再竭运动恢复期大鼠纹状体微透析液中Glu和GABA含量的变化

微透析液。 每一时刻收集时间为 ３ ０ ｍｉ ｎ ， 提前 １ ５ ｍｉ ｎ开始采集。
收集完成后立即转入 一 ８ ０ ℃低温冰箱保存。
能［ ８ － ９ ］ ｏ因此本研 究采 用微透析技术 取得纹状体细胞 外液 样
品，利用毛细管电泳一激光诱导荧光技术对其中所含 Ｇｌ ｕ及
ＧＡ Ｂ Ａ含 量 进 行测 定 ，动态 观 察 力竭 运 动 ２ ４ ｈ恢 复期 纹状 体
ＤＶ： ． ２ ． ６ ａｍ），在定位部位用颅钻在头骨钻一直径约为 １ ｒ ． ５ ｏｎ ｔ ｉ 的ｄ ｑＬ ，于定位 头骨 表面 下植入 一根直径 １ ． ３ ０ ｍｍ，长 １ ４ ｍｌ ｎ的灭菌不锈钢引导管 ，并用牙科水泥固定。
２ ． ３ 微透析采样
采样时小心将微透析探针沿 引导管探入右侧纹状体脑区， 利用微量注射泵将人工脑脊液 以２ １ ｔ ． ｌ ／ ｍｉ ｎ的速度恒速灌注 ， 平衡 １ ８ ０ ｍ ｉ ｎ ；分别于运动后 ４ ｈ 、５ ｈ 、６ ｈ 、８ ｈ 、２ ４ ｈ收集
ห้องสมุดไป่ตู้
疲劳与细胞外液 Ｇ ｌ ｕ 及Ｇ ＡＢ Ａ含量之间的关系提供实验依据 。
１ 实验材料
１ ． １ 实验 动物 及分组
１ ２只 Ｓ Ｄ 雄性成年大 鼠体重为 ２ ０ ０～ ２ ３ ０ ｇ ，随机分为 两组：（ １ ） 安静对照组 Ａ（ ｎ ＝ ６ ） 正常饲 养， 不施加运动；（ ２ ） 力竭运动组 Ｂ （ ｎ ＝ ６ ）进行一次性 力竭游泳运动 ；分养于室 温下 （ １ ８～ ２ ５ ℃） ，自然光照周期 ，自由进食饮水 。
２ ． ５ 微透析样品检测
采 用毛细 管 电泳一 激光 诱导荧光技 术测 定大 鼠纹 状体 脑区微透 析液 中 Ｇ ｌ ｕ 、Ｇ ＡＢ Ａ含量 。 ２ ． ６ 数据处理 所 有数据均采用平均数 ± 标准差 （ Ｘ±Ｓ Ｄ）表示 ，用 ｓ ｐ ｓ ｓ １ ３ ． ０ 对数据进行重复测量 资料 的方差分析 ，ａ为 ０ ． ０ ５ 。
微 量注 射泵 、连接 管均 为美 国 ＢＡＳ公司 ；所 用水 均为 超 纯水 （ 去离 子水用 Ｍｏ ｌ ｌ ｉ ｐ ｏ ｒ ｅ公司生产 的 ｍｉ ｌ ｌ ｉ ｐ ｏ ｒ ｅ ｗａ ｔ ｅ ｒ
用２ ０ ％ 乌 拉坦 按 １ ｇ ／ ｋ ｇ体 重 剂量腹 腔 注射 麻醉 ，每 ６小 时采 用皮下注 射法补注 射相 同剂 量的乌拉坦 。将 麻醉 大 鼠 固定在脑立体 定位仪上 ，根据 《 大 鼠脑立体 定位 图谱 》对
大 鼠右 侧 纹 状 体 进 行 定 位 （ 坐标 为 ＡＰ ： ＋ ｌ ｍｍ ＭＬ： ＋ ２ ． ８ ｍｍ
安静对照组 Ａ采用相 同的方法采集微透析样品。 ２ ． ４ 脑组织学鉴定
将 完成微透 析取样 的大 鼠断头 处死，取全脑 ，福尔 马 林 中过夜 ， 固定后切 片， 检查微透 析探针 是否插入纹状体 中， 微透析探针未准确插入纹状体的数据不采用。
细胞外液 Ｇ ｌ ｕ及 Ｇ Ａ ＢＡ含量 的变化 ，了解 同一研究对象在力 竭运动恢复期不同时段 Ｇｌ ｕ 、 Ｇ Ａ Ｂ Ａ释放的变化特征及规律 ， 揭示运动性 中枢疲劳的产生及恢复机制，为探索运动性中枢
游泳动作明显失调，在水 中放射性乱窜 ，不能再坚持； （ ２ ） 沉入水底不能回到水面超过 １ ０ Ｓ ｌ １ 。
２ ． ２ 纹状体脑区定位手术
力 竭 运 动 组 大 鼠在 游 泳 力 竭 运 动 后 ， 擦 干 身 上 水 渍 ，
技术条件 的限制，运动性 中枢疲劳研 究进展缓慢。近年来随
ＡＣ Ｅ ＭＤ Ｑ毛细管 电泳仪 ，毛细管柱总长度 ５ ７ ｃ ｍ，有效长
度５ ０ ｃ ｍ，内径 ７ ５ ｍ，外径 ３ ７ ５ ｕ ｍ）；Ｉ ２ Ｃ型脑立体定
位 仪 购 自美 国 ｓ ｔ ｏ ｔ ｉ ｎ ｇ公 司 ；微 透 析 探 针 （ 型 号为 Ｉ Ｂ Ｒ ４ ）、
１ ． ２ 实验仪器和试 剂
毛细 管 电泳一 激光诱 导荧光系 统 （ 美 国贝克曼公 司 Ｐ ／
３ 研究结果
３ ． １ 力竭运动恢 复期大 鼠纹状体细胞外液 Ｇｌ ｕ含量的变化
表 １ 、图 ｌ 表 明 力 竭 运 动 后 ４～ ２ ４ ｈ恢 复 期 大 鼠纹 状 体 细 胞 外 液 中 Ｇｌ ｕ含 量 呈 现 先 上 升 后 下 降 的 趋 势 ， 力 竭 运
Ｓｐｏ ｒ ｔ Ｓｃ ｉ ｅｎ ｃ ｅ Ｒｅ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈ
早在 ｌ ９世 纪 末期 ，意大 利 都灵 大 学 的著名 生 理 学家 Ａｎ ｇ ｅ ｌ ｏ Ｍｏ ｓ ｓ ｏ利用记功器记录中指屈肌在随意运动及 电刺激 时的收缩情况，其认 为肌 肉疲劳的影响因素来源于中枢 （ 脑 和脊髓 ）和 外周 （ 神经 肌 肉接 头和骨骼 肌 ）［ １ ］ ，由于当时
着生理学、生物化学和神经生物学的发展及新型分析技术 的 应用 ，运动性中枢疲 劳逐渐成为体育科学领域研究的热点问 题 。众多学者认为长时间运动时及其恢 复期 ，脑 内神经递质 含量 的变化及不同递质之 间平衡的破坏 导致 了运动性中枢疲 劳的发生 口 ： 中枢神经系统 （ ｃ ｅ ｎ ｔ ｒ ａ ｌ ｎ ｅ ｒ ｖ ｏ ｕ ｓ ｓ ｙ ｓ ｔ ｅ ｍ，Ｃ ＮＳ ） 氨基酸类神经 递质含量发生变化 ，影响 Ｃ ＮＳ的兴奋 与抑 制 过程 ，是运动 性中枢疲劳产生 的可能机制之一 ［ ６ － ７ ］ ｏ谷氨 酸 （ ｇ ｌ ｕ ｔ ａ ｍａ ｔ ｅ ，Ｇ ｌ ｕ ）和 ｙ。 氨基丁酸 （ ｙ． ａ ｍｉ ｎ ｏ － ｂ ｕ ｔ ｙ ｒ ｉ ｃ ａ ｃ ｉ ｄ ， Ｇ ＡＢ Ａ）分别是脑 内最重要的兴奋性及抑制性氨基酸类神 经 递质 ，直接参 与 Ｃ ＮＳ兴奋及抑制过程 的调控 ；另外 有学者 认为 Ｇ ｌ ｕ ／ Ｇ ＡＢ Ａ 比值的变化可以在一定程度上反映脑 内氨基 酸类神经递质之 间的平衡情况，影响中枢神 经系统 的生理功