实验二

染色法多用于实验周期较短，动物数量不多的情 况。 这种方法虽简单，动物无痛无损伤，但由于动物 之间相互摩擦、舔毛，尿、水浸渍被毛或脱毛， 或因日久颜色自行消退等原因，不宜用于长期的 实验。 此法主要用于大鼠、小鼠、豚鼠和白色的家兔。
B 涂漆或贴胶布 用油漆在动物脚或体表涂漆进行标记，或用胶布 贴在动物腿上进行标记，也都是效果较好的临时 性标记方法。
实验二 实验动物的编号标记及 注射方法
编号标记通常是动物实验开展时需要进行的第一项工作。 编号标记的目的是使个体易于识别，便于实验者观察每个 动物的变化，并为下一步进行的分组工作做好准备。 无论何种编号方法，良好的标记方法都应满足号码清晰、 耐久、简便和适用的要求。
一 实验目的和要求
学习和掌握实验动物的编号标记和注射方法。
2 注射方法的分类 注射法分为：皮下注射、肌肉注射、腹腔注射、 脑膜下注射、脑内注射、胸腔内注射、静脉注射、 腰椎内注射、关节腔注射和心内注射等。
（1）皮下注射 皮下注射较为简单，易于掌握，一般选择皮肤较 薄，皮下脂肪少的部位，如颈背部、复侧或后腿、 股内侧等部位注射。 注射时，用左手拇指和食指轻轻提起动物皮肤， 右手持注射器，将注射针测如皮下，若针头容易 摆动则证明针头已在皮下，推送药液，缓慢拔出 注射针，稍微用手指压片刻针刺部位，防止药物 外漏。
先拔去注射部位的被毛，用手指弹动或轻揉兔 耳，使静脉充盈，左手食指和中指夹住静脉的近 端，拇指绷紧静脉的远端，无名指及小指垫在下 面，右手持注射器尽量从静脉的远端刺入，移动 拇指于针头上以固定针头，放开食指和中指，将 药液注入，然后拔出针头，用手压迫针眼片刻。
C 犬、猫静脉注射 犬、猫的前肢内侧皮下静脉比较容易固定，故用 于静脉注射。 注射时由助手将动物固定，去除注射部位被毛、 消毒，助手将注射部位用手握紧，使静脉充盈， 操作者持带针头的注射器与血管平行刺入静脉， 回抽见血后放开压迫，操作者一手固定针头，一 手慢慢推注射器注入药液。
常用的标记液有： 红色：0.5％中性红或碱性品红溶液； 黄色：3％～5％苦味酸溶液； 咖啡色：2％硝酸银溶液（涂后需光照10分钟）； 黑色：煤焦油酒精溶液。
左前腿上部为1，左腰部为2，左后腿为3，头部为 4，背部为5，尾基部为6，右侧从前至后依次为7、8、 9。用黑色表示个位数，红色表示十位数。
若配合耳号标记，左耳表示千位，右耳表示百位数 可编至4999号。 可编至4999号。 剪指编号方法的有点是各种毛色的小鼠都能使用， 避免了黑色小鼠用颜色涂擦被毛后不易分辨的缺点。 缺点：在一些长期实验中，若小鼠脚趾剪去太少， 实验后期小鼠长出新生脚趾会不易区分；若脚趾剪 去太多，则动物容易因失血过多导致健康状况不良。 一般剪完后用硝酸银棉签烧烙血管止血。
D 猴静脉注射 常选用前肢桡静脉或后肢隐静脉进行注射，注射 方法同犬。 E 猪的静脉注射 常选用耳大静脉进行，注射方法同兔。 F 鸡的静脉注射 选取翼下静脉进行注射。
注射的注意事项 （1）注射器、针头必需洗净，尖锐、畅通、大小 合适，注射器与针头连接处无漏气现象，注射器、 针头应严格灭菌处理。 （2）先计算需要药量，再吸取药液，用镊子将针 头套在注射器上固定，拿注射器应向上。
（4）剪壳法 对龟类动物可采用在其背甲边缘盾板上剪缺口或钻 孔进行标记。 标记时在背甲边缘盾板上打小孔，按前、中、后分 别表示1 别表示1、2、3号，在背甲盾板的边缘部打成一缺口， 按前、中、后分别表示4 按前、中、后分别表示4、5、6号，如打成双缺口则 表示7 表示7、8、9号。右边表示个位数，左边表示十位数。 打孔时使用滑石粉涂抹在打孔局部以防止孔口愈合。 按此法可编至99号。 按此法可编至99号。
（3）永久性标记 A 烙印法 烙印法是用刺号钳将号码烙压在动物无体毛或明显 的部位，如耳朵、面鼻部和四肢部位等。 另外，可用烧红的铁烙在动物体表明显的部位，烧 烙出号码，然后用酒精为溶剂的染料涂抹，以增加 号码的明显性。 此类方法应注意烙号部位的污染和预防感染。
B 打耳孔法 打耳孔法是专门用于动物编号的耳孔机直接在 动物耳朵上打孔或打成缺口编号的方法，用剪刀将 耳缘剪缺口也可代替此方法。用打孔的位置和孔的 数量来标记。 一般习惯在耳缘内侧打小孔，按前、中、后分别表 示为1、2、3号，在耳缘部打成一缺口，则分别表 示4、5、6号，打成双缺口则表示7、8、9号。左耳 表示个位数，右耳表示十位数。
如注射局部隆起、发白，且推入阻力较大，表明针 头未刺入静脉，应拔出针头，重新向尾根方向移动 针头，再次刺入，直至无皮丘出现，确认刺入血管 内方可注入药液。 注射完毕后把尾部向注射侧弯曲以止血。如需反复 注射，应尽可能从末端开始，以后向尾根部方向移 动注射。
B 兔一般采用耳缘静脉注射 因兔耳部血管分布清晰。兔耳中 央为动脉，耳外缘为静脉。内缘静 脉深不易固定，故不用。外缘静脉 浅易固定，常用。
注射时会感到有很大阻力，注射后可见皮肤表面 隆起一丘疹状的小泡，同时因注射部位局部缺血 而呈苍白色，停留片刻再拔出针头，以免药液露 出。如果小泡不很快小时，表明药液确实注入在 皮内；如很快消失，则可能注在皮下，应更换部 位重新注射。 大鼠、小鼠、地鼠可在背部、尾根部或趾部注射， 豚鼠、兔在耳朵；犬、猫较少进行皮内注射。
（2） 除鳞甲法 对蛇来说除掉尾下鳞甲是一个较好的永久性标记 方法。 用小号外科剪刀或采取灼烧法除掉鳞片（为防止 鳞甲的再生必须除掉其皮的下层）。 还可以采用电灼烧法，在皮肤上灼印数字或字母， 为防鳞甲再生也必须灼伤皮肤的深层。
（3） 纹身染色法 对两栖类和爬行类动物也可以采用纹身染色法进 行标记。 标记时只能使用没有毒性作用的色素、固定剂及 溶剂制成的油漆，不能使用普通油漆，否则会造 成动物死亡。
（4）腹腔注射 腹腔注射的部位为下腹部腹中线左右两侧1cm处， 为 避免伤及内脏，抓取固定动物时应使头稍向后低， 使内脏移向上腹。
腹腔注射时，注射部位消毒后，右手持注射器 在注射位置将针头刺入皮肤，针头到达皮下后，再 稍向前进针，后以约45°刺入腹腔，针尖通过腹腔 后抵抗力消失，回抽针栓，如无血或尿液，则表明 进入腹腔方可注入药液。 大鼠、小鼠、豚鼠腹腔注射时一般以左手固定 动物，右手注射即可；对体重较大的大鼠或豚鼠， 可由一人固定动物，暴露腹部，另一人进行注射操 作；家兔、猫、犬等大动物需由助手固定好动物。
3 禽鸟类的标记 （1）挂腿圈法 禽鸟类可用金属或塑料腿圈进行标记。 首先将号码冲压在圆形或方形金属牌上，金属牌 常用不绣钢的铝板制作，目前也有市售打好号码 和记号的铝制牌；然后将金属薄片固定在拴 腿的 皮带圈上，将此圈固定在禽鸟类腿的上部。 此种方法简便、使用。
（2）染色法 对禽鸟类来说，可用无毒漆或染料进行羽毛染色 来标记。但这种方法只能保持到颜色消退或鸟类 换羽，一般不常用。
皮下注射的部位： 小鼠选颈背部皮肤；大鼠选背部或侧下腹部；豚 鼠选大腿内侧、背部或肩部等皮下脂肪少的部位； 兔选背部或耳根部；猫、犬选大腿外侧。
（2）肌肉注射 肌肉注射比皮下和腹腔注射用得较少，但当给当 给动物注射不溶于水而混悬于油或其它溶剂中的 药物时，常采用肌肉注射。 做肌肉注射时应选择肌肉丰满、无大血管通过的 部位，一般采用臀部、股部、肩胛部及胸部 （鸡）。
D 针刺法 人工针刺号码常用于兔的标记，先用手拔去兔耳的 被毛，人工针刺号码，刺后涂以酒精黑墨即可。目 前市售的兔用打号器原理与此相同。
E 挂牌法 这是一种替代方法。 不在动物身上做标记， 而在笼上挂牌作为编 号。 使用时应特别注意不 要混乱。
2 两栖类和爬行类动物的标记 （1） 剪趾法 肢体正常发育的两栖类和爬行类动物的标记大多采 用剪趾法，这是一种有效的永久性标记方法。 通常若每只脚只剪除一趾，对动物个体的行为和生 存没有影响。但对哪些趾有特殊功能的动物不应该 实施剪趾术。
（3）戴项圈法 对颈部较长的禽鸟类来说，可配戴合适的塑料项 圈或项带进行标记。
（4）穿鼻法 常用鼻鞍或鼻盘标记水 禽。 用单根尼龙丝或金属丝 穿过鼻孔将印有号码的 塑料鼻鞍或鼻盘固定。
（二）注射方法 注Байду номын сангаас方法是两种动物给药方法之一。
1 注射器的准备与消毒 （1） 选择大小适当的注射器，先吸入清水，试 其是否漏水，漏水的注射器不能使用，因其注射 量不准确，而且若注射材料为病原菌，则会污染 环境。
为避免伤及内脏，应将 动物处于头低位，使内脏 移向上腹。
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(4) 静脉注射 A 大小鼠一般采用尾静脉注射 大鼠、小鼠的尾部有四根明显的血管，其中腹侧的一 根为动脉，背部的一根为静脉，两侧还各有一根静脉。 由于两侧的静脉比较容易固定故常作为静脉注射的部 位。
操作时先将动物固定在鼠筒内或扣在烧杯中，使 尾巴露出，用酒精或二甲苯涂擦尾部，或将鼠尾 在50‘C热水中浸泡半分钟使血管扩张。以左手拇 指和食指捏住鼠尾两侧，使静脉充盈，用中指从 下面托起尾巴，以无名指和小指夹住尾巴的末梢， 右手持注射器，使针头与静脉平行，从距尾尖约2 ～3厘米处进针，此处皮薄易于刺入，先缓注少量 药液，如无阻力，表示针头已进入静脉，可继续 注入。
二 实验材料和用具
小鼠、墨水（红、黑色）、毛笔、注射器、镊 子、消毒棉球、生理盐水
三 实验内容 （一） 编号标记方法 标记方法可分为永久（终生）标记法和暂时性标 记法。 前者有墨汁浸入法、耳号法，后者有颜色涂布法、 挂牌法等，可根据实验动物和用途的不同予以先 用。
1 哺乳动物的标记 （1） 临时标记 A 染色法 染色法是用化学试剂在动物身体明显部位如被毛、 四肢等处进行涂染，或用不同颜色等来区分各组动物， 是实验室最常用、最容易掌握的方法。
（2） 消毒时将筒心从针筒中拔出，用一块纱布先 包针筒，后包筒心，并使两者在纱布内的方向一 致，包好后，置煮沸消毒器中。选好的针头包以 纱布，置煮沸消毒器之另一端。同时放入镊子一 把，加入自来水，以淹没注射器为度，煮沸消毒10 分钟。
（3） 消毒完毕后，用镊子取出注射器，置筒心 于针筒中，并将针头牢固地装于注射器的针嘴上， 使针头的斜面与针筒上的刻度在一条直线上。 （4） 吸入注射材料，并将注射器内的空气排尽， 若注射材料具有传染性，则排气时应以消毒棉花 包住针头，以免传染材料外溢而污染环境。 （5） 准备注射。