人类绒毛膜促性腺激素+β亚单位

人类绒毛膜促性腺激素+β亚单位标准操作流程

1 目的

明确人类绒毛膜促性腺激素+β亚单位检测的操作规程，指导检验人员正确进行人类绒毛膜促性腺激素+β亚单位的检测。

2.适用范围：

2.1适用于人类绒毛膜促性腺激素+β亚单位检测的检验人员。

2.2适合仪器：Roche Modular E170 ECL2010

2.3适用试剂: Roche HCG+β2010/E170

3方法原理：

采用双抗体夹心法原理

·第1步：20μl（Elecsys2010,E170）或15μl（Elecsys1010）标本、生物素化的抗HCG单克隆抗体和钌（Ru）标记的抗HCG单克隆抗体混匀，形成夹心复合物。·第2步：加入链霉亲和素包被的微粒，让上述形成的复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。

·第3步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。·检测结果由机器自动从标准曲线上查出。此曲线由仪器通过2点定标校正，由从试剂条形码扫描入仪器的原版标准曲线而得。

4临床应用

HCG的生理功能是维持妊娠黄体及影响类固醇产生。孕妇血清中主要含完整的HCG。检测HCG浓度可在受孕一周后诊断怀孕，在妊娠前三个月测定HCG特别重要，此期间HCG升高提示绒毛膜癌、葡萄胎、多胎妊娠。HCG升高还可见于生殖细胞、卵巢、膀胱、胰腺、胃、肺和肝脏肿瘤病人。含量降低提示流产、宫外孕、妊毒症、死胎。

5样品要求：

血清：按标准常规方法采集。

血浆：肝素、EDTA-K3、枸橼酸钠或草酸钾抗凝均可。标本在2－8度可稳定8小时，-20度可稳定12个月。冻融一次。标本如有沉淀需离心后再使用。

6 定标

每批HCG+β试剂有一条形码标签，含有该批试剂定标所需的特殊信息。应用Elecsys HCG+β定标液定标。

定标频率：每批试剂必须用新鲜试剂（试剂经仪器注册24小时以内）标定一次，如再次标定即根据下列要求：

E170/Elecsys2010：

·一个月（同一批号试剂）

· 7天（放置仪器上的同一试剂盒）

7 质控

Elecsys通用质控品1 (罗氏正常值质控)

Elecsys通用质控品2 (罗氏病理值质控)

质控1和质控2至少每24小时或每一次定标后测定一次。质控间隔期应适用于实验室的具体要求。检测值应落在确定的范围内，如出现质控值落在范围以外，应采取校正措施。

8试剂准备及稳定期

M：链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），1瓶，6.5ml。粒子浓度0.72mg/ml，生物素结合能力： 470ng生物素/mg粒子。含防腐剂。

R1：生物素化的抗HCG单克隆抗体（灰盖），1瓶，10ml。浓度6.3mg/l，磷酸缓冲液0.04mol/l，pH7.5。含防腐剂。

R2：Ru(bpy)32+标记的抗HCG单克隆抗体（黑盖），1瓶，10ml。浓度4.6mg/l，磷酸缓冲液0.04mol/l，pH6.5。含防腐剂。

存放在2-8 度，切莫倒置。未开封，可稳定至标明的保质期。开封后，2－8 度12周；放在E170上，7周；放在Elecsys2010上，8周；

9实验程序

按Roche Modular E170 ECL2010标准操作流程严格进行。

10抗干扰能力

该方法不受黄疸（胆红素<24mg/dl）、溶血（血红蛋白<1.0g/dl）、脂血（脂质<1400mg/dl）和生物素<80ng/ml等干扰。接受高剂量生物素（>5mg/天）治疗的病人，至少要等最后一次摄入生物素8小时后才能采血。不受类风湿因子干扰（3400U/ml）。

11检测范围

0.100─10，000mIUu/ml。

12正常参考值：

·112名非怀孕、健康妇女第97.5%的测定值是3mIU/ml；

·36名更年期后健康妇女为6mIU/ml；

·277名健康男性第97.5%的测定值是2 mIU/ml。

实验室应对各自地区人群的人类绒毛膜促性腺激素+β亚单位正常值波动范围进行

调查，如有必要应自己测定一个参考值范围。

13分析灵敏度

< 0.100mIU/ml。