国内外E-test法万古霉素药敏条临床研究
解读万古霉素临床应用研究
解读万古霉素临床应用研究万古霉素，一种广谱抗生素，自20世纪80年代问世以来，在临床治疗中发挥着举足轻重的作用。
其作用机理主要是通过抑制细菌细胞壁的合成，从而达到杀菌的目的。
万古霉素对多种革兰氏阳性菌具有强大的杀菌作用，特别是对甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌（MRSA）和甲氧西林耐药表皮葡萄球菌（MRSE）等难以治疗的细菌感染，具有显著疗效。
在临床应用研究中，万古霉素主要用于治疗严重感染，如皮肤和软组织感染、呼吸道感染、泌尿系统感染、消化系统感染等。
近年来，随着万古霉素的研究不断深入，其临床应用范围也在不断扩大。
例如，万古霉素可用于心内膜炎的治疗，降低感染性心内膜炎的复发率；在烧伤感染的治疗中，万古霉素能有效控制感染，降低死亡率；万古霉素还被用于治疗耐药革兰氏阴性菌感染，如肠杆菌属、克雷白菌属等。
然而，随着万古霉素的广泛应用，其耐药问题日益凸显。
研究发现，万古霉素的耐药机制主要包括细菌产生万古霉素灭活酶、改变药物靶标、降低药物进入细胞等。
因此，合理使用万古霉素，避免不必要的过度使用，是延缓耐药问题的重要措施。
在临床使用过程中，万古霉素的安全性也受到广泛关注。
尽管万古霉素总体安全性较高，但仍有部分患者可能出现不良反应，如过敏反应、肝功能异常、肾功能损害等。
因此，在使用万古霉素时，需注意监测患者的安全性指标，特别是对药物过敏史、肝肾功能异常的患者应谨慎使用。
万古霉素作为一种重要的抗生素，在临床应用研究中展现出广泛的疗效。
然而，面对耐药问题的挑战，我们需要不断深入研究，寻找新的解决策略，以确保万古霉素在临床治疗中的有效性和安全性。
同时，合理使用抗生素，遵循抗生素使用指南，是每一位临床医生和药师的责任。
在未来的临床应用研究中，我们期待万古霉素在治疗更多感染疾病方面发挥更大的作用。
在临床应用研究中，万古霉素主要用于治疗严重感染，如皮肤和软组织感染、呼吸道感染、泌尿系统感染、消化系统感染等。
近年来，随着万古霉素的研究不断深入，其临床应用范围也在不断扩大。
万古霉素临床应用中国专家共识2011
万古霉素临床应用中国专家共识(2011版)万古霉素(vancomycin)已问世半个多世纪了，随着其临床应用的日益广泛，人们对该药的认识也日益加深。
近年来在医院感染中，革兰阳性菌的比例呈上升趋势，特别是耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的感染更加引人瞩目，其治疗也颇为棘手。
众所周知，万古霉素至今依然是治疗MRS的首选药物。
但是如何规范合理地应用万古霉素，如何用新近获得的临床微生物学、临床药理学及相关的循证医学证据来指导治疗，依然存在较多的问题。
为此，由《中国新药与临床杂志》发起，组织国内临床微生物学、临床药学和各临床相关学科的专家共同起草和制定《万古霉素临床应用中国专家共识》，以供临床医师、药师在临床工作中参考。
本共识共包括药学、抗菌作用与药敏检测及临床应用三大部分。
药学部分主要阐述了本品药学特点、注射用溶液配制、配制各溶液稳定性、药物PK／PD、肾功能不全剂量调整以及药物相互作用；抗菌作用与药敏检测部分介绍了本品抗菌作用机制、药敏检测及其临床意义、折点改变及其影响以及当前细菌敏感检测状况；临床应用部分包括在呼吸、血液、中枢神经系统，骨关节感染，心内膜炎，皮肤软组织感染以及在新生儿耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)感染及儿童患者在以上各系统感染中应用方法与经验。
药学药学特点美国礼来公司1956年天然产品筛选计划从印度尼西亚婆罗州土壤中发现了一种新放线菌“东方链霉菌”产生的活性成分，其杀菌活性强，几乎可杀灭所有葡萄球菌，且基本不诱导耐药。
该活性成分最初命名为化合物05865，后定名为万古霉素。
1958年美国FDA批准了其临床使用。
1 化学结构万古霉素为三环糖肽类抗生素，结构复杂，含有一个七肽核心分子式为C66N75C12N9024，分子质量为148 5.74。
现临床应用为高效液相层析技术纯化产品——盐酸万古霉素，在pH3~5酸性环境中本品稳定，其万古霉素B含量不低于95%，发酵中其他杂质＜4%，为乳白色冻干粉针，溶解后为透明溶液。
临床金黄色葡萄球菌感染的分布及耐药性分析
临床金黄色葡萄球菌感染的分布及耐药性分析发表时间：2014-03-06T16:37:57.467Z 来源：《医药前沿》2013年第35期供稿作者：甘连乐[导读] 金黄色葡萄球菌可产生多种外毒素及侵袭性酶，是医院及社区获得性感染的主要致病菌之一，可引起各系统严重的感染。
甘连乐（广西宁明县人民医院检验科广西宁明 532500）【摘要】目的：了解本院近5年临床金黄色葡萄球菌感染的分布和耐药性情况,为临床合理选用抗菌药物提供依据。
方法：采用常规方法进行微生物鉴定及K-B法和Etest法进行药物敏感性试验。
药敏结果使用WHONET5.6软件进行统计分析。
结果：近5年共收集到316株金黄色葡萄球菌，住院患者占287株（88.6%），来自门诊患者占29株（11.4%）。
其中MRSA占192株（60.8%）。
住院分离菌株主要来源科室为ICU占32.3%（102/316），其次是神经外科、骨外科和呼吸内科，分别占26.9%（85/316）、18.4%（58/316）和10.1%（32/316）。
主要标本来源为呼吸道标本（痰、灌洗液）占48.1%（152/316），伤口、脓液等各类分泌物占36.7%（116/316）。
MRSA多重耐药性严重，对多数所测药物的耐药率高于70%，MSSA对多数药物的耐药率低于40%。
本次调未发现利奈唑胺耐药和万古霉素不敏感金黄色葡萄球菌。
结论：利奈唑胺和万古霉素对金黄色葡萄球菌具有很强的抗菌活性；应重视微生物标本的送检和MRSA的主动监测，临床应加强抗菌药物使用管理。
【关键词】金黄色葡萄球菌抗菌药物分布耐药性【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）35-0222-02金黄色葡萄球菌可产生多种外毒素及侵袭性酶，是医院及社区获得性感染的主要致病菌之一，可引起各系统严重的感染。
随着临床各类抗生素的广泛应用，多重耐药菌株特别是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的检出率越来越高，是临床抗感染治疗需面临最为棘手的问题之一。
耐万古霉素肠球菌耐药表型检测和基因型分析
耐万古霉素肠球菌耐药表型检测和基因型分析张侠家;沈继录;贾伟华【摘要】Objective To research the resistant characteristics, genotype and prevalence of vancomycin-resistant Enterococci( VRE) . Methods K-B disc diffusion method was used to determine the susceptibility, minimum inhibi-tory concentration ( MIC) for vancomycin of VRE was detected by E-test method;VRE was then subjected to PCR for resistance related genes;6 strains sequencing results of PCR product were contrastively analyzed the amino acid sequence by BLAST. Results 6 VREFm strains were found from 193 strains enterococci;6 VREFm strains were completely resistant to high unit gentamicin, ampicillin, ciprofloxacin, teicoplanin,but were sensitive to linezolid and macrodantin,MIC for vancomycin was more than 256mg/L;Genotypes were vanA;Amino acids in vanA gene have changed with Asn83→Asp( AAC→GAC) . Conclusion VRE in our hospital is mostly multi-drug resistant , which bringS difficulty in clinical treatment for its infection. So the hospital should strengthen the prevention and monitoring, to prevent the spread of VRE strains in the hospital and popular.%目的研究某院耐万古霉素肠球菌( VRE)的耐药特性、基因型及流行情况。
鹑鸡肠球菌对万古霉素耐药性监测及耐药基因研究
Ｓｕｒｖｅｉｌｌａｎｃｅ ｏｆ ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ａｎｄ ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｇｅｎｅｓ ｏｆ Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｌｌｉｎａｒｕｍ
ＸＩＥ Ｈｕｉ， ＺＨＯＵ Ｗａｎ⁃ｑｉｎｇ， ＳＨＥＮ Ｈａｎ
μｍｏｌ ／ Ｌ） 各 １ μＬ， ｄｄＨ ２ Ｏ ６ μＬ。 ＰＣＲ 反 应 条 件：
９４ ℃ ５ ｍｉｎ；９４ ℃ ３０ ｓ，５４ ℃ ３０ ｓ，７２ ℃ ３０ ｓ，共 ３０
个循环；７２ ℃ ７ ｍｉｎ。 ＰＣＲ 产物经 １５ ｇ ／ Ｌ 琼脂糖凝
依据。
胶电泳，阳性扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后切胶回
２０１９ 年 １－１２ 月南京大学医学院附属鼓楼医院临床分离 １５ 株鹑鸡肠球菌进行药敏试验，采用 Ｅ⁃ｔｅｓｔ 法复核菌株对万古霉素最
低抑菌浓度（ ＭＩＣ） ；采用 ＰＣＲ 及测序技术分析万古霉素耐药决定基因 ｖａｎＡ、ｖａｎＢ、ｖａｎＣ１ 及 ｖａｎＣ２ ／ ３；采用 Ｉｌｌｕｍｉｎａ ＨｉＳｅｑ ２０００
测序技术对菌株基因组 ＤＮＡ 进行双端测序（ ＰＥ） ，利用生物信息学对菌株全基因组序列分析及耐药基因、毒力基因分析。
结果 １５ 株鹑鸡肠球菌对万古霉素的 ＭＩＣ 值集中在 ４ ｍｇ ／ Ｌ 和 ８ ｍｇ ／ Ｌ，所占比例分别为 ４０％和 ３３ ３％，检出 １ 株（ ６％） 万古
霉素高水平耐药株 ＥＧ１７９０６（ ＭＩＣ 为 ２５６ ｍｇ ／ Ｌ） ，该菌株除对万古霉素和替考拉宁耐药外，对其余常用抗生素均敏感；１５ 株菌
外药敏试验可呈现低水平耐药或敏感结果，但不建
议临床使用。 目前，已有对万古霉素高水平耐药鹑
耐万古霉素肠球菌的耐药与毒力基因检测
ｈｙｌ．Ｔｈｅ
ｐｒｅｓｅｎｃｅ
ｏｆ ｅｓｐ ｉｎ ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ・ｒｅｓｉｓｔａｎｔ Ｅｎｔｅｒｃｏｃｃｕｓ Ｄｒｕｇ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｏｆ Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｅｕｓ ｗａｓ
ａ
ｆａｅｃｉｕｍ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ｔｈｅ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ｏｎｅｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ
１３２
塞旦匡堂苤查垫！垒生箜！Ｑ鲞箜！塑
・检验与临床・
耐万古霉素肠球菌的耐药与毒力基因检测
杨靖娴
摘要
刘静邵冬华
王树琴孙娜
吴富炜
梁国威
目的：调查万古霉素耐药基因和５种毒力基因在临床分离肠球茵中的分布特点，探讨万古霉素
耐药与毒力因子之间的相关性。方法：Ｅ—ｔｅｓｔ法检测１２２株肠球茵对万古霉素和替考拉宁的最低抑菌浓度 （ＭＩＣ）。多重ＰＣＲ法检测ｖａｎＡ、ｖａｎＢ及粪、屎肠球菌的菌种特异基因，同样采用多重ＰＣＲ法检测常见毒力基 因ｅｓｐ，ｈｙｌ、ｇｅｌＥ、ａｓａｌ以及ｃｙｌＡ在上述肠球菌中的分布。结果：共检出７６株万古霉素耐药肠球菌（ＶＲＥ）（屎 肠球菌６９株，粪肠球菌７株）和４６株万古霉素敏感肠球菌（ＶＳＥ）（屎肠球茵２８株，粪肠球菌１８株）；所有 ＶＲＥ耐药表型与基因型一致，属ｖａｎＡ型：粪肠球菌毒力基因检出率明显高于屎肠球菌，并表现为多基因携 带；屎肠球菌仅ｅｓｐ和ｈｖｌ阳性。屎肠球菌ＶＲＥ的ｅｓｐ携带率显著高于其ＶＳＥ。结论：我院肠球菌耐药问题严 重，ｅｓｐ基因分布最广泛，且与万古霉素耐药显著相关。加强肠球菌耐药与毒力基因的监测有利于为预防和 控制耐药茵的流行与传播提供重要的基础信息。 关键词肠球菌属： 万古霉素；毒力
均≥２５６ Ｉ．Ｌｇ／ｍＬ；对替考拉宁呈现不同水平耐药。
万古霉素耐药肠球菌的表型及基因型检测
万古霉素耐药肠球菌的表型及基因型检测胡素侠【摘要】目的了解我院耐万古霉素肠球菌(VRE)的耐药表型、基因型及流行情况.方法用K-B纸片扩散法检测临床分离肠球菌的药物敏感性,E-test法检测VRE对万古霉素的最低抑菌浓度(MIC);PCR检测vanA、vanB、vanC1和vanC2-3基因型;脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析VRE同源性.结果73株肠球菌中检出3株万古霉素耐药屎肠球菌,检出率为4.1％;3株屎肠球菌对万古霉素和替考拉宁均耐药,但对利奈唑胺敏感;基因型检测显示3株屎肠球菌均为vanA型,PFGE结果显示该3株VRE不属于同一型别.结论我院住院患者中已出现VRE,应加强医院感染控制,以阻止VRE菌株在院内的传播和流行.【期刊名称】《临床检验杂志》【年(卷),期】2014(032)008【总页数】3页(P624-625,631)【关键词】万古霉素;耐药;肠球菌;表型;基因型【作者】胡素侠【作者单位】淮南市第一人民医院检验科,安徽淮南232007【正文语种】中文【中图分类】R446.5肠球菌常引起泌尿系感染、菌血症、感染性心内膜炎、腹腔感染、胆道感染以及伤口感染。
随着抗菌药物的广泛应用，肠球菌对常用抗菌药物的耐药性不断上升[1]。
自1988年欧洲报道了耐万古霉素肠球菌(vancomycin-resistant enterococci, VRE)后，各地不断有VRE感染的报道，给临床抗感染治疗带来了极大挑战[2]。
为了解我院VRE的发生率和流行情况，本研究对我院2012年1月至2014年3月间分离的肠球菌进行了耐药表型和基因型检测以及同源性分析，结果报道如下。
1.1 材料万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺、氨苄西林、庆大霉素(每片120 μg)、利福平、环丙沙星、磷霉素、红霉素、呋喃妥因药物纸片及M-H琼脂培养基均购自英国Oxoid公司；E-test试条购自瑞典AB Biodisk公司。
DNA琼脂糖胶回收试剂盒购自广州捷倍斯公司；PCR检测试剂Taq酶、缓冲液及dNTP均购自TaKaRa公司；SmaⅠ限制性内切酶、蛋白酶K、溶菌酶及DNA标准DL 2000、CHEF-MAPP. ER型PFGE仪由美国Bio-Rad公司提供。
卫生部临床检验中心全国临床细菌学室间质量评价(EQA)结
卫生部临床检验中心全国临床细菌学室间质量评价(EQA)结果报告单
Chinese External Quality Assessment Program in Clinical Microbiology
实验室编号：医院名称：
第二次测定日期：2003年月日完成日期: 2003年月日
0309号药敏试验结果(S :敏感I: 中介度R: 耐药※计分项目)
评论或结果解释:
药敏方法:
○纸片扩散法（KB）○MIC法
药敏纸片来源: 自动、半自动系统：
药敏培养基编码: 肉汤微量稀释板来源：
药敏培养基来源: E-test ：
0310号药敏试验结果
评论或结果解释:
（此次活动药敏试验满分35分）
药敏方法:
○纸片扩散法（KB）○MIC法
药敏纸片来源: 自动、半自动系统：
药敏培养基编码: 肉汤微量稀释板来源：
药敏培养基来源: E-test ：
------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 以下必须填写
实验操作者：
实验室负责人：
联系电话：（注明地区号）
E-mail 地址：。
药敏试验方法简介
在规定时间内观察细菌在药敏纸片周围的生长情 况。
结果记录
记录每个药敏纸片对应的抑菌圈直径或是否生长 。
结果解释
根据记录的结果，参照药敏试验标准解释敏感、 耐药等结果。
04
药敏试验结果解读
耐药性解读
耐药性
01
是指细菌、病毒等微生物对药物不敏感，即药物不能有效杀死
或抑制微生物的生长。
耐药性的分类
缺点
成本较高，需要使用特定的E型试纸和细胞培养液。
03
药敏试验操作流程
试验前的准备
确定试验菌种
根据感染类型、临床诊断等选 择合适的试验菌种。
准备培养基
选择适宜的培养基，以支持细 菌生长。
准备药敏纸片
根据需要选择适当的药敏纸片 。
菌液制备
收集菌株
从感染部位或血液等样本中收 集菌株。
纯化培养
将菌株在培养基上进行纯化培养 ，确保无杂菌污染。
01 02
定义
纸片扩散法是一种常用的药敏试验方法，通过在琼脂平板上放置含有 抗菌药物的纸片，让细菌与药物接触，观察细菌的生长情况来判断药 物的抗菌效果。
优点
操作简单、成本低、易于标准化。
03
缺点
由于不同菌种对药物的敏感性不同，可能需要调整纸片的放置位置和
时间。
稀释法
定义
稀释法是通过将细菌与不 同浓度的抗菌药物接触， 观察细菌的生长情况，以 判断药物的抗菌效果。
MRSA对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺和达托霉素较为敏感，但对β-内酰胺类 抗生素、大环内酯类抗生素和磺胺类抗生素等不敏感。
案例三：万古霉素敏感性的药敏试验结果解读
万古霉素是一种糖肽类抗生素，常用 于治疗MRSA感染和耐甲氧西林凝固 酶阴性葡萄球菌感染等严重细菌感染
细菌药敏试验及耐药机制研究进展
二、药敏试验基本条件
（1）对于从粪便中分离的沙门菌和志贺菌属，常规仅测试 和报告氨苄西林，一种喹酮类药和甲氧苄啶/磺胺甲噁唑。此 外对于胃肠外分离的沙门菌属还一定要测试并报告氯霉素及 其某一种Ⅲ代头孢菌素的结果。
（2）所有确认产ESBLs的菌株应当报告为耐所有青霉素类， 头孢菌素类和氨曲南。
•（2）肠球菌心内膜炎要求大剂量青霉素或氨苄西林，或万古霉 素或替考拉宁联合庆大霉素或链霉素以增加杀菌作用。
（3）庆大霉素和链霉素筛选试验，能够预测氨苄西林、 青霉素或万古霉素与一种氨基糖苷类抗生素之间的协同 效应。其它的氨基糖苷类不需进行测试，因为它们对肠 球菌的活性并不优于庆大霉素和链霉素。
（4）对血和脑脊液分离株推荐用头孢硝噻吩β-内酰胺 酶试验。β-内酰胺酶试验阳性提示青霉素耐药，同时也 对酰胺基，羧基和脲基青霉素耐药。
细菌药敏试验及耐药机 制研究进展
2020年7月12日星期日
一、药敏试验种类
1、 纸片扩散法 2、稀释法 稀释法包括宏量肉汤稀释法(macrodilution test)、微 量肉汤稀释法(microdilution test)、琼脂稀释法(agar dilution test)。 3、E-test法
3.D试验-克林霉素诱导耐药试验
（1）机制：对大环内酯耐药的葡萄球菌可能有 天然或诱导性对克林霉素的耐药[通过erm 基因 编码的23S rRNA 甲基化也称为MLSB（大环内 酯、林可和B 型链阳霉素）耐药]，或只对大环 内酯类耐药（由msrA 基因编码的外排机制）。
（2）方法：MHA或血平板，纸片相邻试验， 对于葡萄球菌，距红霉素纸片（15μg/片）边 缘15~26mm 处放置克林霉素纸片(2μg/片)来进 行检测；对于β-溶血链球菌，将克林霉素纸片 (2μg/片)和红霉素纸片（15μg/片）贴在相邻 的位置，纸片边缘相距12mm。
药敏试验及药敏试验结果介绍
MIC与抑菌圈直径的线性关系
Log2. MIC
R
I
v
S
耐药 D1
中介 d2
敏感 抑菌圈直径（mm)
抑菌圈直径与MIC的关系
MIC (ug/ml)
>256 256 128 64 32 16 8 4 2 1 0.5 0.25 6 8 10 12 14 18 20 22 24 26 28 30 32 34
利福平，四环
预报用药(一)
测试药 性 • 四环素 菌名 推测其它药物的敏感
所有β－内酰胺类
• 苯唑西林 葡萄球菌
所有（除葡
萄球菌和不 动杆菌〕
多西环素，米诺环素
• 红霉素
ห้องสมุดไป่ตู้G＋球菌
罗红，克拉，阿奇 林可霉素
• 克林霉素 所有
预报用药(二)
测试药
性 • 氨苄西林 • 青霉素G • 头孢噻吩 罗 • 奈啶酸s 肠杆菌科 所有FQs 肠球菌 葡萄球菌 肠杆菌科 青霉素 氨苄，美洛，替卡 拉定，头孢氨苄，克
三级
常规测试并报告的药物分组(2)
葡萄球菌 苯唑，青霉素 红霉素类 克林，万古 氯霉素 肠球菌 青霉素，氨苄 万古霉素
庆大
一级 二级 三级
常规测试并报告的药物分组(3)
一级 素 二级 三级 平
流感嗜血杆菌 氨苄，青霉素 TMP/SMZ 头孢肤肟，噻肟 他啶，氯霉素 阿奇，头孢克罗
环丙，亚胺培南
肺炎链球菌 青霉素，红霉 TMP/SMZ 氧氟，四环素 万古霉素 氯霉素，利福
25 20 15 10 5 0 0 6 0 8 0 0 1 8 2 0 0 0 0 0 14
10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 Ö ¾ Ò ú » ·± Ö ¾ ¶ (mm)
万古霉素血药浓度监测对临床用药指导意义的分析
2020年6月临床医学DOI :10.19347/ki.2096-1413.202016041作者简介：王敏（1981-），男，汉族，安徽宁国人，副主任药师，学士。
万古霉素是临床较为常用的治疗严重革兰阳性菌感染尤其是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA ）感染的糖肽类抗菌药物。
随着抗菌药物专项整治活动的深入开展，抗菌药物使用的监管越来越严格，身为特殊抗菌药物万古霉素的使用也受到更多的监管，如何更加合理规范地使用万古霉素成为临床关注点之一。
万古霉素疗效与其血药浓度相关已成为共识，2011年美国感染病学会（IDSA ）刊文指出万古霉素的血药浓度应达到10mg/L 以上，对于复杂、严重的感染应达到15~20mg/L 方能起到更好的治疗效果[1]。
另外，万古霉素治疗窗相对狭窄，血药浓度过高可能导致肾功能损害及耳毒性发生。
因此测定万古霉素血药浓度在临床正逐步受到重视。
本研究探讨万古霉素血药浓度监测对临床使用该药的指导意义，现报道如下。
1资料与方法1.1一般资料采用回顾性分析法，选取2018年6月至2019年6月安徽省宣城市人民医院（以下简称“我院”）的住院患者27例，其中男19例，女8例；年龄6~88岁，平均（63.00±19.00）岁；肝脓肿1例，肺脓肿1例，皮肤软组织感染2例，血流感染10例，肺部感染13例。
上述患者均有明确微生物学检查结果及临床症状证实为阳性菌感染。
纳入标准：病原学检测提示为阳性菌感染且细菌药敏试验提示对万古霉素敏感，或结合患者临床症状及其他实验室检查结果给予万古霉素经验治疗；万古霉素使用时间大于5d ；送检万古霉素血药浓度前万古霉素使用超过4个给药周期[2]。
排除标准：因个人体质原因不适宜使用万古霉素或治疗不足5d 未再使用万古霉素者；于我院行万古霉素治疗前3d 在其他医疗机构接受过万古霉素、去甲万古霉素治疗者。
本研究已通过我院伦理委员会批准。
医师给药原则：患者使用万古霉素前常规检查肝肾功能，肾功能正常者根据说明书中推荐剂量进行经验治疗，肾功能损伤者且需使用万古霉素患者按照万古霉素说明书中推荐的肾功能受损患者剂量进行给药。
药敏试验简介40018
X 青霉素类
第三十八页，共九十七页。
我们(wǒ men)应该如何测试和报告?
淋球菌、肺链置CO2环境 • 培养时间：18小时
第九页，共九十七页。
测量方法
• 透射光
− 葡萄球菌
利奈唑胺 苯唑西林(xī lín) 万古霉素
− 肠球菌
万古霉素
第十页，共九十七页。
• 反射光
– 测量(cèliáng)其他细菌 与药物时
第十一页，共九十七页。
• 变形杆菌 • 忽略环内的迁徙
生长 (qiānxǐ)
第三页，共九十七页。
药敏试验 方法学 (shìyàn)
• 纸片扩散(kuòsàn)法 • 稀释法〔MIC法〕 • 肉汤稀释法 • 常量稀释法 • 微量稀释法 • 琼脂稀释法 • E-test法
第四页，共九十七页。
药敏试验(shìyàn)方法学指南
• 美国(měi ɡuó)CLSI • M2-A10 Disk Diffusion (2022)* • M7-A8 MIC (2022)* • M11-A7 Anaerobes (2007) • M24-A Mycobacteria, Nocardiae, and
• 当低到一定程度〔MIC以下〕时药物无法抑 制细菌的生长，从而形成界限清楚的抑菌环
• 通过抑菌环大小与MIC值上下之间的统计学 分布关系，经过回归处理可以求出细菌对某 种抗生素的MIC折点范围对应的抑菌环大小
第七页，共九十七页。
试验方法 与条件 (fāngfǎ)
• CLSI推荐培养基： • 普通营养要求细菌使用水解酪蛋白琼脂〔MHA〕平
行比对
第三十三页，共九十七页。
CLSI M100 “表格〞 内容
M100
万古霉素临床应用的突破与挑战
万古霉素临床应用的突破与挑战万古霉素，作为一种强大的抗生素，自20世纪50年代问世以来，一直是治疗严重细菌感染的的防线。
它对多种抗生素耐药的细菌，如金黄色葡萄球菌、肠球菌等，具有显著的杀菌作用。
然而，在临床应用过程中，万古霉素也带来了一系列的突破与挑战。
让我们来谈谈万古霉素的突破。
万古霉素在治疗严重细菌感染方面取得了巨大的成功。
在一些难治性感染，如 MRSA（耐甲氧西林金黄色葡萄球菌）感染、烧伤感染等病例中，万古霉素成为了挽救患者生命的关键药物。
万古霉素的研究也取得了显著进展。
科学家们通过结构改造，研发出了多种万古霉素类似物，这些新药在保持原有抗生素活性的同时，降低了毒副作用，扩大了应用范围。
然而，万古霉素的应用也面临着诸多挑战。
万古霉素的毒副作用较大。
长期使用或大剂量使用可能导致肾脏损伤、听力下降等严重后果。
因此，在使用万古霉素时，医生需要严格控制剂量，密切监测患者的肾功能和听力变化。
万古霉素耐药问题日益严重。
随着抗生素的广泛使用，越来越多的细菌对万古霉素产生了耐药性。
这使得万古霉素在治疗某些感染时效果大打折扣，增加了治疗的难度。
万古霉素的临床应用还面临着抗菌谱狭窄的问题。
万古霉素主要对革兰阳性菌具有活性，对革兰阴性菌和厌氧菌的覆盖范围有限。
这意味着在治疗这些细菌引起的感染时，万古霉素可能不是最佳选择。
因此，在使用万古霉素时，医生需要充分了解感染的细菌类型，以确保药物的疗效。
面对这些挑战，医生和研究人员正在努力寻找解决方案。
一方面，他们通过对万古霉素进行结构改造，以提高其抗菌活性、降低毒副作用。
另一方面，他们也在积极研究新型抗生素，以填补万古霉素在抗菌谱方面的不足。
为了减少万古霉素的耐药问题，医生们也在探索合理的用药策略，如限制万古霉素的滥用、开展耐药监测等。
万古霉素在临床应用中取得了显著的突破，为治疗严重细菌感染提供了有力支持。
然而，其毒副作用、耐药问题和抗菌谱狭窄等问题，也给我们带来了巨大的挑战。
莫匹罗星、利奈唑胺、万古霉素和替加环素对MRSA的体外活性研究
莫匹罗星、利奈唑胺、万古霉素和替加环素对MRSA的体外活性研究侯喜琴;赵云勋;郑燕青;马晓波【摘要】目的：研究莫匹罗星、利奈唑胺、万古霉素和替加环素对甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌（MRSA）的体外活性。
方法采用 E-试验法对2010年1月～2011年6月我院分离的88株 MRSA进行莫匹罗星、利奈唑胺、万古霉素和替加环素的 MIC检测，并比较 MIC50和 MIC90的大小。
结果莫匹罗星、利奈唑胺、万古霉素和替加环素对MRSA的体外活性均较好，全部敏感且表现为极低的 MIC 值。
其中莫匹罗星和替加环素的 MIC90均未超过0．25μg/mL。
结论莫匹罗星、利奈唑胺、万古霉素和替加环素对 MRSA活性较好，可作为 MRSA感染治疗的有效选择，莫匹罗星是治疗 MRSA相关的皮肤和浅表外伤感染的有效的局部外用抗菌药物。
%Objective To study antimicrobial efficiency ofMupirocin,Linezolid,Vancomycin and Tigecycline against MRSA invitro.Methods Antimicrobial efficiency of antibiotics were performed with E-test among a total of 88 unique strains of MRSA isolated from Jan 2010 to Jun 2010 in our hospital.MIC50 and MIC90 were analyzed.Results There was perfect antimicrobial effiency in these Antibiotics against MRSA with low MIC,MIC value of Mupirocin and Tige-cycline were less than0.25μg/mL.Conclusion Mupirocin,Linezolid,Vancomycin and Tigecycline could be good choice for clinical therapy of serious infection caused by MRSA,especially Mupirocin used for topical infection.【期刊名称】《中国实验诊断学》【年(卷),期】2014(000)010【总页数】3页(P1592-1594)【关键词】MRSA;莫匹罗星;抗菌活性【作者】侯喜琴;赵云勋;郑燕青;马晓波【作者单位】厦门大学附属第一医院，检验科，厦门 361003;厦门大学附属第一医院，检验科，厦门 361003;厦门大学附属第一医院，检验科，厦门 361003;厦门大学附属第一医院，检验科，厦门 361003【正文语种】中文【中图分类】R378.2作为社区获得性感染和医院获得性感染的主要病原菌，金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）在临床感染中扮演重要的角色，尤其MRSA对临床多种抗生素耐药，为临床治疗带来巨大挑战。
万古霉素临床应用的进展报告
万古霉素临床应用的进展报告一、万古霉素的抗菌谱及作用机制万古霉素属于糖肽类抗生素，其主要作用机制是通过抑制细菌细胞壁合成，从而导致细菌死亡。
万古霉素对多种革兰阳性菌具有强大的杀菌作用，特别是对甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌（MRSA）和耐甲氧西林表皮葡萄球菌（MRSE）等菌株表现出优异的抗菌活性。
万古霉素还对一些革兰阴性菌和厌氧菌有一定的抗菌作用。
二、万古霉素的临床应用范围近年来，万古霉素在临床应用中的范围不断扩大。
起初，万古霉素主要用于治疗严重感染，如败血症、感染性心内膜炎等。
随着耐药问题的加剧，万古霉素逐渐成为治疗甲氧西林耐药葡萄球菌感染的首选药物。
万古霉素还被广泛应用于烧伤感染、骨髓移植患者的细菌感染、艰难梭菌感染等领域的治疗。
三、万古霉素的给药方式及剂量万古霉素的给药方式主要有静脉滴注和口服。
静脉滴注是万古霉素临床应用中最常见的给药方式，具有快速、有效的治疗效果。
口服给药适用于一些轻度感染和患者无法接受静脉给药的情况。
关于剂量，万古霉素的治疗剂量因感染类型、感染菌株、患者体重和肾功能等因素而异。
在临床实践中，医生需要根据患者的具体情况进行剂量调整，以确保治疗效果和安全性。
四、万古霉素临床应用的挑战与应对策略尽管万古霉素在抗菌治疗中具有重要地位，但其临床应用仍面临一些挑战。
主要包括：1. 耐药问题：随着万古霉素耐药菌株的不断出现，如何合理使用万古霉素，避免耐药性的进一步恶化成为临床医生关注的焦点。
2. 肾毒性：万古霉素具有一定的肾毒性，长期使用或大剂量使用可能导致急性肾损伤。
因此，在使用万古霉素时，需要密切监测患者的肾功能。
3. 药物相互作用：万古霉素与其他药物合用时，可能出现药物相互作用，影响药物疗效和安全性。
因此，在使用万古霉素时，需注意查阅相关药物相互作用信息。
为应对上述挑战，临床医生需要合理选择适应症，遵循万古霉素的使用指南，注意监测患者肾功能，避免不必要的药物相互作用。
同时，研发新型的万古霉素类似物和抗生素治疗策略，以应对耐药性问题。
几种测定抗菌药物最低抑菌浓度(MIC)方法教程文件
几种测定抗菌药物最低抑菌浓度（MIC）方法1.1.常量肉汤稀释法1.1.1.抗菌药物贮存液制备抗菌药物贮存液浓度不应低于1000μg/ml(如1280μg/ml)或10倍于最高测定浓度。
溶解度低的抗菌药物可稍低于上述浓度。
抗菌药物直接购自厂商或相关机构。
所需抗菌药物溶液量或粉剂量可公式进行计算。
例如：需配制100 ml浓度为1280μg/ml的抗生素贮存液，所用抗生素为粉剂，其药物的有效力为750μg/mg。
用分析天平精确称取抗生素粉剂的量为182.6 mg。
根据公式计算所需稀释剂用量为：（182.6 mg×750μg/ml）/1280μg/ml=107.0ml，然后将182.6 mg抗生素粉剂溶解于107.0ml稀释剂中。
制备抗菌药物贮存液所用的溶剂和稀释剂见表5。
配制好的抗菌药物贮存液应贮存于-60℃以下环境，保存期不超过6个月。
1.1.2.药敏试验用抗菌药物浓度范围根据NCCLS抗菌药物敏感性试验操作标准，药物浓度范围应包含耐药、中介和敏感分界点值，特殊情况例外。
1.1.3. 培养基NCCLS推荐使用Mueller-Hinton（MH）肉汤，pH7.2~7.4。
需氧菌及兼性厌氧菌在此培养基中生长良好。
在测试葡萄球菌对苯唑西林的敏感性时，应在肉汤中加入2%（W/V）氯化钠，按制造厂家的要求配制需要量的MH肉汤。
嗜血杆菌属菌使用HTM 肉汤，肺炎链球菌和其它链球菌使用含2%~5%溶解马血的MH肉汤。
1.1.4.接种物的制备有2种方法配制接种物，一是细菌生长方法，用接种环挑取形态相似待检菌落3-5个，接种于4-5ml的水解酪蛋白（MH）肉汤中，35℃孵育2-6h。
增菌后的对数生长期菌液用生理盐水或MH肉汤校正浓度至0.5麦氏比浊标准，约含1~2×108CFU/ml。
二是直接菌落悬液配制法，对某些苛养菌，如流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌和链球菌及甲氧西林耐药的葡萄球菌等菌株，推荐直接取培养18~24h的菌落调配成0.5麦氏比浊标准的菌悬液。
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110生物技术世界 BIOTECHWORLD由于抗菌药物的滥用,临床耐药菌株的比例逐渐增高,2012年卫生部发布了《抗菌药物临床应用管理办法》,以加强医疗机构抗菌药物临床应用管理,规范抗菌药物临床应用行为,控制细菌耐药。
当前临床微生物敏感性检测的方法有纸片法,微量稀释法,自动化仪器,E-test法,由于微量肉汤法操作繁琐,仅用于研究而很难用于临床,纸片法和自动化仪器是当前临床药敏检测的主要手段,但纸片法在临床使用中受诸多因素影响表现出一定的局限性[1],此外CLSI 中某些抗生素如万古霉素对葡萄球菌属仅有微量稀释法折点MIC 而无纸片法参考折点,这限制了纸片法在临床的广泛使用,自动化仪器使用方便但需要特殊设备、药物选择不灵活、测定MIC值少、特殊菌不能用等问题[1],限制了临床的使用。
E-test法由于操作方便,结果准确、稳定,受到临床认同[1]。
当前,出现了国产的E-test法药敏试剂,本研究收集了河南省人民医院的109株葡萄球菌,就其MIC检测验证,以考察国产E-test药敏条在临床使用效果。
1 材料与方法1.1 菌株来源选择2014年06月—2014年09月间在河南省人民医院临床分离的109株葡萄球菌属菌株,剔除同一患者相同部位的重复分离株。
将菌株接种于非选择性培养基琼脂平板上培养18～24小时,挑取数个单菌落用于药敏检测。
1.2 仪器试剂法国生物梅里埃公司的DensiCHEK plus比浊仪和E-test药敏条(万古霉素，批号：1000902430)(简称进口试剂)。
郑州安图生物工程股份有限公司的万古霉素定量药敏条(E-test法)(批号：20140620)作者简介:侯金丽(1980—),女,讲师,硕士,研究方向:微生物研究。
国内外E-test 法万古霉素药敏条临床研究侯金丽(河南工业贸易职业学院粮食工程系 河南郑州 451191)摘要:目的 比较国内外生产的E-test药敏条对葡萄球菌最低抑菌浓度的符合情况,评价国产E-test法药敏条的临床性能。
方法 收集河南省人民医院109株葡萄球菌属菌株,同时用国产和进口E-test法万古霉素药敏条进行临床比对,并用统计学方法分析。
结果 针对109株葡萄球菌的对比中,有2株菌株测定结果超过±1个二倍稀释,整体符合率为98.17%,经卡方检验,P<0.05,无显著性差异。
结论 国内外E-test法万古霉素药敏条临床性能无显著差异,说明国产E-test药敏条可用于临床微生物药敏的体外检测。
关键词:葡萄球菌 折点 E-test 万古霉素中图分类号:R917文献标识码:A 文章编号:1674-2060(2015)05-0110-02Clinical Study on Domestic and Foreign Drug Sensitivity Strip of Vancomycin by E-test MethodHou JinliDepartment of Food Engineering, Henan Industry and Trade Vocational College, Zhengzhou, Henan province, 451191Abstract:Objective: Compare with the conformity status of the minimum inhibitory concentration onto staphylococcus for E-test drug sensitivity strips made in China and abroad, and evaluate clinical performances of drug sensitivity strips made in China by the E-test method. Method: Collect 109 bacterial strains of staphylococcus in Henan Provincial People’s Hospital, carry out clinical comparison by utilizing domestic and imported E-test drug sensitivity strips of vancomycin at the same time, and adopt the statistical method to carry out analysis. Result: In comparison aiming to 109 staphylococcus strains, there are two strains with a determination result exceeding ±1 times of double-dilution, and the overall conformity rate is 98.17%. After the chi-square test, P<0.05, there is no significant difference. Conclusion: There is no significant difference on clinical performance between domestic and foreign vancomycin drug sensitivity strips by E-test method, and it indicates that the domestic E-test drug sensitivity strips can be applied to in-vitro detection for drug sensitivity of clinical microorganism.Key Words: Staphylococcus; Break point; E-test; Vancomycin国产试剂MIC 值/进口试剂MIC 值结果统计 完全一致75 相差±0.5个二倍稀释 30 相差±1个二倍稀释 2 超过±1个二倍稀释 2 合计109样本编号 国产试 剂(μg/ml) 国外试 剂(μg/ml) 微量肉汤试验 结果(μg/ml) 菌株1 0.25 1 0.25 菌株20.50.1250.25表1 国产试剂MIC 值/进口试剂MIC 值结果统计表表2 微量肉汤试验结果111BIOTECHWORLD 生物技术世界(简称国产试剂）和MH琼脂平板；英国Oxoid公司生产的微量肉汤稀释(批号：1178727)；中国生物制品所的万古霉素标准品。
1.3 操作及判读选择进行药物敏感性测试的标准菌株或临床菌株,将菌株接种于非选择性培养基琼脂平板上培养18～24小时,挑取数个单菌落用比浊仪制备成0.5麦氏标准菌液,涂布于MH平板上,平行贴国产药敏条和进口药敏条。
放置35℃培养16-18小时判读MIC值。
MIC值符合程度统计时参照相关文献,MIC相差±1个二倍稀释均判为一致,当MIC值超过±1个二倍稀释时,对该菌株采用微量肉汤方法测定其MIC值[2]。
1.4 统计学分析采用SPSS 14.0统计软件,计数资料采用χ2检验,检验水准α=0.05。
2 结果与分析2.1 国产试剂与进口试剂测定结果临床109株葡萄球菌属菌株进行结果见表1,有107份国产试剂与进口试剂检测结果差异均在±1个二倍稀释内,有2份菌株超过±1个二倍稀释,国产试剂与进口试剂总符合率为98.17%,经卡方检验P>0.05,两种的检测结果无显著差异。
2.2 微量肉汤试验针对2株菌株用国内外试剂测定结果超过±1个二倍稀释的采用微量肉汤试验进行检测,结果见表2。
3 结论E-test法即是指浓度梯度琼脂扩散试验,综合了稀释法和扩散法的原理和特点,同时又弥补了二者的一些不足,可像稀释法一样直接定量测出抗菌药物对受试菌的MIC。
可用于各种常见菌、微需氧菌、分枝杆菌、厌氧菌和真菌等的药敏试验。
但是E-test法产品均为进口产品,由于价格昂贵很难在临床使用广泛使用[3]。
本研究就新出现的国产的E-test法万古霉素定量药敏条进行临床对比研究,临床分离的109株葡萄球菌属菌株与法国梅里埃产品对比中,有2份菌株超过±1个二倍稀释,二者的总符合率为98.17%,经卡方检验,两种试剂的检测结果无显著差异,说明国产试剂与进口试剂有较高的一致性,可以用于临床微生物的体外药敏检测。
进口试剂需多重运输,成本增加明显,而国产试剂价格使用,且性能与进口试剂基本一致,值得在各级医院大力推广。
参考文献[1]谭瑶,赵清,舒为群,等. K-B 纸片扩散法药敏试验[J].检验医学与临床,2010,7(20):2290-2291.[2]伊茂礼,臧琴波,李少君,等.VITEK-2 Compact 检测鲍曼不动杆菌菌对阿米卡星药敏结果准确性的探讨[J ].中华医院感染学杂志,2013,23(3):707-709.[3]卓超,肖永红,等.E-TEST 监护病房中400株革兰阴性杆菌的耐药性[J].中国抗生素志,2003,28(5):276.酚在应用中具有较强的循环抑制性,能够对患者神经的兴奋度起到较佳的抑制作用[6-7]。
TCI方式能够对麻醉剂的浓度科学控制,帮助患者在术后平稳苏醒,维持其血流动力学的平稳化[8]。
在本次研究中还能够发现,丙泊酚组患者的意识消失、插管时间均明显少于七氟醚组,由此能够充分表明TCI麻醉方式的诱导性更强,能够在较短的时间内达到极佳的麻醉效果,确保患者术后平稳苏醒,保障其生命安全。
通过研究能够发现,在腹腔镜手术的实施中,运用丙泊酚TCI麻醉方式的镇痛效果优良,患者术后出现的不良反应较少,整体麻醉效果要明显优于七氟醚吸入麻醉方式,值得在临床上进一步的推广应用。
参考文献[1]王建伟,刘晓飞.比较丙泊酚与七氟醚麻醉对梗阻性黄疸患者苏醒和术后恶心呕吐的影响[J].临床麻醉学杂志,2011(04):394-395.[2]欧晓峰,郑宏,叶建荣等.七氟醚和丙泊酚对老年冠心病患者麻醉诱导期心率变异性的影响[J].临床麻醉学杂志,2011(06):538-540.[3]向波,颜娅.瑞芬太尼复合丙泊酚靶控输注在老年妇科腹腔镜手术麻醉中的应用[J].中国老年学杂志,2014(19):5471-5472.[4]刘光跃,徐仲煌,李敏等.腔镜手术不同麻醉方法费效的比较:前瞻性、多中心、随机、双盲临床研究[J ].中华麻醉学杂志,2013(07):876-879.[5]李成龙,李有武,戴转云等.丙泊酚靶控输注麻醉诱导时瑞芬太尼用于喉罩置入的半数有效浓度的测定[J].南昌大学学报(医学版),2014(07):61-64.[6]杨琦琳,柴静,王坚伟等.靶控输注舒芬太尼或瑞芬太尼用于妇科腹腔镜手术麻醉的临床研究[J].重庆医科大学学报,2012(03):267-269.[7]孙璐,邵忠新,王鹭蓉等.依托咪酯靶控输注复合瑞芬太尼用于妇科腹腔镜手术病人麻醉的效果[J].中华麻醉学杂志,2013(04):462-465.[8]马珏,张光燕,陈怡静等.Narcotrend 监测下靶控输注丙泊酚TIVA 与静吸复合麻醉的对比观察[J].实用医学杂志,2013(24):4095-4097.······上接第109页。