安捷伦1260操作规程全新

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安捷伦1260型高效液相色谱仪详细操作规程

安捷伦1260型高效液相色谱仪详细操作规程1.目的：规范Agilent 1260高效液相色谱仪维修、保养、校正操作。

2.适用范围：本公司化验室Agilent 1260高效液相色谱仪的维修、保养。

3.有关责任：化验室精密仪器室4.引用标准：仪器说明书及Agilent化学工作者现场操作培训教材5.规程内容：5.1开机前准备5.1.1根据实验要求配制流动相，须经0.45μm滤膜过滤，之后再进行脱气处理，使用前必须用超声波振荡l0-15min，按无机相和有机相分开别装入溶剂瓶A（装有洗盐装置，最好固定盛放无机盐水相）、B中；对照品和样品溶液进样前要经0.45μm滤膜过滤。

5.1.2若流动相中含有缓冲盐,则必须以每分钟2～3滴的速度虹吸10%的异丙醇水冲洗seal-wash，以防有盐结晶在泵头产生而损坏泵头。

5.2.采样前准备5.2.1打开计算机,进入Windows 系统, 从上到下依次打开各模块电源。

5.2.2待各模块自检完成后，双击桌面上的“仪器1联机”图标，将自动进入化学工作站画面。

5.2.3从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面,也可单击工作站画面左侧的“方法和运行控制”项，进入方法和运行控制窗口。

5.2.4打开Purge阀（逆时针），右击“泵”图标出现参数设定菜单单击“设定泵”选项进入泵编辑画面。

5.2.5设“流量”逐步增大流速至5ml/min ，A通道设到100%，单击“确定”。

5.2.6单击“泵”图标，出现参数设定菜单，单击“泵控制“选项选中“开”单击“确定”则系统开始Purge，直到管路内由溶剂瓶A到泵入口无气泡为止；切换B通道(B通道设到100%)继续Purge直到所有通道管路内均无气泡为止。

(查看柱前压力，若大于10Bar，则应更换排气阀内滤芯/过滤白头。

)5.2.7将泵的流量设到0.5ml/min，若使用双泵则应设定溶剂配比，如A=80%，B=20%；关闭排气阀（顺时针）；再将流量设到0.8ml/min，2分钟后设定至方法所需流速，冲洗色谱柱20-30min。

安捷伦1260全自动高效液相操作规程

安捷伦1260全自动高效液相操作规程
1.样品的准备：最好使用流动相溶解样品；进样前样品需过滤膜，除去悬浮不溶杂质。

2.流动相的选择和处理：使用高纯度试剂，所有含盐或含水溶剂必须膜过滤，100%色谱纯有机试剂，滤膜过滤后方可使用；流动相现配现用，剩余的流动相（水相）及时清理，实验间隔>2天，建议倒掉；任何溶剂，如果有可见悬浮物、菌丝，不可使用；更换流动相之前，必须事先阅读色谱柱的说明书；除非有说明，反相柱不得使用100%水。

3.开机注意事项：先开HPLC仪器开关、脱气机、泵和紫外检测电源；等各电源开启后（30s），打开在线软件；冲柱子和平衡时，暂不开紫外灯；平衡完后，打开紫外灯，设置梯度和波长或引用方法。

4.实验结束：C18反相柱应用色谱甲醇保存，不能含任何酸、盐；用甲醇替换通道，四个过滤头均存放于有机溶剂瓶中，以防长菌；流速调零，再关闭软件，最后依次关闭脱气机、泵和紫外检测器的电源。

Agilent1260液相色谱系统操作规程

Agilent 1260液相色谱系统标准操作及维护保养规程1目的规范 Agilent 1260系列高效液相色谱的日常使用和维护保养，保证仪器的正常运转，确保检测工作的顺利进行。

2适用范围适用于 Agilent 1260 系列高效液相色谱系统的日常使用和维护。

3职责实验室分析人员负责Agilent 1260系列高效液相色谱系统的日常使用和维护。

4系统组成4.1 Agilent 1260系列四元泵(G1311C)和脱气机；4.2 可变波长紫外检测器（ VWD G1314F）；4.3 Chemstation A.01.04色谱工作站4.4 国产柱温箱（ AT-550）色谱柱；4.5 电脑、打印机等辅助设备。

5定义无6操作程序6.1 开机前的准备6.1.1 检查仪器校验标识，确认仪器处于校验周期内。

6.1.2 检查上次《实验室仪器设备使用记录表》和仪器状态，确认仪器处于正常状态；6.1.3 流动相的制备：6.1.3.1 按《高效液相色谱法流动相配制标准操作规程》配制需要的流动相。

6.1.3.2 用前超声脱气（一般 10～ 20min）。

6.1.4 更换流动相：6.1.4.1将泵的吸滤器从旧流动相中取出，用新流动相冲洗后放入新流动相的储液瓶中，并盖好瓶盖；6.1.4.2将排液管的出口端放入废液瓶中，并盖好瓶盖。

6.1.5 供试溶液的配制：Agilent 1260液相色谱系统标准操作及维护保养规程6.1.5.1供试品用规定溶剂配制成供试品溶液。

6.1.5.2定量测定时，对照品溶液和供试品溶液均应分别配制 2 份。

6.1.5.2如有必要，样品需预处理，如过滤等，以免对色谱系统产生污染和色谱干扰。

6.1.6 选择色谱柱：6.1.6.1根据待检供试品的检测方法确定所需的色谱柱；6.1.6.2检查仪器上安装的色谱柱是否与其相同，若不同则需进行更换。

6.1.7 更换色谱柱6.1.7.1拆卸原色谱柱：先握住色谱柱，再松动色谱柱出口端螺帽，取下出口端的管线；松动色谱柱入口端螺帽，取下入口端的管线；用止动塞将色谱柱的进出口塞住拧紧后，将色谱柱放回原专用包装盒内。

安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程

安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程一、仪器介绍二、前期准备1.打开仪器电源，待仪器自检完成后，确保所有指示灯都亮起。

2.检查溶剂瓶的液位，确保足够的溶剂供给。

3.清洁好色谱柱并连接到系统中。

三、仪器启动1.打开色谱软件，选择相应的方法。

2.点击“系统”菜单，选择“启动系统”命令，系统开始进行初始化。

3.在系统初始化完成后，点击“准备”菜单，选择“准备系统”命令，系统开始进行一系列的自动化准备工作，比如冲洗和平衡柱子。

4.检查系统的压力和温度，确保在正常范围。

四、样品进样1.准备好待测样品和标准品。

2.将样品装入进样瓶中，注意不要超过瓶口。

3.将进样瓶插入样品进样系统中，按照方法设置的条件进行进样。

4.点击软件界面上的“进样”按钮，开始进样。

五、色谱柱选择1.根据待测样品的性质和分离特点，选择合适的色谱柱。

2.将色谱柱连接到色谱仪系统中。

3.检查色谱柱的压力和温度，确保在正常范围。

六、色谱条件设置根据分析方法的要求，设置好色谱条件，包括流量、温度、柱温等参数。

七、检测器设置1.根据需要选择合适的检测器，比如紫外检测器、荧光检测器等。

2.设置检测器的工作参数，如波长、增益、基线噪声等。

八、开始分析1.在样品进样后，点击软件界面上的“开始”按钮，开始进行色谱分析。

2.监控检测器输出的信号，根据需要可以对信号进行放大或调整。

九、结果解析1.根据所用方法的要求，对分析结果进行解析。

2.可以通过软件导出结果并进行后续处理。

十、仪器关机1.关闭色谱仪软件。

2.关闭色谱柱进样系统。

3.关闭色谱仪电源。

此为安捷伦1260高效液相色谱仪的操作规程，希望能对使用者提供一定的参考和帮助。

在操作过程中，应严格按照安全操作规范进行，并及时进行维护和保养，以保证仪器的正常运行。

安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程资料

安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程一、开机（1）打开计算机，登陆windows操作系统。

（2）打开主机各模块电源（从上至下），待各模块完成自检后，再双击桌面“仪器1联机”图标，进入化学工作站，从视图菜单中选择“方法和运行控制”画面。

（3）进行仪器配置，点仪器-仪器配置-选择所需模块-自动配置-输入IP地址：192.168.254.11。

把各流动相放入相应的溶剂瓶中。

（4）编辑方法。

方法-新建方法-方法-编辑完整方法-编辑各项（四元泵、TCC、VWD、仪器曲线参数设定，仪器参数默认），完成后，文件→方法另存为→编辑名称，保存方法。

（5）排气。

旋开排气阀（逆时针），右单击“四元泵”图标出现快捷键，点击“方法”设置泵流速，排气可设置1.2ml/min，l流量梯度100，也可5ml/min，流量梯度10。

一般冲洗3-5min，注意倾斜储液瓶使过滤头处的气体进入管道才可使气体排出，观察管路中气体位置，以其排净为目的。

关泵，关闭排气阀（顺时针）。

（注意：先开排气阀，再开泵，先关泵，后关排气阀）。

（6）在让液体进入柱子之前应将甁填充设置为实际值，谨防空进。

将泵流速设置1ml/min,用过渡液即缓冲液冲洗色谱柱20—30分钟。

（7）换流动相，待柱前压力基本稳定后，打开检测器，视图，在线信号，选择信号，观察基线情况。

二、数据采集信息编辑及进样（1）编辑样品信息：点“单次样品”小瓶，或点击运行信息-单次进样，设定操作者姓名，样品数据文件名，进样量等。

（2）编辑好样品信息后方可进样。

三、数据处理（1）打开桌面“仪器1脱机”，单击“数据分析”进入数据分析画面。

（2）从“文件”菜单中选择调用信号，选择您的数据文件名，单击确定。

（3）谱图优化。

从“图形”菜单中选择“信号选项”从范围中选择“自动量程”及合适的显示时间，或选择“自定义量程”调整，反复进行，直到图比例合适为止。

（4）积分。

从“积分”中选择“自动积分”，若积分结果不理想，从菜单中选“积分事件”，更改数据为合适的“斜率灵敏度、峰宽、最小峰面积、最小峰高”，从“积分”中选择积分选项，则数据被积分，如积分结果不理想则修改相应的积分参数直到满意为止。

安捷伦1260操作规程

安捷伦1260LC操作规程一开机1)打开计算机，登陆windows操作系统。

2)打开主机各模块电源（从上至下），待各模块完成自检后，再双击桌面“仪器1联机”图标，进入化学工作站，从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面。

3)把各流动相放入溶剂瓶中。

4)旋开排气阀（逆时针旋开半圈左右），右键单击“四元泵”图标出现快捷键，点击“方法”选项进入泵编辑画面。

将泵流量设到5ml/min，溶剂A设到100%，打开泵，排出管线中的气体2~3min，直到管线内由溶剂瓶到泵入口无气泡为止，查看柱前压力（若大于10bar，则应更换排气阀内过滤白头）。

5)依此切换到B、C、D溶剂分别排气。

6)将泵的流量设到0.5ml/min，多元泵则再设定溶剂配比，如A=80%，B=20%；关闭排气阀（顺时针）。

7)再将泵的流量设到0.8ml/min，2分钟后将泵的流量设到1ml/min，冲洗色谱柱20~30min。

8)把缓冲液换成流动相，待柱前压力基本稳定后，打开检测器灯，观察基线情况。

二数据采集方法编辑1)编辑样品信息：现在“视图”菜单下“首选项”中添加路径，然后由“运行控制”进入“样品信息”，设定操作者姓名、样品数据文件名、样品数据保存路径等。

2)编辑完整方法：从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项。

单击“确定”入下一画面“方法注释”，后单击“确定”进入下一画面“选择进样源”，选中Als单击“确定”下一画面“设臵方法”进行参数设定。

3)四元泵参数设定：在“流速”处输入流量，如1ml/min；在“溶剂”处根据各自的流动相比例填写即可(A=100-B-C-D)；设臵泵的“停止时间”（即样品的出峰时间）在“压力限值”处输入柱子的最大耐高压以保护柱子，如：250bar。

4)TCC检测器参数设定：在“温度”左侧下面的方框内输入所需温度，并选中它，右侧选中“与左侧相同”使柱温箱的温度左右一致。

5)DAD检测器参数设定：在“波长”下方的空白处输入样品所需的检测波长，如254nm，在“峰宽(响应时间)”下方点击下拉式三角框，选择合适的响应时间，如>0.1min(2s)。

安捷伦1260操作规程

安捷伦1260操作规程安捷伦（Agilent）1260操作规程一、仪器概述安捷伦1260高效液相色谱仪是一种用于液相色谱分析的仪器，具有高灵敏度、高分辨率和高效率的特点。

该仪器由进样器、色谱柱、色谱泵、检测器等组成。

二、仪器准备1. 确保仪器的电源已连接并接通。

2. 检查进样器、色谱柱和检测器是否安装正确。

3. 检查液相色谱仪的液相系统是否已进行适当的液相填充，以及是否有足够的溶剂。

三、方法设置1. 打开色谱软件，并选择合适的方法模板。

2. 根据分析需求，在方法设置中输入样品信息、进样量、流速等参数。

3. 设置检测器的波长、增益和测量范围。

四、进样操作1. 打开进样器的盖子，将待测样品加入样品瓶中。

2. 点击软件中的进样按钮，设置样品名称和进样量。

3. 将样品瓶放入进样器，并关闭盖子。

4. 点击软件中的进样按钮，开始进样。

5. 进样完成后，从进样器中取出样品瓶，并将它放入垃圾桶中。

五、色谱柱操作1. 打开色谱柱的阀门，并将柱端与色谱柱连接。

2. 检查色谱柱是否没有泄漏，如果有泄漏，则需重新连接。

3. 检查色谱柱的温度，确保它处于合适的温度范围内。

六、液相泵操作1. 打开液相泵的电源，并连接到电脑上。

2. 设置合适的流速和梯度梯度。

3. 点击软件中的启动按钮，开始进行分析。

七、数据分析1. 使用色谱软件进行数据采集和分析。

2. 根据需要选择适当的数据处理方法，如峰面积计算、定量分析等。

3. 导出分析结果并保存。

八、仪器维护1. 分析结束后，关闭液相泵、进样器、色谱柱和检测器等设备的电源。

2. 清洗色谱柱和进样器，保持其清洁。

3. 定期检查仪器的连接线和电源线是否有松动或损坏。

九、安全操作1. 在操作仪器时，注意安全，避免接触到有害化学品。

2. 在操作过程中，严禁随意触摸仪器或移动连接线。

3. 在操作过程中，如遇到异常情况，请及时停止分析并向管理员报告。

通过以上操作规程，可以有效地使用安捷伦1260高效液相色谱仪进行样品分析。

安捷伦1260型HPLC使用操作

安捷伦1260型HPLC使用操作1.准备工作-打开高效液相色谱仪电源，并确保与计算机的连接稳定。

-打开色谱柱箱的前盖，并检查柱箱是否安装了所需的柱。

-检查并确认进样器和检测器的所有连接口均已连接到系统中。

-打开色谱仪控制软件，并确保与色谱仪的连接正常。

2.样品准备和进样-准备样品溶液，并使用过滤器将其过滤以去除悬浮物。

-选择适当的进样方式，可以是自动进样器、手动进样或在线进样。

-根据进样方式的不同，设置进样器参数，并将样品注入进样器。

-设置进样体积和进样流速。

3.设定色谱柱和流动相条件-选择合适的色谱柱，根据分析需要选择固定相材料和尺寸。

-设置所需的流动相条件，包括流动相组成、流速和梯度程序等。

-确保流动相的pH值适合分离物质的性质。

4.开始运行HPLC实验-在色谱仪软件中设置分析方法，包括运行时间、梯度程序和检测波长等参数。

-点击运行按钮，开始HPLC分析实验。

-监控进样、分离和检测过程，并保持对系统的稳定控制。

5.数据分析和结果解读-实时监测实验过程中的色谱图和峰形。

-根据标准品或已知样品进行定量分析，并计算所需的峰面积和浓度。

-使用色谱仪软件进行数据分析，并生成报告和结果图表。

-解读分析结果，如峰形和保留时间，确定分离物质的纯度和结构。

6.实验后处理-关闭色谱仪电源。

-清洗色谱柱和进样器，以及其他与样品接触的部件。

-将废液正确处理，并清理实验台面。

-存储和整理实验数据和结果文件，以备后续分析和参考之用。

以上是安捷伦1260型HPLC使用操作的基本步骤，根据具体的实验需求和样品特性，可能需要进行一些调整和优化。

熟悉和掌握这些操作步骤，可以提高实验的效率和结果的准确性。

安捷伦1260型HPLC使用操作

安捷伦1260型HPLC使用操作安捷伦1260型高效液相色谱仪（HPLC）是一种目前广泛应用于科研实验室和分析化验室的仪器，用于分离、鉴定和定量化学物质，尤其在药物研究、食品安全和环境监测等领域有着重要的应用价值。

下面将介绍如何使用安捷伦1260型HPLC进行操作。

1.准备工作-确保HPLC仪器和相关附件的电源已正常连接，并打开电源开关。

-检查溶剂瓶中的溶剂是否充足，并确保应用的溶剂完全溶解。

-测量并记录样品的重量或体积，并准备相应的样品溶液。

-在毛细管芯上安装合适的毛细管，确保毛细管没有损坏。

2.打开安捷伦1260型HPLC软件-打开计算机并登录HPLC软件。

-确保计算机与HPLC仪器连接正常，并与仪器建立通信。

-在软件界面上选择打开一个新的分析方法。

3.设置分析方法-在打开的分析方法中，设置适当的柱温、流速、柱压和波长等参数。

-根据样品的性质，选择合适的检测波长，以获得最佳的检测结果。

-设定进样器的进样体积和方法运行时间等参数，以获得期望的分析效果。

4.进样样品-使用自动进样器或手动进样器将待测样品进入HPLC系统中。

-设置进样器的洗涤方法，以确保不同样品的交叉污染风险降至最低。

-如果使用了自动进样器，将样品盘或样品架连接到进样器上，并设置自动进样的参数。

5.启动HPLC分析-在软件界面上，点击启动按钮，开始运行分析方法。

-监控仪器运行情况，确保流速、柱压等参数稳定在设定范围内。

-观察检测结果的峰形和峰高，并记录峰面积或峰高数据以便后续分析。

6.数据处理与结果分析-使用HPLC软件进行数据处理，可以进行峰识别、峰面积计算和浓度计算等操作。

-将结果数据导出并进行统计分析，如绘制色谱图、拟合曲线和计算浓度等。

-分析结果的可靠性和准确性需要通过质控样品或标准品进行验证。

7.仪器维护和清洁-定期对HPLC仪器进行维护，包括更换毛细管、清洗进样器和柱子，并检查其他配件的磨损情况。

-使用合适的溶剂进行清洗，以去除可能留在系统中的残留物。

安捷伦1260液相操作规程

安捷伦1260液相操作规程一开机1 打开计算机，登录windows操作系统。

2 打开主机各模块电源（从上至下），待各模块完成自检后，双击桌面“仪器1联机”图标，进入化学工作站，出现进样器，泵，检测器，柱温箱四个图标。

若没有出现，从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”选项。

二排气1 把各流动相放入溶剂瓶中2 旋开排气阀（逆时针），右单击“四元泵”图标出现快捷键，点击“方法”选项进入泵编辑画面。

将泵流速设到5ml/min，溶剂瓶A设到100％，开泵，排出管线的气体3分钟，柱压＜10bar。

3 依次切换到B,C,D溶剂瓶排气，待排气结束，关泵。

4 将泵的流速设到1.0ml/min，将多元泵设置成做样时的溶剂配比，关闭排气阀（顺时针）。

5 开泵，待柱压稳定后，基线平衡后方可进样。

三设置方法和调用方法1 设置进样量，在“进样器”的模块中，点击鼠标右键，在“方法”中，设定进样量。

在进样模式中输入进样量。

“标准进针”——只能输入进样体积。

“针清洗后进样”——可以输入进样体积和洗瓶位置。

2 在“检测器”模块中，点击鼠标右键，点击“控制”，打开检测器的灯，点击“确认”。

3 在“检测器”模块中，点击鼠标右键，点击“方法”，一般选择“与泵，进样器一致”。

4 紫外检测器参数设定：在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长。

5 以上模块设置好后，从“方法”菜单中，选中“方法另存为”，输入方法名，点击“确认”。

6 从“方法”菜单中，选择“调用方法”，单击确认。

四设置序列和调用序列1 从“序列”菜单中，选中“序列参数”，选择数据文件路径和输入子目录名称，这样数据会自动保存在指定的文件夹中，方便查找。

2 从“序列”菜单中，选中“序列表”，在样品盘中依次放置好样品，命名样品的名称和批号，选择“方法”，点击“确认”。

3 从“序列”菜单中，选中“调用序列表”，把序列表改好后，点击保存当前序列模板。

点击“文件”，另存为序列模板。

4 点击“进样器”图标上的“序列”或者点击序列表中的“运行”，仪器进样。

安捷伦1260高效液相操作规程

安捷伦液相 1260 高效液相色谱操作规程1.前期工作查找资料（最好是外文文献）了解别人做该样品时常用的流动相和固定相。

如果还不清晰样品是什么物质，最起码也应该对其极性进行了解，为选择合适的流动相和固定相打好基础。

流动相选择注意事项：① 避免使用高粘度的溶剂作为流动相；② 所选用的流动相一定要与样品相溶；③ 各流动相之间可以很好的相溶；固定相选择注意事项：a. 正相色谱正相色谱用的固定相通常为硅胶（Silica）以及其他具有极性官能团胺基团，如（NH2，APS）和氰基团（CN，CPS）的键合相填料。

由于硅胶表面的硅羟基（SiOH）或者其他极性基团极性较强，因此，分离的次序是依据样品中各组分的极性大小，即极性较弱的组份最先被冲洗出色谱柱。

正相色谱使用的流动相极性相对照固定相低，如正已烷（Hexane），氯仿（Chloroform），二氯甲烷（Methylene Chloride）等。

b. 反向色谱反向色谱用的填料常是以硅胶为基质，表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。

反向色谱所使用的流动相极性较强，通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。

样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分最先被冲洗出，而极性弱的组分会在色谱柱上有更强的保留。

常用的反向填料有：C18（ODS）、C8（MOS）、C4（Butyl）、C6H5（Phenyl）等。

2.准备工作① 用于液相色谱分析的样品溶液使用前要经过0.15µm 过滤器过滤，必须达到均匀而无颗粒的状态；② 流动相一定要选用色谱级别的（最好是默克、飞世尔、时联等牌子的），并且在使用之前一定要使用0.4µm 过滤器过滤，再用超声波清洗仪脱气处理20-30min；③ 在连接柱子和色谱仪之前，阀件或者管路一定要清洗干净，（一般用异丙醇将管路清洗）3.仪器操作（一）将所选择的流动相加入相应的试剂瓶中：棕色瓶对应A 泵，该瓶中只能加双蒸水或者娃哈哈纯净水；B、C、D 泵根据需要添加。

安捷伦1260液相色谱仪操作流程及注意事项

安捷伦1260液相色谱仪操作流程及注意事项1、配制流动相，水相置于棕色玻璃瓶中，有机相置于相应无色玻璃瓶中。

水相和有机相必须过滤，滤膜选用0.45有机系滤膜（尼龙）。

注意：过夜的流动相必须重新过滤。

2、流动相过滤后，置超声仪中超声20min。

3、将已超声的流动相轻轻换上，动作不要太剧烈，会产生气泡，注意不要把有机相和水相换反了（A是有机相，B是水相）。

4、将色谱柱接上，注意：流动相的流动方向必须和色谱柱上的箭头方向一致。

5、打开计算机电源、显示器开关，并输入密码。

6、依次从上往下打开液相色谱仪上的所有开关。

7、打开液相色谱在线工作站（online），输入密码。

8、打开的液相工作站上分为四个小部分，依次为进样器、泵、柱温箱及检测器。

在第二个部分设置流动相的体积及溶剂瓶的总体积。

9、脱气：旋开purge阀开关，右击泵部分，选择“method”，选择B相100%，流速1ml/min，选择确定；右击泵部分，选择“control”，选择pump“on”，10秒后，调节流速为3ml/min，10秒后，调节流速5ml/min，开始水相脱气3min，水相脱气结束后，将流速按照5ml/min-3ml/min-1ml/min的流程往下调。

然后开始有机相脱气，步骤同上，注意流速不可一下子从1ml/min调到5ml/min，需慢慢调节。

流动相脱气结束后，旋紧purge阀开关。

10、建立样品的色谱方法：设置进样体积，选择洗针进样，注明洗针位置；设置流动相比例、流速及梯度洗脱条件，序列进样时设置样品运行时间和后运行时间；打开柱温箱，设置柱温；打开紫外检测灯，设置检测波长。

全部设置好后，保存方法，不要覆盖别人的方法。

11、谱图保存路径的设置：View—preferences—data path（第二个选项）—remove旧的文件夹，add自己的文件夹。

再打开Sequence—Sequence parameter—选择Data path为自己的文件夹即可。

安捷伦1260型高效液相色谱仪操作规程

安捷伦1260型高效液相色谱仪操作规程开机1.1 打开计算机，输入用户名和密码，进入Windows XP画面。

1.2 打开1260 LC 各模块电源(不分先后)。

待各模块自检完成后，双击“仪器2联机”图标，化学工作站自动与1260 LC通讯，进入工作站。

（注意：在“仪器2脱机”关闭的情况下，“仪器2联机”方能打开。

）1.3 从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面，来调用所需的界面，正常情况会默认进入此界面。

1.4 确保对应溶剂瓶装入所要使用的流动相，左击“四元泵”模块下的“溶剂瓶”图标或右击“四元泵”下选择“瓶填充”，输入溶剂的实际体积和瓶总体积，可输入停泵的体积。

单击“确定”。

（注意：此操作很重要，以免气泡进入系统）。

1.5 轻轻旋开泵上的冲洗阀（缓缓旋开约1/4即可，不可用力太过）。

右击“四元泵”图标，出现参数设定菜单，单击“方法”选项，进入泵编辑画面。

设流量6ml/min，溶剂A设到100%；单击“确定”。

右击“四元泵”图标，选择“控制”选项，选中“打开”，单击“确定”，则系统开始排气，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止；切换到通道同法继续排气，直到所有要用通道无气泡为止（只需排所用到的通道即可）。

1.6 右击“四元泵”图标，出现参数设定菜单，单击“方法”选项，进入泵编辑画面。

设流量为：0ml/min，单击“确定”，轻轻关闭排气阀（旋紧即可）。

2. 数据采集方法、系列编辑：2.1 编辑完整方法：2.1.1. 从“方法”菜单中选择“编辑完整方法” 项，选中除“数据分析”外的三项，单击“确定”，进入下一界面“方法注释”。

2.1.2. 方法信息：在“方法注释”中写入方法的相关信息。

此项可忽略不写，单击“确定”，进入下一界面“选择进样源/位置”。

2.1.3. 自动进样器参数设定:选择“Als”的进样方式，单击“确定”，进入下一界面“设置方法”。

2.1.4. 方法参数设定：在“设置方法”界面选择“四元泵”选项，在“流量”处输入所需流量，如：1ml/min，在溶剂“B”、“C”、“D”处输入流动相所占比例(A=100-B-C-D)，也可在右侧“时间表”项下选择“添加”，编辑梯度。

Agilent1260液相色谱仪器操作规程(新)

Agilent1260液相色谱仪器操作规程一.生产厂家：美国Agilent二.到货日期：2011年1月三.附件：电脑、打印机四.使用范围：用于三聚氰胺，维生素A、D、E,β-胡萝卜素，牛磺酸，山梨酸、苯甲酸，乳糖、蔗糖等的检测五.工作环境：温度15℃~30℃，湿度20%~80%六.操作步骤:1.开机前准备：1.1.打开仪器室的空调。

1.2.配制流动相（按国标）,准备好蒸馏水、乙腈和甲醇。

2.开机：2.1.打开1260液相色谱仪器的进样器、泵、柱温箱和检测器的电源。

2.2.打开计算机。

2.3.打开“仪器1联机”图标，各模块完成自检。

2.4.点击“打开”图标，进入化学工作站。

3.设置运行模块和方法3.1.进样器（自动进样器）3.1.1.设置进样量，在“进样器”的模块中，点击鼠标右键，在“方法”中，按照国标，检测不同物质，设定不同的进样量。

反相：最大进样量编制：审核：批准：为100ul，抽取速度一般设定200ul/min。

正相：最大进样量为500ul，抽取速度一般设定200~500ul/min。

3.1.2.设置进样器停止时间，在“进样器”的模块中，点击鼠标右键，在“方法”中，如标样的出峰时间为7分钟，停止时间可以设置为8分钟以上。

3.2.泵（四元泵或单泵）3.2.1.泵的流速：在“泵”的模块中，点击鼠标右键，点击“方法”，按照国标要求，如设置1.00ml/min。

3.2.2.如果是四元泵，可选择溶剂瓶，输入需要使用的各溶液的比例，如B蒸馏水90%，C乙腈10%，点击“确认”。

3.2.3.在“泵”的模块中点击鼠标右键，点击“控制”，选择“泵”（打开），确认。

3.2.4. 设置泵停止时间：在“泵”的模块中，点击鼠标右键，点击“方法”，一般选择“与进样器一致/无限制”。

3.2.5. 压力限值：最小值一般设0bar，最大值一般设100bar。

3.3.柱温箱3.3.1.设置柱温箱的温度：在“柱温箱”模块中，点击鼠标右键，点击“方法”，左边按照国标要求可设置，比如35度，一般右边设置同左边。

安捷伦1260高效液相操作规程

安捷伦液相1260高效液相色谱操作规程前期工作查找资料（最好是外文文献）了解别人做该样品时常用的流动相和固定相。

如果还不清楚样品是什么物质，最起码也应该对其极性进行了解，为选择合适的流动相和固定相打好基础。

流动相选择注意事项：避免使用高粘度的溶剂作为流动相；所选用的流动相一定要与样品相溶；各流动相之间可以很好的相溶；固定相选择注意事项：正相色谱正相色谱用的固定相通常为硅胶（Silica）以及其他具有极性官能团胺基团，如（NH2，APS）和氰基团（CN，CPS）的键合相填料。

由于硅胶表面的硅羟基（SiOH）或其他极性基团极性较强，因此，分离的次序是依据样品中各组分的极性大小，即极性较弱的组份最先被冲洗出色谱柱。

正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低，如正已烷（Hexane），氯仿（Chloroform），二氯甲烷（Methylene Chloride）等。

反向色谱反向色谱用的填料常是以硅胶为基质，表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。

反向色谱所使用的流动相极性较强，通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。

样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分最先被冲洗出，而极性弱的组分会在色谱柱上有更强的保留。

常用的反向填料有：C18（ODS）、C8（MOS）、C4（Butyl）、C6H5（Phenyl）等。

准备工作用于液相色谱分析的样品溶液使用前要经过µm过滤器过滤，必须达到均匀而无颗粒的状态；流动相一定要选用色谱级别的（最好是默克、飞世尔、时联等牌子的），并且在使用之前一定要使用µm过滤器过滤，再用超声波清洗仪脱气处理20-30min；在连接柱子和色谱仪之前，阀件或管路一定要清洗干净，（一般用异丙醇将管路清洗）仪器操作将所选择的流动相加入相应的试剂瓶中：棕色瓶对应A泵，该瓶中只能加双蒸水或娃哈哈纯净水；B、C、D泵根据需要添加。

注：若流动相中有水、乙腈最好现用现处理，不宜放置太长时间。

先打开计算机登陆windows操作系统，再将仪器的泵、色谱柱、检测器打开，待计算机界面显示连接好后，双击桌面“联机”图标，进入化学工作站，从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面。

安捷伦1260操作规程

安捷伦液相操作规程一开机1)打开计算机，登陆windows操作系统。

2)打开主机各模块电源（从上至下），待各模块完成自检后，再双击桌面“仪器1联机”图标,进入化学工作站，从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面。

3)把各流动相放入溶剂瓶中。

4)旋开排气阀（逆时针），右单击“四元泵”图标出现快捷键，点击“方法”选项进入泵编辑画面。

将泵流量设到5ml/min，溶剂A设到100%，打开泵，排出管线中的气体2—3分钟，直到管线内由溶剂瓶到泵入口无气泡为止,查看柱前压力（若大于10bar，则应更换排气阀内过滤白头）。

5)依此切换到B、C、D溶剂分别排气。

6)将泵的流量设到0.5ml/min，多元泵则再设定溶剂配比，如A=80%，B=20%；关闭排气阀（顺时针）。

7)再将泵的流量设到0.8ml/min，2分钟后将泵的流量设到1ml/min，冲洗色谱柱20—30分钟。

8)把缓冲液换成流动相，待柱前压力基本稳定后,打开检测器灯，观察基线情况。

二数据采集方法编辑1)编辑样品信息：由“运行控制”进入“样品信息”，设定操作者姓名，样品数据文件名等。

2)编辑完整方法：从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项.选中项单击“确定”入下一画面“方法注释”，编辑好单击“确定”进入下一画面“选择进样源”，选中Als单击“确定”入下一画面“设置方法”进行参数设定。

3)四元泵参数设定：在“流速”处输入流量,如1ml/min,在“溶剂”处选中B输入80%(A=100-B-C-D)，在右面注释栏中标明各溶剂的名称；设置“停止时间”和“后运行时间”，在“压力限值”处输入柱子的最大耐高压以保护柱子如：250bar，在“时间表”添加编辑梯度。

4)进样器参数设定：在进样模式中输入进样量xxul。

“标准进针”——只能输入进样体积此方式无洗针功能。

“针清洗后进样”——可以输入进样体积和洗瓶位置为xx，此方式针从样品瓶抽完样品后会在洗瓶中洗针。

5)进样器进样程序参数设定：选中使用进样程序，在“函数”中添加相应函数即可按程序进样。

标准安捷伦1260液相色谱仪操作规程

安捷伦1260液相色谱仪操作规程一、仪器开机1、更换流动相（水需要超纯水，有机试剂需要色谱纯），其中水需要每次使用时更换，有机试剂长时间不用也需要更换2、开机：打开电脑、打开液相所有模块电源、点击电脑桌面上的工作站联机图标3、打开工作站上的所有电源，待其就绪（所有灯变绿）4、拧开排空阀，四元泵里设置流速5 ml/min，A 100%；3分钟后，设置B 100%；3分钟后设置流速至合适流速，关闭排空阀二、运行样品1、新建方法或调用已有方法2、设置方法参数四元泵：设置流速、流动相比例、采集时间，若需梯度则设置梯度，确定自动进样器（ALS）：设置进样量，确定柱温箱（TCC）：设置柱子温度，确定紫外检测器(VWD)：设置紫外波长，确定设置好后保存方法3、在线信号中点击“改变”，可添加泵的压力，以及VWD的信号4、等待系统平衡，所有灯变绿，泵的压力稳、VWD的信号稳定（约20分钟）5、进样：（1）单针进样：运行控制—样品信息，设置进样位置，保存路径等后运行方法（2）序列进样：序列—序列参数，编辑保存路径；序列—序列表，编辑序列表，然后运行序列6、待仪器自动停止分析（四元泵中已设置采集时间）或手动点击“停止”图标（四元泵中未设置采集时间）三、关机1、冲柱流动相中含缓冲盐：先用10%甲醇、90%水冲30分钟，再用90%甲醇、10%水冲30分钟（四元泵里设置比例）后关机流动相中不含缓冲盐：用90%甲醇、10%水冲30分钟（四元泵里设置比例）后关机2、关机关闭各模块，关闭仪器电源，关闭工作站，关闭电脑四、数据处理1、调用需要处理的信号2、自动积分，或者手动积分，删除不要的峰3、打印面积百分比结果，记录每个峰的峰面积、保留时间，在excel中用已知浓度（标准样品）的峰面积作工作曲线，得到工作曲线方程4、未知样品的峰面积来算得其浓度。

安捷伦1260操作规程

安捷伦1260液相操作规程一、开机1)打开计算机，登陆windows操作系统。

3)把各流动相放入溶剂瓶中。

4)旋开排气阀（逆时针），右单击“四元泵”图标出现快捷键，点击“方法”选项进入泵编辑画面。

将泵流量设到5ml/min，溶剂A 设到100%，打开泵，排出管线中的气体2—3分钟，直到管线内由溶剂瓶到泵入口无气泡为止,查看柱前压力（若大于10bar，则应更换排气阀内过滤白头）。

5)依此切换到B、C、D溶剂分别排气。

6)将泵的流量设到0.5ml/min，多元泵则再设定溶剂配比，如A=80%，B=20%；关闭排气阀（顺时针）。

7)再将泵的流量设到0.8ml/min，2分钟后将泵的流量设到1ml/min，冲洗色谱柱20—30分钟。

8)把缓冲液换成流动相，待柱前压力基本稳定后,打开检测器灯，观察基线情况。

二、数据采集方法编辑1)编辑样品信息：由“运行控制”进入“样品信息”，设定操作者姓名，样品数据文件名等。

4)进样器参数设定：在进样模式中输入进样量xxul。

“标准进针”——只能输入进样体积此方式无洗针功能。

“针清洗后进样”——可以输入进样体积和洗瓶位置为xx，此方式针从样品瓶抽完样品后会在洗瓶中洗针。

1260操作规范及注意事项

安捷伦液相操作规程及注意事项一、开机1.接通电源，打开计算机，进入windows操作系统；2.检查色谱柱（型号是否正确及进出口有无接反）；3.检查流动相（是否正确，溶剂是否够用）；4.打开主机各模块，待其完成自检后，双击桌面联机系统(online)，单击view，选择方法和运行控制画面；5.排气：逆时针旋转排气阀60-90°，右击“四元泵”图标出现快捷键，点击method选项进入泵编辑画面。

将泵流量设到5 mL/min，溶剂A设到100%，打开泵，排出管线中的气体2-3分钟，直到管线内由溶剂瓶到泵入口无气泡为止，查看柱前压力（若大于10 bar，则应更换排气阀内过滤白头）。

依次切换到B、C、D管道分别排气；6.将泵流量设为0.5 mL/min，设定溶剂配比，关闭排气阀。

随后将泵流量设为0.8 mL/min，2 min后设为1 mL/min，冲洗柱子20-30 min；7.待柱前压力基本稳定后，打开检测器灯，观察基线情况，待基线稳定后即可进样。

二、采集方法编辑1.编辑样品信息：由“运行控制”进入“样品信息”，设定操作者姓名，样品数据文件名及存储路径等；2.编辑方法信息：从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项。

选中项单击“确定”入下一画面“方法注释”，编辑好单击“确定”进入下一画面“选择进样源”，选中Als单击“确定”入下一画面“设置方法”进行参数设定。

最后保存方法；3.设置泵参数：在“流速”处输入流量，在“溶剂”处选中输入相应比例，在右面注释栏中标明各溶剂的名称；设置“stop time”和“post time”，在“压力限值”处输入柱子的最大耐高压以保护柱子如：250 bar，在“时间表”添加编辑梯度；4.设定进样器参数：在进样模式中输入进样量。

标准进针：只能输入进样体积不能洗针。

针清洗后进样：可以输入进样体积和洗瓶位置，针从样品瓶抽完样品后会在洗瓶中洗针。

注意：洗针瓶不盖盖子，以免污染针外表面。