自养小球藻培养条件的优化
小球藻的培养
一、小球藻小球藻是单细胞植物,种类较多,多数生活在淡水中,少数生活在海洋里。
按植物学分类,小球藻属于小球藻纲绿藻目原球藻科生物,其体型小,直径一般为3~5μm,在显微镜下,需要放大400~600倍才能看到,我们肉眼看到的只不过是含有小球藻的绿色的水。
小球藻所含的营养成分很高,其蛋白质含量达到50%~60%(相当于花生米的2倍、鸡蛋的5倍),含脂肪10%~30%,还含有多种维生素。
小球藻的生物活性物质糖蛋白和多糖体的含量也相当高,这些生物活性物质具有增强人体免疫力、抗癌、降血压、抑制血糖上升、排除体内毒素和迅速恢复机体损伤等功能。
因此,小球藻的培养前景广阔。
作为培养原料的小球藻,可以到较清洁的池塘、水坑中采集绿色的水,在显微镜下鉴定,然后再用。
也可以向培养它的人索取。
1 容器的准备小规模的培养可用瓶、缸等,大规模的培养可用水泥池。
首先,要对所使用的容器进行消毒,一般用100mg/L的漂白粉水溶液浸泡,再用水冲刷数次。
(100mg/L的漂白粉水溶液的配制:①天平称量5g2%漂白粉澄清液;②定量转移至容量瓶中;③加水至1L;④混匀。
2%漂白粉上清液的配制法:取漂白粉2克,加少量水搅匀,再加水至100毫升,充分调匀后,待澄清后取上清液使用。
)2 培养液的准备(1)BG11液体培养基配方:Stock1 定容100mL 柠檬酸柠檬酸铁胺 EDTANa2Stock2 定容1000mL NaNO3 30g K2HPO4 MgSO4·7H2OStock3 定容100mL CaCl2·2H2OStock4 定容100mL Na2CO3 2gStock5 定容1000mL H3BO3 MnCl2·4H2O ZnSO4·7H2O Na2MnO4·2H2O CuSO4·5H2O Co(NO3)2·6H2OStock1 取用2mL Stock2 取用20mL Stock3 取用2mL Stock4 取用1mL Stock5 取用1mL 总定容 1000mL(2)购买2000元/套,九种原液各200ml(稀释1000倍),10瓶。
小球藻的培养
小球藻是单细胞植物,种类较多,多数生活在淡水中,少数生活在海洋里。
按植物学分类,小球藻属于小球藻纲绿藻目原球藻科生物,其体型小,直径一般为3~5μm,在显微镜下,需要放大400~600倍才能看到,我们肉眼看到的只不过是含有小球藻的绿色的水。
小球藻所含的营养成分很高,其蛋白质含量达到50%~60%(相当于花生米的2倍、鸡蛋的5倍),含脂肪10%~30%,还含有多种维生素。
小球藻的生物活性物质糖蛋白和多糖体的含量也相当高,这些生物活性物质具有增强人体免疫力、抗癌、降血压、抑制血糖上升、排除体内毒素和迅速恢复机体损伤等功能。
因此,小球藻的培养前景广阔。
作为培养原料的小球藻,可以到较清洁的池塘、水坑中采集绿色的水,在显微镜下鉴定,然后再用。
也可以向培养它的人索取。
1 容器的准备小规模的培养可用瓶、缸等,大规模的培养可用水泥池。
首先,要对所使用的容器进行消毒,一般用100mg/L的漂白粉水溶液浸泡,再用水冲刷数次。
(100mg/L的漂白粉水溶液的配制:①天平称量5g2%漂白粉澄清液;②定量转移至容量瓶中;③加水至1L;④混匀。
2%漂白粉上清液的配制法:取漂白粉2克,加少量水搅匀,再加水至100毫升,充分调匀后,待澄清后取上清液使用。
)2 培养液的准备(1)BG11液体培养基配方:Stock1 定容100mL 柠檬酸柠檬酸铁胺 EDTANa2Stock2 定容1000mL NaNO3 30g K2HPO4 MgSO4·7H2OStock3 定容100mL CaCl2·2H2OStock4 定容100mL Na2CO3 2gStock5 定容1000mL H3BO3 MnCl2·4H2O ZnSO4·7H2O Na2MnO4·2H2O CuSO4·5H2O Co(NO3)2·6H2OStock1 取用2mL Stock2 取用20mL Stock3 取用2mL Stock4 取用1mL Stock5 取用1mL 总定容 1000mL(2)购买2000元/套,九种原液各200ml(稀释1000倍),10瓶。
小球藻育藻条件优化及其在高位池对虾养殖中的应用
小球藻育藻条件优化及其在高位池对虾养殖中的应用作者:高攀峰温小娟沈惜坤翁朝斌来源:《福建农业学报》2018年第05期摘要:介绍一种新型的高位池对虾养殖中独立培育小球藻优化模式工艺,通过单因素和正交试验设计相结合的方法研究温度、光照强度、pH、N/P(氮磷比)、Fe3+浓度等条件对小球藻定向培育的影响,并在高位池对虾养殖中进行实践应用。
结果显示最佳育藻条件为温度25℃,光照7 000 lx,pH 8.5,N/P为10∶1,Fe3+ 质量浓度500 μg·L-1,在第9~11 d小球藻有最大比生长率,可将藻液投入养殖池使用。
高位池对虾养殖场的实践表明,该方法不但可以节约饲料成本,还可以较好稳定养殖水体的水质。
关键词:独立育藻;高位池;对虾养殖;最大比生长率中图分类号:S 968.22文献标识码:A文章编号:1008-0384(2018)05-463-06Abstract: Chlorella farming for shrimp aquaculture in aboveground ponds was optimized by using an experiment with single factor and orthogonal design. Factors for the evaluation included light intensity and the temperature, pH, N/P ratio, and Fe3+ concentration in the water for the algae cultivation.A maximized chlorella growth coefficient was reached in 9 to 11 ds by exposing the algae to 7 000 lx light in a pH 8.5 water medium that contained 10∶1 N/P nutrients and Fe3+ 500 μg ·L-1 at 25℃. Thus, at that time chlorella could be harvested for feeding the shrimps. The practice could not only reduce the cost on feed for the aquaculture, but also stabilize the water quality in the shrimp pond.Key words: chlorella farming; aboveground pond; shrimp aquaculture; maximized growth coefficient近年来,我国东南沿海地区南美白对虾高位池养殖病害频发,成为制约对虾养殖业持续稳定发展的主要因素[1-2],早期高位池粗放式的养殖以低廉的成本获取的高效益回报,促使高位池对虾养殖业迅猛发展,同时也加速了近海养殖水体生态环境急剧恶化,成为养殖区病毒性虾病大面积频繁暴发的根本原因。
小球藻最简单繁殖方法
小球藻最简单繁殖方法小球藻(Chlorella)是一种单细胞绿藻,具有高度的生物活性和营养价值。
它可以进行自养和异养,并在适宜的环境条件下快速繁殖。
小球藻的繁殖可以通过自然繁殖和人工繁殖两种方法实现。
以下将详细介绍小球藻的最简单繁殖方法。
一、自然繁殖法:1.提供适宜的环境条件小球藻繁殖的关键是提供适宜的环境条件。
首先,确保水质清洁、无污染,可以使用过滤器或疏通水源来保持水质清洁。
其次,适宜的光照条件也是重要的因素,小球藻对光的需求较高,可以放置在充足的自然光下,或使用人工光源。
此外,适宜的温度范围是在20-30℃之间,PH值维持在7-9之间。
2.提供养分小球藻可以自养,需要提供充足的养分。
最简单的方式是添加适量的无机盐和有机物质。
常用的无机盐包括硝酸盐、磷酸盐、铁盐等。
有机物质可选择葡萄糖、酵母提取物等。
3.维持适宜密度小球藻繁殖过程中,要维持适宜的生物量密度,避免过高或过低。
过高的密度容易导致资源竞争和养分耗尽,过低的密度则会影响繁殖速度。
可以通过定期稀释培养液来维持适宜的小球藻密度。
4.周期性收获小球藻通常在连续培养一段时间后会进入寿命末期,此时可以进行周期性的收获和再播种。
收获的方式可以是离心收获或过滤收获,保留一部分培养液中的小球藻,将其转移到新的培养容器中重新培养。
二、人工繁殖法:1.培养液制备准备一个合适的培养液,可以使用无机盐和有机物质来供给小球藻所需养分。
比如添加硝酸盐、磷酸盐、铁盐等无机盐,以及葡萄糖、酵母提取物等有机物质。
根据不同的繁殖需求,可以调整培养液的组成和浓度。
2.接种小球藻将一定量的小球藻接种到培养液中,开始培养过程。
接种量的确定可以根据预期的繁殖速率和容器的体积来调整,一般可以根据经验进行初始接种。
3.提供适宜的环境条件与自然繁殖类似,提供适宜的环境条件对小球藻的人工繁殖也至关重要。
维持水质清洁、充足的光照、适宜的温度和PH值等条件可以促进小球藻的繁殖。
4.定期收获和再播种根据小球藻的生长情况和繁殖需求,可以定期收获一部分培养液中的小球藻,并将其转移到新的培养容器中重新培养。
小球藻高密度培养及油脂提取条件的优化.
图 1 碳源对小球藻生长量的影响 Fig. 1 Effect of carbon source on cell growth of Y4
/wswxtbcn
李金穗等: 小球藻高密度培养及油脂提取条件的优化
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从图 1 的生长曲线中可以看出, 小球藻的生 长趋势大致为对数形, 即在初期生长比较缓慢, 中间经历一段比较快的增长后又趋于平缓。其原 因可能是, 接种初期, 小球藻需要一段适应时期, 然后才开始大量繁殖增长, 呈现出一个比较迅速 的上升趋势, 由于藻类的迅速增多和营养物质的 减少, 曲线的后期又逐渐平缓, 并有下降趋势。
Abstract: [Objective] Chlorella high density training and lipid extraction condition optimizing. [Methods] Single factor experiments were used to research different mediums and environmental factors on Chlorella cell growth effects, and the ultrasonic extraction method was employed by orthogonal experiment for algae powder oil extraction conditions. [Results] The optimal condition of Chlorella ellipsoidea Y4 under heterotrophic culture to get high biomass were: BG11 medium with 50 g/L of glucose as the carbon source and 2 g/L KNO3 as the nitrogen source. The optimum culture temperature, shaking rate and the inoculums size were
藻类的实验室培养方法优化-1
藻类的实验室培养方法优化第1章绪论1.1 研究背景及目的由于水体富营养化加重,河流、湖泊(水库)中火量藻类繁殖,直接影响了人们的饮用水安全。
为了有效控制藻类的生长,对藻类的研究是非常必要的。
众所周知,富足的氮、憐等营养物质,缓慢的水流速度,适宜的气候条件包括水湿、光照等是特定优势藻生长繁衍所必需的环境条件。
目前人们对于富营养化水体中藻类的研究主要集中在温度、光照、营养盐水平下的藻类生长,并且找出了藻类生长与温度、光照、营养盐等之间的对应关系。
但是水体中浮游生物的种群交替和生物量的变化,不仅与水体的温度、光照周期、营养物质及生物自身的生理状态相关,还受到水体流动的影响。
本实验分别以实验室培养铜绿微囊藻为实验对象,参照藻类生长的最适宜环境条件,在温度、光照、pH值及营养盐条件一定的条件下,研究影响藻类生长的规律,为生态调水、生态河道设计流速的确定提供理论依据,控制或减少水体富营养化现象的发生。
1.2 藻种的分类藻类植物并不是一个单一的种群,它的分布范围极广,对环境条件要求不严,适应性较强。
有些种类的水藻在极低的营养浓度、极微弱的光照强度和相当低的温度下也能生活。
不同研究系统对藻类的分类方法各不相同,常用的分类系统,如,根据藻类的结构特征和藻细胞的生理生化特点,将藻类分为蓝藻门、硅藻门、黄藻门、绿藻门等共十一门,引起水体富营养化的藻类植物主要为蓝藻门和绿藻门;根据藻类在水中生长的位置,将藻类分为浮游藻类、飘浮藻类和底栖藻类。
硅藻门、甲藻门和绿藻门的单细胞种类以及蓝藻门的一些丝状的种类浮游生长在海洋、江河、湖泊,称为浮游藻类。
一下简要说明蓝藻和绿藻的种类、分布、形态和繁殖特征。
引起水体富营养化的藻类植物主要为蓝藻门和绿藻门。
1.2.1 蓝藻在中国,蓝藻是有毒有害性最强、分布范围最为广泛的一类淡水藻。
有毒的蓝藻藻种有:铜绿微囊藻,泡沫节球藻,水华鱼腥藻,阿氏颤藻,水华束丝藻等。
蓝藻是广适性藻类,分布十分广泛。
小球藻养殖方法
小球藻养殖方法小球藻是一种单细胞藻类,又称为球藻、球形藻或球状藻,属于原生生物界。
小球藻在光合作用中能够产生丰富的氧气,对水质净化和环境改善有着重要的作用。
因此,养殖小球藻不仅可以提供高质量的氧气资源,还可以作为生物饵料、鱼类养殖的饵料以及水产养殖的防病剂等用途。
小球藻的养殖方法主要有以下几个步骤:一、选取合适的培养基小球藻的培养基一般为复合营养盐培养基,可以使用硝酸铵、磷酸二氢钠、硫酸镁、氯化钾等化学试剂配制而成。
在配制培养基的过程中,需要注意控制好各种营养盐的浓度和比例,以使培养基中的营养物质能够满足小球藻的生长需求。
二、选择适宜的光照条件小球藻是一种光合生物,对光照有着较高的要求。
一般情况下,小球藻的光照强度应在5000-10000勒克斯之间,光照时间应为12-16小时。
光照过强或过弱都会影响小球藻的生长,因此需要根据实际情况进行调整。
三、控制好温度和pH值小球藻的适宜生长温度一般在20-30摄氏度之间,过高或过低的温度都会影响其生长速度和生长质量。
同时,小球藻对pH值也有一定的要求,一般在7-9之间为宜。
因此,在养殖过程中应及时监测和调整水温和pH值,以创造良好的生长环境。
四、采用适当的培养方式小球藻的培养方式主要有静态培养和搅拌培养两种。
静态培养适用于小规模的养殖,可以采用培养皿或培养罐等容器进行培养。
搅拌培养适用于大规模的养殖,可以采用搅拌桶或搅拌池等设备进行培养。
在培养过程中,需要定期进行搅拌或通气操作,以保持培养液的均匀性和氧气供应。
五、进行适当的养殖管理在养殖过程中,需要定期检测和调整培养液的营养物质浓度、pH值和温度等参数。
同时,还需要注意防止外界污染物的进入和病害的发生。
在发现异常情况时,及时采取相应的措施进行调整和处理,以保证小球藻的正常生长和繁殖。
通过以上步骤的合理操作和管理,可以有效地养殖小球藻,提高其生长速度和生长质量。
养殖小球藻不仅可以为人类提供高质量的氧气资源,还可以作为生物饵料和水产养殖的防病剂等用途。
小球藻的异养生长及培养条件优化_张丽君
广西植物Gu ihaia 21(4):353-357 2001年11月 小球藻的异养生长及培养条件优化张丽君,杨汝德,肖 恒(华南理工大学食品与生物工程学院,广东广州510640)摘 要:对小球藻异养培养中的碳源、氮源、微量元素—镁离子以及其他培养条件的影响进行了探讨,并测定了小球藻的生长曲线。
优化结果:C∶N为4∶1~5∶1,硫酸镁的量为1g L;培养条件为:pH6~7,接种量10%,温度30°C。
在此条件下,异养培养小球藻,其OD值可达18,蛋白质为30%,叶绿素含量为112%。
关键词:小球藻;异养培养;生物量中图分类号:Q949121+7 文献标识码:A 文章编号:100023142(2001)0420353205ΞThe hetertroph ic culture of Ch lorella andopti m iza tion of growth cond itionZHAN G L i2jun,YAN G R u2de,X I AO H eng(T he F ood and B iotechnology Institu te of S ou th Ch ina U niversity of T echnology,Guangzhou510640,China) Abstract:T he effect of carbon sources,nitrogen sources,m icroelem ent2M g2+and culture conditi on fo r het2 ero troph ic culture of Ch lorella w as researched.W e also get the grow th curve.T he results of op ti m izati on:C N is4∶1~5∶1,M gSO4is1g L;pH is6~7,inoculati on is10%,temperature is30°C.U nder th is con2diti on,the OD is18,p ro tein concentrati on is30%,ch lo rophyll concentrati on is112%.Key words:Ch lorella;hetero troph ic;bi om ass 小球藻为绿藻门小球藻属(Ch lorella)单细胞绿藻,生态分布广,易于培养,生长速度快,应用价值高。
小球藻培养条件的优化
技术研究所保存。
1. 2 方法 1. 2. 1 球藻培养。在 BG11 培养基基础上进行优化。培养
当 pH 值为 5. 0 和 7. 0 时 ,小球藻的生长明显较差。因此 , pH 值 6. 0 为小球藻生长的适宜环境条件。
3
温度为 28 ℃, 光强为 4. 5 × 10 lx, 转速为 140 r/m in 下培 养
167631676416834责任编辑刘月娟责任校对卢瑶小球藻培养条件的优化季祥张智慧张雪艳蔡禄内蒙古科技大学生物工程与技术研究所内蒙古包头叭4010摘要目的优化小球藻培养条件以提高小球藻生物量
安徽农业科学 , Journal of Anhui Agri . Sci . 2009, 37 ( 34) : 16763 - 16764, 16834
表 1 因素水平
Table 1 L evels of factors g/L D (Na2 CO3 ) 0. 015 0. 020 0. 025
1. 2. 3 生物量的测定
[ 10 ]
。包括小球藻和其他微藻类对生物治理 (净化环境 )
[2]
水平
Levels 1 2 3
A (NaNO3 ) 1. 0 1. 5 2. 0
2. 5 有机氮对小球藻生长的影响 以尿素为有机氮源 , 考
0. 0. 0. 0. 0. 0. 0. 0. 0.
109 097 079 109 081 064 115 056 079
查尿素对小球藻生长的影响。尿素浓度为 0、 0. 2、 0. 4、 0. 6、
0. 8 g /L,在光照培养箱中培养。研究表明 ,尿素是一种很好
4 和 KH2 PO4 的浓度 ,采用 L9 ( 3 ) 正交表 (表 1 ) 进行 4 因素 3
响应面法优化小球藻培养工艺的研究
收稿日期:2020-11-02作者简介:耿晓玲(1981—),女,硕士,副教授,研究方向:生物化工。
响应面法优化小球藻培养工艺的研究耿晓玲,陆晓燕(江阴职业技术学院环境与材料工程系,江苏无锡214433)摘要:小球藻的生长受到很多因素的影响,本文主要研究了容器厚度、培养基浓度、接种密度、不同钠浓度对其生长情况的影响。
在单因素实验的基础上,采用响应面分析,优化培养条件为:容器厚度13.18cm、培养基浓度0.457Z、接种密度(OD550)0.467、不同钠浓度比0.9。
在此条件下,小球藻培养所得细胞干重最大为8.439g/L。
关键词:小球藻;响应面法;优化培养;细胞干重中图分类号:Q949.217 文献标识码:A 文章编号:1008-021X(2021)04-0070-05OptimizationofCultureConditionsinChlorellasp.byResponseSurfaceMethodologyGengXiaoling,LuXiaoyan(DepartmentofEnviromentandMaterialEngineering,JiangyinPolytechnicCollege,Jiangyin 214433,China)Abstract:ThegrowthofChlorellaisaffectedbymanyfactors.Thispapermainlystudiedtheeffectsofcontainerthickness,mediumconcentration,inoculationdensityanddifferentsodiumconcentrationonthegrowthofchlorella.Onthebasisofsingle-factorexperiment,responsesurfaceanalysiswasusedtooptimizetheconditions:containerthickness13.18cm,mediumconcentration0.457Z,inoculationdensity(OD550)0.467,differentsodiumconcentrationratio0.9.Undertheconditions,themaximumdryweightofChlorellacellswas8.439g/L.Keywords:Chotrellasp.,responsesurfacemethodology;optimizedculture;drycellweight 作为地球上最早的生命之一,小球藻含有丰富的蛋白质、脂类等生物活性代谢产物[1-3],除了可以作为保健食品、饲料、医药制剂等的原料,在污水处理等方面也有广泛的应用,在一定的光照和温度条件下,小球藻对氮、磷等污染物的去除效果显著[4]。
小球藻培养方法!
小球藻培养方法!第一篇:小球藻培养方法!微藻培养光照强度多少合适?我们首先需要了解光照强度的概念。
光照强度是指单位面积上所接受可见光的能量,简称照度,单位勒克斯(Lux或Lx)。
常规培养品种,如小球藻、扁藻(绿藻),最适光照强度约在5000-10000lx之间,牟氏角毛藻(硅藻)的最适光照强度约在10000~15000lx。
那如何判断培养环境光照强度是多少呢?可以根据如下的常见情况进行推测:夏日阳光下为100,000 lx;阴天室外为10000 lx;室内日光灯为100 lx;距60W台灯60CM桌面为300lx;电视台演播室为1000 lx;黄昏室内为10 lx;夜间路灯为0.1 lx;烛光(20CM远处)10~15 lx。
2、微藻培养是用自然光还是人工光源?很多人可能会问小球藻培养到底是用自然光还是人工光源好呢?根据微藻网培养经验这主要取决于培养处光照强度是否适合微藻的生长,如果室外光源符合培养要求,当然是室外好,即环保又节能,但要注意培养过程应避免长时间阳光直射,培养器放在自然光线好的地方,如:窗户边,有遮阴的平台,最好以阳光散射和人工光源为主。
一般12小时光照就可以了。
第二篇:家庭培养小球藻轮虫的方法海水小球藻的家庭简单培养方法(淡水同样适用):1.找一电磁炉,一锅,把海水(自来水或鱼缸里的老水)加热消毒(不管用什么工具,只要把海水加热一下就行),海水可以用从鱼缸里换下来的剩水,因为换出来的水有一些营养物质小球藻是可以吸收的,海水用之前如果有污物最好用纱网过滤,加热到海水沸腾,由于海水中的一些对藻类生长有促进作用的有机物在高温时易遭破坏,所以加温时间不宜太长,除去细菌,原生动物和其他藻类。
2.等到几个小时以后海水冷却,把海水倒进用开水烫过的容器里(开水烫一下是消毒,容器什么都行,玻璃的,塑料的,只要不是金属的就行,详细方法可见网店),当然也可以直接倒进容器,倒进去的的热水也会起到对容器的消毒作用,建议用玻璃缸,当然了有锥形瓶最好。
小球藻扩培正确方法
小球藻扩培正确方法
小球藻可是个神奇的玩意儿呀!它富含丰富的营养,在很多领域都有着重要的作用呢。
那怎么进行小球藻扩培呢?这可得好好讲讲。
首先呀,准备好干净的容器,比如透明的大玻璃瓶之类的。
然后把小球藻种液倒进去,再加入适量经过消毒的培养液。
这就像是给小球藻准备了一个舒适的家。
接下来,要把容器放在有充足光照的地方,但可别暴晒哦,不然小球藻可受不了。
在这个过程中,要注意保持温度适宜,就像我们人一样,太冷或太热都不舒服呀。
还要经常观察,看看有没有异常情况。
在小球藻扩培的过程中,安全性那是相当重要的呀!只要按照正确的方法来操作,一般不会有什么问题。
而且它的稳定性也不错,只要条件合适,小球藻就能茁壮成长。
小球藻的应用场景那可多了去啦!在水产养殖中,它可以作为饲料,让鱼儿吃得饱饱的,长得壮壮的。
在环保领域,它还能帮忙净化水质呢,是不是很厉害?它的优势也很明显呀,繁殖快、营养高,简直就是个小宝藏。
我就知道一个实际案例,有个渔场用了扩培后的小球藻,鱼儿的产量大大提高了,而且鱼儿还特别健康活泼。
这效果,那可真是杠杠的!
小球藻扩培真的是一项很有意义的事情呀,能带来这么多好处,大家赶紧行动起来吧!。
响应面法优化蛋白核小球藻的生长条件
响应面法优化蛋白核小球藻的生长条件钟晓璇;颜菲菲;曲奕;陈钰涵;李新颜;邱振鲁【摘要】采用响应面法优化小球藻的最适生长条件.实验选取温度、pH、磷酸盐浓度3个因素,利用响应面法优化小球藻生长的最佳条件.通过对响应面因素进行优化,得到小球藻最佳生长条件为:温度26.43℃,p H 7.25,磷酸盐浓度5.51 mg/L.考虑到仪器的控制因素与实际操作条件,将优化后生长条件修正为温度26.4℃,pH7.25,磷酸盐浓度5.50mg/L.最佳优化条件验证试验表明,培养48 h后,藻类生物量平均达到了0.116,比优化前的生物量0.114略有提高,与预测值0.115无显著差别.因此响应面法优化得到的优化条件准确可靠,并具有一定的实用意义.【期刊名称】《河北渔业》【年(卷),期】2019(000)003【总页数】7页(P35-40,62)【关键词】响应面法;优化;影响因素;生物量;小球藻【作者】钟晓璇;颜菲菲;曲奕;陈钰涵;李新颜;邱振鲁【作者单位】齐鲁理工学院化学与生物工程学院,山东济南250200;齐鲁理工学院化学与生物工程学院,山东济南250200;齐鲁理工学院化学与生物工程学院,山东济南250200;齐鲁理工学院化学与生物工程学院,山东济南250200;齐鲁理工学院化学与生物工程学院,山东济南250200;齐鲁理工学院化学与生物工程学院,山东济南250200【正文语种】中文在自然界的水域生态系统中,藻类是水域食物链的初级生产者,它们的生命活动,能影响和改变水的理化性质[1]。
藻类的生长状况往往能指示水体富营养化程度,在富营养化的水体中,藻类及浮游生物大量繁殖,水体溶解氧量降低,水质恶化[2]。
富营养化已经成为我国湖泊所面临的主要生态环境问题之一。
小球藻是一种淡水湖泊中常见的藻类,并且作为渔业生产常用藻,因其强大的光合作用和易于消化的特性,在鱼、虾、蟹、贝的养殖过程中起着很好的肥水和调水的作用[3]。
小球藻无菌培养体系的建立及培养条件的优化
小球藻无菌培养体系的建立及培养条件的优化武振晋;周广航;赵奎;王亚君;季春丽;薛金爱;李润植【摘要】[Objective]Erichsen Chlorella is a promising candidate for biofuel production for its high lipid content and photosyntheticefficiency.However,contamination and cultivation conditions controlling are two important factors affecting the microalgal biomass and lipid accumulation,as well as the large scale production of Chlorella.[Method]In this study,5 antibiotics cefazolin andCephalosporins(Cefo),Ampicillin(Amp),Carbenicillin(Car),Neomycin sulfateon(Nw) and rifampicin and amphotericin (Rif) were tested as bacteriostat with different concentrations and combinations,the effect of the antibiotics on the bacteria inhibition and microalgal growth were explored.In addition,the effects of inoculum,medium culture pH,cultivation temperature and salt concentration in culture medium on Chlorella growth were also studied.[Results]As a result,a sterile system for Chlorella cultivation was established and the cultivation conditions were optimized then.[Conclusion]Resu lts showed that the combination of 30 mL· L-1 Rif and 100 mL·L-1 Cefo was effectively bacteriostatic in the cultivation system of Chlorella.And the optimal conditions for Chlorella growth were as follows:OD 0.2 for initial inoculum,p H range 8.5-9.5,cultivation temperature(25 ± 0.5) ℃ and salt density lower than 0.01 mol· L-1.%[目的]埃氏小球藻(Erichsen Chlorella)富含油脂、具有高效光合固碳能力,是生产生物柴油的优质藻种.杂菌污染和培养条件是制约小球藻生物量和油脂产量以及规模化培养生产的重要因素.为有效防除杂茵污染,优化埃氏小球藻培养条件,[方法]本试验选用5种普通抗生素即头孢霉素(Cefo)、氨苄霉素(Amp)、羧苄霉素(Car)、硫酸新霉素(Nw)和利福平霉素(Rif),检测其不同剂量和组合对埃氏小球藻除茵效果及生长的影响.分析初始接种量、藻液pH、培养温度和盐浓度等因子对埃氏小球藻生长的影响.[结果]综合评定各项指标,建立埃氏小球藻无菌培养体系和优化的培养条件.[结论]抗生素组合为Rif+Cefo(30 mL·L-1+ 100 mL·L-1);最适培养条件为:接种的初始OD值0.2,pH范围8.5~9.5,培养温度(25±0.5)℃,盐浓度<0.01 mol· L-1.【期刊名称】《山西农业大学学报(自然科学版)》【年(卷),期】2017(037)004【总页数】8页(P287-294)【关键词】埃氏小球藻;抗生素;无菌培养体系;培养条件优化【作者】武振晋;周广航;赵奎;王亚君;季春丽;薛金爱;李润植【作者单位】山西农业大学分子农业与生物能源研究所,山西太谷030801;山西农业大学分子农业与生物能源研究所,山西太谷030801;山西农业大学分子农业与生物能源研究所,山西太谷030801;山西农业大学分子农业与生物能源研究所,山西太谷030801;山西农业大学分子农业与生物能源研究所,山西太谷030801;山西农业大学分子农业与生物能源研究所,山西太谷030801;山西农业大学分子农业与生物能源研究所,山西太谷030801【正文语种】中文【中图分类】Q93-335小球藻是可以大规模养殖的为数不多的藻种之一,易于培养,生长繁殖快,含有丰富的蛋白质、多糖、维生素、类胡萝卜素、DHA、EPA等营养物质[1]。
小球藻的培养
小球藻营养液尿素0.3G/L,硝酸钾0.3G/L,磷酸二氢钠0.2G/L最大细胞数量:葡萄糖2G/L,硝酸钾0.8G/L,磷酸二氢钠0.2G/L 最大蛋白质数量:葡萄糖6G/L,硝酸钾1.6G/L,磷酸二氢钠0.2G/L 人尿按2~3%的比例直接掺入水中。
海水小球藻适宜盐度为4~36%。
,适宜温度10~36℃,最适温度25~30℃,适宜光照度8000~15000勒,适宜pH7.5~8.5。
藻种培养:1.藻种培养设施:藻种的培养要在保种室中进行,保种室要求通风条件好,光线条件好,温度可控性好,保种室要配有空调、冰箱、具有人工光源的培养架等。
培养中常用培养仪器有显微镜、解剖镜等,容器有三角烧瓶、广口玻璃瓶等。
保种室要严格消毒,防止病菌的侵入。
2.容器、工具的消毒:进行单细胞藻类的纯培养,容器、工具、培养基都要进行严格灭菌,但一般生产性的单种培养,则只须达到消毒目的就可以了。
常用的消毒方法有高温消毒法和化学药品消毒法。
高温消毒法是利用高温杀死微生物的方法。
不耐高温的容器如塑料和橡胶制品等不能利用高温法消毒。
a、直接灼烧消毒接种环、镊子等金属小工具,试管口、瓶口等可以直接在酒精灯火焰上短暂灼烧消毒。
载玻片、小刀等则最好先蘸酒精,然后在酒精灯火焰上点燃,等器具上的酒精烧完,也就完成了灭菌操作。
b、煮沸消毒把容器、工具放入锅中,加水煮沸消毒,一般煮沸10-20分钟。
大型锥形瓶消毒,可在瓶口上放一普通的玻璃漏斗,再在漏斗上放一称量瓶盖,在锥形瓶内加少量淡水,置电炉上加热煮沸5-10分钟,可使整个瓶壁消毒。
消毒完毕即用消毒的纸或消毒的纱布包扎瓶口。
此法适合消毒小型的容器工具。
c、烘箱干燥消毒将玻璃容器、金属工具用清水洗干净后,放入烘箱。
关闭烘箱门,打开通气孔,接通电源加热。
当温度上升到120℃时,关闭通气孔,停止加热。
如果进行纯培养,容器必须灭菌,当温度上升到105℃时,关闭通气孔,继续加热至160℃,保持温度,恒温2小时,然后停止加热。
小球藻的培养
小球藻的培养一、小球藻小球藻是单细胞植物,种类较多,多数生活在淡水中,少数生活在海洋里。
按植物学分类,小球藻属于小球藻纲绿藻目原球藻科生物,其体型小,直径一般为3~5μm,在显微镜下,需要放大400~600倍才能看到,我们肉眼看到的只不过是含有小球藻的绿色的水。
小球藻所含的营养成分很高,其蛋白质含量达到50%~60%(相当于花生米的2倍、鸡蛋的5倍),含脂肪10%~30%,还含有多种维生素。
小球藻的生物活性物质糖蛋白和多糖体的含量也相当高,这些生物活性物质具有增强人体免疫力、抗癌、降血压、抑制血糖上升、排除体内毒素和迅速恢复机体损伤等功能。
因此,小球藻的培养前景广阔。
作为培养原料的小球藻,可以到较清洁的池塘、水坑中采集绿色的水,在显微镜下鉴定,然后再用。
也可以向培养它的人索取。
1 容器的准备小规模的培养可用瓶、缸等,大规模的培养可用水泥池。
首先,要对所使用的容器进行消毒,一般用100mg/L的漂白粉水溶液浸泡,再用水冲刷数次。
(100mg/L的漂白粉水溶液的配制:①天平称量5g2%漂白粉澄清液;②定量转移至容量瓶中;③加水至1L;④混匀。
2%漂白粉上清液的配制法:取漂白粉2克,加少量水搅匀,再加水至100毫升,充分调匀后,待澄清后取上清液使用。
)2 培养液的准备(1)BG11液体培养基配方:Stock1 定容100mL 柠檬酸0.3g 柠檬酸铁胺0.3g EDTANa2 0.05gStock2 定容1000mL NaNO3 30g K2HPO4 0.78gMgSO4·7H2O 1.5gStock3 定容100mL CaCl2·2H2O 1.9gStock4 定容100mL Na2CO3 2gStock5 定容1000mL H3BO3 2.86g MnCl2·4H2O 1.81g ZnSO4·7H2O 0.222g Na2MnO4·2H2O 0.391g CuSO4·5H2O 0.079g Co(NO3)2·6H2O 0.049gStock1 取用2mL Stock2 取用20mL Stock3 取用2mL Stock4 取用1mL Stock5 取用1mL 总定容1000mL(2)购买2000元/套,九种原液各200ml(稀释1000倍),10瓶。
小球藻的培养
小球藻的培养一、小球藻小球藻是单细胞植物,种类较多,多数生活在淡水中,少数生活在海洋里。
按植物学分类,小球藻属于小球藻纲绿藻目原球藻科生物,其体型小,直径一般为3~5μm,在显微镜下,需要放大400~600倍才能看到,我们肉眼看到的只不过是含有小球藻的绿色的水。
小球藻所含的营养成分很高,其蛋白质含量达到50%~60%(相当于花生米的2倍、鸡蛋的5倍),含脂肪10%~30%,还含有多种维生素。
小球藻的生物活性物质糖蛋白和多糖体的含量也相当高,这些生物活性物质具有增强人体免疫力、抗癌、降血压、抑制血糖上升、排除体内毒素和迅速恢复机体损伤等功能。
因此,小球藻的培养前景广阔。
作为培养原料的小球藻,可以到较清洁的池塘、水坑中采集绿色的水,在显微镜下鉴定,然后再用。
也可以向培养它的人索取。
1 容器的准备小规模的培养可用瓶、缸等,大规模的培养可用水泥池。
首先,要对所使用的容器进行消毒,一般用100mg/L的漂白粉水溶液浸泡,再用水冲刷数次。
(100mg/L的漂白粉水溶液的配制:①天平称量5g2%漂白粉澄清液;②定量转移至容量瓶中;③加水至1L;④混匀。
2%漂白粉上清液的配制法:取漂白粉2克,加少量水搅匀,再加水至100毫升,充分调匀后,待澄清后取上清液使用。
)2 培养液的准备(1)BG11液体培养基配方:Stock1 定容100mL 柠檬酸0.3g 柠檬酸铁胺0.3g EDTANa2 0.05gStock2 定容1000mL NaNO3 30g K2HPO4 0.78g MgSO4·7H2O 1.5gStock3 定容100mL CaCl2·2H2O 1.9g Stock4 定容100mL Na2CO3 2gStock5 定容1000mL H3BO3 2.86g MnCl2·4H2O 1.81g ZnSO4·7H2O 0.222gNa2MnO4·2H2O 0.391g CuSO4·5H2O 0.079g Co(NO3)2·6H2O 0.049gStock1 取用2mL Stock2 取用20mL Stock3 取用2mL Stock4 取用1mL Stock5 取用1mL 总定容1000mL(2)购买2000元/套,九种原液各200ml(稀释1000倍),10瓶。
小球藻的培养和保存技术-新
小球藻的培养和保存技术如何培养和保存小球藻,是繁殖小丑鱼的另一个关键。
小球藻可以买成品的,也不贵。
也可以自己培养,但比较麻烦。
下面是用小球藻培育和保存的经验。
一、小球藻种的获得小球藻种可以从活体小球藻种液获得。
初次可以从渔友那取得种液,也可从淘宝商家购买,一般一套(小球藻、小球藻、营养液)100元左右。
二、小球藻的有关知识小球藻属于绿藻门,绿藻纲,绿球藻目,卵囊藻科,小球藻属,繁殖时,每个细胞形成2、4、8或16个似亲孢子,似亲孢子经母细胞壁破裂释放。
小球藻细胞内含有丰富的叶绿素,光合作用非常强,是其他植物的几十倍。
其含有丰富的蛋白质、维生素、矿物质、食物纤维、核酸及叶绿素等,特别是含有令人注目的生物活性物质糖蛋白、多糖体以及高达13%的核酸等物质。
小球藻的直径只有3〜8微米,必须用600倍以上的显微镜才能看见,且形状呈圆球形,所以被称为小球藻(绿藻)。
小球藻可以生息在淡海水中,它借助阳光、水和二氧化碳,以每隔20 小时分裂出4个细胞的旺盛繁殖能力,不停地将太阳能量转化生成蕴涵多种营养成分的藻体,并在增值中释放出大量的氧气。
它的光合能力高于其他植物10倍以上,繁殖能力比陆地上的高等植物强100倍以上。
小球藻生于热带、温带淡水和海水中,以细胞分裂进行无性繁殖,并可产生配子进行有性繁殖。
适宜温度为20-23 C ,温度过低会影响小球藻的繁殖。
海水小球藻适宜盐度20- 30%o。
适宜光照5000-10000LX,太弱会抑制光合作用,影响生长和繁殖。
适宜水质为pH=8氮磷钾、二氧化碳含量高的海水。
含量太低会抑制生长和繁殖。
三、轮虫繁殖用活体小球藻的培育条件温度与繁殖缸相近即可,我用室温8-26 C。
盐度与繁殖缸一样,我用30%。
,比重1.02。
合适的光线,我用自然光,必要时加照明。
合适的营养液,可购买或自己配制(方法后面介绍)四、准备一容器做培养缸,可以是玻璃或透明塑料的,容积可根据要繁殖的轮虫的数量确定,我是用食用油瓶改制培养缸,我繁殖轮虫只用5 升的就够了。
小球藻的培养
小球藻的培养一、小球藻小球藻是单细胞植物,种类较多,多数生活在淡水中,少数生活在海洋里。
按植物学分类,小球藻属于小球藻纲绿藻目原球藻科生物,其体型小,直径一般为3~5μm,在显微镜下,需要放大400~600倍才能看到,我们肉眼看到的只不过是含有小球藻的绿色的水。
小球藻所含的营养成分很高,其蛋白质含量达到50%~60%(相当于花生米的2倍、鸡蛋的5倍),含脂肪10%~30%,还含有多种维生素。
小球藻的生物活性物质糖蛋白和多糖体的含量也相当高,这些生物活性物质具有增强人体免疫力、抗癌、降血压、抑制血糖上升、排除体内毒素和迅速恢复机体损伤等功能。
因此,小球藻的培养前景广阔。
作为培养原料的小球藻,可以到较清洁的池塘、水坑中采集绿色的水,在显微镜下鉴定,然后再用。
也可以向培养它的人索取。
1 容器的准备小规模的培养可用瓶、缸等,大规模的培养可用水泥池。
首先,要对所使用的容器进行消毒,一般用100mg/L的漂白粉水溶液浸泡,再用水冲刷数次。
(100mg/L的漂白粉水溶液的配制:①天平称量5g2%漂白粉澄清液;②定量转移至容量瓶中;③加水至1L;④混匀。
2%漂白粉上清液的配制法:取漂白粉2克,加少量水搅匀,再加水至100毫升,充分调匀后,待澄清后取上清液使用。
)2 培养液的准备(1)BG11液体培养基配方:Stock1 定容100mL 柠檬酸0.3g 柠檬酸铁胺0.3g EDTANa2 0.05gStock2 定容1000mL NaNO3 30g K2HPO4 0.78g MgSO4·7H2O 1.5gStock3 定容100mL CaCl2·2H2O 1.9g Stock4 定容100mL Na2CO3 2gStock5 定容1000mL H3BO3 2.86g MnCl2·4H2O 1.81g ZnSO4·7H2O 0.222gNa2MnO4·2H2O 0.391g CuSO4·5H2O 0.079g Co(NO3)2·6H2O 0.049gStock1 取用2mL Stock2 取用20mL Stock3 取用2mL Stock4 取用1mL Stock5 取用1mL 总定容1000mL(2)购买2000元/套,九种原液各200ml(稀释1000倍),10瓶。
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联合 国粮农组织列为 21世纪人类健康食 品. 小 球藻作 为 光 能 自养 型生 物 ,可 利 用 CO 作 为
碳 源供 其生 长 ,虽 多数微 藻在 CO,环境 浓 度为 1% ~ 5%时 生长 良好 ,但 现 已发现可 将微 藻驯化 为耐受 高 浓 度 CO 的藻种 ,由此 对 酒 精发 酵 工 艺 中排 出 的 高纯 度 CO:(每年 约 500万 吨 )吸 收利 用 ,既 节约 了 资源 ,又减少 了温 室 效 应 的 发 生.基 于 小 球 藻 的上 述 特 点 ,美 国 、日本 、以 色 列 等 国 家 先 后 开 发 出 现 代 化 的 小 球 藻 培 养 技 术 并 成 为 小 球 藻 的 主 要 生 产 国 . 目前该 领域在 我 国研究 较少 ,国内开展此 项工作 ,其 经济效 益和社 会效 益前 景广 阔 。。 .
汪 苹 ,女 ,教 授 ,主要 从 事 水 污 染 控 制 工程 、废 水 生 物 处 理 及 反应 器 方 面 的研 究 .通 讯 作 者
第 29卷 第 1期
张 正 洁 等 :自养 小 球 藻 培 养 条 件 的优 化
55
库 无 菌 普 通 小 球 藻 1068藻 株 (Chlorella vlgaris 1068
第 29卷 第 1期
54
2011年 1月
北 京 工 商 大 学 学 报 (自然 科 学 版 ) Journal of Beijing Technology and Business University(Natural Science Edition)
文 章 编 号 :1671—1513(2011)O1.0054—05
strain). 1.1.2 培 养 基 配 方
本 实 验 在 BG一11培 养 基 的 基 础 上 进 行 优 化 ,1L BG一11培养基 由 5种储备 液 (1~5)及 NaNO,构 成 .
关键 词 :小球 藻 ;自养培 养 ;培 养基
中图分类 号 :TS201.3
文 献标 志码 :A
小球 藻为绿 藻 门(ChloropHyta)小 球 藻属 (Chlo— rella)的一 种 单 细 胞 绿 藻 ,其 生 态 分 布 广 ,世 界 上 已 知 的小 球 藻现有 15种左 右 ,加 之其 变种可 达百 种之 多 .我 国 常 见 的 种 类 有 普 通 小 球 藻 (Chlorella vl— garis)、椭 圆 小 球 藻 (Ch.ellipsoidea)和 蛋 白核 小 球 藻 (c .PY—renoidosa).小 球藻 富含蛋 白质 、不饱 和脂 肪 酸 (亚 油酸 、亚麻 酸 、DHA、EPA 等 )、类胡 萝 卜素 、虾 青素 和多种 维生 素 ,具有 极 高 的 营养 价 值 和提 高 免疫力 的功 效 .其 中不 饱 和脂 肪 酸 (PUFA)更 具 有 广泛 的生物 学活 性 ,具 有抗 血 栓 、降血脂 等功 能 ,尤 其对 心脑 血 管 、关 节 炎 等 疾 病 有 良好 的 防 治 作 用 . 此外 ,DHA还 能 促 进 脑 细 胞 的生 长 发 育 ,改 善 大 脑 机能 .传 统上 ,深 海 鱼油 是 不 饱 和 脂 肪 酸 的 主要 来 源 ,但 从 鱼 油 中 提 取 的 不 饱 和 脂 肪 酸 存 在 腥 臭 味 , 且处 理过 程复 杂.微 藻作 为 水 体 中初 级 生产 力 ,具 有合成 不饱 和脂 肪 酸 的能 力 ,且 藻 体 内 PUFA 的 相对 含量远 远高 于 鱼油 中 的含 量 ,从 藻细 胞 中提取 的 PUFA产 品没 有腥臭 味 ,不 含胆 固醇成 分 ,避 免 了 服 用 鱼 油 胶 囊 时 摄 人 大 量 胆 固 醇 的 缺 点 .此 外 ,小 球 藻 还 含 有 一 种 非 常 重 要 的 成 分 — — 小 球 藻 生 长 因 子 ,它 既 具 有 诱 发 干 扰 素 激 发 人 体 防 御 和免 疫 组 织 中 的 巨噬 细胞 、T细 胞 和 B细 胞 的 功 能 ,又 具 有 人 体 对 环 境污染有害物质解毒和排泄 的作用 .因此 ,小球 藻被
1 材 料 与 方法
1.1 材 料 1.1.1 藻种 来 源
本实 验藻 种购 自中 国科 学 院水生研 究所 淡水 藻
收 稿 日期 :2010—09—13 基 金项 目:国 家 “十 一 五 ”科 技 支 撑计 划 项 目 (2007BAK36B07). 作 者简 介 :张 正 洁 ,女 ,硕 士 研 究 生 ,研 究 方 向 为小 球 藻 的 固碳 作 用 及 其 产 物 ;
VoI_29 NO.1 Jan. 2O11
自养 小 球 藻 培 养 条 件 的 优 化
张 正 洁 , 汪 苹
(北 京 工 商 大 学 食 品 学 院 ,北 京 100048)
摘 要 :在 无 菌条 件 下 ,对影 响 自养 小球 藻生 长的主要 因素进 行 优化 .实验 表 明 ,优 化 结果 对 小球 藻的 生长有显 著影 响.通过 正交试验 和 单 因素 实验得 到 了 以 BG一1 1培 养 基 为基 础 的优 化 培养 条 件 :Na2CO3质 量 浓 度 为 0.02 g/L、初 始 pH 值 为 7、N/P为 30、接 种 量 为 5% 、温 度 25℃ 、光 照 强 度 8 800 lx.该优 化条件 有 效地提 高 了 自养 小球 藻 的生 长速率 .
利用小球 藻 固定 CO 并得 到 高不饱 和脂 肪 酸等 产 物 ,需 获 得 大 量 藻 体 .本 研 究 以 普 通 小 球 藻 为 材 料 ,考 察 温度 、光 照 强度 、接 种 量 、pH 值 以及 营养 成 分对小 球藻 生 长速率 、细胞积 累 量的影 响 ,寻求 最优 培养 条件 ,提 高小 球藻 生物量 ,以期为今 后大规 模培 养小 球藻提 供参 考.