微生物学实验

讲授：讲述主要内容的第一部分；演示：显微镜的正确使用。 实验二、细菌革兰氏染色、放线菌形态观察 3 学时层次基础性 主要内容：
1.对 4 种细菌（两种革兰氏阳性菌和两种革兰氏阴性菌）进行革兰氏染色观察。
2.对 2 种放线菌进行形态结构观察。 教学要求：
了解：细菌革兰氏染色的应用及意义；放线菌与抗生素；放线菌在实际中的意义。
Hale Waihona Puke Baidu
二、教学内容和学时分配
实验一、细菌形态观察（装片）3 学时层次基础性
主要内容：
1.微生物学实验意义、研究进展、研究内容，实验要求。
2.11 种细菌永久装片的观察。 教学要求：
了解：微生物学实验的意义和研究进展；微生物学实验的主要实验技术和研究方法。
理解：微生物学实验在解决生命科学重大理论问题和人类面临的许多严峻的实际问题中所发挥的重要作用；各类微生物细胞的细 胞结构和功能的相互适应。
掌握：细菌的基本形态；细菌细胞的基本结构如细胞壁、细胞膜等；细菌细胞的特殊结构如鞭毛、芽孢、荚膜等特殊结构。 重点、难点：
重点：微生物实验所能解决的理论和实际问题；显微镜的正确使用方法；光学显微镜下识别细菌细胞的基本结构和特殊结构。
难点：细菌各部分结构的辨认和识别；显微镜的正确使用方法。 其它教学环节：
掌握：酵母菌和霉菌的观察方法；酵母菌和霉菌的形态和结构特征，包括酿酒酵母的出芽生殖和子囊孢子，青霉、曲霉所产生的 分生孢子，黑根霉产生孢囊孢子，黑曲霉产生的足细胞等。 重点、难点：
重点：酵母菌形态、出芽生殖、死亡率的测定、子囊孢子观察；霉菌形态观察，包括分生孢子、黑根霉的假根及孢囊孢子、黑曲 霉的足细胞及分生孢子、青霉的分生孢子等。
难点：酵母菌子囊孢子观察，黑曲霉足细胞的观察；青霉分生孢子产生结构。 其它教学环节：
演示：酵母菌、霉菌临时装片的制作。 实验四、培养基的设计及配制、培养基的消毒与灭菌 3 学时层次基础性、设计性 主要内容：
1. 培养基设计的原则及培养基的设计方法。 2. 几种培养基的配制方法及灭菌方法。 教学要求： 了解：培养基的种类及应用。 理解：培养基设计的基本原理；消毒和灭菌的基本原理、主要方法和应用范围。 掌握：培养基的配制方法；培养基的高压蒸汽灭菌。 重点、难点： 重点：培养基的设计方法；培养基的配制方法；培养基的灭菌方法。 难点：培养基的设计。 其它教学环节： 演示：高压蒸汽灭菌器的使用。 实验五、无菌操作技术、微生物分离筛选 3 学时层次基础性 主要内容： 1. 无菌操作练习：倒平板、划线接种。 2. 稀释涂平板法、划线法分离纯化微生物。 教学要求： 了解：无菌操作的意义及在各领域的应用。 理解：稀释涂平板法、划线法分离纯化微生物的基本原理。 掌握：微生物无菌操作技术的实验方法，包括倒平板、划线接种、涂布法接种等。 重点、难点： 重点：无菌操作技术；稀释涂平板法、划线法分离纯化微生物。 难点：划线法分离纯化微生物。 其它教学环节： 演示：无菌操作演示，包括倒平板、划线接种、涂布法接种等。 实验六、目的菌的获得及证实、菌落特征观察、数量统计分析 3 学时层次综合性 主要内容： 1. 细菌、放线菌、霉菌等菌落特征观察与辨认。
教学要求：
了解：常见的用于微生物分类和鉴定的生理生化反应。
理解：细菌革兰氏染色机理，放线菌三种菌丝的功能。
掌握：细菌革兰氏染色方法；放线菌三种菌丝的结构特点及观察方法。 重点、难点：
细菌革兰氏染色方法；放线菌三种菌丝的观察方法；放线菌营养菌丝和气生菌丝的区别。 其它教学环节：
演示：细菌革兰氏染色；放线菌三种菌丝的观察方法。 实验三、酵母菌形态观察、霉菌形态观察、菌体大小测量 3 学时层次基础性 主要内容：
1. 酿酒酵母、假丝酵母的形态观察.
2. 酿酒酵母出芽生殖（无性生殖），子囊孢子观察（有性生殖）。
3. 青霉分生孢子的观察、黑曲霉分生孢子和足细胞的观察、黑根霉假根和孢囊孢子的观察，总状毛霉孢囊孢子的观察。 教学要求：
了解：酵母菌和霉菌的生殖方式；霉菌的主要种类。
理解：酵母菌、霉菌产生的各种无性孢子和有性孢子及在微生物分类鉴定中的作用。
2. 目的微生物的筛选分离。 3. 根据平板上菌落数对样品中微生物进行计数。 教学要求： 了解：微生物计数方法；微生物纯化方法。 理解：微生物菌落特征在微生物分类鉴定中的作用。 掌握：微生物分离纯化基本实验方法；细菌、放线菌、霉菌等菌落特征。 重点、难点： 重点：细菌、放线菌、霉菌等菌落特征；微生物分离纯化方法；目的菌株的筛选及获得。 难点：放线菌菌落特征及辨认。 其它教学环节： 讲解：对照各类微生物菌落，讲解各类微生物菌落特征要点。 实验七、各种生理生化用培养基的设计和配制 3 学时层次基础性 主要内容： 1. 配制微生物生理生化实验培养基。 2. 培养基的灭菌。 教学要求： 了解：常用的微生物生理生化培养基的种类和应用。 理解：微生物生理生化反应在微生物分类鉴定中的应用。 掌握：糖发酵培养基、V.P.反应、吲哚实验等生理生化培养基的配制方法。 重点、难点： 不同培养基具有不同的 pH 范围，配制各种培养基时要精确 pH 值，注意各试剂添加的先后顺序。 其它教学环节： 演示：糖发酵培养基中杜氏发酵罐的加入方法。 实验八、几种细菌生理生化测定 3 学时层次基础性 主要内容： 1. 无菌操作接种：在已经灭菌的各种培养基中分别接入相应的微生物菌种。 2. 培养：将接种后的培养基在一定温度下进行培养。
of Microbiology
微生物学实验
Experiment
【课程编号】（必备项）
【课程类别】学科基础课
【学分数】1.5
【适用专业】生物学、生物技术
【学时数】48
【编写日期】2009.06.19
一、教学目标
主要介绍微生物学实验的基本原理和实验方法，内容涉及微生物形态结构观察、生理生化实验、遗传与免疫实验、基于 16S rDNA 序列分析的系统发育学分析等。使学生了解微生物学的研究进展和发展方向，获得和掌握微生物学的基本研究方法和实验技术。 培养科学兴趣，培养分析问题、解决实际问题及自主创新的能力，使学生达到综合性大学全日制本科毕业水平，为将来成为国家 需要的创新型人才奠定基础。