基本要求- 第二章药物的杂质检查

2．方法
除另有规定外，取各药品项下规定量的 供试品，加水溶解使成约40ml(溶液如 显碱性可滴加盐酸使成中性)；溶液如不 澄清，应滤过；置50m1纳氏比色管中， 加稀盐酸2ml，摇匀，制得供试品溶液。
另取各药品项下规定量的标准硫酸钾溶液， 置50ml纳氏比色管中，加水使成约40ml， 加稀盐酸2ml，摇匀，制得对照品溶液。
4．供试品处理
（1）供试品溶液如需滤过，应先用加盐 酸使成酸性的水洗净滤纸中硫酸盐，再 滤过。
（2）有色供试品如富马酸亚铁处理的方 法采用内消色法。
其他国家药典如JP(14)、USP(25)、 BP(2000)检查硫酸盐的方法基本相同， 都是在酸性条件下使SO42-与氯化钡反 应后进行比较。
A. 0.20g B. 2.0g C．0.020g
D. 1.0g E. 0.10g
已知：c＝1 g/ml＝1×106 g/ml
V＝2ml L＝0.0001%
S V c 100% L
2 110 6 100% 0.0001%
2.0g
例题 检查维生素C中的重金属时，若取样量为1.0g，要求 Nhomakorabea重金属不得过
（3）为了避免光线使单质银析出，在观察 前应在暗处放置5min。由于氯化银为白色 沉淀，比较时应将比色管置黑色背景上， 从上向下观察，使得比较液层厚，背景对 比度强，利于判断。
讨论
（4）供试液稀释后，再加硝酸银试液，避 免在较大氯化物浓度下产生沉淀影响比浊。
（5）温度对产生氯化银的浑浊有影响，以 30～40℃产生浊度最大，结果也稳定。但 作为限量检查，供试管与对照管在平行条 件下操作，故可在室温下进行。
具体是指：
1.本身无毒副作用，也不影响药物的稳定性 和疗效，但影响药物的科学管理的物质
2. 本身无毒副作用，但影响药物的稳定性和 疗效的物质
3.有毒副作用的物质
三、药物中杂质的来源
1. 生产过程中引入
（1）原料、反应中间体及副产物 （2）试剂、溶剂、催化剂类 （3）生产中所用金属器皿、装置以及其他不 耐酸、碱的金属工具所带来的杂质
Fe3+ + 6SCN-
H [Fe(SCN)6]3-
氯化物作为信号杂质
1.原理
中国药典对氯化物的检查是利用氯化物 在硝酸酸性溶液中与硝酸银试液作用， 生成氯化银白色浑浊液，与一定量标准 氯化钠溶液在相同条件下生成的氯化银 浑浊液比较，以判定供试品中所含氯化 物是否符合限量规定。
Ag+ + Cl- = AgCl
2.方法
除另有规定外，取各药品项下规定量的供 试品，加水溶解使成25ml(溶液如显碱性， 可滴加硝酸使成中性)，再加稀硝酸10ml；
50µg ～ 80µg的Cl-(相当于标准氯化钠溶 液5.0ml～8.0ml)所显浑浊梯度明显，便 于比较。 应以此设计氯化物的检查方法，根据其限 量，取用适宜的供试品量，使氯化物的浓
讨论
（2）氯化物检查宜在硝酸酸性溶液中进行， 加入硝酸可加速氯化银沉淀的生成并产生 较好的乳浊，可避免弱酸银盐如碳酸银、 磷酸银以及氧化银沉淀的形成而干扰检查。
加入氯化钡试液后，应立即充分摇匀， 防止因局部过浓而影响产生浑浊的程度。
（4）温度对产生浑浊有影响，将比色管在 25～30℃水浴中放置10min，再观察比较。
（5）所产生的浊度除与硫酸量有关外，还 与生成硫酸钡微粒的大小有极大关系，而 硫酸钡微粒的大小与实验条件直接相关， 供试液与对照液应尽可能在相同的条件下 实验。
第四章 药物的杂质检查
基本要求
一、掌握一般杂质检查的原理、方法和计算。 二、熟悉特殊杂质检查的方法和原理。 三、熟悉药物中杂质的来源。
第一节 药物中杂质来源及限量检查
基本要求
了解药物中杂质来源 掌握杂质限量检查方法
一、药物的纯度
指药物纯净程度，反映了药物质量 的优劣，含有杂质是影响药品质量的主要 因素。
溶液如不澄清，应滤过； 置50ml纳氏比色管中，加水使成约40ml，
摇匀，即得供试溶液。 另取各药品项下规定量的标准氯化钠溶液，
置50ml纳氏比色管中，加稀硝酸10ml，
于供试溶液与对照溶液中，分别加入硝 酸银试液1.0ml，用水稀释至50ml，摇 匀，在暗处放置5min，同置黑色背景上， 从比色管上方向下观察，比较。
4．供试品处理
有的药物在上述试验条件下对检查有干 扰，应排除干扰后再检查。
（1）供试品溶液如不澄清，可用含硝酸 的水洗净滤纸中的氯化物后滤过。
（2）供试品溶液如带颜色，可按中国药典 附录所规定的内消色方法处理。
即取两份供试品溶液，于其中一份中先加 入硝酸银试液1.0ml，摇匀，放置10min， 如显浑浊，可反复滤过，至滤液澄清，即 得无氯化物杂质又具有相同颜色的澄清溶 液，再在其中加入规定量的标准氯化钠溶 液与水适量使成50ml，作为对照溶液；
如检查碘中氯化物和溴化物，是将供试品 加水研磨、滤过，于滤液中加锌粉使碘还 原为无色的碘化物，再在氨碱性条件下滴 加硝酸银试液使生成碘化银沉淀而滤除。 向滤液中加入硝酸，破坏络离子后，AgBr 和AgCl沉淀复析出，与一定量标准氯化钠 溶液生成的沉淀比较，即可确定氯化物和 溴化物是否符合要求。
（5）溶于水的有机药物，可按中国药典附 录规定的方法直接检查氯化物;
药物的纯度与化学试剂的纯度
药物的纯度考虑杂质的生理作用，药品 只有两个等级：合格或不合格。
化学试剂有很多等级，如基准试剂、优 级纯（GR）、分析纯（AR）、化学纯 （CP）、色谱纯、光谱纯。
二、杂质定义
是指药物中存在的： ①无治疗作用 ②影响药物的稳定性和疗效, ③甚至对人体健康有害的微量物质
2. 贮藏过程中产生
水解、氧化、分解、异构化、晶形转变、 聚合、潮解和发霉等
易发生水解反应的结构： 酯、内酯、酰胺、卤代烃、苷类
等 易发生氧化反应的结构：
醚、醛、酚羟基、巯基、亚硝基、 双键等
四、杂质的分类
药物中的杂质按来源分为
1. 一般杂质：如氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、 砷盐、酸、碱、水分、易炭化物、炽灼残渣等。一般杂 质其检查方法收载在中国药典的附录中。
例如
中国药典对无水葡萄糖中氯化物的检查 方法：
取本品0.60g，依法检查(附录VIA)，与 标准氯化钠溶液6.0ml制成的对照液比较， 不得更浓(0.010％)。
3.讨论
（1）氯化物的检测灵敏度为1µg/ml。 所用的标准氯化钠溶液每1ml相当于10µg
的C1-。 在测定条件下，氯化物浓度以50ml中含
三、铁盐检查法
药物中微量铁盐的存在可能会加速药物 的氧化和降解，因此需要控制其存在量， 常用以下两种方法检查。
(一)硫氰酸盐法
检查药品中的铁盐杂质，中国药典和 美国药典均采用硫氰酸盐法。
1．原理 铁盐在盐酸酸性溶液中与硫氰酸 铵生成红色可溶性硫氰酸铁配位离子， 再与一定量标准铁溶液用同法处理后所 呈的颜色进行比较，颜色不得更深。
特点：准确测定杂质的量，不需对照 品
三、 杂质限量的计算
杂质限量
允许杂质存在的最大量 供试品量
杂质限量
标准溶液体积 标准溶液浓度 供试品量
L V c 100% S
Lppm
V S
c
106
例题 检查某药物中的砷盐，取标准砷 溶液2ml（每1ml相当于1g的As）制 备标准砷斑，砷盐限量为0.0001％， 应取供试品的量为
另一份中加入硝酸银试液1.0ml与水适量 使成50ml，作为供试品溶液。将两液在 暗处放置5min后比较，即可消除颜色的 干扰。如枸椽酸铁铵中氯化物检查就采 用此法。
（3）某些有颜色的药物也可根据其化学 性质，设计其他的排除干扰的方法。如 高锰酸钾中的氯化物检查，可先加乙醇 适量使高锰酸钾还原褪色后，再依法检 查。
解： L = C×V / S = 5.0×0.02/0.1×1000 ×100% = 0.1%
注意点 ①单位一致 ②稀释倍数 ③表示方法（%，mmp）
一、氯化物检查法
氯化物广泛存在于自然界中，在药物的 生产过程中，常常要用到盐酸或原料、 中间体呈盐酸盐等，氯化物因此极易被 引入到药物中。
Cl-对人体虽然无害，但它的量可以反映出 药物的纯净程度及生产过程、贮藏过程是 否正常，如通过对氯化物控制，可同时控 制与氯化物结合的一些阳离子以及某些同 时生成的副产物。
杂质量 ≤ 杂质限量 ＜ 杂质量
药品合格
药品不合格
二、药物的杂质检查法
1. 对照法 限量检查法 （Limit Test） 特点：不需知道杂质的准确含量
2. 灵敏度法
系指在供试品溶液中加入试剂，在 一定反应条件下，不得有正反应出现。
特点：不需对照品
3. 比较法
含量测定法：测定杂质的绝对含量， 如测定吸收度、pH值等。
2. 特殊杂质：指某一个或某一类药物 的生产或贮藏过程中引入的杂质，如阿司匹 林中的游离水杨酸、异烟肼中的游离肼、甾 体激素中的其他甾体。特殊杂质检查方法收 载在中国药典正文各药品的质量标准中。
按结构可分为
1.无机杂质 Cl-、S2-、CN-、As、重金属
2.有机杂质 中间体、副产物、分解物、异构体、残留 溶剂
若杂质中氯原子连接于环上，则需先对 其进行有机破坏，使分解后再检查。
二、硫酸盐检查法
药物中存在的微量硫酸盐杂质，也是一种信号 杂质。
1．原理 药物中存在的微量硫酸盐与氯化钡在盐酸酸性
介质中生成硫酸钡白色浑浊，与一定量标准硫 酸钾溶液在相同条件下生成的浑浊比较，判定 供试品硫酸盐是否符合限量规定。 Ba2+ + SO42- = BaSO4
于供试品溶液与对照品溶液中，分别加入 25％氯化钡溶液5ml，用水稀释至50ml， 充分摇匀，放置10min，同置黑色背景上， 从比色管上方向下观察，比较。
3．讨论
（1）本法对硫酸盐的最低检测浓度为 35µgSO4/50ml。
所用标准硫酸钾溶液每1ml相当于100µg 的SO42-
本法适宜比浊的浓度范围为每50ml溶液中 含0.2mg～0.5mg的SO42-，相当于标准 硫酸钾溶液2.0ml～5.0ml。若SO42-的浓 度小于0.05mg／50ml，产生的硫酸钡浑 浊不明显，若大于1mg／50ml，则产生的 浑浊度较大，无法区别其浓度差异，且重
（4）检查碘化物(如碘化钠)中氯化物，I也能与硝酸银形成沉淀，干扰检查。
可在供试品中加入一定量的酸和过氧化氢 溶液，加热煮沸，使将I-氧化成产物I2并挥 发、溶液澄明无色后，再依法检查。
也可以利用碘化银沉淀稳定，在氨液中不 溶解，而氯化银、溴化银沉淀在氨溶液中 溶解的性质，除去碘化物的干扰。
不溶于水的有机药物，多数采用加水振摇， 使所含氯化物溶解，滤除不溶物；
或加热溶解供试品，放冷后析出沉淀，滤 过，取滤液依法检查。
如药物在稀乙醇或丙酮中有一定溶解度， 也可加这些溶液溶解后依法检查。
三氯叔丁醇中氯化物的检查即如此。
（6）检查有机氯杂质，可根据有机药物 的杂质结构，选择适宜的有机破坏方法 如氧瓶燃烧法，将有机氯转变为离子状 态，再依法检查。
按性质可分为
1.信号杂质 —指本身一般无害,但其含量多少可反映药物 纯度水平,指示生产工艺是否合理. 如：氯化物、硫酸盐等.
2.有害杂质 —对人体有毒害的杂质.在质量标准中严加控 制,以保证用药安全. 如：重金属、砷盐、氰化物、氟化物等.
五、杂质的限量检查
（一）杂质限量
在不影响药物疗效、稳定性及不发生毒性 的前提下,药物中所含杂质的最大允许量。通 常用百分之几或百万分之几（ppm）来表示
百万分之十，问应吸取标准铅溶液
（每1ml＝0.01mg的Pb）多少ml？
A. 0.2ml B. 0.4ml C．2ml
D. 1ml
E. 20ml
V LS c
10 106 1.0 10 106
1 ml
例．磷酸可待因中吗啡的检查： 已知：V = 5.0ml；C = 0.02 mg/ml；S = 0.1g 求： L = ？
（2）供试品溶液加盐酸成酸性，可防止 碳酸钡或磷酸钡等沉淀的生成。溶液的 酸度也能影响硫酸钡的溶解度，以50ml 中含稀盐酸2ml，溶液的pH值约为1为 宜。酸度增加，灵敏度下降，应严格控 制。
（3）氯化钡溶液的浓度在10％～25％ 范围内所呈硫酸钡的浑浊较稳定。
中国药典采用25％氯化钡溶液，使用时 不必新配，可放置1个月。