微生物实验演示文稿
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微生物学实验ppt课件
器材与试剂的选用原则
03
如无菌操作、适用性、经济性等
02
细菌形态与结构观察
细菌培养及形态特征
01
02
03
细菌培养方法
包括需氧培养、厌氧培养 和兼性厌氧培养等，不同 种类的细菌需要不同的培 养条件。
细菌菌落特征
观察细菌在固体培养基上 形成的菌落，了解其形状、 大小、颜色、透明度等特 征。
细菌细胞形态
05
微生物代谢活性测定
生长曲线测定方法
直接计数法
通过显微镜直接观察并计数微生物数量，适用于较大微生物如细 菌、酵母菌等。
比浊法
利用微生物生长引起培养液浊度变化来测定生长曲线，操作简便 但易受杂质干扰。
平板菌落计数法
将待测样品稀释后涂布于固体培养基表面，培养后计数形成的菌 落数，适用于可形成菌落的微生物。
原理
病毒必须寄生在活细胞内才能增 殖，通过提供适宜的细胞环境， 使病毒在细胞内复制并产生子代
病毒。
病毒检测技术及应用
免疫学方法
利用抗原抗体特异性结合的原理，通过酶联免疫吸附试验 （ELISA）、免疫荧光技术等检测病毒抗原或抗体。
分子生物学方法
基于病毒核酸的特异性，利用PCR、实时荧光定量PCR等技术扩增 并检测病毒核酸。
微生物学实验ppt课件
contents
目录
• 实验基础知识 • 细菌形态与结构观察 • 真菌形态与结构观察 • 病毒培养与检测技术 • 微生物代谢活性测定 • 微生物遗传与变异研究 • 微生物生态学及环境因子影响研究
01
实验基础知识
微生物学概述
类生活中的作用：如 生态平衡、发酵工业 等
生理生化鉴定
利用真菌的生理生化特性，如营养需 求、代谢产物等，进行进一步的分类 鉴定。
微生物的培养PPT 演示文稿
碳源——CO2为唯一或主要碳源 能源——光能 例： CO2 + H2O [CH2O] + O2 2CO2 + H2S + 2H2O 2[CH2O] +H2SO4 CO2 + 2H2S CH2O] + H2O + 2S 藻类和蓝细菌
（1）产氧光合作用 ----藻类和蓝细菌细胞内含有叶绿素，能与高 等植物一样利用光能分解水产生氧气并还原 CO2为有机碳化物，其反应通式为： CO2 + H2O ----------［CH2O］+ O2↑ 叶绿素
四、Nutrient
营养物质按照它们在机体中的生理作用不同，可 以将它们区分成六大类。
1. Source of carbon （碳源） 2. Source of Nitrogen （氮源) 3.Inorganic salt（无机盐） 4. Growth factor（生长因子) 5.Water（水分） 6. Energy source（能源)
藻类的叶绿体中含有叶绿素a和类胡萝卜素，其它光合色素 随类群而异。藻类多数水生， 只要环境中有光照、少量氮素 和无机盐就能生长
（2）不产氧光合作用
----光合细菌(紫色细菌和绿色细菌)与蓝细菌不同，细
胞内含有类似于叶绿素的菌绿素，但不能进行以H2O 为供氢体的非环式光合磷酸化作用，也不产生氧气。 光合细菌吸收光能，以还原态无机硫化物(H2S、S或 S2O3-2等)为氢或电子供体同化CO2，代表性反应为：
二、营养物质的功能
参与微生物细胞的组成 提供微生物机体进行各种生理活动所需 的能量 形成微生物代谢产物的来源
营养物质是微生物新陈代谢和一切生命 活动的物质基础，失去这个基础，生命 也就停止
三、化学成分
（1）产氧光合作用 ----藻类和蓝细菌细胞内含有叶绿素，能与高 等植物一样利用光能分解水产生氧气并还原 CO2为有机碳化物，其反应通式为： CO2 + H2O ----------［CH2O］+ O2↑ 叶绿素
四、Nutrient
营养物质按照它们在机体中的生理作用不同，可 以将它们区分成六大类。
1. Source of carbon （碳源） 2. Source of Nitrogen （氮源) 3.Inorganic salt（无机盐） 4. Growth factor（生长因子) 5.Water（水分） 6. Energy source（能源)
藻类的叶绿体中含有叶绿素a和类胡萝卜素，其它光合色素 随类群而异。藻类多数水生， 只要环境中有光照、少量氮素 和无机盐就能生长
（2）不产氧光合作用
----光合细菌(紫色细菌和绿色细菌)与蓝细菌不同，细
胞内含有类似于叶绿素的菌绿素，但不能进行以H2O 为供氢体的非环式光合磷酸化作用，也不产生氧气。 光合细菌吸收光能，以还原态无机硫化物(H2S、S或 S2O3-2等)为氢或电子供体同化CO2，代表性反应为：
二、营养物质的功能
参与微生物细胞的组成 提供微生物机体进行各种生理活动所需 的能量 形成微生物代谢产物的来源
营养物质是微生物新陈代谢和一切生命 活动的物质基础，失去这个基础，生命 也就停止
三、化学成分
浓香型白酒发酵过程及其微生物演示文稿
浓香型白酒发酵过程及其微生物演示文稿一、引子大家好，今天我将为大家呈现关于浓香型白酒发酵过程及其微生物演示文稿。
浓香型白酒是中国传统的特色酒之一，其制作过程复杂，其中微生物是至关重要的环节。
接下来，我将为大家详细介绍浓香型白酒发酵过程及相关的微生物。
二、浓香型白酒发酵过程1.主要材料2.米糠水的制备首先，将糯米洗净后煮熟，捞出备用。
然后将糯米中的米糠与适量的水混合，搅拌均匀，再过滤得到米糠水。
3.酒曲的制备酒曲是浓香型白酒发酵过程中的关键因素。
首先，将高粱与小麦混合后蒸熟，待其降温到30°C左右，将酒曲加入其中，并搅拌均匀。
然后将混合物倒入发酵窖中培养，经过一段时间的发酵，即可得到酒曲。
4.发酵过程发酵过程主要包括原料的混合和发酵。
首先，将米糠水与糯米混合，加入适量的酒曲，搅拌均匀。
然后将混合液倒入盛放酒曲的池子中静置，让发酵开始。
发酵过程一般需要持续40-50天，过程中需定期搅拌。
5.蒸馏过程发酵结束后，将发酵液经过蒸馏器蒸馏，得到白酒精馏分，再经过陈酿等过程，最终得到浓香型白酒。
三、与浓香型白酒发酵相关的微生物1.糯米和高粱中的微生物糯米和高粱中常存在一些有益的微生物，如酵母和乳酸菌。
这些微生物在发酵过程中起到重要作用，能够分解碳水化合物并产生酒精和香气物质。
2.酒曲中的微生物酒曲是浓香型白酒发酵过程中必不可少的因素，其中的微生物主要包括酵母菌和曲霉菌。
酵母菌能够将糖类转化为酒精和二氧化碳，而曲霉菌则能产生各种酶类，促进淀粉的分解和酒精的生成。
3.发酵液中的微生物发酵液中的微生物主要包括酵母菌和乳酸菌。
酵母菌在发酵过程中负责产生酒精和香气物质，而乳酸菌则能产生乳酸和其他有机酸，为浓香型白酒提供独特的酸甜口感和香气。
四、总结通过本文稿，我们了解了浓香型白酒的发酵过程及与之相关的微生物。
糯米和高粱中的微生物、酒曲中的微生物以及发酵液中的微生物都起到了重要作用，它们通过分解碳水化合物、产生酒精、香气物质和酸甜口感等，为浓香型白酒的形成做出了贡献。
实验动物微生物学和寄生虫学质量控制详解演示文稿
第八页，共39页。
SPF级动物监测项目
类别
动物种类
病原菌
小鼠、 豚鼠、 犬、猴 大鼠 兔
小鼠、 大鼠
病毒
豚鼠、 犬、猴 兔
寄生虫
小鼠、 豚鼠、 犬、猴 大鼠 兔
项目
沙门 菌、 支原 体、 泰泽 病原 体等
沙门 志贺菌、 鼠痘病 兔瘟、 B病毒、
菌、 结核杆 毒、汉 仙台 逆转录
多杀 菌等
坦病毒、 病毒 病毒等
北美 0.02 0.00 0.00 0.01 0.02
0.04
1.57
血清学 血清学
44876 578464
32.64 1.65
血清学 血清学 血清学 血清学 血清学 血清学 血清学 血清学
594539 595903 447656 225868 428821 466572 462209 435772
情况。检测方法有:病毒分离与鉴定，病毒颗粒、抗原或核酸的检出，潜在病毒的 激活，抗体产生试验等。例如:采用免疫组化的方法在光镜下检查病变组织中的特 异性抗原；采用 HA方法检查患病动物排泄物或组织悬液中的血凝素抗原;采用电 镜技术或免疫电镜技术检查组织或排泄物中的病毒颗粒;采用聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)检查病毒的蛋白质;采用
病原的动物。
形虫等。
清洁级动物
(Clean animal,CL)
无特定病原体动物
（Specific pathogen free animal,SPF)
无菌动物
（Germ free animal,GF)
是指除普通动物应排除的 病原外，还应不携带对动 物健康危害和对科学研究 干扰较大的病原的动物。
是指除清洁动物应排除的 病原外，还应不携带主要 潜在感染或条件致病和对 科学实验干扰大的病原的 动物。
SPF级动物监测项目
类别
动物种类
病原菌
小鼠、 豚鼠、 犬、猴 大鼠 兔
小鼠、 大鼠
病毒
豚鼠、 犬、猴 兔
寄生虫
小鼠、 豚鼠、 犬、猴 大鼠 兔
项目
沙门 菌、 支原 体、 泰泽 病原 体等
沙门 志贺菌、 鼠痘病 兔瘟、 B病毒、
菌、 结核杆 毒、汉 仙台 逆转录
多杀 菌等
坦病毒、 病毒 病毒等
北美 0.02 0.00 0.00 0.01 0.02
0.04
1.57
血清学 血清学
44876 578464
32.64 1.65
血清学 血清学 血清学 血清学 血清学 血清学 血清学 血清学
594539 595903 447656 225868 428821 466572 462209 435772
情况。检测方法有:病毒分离与鉴定，病毒颗粒、抗原或核酸的检出，潜在病毒的 激活，抗体产生试验等。例如:采用免疫组化的方法在光镜下检查病变组织中的特 异性抗原；采用 HA方法检查患病动物排泄物或组织悬液中的血凝素抗原;采用电 镜技术或免疫电镜技术检查组织或排泄物中的病毒颗粒;采用聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)检查病毒的蛋白质;采用
病原的动物。
形虫等。
清洁级动物
(Clean animal,CL)
无特定病原体动物
（Specific pathogen free animal,SPF)
无菌动物
（Germ free animal,GF)
是指除普通动物应排除的 病原外，还应不携带对动 物健康危害和对科学研究 干扰较大的病原的动物。
是指除清洁动物应排除的 病原外，还应不携带主要 潜在感染或条件致病和对 科学实验干扰大的病原的 动物。
微生物检测技术 演示文稿
（二)外部质量控制
a.实验室应参加外部的质量控制活动,对其开展的每 一项检测均应参加相应的室间质量控制。
b.对有关实验室或管理机构发出的测试样品应严格 地当作普通样品一样处理,这样一种方法有助于实验 室每天测试的准确性和重复性,是对实验室所用的方 法,试剂,设备,人员能力的测试。
C.从室间样品测试中的错误可以发现实验室的 不足之处,对工作人员的教育改进可以提高实 验室的检测质量。
7、微生物的生长
1.个体生长很不明显，持续很短时间就繁殖。
被后人尊为细菌学鼻祖，传染病的克星，细菌学的奠基人和开拓者 传染病是人类健康的大敌。从古至今，鼠 疫、伤寒、霍乱、肺结核等许多可怕的病 魔夺去了人类无数的生命。人类要战胜这 些疾病，首先要弄清楚致病的原因。而第 一个发现传染病是由病原细菌感染造成的 人就是罗伯特· 科赫。
2003年，经过全球10个国家的科学 家的共同努力，终于确认了冠状病毒 是SARS的病原体。最终判定这种冠 状病毒是否真正的元凶，依靠的是 100多年前德国伟大的细菌学家科赫 提出的“科赫原则”。
微生物
金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 沙门氏菌 酵母菌 霉菌
热死 时间 温度( ℃) 时间( 分)
63 60 60 50~60 60 7 5~30 5 10~15 5~10
消毒与灭菌方法 a、干热灭菌法
1.火焰灭菌（酒精灯） 2.干热灭菌（电热干燥箱） b、湿热灭菌法 1.巴氏消毒 2.煮沸消毒 3.间歇灭菌法 4.加热蒸汽灭菌法（高压灭菌锅） c、辐射 d、过滤 e、化学方法
微生物检验技术
讲授:周慧恒
目录
一、第一讲 二、第二讲 三、第三讲 四、第四讲 五、第五讲 六、第六讲 七、第七讲 八、第八讲 九、第九讲 十、第十讲
微生物与人类健康第四章人体微生物详解演示文稿
第27页，共38页。
四、无菌动物的特点
人们通过普通动物与无菌动物的比较,发现无菌动物有 如下特点: • 肝脏枯否(kupfer,一种吞噬细胞)较少; • 吞噬细胞的溶菌体酶活性在无菌动物中较低;
• 无菌动物肠黏膜表面积减少;
• 无菌动物肠壁细胞薄,如透明层少;
• 肠道内缺乏浆细胞;
第28页，共38页。
第35页，共38页。
2.环境影响正常菌群
环境
社会环境 自然环境
物理因素
生物因素 化学因素
第36页，共38页。
二、微生态平衡与健康
微生态学中的核心问题是微生态平衡——就是 保持人、动物或植物健康发育和最佳生理状态.
可以说，保护宏观生态就是保护我们的地球，而保 护微生态就是保护我们自身的健康。
第37页，共38页。
第20页，共38页。
免疫球蛋白A，能中和病毒、毒素和酶及致病菌等生物 活性抗原，具有广泛的保护作用——阻止致病菌对肠上皮 黏膜细胞的黏附；sIgA与机体补体及溶菌酶还具有协同杀 菌作用，故胃肠黏膜屏障是宿主整个免疫能力的重要组成部分。
肠壁组织内的淋巴细胞在免疫屏障中也具有重要作用。在 IgA产生的初始阶段，产生和制备IgA的浆细胞的转化是在T 细胞辅助下完成的——T细胞分泌白介素-2和白介素-5等细 胞因子——促进浆细胞的分化、成熟并分泌IgA。
第32页，共38页。
• 长期不洗澡或洗脸不认真时，就可能由细菌 或霉菌在身上或脸上引起皮疹，发炎，继而 流出大量的脓和污物。
• 皮肤大面积烧伤或粘膜破损时，葡萄球菌便 会侵袭创伤面而大量繁殖，引起创伤发炎溃 烂；
第33页，共38页。
• 机体着凉或疲劳过度时，在健康人的呼吸 道一定能分离到的，造成典型肺炎的肺炎 链球菌便会引起咽炎和扁桃体炎。
四、无菌动物的特点
人们通过普通动物与无菌动物的比较,发现无菌动物有 如下特点: • 肝脏枯否(kupfer,一种吞噬细胞)较少; • 吞噬细胞的溶菌体酶活性在无菌动物中较低;
• 无菌动物肠黏膜表面积减少;
• 无菌动物肠壁细胞薄,如透明层少;
• 肠道内缺乏浆细胞;
第28页，共38页。
第35页，共38页。
2.环境影响正常菌群
环境
社会环境 自然环境
物理因素
生物因素 化学因素
第36页，共38页。
二、微生态平衡与健康
微生态学中的核心问题是微生态平衡——就是 保持人、动物或植物健康发育和最佳生理状态.
可以说，保护宏观生态就是保护我们的地球，而保 护微生态就是保护我们自身的健康。
第37页，共38页。
第20页，共38页。
免疫球蛋白A，能中和病毒、毒素和酶及致病菌等生物 活性抗原，具有广泛的保护作用——阻止致病菌对肠上皮 黏膜细胞的黏附；sIgA与机体补体及溶菌酶还具有协同杀 菌作用，故胃肠黏膜屏障是宿主整个免疫能力的重要组成部分。
肠壁组织内的淋巴细胞在免疫屏障中也具有重要作用。在 IgA产生的初始阶段，产生和制备IgA的浆细胞的转化是在T 细胞辅助下完成的——T细胞分泌白介素-2和白介素-5等细 胞因子——促进浆细胞的分化、成熟并分泌IgA。
第32页，共38页。
• 长期不洗澡或洗脸不认真时，就可能由细菌 或霉菌在身上或脸上引起皮疹，发炎，继而 流出大量的脓和污物。
• 皮肤大面积烧伤或粘膜破损时，葡萄球菌便 会侵袭创伤面而大量繁殖，引起创伤发炎溃 烂；
第33页，共38页。
• 机体着凉或疲劳过度时，在健康人的呼吸 道一定能分离到的，造成典型肺炎的肺炎 链球菌便会引起咽炎和扁桃体炎。
食品卫生微生物指标及微生物检测详解演示文稿
培养时间一般为48h，有些方法只要求24h的培养即 可计数
培养箱应保持一定的湿度，琼脂平板培养48h后， 培养基失重不应超过15％
在某些场合，为了防止食品颗粒与菌落混淆不清， 可在营养琼脂中加入氯化三苯四氮唑（TTC），培 养后菌落呈红色，易于分别
平板计数琼脂培养基（PCA）
❖ 胰蛋白胨5.0g，酵母浸粉2.5g，葡萄 糖1.0g，琼脂15.0g，蒸馏水1000ml，
若有二个稀释度均在30－300之间时，按国家 标准方法要求应以二者比值决定，比值小于或 等于2取平均数，比值大于2则其较小数字（有 的规定不考虑其比值大小，均以平均数报告）。
若所有稀释度均不在计数区间。如均大于300， 则取最高稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数报告 之。
如均小于30，则以最低稀释度的平均菌落数乘 稀释倍数报告之。
当平板上有链状菌落生长时，如呈链状生长的菌落之间无任何明 显界限，则应作为一个菌落计，如存在有几条不同来源的链，则 每条链均应按一个菌落计算，不要把链上生长的每一个菌落分开 计数。如有片状菌落生长，该平板一般不宜采用，如片状菌落不 到平板一半，而另一半又分布均匀，则可以半个平板的菌落数乘 2代表全平板的菌落数。
❖ AOAC国际分析化学家协会
细菌总数的常规检验方法
稀释平板菌落计数法(Plate Counter)
操作步骤
-----样品的稀释 -----倾注平皿 -----培养48（24）小时 -----计数 -----报告
25g或25mL 1mL
9mL
10-1 10-2 10-3 225mL
当计数平板内的菌落数过多（即所有稀释度 均大于300时），但分布很均匀，可取平板 的一半或1/4计数。再乘以相应稀释倍数作为 该平板的菌落数。
培养箱应保持一定的湿度，琼脂平板培养48h后， 培养基失重不应超过15％
在某些场合，为了防止食品颗粒与菌落混淆不清， 可在营养琼脂中加入氯化三苯四氮唑（TTC），培 养后菌落呈红色，易于分别
平板计数琼脂培养基（PCA）
❖ 胰蛋白胨5.0g，酵母浸粉2.5g，葡萄 糖1.0g，琼脂15.0g，蒸馏水1000ml，
若有二个稀释度均在30－300之间时，按国家 标准方法要求应以二者比值决定，比值小于或 等于2取平均数，比值大于2则其较小数字（有 的规定不考虑其比值大小，均以平均数报告）。
若所有稀释度均不在计数区间。如均大于300， 则取最高稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数报告 之。
如均小于30，则以最低稀释度的平均菌落数乘 稀释倍数报告之。
当平板上有链状菌落生长时，如呈链状生长的菌落之间无任何明 显界限，则应作为一个菌落计，如存在有几条不同来源的链，则 每条链均应按一个菌落计算，不要把链上生长的每一个菌落分开 计数。如有片状菌落生长，该平板一般不宜采用，如片状菌落不 到平板一半，而另一半又分布均匀，则可以半个平板的菌落数乘 2代表全平板的菌落数。
❖ AOAC国际分析化学家协会
细菌总数的常规检验方法
稀释平板菌落计数法(Plate Counter)
操作步骤
-----样品的稀释 -----倾注平皿 -----培养48（24）小时 -----计数 -----报告
25g或25mL 1mL
9mL
10-1 10-2 10-3 225mL
当计数平板内的菌落数过多（即所有稀释度 均大于300时），但分布很均匀，可取平板 的一半或1/4计数。再乘以相应稀释倍数作为 该平板的菌落数。
第八章微生物生态-PowerPoint演示文稿
高BOD5的污水进入污水处理装置后，其中的自 然微生物区系在好氧条件下，根据其中营养物质或 有毒物质的情况，在客观上造成一个选择性的培养 条件，随时间推移，发生微生物区系的群落演替， 使水中有机物不断被降解、氧化、分解、转化或吸 附沉降，进而达到净化的目的。
污水处理中的几个常用名词
BOD5（生物耗氧量） COD（化学需氧量） TOD（总需氧量） DO（溶氧量） SS（悬浮物含量） TOC（总有机碳含量）
（三）水体微生物
1、不同水体中的微生物种类
淡水型水体微生物 清水型微生物：化能自养、光能自养微生物 腐败型微生物：肠道杆菌、芽孢杆菌、弧菌
淡水生境：湖泊与水库 沿岸区：蓝细菌、光合藻类和好氧微生物 深水区：严重缺氧
海水型水体微生物—海洋微生物学
海水的理化特征：含盐量3% 海水微生物：2-4%，2.5-3.5% 海水微生物比淡水微生物更耐渗透压 藻类 Bacilus Pseudomonas Vibrio 发光细菌
正常条件下，正常菌群与人体保持的十分和 谐的平衡状态，菌群内部各微生物之间相互 制约，维持稳定有序的关系 人体肠道中有60-400种微生物，数百万亿。
肠道菌群对人体的作用
有益作用 有害作用
某些正常菌群当条件变化会变成病原微生物，引 起疾病，称为条件致病菌，由其引起的感染称之 为内源感染 条件致病菌 正常菌群的微生物，当机体防御性降低，生存部 位改变或因数量剧增等而引起疾病者
环境污染 指土壤或水体等生态系统的结构、功能受到 外来有害因素的影响或破坏失去了平衡，导 致物质流、能量流无法正常运转的现象
环境问题 三废处理 消除公害 环境保护 可持续发展
水体的污染—富营养化
水体的自净作用 物理作用：沉淀、扩散、稀释 化学作用：氧化 生物学和生物化学作用
污水处理中的几个常用名词
BOD5（生物耗氧量） COD（化学需氧量） TOD（总需氧量） DO（溶氧量） SS（悬浮物含量） TOC（总有机碳含量）
（三）水体微生物
1、不同水体中的微生物种类
淡水型水体微生物 清水型微生物：化能自养、光能自养微生物 腐败型微生物：肠道杆菌、芽孢杆菌、弧菌
淡水生境：湖泊与水库 沿岸区：蓝细菌、光合藻类和好氧微生物 深水区：严重缺氧
海水型水体微生物—海洋微生物学
海水的理化特征：含盐量3% 海水微生物：2-4%，2.5-3.5% 海水微生物比淡水微生物更耐渗透压 藻类 Bacilus Pseudomonas Vibrio 发光细菌
正常条件下，正常菌群与人体保持的十分和 谐的平衡状态，菌群内部各微生物之间相互 制约，维持稳定有序的关系 人体肠道中有60-400种微生物，数百万亿。
肠道菌群对人体的作用
有益作用 有害作用
某些正常菌群当条件变化会变成病原微生物，引 起疾病，称为条件致病菌，由其引起的感染称之 为内源感染 条件致病菌 正常菌群的微生物，当机体防御性降低，生存部 位改变或因数量剧增等而引起疾病者
环境污染 指土壤或水体等生态系统的结构、功能受到 外来有害因素的影响或破坏失去了平衡，导 致物质流、能量流无法正常运转的现象
环境问题 三废处理 消除公害 环境保护 可持续发展
水体的污染—富营养化
水体的自净作用 物理作用：沉淀、扩散、稀释 化学作用：氧化 生物学和生物化学作用
演示文稿 微生物的营养.
氨基酸、简单蛋白质 （氨基酸，明胶等）
C.H.O.N.X型
复杂蛋白质、核酸等 （牛肉膏、蛋白胨、花生饼粉等）
特点
1）根据微生物利用有机碳或无机碳，可将微生物分为：
异养微生物：有机碳 自养微生物：无机碳
2）碳源谱广（微生物>>植物>动物）；
3）最适碳源： C.H.O型，糖类 （ 异养微生物）
糖 >有机酸，醇 > 脂 单糖 >双糖 >多糖（淀粉>纤维素,木质素,几丁质） 己糖 > 戊糖 葡萄糖，果糖 > 甘露糖，半乳糖
4）微生物对碳源利用具有选择性 混合存在 葡萄糖 ：首先利用（速效碳源） 乳糖 ： 后利用（迟效碳源）
5）不同微生物，其碳源谱不同 （利用碳源物质的能力有差别）
洋葱假单胞菌：90种以上 甲烷菌：甲醇和甲烷
6）异养微生物：碳源=能源（双功能营养物）
选择碳源原则
1）根据微生物的生理机能选择； 2）考虑经济效益，防止降格使用
二、微生物的营养要素及其生理功能
微生物的6大营养要素：
碳源，氮源，能源，无机盐，生长因子，水
营养要素的功能： 1）构成细胞结构组分和代谢产物的原料； 2）提供能量； 3）调节新陈代谢。
1、 水
功能：
（1）起到溶剂与运输介质的作用； （2）直接作为反应物或产物参与体内多种生化反应； （3）水是热的良导体，有利于散热，不致于因代谢产热而使细胞
大量元素：P、S、K、Mg、Na、Ca等（10-3~10-4mol/L）； 微量元素：Fe、Zn、Mn、Mo、Co、Cu、Ni等（10-6~10-8mol/L） 其中：Fe是介于微量元素和宏量元素之间的元素。
(1)磷：合成核酸、磷脂、一些辅酶（NAD，NADP，CoA等）及高能磷 酸化合物的重要原料。一般都以K2HPO4和KH2PO4的形式人为 地提供。
C.H.O.N.X型
复杂蛋白质、核酸等 （牛肉膏、蛋白胨、花生饼粉等）
特点
1）根据微生物利用有机碳或无机碳，可将微生物分为：
异养微生物：有机碳 自养微生物：无机碳
2）碳源谱广（微生物>>植物>动物）；
3）最适碳源： C.H.O型，糖类 （ 异养微生物）
糖 >有机酸，醇 > 脂 单糖 >双糖 >多糖（淀粉>纤维素,木质素,几丁质） 己糖 > 戊糖 葡萄糖，果糖 > 甘露糖，半乳糖
4）微生物对碳源利用具有选择性 混合存在 葡萄糖 ：首先利用（速效碳源） 乳糖 ： 后利用（迟效碳源）
5）不同微生物，其碳源谱不同 （利用碳源物质的能力有差别）
洋葱假单胞菌：90种以上 甲烷菌：甲醇和甲烷
6）异养微生物：碳源=能源（双功能营养物）
选择碳源原则
1）根据微生物的生理机能选择； 2）考虑经济效益，防止降格使用
二、微生物的营养要素及其生理功能
微生物的6大营养要素：
碳源，氮源，能源，无机盐，生长因子，水
营养要素的功能： 1）构成细胞结构组分和代谢产物的原料； 2）提供能量； 3）调节新陈代谢。
1、 水
功能：
（1）起到溶剂与运输介质的作用； （2）直接作为反应物或产物参与体内多种生化反应； （3）水是热的良导体，有利于散热，不致于因代谢产热而使细胞
大量元素：P、S、K、Mg、Na、Ca等（10-3~10-4mol/L）； 微量元素：Fe、Zn、Mn、Mo、Co、Cu、Ni等（10-6~10-8mol/L） 其中：Fe是介于微量元素和宏量元素之间的元素。
(1)磷：合成核酸、磷脂、一些辅酶（NAD，NADP，CoA等）及高能磷 酸化合物的重要原料。一般都以K2HPO4和KH2PO4的形式人为 地提供。
药包材微生物检验详解演示文稿
➢ 包材的微生物污染源：空气、水、厂房与设 备、生产用原辅料、包装材料、生产操作人 员等
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微生物检验
• 一、实验准备 • 二、培养基的制备 • 三、人流、物流程序 • 四、检验步骤方法 • 五、培养观察与结果判断
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实验准备
洁净室的启用
现在是35页\一共有51页\编辑于星期二
1、我国的微生物菌种保藏机构
• 1）普通微生物菌种保藏管理中心（CCGMC）
• 中科院微生物所，北京， • 中科院武汉病毒研究所
• 2）农业微生物菌种保藏管理中心（ACCC） • 中国农业科学院土壤肥料研究所，北京 （ISF） • 3）工业微生物菌种保藏管理中心（CICC）
边加热边搅拌,避免培养基焦化或爆沸溢出。
培养基的灭菌
已配制好的培养基必须立即灭菌 湿热灭菌必须严格控制灭菌温度和时间（121度，15-30分钟，20分钟）
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培养基制备过程中的注意事项
培养基的保温
培养基灭菌后应立即取出，不得储藏在高压灭菌器中，避免造成过度灭菌,
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• 菌种的采购
向指定的菌种保藏机构购置。 所购菌种均为冷冻干燥菌种。 购入菌种后，应及时移交实验室。实验室菌种 管理人员应仔细核对菌种发放单和冷冻干燥菌种 管标签等各项信息，确认无误后，置4～6℃暂存。
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菌种的复苏
菌种在打开前应仔细核对标签上菌名、菌号。
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人流、物流程序
物流
将样品、灭菌后的物品、集菌过滤器等转移入传递窗内，打开传递窗内的紫外
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微生物检验
• 一、实验准备 • 二、培养基的制备 • 三、人流、物流程序 • 四、检验步骤方法 • 五、培养观察与结果判断
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实验准备
洁净室的启用
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1、我国的微生物菌种保藏机构
• 1）普通微生物菌种保藏管理中心（CCGMC）
• 中科院微生物所，北京， • 中科院武汉病毒研究所
• 2）农业微生物菌种保藏管理中心（ACCC） • 中国农业科学院土壤肥料研究所，北京 （ISF） • 3）工业微生物菌种保藏管理中心（CICC）
边加热边搅拌,避免培养基焦化或爆沸溢出。
培养基的灭菌
已配制好的培养基必须立即灭菌 湿热灭菌必须严格控制灭菌温度和时间（121度，15-30分钟，20分钟）
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培养基制备过程中的注意事项
培养基的保温
培养基灭菌后应立即取出，不得储藏在高压灭菌器中，避免造成过度灭菌,
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• 菌种的采购
向指定的菌种保藏机构购置。 所购菌种均为冷冻干燥菌种。 购入菌种后，应及时移交实验室。实验室菌种 管理人员应仔细核对菌种发放单和冷冻干燥菌种 管标签等各项信息，确认无误后，置4～6℃暂存。
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菌种的复苏
菌种在打开前应仔细核对标签上菌名、菌号。
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人流、物流程序
物流
将样品、灭菌后的物品、集菌过滤器等转移入传递窗内，打开传递窗内的紫外
微生物基础知识演示文稿
能使宿主致病的为致病菌或病原菌；不能造成宿主感染 的为非致病菌或非病原菌；有些细菌在正常情况下并不 致病，但当在某些条件改变的特殊情况下可以致病，这 类菌称为条件致病菌或机会致病菌。
第二十页，共86页。
微生物的作用与危害
1. 微生物的作用 绝大多数微生物对人和动物是有益的， 已广泛应用于农业、食品、医药、酿造、 重要的作用。例如与我们日常生活密切相 关的如酸奶、酒类、抗生素、疫苗等。
第十一页，共86页。
细菌的繁殖：二分裂繁殖
第十二页，共86页。
二、真菌
真菌是一类有细胞壁，无叶绿素，以寄生或 腐生方式生存，少数为单细胞，多数为多细 胞，能进行无性或有性繁殖的一类真核细胞
真菌包括单细胞与多细胞两类。单细胞真菌 呈圆形或卵圆形，称为酵母菌；多细胞真菌
第十三页，共86页。
微生物的主要类群：丝状真菌
病毒和朊病毒等。
第五页，共86页。
微生物分类
2.按其致病性可分为: ★病原性微生物:侵犯人体，引起感染甚至
传染病的微生物，或称病原体 。 ★非病原性微生物
第六页，共86页。
微生物形态结构
一、细菌 细菌是一类细胞细而短、结构简单、细胞壁坚韧，以二分裂方式无性繁殖
的原核微生物，分布广泛。
1. 球菌 多数球菌直径在1微米左右，外观呈球形或近似球形。由于繁
微生物基础知识演示文稿
第一页，共86页。
一、微生物基础知识
第二页，共86页。
什么是微生物
微生物（microorganism, microbe）:
存在于自然界中的一群体型细小、结构简 单、肉眼看不见，必须借助于特殊仪器 放大后才能观察到的微小生物。
第三页，共86页。
微生物的特点
第二十页，共86页。
微生物的作用与危害
1. 微生物的作用 绝大多数微生物对人和动物是有益的， 已广泛应用于农业、食品、医药、酿造、 重要的作用。例如与我们日常生活密切相 关的如酸奶、酒类、抗生素、疫苗等。
第十一页，共86页。
细菌的繁殖：二分裂繁殖
第十二页，共86页。
二、真菌
真菌是一类有细胞壁，无叶绿素，以寄生或 腐生方式生存，少数为单细胞，多数为多细 胞，能进行无性或有性繁殖的一类真核细胞
真菌包括单细胞与多细胞两类。单细胞真菌 呈圆形或卵圆形，称为酵母菌；多细胞真菌
第十三页，共86页。
微生物的主要类群：丝状真菌
病毒和朊病毒等。
第五页，共86页。
微生物分类
2.按其致病性可分为: ★病原性微生物:侵犯人体，引起感染甚至
传染病的微生物，或称病原体 。 ★非病原性微生物
第六页，共86页。
微生物形态结构
一、细菌 细菌是一类细胞细而短、结构简单、细胞壁坚韧，以二分裂方式无性繁殖
的原核微生物，分布广泛。
1. 球菌 多数球菌直径在1微米左右，外观呈球形或近似球形。由于繁
微生物基础知识演示文稿
第一页，共86页。
一、微生物基础知识
第二页，共86页。
什么是微生物
微生物（microorganism, microbe）:
存在于自然界中的一群体型细小、结构简 单、肉眼看不见，必须借助于特殊仪器 放大后才能观察到的微小生物。
第三页，共86页。
微生物的特点
微生物学实验普通光学显微镜的使用及细菌形态的观察演示文稿
显微镜的总放大倍数=物镜放大倍数X目镜放大倍数
◆ 物镜上的标识
当前第6页\共有17页\编于星期四\17点
油镜的放大倍数可达100× ，放大倍数这样大的镜头，焦距很
短，直径很小，但所需要的光照强度却最大。
由低倍镜转为高倍镜时，通过增加照明强度和开大虹 彩光圈，以增大高倍镜及油镜下视野的亮度。
当前第7页\共有17页\编于星期四\17点
当前第4页\共有17页\编于星期四\17点
粗准焦螺旋
普 细准焦螺旋
通
光
学
显微
镜臂
镜机
的 构 造 可 分
械 部 分 和 光 学
为部
两分
镜柱
部
分
：
当前第5页\共有17页\编于星期四\17点
目镜
一
、
普
通
镜筒
光
学
显
转换器
微
物镜
镜
通光孔
的 基
载物台
本
结
聚光器
构
压片夹
反光镜
镜座
二、实验原理：显微镜的工作原理
当前第10页\共有17页\编于星期四\17点
三、实验器材
1、标本片：四联球菌、枯草芽孢杆菌 2、试剂：香柏油、二甲苯 3、仪器及其它用具：显微镜、擦镜纸等
当前第11页\共有17页\编于星期四\17点
四、实验步骤
1、显微观察步骤 1）低倍镜观察（10×）： 2） 高 倍镜 观 察 （40×） ： 3）油镜观察（100×）： 2、显微镜用毕后的处理 当前第12页\共有17页\编于星期四\17点
从标本玻片透过来的光线，因介 质密度不同（从玻片进入空气，再进 入镜头），有些光线会因折射或全反 射，不能进入镜头，致使在使用油镜 时会因射入的光线较少，物像显现不 清。
◆ 物镜上的标识
当前第6页\共有17页\编于星期四\17点
油镜的放大倍数可达100× ，放大倍数这样大的镜头，焦距很
短，直径很小，但所需要的光照强度却最大。
由低倍镜转为高倍镜时，通过增加照明强度和开大虹 彩光圈，以增大高倍镜及油镜下视野的亮度。
当前第7页\共有17页\编于星期四\17点
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粗准焦螺旋
普 细准焦螺旋
通
光
学
显微
镜臂
镜机
的 构 造 可 分
械 部 分 和 光 学
为部
两分
镜柱
部
分
：
当前第5页\共有17页\编于星期四\17点
目镜
一
、
普
通
镜筒
光
学
显
转换器
微
物镜
镜
通光孔
的 基
载物台
本
结
聚光器
构
压片夹
反光镜
镜座
二、实验原理：显微镜的工作原理
当前第10页\共有17页\编于星期四\17点
三、实验器材
1、标本片：四联球菌、枯草芽孢杆菌 2、试剂：香柏油、二甲苯 3、仪器及其它用具：显微镜、擦镜纸等
当前第11页\共有17页\编于星期四\17点
四、实验步骤
1、显微观察步骤 1）低倍镜观察（10×）： 2） 高 倍镜 观 察 （40×） ： 3）油镜观察（100×）： 2、显微镜用毕后的处理 当前第12页\共有17页\编于星期四\17点
从标本玻片透过来的光线，因介 质密度不同（从玻片进入空气，再进 入镜头），有些光线会因折射或全反 射，不能进入镜头，致使在使用油镜 时会因射入的光线较少，物像显现不 清。
微生物的纯培养生长曲线及繁殖演示文稿
单个的微生物组成的群体。
微生物接种是群体接种，接种后的生长是微生物群体繁殖生长。
对细菌群体生长规律的了解是对其进行研究与利用的基础
第19页，共112页。
第二节 细菌的群体生长繁殖 一、生长曲线
生长曲线(Growth Curve)：
细菌接种到定量的液体培养基中，定时取样测定细胞数量， 以培养时间为横座标，以菌数的对数为纵座标作图，得到的一条反映细菌在 整个培养期间菌数变化规律的曲线。
细菌代谢活性降低，细菌衰老并出现自溶，产生或释放出一些产物 ，如氨基酸、转化酶、外肽酶或抗生素等。细胞呈现多种形态，有 时产生畸形，细胞大小悬殊，有些革兰氏染色反应阳性菌变成阴性 反应等。
该时期死亡的细菌以对数方式增加，但在衰亡期的后期，由于部分 细菌产生抗性也会使细菌死亡的速率降低，仍有部分活菌存在。
培养过程中不断的补充营养物质和以同样的速率移出培养物是 实现微生物连续培养的基本原则。
第42页，共112页。
二、连续培养
第二节 细菌的群体生长繁殖
控制连续培养的方法
恒浊连续培养
不断调节流速而使细菌培养液浊度保持恒定
恒化连续培养
第29页，共112页。
t1 – t0
G = ——————
n
(t1 – t0 )
= ————————————
3.322(lgNt-lgN0)
第30页，共112页。
影响微生物增代时间（代时）的因素：
1）菌种，不同的微生物及微生物的不同菌株代时不同；
2）营养成分，在营养丰富的培养基中生长代时短 3）营养物浓度，在一定范围内，生长速率与营养物浓度呈正比，
活菌计数：
采用特定的染色技术也可分别对活菌和死菌进行分别计数
第15页，共112页。
微生物接种是群体接种，接种后的生长是微生物群体繁殖生长。
对细菌群体生长规律的了解是对其进行研究与利用的基础
第19页，共112页。
第二节 细菌的群体生长繁殖 一、生长曲线
生长曲线(Growth Curve)：
细菌接种到定量的液体培养基中，定时取样测定细胞数量， 以培养时间为横座标，以菌数的对数为纵座标作图，得到的一条反映细菌在 整个培养期间菌数变化规律的曲线。
细菌代谢活性降低，细菌衰老并出现自溶，产生或释放出一些产物 ，如氨基酸、转化酶、外肽酶或抗生素等。细胞呈现多种形态，有 时产生畸形，细胞大小悬殊，有些革兰氏染色反应阳性菌变成阴性 反应等。
该时期死亡的细菌以对数方式增加，但在衰亡期的后期，由于部分 细菌产生抗性也会使细菌死亡的速率降低，仍有部分活菌存在。
培养过程中不断的补充营养物质和以同样的速率移出培养物是 实现微生物连续培养的基本原则。
第42页，共112页。
二、连续培养
第二节 细菌的群体生长繁殖
控制连续培养的方法
恒浊连续培养
不断调节流速而使细菌培养液浊度保持恒定
恒化连续培养
第29页，共112页。
t1 – t0
G = ——————
n
(t1 – t0 )
= ————————————
3.322(lgNt-lgN0)
第30页，共112页。
影响微生物增代时间（代时）的因素：
1）菌种，不同的微生物及微生物的不同菌株代时不同；
2）营养成分，在营养丰富的培养基中生长代时短 3）营养物浓度，在一定范围内，生长速率与营养物浓度呈正比，
活菌计数：
采用特定的染色技术也可分别对活菌和死菌进行分别计数
第15页，共112页。
演示文稿微生物平板划线试验
第20页，共43页。
2、液体培养基接种方法
图2-2 液体培养基接种法
第21页，共43页。
3、穿刺接种法
常用于半固体琼脂培养基、醋酸铅培养基、双糖铁培养基 等的接种，前者用于测定细菌的动力，后二者则用于观察 细菌的生化反应。
第22页，共43页。
3、穿刺接种法
步骤:（1）用记号笔在待接种培养基上写明标记。 （2）如斜面培养基接种法，握持菌种管及待接种
观察生长情况。
第17页，共43页。
1、斜面培养基接种法
图2-1 斜面培养基接种法
第18页，共43页。
2、液体培养基接种方法
可用于观察细菌不同的生长状况，有的呈均匀混浊， 有的呈沉淀生长，还有的在液体表面形成菌膜；另外 还可以供测定细菌生化特性用。凡是肉汤、葡萄糖蛋 白胨水以及各种单糖发酵管等液体培养基均用此法接 种。
第24页，共43页。
4、平板划线接种法
常用于分离单个菌落，也可用于观察细菌的生长状况和观察 某些生化反应。沙门氏菌的各属在亚硫酸铋琼脂平板上呈黑
色，具有金属光泽；志贺氏菌属在HE琼脂平板、SS琼脂平
板、麦康凯琼脂平板上呈现无色透明不发酵乳糖的菌落。
第25页，共43页。
4、平板划线接种法——接种方法
第42页，共43页。
5、观察结果
(3)色素：有些细菌产生水溶性色素，使菌落和周围的培 养基出现绿色、金黄色、白色、橙色、柠檬色等颜色，产 生的色素有水溶性或脂溶性。 (4)气味：某些细菌在培养基中生长繁殖后可产生特殊气 味，如铜绿假单胞菌（生姜气味）、变形杆菌（巧克力烧 焦的臭味）、厌氧梭菌（腐败的恶臭味）、白色假丝酵母 菌（酵母味）和放线菌（泥土味）等。
平行划线，划满平板其余部分，此视为四区。 各区接种线间尽量互不交接，以达到细菌逐渐稀释的目
2、液体培养基接种方法
图2-2 液体培养基接种法
第21页，共43页。
3、穿刺接种法
常用于半固体琼脂培养基、醋酸铅培养基、双糖铁培养基 等的接种，前者用于测定细菌的动力，后二者则用于观察 细菌的生化反应。
第22页，共43页。
3、穿刺接种法
步骤:（1）用记号笔在待接种培养基上写明标记。 （2）如斜面培养基接种法，握持菌种管及待接种
观察生长情况。
第17页，共43页。
1、斜面培养基接种法
图2-1 斜面培养基接种法
第18页，共43页。
2、液体培养基接种方法
可用于观察细菌不同的生长状况，有的呈均匀混浊， 有的呈沉淀生长，还有的在液体表面形成菌膜；另外 还可以供测定细菌生化特性用。凡是肉汤、葡萄糖蛋 白胨水以及各种单糖发酵管等液体培养基均用此法接 种。
第24页，共43页。
4、平板划线接种法
常用于分离单个菌落，也可用于观察细菌的生长状况和观察 某些生化反应。沙门氏菌的各属在亚硫酸铋琼脂平板上呈黑
色，具有金属光泽；志贺氏菌属在HE琼脂平板、SS琼脂平
板、麦康凯琼脂平板上呈现无色透明不发酵乳糖的菌落。
第25页，共43页。
4、平板划线接种法——接种方法
第42页，共43页。
5、观察结果
(3)色素：有些细菌产生水溶性色素，使菌落和周围的培 养基出现绿色、金黄色、白色、橙色、柠檬色等颜色，产 生的色素有水溶性或脂溶性。 (4)气味：某些细菌在培养基中生长繁殖后可产生特殊气 味，如铜绿假单胞菌（生姜气味）、变形杆菌（巧克力烧 焦的臭味）、厌氧梭菌（腐败的恶臭味）、白色假丝酵母 菌（酵母味）和放线菌（泥土味）等。
平行划线，划满平板其余部分，此视为四区。 各区接种线间尽量互不交接，以达到细菌逐渐稀释的目
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将配制好的乳糖胆盐培养液加 入到支发酵管中，每支9ml。并 将杜氏小管倒放入其中（小倒 管中千万不要出现气泡）
另取3支试管，加入9ml蒸馏水。将12支试管 分成三组。每组2支平行样+一只空白样+一支 蒸馏水
编 号
第一组 平行样 空 白 样 1 2 3
第二组
第三组 空 白 样 11 蒸 馏 水 12
实验名称：土壤中大肠杆菌 的测定
组别：第三组
实验目的
1、学习利用多管发酵法测定土壤中的大肠菌 群的数量。 2、了解大肠菌群分解糖类、产酸产气的胜利 特征。 3、了解大肠菌群作为卫生指标的意义。
实验原理
大肠菌群是能够在37度、24小时 能发酵糖类、产酸、产气、需氧和 兼厌氧的革兰式阳性无芽杆菌。该 菌群主要来源于人畜粪便，故以此 作为粪便污染指标。
3.再无菌条件下对用移液管移取4号试管中的溶 液1ml于1号、2号试管中，依次将8号和12号移 取1ml到5号、6号和9号、10号试管中，塞上试 管塞。
将12支试管放入恒温培养箱中 （37摄氏度，18-2象？ 1.牛粪是假的？
问 题 探 讨
渴死了！！ 渴死了！！
蒸 平行样 空 蒸 平行样 馏 白 馏 水 样 水 4 5 6 7 8 9 10
干热灭菌 将包好的待灭菌的物品放入干燥箱内，将温度 调至160—170度后，维持2h.待温度降至50度左右 才可将物品取出。 高压蒸汽灭菌 将12支发酵管及装有蒸馏水的锥形瓶包扎好放入 高压灭菌锅内当压力达到1.05kg/cm2(温度为121度） 即灭菌开始，维持15-30min
制备土壤稀释液 1.称土样1g于盛有99ml的三角瓶中，充分震 荡,此时即把土壤稀释100倍。
2.点燃酒精灯，用75%的乙醇 洗手后用移液管移取上清液 1ml到4号试管中，再从4号试 管中移取1ml到8号试管中，再 从8号 试管中移取1ml到12号 试管中，则4、8、12号试管中 4 8 12 的溶质以此被稀释1000,10000 100000倍。
主 要 仪 器 和 试 剂
1、锥形瓶、发酵管12支、1ml移液管9支、培养皿 6套、接种环1支、试管架1台、小倒管9支、250ml 大烧杯 2、蒸馏水、伊红美蓝原料、糖蛋白原料、乳糖胆 盐原料
激烈的讨论
仪器的包装 仪器的洗涤
配制乳糖胆盐发 酵液
称取7g乳糖胆盐原料，加 入200ml蒸馏水溶解，加热并 搅拌均匀。然后调PH=7.4
2.因为土壤在太阳光下曝晒，致使水分缺 失大肠杆菌因缺水而渴死。
3.大肠杆菌没有侵入到土壤中，在清 除草根等一些杂物后，土壤里已不含 大肠杆菌。
大肠菌群最适生存环境是什么？ 大肠菌群生长温度范围是7-49.5摄氏度， 7-49.5 最适生长温度37摄氏度，最低水分活度 0.95.PH4.0-9.0，最高盐度6.5%，致病性 大肠杆菌在室温下能生存数周，在土壤和 水分中可达数月，比较耐低温。