荧光法原理

荧光法原理
一、引言
荧光法是一种广泛应用于生命科学、化学和物理学等领域的分析方法，它基于物质在受到激发后发出荧光的原理，通过测量荧光强度来确定
样品中所含物质的浓度或性质。

本文将详细介绍荧光法的原理及其应用。

二、荧光现象
1. 荧光定义
当某些物质受到能量激发后，会发生从低能级到高能级的跃迁，并随
即从高能级向低能级跃迁时放出辐射，这种辐射称为荧光。

与磷光不同，荧光是在吸收外部能量后立即放出的辐射。

2. 荧光特性
荧光具有以下特性：
（1）波长长：通常波长范围在200-700 nm之间；
（2）持续时间短：持续时间通常在10-9秒至10-6秒之间；
（3）强度低：通常比吸收强度低几个数量级；
（4）受环境影响大：如溶剂极性、温度、pH值等。

三、激发和发射
1. 激发
荧光分析中，样品通常通过吸收紫外线、可见光或其他形式的电磁辐射来激发。

当吸收的能量与物质的电子跃迁到高能级时，就会激发荧光现象。

2. 发射
激发后，物质在返回基态时会放出辐射，即荧光。

荧光具有一定的波长范围和强度，可以通过荧光仪来测量。

四、荧光仪测量
1. 荧光仪构造
荧光仪由以下部分组成：
（1）激发源：产生激发波长的灯或激光器；
（2）样品室：容纳待测样品；
（3）检测器：检测样品放出的荧光；
（4）滤波器：挑选特定波长的荧光信号。

2. 测量原理
荧光信号经过滤波器后被检测器检测到，并转换为电信号。

然后经过放大和处理后输出到计算机或记录装置上。

根据不同实验要求可以选择不同的滤波器和检测器。

五、应用领域
1. 生命科学
荧光法在生命科学中应用广泛，如荧光定量PCR、荧光原位杂交、蛋
白质分离和检测等。

2. 化学分析
荧光法在化学分析中应用较多，如气相色谱、液相色谱、毒素检测等。

3. 材料科学
荧光法在材料科学中也有应用，如纳米材料的表征等。

六、总结
荧光法是一种灵敏度高、选择性好的分析方法。

它广泛应用于生命科学、化学和物理学等领域。

通过测量样品放出的荧光信号，可以确定
样品中所含物质的浓度或性质。