人教版选修三2.2动物细胞融合(共25张PPT)

6. 选择所需要的杂交瘤克隆细胞群，体外培养或注射到 小鼠腹腔内增殖。
7. 提取单克隆抗体。
网络直播课——动物细胞工程
单克隆抗体的应用
1、作为诊断试剂： 具有准确、高效、简易、快速特点.
2、用于治疗疾病和运载药物： 主要用于癌症治疗。 生物导弹：抗癌细胞的单克隆抗体+放射性同
位素+化学药物或细胞毒素。（单克隆抗体：导 向。准确找到癌细胞位置，原位杀死癌细胞。）
仙台病毒
物理/化学 方法
丧失感染能力 保留融合活性
网络直播课——动物细胞工程
动物细胞融合过程
不同DNA的两个细胞
灭活病毒诱导细胞融合
融合后的细胞（杂交细胞） 进行有丝分裂
（动物细胞培养技术）
网络直播课——动物细胞工程
结果、意义和应用
结果：产生杂交细胞，即具有原来两个或多个细 胞遗传信息的单核细胞。
2月21日用
动物细胞融合
课前准备
选修三课本P52 导学案 6
植物细胞 A（番茄） 植物细胞 B（马铃薯）
知植 识物 回体 顾细
胞
杂
交
过
程
去除细胞壁
原生质体 A
原生质体 B
原生质体融合
再生出细胞壁
正在融合的原生质体 杂种细胞
脱分化 愈伤组织
再分化
杂种植网络株直(播番课—茄—动-物马细铃胞工薯程 )
知识回顾
网络直播课——动物细胞工程
• 下节课讲评练案6
• 预习课本P53-P57,找出以下问题的答案：
1、传统获得抗体的方法是_____？局限性？（回顾体液 免疫） 2、单克隆抗体制备过程中，至少经过几次筛选？其目 的分别是什么？ 3、杂交瘤细胞的特点是_____，单克隆抗体的优点是__?
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设计方案：
一个浆细胞只分泌 一种特异性抗体
+ 骨髓瘤细胞能无限增 殖
单
克 隆
动物细胞培养技术
杂交瘤细胞
动物细胞融合技术
抗 体
既能产生特异性抗体， 又能大量繁殖的细胞
解读课文P54
网络直播课——动物细胞工程
网络直播课——动物细胞工程
下面是某同学根据单克隆抗体技术的方法，设计的 生产破伤风杆菌抗体的实验方案。指出不足之处。
2月24日用
单克隆抗体的制备
课前准备
选修三课本P52-54 导学案 7
你找到了吗？
1、传统获得抗体的方法是_____？局限 性？（回顾体液免疫）
2、单克隆抗体制备过程中，至少经过几 次筛选？其目的分别是什么？
3、杂交瘤细胞的特点是_____，单克隆 抗体的优点是__?
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每一个浆细胞
• 人们获得抗只特能体异产性的生抗传一体种统方法是什么体特多内异达?产性百生抗万的体种
抗原 刺激 动物体内 浆细胞 抗体 血清
筛选单一浆细胞并克隆
不能无限增殖产生大量抗体
• 这种方法的缺点是什么?
产量低、纯度低，制备的抗体特异性差。
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如何获得化学性质单一、特异性强的抗体？
意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂 交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可 能。 用途：成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生 物新品种培育等的重要手段。特别是利用杂交瘤 技术制造单克隆抗体。
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ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
处理方法 诱导手段
结果
原理
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• 重读课本52页，背一下 • 填写导学案6“知识梳理” • 与植物体细胞杂交技术进行列表对比
• 背诵本节主要内容（非常重要） • 完成练案7
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单抗的制备过程要点：
1. 动物特异性免疫
2. 分离浆细胞（B）；找到骨髓瘤细胞（G）。
3. 细胞融合——三种融合方式:（BB;BG;GG）
4. 第一次筛选：在“选择培养基培养”上培养筛选杂交 瘤细胞（只有BG杂交瘤细胞存活）。
5. 第二次筛选：对已经选择性培养的杂交瘤细胞进行 “克隆化培养”，并进行“专一抗体检测”，“检测 阳性”的即是所需要的杂交瘤细胞。
1、植物体细胞杂交时首先应用什么方法去掉细胞壁？ 酶解法，纤维素酶和果胶酶。
2、植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用方法有哪些？ 物理方法：离心、振动、电激； 化学方法：聚乙二醇（？）
3、如何诱导动物细胞融合，需要进行去壁处理吗？ 无需，因为动物细胞无细胞壁。
4、植物体细胞杂交技术的原理是什么？
网络直播课——动物细胞工程
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已免疫的 注射 B淋巴细胞 抗原
骨髓瘤 细胞
诱导融合
单
动
杂交细胞等
克
物
筛选一
隆
细
杂交瘤细胞
抗
胞
筛选二
既能迅速大量繁殖
体 的
融 合
分泌特异抗体 又能产生专一抗体 的杂交瘤细胞
制 备
动
体外或
物
体内培养
细
杂交瘤细胞群 特异性强
胞 培 养
提取
灵敏度高 可大量制备
单克隆抗体
自习任务
人鼠细胞杂交融合实验→动物细胞融合
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利用3分钟阅读课本P52，并重点解决 有关动物细胞融合的以下问题：
1、概念 2、原理 3、过程 4、诱导融合的方法 5、结果、意义和应用 6、思考与植物体细胞杂交技术有哪些 异同之处？
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动物细胞融合的概念和原理
已注入过灭活破伤风 杆菌的小鼠
B淋巴细胞
第一步：从一只小鼠体内提取T淋巴细胞，然后与骨
髓瘤细胞诱导融合。 选择性培养基
第二步：再用普通培养基进行筛选，在该培养基上， 未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死 去。 必须经过克隆化培养和专一抗体检验阳性
第三步：对上述经选择性培养的杂交瘤细胞直接在 体外条件下做大规模培养，这样从细胞培养液中就可 以提出破伤风杆菌单克隆抗体。
又称为细胞杂交。 指两个或多个动物细胞 结合形成一个细胞的过 程。 杂交细胞：融合后形成 的具有原来两个或多个 细胞遗传信息的单核细 胞，称为杂交细胞。 原理？
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诱导的方法
物理法： 电激、振动、离心
化学法： 聚乙二醇（PEG）
生物法： 灭活的病毒 如：仙台病毒
为什么要用灭活的病毒？（旁栏资料卡）