南京大学实验报告-果蝇唾液腺染色体的制片与观察实验报告

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果蝇唾液腺染色体的制片与观察

一、实验目的

1、练习果蝇唾液腺的分离方法

2、掌握唾液腺染色体的制片技术

3、观察了解果蝇唾液腺染色体的形态特征

二、实验原理

1、双翅目昆虫(果蝇)幼虫期的唾液腺细胞很大,其中的染色体称唾液腺染色体,相

当于一般普通染色体的100-150倍,又称巨大染色体。

2、在幼虫发育过程中,唾液腺染色体仍进行复制,但细胞只生长不分裂,从而产生多

线染色体。多线染色体经染色后,出现深浅不一、宽窄不同的横纹,这些横纹的数

目和位置是恒定的,代表着果蝇等昆虫的种的特征。如果染色体缺失、重复、倒位、

易位等结构变异时,很容易在唾腺染色体上识别出来。

3、多线染色体的特征:a 巨大;b体细胞配对,所以染色体只有半数(n=4);c 各染

色体的异染色质多份额着丝粒部分相互靠拢形成染色中心;d 横纹有深浅、疏密的

不同,各自相应排列,这意味着基因的排列。

三、实验材料和用品

实验材料:黑腹果蝇的三龄幼虫

实验用品:显微镜、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、滤纸。生理盐水、1%醋酸洋红。

四、实验步骤

1、载玻片置于显微镜下,上面滴加一滴生理盐水,放上果蝇幼虫(有一钝尾和带黑色口

器的尖头,可根据其在盐水中爬行方向确定头部),两手各拿一枚解剖针,左手解剖针按住幼虫的后端1/3, 右手解剖针按住头部(尽量靠近口器)用力后拉,把头部从身体拉

出,唾液腺随之而出。(一对双叉形透明的囊状腺体)。

2、除去幼虫其他组织部分,把唾液腺周围脂肪组织(不透明)剥离干净,然后将多余生

理盐水吸走,滴一滴醋酸洋红在载玻片上。

3、染色10 分钟,盖上盖玻片,用滤纸轻压一下吸去多余的染色液,然后平放在桌子上,

用大拇指适当均匀用力压住,并横向揉几次(勿使盖玻片移动,用力和揉动是一个方向,不能来回揉!)。

4、显微镜观察,先在低倍镜下观察,找到分散好的染色体图像,再高倍镜观察。

用显微镜可以看到四对染色体,第一对染色体(X-)组成一个长条,第二和第三对各自组成了具有左右两臂的染色体对,它们都以中部的着丝区聚集,而第四对染色体很小,分布在着丝区呈点状或盘状。这样,从压好的较为模式的片子中便可看到五条弯曲展开的染色体臂(X-、ⅡL、ⅡR、ⅢL、ⅢR),和一个点状的第四染色体对,它们在着丝区构成染色中心并向四周伸开。

五、实验结果

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