实验三阿司匹林肠溶片的含量测定

实验三阿司匹林肠溶片的含量测定
一、目的
1、掌握两步滴定法测定阿司匹林含量的原理和方法。

2、掌握剩余滴定法的一般方法和计算。

二、实验内容
（一）阿司匹林肠溶片的含量测定
取本品10片，研细，用中性乙醇70ml，分数次研磨，并移入100ml量瓶中，充分振摇，再用水适量洗涤研钵数次，洗液合并于量瓶中，再用水稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取滤液10ml（相当于阿司匹林0.3g），置锥形瓶中，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml，酚酞指示液3滴，滴加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）至溶液显粉红色，再精密加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）40ml，置水浴上加热15分钟，并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液（0.05mol/L）滴定，并将滴定结果用空白试验校正。

每1ml的氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）相当于18.02mg的C9H8O4。

本品含阿司匹林应为标示量的95.0~105.0%。

（二）硫酸滴定液（0.05mol/L）的标定
取在270~300℃干燥至恒重的基准无水碳酸钠约0.15g，精密称定，加水50ml使溶解，加甲基红-溴甲酚绿混合指示液10滴，用本液滴至溶液由绿色转变为紫红色时，煮沸2分钟，冷却至室温，继续滴定至溶液由绿色变为暗紫色。

每1ml的硫酸滴定液（0.05mol/L）相当于5.30mg的无水碳酸钠。

根据本液的消耗量及无水碳酸钠的取用量，算出本液的浓度，即得。

三、说明
1、为消除阿司匹林的水解产物水杨酸、醋酸及稳定剂枸椽酸、酒石酸对测定的影响，中国药典采用两步滴定法测定本品的含量。

2、中性乙醇的制备方法为：取乙醇，加酚酞指示液适量，滴加氢氧化钠液至显粉红色，即得。

3、过滤供试液，是为了滤除不溶解的附加剂，以免对测定造成影响。

为了保证过滤前后供试液的浓度相等，应用干燥滤纸过滤，并弃去初滤液，取续滤液备用。

4、标定硫酸滴定液时，由于在近终点，滴定溶液中存在缓冲对H2CO3和
3 HCO，可使
终点不敏锐，所以需加热煮沸2分钟，除去其中的H2CO3，再迅速放冷至室温，继续滴定至终点。

四、思考题
1、试简述两步滴定法测定阿司匹林含量的基本原理。

2、测定阿司匹林含量时为什么要做空白试验？应如何做空白试验？
3、为什么要用中性乙醇溶解样品？如何制备中性乙醇？
4、如何理解“取基准无水碳酸钠约0.15g，精密称定”这句话？
实验一氯化钠的杂质检查
一、目的
1、了解药物中杂质检查的意义。

2、掌握氯化钠中杂质检查的原理和方法。

3、掌握杂质限量的计算方法
二、实验内容
（一）标准溶液的配制
1、标准氯化钠溶液的制备
称取氯化钠0.165g，置1000ml量瓶中，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。

临用前，精密量取贮备液10ml置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml μ的Cl）。

相当于10g
2、标准硫酸钾溶液的制备
称取硫酸钾0.181g，置1000ml量瓶中，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml相当于100gμ的-24
SO）。

3、标准铁溶液的制备
称取硫酸铁铵[FeNH4(SO4)2·12H2O]0.863g，置1000ml量瓶中，加水溶解后，加硫酸2.5ml，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。

临用前，精密量取贮备液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml相当于10gμ的Fe3+）。

4、标准铅溶液的制备
称取硝酸铅0.160g，置1000ml量瓶中，加硝酸5ml与水50ml溶解后，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。

临用前精密量取贮备液10ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml μ的Pb2+）。

相当于10g
配制与贮存用的玻璃容器均不得含有铅。

5、标准砷溶液的制备匀，即得（每1ml相当于1gμ的As3+）。

（二）检查方法
1、酸碱度
取本品5.0g，加水50ml溶解后，加溴麝香草酚蓝指示液2滴，如显黄色，加氢氧化钠液（0.02mol/L）0.10ml，应变为蓝色；如显蓝色或绿色，加盐酸液（0.02mol/L）0.2ml，应
2、溶液的澄清度
取本品5.0g，加水25ml溶解后，溶液应澄清。

3、碘化物
取本品的细粉5.0g，置瓷蒸发皿内，滴加新配制的淀粉混合液[取可溶性淀粉0.25g，加水2ml，搅匀，再加沸水至25ml，随加随搅拌，放冷，加硫酸液（0.025mol/L）2ml，亚硝酸钠试液3滴与水25ml，混匀]适量使晶粉湿润，置日光下（或日光灯下）观察，5分钟内晶粒不得显蓝色痕迹。

4、溴化物
取本品2.0g，加水10ml使溶解，加盐酸3滴与氯仿1ml，边振摇边滴加2%氯胺T溶液（临用新制）3滴，氯仿层如显色，与标准溴化钾溶液（精密称取在105℃干燥至恒重的溴化钾0.1485g，加水使溶解成100ml，摇匀）1.0ml用同一方法制成的对照液比较，不得更深。

5、硫酸盐
取本品5.0g，加水溶解成约40ml（溶解如显碱性，可滴加盐酸使成中性），溶液如不澄清，应滤过，置50ml纳氏比色管中，加稀盐酸2ml，摇匀，即得供试溶液。

另取标准硫酸钾溶液1.0ml置50ml纳氏比色管中，加水使成约40ml，加稀盐酸2ml，摇匀，即得对照溶液。

于供试溶液与对照溶液中，分别加入25%氯化钡溶液5ml，用水稀释使成50ml，充分摇匀，放置10分钟，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察，比较，供试品管不得更浓（0.002%）。

6、钡盐
取本品4.0g，加水20ml，溶解后，滤过，滤液分为两等份，1份中加稀硫酸2ml，另一份中加水2ml，静置15分钟，两液应同样澄清。

7、钙盐
取本品2.0g，加水10ml使溶解，加氨试液1ml，摇匀，加草酸铵试液1ml，5分钟内不得发生浑浊。

8、镁盐
取本品1.0g，加水20ml使溶解，加氢氧化钠试液2.5ml与0.05%太坦黄溶液0.5ml，摇匀，产生的颜色与标准镁溶液（精密称取在800℃炽灼至恒重的氧化镁16.58mg，加盐称取三氧化二砷0.132g，置1000ml量瓶中，加20%氢氧化钠溶液5ml溶解后，用适量的稀硫酸中和，再加稀硫酸10ml，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。

临用前，精密量取贮备液1ml，置100ml量瓶中，加稀硫酸1ml，用水稀释至刻度，摇酸2.5ml与水适量使溶解成1000ml，摇匀）1.0ml，用同一方法制成的对照液比较，不得更深。

（0.001%）。

9、钾盐
取本品5.0g，加水20ml溶解后，加稀醋酸2滴，加四苯硼钠溶液（取四苯硼钠1.5g，置乳钵中，加水10ml研磨后，再加水40ml，研匀，用质密的滤纸滤过，即得）2ml，加水使成50ml，如显浑浊，与标准硫酸钾溶液12.3ml用同一方法制成的对照液比较，不得更浓
10、干燥失重
取供试品，混合均匀（如为较大的结晶，应先迅速捣碎，使成2mm以下的小粒）。

分取约1g，平铺在130℃干燥至恒重的扁形称瓶中，厚度不超过5mm，精密称定。

将瓶盖取下，置称瓶旁，或将瓶盖半开，置烘箱内于130℃干燥约2~3小时后，将称瓶盖好，取出，置干燥器中放置40分钟后，称定重量。

再按上述方法自“将瓶盖取下……”起，继续干燥1~2小时，依法操作，至恒重为止。

从减失重量和取样量计算供试品的干燥失重（规定不得超过0.5%）。

11、铁盐
取本品5.0g，加水溶解成25ml，置50ml纳氏比色管中，加稀盐酸4ml与过硫酸铵50mg，用水稀释成35ml后，加30%硫氰酸铵溶液3ml ,再加水适量稀释成50ml，摇匀。

如显色，立即与标准铁溶液1.5ml用同一方法制成的对照液比较，不得更深（0.0003%）。

12、重金属
取本品5.0g，加水20ml溶解后，置25ml纳氏比色管中，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml 与水适量使成25ml,加硫代乙酰胺试液2ml，摇匀，放置2分钟，置白纸上，自上向下透视。

如显色，立即与标准铅溶液1.0ml用同一方法制成的对照液比较，不得更深（0.0002%）。

13、砷盐
仪器装置，如图。

A为100ml标准磨口锥形瓶，B为中空的标准磨口塞，上连导气管C （外径8.0mm，内径6.0mm），全长约180mm。

D为具孔的有机玻璃旋塞，其上部为圆形平面，中央有一圆孔，孔径与导气管C的内径一致，其下部孔径与导气管C的外径相适应。

将导气管C的顶端导入旋塞下部孔内，并使管壁与旋塞的圆孔适相吻合，粘合固定，E为中央具有圆孔（孔径6.0mm）的有机玻璃旋塞盖，与D紧密吻合。

测试时，于导气管C中装入醋酸铅棉花60mg（装管高度约60~80mm），再于旋塞D的顶端平面上放一片溴化汞试纸（试纸大小以能覆盖孔径而不露出平面外为宜），盖上旋塞E 并旋紧，即得。

标准砷斑的制备：精密量取标准砷溶液2ml，置A瓶中，加盐酸5ml与水21ml，再加碘化钾试液5ml与酸性氯化亚锡试液5滴，在室温放置10分钟后，加锌粒2g，立即照上法装妥的导气管C密塞于A瓶上，并将A瓶置25~40℃水浴中，反应45分钟后，取出溴化汞试纸，即得。

检查法，取本品5.0g，置A瓶中，加水23ml溶解后，
加盐酸5ml，照标准砷斑的制备，自“加碘化钾试液5ml”
起，依法操作，将生成的砷斑与标准砷斑比较，不得更深
（0.00004%）。

三、说明
1、药物杂质检查必须严格遵守平行原则。

平行原则是
指样品与标准必须在同一条件下进行反应与比较。

即应选择
容积、口径和色泽相同的比色管，在同一光源、同一衬底上，
以相同的方式（一般是自上而下）观察，加入的试药种类、量，加入顺序和反应时间等也应一致。

2、杂质限量是指药物中杂质的最大允许量。

其计算公式为：
%100⨯=供试品量
杂质最大允许量杂质限量 3、药物的杂质检查一般为限量检查，合格者仅说明其杂质量在药品质量标准允许范围内，并不说明药品中不含该项杂质。

四、思考题
1、药物中杂质检查的意义是什么？
2、药物中杂质的来源主要有哪些？什么是一般杂质？什么是特殊杂质？
3、药物中杂质检查应严格遵循什么原则？为什么？
4、试计算出氯化钠中溴化物、硫酸盐、镁盐、钾盐、铁盐、重金属和砷盐的限量。

5、取某一药物0.5g 进行重金属检查，药典规定限量为10ppm ，应取多少ml 标准铅溶液？
6、药典规定某一药物砷盐限量为4ppm ，取标准砷溶液2ml 作对照，问应取供试品多少克
实验三 阿司匹林肠溶片的含量测定
一、目的
1、掌握两步滴定法测定阿司匹林含量的原理和方法。

2、掌握剩余滴定法的一般方法和计算。

二、实验内容
（一）阿司匹林肠溶片的含量测定
取本品10片，研细，用中性乙醇70ml ，分数次研磨，并移入100ml 量瓶中，充分振摇，再用水适量洗涤研钵数次，洗液合并于量瓶中，再用水稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取滤液10ml （相当于阿司匹林0.3g ），置锥形瓶中，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml ，酚酞指示液3滴，滴加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L ）至溶液显粉红色，再精密加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L ）40ml ，置水浴上加热15分钟，并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液（0.05mol/L ）滴定，并将滴定结果用空白试验校正。

每1ml 的氢氧化钠滴定液（0.1mol/L ）相当于18.02mg 的C 9H 8O 4。

本品含阿司匹林应为标示量的95.0~105.0%。

（二）硫酸滴定液（0.05mol/L ）的标定
取在270~300℃干燥至恒重的基准无水碳酸钠约0.15g ，精密称定，加水50ml 使溶解，加甲基红-溴甲酚绿混合指示液10滴，用本液滴至溶液由绿色转变为紫红色时，煮沸2分钟，冷却至室温，继续滴定至溶液由绿色变为暗紫色。

每1ml 的硫酸滴定液（0.05mol/L ）相当于5.30mg 的无水碳酸钠。

根据本液的消耗量及无水碳酸钠的取用量，算出本液的浓度，即得。

三、说明
1、为消除阿司匹林的水解产物水杨酸、醋酸及稳定剂枸椽酸、酒石酸对测定的影响，中国药典采用两步滴定法测定本品的含量。

2、中性乙醇的制备方法为：取乙醇，加酚酞指示液适量，滴加氢氧化钠液至显粉红色，即得。

3、过滤供试液，是为了滤除不溶解的附加剂，以免对测定造成影响。

为了保证过滤前后供试液的浓度相等，应用干燥滤纸过滤，并弃去初滤液，取续滤液备用。

4、标定硫酸滴定液时，由于在近终点，滴定溶液中存在缓冲对H2CO3和
-
3 HCO，可使
终点不敏锐，所以需加热煮沸2分钟，除去其中的H2CO3，再迅速放冷至室温，继续滴定至终点。

四、思考题
1、试简述两步滴定法测定阿司匹林含量的基本原理。

2、测定阿司匹林含量时为什么要做空白试验？应如何做空白试验？
3、为什么要用中性乙醇溶解样品？如何制备中性乙醇？
4、如何理解“取基准无水碳酸钠约0.15g，精密称定”这句话？
实验四复方磺胺甲恶唑片的含量测定
一、目的
1、掌握复方制剂的分析特点及赋形剂的干扰与排除方法。

2、掌握双波长分光光度法测定复方磺胺甲口恶唑片中磺胺甲口恶唑与甲氧苄啶含量的原理与方法。

二、实验内容
1、供试品溶液的制备
取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于磺胺甲口恶唑50mg与甲氧苄啶10mg），置于100ml量瓶中，加乙醇适量，振摇15分钟磺胺甲口恶唑与甲氧苄啶溶解，加乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

2、对照品溶液的制备
精密称取在105℃干燥至恒重的磺胺甲口恶唑对照品50mg与甲氧苄啶对照品10mg，分置100ml量瓶中，各加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，分别作为对照品溶液（1）与对照品溶液（2）。

3、磺胺甲口恶唑的测定
精密量取供试品溶液与对照品溶液（1）、（2）各2ml，分置100ml量瓶中，各加0.4%氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀。

取对照品溶液（2）的稀释液，以257nm为测定波长（λ2），在304nm波长附近（每间隔0.5nm）选择等吸收点波长为参比波长（λ1），要求∆A=Aλ2
－A λ1=0。

再在λ2与λ1波长处分别测定供试品溶液的稀释液与对照品溶液（1）的稀释液的吸收度，求出各自的吸收度差值（∆A ）计算，即得。

4、甲氧苄啶的测定
精密量取上述供试品溶液与对照品溶液（1）（2）各5ml ，分置100ml 量瓶中，各加盐酸-氯化钾溶液[取盐酸液（0.1mol/L ）75ml 与氯化钾6.9g ，加水至1000ml]摇匀稀释至刻度，摇匀。

取对照品溶液（1）的稀释液，以239.0nm 为测定波长（λ2），在295nm 波长附近（每间隔0.2nm ）选择等级吸收点波为参比波长（λ1），要求∆A=A λ2－A λ1=0。

再在λ2与λ1波长处分别测定供试品溶液的稀释液与对照品溶液（2）的稀释液的吸收度，求出各自的吸收度差值（∆A ），计算，即得。

本品每片中含磺胺甲口恶 唑（C 10H 11N 3O 3S ）应为0.360~0.440g ，含甲氧苄啶（C 14H 12N 4O 3）应为72.0~88.0mg 。

（三）说明
1、 磺胺甲口恶 唑与甲氧苄啶的结构分别为： CH 3
N O
SO 2NH
H N 2 磺胺甲口恶唑 (SMZ) CH 2N
N NH 2NH 2O CH 3O CH 3O OCH 3
甲氧苄啶 (TMP)
SMZ 与TMP 的紫外吸收图谱分别为：
波长：nm 波长：nm 图1 SMZ的紫外吸收图谱
1 TMP(2.0
ml
/g
μ
)；2 SMZ(10.0
ml
/g
μ
)；
3 SMZ+TMP；
4 辅料
图2 TMP的紫外吸收图谱
1 TMP(2.0
ml
/g
μ
)；2 SMZ(10.0
ml
/g
μ
)；3SMZ+TMP； 4 辅料
2、复方磺胺甲口恶唑片的处方为：
磺胺甲口恶唑400g
甲氧苄啶80g 制成1000片
3、本实验采用双波长分光光度法测定SMZ和TMP的含量。

由于干扰组分在测定波长和参比波长处吸收度相等，可在计算∆A时消去，所以应用本法可以不经分离，直接测定复方制剂中SMZ和TMP的含量。

4、本品在中国药典（1985年版）中的名称为复方磺胺甲基异口恶唑片，其含量测定方法为：磺胺甲基异口恶唑以重氮化法测定；甲氧苄啶以氯仿提取后，用紫外分光光法测定。

5、此实验的原理可参考：胡育筑，等。

南京药学院学报，1982，（1）：29-35。

四、思考题
1、试简述双波长分光光度法的原理。

2、试比较中国药典（1985年版）与中国药典（2000年版）中本品含量测定方法的优缺点。

3、试查阅本品的其它分析方法，从中了解复方制剂分析的特点及发展趋势。