2019版高考生物大一轮复习第49讲微生物的培养与应用课时达标
2011年一轮复习生物课时课件：第49课时 微生物的培养与应用
（2）可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白的体外抗菌 特性。 特性。抗菌实验所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主 要为细菌生长提供 和 。 （3）分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接 种等量菌液。培养一定时间后， 种等量菌液。培养一定时间后，比较两种培养基中 菌落的 ，确定该蛋白质的抗菌效果。 确定该蛋白质的抗菌效果。
。 培养 。
（3）在该培养基中，可以通过检测pH的变化来判 在该培养基中，可以通过检测pH的变化来判 pH 断尿素是否被分解， 断尿素是否被分解，所依据的原理是 ，所用方法是在培养基 中加入 变成 色。 ，若尿素被分解，则培养基 若尿素被分解，
（4）如果将此培养基改为用来分离分解纤维素的微 生物的培养基， 生物的培养基，则主要提供碳元素的物质应改为 。
5.从自然菌样筛选较理想生产菌种的一般步骤是： 5.从自然菌样筛选较理想生产菌种的一般步骤是： 从自然菌样筛选较理想生产菌种的一般步骤是 采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。 采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。 （1）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生 不同微生物的生存环境不同， 物的第一步是从合适的环境中采集菌样， 物的第一步是从合适的环境中采集菌样，然后再 按一定的方法分离、纯化。 按一定的方法分离、纯化。培养嗜盐菌的菌样应 从 环境采集。 环境采集。 （2）富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生 长的特定环境条件，使群落中其数量大大增加， 长的特定环境条件，使群落中其数量大大增加，从 而分离出所需微生物的培养方法。 而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉 酶微生物的富集培养应选择 基，并在 条件下培养。 条件下培养。 的培养
④向定量纤维素分解菌培养液中加入定量
(2)固定化酶 (2)固定化酶
纤维素， 纤维素，定时测定葡萄糖产量的变化
全国通用近年高考生物一轮复习选考部分生物技术实践课时训练(三十九)微生物的培养与应用(2021年整
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课时跟踪检测(三十九) 微生物的培养与应用1．苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中，对环境有严重危害.小明同学准备依据如图操作步骤，从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。
请回答下列问题：（1）酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作为碳源的有____________。
(2）将采集到的样品接种培养，苯酚用量应随转接次数增加而逐渐________，以达到富集酚降解菌的目的。
若上图平板中菌落过于密集，应进一步____________，以便于菌落计数与分离。
制备平板培养基时除了需要水、营养物质外,还必须添加________。
（3）右图为连续划线法示意图，在图中________（填图中序号）区域更易获得单菌落.(4）采用比色测定法(使用苯酚显色剂）检测降解后的废水中苯酚残留量.先制作系列浓度梯度并进行显色反应，下表中1~5号比色管的苯酚浓度应分别为________________________。
管号123456苯酚浓度（mg/L）1如果废水为________（填序号：①5 ②10 ③20)倍后，再进行比色。
2019届高考生物大一轮(课标通用)专题精品复习课件：专题22微生物的应用 (共66张PPT)
考点51
试做真题
透析真题
高手必备
萃取高招
对点精练
【答案】 (1)脲酶 分解尿素的细菌是异养生物,不能利用CO2来合成有机 物 为细胞生命活动提供能量,为其他有机物的合成提供原料 (2)尿素 其他两组都含有NH4NO3,能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细 菌都能利用NH4NO3,不能起到筛选作用 (3)为细菌生长提供无机营养,作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定
考点51
试做真题
透析真题
高手必备
萃取高招
对点精练
【答案】 (1)无菌水 泡菜滤液中菌的浓度高,直接培养很难分离得到单菌 落 (2)鉴别乳酸菌 中和产生的乳酸(或酸) 具有透明圈 (3)甘油 【解析】 本题考查微生物的培养及分离。 (1)分离纯化乳酸菌时,首先需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释,原因是 在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的乳酸菌被分散,培养后能在培养基 表面形成单个的菌落。 (2)在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有鉴别乳酸菌和中和乳 酸菌代谢过程中产生的乳酸;乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙, 故分离纯化时应挑选出具有透明圈的菌落作为候选菌。 (3)乳酸菌在-20 ℃长期保存时,菌液中常需要加入一定量的甘油。
考查频度 考查趋向 侧重考查 微生物的 培养和分 离、培养 5 年 9 考 基的制备 和用途、 ★★★★★ 果酒果醋 的制备、 腐乳泡菜 的制作等 技术操作
考点51
试做真题
透析真题
高手必备
萃取高招
对点精练
微生物的培养、计数与应用 1.(2017· 课标全国Ⅰ,37,15分,较低难度)某些土壤细菌可将尿素分解成CO2 和NH3,供植物吸收和利用。回答下列问题。 (1)有些细菌能分解尿素,有些细菌则不能,原因是前者能产生 。能分 解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源,原因是 。但可用葡 萄糖作为碳源,进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是 (答出两点即可)。 (2)为了筛选可分解尿素的细菌,在配制培养基时,应选择 (填“尿 素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”)作为氮源,不选择其他两组的原因 是 。 (3)用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用有 (答 出两点即可)。
2019版高考生物大一轮复习第49讲微生物的培养与应用优盐件201805032142
生物技术实践
第49讲 微生物的培养与应用
考纲要求 1．微生物的 分离和培养 2．某种微生 物数量的测 定 3．培养基对 微生物的选 择作用
考情分析命题趋势来自2017，全国卷Ⅰ，37T 微生物的分离和培养在新课标高考试卷中 出现频率较高，试题主要以非选择题的形 2016，全国卷Ⅰ，39T 式围绕培养基的种类和功能、微生物分离 2016，全国卷Ⅲ，39T 的方法和原理、平板划线法和稀释涂布平 板法的比较、透明圈的大小与分解能力或 2016，四川卷，10T 2015，全国卷Ⅰ，39T 抗菌能力的关系等内容进行命题，试题难 度一般不大 对微生物的筛选与计数的考查多以非选择 分值：12～15分 题的形式与微生物的分离、培养等内容相 结合进行考查
3．筛选流程 纤维素 的环境 土壤取样：富含__________ ↓ 选择培养：用选择培养基培养，以增加纤维素分解菌的数量
↓
梯度稀释 ↓ 涂布平板：将样品涂布于含CR的鉴别纤维素分解菌的培养基上 ↓ 纤维素酶 的菌落周围出现透明圈 挑选产生透明圈的菌落：产生____________
1．判断正误，正确的画“√”，错误的画“×”。 (1)倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上。( × )
三、分解纤维素的微生物的分离 1．纤维素酶 C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶 。 (1)组成：纤维素酶是一种复合酶，它包括__________________________ (2)作用
2．菌种筛选 刚果红染色法 (1)方法：________________ 。 (2)原理
是否产生透明圈 来筛选纤 即使用以纤维素为唯一碳源的选择培养基，根据__________________ 维素分解菌。
化学药品
学药品反应，产生明
【人教版】2019版高考一轮：12.1-微生物的培养与应用
鉴别 培养基中加入
用伊红—美
蓝培养基 鉴别大肠 杆菌
颜色 或其他 指示剂 或 _____ 培养 某种_______ 基 化学药品 变化
生物
二、消毒与灭菌
条件 较为 _____ 温和 消 的物理 毒 或化学 方法
结果
常பைடு நூலகம்方法
应用范围
仅杀死物体 煮沸消毒法 日常用品 表面或内部 巴氏消毒法 不耐高温的液体 的部分对人 体 有害 的 化学药剂消毒法 用酒精擦拭双手， 用氯气消毒水源 微生物
(2)将获得的 3 种待选微生物菌种甲、乙、丙分别接种在 1 L 含 20 mg 有机磷农药的相同培养液中培养(培养液中其他营 养物质充裕、条件适宜 )，观察实验开始到微生物停止生长 所用的时间，甲、乙、丙分别为 32 小时、45 小时、16 小时， 则应选择微生物__________(填“甲”“乙”或“丙”)作为 菌种进行后续培养，理由是____________________。 (3) 制备固体培养基的基本步骤是计算→__________→溶化 →分装→加棉塞→包扎→__________→倒平板。 (4)若要测定培养液中选定菌种的菌体数， 既可在显微镜下用 _________直接计数，也可选用_________法统计活菌数目。
即：使用以纤维素为唯一碳源的选择培养基，根据是否产生
透明圈 来筛选纤维素分解菌。 ________
3．筛选流程 土壤取样：富含 纤维素 的环境 ↓ 选择培养：用选择培养基培养，以增加纤维素分解菌的数量 ↓ 梯度稀释 ↓
涂布平板：将样品涂布到鉴别纤维素分解菌培养基上 ↓ 挑选产生透明圈的菌落：产生 纤维素酶的菌落 周围出 现透明圈
3.平板划线操作的注意事项 (1)操作第一步即取菌种之前及每次划线之前都需要对接种 环进行火焰灼烧灭菌，划线操作结束时，仍需灼烧接种环， 每次灼烧目的如下表：
2019年高考生物(全国版)一轮复习教案课件第49课生态工程(共17张PPT)
两 组 题讲 透
（1）传统农业由于大量施用化肥、农药，造成了严重的环境污染，因此我国 政府正大力推广经济效益、社会效益和生态效益相统一的生态农业，下列关于 生态农业的叙述不正确的是( A ) A.生态农业系统中食物链和营养级越多，在能量流动中消耗的能量越少 B.生态农业系统的抵抗力稳定性比现代农业高 C.生态农业系统设计的指导原则是能量的多级利用和物质的循环再生 D.生态农业系统属于人工生态系统，人的作用非常突出
第49课 第（2）题 P353
解析： 大规模种植马尾松一个品种，物种数目少，生态系统的抵抗力稳 定性较弱，容易受虫害的威胁，这种做法违背了物种多样性原理，故 B项正确。
8
of
22
8
小积累
第49课 小积累 P353
9
of
22
9
变式训练
（3）下列实例与相关生态工程基本原理，匹配最恰当的是 ( C ) A.无废弃物农业——应用了物种多样性原理 B.在养分稀少的深海有物种丰富的珊瑚礁——体现了物质循环再生的 原理 第49课 第（3）题 C.包孕吴越的太湖中水葫芦泛滥——违反了协调与平衡原理 P353 D.水乡的桑基鱼塘——应用了整体性原理 解析： 无废弃物农业主要应用了物质循环再生的原理，故A项错误。在养 分稀少的深海有物种丰富的珊瑚礁主要体现了物种多样性原理，故B项 错误。包孕吴越的太湖中水葫芦泛滥主要是违反了协调与平衡原理，故 C项正确。桑基鱼塘主要应用了系统的结构决定功能原理，故 D项错误。
第49课 第（1）题 P353
解析： 营养级越多，以热能形式散失的能量就越多，在能量流动中消耗的 能量也就越多，故A项错误，符合题意。生态农业系统，实现了废物资 源化和能量的多级利用；对害虫进行生物防治，有利于保护生物多样性， 提高生态农业系统的抵抗力稳定性，故B、C项课 第（1）题 P353
2019版高考生物大一轮复习第49讲微生物的培养与应用课时达标
课时达标第49讲1．幽门螺杆菌Hp)感染是急慢性胃炎和消化道溃疡的主要致病因素，在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。
实验基本步骤如下，请回答：配制培养基→灭菌、倒平板→X→培养→观察1)在生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做__选择培养基__。
2)配制培养基时，要加入尿素和__酚红__指示剂，这是因为Hp含有__脲酶__，它能以尿素作为__氮__源；若有Hp，则菌落周围会出现__红__色环带。
3)步骤X表示__接种__。
在无菌条件下操作时，先将菌液稀释，然后将菌液__涂布__到培养基平面上。
菌液稀释的目的是为了获得__单个__菌落。
4)临床上用14C呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将14C标记的__尿素__分解为NH3和14CO2。
解析1)选择培养基是指在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。
2)由于Hp细菌能合成脲酶，脲酶将尿素分解成氨，会使培养基碱性增强，pH升高，酚红指示剂变红。
3)步骤X表示接种。
在无菌条件下操作时，先将菌液稀释，然后将菌液涂布到培养基平面上。
菌液稀释的目的是为了获得单个菌落。
4)用14C呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将14C标记的尿素分解为NH3和14CO2。
2．烧伤病人容易感染绿脓杆菌，引起化脓性感染，比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素都是非常经典的抗绿脓杆菌的药物。
临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。
实验时，从病人身上获取少量样本，按照一定的实验步骤操作，以确定该病人体内的绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性。
1)获取绿脓杆菌单菌落：配制适于绿脓杆菌生长的培养基，培养基中的营养成分一般含有__碳源__、氮源、生长因子、水和无机盐，调节pH至7，灭菌处理，待培养基冷却至50 ℃时，在__酒精灯火焰__附近倒平板。
经过选择培养、鉴别等步骤获得单菌落。
2019版高考生物大一轮复习第49讲微生物的培养与应用优盐件
2016，四川卷，10T 板法的比较、透明圈的大
2015，全国卷Ⅰ，39T
抗菌能力的关系等内容进 度一般不大
对微生物的筛选与计数的
分值：12～15分 题的形式与微生物的分离 板块三 板块四
一、微生物的实验室培养
1．培养基 (1)概念：人们按照微生物对___营__养__物__质___的不同需求，配制 __营__养__基__质____。
2．微生物的纯化培养——平板划线法与稀释涂布平板法
方法
平板划线法
稀释涂布
(1)接种环的灼烧：①第一次划线前： (1)稀释操作时：每
杀死接种环上的微生物，避免污染培 mL水、移液管等均
养物；②以后每次划线前：杀死残留 ，试管口和移液管
菌种，保证每次划线菌种来自上次划 1～2 cm处
注 线末端；③划线结束后：杀死残留菌 (2)涂布平板时：①
二、土壤中分解尿素的细菌的分离和计数
1．菌种筛选：使用尿素是唯一氮源的选择培养基培养。 2．统计菌落数目：常用方法有___稀__释__涂__布__平__板__法___、显微镜 3．细菌分离与计数的实验流程 土壤取样→配制__培__养__基____→微生物的培养与观察→细菌的计
三、分解纤维素的微生物的分离
(2)纯化大肠杆菌 ① 原 理 ： 在 培 养 基 上 将 细 菌 稀 释 或 分 散 成 __单__个__细__胞____ ， 使
落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。 ②方法：___平__板__划__线__法___、_稀__释__涂__布__平__板__法_____。
(3)菌种的保藏 ①短期保存：___固__体__斜__面__培__养__基___上4 ℃保存，菌种易被污染 ②长期保存：_甘__油__瓶_____中－20 ℃在冷冻箱中保藏。
2019版高考生物大一轮复习第49讲微生物的培养与应用考题集萃实战演练
第11章第49讲1．2017·全国卷Ⅰ)某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。
回答下列问题：1)有些细菌能分解尿素，有些细菌则不能，原因是前者能产生__脲酶__。
能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源，原因是__分解尿素的细菌是异养生物，不能利用CO2来合成有机物__，但可用葡萄糖作为碳源，进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是__为细胞生命活动提供能量，为其他有机物的合成提供原料__答出两点即可)。
2)为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时，应选择__尿素__填“尿素”“NH4NO3”或“尿素＋NH4NO3”)作为氮源，不选择其他两组的原因是__其他两组都含有NH4NO3，能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3，不能起到筛选作用__。
3)用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有__为细菌生长提供无机营养，作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定__答出两点即可)。
解析1)土壤中的某些细菌之所以能够分解尿素，是因为它们能产生脲酶。
尿素分解菌是异养生物，不能利用CO2来合成有机物，必须利用现成的有机物作为能源物质；葡萄糖通过呼吸作用被分解时，能为细胞生命活动提供能量，同时，葡萄糖还可以转化成脂肪、氨基酸等物质。
2)选择培养基是只允许特定种类的微生物目的微生物)生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。
本实验的目的菌是可分解尿素的细菌，因此，配制的培养基应只允许尿素分解菌生长，NH4NO3可以作为所有细菌的氮源，培养基中如含有NH4NO3，将不能起到筛选作用。
3)KH2PO4和Na2HPO4能为细菌生长提供钾盐、钠盐和磷酸盐，而H2PO－4/HPO2－4可以使培养基中pH保持相对稳定。
2．2016·全国卷Ⅰ)空气中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。
某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。
【2019年高考二轮课程】生物全国通用版微生物的培养与应用
物的培养与应用1.以下是在推进生态文明建设过程中，合理利用微生物的实例。
①农作物秸秆可用于还田、造纸、养殖蘑菇、生产乙醇等，既能解决集中焚烧污染环境问题，又能变废为宝。
②农业生产上广泛使用的除草剂在土壤中不易被降解，长期使用会污染土壤，可选育^降解该除草剂的细菌修复被污染的土壤。
请回答：〔1〕用于生物工程的目的菌大多是从自然环境中筛选纯化出来的。
在选育能分解除草剂〔一类含氮有机物〕的目的菌时，应将土壤浸出液接种在以为唯一氮源的固体培养基上。
对固体培养基进行灭菌处理常用的方法是，为检测灭菌效果可对培养基进行。
〔2〕稻杆还田以及利用秸秆生产乙醇的过程都需要以纤维素为的微生物。
分离该类微生物时应用含纤维素的培养基进行培养，并加入形成红色复合物进行筛选，目的菌应从周围有的菌落中选取。
〔3〕生产乙醇过程中常用的微生物是，发酵过程中检测该微生物数量可采用的方法有显微直接计数〔或血球计数板〕法和，后者统计得到的菌落数目往往比活菌的实际数目。
2.为探究大肠杆菌CV101菌株和CV103菌株的营养需求，某团队在营养成分相同的含醋酸盐的培养液中分别接种CV101菌株和CV103菌株，并置于相同且适宜的环境中培养，每隔一段时间统计两种菌株的生长状况。
实验数据如以下图所示，回答以下问题：〔1〕醋酸盐培养基从物理性质上来看属于培养基，该培养基主要应用是；从功能上来看属于培养基。
〔2〕由图可知:更适应醋酸盐培养基环境的菌株是，其依据是，原因是。
〔3〕假设要统计培养30小时后醋酸盐培养基中的CV101活菌数，可采用法；为保证能在固体培养基上获得单个菌落，接种前，需取1 mL该菌液进行处理。
3.乳酸是一种重要的多用途有机酸。
为得到高产乳酸的菌种并降低其培养成本，科学家利用辣白菜为材料进行了如下筛选纯化过程：〔1〕配制培养基:基础液体培养基中需含有细菌生长必须的，分离液体培养基是在基础培养基的基础上加入0.lg/L溴甲酚紫〔酸碱指示剂，酸性条件下变黄〕，分离固体平板是在液体培养基的基础上加入CaC O3和。
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课时达标第49讲
1．幽门螺杆菌感染是急慢性胃炎和消化道溃疡的主要致病因素，在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。
实验基本步骤如下，请回答：
配制培养基→灭菌、倒平板→X→培养→观察
在生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做__选择培养基__。
配制培养基时，要加入尿素和__酚红__指示剂，这是因为Hp含有__脲酶__，它能以尿素作为__氮__源；若有Hp，则菌落周围会出现__红__色环带。
步骤X表示__接种__。
在无菌条件下操作时，先将菌液稀释，然后将菌液__涂布__到培养基平面上。
菌液稀释的目的是为了获得__单个__菌落。
临床上用14C呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将14C标记的__尿素__分解为NH3和14CO2。
解析选择培养基是指在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。
由于Hp细菌能合成脲酶，脲酶将尿素分解成氨，会使培养基碱性增强，pH升高，酚红指示剂变红。
步骤X表示接种。
在无菌条件下操作时，先将菌液稀释，然后将菌液涂布到培养基平面上。
菌液稀释的目的是为了获得单个菌落。
用14C呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将14C标记的尿素分解为NH3和14CO2。
2．烧伤病人容易感染绿脓杆菌，引起化脓性感染，比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素都是非常经典的抗绿脓杆菌的药物。
临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。
实验时，从病人身上获取少量样本，按照一定的实验步骤操作，以确定该病人体内的绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性。
获取绿脓杆菌单菌落：配制适于绿脓杆菌生长的培养基，培养基中的营养成分一般含有__碳源__、氮源、生长因子、水和无机盐，调节pH至7，灭菌处理，待培养基冷却至50 ℃时，在__酒精灯火焰__附近倒平板。
经过选择培养、鉴别等步骤获得单菌落。
检测绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性：取该单菌落适当稀释，用__涂布平板__法接种于固体培养基表面，使其均匀生长，布满平板。
将分别含等剂量的比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素的相同大小的小滤纸圆片均匀置于该平板上的不同位置，适宜条件培养一段时间，结果是含不同抗生素的滤纸片周围均出现透明圈，这说明绿脓杆菌对上述抗生素__敏感__；含头孢菌素的滤纸片周围的透明圈比含美罗培南的小，这说明__绿脓杆菌对头孢菌素的敏感性比美罗培南弱__；含比阿培南、碳青霉烯类的滤纸片周围的透明圈也比含美罗培南的小，且比阿培南透明圈中出现了一个菌落，请推测此菌落产生的可能原因：一是__杂菌污染__，二是__抗比阿培南的绿脓杆菌或绿脓杆菌产生耐药性突变)形成的菌
落__。
根据上述实验结果，为达到抗绿脓杆菌的目的，对于该患者来说最好应选用抗生素__美罗培南__。
3．在农业生产研究上，常需要进行微生物的分离和计数。
下表为两种微生物的培养基配方：
A组
B
①从功能上来看，上述两种培养基均属于__选择__培养基。
②如果要对土壤中分解尿素的细菌进行分离，则需要选择__A填“A”或“B”)培养基，该培养基中的碳源是__葡萄糖__。
③在分离尿素分解菌所用的培养基中可加入__酚红__指示剂，根据指示剂的颜色可鉴定某种细菌能否分解尿素，若有分解尿素的细菌，培养基将会呈现__红色__。
如图是某同学采用的接种微生物的方法，请回答下列问题：
①本实验采用的接种微生物的方法是__平板划线__法，把聚集的菌种逐步__稀释__分散到培养基的表面，为达到这一目的，操作上应注意：__每次划线前接种环要灼烧；冷却后从上一次划线的末端开始划线至少答2项)。
②三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下统计结果：
甲同学涂布了两个平板，统计的菌落数是236和260，取平均值248；
乙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是210、240和250，取平均值233；
丙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是21、212和256，取平均值163；
在三位同学的统计中，__乙__同学的统计是正确的。
解析①据题表中的培养基的配方分析，A组中的氮源为尿素，应该是筛选尿素分解菌的选择培养基；B组中的碳源是纤维素，应该是筛选纤维素分解菌的选择培养基。
②对土壤中分解尿素的细菌进行分离，需要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，应当选择A 组培养基，该培养基中的碳源是葡萄糖。
③尿素分解菌可以用酚红指示剂进行鉴定。
尿素分
解菌产生的脲酶能够将尿素分解为氨而使pH升高，使酚红指示剂呈红色。
①据图分析，图示表示平板划线法接种，是把聚集的菌种逐步稀释到培养基的表面，操作上应注意每次划线前接种环要灼烧，冷却后从上一次划线的末端开始划线。
②在进行平板菌落计数时，应选择菌落数在30～300之间的平板进行计数，同时为减少实验误差应选择至少3个或3个以上的平板进行计数并取平均值。
4．如图为利用农作物废弃物——秸秆代替粮食作为原料生产燃料乙醇的主要技术及废弃物利用的流程图。
请回答：
图中①所需微生物可从土壤中获取，获取该微生物的过程称为微生物的__分离__，选择培养基应以__纤维素__为唯一碳源。
纯化菌种时，将筛选获得的菌液稀释后用__稀释涂布平板__法接种到培养基上。
在筛选纤维素分解菌的过程中，常采用__刚果红染色__法，__刚果红__能与培养基上的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物就无法形成，培养基上就会出现以纤维素分解菌为中心的__透明圈__，可以此来筛选纤维素分解菌。
图中①也可以采用酶解法。
将酶应用于生产实践之前需对酶进行__酶活力或酶活性)__的检测。
图中②酒精发酵阶段接种的微生物是__酵母菌__，酒精发酵时一般将温度控制在__18～25__℃。
在培养微生物的过程中，对培养基和接种环采用的灭菌方法分别是__高压蒸汽灭菌__、__灼烧灭菌__。
乙醇纯化一般需要使用__蒸馏__法。
图中③产生的农作物废弃物，主要成分为木质素、纤维素和半纤维素，但是酵母菌无法直接利用农作物废弃物，原因是其__缺乏相应分解酶系或缺乏能分解木质素、纤维素和半纤维素的酶)__。
若要利用图示中的发酵产物生产醋酸，常用的菌种为__醋酸菌__，则下一阶段的发酵过程中应通入__无菌空气__，温度严格控制在__30～35__℃。
5．研究被石油污染过的土壤中细菌数量，并从中筛选出能分解石油的细菌。
为了分离和纯化高效分解石油的细菌，科研人员利用被石油污染过的土壤进行如图1所示的实验。
配置好的培养基通常可以使用__高压蒸汽灭菌__法灭菌。
与步骤②中培养基成分相比，步骤③中培养基成分的最大区别是__石油是唯一碳源__。
接种细菌常用的方法有__平板划线法和稀释涂布平板法__。
若经过④过程后获得的结果为图2所示，则所操作方法如下图__甲__所示。
步骤⑤后取样测定石油含量的目的是__筛选出分解石油能力最强的细菌__。
对步骤⑤某瓶中细菌计数的方法有两种，一种方法是__稀释涂布平板法__，其菌落数可代表活菌数；另一种方法是__显微镜直接计数或血球计数板计数法)__，该方法需要借助一块特殊的载玻片，其名称为__血细胞计数板或血球计数板)__。