猪繁殖与呼吸综合征病毒-
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4、流行病学特点 高度接触性传染病,呈地方流行性。
持续性感染是PRRSV流行病学的重要特征 。 * PRRSV可在感染猪体内存在很长时间。 *猪感染病毒后2~14周均可通过接触将病毒 传播给其它易感猪。
六、PRRSV的实验室诊断
该病毒确切诊断需依赖实验室诊断技术,包括病毒 分离鉴定、血清学诊断和分子生物学诊断技术。 (一)病毒分离鉴定 病毒分离鉴定是诊断PRRSV最确切的方法 1、病料 首选材料:肺、扁桃体、脾、淋巴结和血清。 适宜的检验材料:死产和流产胎儿的脾肺血清和胸水。 检出率最高:弱胎猪和有呼吸道症状的急性感染猪。
七、PRRSV的防治
(1)坚持自繁自养的原则,建立稳定的种猪群,不轻 易引种。 (2)规模化猪场应彻底实现全进全出,至少要做到产 房和保育两个阶段的全进全出。 (3)建立健全规模化猪场的生物安全体系,定期对猪 舍和环境进行消毒,保持猪舍、饲养管理用具及环 境的清洁卫生。 (4)适当使用药物控制猪群的细菌性继发感染。 (5)定期对猪群中PRRSV的感染状况进行监测,以了 解该病在猪场的活动状况。
三、PRRSV的致病机理
心衰
病毒 巨噬细胞
免疫系统 严重损伤
肺衰
免疫功能 脾广泛坏死 淋巴结的严重破坏 广泛性的血管炎 其他组织的破坏
畜体
四、PRRSV的抵抗力
1、病毒的稳定性受pH和温度的影响比较大。 在pH﹤5或 pH﹥7的条件下,其感染力降低95%以 上。 病毒在-70℃可保存18个月,4℃保存1个月, 37℃ 48h,56℃ 45min完全失去感染力。 2、干燥可很快使病毒失活。 3、对有机溶剂十分敏感,经氯仿处理后,其感染性 可下降99.99%。 4、对常用的化学消毒剂的抵抗力不强。
GP5为糖蛋白,分子质量约25 000u。
GP5与M通过二硫键形成二聚体, 对病毒的感染力及中和作用至关 重要。 此外,还有4种次要囊膜蛋白 (GP2、GP3、GP4及E)及两种 大分子非结构蛋白(NSP)。
4、基因组大小为13000~15000nt。 5′端帽,约75%为RNA聚合酶基团。 3′端聚A尾,有编码病毒结构蛋白的基因。 有感染性。 5、表面有约5nm大小的突起,无血凝活性,不凝集哺乳动物 或禽类红细胞。
血液循环
其他器官 (单核巨噬细胞系统)
初级复制部位
病毒增殖的特点:
增殖的特点
即在亚中和抗体 水平存在的情况 下,在细胞上的 复制能力反而得 到增强。
有严格的宿主专一性 对巨噬细胞有专嗜性。
抗体依赖性 增强作用
2、病毒的变异
PRRSV分为两个型: (1)以Lelystad virus(LV株)为代表的欧洲型(简称A亚群)。 (2)以ATCC VR-2332毒株为代表的美洲型(简称B亚群)。 两者在抗原上有显著差异, 只有很少的交叉反应。 A亚群:广泛的基因组变异。 B亚群:呈较为保守性。 不同毒株之间在毒力和致病力上有明显的差异。 我国的PRRSV均属美洲型,迄今还没有发现欧洲型株,同 时我国的分离毒株也存在变异现象,现已发现有缺失变异毒 株的存在。
3、病毒鉴定的技术 (1)单克隆抗体或多克隆抗体免疫荧光抗体技术 (2)单层过氧化物酶试验 (3)RT-PCR技术 (4)电镜技术 (二)血清学诊断 采用血清学抗体检测技术是应用最为广泛的实验室诊 断方法。 目前有4种不同的方法用于检测血清中的 PRRSV抗 体,包括:
方法
优点
缺点
结果主观判定 结果主观判定 高背景 抗原变异会影响结果 敏感性低 耗时 抗原变异会影响结果
2、分离病毒的细胞
原代细胞:PAM。 传代细胞:CL2621、MAl04、 Marcl45等细胞系。 但就临诊分离率而言,PAM的敏感性要高于传代细胞。 注意: (1)一般来说日龄小的猪对病毒的敏感性更高些。 (2)首次传代有时可能无CPE,需盲传2~3代。 (3) 不同的毒株可能适应不同的细胞系。 有些毒株仅能在PAM或仅能在CL2621细胞中生长。 欧洲株在PAM上的复制速度更快、效率更高。 北美毒株在CL2621上更有利于分离。
一、PRRSV的形态特征
1、套式病毒目 动脉炎病毒科 动脉炎病毒属 2、基本形态及核酸 病毒粒子呈卵圆形,直 径50~65nm。 核衣壳直径30~35nm, 呈二十面体对称。 有囊膜。 单分子线状单股正链RNA 病毒。
3、病毒蛋白有核衣壳蛋白(N, 分子质量120000u)和两种主要囊 膜蛋白(M和GP5)。 M是非糖基化的嵌膜蛋白,分子质 量160000u 。
二、PRRSV的增殖与变异 1、病毒的增殖
病毒增殖的细胞:
猪的单核细胞巨噬细胞系统内增殖
在宿主细胞浆的空泡膜及 滑面内质网小池膜上“出 芽”,成熟的病毒粒子多 蓄积在空泡腔内。
猪肺泡 巨噬细胞
外周 单核细胞
肺间质 巨噬细胞
最为敏感 病毒增殖数量与其适应宿主细胞程度有密切关系。
病毒增殖的过程:
wenku.baidu.com
鼻黏膜或 上呼吸道系统 (巨噬细胞)
(6)对发病猪场要严密封锁,对发病猪场周围的 猪场也要采取一定的防范措施,避免疫源扩 散。 (7)关于免疫接种,目前尚无十分有效的免疫防 制措施。
五、PRRSV的流行病学
1、易感动物 PRRSV只感染猪。 各种品种、不同年龄和用途的猪均可感染, 但以妊娠母猪和1月龄以内的仔猪最易感。 2、传染源 患病猪和带毒猪是本病的重要传染源。
4、传播途径 PRRSV主要传播途径是接触感染、空气传播,也可通过 胎盘垂直传播。
易感猪可经以下几种途径而感染病毒: 经口、鼻腔、肌肉、腹腔、静脉及子宫内接种。 与带毒猪直接接触。 与污染有PRRSV的运输工具、器械接触。 感染猪的流动也是本病的重要传播方式。
猪繁殖与呼吸综合征病毒
(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)能引起猪 的一种高度传染性疾病,又称“猪蓝耳病”。 症状: 妊娠母猪的繁殖障碍(流产、死胎、木乃伊胎)。 各种年龄猪特别是仔猪的呼吸道疾病 。
间接免疫荧光抗 体试验 (IFA)
特异性高 早期诊断 抗原变异会影响结果
免疫过氧化物酶 特异性高 敏感性高 单层试验(IPMA) 早期诊断 血清中和试验
( SN )
可检测期长
酶联免疫吸附试 验 ( ELISA )
自动化操作 高品质 高背景 控制
(三)分子生物学诊断技术 1、RT-PCR 2、巢式PCR 3、原位PCR 4、RT-PCR-RFLP 5、核酸探针技术 直接检测病料组织中的病毒。