切割位点0．8kb，限制酶H切 割位点距限制酶F切割位点O．5kb。若分别用限制酶G和H酶切两份重组质粒pZHZ2样
品，据表4所列酶切结果判断目的基因的大小为1.2 kb
限制酶1：——G↓GATCC——
限制酶2：——T ↓ GATCA—— 限制酶3：——↓GATC——
限制酶4：——A ↓ AGCTT——
基因工程需要三种必要的工具
辨一辨：分析这四种限制酶的识别序列、切割位点及切割 后产生的产物 ？
限制酶1：——G↓GATCC——
限制酶2：——T ↓ GATCA—— 限制酶3：——↓GATC——
因（YR）。其中XR内部含有限制酶KasI识别序列，YR内部含有限制酶FseI 、HpaII、NaeI、NgoMIV识别序列，五种酶的识别序列如图28B（▼表示切 割位点），且这些识别序列在整个质粒上均仅有一处，目的基因内部不存在 这些识别序列。
• 1．若要将结构如图28C所示的目的基因直接插入到YR内形成重组质粒
基因工程
1 基因工程基本过程
（1）获取目的基因
【直接分离/人工合成】
（2）目的基因与运载体重 组
[通常用同种限制酶切割
运载体；DNA连接酶拼接]
2
（3）重组DNA分子导入受
体细胞
3
【微生物/动物/ 植物细胞】 （4）筛选含目的基因的受体
细胞
4
【成功表达目的基因产物】
基因工程需要三种必要的工具
1、化学剪刀——限制性核酸内切酶
重组DNA:1.6+3.1=1.2+3.5=4.7
入至3．山若羊想的在__山受__羊_精_的_卵_乳__汁细中胞收中获。上述目的基去 目因掉 的的E基-表F因达段=产重的物组质，D粒则N’=A需3-将.质7重-粒0组.2’==质43.粒.75-p3Z.H5=Z21导.2
4．上述目的基因模板链中的TGA序列对应一个密码子，翻译时识别该密码子的
三种
•目的基因——目的基因 （×）
•质粒——质粒
（×）
•目的基因——质粒 （ √ ）
完成练一练第3小题
1 基因工程基本过程
（1）获取目的基因
【直接分离/人工合成】
（2）目的基因与运载体重 组
[通常用同种限制酶切割
运载体；DNA连接酶拼接]
2
（3）重组DNA分子导入受
体细胞
3
【微生物/动物/ 植物细胞】
3.6kb(1kb=1000对碱基因)，目的基因长度为
0.4kb。 若用ECOR1和BamH1两种
0.15kb
限制酶切下质粒ECOR1—
BamH1片段（片段长度为
0.15kb）,再用ECOR1和
BamH1两种限制酶切下目
的基因替换质粒ECOR1—
BamH1片段，则重组DNA
3.6kb
长度为? 3.6kb—0.15kb+0.4kb=3.85kb
• A．XR、YR B．XR、YS C．XS、YR D．XS、YS
• 3．动物基因工程通常以受精卵作为受体细胞的根本原因是__B______。
• A．受精卵能使目的基因高效表达 B．受精卵可发育成动物个体 • C．受精卵基因组更易接受DNA的插入 • D．受精卵尺寸较大，便于DNA导入操作
• （2015年真题） • 如图28A所示，质粒pZHZ9上含有X抗生素抗性基因（XR）和Y抗生素抗性基
• You have to believe in yourself. That's the secret ofห้องสมุดไป่ตู้success. 人必须相信自己，这是成功的秘诀。
•
【真题训练】 完成2015年第1小题 完成2012年第1小题
基因工程需要三种必要的工具
2、化学浆糊——DNA连接酶
连接目的基因和运载体
练一练：已知某A质粒上有抗氨苄青霉素基因（APr ）和抗四环素基因（TCr）,且同时具备ECOR1和 BamH1两种限制酶的酶切位点。A质粒总长 3.6kb(1kb=1000对碱基因)，目的基因长度为 0.4kb。
若将用ECOR1和BamH1限 制酶切开的目的基因和质 粒混合连接后的产物导入 大肠杆菌，则如何才能筛 选出成功导入目的基因的 工程菌，请简述筛选步骤。
练一练：已知某A质粒上有抗氨苄青霉素基因（APr ）和抗四环素基因（TCr）,且同时具备ECOR1和 BamH1两种限制酶的酶切位点。A质粒总长 3.6kb(1kb=1000对碱基因)，目的基因长度为 0.4kb。
若用BamH1限制酶切开的 目的基因和质粒混合连 接，连接后获得的产物 有几种?
（假设一个质粒最多只能 连接一个目的基因）
pZHZ10，则pZHZ9需用限制酶_N_ goM_IV__切开。
• 2．将上述切开的质粒溶液与目的基因溶液混合，加入DNA连接酶连接后，进 行大肠杆菌受体细胞导入操作。之后，受体细胞的类型（对两种抗生素表现
出抗性R或敏感性S）包含_A_、_ B、_D_（多选）。
• A．XR、YR B．XR、YS C．XS、YR D．XS、YS
• 3．动物基因工程通常以受精卵作为受体细胞的根本原因是__B______。
• A．受精卵能使目的基因高效表达 B．受精卵可发育成动物个体 • C．受精卵基因组更易接受DNA的插入 • D．受精卵尺寸较大，便于DNA导入操作
1、空载
X 敏感Y敏感
2、目的基因-质粒 Y被破坏 X抗性
3、质粒-质粒 X抗性 Y抗性
三种。 质粒—目的基因 质粒—质粒 目的基因——目的基因
• （2015年真题） • 如图28A所示，质粒pZHZ9上含有X抗生素抗性基因（XR）和Y抗生素抗性基
因（YR）。其中XR内部含有限制酶KasI识别序列，YR内部含有限制酶FseI 、HpaII、NaeI、NgoMIV识别序列，五种酶的识别序列如图28B（▼表示切 割位点），且这些识别序列在整个质粒上均仅有一处，目的基因内部不存在 这些识别序列。
限制酶4：——A ↓ AGCTT——
•9、要学生做的事，教职员躬亲共做；要学生学的知识，教职员躬亲共学；要学生守的规则，教职员躬亲共守。2021/8/272021/8/27Friday, August 27, 2021 •10、阅读一切好书如同和过去最杰出的人谈话。2021/8/272021/8/272021/8/278/27/2021 1:23:16 AM •11、只有让学生不把全部时间都用在学习上，而留下许多自由支配的时间，他才能顺利地学习……（这）是教育过程的逻辑。2021/8/272021/8/272021/8/27Aug-2127-Aug-21 •12、要记住，你不仅是教课的教师，也是学生的教育者，生活的导师和道德的引路人。2021/8/272021/8/272021/8/27Friday, August 27, 2021
大肠杆菌要么空载，要么含有目的基因——质粒重组DNA分子。因 此，可以利用质粒上的标记基因筛选。因为 TCr 被破坏，所以 只能用含 有安苄青霉素 的培养基筛选。
练一练：已知某A质粒上有抗氨苄青霉素基因（APr ）和抗四环素基因（TCr）,且同时具备ECOR1和 BamH1两种限制酶的酶切位点。A质粒总长 3.6kb(1kb=1000对碱基因)，目的基因长度为 0.4kb。
3、分子运输车——运载体
常见类型：质粒 ①能在宿主细胞中自我复制并稳定保存，以使目的基 因在受体细胞中复制并稳定存在； ②.有适宜的限制酶切点,以便装载目的基因； ③.带有某些标记基因，便于鉴定和筛选。
思考：用同一种限制酶切目的基因和质粒。然 后把很多很多用同种限制酶切割得到的质粒和 目的基因混合在一起，可能产生几种连接情况？
tRNA上相应的碱基序列是_U__G__A___。
总结
基因工程基本过程
（1）获取目的基因 （2）目的基因与运载体重组 （3）重组DNA分子导入受体细胞 （4）筛选含有目的基因的受体细胞
基因工程三种工具
1、化学剪刀——限制性核酸内切酶 2、化学浆糊——DNA连接酶 3、分子运输车——运载体
作业
• 完成练习纸上未完成的练习 • 尝试自己纠错
• 1．若要将结构如图28C所示的目的基因直接插入到YR内形成重组质粒
pZHZ10，则pZHZ9需用限制酶_N_ goM_IV__切开。
• 2．将上述切开的质粒溶液与目的基因溶液混合，加入DNA连接酶连接后，进 行大肠杆菌受体细胞导入操作。之后，受体细胞的类型（对两种抗生素表现
出抗性R或敏感性S）包含_A_、_ B、_D_（多选）。
13、He who seize the right moment, is the right man.谁把握机遇，谁就心想事成。2021/8/272021/8/272021/8/272021/8/278/27/2021 •14、谁要是自己还没有发展培养和教育好，他就不能发展培养和教育别人。2021年8月27日星期五2021/8/272021/8/272021/8/27 •15、一年之计，莫如树谷；十年之计，莫如树木；终身之计，莫如树人。2021年8月2021/8/272021/8/272021/8/278/27/2021 •16、教学的目的是培养学生自己学习，自己研究，用自己的头脑来想，用自己的眼睛看，用自己的手来做这种精神。2021/8/272021/8/27August 27, 2021 •17、儿童是中心，教育的措施便围绕他们而组织起来。2021/8/272021/8/272021/8/272021/8/27
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完成2015年第2小题
1 基因工程基本过程
（1）获取目的基因
【直接分离/人工合成】
（2）目的基因与运载体重 组
[通常用同种限制酶切割
运载体；DNA连接酶拼接]
2
（3）重组DNA分子导入受
体细胞
3
【微生物/动物/ 植物细胞】 （4）筛选含目的基因的受体
细胞
4
【成功表达目的基因产物】
完成练一练第4小题
若用BamH1限制酶切开 的A质粒，将得到什么？
一条线型DNA分子，长度为3.6kb
再在缺口处嵌入目的基 因，得到的重组DNA分 子长度为 3.6kb+0.4kb=4.0kb
3.6kb
练一练：已知某A质粒上有抗氨苄青霉素基因（APr
）和抗四环素基因（TCr）,且同时具备ECOR1和
BamH1两种限制酶的酶切位点。A质粒总长
功能：识别双链DNA分子的某种特定脱氧核苷酸序 列，并且切断其中特定部位的两个脱氧核苷酸之 间的键。
特异性的识别并切割DNA分子。 特点：专一性。
一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定 的切割点上将DNA分子切断。
基因工程需要三种必要的工具
辨一辨：分析这四种限制酶的识别序列、切割位点及切割 后产生的产物 ？
（2012年真题）回答下列有关遗传信息传递和表达的问题。(10分) 1．如图18所示，若用两种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从基因组DNA上切下目 的基因，并将之取代质粒pZHZ1(3.7kb，1kb=1000对碱基)上相应的E—F区域 (0.2kb)，那
么所形成的重组质粒pZHZ2____A_______。