实验室常用技术参数资料 试剂配方分解
20几种常用试剂配置方法
20几种常用试剂配置方法一、常用试剂配置方法的介绍试剂配置是实验室中常见的一项工作，准确的试剂配置可以保证实验的准确性和可重复性。
本文将介绍20几种常用的试剂配置方法，帮助实验人员更好地进行实验。
二、体积分配法体积分配法是常见的试剂配置方法之一，通常使用量较小、浓度较高的试剂进行配置。
该方法可通过使用体积移液器、移液枪等实验设备，根据需要配置所需体积的试剂溶液。
三、质量分配法质量分配法适用于需要配置具有特定质量浓度的试剂溶液。
该方法通过称量固体试剂，并按照比例配制溶液浓度。
四、摩尔浓度计算法摩尔浓度计算法是根据化学反应的摩尔比例来计算试剂的浓度。
通过计算反应物的摩尔量和体积，然后以摩尔量除以体积得到摩尔浓度。
五、比例混合法比例混合法适用于需要按照特定比例混合两种试剂的情况。
通常将两种试剂按照比例称量，然后进行混合。
六、稀释法稀释法是指将浓度较高的试剂与溶剂按照一定比例混合来降低试剂的浓度。
通过稀释法可以得到不同浓度的试剂溶液。
七、溶液配制法溶液配制法是根据溶液的浓度公式，按照一定的配比计算所需试剂的质量、体积等，并通过称量和混合来配制出所需的试剂溶液。
八、体积比配制法体积比配制法是指按照特定的体积比例计算所需的试剂体积，并进行混合配制。
该方法常用于需要配制特定体积比例的溶液。
九、对数浓度计算法对数浓度计算法是一种根据试剂的对数浓度来计算所需试剂量的方法。
通过计算对数浓度和体积，然后反推得到所需试剂量。
十、酸碱溶液的配制方法酸碱溶液的配制方法通常是指根据酸碱中和反应的化学方程式，计算所需溶液的质量、体积，并进行配制。
十一、标准溶液配制方法标准溶液配制方法是指通过称量准确的标准溶液，并按照一定比例配制出所需的标准溶液。
十二、离子稀释法离子稀释法是通过稀释一定体积的离子试剂溶液来得到特定浓度的离子溶液。
十三、等效物浓度计算法等效物浓度计算法是根据试剂反应的化学方程和摩尔比例，计算所需试剂的质量或体积，并进行配制。
实验室常用试剂和缓冲液配方
实验室常用试剂和缓冲液配方实验室中常用的试剂和缓冲液配方有很多种，下面将介绍一些常用的试剂和缓冲液的配方：一、试剂的配方1. Tris缓冲液：- 3 M Tris-Cl，pH 7.4（准备方法：将121.1 g Tris粉末溶解在800 mL去离子水中，使用HCl调节pH值至7.4，并将溶液体积加至1 L）2.NaCl溶液：-5MNaCl（准备方法：将287.7gNaCl溶解在800mL去离子水中，并将溶液体积加至1L）3.验血试剂：-4%NaOH溶液（准备方法：将40gNaOH溶解在900mL去离子水中，并将溶液体积加至1L）-5%CuSO4溶液（准备方法：将50gCuSO4溶解在900mL去离子水中，并将溶液体积加至1L）-2%K4[Fe(CN)6]溶液（准备方法：将20gK4[Fe(CN)6]溶解在900mL去离子水中，并将溶液体积加至1L）4.PBS缓冲液（磷酸盐缓冲液）：-10×PBS缓冲液（准备方法：将80gNaCl，2gKCl，11.5gNa2HPO4，2gKH2PO4溶解在800mL去离子水中，并将溶液体积加至1L。
pH值可以调节至7.4左右）5. Tris-EDTA缓冲液（TE缓冲液）：- 10 mM Tris-HCl，1 mM EDTA，pH 8.0（准备方法：将12.1 gTris溶解在800 mL去离子水中，然后加入0.37 g EDTA，使用HCl调节pH值至8.0，并将溶液体积加至1 L）二、缓冲液的配方1. Tris-HCl缓冲液：- 50 mM Tris-HCl，100 mM NaCl，1% Triton X-100，pH 7.4（准备方法：将6.05 g Tris，5.8 g NaCl，0.1 g Triton X-100溶解在800mL去离子水中，使用HCl调节pH值至7.4，并将溶液体积加至1 L）2. Tris-Borate缓冲液（TBE缓冲液）：- 89 mM Tris，89 mM boric acid，2 mM EDTA，pH 8.3（准备方法：将10.81 g Tris，5.49 g boric acid，3.72 g EDTA溶解在800 mL去离子水中，使用NaOH或HCl调节pH值至8.3，并将溶液体积加至1 L）3. Tris-Glycine缓冲液：- 25 mM Tris，192 mM glycine，0.1% SDS，pH 8.3（准备方法：将3.03 g Tris，14.35 g glycine溶解在800 mL去离子水中，使用HCl调节pH值至8.3，并将溶液体积加至1 L）4. Tris-Acetate缓冲液（TAE缓冲液）：- 40 mM Tris，20 mM acetic acid，1 mM EDTA，pH 8.3（准备方法：将4.84 g Tris，1.86 g acetic acid，0.37 g EDTA溶解在800 mL去离子水中，使用NaOH或HCl调节pH值至8.3，并将溶液体积加至1 L）5. Phosphate缓冲液：- 100 mM sodium phosphate，pH 7.0（准备方法：根据目标pH值使用磷酸二氢钠和磷酸氢二钠调节溶液pH至7.0，并将溶液体积加至1 L）以上只是一些常用的试剂和缓冲液的配方，并不是全部。
实验室常用生化试剂配方
实验室常用生化试剂配方1.常用抗生素配制以及使用说明（参考链霉菌室操作手册2019版）抗生素英文名称及缩写抗性基因贮藏液浓度(mg/ml) 10025(无水乙醇配) 50 25 50 50 25(DMSO配) 100 50 3525(0.15M NaOH配) 50(DMSO配)50 50MM使用终浓度（μg/ml）链霉菌2CMYEME大肠杆菌LA或LB氨苄青霉素氯霉素潮霉素卡那霉素壮观霉素链霉素硫链丝菌素红霉素阿泊拉霉素紫霉素萘锭酮酸 TMPAmpicillin, Amp bla Chloramphenicol, Cml Hygromycin, Hyg Kanamycin, Km Spectinomycin, Spc Streptomycin, Str Thiostrepton, Thio Erythomycin, Ery Apramycin, Am Viomycin,Vio Nalidixic acid Trimethoprimcat hyg aac/aph aadA str tsr ermE aac(3)IV vph－* 10 10 2 5 10 5 100 10－－ 25 25 20 25 10 － 50－－－－－－ 2.5 － 550-100 25 － 25 50 25 25 20 10-30注意事项：(1) –表示无记录或不能使用，贮存液除特别说明外均用无菌水配制，配制过程请确保抗生素粉末充分溶解混匀后再分装；（2）Km 和Am有交叉抗性，同时具有这两种抗性基因时应适当提高抗生素的量，并设置阴性对照；（3）Hyg、Vio易见光分解，配制好后应用锡箔纸包好,使用过程中建议避光操作。
有些抗生素需要在低盐的环境（如DNA培养基）下筛选效率较高，如Hyg, Km, Vio（4）用无菌水配制的抗生素需在超净工作台内用0.22 μm一次性过滤器过滤除菌并分装；氯霉素、TMP、硫链丝菌素可以在超净工作台外配制分装，无需过滤除菌，但需确保配制贮存液所用溶剂（无水乙醇、DMSO）未遭受污染，建议配制氯霉素时使用新的无水乙醇，不要使用抽提质粒或总DNA时用的无水乙醇，以防止污染；DMSO，即二甲亚砜，易挥发，有剧毒；（5）长期不用的抗生素请置于-20℃保存，抗生素粉末按照使用说明一般置于4℃保存，经常使用时可以暂置于4℃保存；（6）抗生素的实际使用浓度请结合实验经验进行适当调整；(7)配制抗生素时应尽量一次性称取抗生素粉末，配制过程中建议穿工作服，戴一次性橡胶手套及口罩，及时清理称量配制抗生素时使用的台面及器具，以避免抗生素及溶剂对自身的损伤及对工作环境的污染。
生化实验室常用试剂配方
PBS:我们去买复合片，直接配制。
试剂名称：4%多聚甲醛-磷酸二氢钠/氢氧化钠：40ml500ml配方所需药品及剂量：A液：多聚甲醛20g 溶于200ml蒸馏水B液：Na2HPO4·2H2O 3.44g溶于150ml蒸馏水C液：NaOH 1.93g 200ml蒸馏水操作过程A液最好在500ml的三角烧瓶中加热配制（低温比较难溶），至多聚甲醛完全溶解后冷却待用。
注意，在溶解多聚甲醛时，要尽量避免吸入气体或溅入眼内。
B液和C液配制好后，将B液倒入C液中，混合后再加入A液，将pH调至7.2～7.4，最后，补充蒸馏水至500ml 充分混合。
或者将多聚甲醛20g、Na2HPO4·2H2O 3.44g、NaOH 1.93g直接溶于500ml蒸馏水，将pH 调至7.2～7.4即可。
5×Tris-硼酸（TBE）缓冲液（配制1L溶液各成分的用量）Tris碱 54 g硼酸 27.5 gEDTA 2.92 g实际配500ml，那么Tris碱27g，硼酸 13.75g，EDTA 1.46gWestern bloting10％分离胶（两块胶，15ml ）4％浓缩胶（两块胶，5ml）超纯水6ml 超纯水 3.2ml40％Acr/Bic （37.5：1）5.25ml 40％Acr/Bic（37.5：1）0.55mlLT 3.75 HT 1.25 10%AP 80 μl 10%AP 50 μl TEMED 7.6 μl TEMED 12.5 μlRunning buffer(1×): Trisbase 3.03g;Glycine 18.8g;SDS1.0g加水至1L可以配成5×（5×电泳缓冲液配方：总量为1L；15.1g Tris 碱；72.0g 甘氨酸；5.0g SDS）Transfer Buffer(1×): 甘氨酸2.9gTris（MW121.14） 5.8gSDS 0.37g甲醇 200ml，加蒸馏水至 1000ml 溶解后4℃保存，溶液可重复使用2-3次。
医学实验技术用到的试剂配制方法
医学实验技术用到的试剂配制方法
实验中用到的试剂配方
一、WB实验
1.电转液（PH=8.3）
甘氨酸 14.5g
Tris 2.9g
甲醇 200ml
蒸馏水至 1000ml
先用蒸馏水溶甘氨酸，最后加甲醇，室温保存，2-3次可用，最好4度保存，可配制成2x转移缓冲液，稀释后可用。
2.TBS缓冲液
1mol/L Tris-HCL （PH=7.5） 10ml
NaCl 8.8g
蒸馏水至 1000ml
可配制成10x转移缓冲液，稀释后可用。
3.TBST缓冲液
20%Tween 1.65ml
TBS 700ml
混匀后即可使用，最好现用现配。
二、免疫染色相关实验
5.多聚甲醛溶液（4%）
多聚甲醛 40g
1×PBS 定容至1L
6.柠檬酸盐抗原修复液（1×）
柠檬酸三钠 3g
柠檬酸 0.4g
dH2O 定容至1L
PH调至6.0
7.盐酸酒精（1%）
浓盐酸 2.5ml
75%乙醇定容至250ml
8.氨水（1%）
氢氧化铵 2.5ml
dH2O 定容至250ml
三、其他
4.红细胞裂解液
NH4CL 2g
KHCO3 0.25g
ddH2O 250ml
0.5M EDTA 250ul
最后用除菌过滤器过滤，待用。
化学试剂配制方法全解
电厂化学试剂配制1、硬度：一种测定硬度大于0.5me/L的水样；二种测定硬度在1-0.5ue/L的水样。
⑴、氨-氯化铵缓冲溶液：称取20g氯化铵溶于500高纯水中，加150ml浓氨水，用高纯水稀释至1000ml混匀；取50ml按第二方法测定其硬度，根据测定结果往其余950ml缓冲溶液加所需EDTA溶液抵消其硬度。
⑵、（高硬度）氨-氯化铵缓冲溶液：称取67.5克氯化铵，加570ml浓氨水，加1gEDTA用高纯水稀释至1000ml混匀；⑶、硼砂缓冲溶液：称取40g硼砂溶于80ml高纯水中，加入10g氢氧化钠，溶解后用高纯水稀释至1000ml，按上述方法抵消硬度。
⑷、0.5﹪铬黑T指示剂（乙醇溶液）：称取0.5g铬黑T 与4.5g盐酸羟胺在研钵中磨匀，混合后溶于100ml95﹪乙醇中，转入棕色瓶中。
使用期限不超过1个月。
⑸、酸性铬蓝K指示剂（乙醇溶液）：称取0.5g酸性铬蓝K与4.5盐酸羟胺混合，加10ml氨-氯化铵缓冲溶液（硼砂也可）和40ml高纯水，溶解后用95﹪乙醇稀释至100ml. 使用期限不超过1个月。
2、磷酸盐：⑴、磷酸盐储备液（1ml=1mgPO），称取在105℃干燥过的优级纯磷酸二氢钾1.433g溶于少量除4盐水中，并稀释至1000ml。
⑵、磷酸工作溶液：（1ml=0.1mgPO4），取上述储备液10ml稀释至100ml⑶、钼酸铵-偏钒酸铵-硫酸显色液（酸性钼酸铵）：（A）称取50g钼酸铵和2.5g偏钒酸铵，溶于400ml除盐水中；（B）取195ml浓硫酸，在不断搅拌下徐徐加入到250ml除盐水中，并冷却至室温。
将（B）配置的溶液倒入（A）配置的溶液中，用除盐水稀释至1000ml。
3、二氧化硅：⑴、酸性钼酸铵溶液：A.称取50g钼酸铵溶于500ml高纯水中；B.取42ml浓硫酸，在不断搅拌下加入到300ml高纯水中，并冷却至室温。
C.将A加入到B中，然后用高纯水稀释至1000ml。
⑵、10﹪酒石酸溶液（质量/体积）⑶、1、2、4酸还原剂：A．称取1.5g1、2、4酸和无水亚硫酸钠溶于200ml高纯水中1B. 称取90g 亚硫酸氢钠，溶于600ml高纯水中。
实验室常用技术参数资料_(精)
常见实验用溶液的配制方法一.常用贮液与溶液1mol/L亚精胺（Spermidine : 溶解2.55g 亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20C。
1mol/L精胺（Spermine :溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml 。
分装成小份贮存于-20C。
10mol/L乙酸胺（ammonium acetate :将77.1g 乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后,用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。
10mg/ml牛血清蛋白（BSA:加100mg的牛血清蛋白（组分V或分子生物学试剂级,无DNA酶于9.5ml水中（为减少变性，须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白，盖好盖后,轻轻摇动,直至牛血清蛋白完全溶解为止。
不要涡旋混合。
加水定容到10ml ,然后分装成小份贮存于-20C。
1mol/L二硫苏糖醇（DTT :在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水，分成小份贮存于-20E。
或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管，加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。
8mol/L乙酸钾（potassium acetate : 溶解78.5g 乙酸钾于足量的水中，加水定容到100ml。
1mol/L氯化钾（KCl :溶解7.46g 氯化钾于足量的水中，加水定容到100ml 。
3mol/L乙酸钠（sodium acetate : 溶解40.8g 的三水乙酸钠于约90ml水中, 用冰乙酸调溶液的pH至5.2,再加水定容到100ml 00.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L,混合后形成EDTA的三钠盐。
或称取186.1g 的Na2EDTA 2H2O和20g的NaOH ,并溶于水中，定容至1L。
1mol/L HEPES :将23.8gHEPES 溶于约90ml 的水中，用NaOH 调pH （6.8- 8.2,然后用水定容至100ml。
1mol/L HCl :力卩8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。
实验室常用试剂和缓冲液配方
实验室常用试剂和缓冲液配方PBS（磷酸盐缓冲液）是一种常用的生物化学缓冲液，用于洗涤和稀释生物化学试样。
配方：-NaCl：8g-KCl：0.2g-Na2HPO4：1.42g-KH2PO4：0.24g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，调节pH值至7.4、用1M（摩尔浓度）盐酸或1M氢氧化钠进行调节。
2. Luria-Bertani (LB) 培养基配方LB培养基是微生物学研究中常用的培养基，适用于大多数细菌和酵母菌的培养。
配方：- 水解酪蛋白（tryptone）：10 g- 酵母粉（yeast extract）：5 g-NaCl：10g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，用1M盐酸或1M氢氧化钠调节pH 至7.0。
可以选择添加洗涤剂Tween-20（0.1%）以提高溶解度。
SSC缓冲液广泛用于核酸杂交实验等生物学研究中。
配方：-NaCl：175.3g- Na3Citrate·2H2O：88.2 g-EDTA：37.2g将上述物质溶解在1升蒸馏水中，调节pH值至7.0-7.2、可以选择添加DEPC（二硫酰二甲酯）处理，增强其功能。
4.甲醛溶液甲醛溶液常用于生物样品固定以及染色实验。
配方：-甲醛：37%-PBS或水将适量的甲醛加入PBS或水中，制备所需浓度的甲醛溶液。
5. β-羟丁酸钠（β-Hydroxybutyrate）溶液β-羟丁酸钠是一种常用的减少剂，用于生物化学实验中。
配方：-β-羟丁酸钠：1M根据需求将适量的β-羟丁酸钠溶解在合适的溶剂中。
这里只是列举了几个常见的试剂和缓冲液配方，实验室试剂和缓冲液种类丰富多样，具体使用取决于研究目的和实验要求。
在进行实验之前，建议仔细阅读相关文献和制造商提供的说明书，并按照正确的比例和步骤配制试剂和缓冲液。
常用化学试剂配方及显色剂大全
常用试剂及配置方法（一）化学成分定性反应试剂1、5％α-萘酚试剂α-萘酚5g，加乙醇100ml溶解，如不澄清，可过滤，装棕色瓶备用；2、费林(Fehling)试剂甲液：6.92g硫酸铜结晶、溶于100ml水中。
乙液：34.6g酒石酸钾钠的结晶、10g氢氧化钠共溶于100ml水中，贮藏于带橡皮塞的试剂瓶中。
使用时取甲、乙二液等量混合。
3、10％盐酸盐酸27ml，加蒸馏水使成100ml。
4、10％氧氧化钠氢氧化钠10g，加蒸馏水使成100ml。
5、苦味酸钠试纸取滤纸条浸入苦味酸饱和水溶液中，浸透后取出晾干，再浸入10％碳酸钠水溶液中，迅速取出，晾干即得。
6、普鲁土蓝试剂（1）10％氢氧化钾试液氢氧化钾6.5g，加蒸馏水使成100ml。
（2）10％硫酸亚铁水溶液取硫酸亚铁结晶8g。
加新沸过的冷蒸馏水使成250ml。
应临用时新鲜配制。
（3）10％盐酸溶液。
（4）5％三氯化铁溶液三氯化铁5g，加适量的蒸馏水使溶解成100ml。
7、1％三氯化铁试剂三氯化铁1g，加蒸馏水使溶解成100ml。
8、1％氢氧化钠试液氢氧化钠1g，加蒸馏水使成100ml。
9、1％醋酸镁甲醇液醋酸镁1g，加甲醇100ml。
10、1％三氯化铝乙醇液三氯化铝1g，溶解于100ml乙醇中。
11、0.9％氯化钠溶液氯化钠0.09g，加水100ml。
12、1.8％氯化钠溶液氯化钠1.8g，加水100ml。
13、2％红细胞生理盐水混悬液兔血10ml，放在盛有玻璃珠的三角烧瓶中，振摇10分钟，除去纤维蛋白，把脱纤维血倒在离心管中，加生理盐水混匀后，离心，使血细胞下沉，反复2～3次，至生理盐水不再显红色，取以上红细胞2ml，加生理盐水100ml，稀释成2％的红细胞混悬液（本液须置冰相保存，存期2～3天）。
14、0.15％三氯化铁-冰醋酸溶液1％三氯化铁溶液0.5ml，加冰醋酸100ml。
15、醋酸铅试液取醋酸铅9.5g，加新煮沸过的冷蒸馏水使成100ml。
实验室常用试剂配方
1.常用PBS：称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4、0.24g KH2PO4，溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L即可，高压灭菌。
2.常用PBS(不含K盐)：8.5g NaCl、0.8736g NaH2PO4•2H2O、5.531g Na2HPO4•12H2O，800ml三蒸水搅拌，无需调PH，1L定容。
3.DMEM培养基：DMEM干粉溶入800ml三蒸水中，加入3.7g NaHCO3，搅拌后调PH至7.2~7.4，最终用1000ml容量瓶定容，无菌层流间中过滤分装。
4.1640培养基：1640干粉溶入800ml三蒸水中，加入2.0g NaHCO3，搅拌后调PH至7.2~7.4，最终用1000ml容量瓶定容，无菌层流间中过滤分装。
5.胰酶：浓度为0.25%~0.4%，通常是用生理盐水或PBS等平衡盐溶液作为溶剂。
6.胰酶（含EDTA）：普通胰酶中额外加入0.01%~0.02%的EDTA7.细胞冻存液：多数细胞配方为10%DMSO+20%血清+70%细胞培养基，也有介绍直接10%DMSO加90%含血清培养液，部分细胞需10%DMSO+90%血清。
理论上血清越多冻存效果越好。
8.谷氨酰胺：标准的谷氨酰胺100×液为200mmol/L(29.22g/L)。
通常培养液中浓度为1~4mmol/L （0.146~0.5844g/L），4o C下半衰期为7天，两周以上需要重新加入。
9.双抗：青霉素—100IU/ml（通常培养液中终浓度为20~100IU/ml均可），链霉素—100ug/ml（通常培养液中浓度为50ug/ml）。
多数体外培养都是使用青霉素和链霉素，上述的工作浓度可在37o C长时间控制轻度污染而对细胞无毒性作用。
10.MTT：0.5克MTT，溶于无酚红的培养基中（就用培养细胞的培养基），浓度为5mg/ml，过滤除菌，4℃避光保存。
实验室试剂配制及实验方法
PBS缓冲液的配制(1PBS)NaCl 8gKCL 0.2gNa2HPO4 1.44gKH2PO4 0.24g调pH至7.4，加去离子水至1000ml，放于4℃备用。
Hank's 液用于冲洗动物组织和细胞，具有等渗和一定的酸性缓冲能力。
本实验中使用的是无钙、无镁Hank's 液（又称D- Hank's液），具体配方如下：NaCl 8.00gKCl 0.40gNa2HPO4.12H2O 0.134gNaHCO3 0.35g1%酚红 2ml加去离子水至 1000ml10磅高压灭菌10分钟，0-4℃储存备用。
使用前将调pH至7.2-7.4。
胰酶 (0.25%)NaCl 8gKCl 0.4g柠檬酸钠（5H2O） 1.12g磷酸二氢钠（2H2O） 0.056g碳酸氢钠 1g葡萄糖 1g胰酶 2.5g加去离子水至 1000ml用滤器过滤除菌，分装后放于-20℃备用。
大肠杆菌感受态细胞的制备按分子克隆实验指南中的氯化钙法制备感受态细胞。
以无菌的接种环取冻存的JM83菌种划线接种于LB琼脂平板上，37℃温箱培养过夜。
次日挑取生长好单个菌落接种于5ml LB 培养液中37℃振荡培养过夜。
取1ml过夜培养液接种到100ml LB液体培养基中，37℃剧烈振荡培养2-3小时使OD600达到0.4左右。
在无菌条件下将细菌培养物倒入灭菌后冰预冷的离心管中，冰浴10分钟，4℃1600g离心10分钟后尽弃上清。
加入100ml冰预冷的0.1mol/L的CaCl2溶液重新悬浮沉淀的细胞，在冰浴中放置30分钟，4℃1600g离心10分钟后尽弃上清。
加入10ml冰预冷的0.1mol/L的CaCl2溶液再次悬浮沉淀的细胞，加入终浓渡为15% 灭菌的甘油，混匀后分装为200 μl/管，直接用于转化或置-70℃冰箱保存备用。
CEF细胞制备取10日龄的SPF鸡胚，先后用碘酒棉和酒精棉消毒气室部位，无菌取出鸡胚，用Hank's液洗涤胚体，去头、四肢和内脏，剪成2mm大小的组织块，用0.25%胰酶溶液(4ml/胚)在37℃水浴中消化12分钟左右，然后倒掉胰酶，用不含血清的Hank's液洗涤2~3次后，再加入适量的营养液（DMEM），吹打分散细胞，用6层纱布过滤，制成每毫升含活细胞数106-107个的细胞悬液，分装为5 ml/60mm平皿，制成CEF单层细胞。
实验室常用试剂的配方
常用试剂的配方常用贮液与溶液 (1)1mol/L亚精胺（Spermidine） (1)1mol/L精胺（Spermine） (1)10mol/L乙酸胺（ammonium acetate） (1)10mg/ml牛血清蛋白(BSA） (1)1mol/L二硫苏糖醇（DTT） (1)8mol/L乙酸钾（potassium acetate） (1)1mol/L氯化钾（KCl） (1)3mol/L乙酸钠（sodium acetate） (1)0.5mol/L EDTA (1)1mol/L HEPES (1)1mol/L HCl (1)25mg/ml IPGT (1)1mol/LMgCl2 (1)100mmol/L PMSF (1)20mg/ml蛋白酶K（proteinase K） (1)10mg/mlRnase（无DNase）（DNase－free RNase） (1)5mol/L氯化钠（NaCl） (1)10N氢氧化钠（NaOH） (1)10％SDS（十二烷基硫酸钠） (1)2mol/L山梨（糖）醇（Sorbitol） (2)100％三氯乙酸（TCA） (2)2.5％ X－gal（5-溴-4-氯-3-吲哚－β-半乳糖苷） (2)100×Denhardt试剂（Denhardt’s regent） (2)10×标准DNA连接酶缓冲液（standard DNA ligase buffer）（粘端、平端连接） (2)100 mmol/L dNTP 溶液（dNTP solutions） (2)20％PEG 8000/2.5M NaCl (2)20×SSC (2)DEPC（焦碳酸二乙酯）处理水 (3)甲酰胺（deionized formamide） (3)TE（用于悬浮和贮存DNA） (3)Tris缓冲液（Tris-HCl buffer） (3)30%丙烯酰胺溶液 (3)40%丙烯酰胺 (3)放线菌素D溶液 (4)0.1mol/L腺苷三磷酸（ATP）溶液 (4)10mol/L乙酸酰溶液 (4)10%过硫酸铵溶液 (4)BCIP溶液 (4)2×BES缓冲盐溶液 (4)1mol/L CaCl2溶液 (5)2.5mol/L CaCl2溶液 (5)1mol/L二硫苏糖醇（DTT）溶液 (5)脱氧核苷三磷酸（dNTP）溶液 (5)0.5mol/L EDTA(pH8.0)溶液 (6)2×HEPES缓冲盐溶液 (6)IPTG溶液 (6)1mol/L乙酸镁溶液 (6)1mol/L MgCl2溶液 (6)β-巯基乙醇（BME）溶液 (7)NBT溶液 (7)酚/氯仿溶液 (7)10mmol/L苯甲基磺酰氟（PMSF）溶液 (7)磷酸盐缓冲溶液（PBS）溶液 (7)1mol/L乙酸钾（pH7.5）溶液 (8)乙酸钾溶液（用于碱裂解） (8)3mol/L乙酸钠（pH5.2和pH7.0）溶液 (8)5mol/L NaCl溶液 (8)10%十二烷基硫酸钠（SDS）溶液 (8)20×SSC溶液 (8)20×SSPE溶液 (9)100%三氯乙酸溶液 (9)1mol/L Tris溶液 (9)Tris缓冲盐溶液（TBS）（25mmol/L Tris） (9)X-gal溶液 (9)PBS: (10)TBS： (10)枸橼酸盐缓冲液（Citrate buffer）： (10)胰酶（Trypsin）： (10)胃酶（Pepsin）： (10)DAB： (10)AEC： (10)RIPA： (11)9、Blotto A： (11)10、Blotto B： (11)电泳缓冲液、染料和凝胶加样液 (11)电泳缓冲液 (11)染料 (11)10mg/ml的溴化乙锭（ethidium bromide） (11)凝胶上样液（gel loading solutions） (12)6×聚蔗糖凝胶上样液（室温贮存） (12)6×溴酚蓝/二甲苯青/聚蔗糖凝胶上样液（室温贮存） (12)6×甘油凝胶上样液（4℃贮存） (12)6×蔗糖凝胶上样液（室温贮存） (13)10×十二烷基硫酸钠/甘油凝胶上样液（室温贮存） (13)常用培养基 (13)LB培养基 (13)SOC培养基 (13)TB培养基 (14)YPD培养基 (14)常用抗生素 (14)羧苄青霉素（carbenicillin）（50mg/ml） (14)甲氧西林（methicillin）（100mg/ml） (14)卡那霉素（kanamycin）（10mg/ml） (14)氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml） (14)链霉素（streptomycin）（50mg/ml） (14)萘啶酮酸（nalidixic acid）（5mg/ml） (15)四环素（tetracyyline）（10mg/ml） (15)实验室常用贮存液的配制参数 (15)一、核酸及蛋白质常用数据 (15)2．常用核酸的长度与分子量 (15)3．常用核酸蛋白换算数据 (16)4．常用蛋白质分子量标准参照物 (17)5．常用DNA分子量标准参照物 (17)二、常用缓冲液 (18)1．分子克隆常用缓冲液 (18)2．磷酸缓冲液 (18)3．电泳缓冲液 (20)4．凝胶加样缓冲液 (21)5．各种pH值的Tris缓冲液的配制 (22)7．温度对常用缓冲液pH的影响 (24)三、常用酶的配制 (25)1．溶菌酶 (25)2．蛋白水解酶类 (25)3．无DNA酶的RNA酶 (25)四、常用抗生素溶液 (25)五、杂交试验中用于降低背景的封闭剂 (26)六、常用凝胶的技术参数 (27)1．葡聚糖凝胶的某些技术数据 (27)2.聚丙烯酰胺凝胶的技术数据 (29)3．琼脂糖凝胶的技术数据 (29)4．各处凝胶所允许的最大操作压 (30)5．琼脂糖凝胶浓度与线性DNA分辨范围 (30)6．染料在变性聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速度 (30)7．染料在非变性聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速度 (31)七、氨基酸的特性 (31)八、遗传密码 (32)九、常用酸碱技术参数 (33)1．常见的市售酸碱的浓度 (33)2．各种浓度的酸碱贮存液的近似pH值 (34)常用贮液与溶液1mol/L亚精胺（Spermidine）溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。
化验室试剂的配制
试剂的配制方法：TN ：过硫酸钾氧化紫外分光光度法1、碱性过硫酸钾溶液：称取 4g 过硫酸钾（K2S2O8）（经过提纯的），1.5g 氢氧化钠（NaOH），溶于无氨水中，稀释至100mL。
溶液存放在聚乙烯瓶中，一般用四、五天。
3、过硫酸钾提纯：在 1 升广口瓶中加入约800mL 水， 50 摄氏度水浴锅加热，然后逐渐加入过硫酸钾，直至不能溶解为止，然后把完全溶解的饱和溶液放在室温中自然冷却，再放进四度冰箱重结晶，同时冰一瓶去离子水，重结晶一夜后，倒掉上清液然后用冰冻好的去离子水清洗几遍，洗净后倒掉上清液，倒入烧杯中，然后放入50 摄氏度烘箱烘干即可。
2、（1+9）盐酸： 10mL 盐酸加到 90mL 的水中。
TP：钼锑抗分光光度法1、5%过硫酸钾溶液：称取5g 过硫酸钾（上海国药的）溶于水中，稀释至100mL。
保质期为一个星期。
2、10%抗坏血酸溶液：溶解10g 抗坏血酸于水中，稀释至100mL。
3、钼酸盐溶液：溶解 13g 钼酸铵于 100mL 水中；溶解 0.35g 酒石酸锑钾于 100mL 水中，并在不断搅拌下，将钼酸盐溶液徐徐加到300mL（1+1）硫酸中，加酒石酸锑钾溶液并混合均匀。
此溶液贮存于棕色瓶中，在冷处可保存两个月。
NH 3-N：纳氏试剂光度法1、10%硫酸锌溶液：取10g 硫酸锌溶于水中，稀释至100mL。
2、25%NaOH 溶液：称取 25g 氢氧化钠（片状）溶于水中，稀释至100mL。
3、纳氏试剂：①称取10g 碘化钾溶于约50mL 水中，边搅拌边分少量加入二氯化汞（Hgcl2）结晶粉末（ 4.5g），至出现朱红色沉淀不易溶解时，改为滴加饱和二氯化汞溶液，并充分搅拌，当出现微量朱红色沉淀不易溶解时，停止滴加氯化汞溶液。
另称取 60g 氢氧化钾溶于水，并稀释至 125mL，充分冷却至室温后，将上述溶液在搅拌下，徐徐注入氢氧化钾溶液中，用水稀释至 200mL，混匀。
静置过夜，装到聚乙烯瓶中，密塞保存。
超全实验室试剂配制资料
一、实验室常用试剂、缓冲液的配制方法1、1 M Tris-HCl(pH7.4，7.6，8.0)组份浓度 1 M Tris-HCl配制量1L配制方法 1.称量121.1 g Tris置于l L烧杯中。
2.加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
5.高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高l℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2、1.5 M Tris-HCl(pH8.8)组份浓度 1.5 MTris-HCl配制量 1 L配制方法 1.称量181.7 g Tris置于1 L烧杯中。
2.加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3.用浓HCl调节pH值至8.8。
4.将溶液定容至1 L。
5.高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高l℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
3、1 0×TE Buffer (pH7.4, 7.6，8.0)组份浓度100 mM Tris-HCl，10 mM EDTA配制量 1 L配制方法3.将溶液定容至1 L后，高温高压灭菌。
4.室温保存。
4、3 M醋酸钠(pH5.2)组份浓度 3 M醋酸钠配制量100 ml配制方法 1.称量40.8 g NaOAc·3H2O置于100~200 ml烧杯中，加入约40 ml 的去离子水搅拌溶解。
2.加入冰醋酸调节pH值至5.2。
3.加去离子水将溶液定容至100 ml。
4.高温高压灭菌后，室温保存。
5、PBS Buffer组份浓度137 mM NaCl，2.7 mM KCl，10 mM Na2HPO4，2 mM KH2PO4 配制量 1 L配制方法3.滴加浓HCl将pH值调节至7.4，然后加入去离子水将溶液定容至1 L。
4.高温高压灭菌后，室温保存。
注意：上述PBS Buffer中无二价阳离子，如需要，可在配方中补充1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。
(参考资料)实验室常用药品试剂的配置与使用
实验室常用药品试剂的制备与使用(一)认识药品规格纯度规格简写标签颜色级别特点(二)染色试剂的配制1.甲基绿（DNA—绿色）和吡罗红（RNA—红色）染色剂配制：a)A液：取甲基绿2 g溶于98 mL蒸馏水中，取吡罗红G 5 g溶于95 mL蒸馏水中。
取6 mL甲基绿溶液和2 mL吡罗红溶液加入到16 mL蒸馏水中，置于棕色瓶中备用。
b)B液：是一种缓冲液，由乙酸钠和乙酸混合而成。
先取乙酸钠16.4 g，用蒸馏水溶解至1000 mL备用；再取乙酸12 mL，用蒸馏水稀释至1000 mL备用。
取配好的乙酸钠溶液30 mL和稀释的乙酸20 mL，加蒸馏水50 mL，配成pH为4.8的B液（缓冲液）。
c)取A液20 mL和B液80 mL混合，就是实验中所用的吡罗红甲基绿染色剂。
应该注意的是该试剂应现用现配。
2.I2-KI溶液（淀粉—蓝紫色，蛋白质—黄色）配制：将碘化钾3g溶于蒸馏水中，待全部溶解后加入碘1g，振荡使其溶解，将此液保存在棕色玻璃瓶内。
3.苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ（木栓化、角质化细胞壁—红色，脂肪、挥发油、树脂等—红色或淡红色）配制：苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ干粉0.1g与95%乙醇10 mL混合，过滤后再加入10 mL甘油。
4.1% 醋酸洋红染料（染色体—紫红色）配制：将洋红1 g与45% 醋酸100 mL煮沸2h 左右，并随时注意补充加入蒸馏水到原含量。
冷却后过滤，加入4% 铁明矾溶液1~2滴，放入棕色瓶中备用。
5.龙胆紫酸性染料（染色质—紫色）配制：取龙胆紫1 g，溶于少量2% 醋酸溶液中，滴加2% 醋酸溶液，直至溶液不呈深紫色为止。
6.卡宝染色剂（染色体—红色，着色深，保存性好）又名苯酚-品红染色剂配制：a)原液A：将3g碱性品红溶于100 mL 70% 的乙醇中。
b)原液B：取原液A 10 mL 加入到90 mL 5% 苯酸水溶液中。
（两周内有效）c)原液C：取原液B 55 mL，加入6 mL福尔马林和6 mL冰醋酸。
各实验试剂配制方法
NOx的测定试剂配制1、1・0Og/L盐酸萘乙二胺贮备液：称取0.50g(N-l-萘基)乙二胺盐酸盐(C1O H7NH(CH2)NH2・2HC1)于500ml容量瓶中，用水稀释至标线。
此溶液贮于密闭的棕色试剂瓶中，在冰箱中冷藏可稳定三个月。
2、显色液：称取5.0g对氨基苯磺酸(NH2C6H4S03H)，溶解于约200ml热水中，将溶液冷却至室温，全部移入1000ml容量瓶中，加入50.0ml盐酸萘乙二胺贮备液和50ml冰乙酸，用水稀释至标线。
此溶液于密闭的棕色瓶中，在25°C以下暗处存放，可稳定三个月。
若呈现淡红色，应弃之重配。
3、吸收液：临用时将显色液和水按4+1(V/V)比例混合，即为吸收液。
吸收液的吸光度不超过0.005(540nm，lcm比色皿，以水为参比)。
否则，应检查水、试剂纯度或显色液的配制时间和贮存方法。
4、亚硝酸钠标准贮备液：准确称取0.3750g亚硝酸钠(NaN02，优级纯，预先在干燥器内放置24h)溶解于水，移入1000ml容量瓶中，用水稀释至标线。
贮于密闭的棕色试剂瓶中，可稳定三个月。
此溶液每毫升含0.250mg亚硝酸根。
5、亚硝酸钠标准使用液：吸取亚硝酸钠标准贮备液1.00ml于100ml容量瓶中，用水稀释至标线。
临用前现配。
此溶液每毫升含2.5审亚硝酸根。
6、硫酸溶液C(1/2H2S04)=lmol/L：取15ml硫酸(p=1.84g/m1)徐徐加入500ml水中。
7、酸性高锰酸钾溶液：称取25g高锰酸钾，稍微加热使其全部溶解于500ml水中，然后加入lmol/L硫酸溶液500ml,混匀，贮于棕色试剂瓶中。
SO2的测定试剂配制1、环己二胺四乙酸二钠溶液C(CDTA-2Na)=0.0050mo1/L：称取1.82g反式-1,2-环己二胺四乙酸((trans-1，2-Cyc1ohexy1enedinitri1o)tetraaceticacid，简称CDTA),加入1.50mo1/L的氢氧化钠溶液6.5ml,溶解后用水稀释至100ml。
实验室常用生化试剂配方
实验室常用生化试剂配方实验室中常用的生化试剂有很多种，下面是一些常见的生化试剂及其配方的介绍：1.磷酸缓冲液（PBS）PBS是一种常用的缓冲液，用于洗涤细胞和组织，以及稀释试剂等。
它的配方通常包括：-NaCl：8g-KCl：0.2g-Na2HPO4：1.44g-KH2PO4：0.24g将以上试剂溶解于1L去离子水中，调节pH至7.42. Tris缓冲液Tris缓冲液用于调节溶液的pH值，常用于分子生物学实验。
其配方为：- Tris-HCl：12.11 g将Tris-HCl溶解于1L去离子水中，调节pH至所需值。
3.氢氧化钠（NaOH）溶液NaOH是一种常用的碱试剂，可用于调节pH、溶解蛋白质等。
其常见配方为：-NaOH：4g将NaOH溶解于1L去离子水中。
4.氯仿／异丙醇提取液氯仿／异丙醇提取液常用于分离DNA或RNA。
其配方为：-氯仿：24mL-异丙醇：25mL-TE缓冲液：1mL将以上试剂混合，并轻轻摇匀。
5.碳酸氢钠（NaHCO3）缓冲液NaHCO3是一种常用的缓冲液，可用于调节溶液的pH值。
其配方为：-NaHCO3：8.4g将NaHCO3溶解于1L去离子水中，调节pH至所需值。
6.绿色荧光蛋白（GFP）提取液GFP提取液用于提取含有GFP标记的蛋白质。
其配方为：- Tris-HCl（pH 7.5）：50 mM-NaCl：150mM-EDTA：1mM- Triton X-100：1%将以上试剂混合，并用PBS稀释至所需浓度。
7.锌离子（Zn2+）溶液锌离子溶液可用于一些酶活性实验。
其配方为：-ZnSO4·7H2O：2.19g将ZnSO4·7H2O溶解于1L去离子水中。
8.溶血液溶血液常用于红细胞计数等实验。
其配方为：-生理盐水：9mL-甲苯：1mL将以上试剂混合，即可得到溶血液。
这只是一小部分生化试剂配方的介绍，实验室中常用的试剂配方非常多，根据具体实验的需要，需要选择合适的试剂及其配方。
生物实验常用试剂配制方法
生物实验常用试剂配制方法
1．碘液的配制
取2g碘化钾，溶解在5mL蒸馏水中，再加1g碘，待溶解后用蒸馏水稀释到300mL。
用来测定淀粉和标本染色。
2．斐林试剂
试剂A：将34.5g结晶硫酸铜溶于500mL水中，加0.5mL硫酸，混合均匀。
试剂B：将125g氢氧化钠和137g酒石酸钾钠溶于500mL蒸馏水中。
（贮于带橡皮塞的瓶中）
※临用时试剂A与试剂B等量混合
3．双缩脲试剂
试剂A：10%氢氧化钠试剂B：1%硫酸铜
4．苏丹Ⅲ试剂
0.1g苏丹Ⅲ溶于20mL95%酒精中，因脂肪可溶于酒精中，因此染色脂肪不得超过10分钟。
5．二苯胺试剂：
将1g二苯胺溶液于100mML冰醋酸中，再加2.75mL浓硫酸（置冰箱中可保存根6个月，使用前在室温下摇匀）。
6．醋酸洋红染液
冰醋酸45mL＋55mL蒸馏水＋0.5g洋红
先将洋红溶于蒸馏水中，再加入冰醋酸充分摇匀后，加热煮沸10分钟，待冷却后，即可使用。
7．有丝分裂细胞解离液
15%盐酸和95%酒精按1：1的比例配成解离液。
8．有丝分裂细胞染液
医用紫药水和蒸馏水按1：16的比例混合配成染色液
9．卡诺氏固定液（用于细胞有丝分裂根尖的固定）
酒精：冰醋酸=3：1（体积比）。
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验室常用技术参数资料一、核酸及蛋白质常用数据1．核苷三磷酸的物理常数化合物分子量λmax(pH7.0)1摩尔溶液（pH7.0）中λmax时的最大吸收值OD280/OD260ATP 507 259 15400 0.15 CTP 483 271 9000 0.97 GTP 523 253 13700 0.66 UTP 484 262 10000 0.38 dATP 494 259 15200 0.15 dCTP 467 271 9300 0.98 dGTP 507 253 13700 0.66 dTTP 482 267 9600 0.712．常用核酸的长度与分子量核酸核苷酸数分子量λDNA48502（双链环状） 3.0×107pBR322 4363（双链） 2.8×10628SrRNA 4800 1.6×10623SrRNA 3700 1.2×10618SrRNA 1900 6.1×10519SrRNA 1700 5.5×1055SrRNA 120 3.6×104 tRNA（大肠杆菌）75 2.5×1043．常用核酸蛋白换算数据（1）重量换算1μg=10-6g 1pg=10-12g1ng=10-9g 1fg=10-15g （2）分光光度换算：1A260双链DNA=50μg/ml1A260单链DNA=30μg/ml1A260单链RNA=40μg/ml（3）DNA摩尔换算：1μg 100bp DNA=1.52pmol=3.03pmol末端1μg pBR322 DNA=0.36pmol1pmol 1000bp DNA=0.66μg1pmol pBR322=2.8μg1kb双链DNA（钠盐）=6.6×105道尔顿1kb单链DNA（钠盐）=3.3×105道尔顿1kb单链RNA（钠盐）=3.4×105道尔顿（4）蛋白摩尔换算：100pmol分子量100，000蛋白质=10μg 100pmol分子量50，000蛋白质=5μg 100pmol分子量10，000蛋白质=1μg 氨基酸的平均分子量=126.7道尔顿（5）蛋白质/DNA换算：1kb DNA=333 个氨基酸编码容量=3.7×104MW蛋白质10，000MW蛋白质=270bp DNA30，000MW蛋白质=810bp DNA50，000MW蛋白质=1.35kb100，000MW蛋白质=2.7kb DNA4．常用蛋白质分子量标准参照物（1）高分子量标准参照（2）中分子量标准参照（3）低分子量标准参照肌球蛋白分子量磷酸化酶B 97，400 碳酸酐酶31，00 肌球蛋白212，000 牛血清白蛋白66，200 大豆脻蛋白酶21，500β-半乳糖甘酶B116，000 谷氨酶脱氢酶55，000 抑制剂磷酸化酶B 97，400 卵白蛋白42，700 马心肌球蛋白16，900 牛血清白蛋白66，200 醛缩酶40，000 溶菌酶14，400 过氧化氢酶` 57，000 碳酸酐酶31，000 肌球蛋白（F1）8，100 醛缩酶40，000 大豆脻蛋白酶21，500 肌球蛋白（F2）6，200抑制剂肌球蛋白（F3）2，500溶菌酶14，4005．常用DNA分子量标准参照物λDNA/HindⅢλDNA/EcoRⅠλ/HindⅢ+EcoRⅠpBR322/HaeⅢ23130 21226 21227 587 1239416 7421 5148 405 1046557 5804 4973 504 894361 5643 4268 458 802322 4843 3530 434 64 2027 3530 2027 267 57 564 1904 234 51 125 1584 213 211375 192 18974 184 11831 124 7564125续上表pBR322/HinfⅠφχ174/HinfⅠφχ174/Hae Ⅲφχ174/TapⅠ1631 726 140 1353 2914517 713 118 1078 1175506 553 100 872 404396 500 82 603 327344 417 66 310 231298 413 48 281 141221 311 42 271 87220 249 40 234 54154 200 24 194 3375 151 118 2072二、常用缓冲液1．分子克隆常用缓冲液2．磷酸缓冲液（1）25℃下0.1mol/L磷酸钾缓冲液的配制※pH 1mol/L K2HPO4(ml) 1mol/L KH2PO4(ml)5.8 8.5 91.56.0 13.2 86.86.2 19.2 80.86.4 27.8 72.26.6 38.1 61.96.8 49.7 50.37.0 61.5 38.57.2 71.7 28.37.4 80.2 19.87.6 86.6 13.47.8 90.8 9.28.0 94.0 6.2（2）25℃下0.1mol/L磷酸钠缓冲液的配制※pH 1mol/L Na2HPO4(ml) 1mol/L NaH2PO4(ml)5.8 7.9 92.16.0 12.0 88.06.2 17.8 82.26.4 25.5 74.56.6 35.2 64.86.8 46.3 53.77.0 57.7 42.37.2 68.4 31.67.4 77.4 22.67.6 84.5 15.57.8 89.6 10.48.0 93.2 6.8※:用蒸馏水将混合的两种1mol/L贮存液稀释至1000ml，根据Henderson-Hasselbalch 方程计算其pH值：pH=pK’+1g([质子受体]/[质子供体])在此，pK’=6.86(25℃)。
3．电泳缓冲液测序凝胶加样缓冲液98%去离子甲酰胺10mol/L EDTA(pH8.0)0.025%二甲苯青FF0.025%溴酚蓝甲酰胺：许多批号的试剂级甲酰胺，其纯度符合使用要求，无须再进行处理。
不过，一旦略呈黄色，则应用在磁力搅拌器上将甲酰胺与Dowex XG8混合床树脂共同搅拌1小时进行去离子处理，并用Whatman 1号滤纸过滤2次，去离子甲酰胺分装成小份，充氮存于-70℃。
常用的电泳缓冲液缓冲液使用液浓贮存液（每升）Tris-乙酸（TAE）1×：0.04mol/L Tris-乙酸50×：242g Tris碱0.001mol/L EDTA 57.1ml冰乙酸100ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0) Tris-磷酸（TPE）1×:0.09mol/L Tris-磷酸10×:10g Tris碱0.002mol/L EDTA 15.5ml85%磷酸（1.679g/ml）40ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0) Tris-硼酸（TBE）a 0.5×0.045mol/L Tris-硼酸5×：54g Tris碱0.001mol/L EDTA 27.5硼酸20ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0)碱性缓冲液b 1×:50mmol/L NaOH1×:5ml 10mol/L NaOH1mmol/L EDTA 2ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0) Tris-甘氨酸c 1×:25mmol/L Tris5×:15.1g Tris250mmol/L 甘氨酸94g 苷氨酸（电泳级）（pH8.3）0.1% SDS 50ml 10% SDS(电泳级)说明：①TBE溶液长时间存放后会形成沉淀物，为避免这一问题，可在室温下用玻璃瓶保存5×溶液，出现沉淀后则予以废弃。
以片都以1×TBE作为使用液（即1：5稀释浓贮液）进行琼脂糖凝胶电泳。
但0.5×的使用液已具备足够的缓冲容量。
目前几乎所有的琼脂糖胶电泳都以1：10稀释的贮存液作为使用液。
进行聚丙烯酰胺凝胶垂直槽的缓冲液槽较小，故通过缓冲液的电流量通常较大，需要使用1×TBE以提供足够的缓冲容量。
②碱性电泳缓冲液应现用现配。
③Tris-甘氨酸缓冲液用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。
2×SDS凝胶加样缓冲液：100mmol/L Tris·HCl(6.8)200mmol/L二硫苏糖醇（DTT）4%SDS（电泳级）0.2%溴酚蓝20%甘油不含DTT的2×SDS凝胶加样缓冲液可保存于室温，应在临用前取1mol/L贮存液现加于上述缓冲液中。
4．凝胶加样缓冲液缓冲液类型6×缓冲液贮存温度Ⅰ0.25%溴酚蓝4℃0.25%二甲苯青FF40%（W/V）蔗糖水溶液Ⅱ0.25溴酚蓝室温0.25%二甲苯青FF15%聚蔗糖(Ficoll400)Ⅲ0.25%溴酚蓝4℃0.25%二甲苯青FF30%甘油水溶液Ⅳ0.25%溴酚蓝4℃40%(W/V)蔗糖水溶液碱性加样缓冲液:300mmol/L NaOH6mmol/L EDTAⅤ18%聚蔗糖(Ficoll400)4℃0.15%溴甲酚绿0.25%二甲苯青FF使用以上凝胶加样缓冲液的目的有三：增大样品密度；以确保DNA均匀进入样品孔内；使样品呈现颜色，从而使加样操作更为便利，含有在电块中能以可预知速率向阳极泳动的染料。
溴酚蓝在琼脂糖中移动的速率约为二甲苯青FF的 2.2倍，而与琼脂糖浓度无关。
以0.5×TBF作电泳液时，溴酚蓝在琼脂糖中的泳动速率约与长300bp的双链线状DNA相同，而二甲苯青FF的泳动则与长4kb的双链线状DNA相同。
在琼脂糖浓度为0.5%～1.4%的范围内，这些对应关系受凝胶浓度变化的影响并不显著。
选用哪一种加样染料纯属个人喜恶。
但是，对于碱性凝胶应当使用溴甲酚绿作为示踪染料，因为在碱性pH条件下其显色较溴酚更蓝为鲜明。
5．各种pH值的Tris缓冲液的配制各种pH值的Tris缓冲液的配制所需pH值（25℃）0.1mol/L HCl的体积7．1 45．77．2 44．77．3 43．47．4 42．07．5 40．37．6 38．57．7 36．67．8 34．57．9 32．08．0 29．28.1 26.28.2 22.98.3 19.98.4 17.28.5 14.78.6 12.48.7 10.38.8 8.58.9 7.0某一特定pH值的0.05mol/L Tris缓冲液的配制：将50ml 0.1mol/L Tris碱溶液与上表所示相应体积（单位：ml）的0.1ml/L HCl混合，加水将体积调至100ml （2）温度对50mmol/L Tris·HCl液pH值的影响4℃25℃37℃8．1 7．5 7．28．2 7．6 7．38．3 7．7 7．48．4 7．8 7．58．5 7．9 7．68．6 8．0 7．78．7 8．1 7．88．8 8．2 7．98．9 8．3 8．09．0 8．4 8．19．1 8．5 8．29．2 8．6 8．39．3 8．7 8．49．4 8．8 8．5 （6）常用缓冲液的pKa值缓冲液分子量pKa值缓冲范围Trisa 12.1 8.08 7.1～7.9HEPESb 283.3 7.47 7.2～8.2MPOSc 209.3 7.15 6.6～7.8PIPESd 304.3 6.76 6.2～7.3MESe 195.2 6.09 5.4～6.8 a：三羟甲基氨基甲烷；b：N-2-羟乙基哌嗪-N’-2-乙磷酸；c：3-（N-吗啉代）丙磺酸；d：N，N’-双（2-乙磺酸）哌嗪；e：2-（N-吗啉代）乙磺酸。