正交法优化远志皂苷的提取工艺研究

第31期2021年11月No.31November ，2021
正交法优化远志皂苷的提取工艺研究
孙云朋，韩凤波
（吉林农业科技学院中药学院，吉林吉林132109）
摘要：文章采用乙醇回流提取法提取远志总皂苷，香草醛-冰醋酸显色法测定总皂苷含量，通过单因素
试验及正交试验，优选出最佳提取工艺为：20倍量70%乙醇70℃下提取1h ，此条件下总皂苷提取率可达1.900%。

本法可有效提高总皂苷得率，为进一步开发和利用提供参考。

关键词：远志总皂苷；单因素试验；正交法中图分类号：G258.6文献标志码：A
江苏科技信息
Jiangsu Science &Technology Information
基金项目：吉林农业科技学院青年基金项目；项目名称：东北远志多糖的分离纯化及其对小鼠学习记忆力的影响；项目编号：吉农院合字第〔20200006〕号。

作者简介：孙云朋（1994—），女，吉林长春人，助教，硕士；研究方向：中药质量分析与控制。

0引言
远志为远志科植物远志（Polygala tenuifolia
Willd.）或卵叶远志（Polygala sibirica L.）的干燥根，具有安神益智、交通心肾、聪耳明目等作用［1］，最早在
《神农本草经》记录，被列为上品，目前已鉴定出三萜类皂苷、口山酮、寡糖酯和生物碱类等化学成分［2］。

研
究表明，远志皂苷具有抗衰老及提高免疫功能作用、对脂多糖诱发的神经细胞炎症损伤有保护作用［3］、对癫痫模型大鼠海马LTP 有抑制作用［4］，并可改善阿尔兹海默症小鼠的学习记忆能力［5］。

1
实验材料与设备
远志购自吉林市吉林东市商贸经济示范区益康泰大药房；远志皂苷元标准品购自中国食品药品检定研究所；752型紫外可见分光光度计为上海奥普勒仪器有限公司产品；精密数显恒温水浴锅为上海皓庄仪器有限公司产品。

2实验方法2.1
药材预处理
将干燥的远志粉碎，过40目（0.425mm ）筛，取粗
粉，以1∶4（g/mL ）料液比加入石油醚，在70℃水浴上加热4h ，静置过夜，过滤，滤渣中加入适量石油醚充分洗涤，过滤，将药渣中的石油醚除去，药渣干燥待用［6］。

2.2
总皂苷含量测定
精确称定远志皂苷元标准品，以甲醇溶液溶解，
制备0.7mg/mL 的远志皂苷元标准溶液待用。

精密吸取10μL ，20μL ，30μL ，40μL ，50μL ，60μL 的标准品溶液分别置于10mL 具塞试管中。

于60℃水浴锅中加热挥发甲醇，分别加入刚配制的5%香兰素-冰醋酸0.2mL 、高氯酸0.8mL ，摇匀，密塞置于60℃水浴中15min ，冰水冷却5min ，加入5mL 冰醋酸稀释，摇匀，
静置15min ，在568nm 波长下测吸光度［7］，绘制标准曲线，得出远志皂苷元浓度与吸光度的线性方程为y =16.363x -0.0604，相关系数R 2=0.9984。

2.3
单因素试验
称取10g 脱脂后的远志粗粉，加入70%乙醇200mL ，60℃水浴加热回流提取1.5h ，挥干试剂后加入适量甲醇，使残渣全部溶解，过滤，定容，即得供试品溶液。

分别选择料液比、乙醇的质量分数、提取温度、提
取时间进行单因素考察。

以95%乙醇60℃恒温水浴提取远志1h ，考察料液比1∶10，1∶15，1∶20，1∶25，1∶30时的提取率。

结果显示，料液比由1∶10到1∶20时提取率逐渐升高，1∶20时达到最高，此后则逐渐下降，结果见图1（a ）。

以料液比1∶20，95%乙醇回流提取1h ，考察温度
60℃，65℃，70℃，75℃，80℃时的提取率。

结果显示，提取温度由60℃升至65℃时提取率明显提高，
65℃时达到最大，此后则开始下降，结果见图1（b ）。

以料液比1∶20，95%乙醇60℃恒温水浴，考察提
取时间0.5，1，1.5，2，2.5时的提取率。

结果显示，提取时间在1.5h 以内，远志总皂苷提取率逐渐增加，此后基本持平，结果见图1（c ）。

以料液比1∶20，60℃恒温水浴，提取0.5h ，考察乙醇质量分数60%，65%，70%，75%，80%时的提取率。

结果显示，提取率在乙醇质量分数低于70%时逐渐增高，达到70%以上时则开始下降，结果见图1（d ）。

2.4
正交试验
采用L 9（34
）
正交试验，以远志总皂苷提取率为考察指标，进行直观分析，试验设计如表1所示［8］。

结果显示，因素A 中k 2＞k 1＞k 3，因素B 中k 3＞k 2＞k 1，因
素C 中k 1＞k 2＞k 3，因素D 中k 3＞k 1＞k 2，R 值为C ＞A ＞D ＞B ，即各因素影响顺序为提取时间＞料液比＞乙醇质量分数＞提取温度，最佳提取组合为
A 2
B 3
C 1
D 3，结果如表2所示。

2.5
正交验证试验
称取远志10g ，对优选出的提取工艺进行3次平行实验，同法测定总皂苷提取率，结果分别为1.854%，1.877%，1.911%，平均提取率为1.881%。

3
结语
通过对远志总皂苷各提取因素的系统研究，确定最佳提取条件为：用20倍量的70%乙醇，70℃恒温水浴中回流提取1h ，此条件下远志总皂苷的提取率可达1.881%。

本法克服了收率低、耗时长、成本高等缺点，溶剂用量少，
效率高。

图1单因素试验结果
表1正交试验因素水平
水平123
因素
料液比（A ）/倍
152025
提取温度（B ）/℃
606570
提取时间（C ）/h
1.01.5
2.0
乙醇质量分数（D ）/%
606570
参考文献
［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典（四部2020年版）［M］.北京：中国医药科技出版社，2020.
［2］刘超，马海英.传统中药远志研究概述［J］.河北农业科学，2014（5）：75-81.
［3］皮婷，梁月琴，欧雯励蓉，等.远志皂苷元对脂多糖诱发神经细胞炎症损伤的保护作用［J］.中国比较医学杂志，2020（11）：52-58.
［4］景玮，马彪，李艳，等.远志总皂苷对癫痫模型大鼠学习记忆及海马LTP的影响［J］.中西医结合心脑血管病杂志，2017（20）：2540-2542.［5］陈庆林，陈勤，金蓓蓓.远志皂苷对AD小鼠学习记忆能力及中枢胆碱能系统标志酶活性的影响［J］.中药药理与临床，2011（3）：33-36.
［6］梁戈亮.远志总皂苷的超声提取工艺及动力学研究［D］.西安：陕西师范大学，2008.
［7］韦贵云，李芳，黄程，等.比色法测定巴西人参中齐墩果酸型皂苷含量［J］.中国药业，2019（7）：23-25.［8］赵华，李会鹏，廖克俭.正交试验法优选微波提取远志皂苷的工艺［J］.化学工业与工程，2011（6）：35-38.
（编辑傅金睿）
表2正交试验结果
序号1 2 3 4 5 6 7 8 9 k1 k2 k3 R
因素
料液比（A）/倍
1
1
1
2
2
2
3
3
3
1.575
1.600
1.422
0.178
提取温度（B）/℃
1
2
3
1
2
3
1
2
3
1.521
1.523
1.553
0.038
提取时间（C）/min
1
2
3
2
3
1
3
1
2
1.731
1.563
1.303
0.428
乙醇质量分数（D）/%
1
2
3
3
1
2
2
3
1
1.498
1.465
1.634
0.169
考察指标
提取率/%
1.728
1.528
1.468
1.721
1.327
1.751
1.115
1.713
1.439
Research on the extraction technology of Polygala tenuifolia total saponins
by orthogonal design
Sun Yunpeng,Han Fengbo
（College of Traditional Chinese Medicine,Jilin University of Agricultural Science and Technology,Jilin132109,China）Abstract:Polygala tenuifolia total saponins were extracted by ethanol reflux extraction method,and the content of total saponins was determined by vanillin-glacial acetic acid chromogenic method.Through single factor test and orthogonal test,the optimum extraction process was obtained as follows:extracting20times70%ethanol at70℃for1hour. Under this condition,the extraction rate of total saponins was1.900%.The method can effectively improve the yield of total saponins and provide reference for further development and utilization.
Key words:Polygala tenuifolia total saponins;single factor test;orthogonal method。