血红蛋白含量的测定血型鉴定

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实验目的
掌握血红蛋白的测定方法; 学习鉴定血型的基本方法,观察红细胞凝集现
象,掌握ABO血型和Rh血型鉴定的原理; 学习并掌握人体间接测压法的原理和方法; 学习心电图波形的测量方法;了解人体正常心
电图各波的波形及其生理意义。
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实验材料
0.1mol/L盐酸溶液; 显微镜、载玻片、刺血针、消毒牙签、A型和B
型标准血清、生理盐水、酒精棉球、抗D血清 等; 血压计、听诊器等; 心电图机、酒精棉球等。
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方法与步骤-1
于测定管内加入0.1mol/L盐酸溶液至百分刻度20处。 取20μl被检血液, 迅速将吸血管插入测定管底部盐酸
测定人体动脉血压最常用的方法是间接测压法, 是使用血压计在动脉外加压,根据血管音的变 化来测量动脉血压的。
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用压脉带在上臂给肱动脉加压,当外加压力超过动 脉的收缩压时,动脉血流完全被阻断,此时用听诊 器在肱动脉处听不到任何声音。
外加压力低于动脉内的收缩压而高于舒张压时,则 心脏收缩时,动脉内有血流通过,舒张时则无,血 液断续地通过血管,形成涡流而发出声音。
心脏在收缩之前,首先发生电位变化。心电变化由 心脏的起搏点——窦房结开始,经特殊传导系统最 后到达心室肌,引起肌肉的收缩。
心脏的综合性电位变化可通过体液传播到人体的表 面,经体表电极引导并放大而成的波形为心电图。
心电图可以反映心脏内综合性电位变化的发生、传 导和消失过程。
心电图:心脏不同部位之间的电位差
因为这类抗原存在于所有恒河猴(rhesus monkey) 的红细胞上,故命名为RH因子。将凡能与这种抗RH 血清起反应的85%白人称之为RH阳性,不能起反应 的15%白人称之为RH阴性。
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实验原理-动脉血压测定
通常血液在血管内流动时并没有声音,但如给 血管以压力而使血管变窄形成血液涡流时则可 发生声音(血管音)。
液中,缓慢挤出血液,再吸取上部清液,反复冲洗 吸血管2~3次,并混匀,静置10min。 沿着管壁加入蒸馏水,逐步稀释至与标准色柱色调 一致后,读取重量(或百分)刻度值报告结果。
❖ 标准制换算:血红蛋白(g/L)=血红蛋白(g/dl)×10
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方法与步骤-2
取一清洁玻片,用蜡笔划上记号,左上角写抗B字,右上角写抗A字。 用小滴管吸A型标准血清(抗B)一滴加入左侧,用另一小滴管吸B
外加压力等于或小于舒张压时,则血管内的血流连 续通过,所发出的音调突然降低或声音消失,故恰 好可以完全阻断血流所必须的最小管外压力(即发 生第一次声音时)相当于收缩压。在心舒张时有少 许血流通过的最大管外压力(即音调突然降低时) 相当于舒张压。
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实验原理-心电图的描记
松紧应适宜。受试者手掌向上平放于台上,压脉带应 与心脏同一水平 在肘窝部找到动脉搏动处,左手持听诊器的胸具置于 其上。注意:不可用力下压
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听取血管音变化右手持打气球,向压脉带打气加压,此 时注意倾听声音变化,在声音消失后再加压30mmHg, 然后扭开打气球之螺丝,缓慢放气(切勿过快),此时 可听到血管音的一系列变化,声音从无到有,而后由低 而高,突然变低,最后完全消失。然后扭紧打气球螺丝 继续打气加压,反复听取声音变化2-3次。
抗体或凝集素存在于血清中,与红细胞的不同抗 原起反应,产生凝集,最后溶解,由于这种现象, 临床上在输血前必须注意鉴定血型,以确保安全 输血。
通常输血反应中大多数注意ABO血型系统,其次 为Rh血型。
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Rh血型系统
1940年,landersteiner与wiener用恒河猴RBC免疫学 得到一种抗体,发现抗血清不仅能与猴子RBC发生反 应,还与纽约85%白人的RBC发生反应。
型标准血清(抗A)一滴加入右侧。 穿刺手指取血,玻片的每侧各放入一小滴血,用牙签搅拌,使每侧
抗血清和血液混和。 静置室温下10-15min后,观察有无凝集现象,假如只是抗A侧发生凝
集,则血型为A型;若只是抗B侧凝集,则为B型;若两边均凝集, 则为AB型;若两边均未发生凝集,则为O型。
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实验原理-血红蛋白含量测定
红细胞与盐酸作用生成褐色盐酸高铁血红蛋白。 经稀释与标准色柱比色,即可求得血红蛋白含 量。
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实验原理-血型鉴定
血型一般指红细胞的血型,是根据红细胞膜外表 面存在的特异性抗原(镶嵌于红细胞膜上的糖蛋 白和糖脂)来确定的,这种抗原或凝集原是由遗 传决定的。
测量动脉血压重复上一操作,同时注意检压计之水银柱 和声音变化。在徐徐放气减压时,第一次听到血管音的 水银柱高度即代表收缩压。在血管音突然由强变弱时的 水银柱高度即代表舒张压。记下测定数值,将压脉带内 的空气放尽,使压力降至零。
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方法与步骤-4
受试者安静平卧,全身肌肉松弛 按要求将心电图机面板上各控制钮置于适当位置。在心
Rh血型鉴定
取干净玻片1个,滴入抗D血清及受检者 血液各1滴,混匀,20 min后观察。凝集者 为Rh阳性,否则为Rh阴性。
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方法与步骤-3
受试者脱左臂衣袖,静坐5min。 松开打气球上的螺丝,将压脉带内的空气完全放出,
再将螺丝扭紧。 将压脉带裹于左上臂,其下缘应在肘关节上约3cm处,
电图机妥善接地后接通电源,预热5min。 安放电极。把准备安放电极的部位先用酒精棉球脱脂,
再涂上导电糊,以减小皮肤电阻。 连接导联线。按所用心电图机之规定,正确连接导联线。
一般以5种不同颜色的导联线插头与身体相应部位的电 极连接,上肢:左黄、右红;下肢:左绿、右黑。
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