胰头部氩氦刀冷冻手术动物实验的护理 广州复大肿瘤医院

胰头部氩氦刀冷冻手术动物实验的护理１）Ｎｕｒｓｉｎｇ　ｃａｒｅ　ｏｆ　ａｎｉｍａｌ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ　ｏｎ　ｃｒｙｏａｂｌａｔｉｏｎ　ｓｕｒｇｅｒｙ　ｉｎｈｅａｄ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐａｎｃｒｅａｓ　ａｎｉｍａｌ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ姚　飞，邓春娟，李书英，邓春梅，曾健滢，陈继冰，李家亮，牛立志，徐克成Ｙａｏ　Ｆｅｉ，Ｄｅｎｇ　Ｃｈｕｎｊｕａｎ，Ｌｉ　Ｓｈｕｙｉｎｇ，ｅｔ　ａｌ（Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ　Ｆｕｄａ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆＧｕａｎｇｚｈｏｕ　Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ　５１０６６５Ｃｈｉｎａ）摘要：［目的］以西藏小型猪为动物模型探讨胰头部氩氦刀冷冻手术的护理配合，以保证手术的顺利进行。

［方法］８头西藏小型猪胰头部采用美国氩氦刀冷冻，２头作为实验对照。

所有参与实验的西藏小型猪术前、术中和术后均实施严格的整体护理。

［结果］１０头西藏小型猪顺利完成手术，均于术后第２天恢复，术后７ｄ均存活。

［结论］在西藏小型猪胰头部氩氦刀冷冻手术中实施严格的护理措施，有利于冷冻手术的顺利实施。

关键词：西藏小型猪；氩氦刀；胰头部冷冻；护理中图分类号：Ｒ４７１ 文献标识码：Ｃ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００９－６４９３．２０１２．１３．０１９ 文章编号：１００９－６４９３（２０１２）５Ａ－１２００－０２ 胰腺癌是世界范围内临床常见的消化道恶性肿瘤，占消化道恶性肿瘤的８％～１０％、全身恶性肿瘤的１％～４％。

胰腺癌的治疗方法主要是手术切除，但切除率较低，通常为１５％左右［１］。

对于不可切除的胰腺癌，化疗是治疗进展期胰腺癌的主要手段，但效果极为有限，病人中位生存期为４个月～６个月。

目前，以氩氦冷冻技术为代表的冷冻疗法在中晚期胰腺癌治疗中已进行初步尝试，并取得一定进展［２］，但还需对胰腺冷冻的安全性和有效性进行进一步评估［３］。

西藏小型猪具有体型小、生长性能稳定，其胰腺解剖结构接近人类的特点，是胰腺冷冻研究较好的动物模型［４］。

因此，本次实验选择西藏小猪作为胰头部氩氦冷冻手术的动物模型。

由于胰腺位于上腹后侧，术位隐蔽，且毗邻胃、十二指肠、肝脏、门静脉等重要脏器，氩氦刀冷冻穿刺操作难度大，手术护理及相关监测至关重要。

我院成功对１０头西藏小型猪进行胰头部氩氦刀冷冻实验，对围术期护理过程进行初步总结，现报告如下。

１　材料与方法１．１　实验动物　西藏小型猪１０头，雄性，体重２５ｋｇ～３０ｋｇ，普通级，动物生产许可证号为［ＳＣＸＣ（粤）２００６２００１５］，动物合格证号为［粤监证字００８７２３８］，由南方医科大学实验动物中心提供。

术前从锁骨下缘中心静脉丛采血，测得白细胞计数（ＷＢＣ）、血小板计数（ＰＬＴ）、红细胞比积（ＰＣＶ）、尿蛋白（ＰＲＯ）均在正常参考值内，测淀粉酶、白介素－６、白介素－８及Ｃ反应蛋白值无异常。

１．２　手术器材及药品准备　异氟烷由上海雅培制药有限公司提供，批号７１５７６５Ｕ；速眠新Ⅱ注射液由长春军需大学兽医研究所提供。

治疗前做好准备工作：包括电源、冷冻刀（２ｍｍ）、氩气罐、氦气罐与氩氦刀主机的确切连接；冷冻刀的冷冻和复温的测试；检查氩氦冷冻治疗系统（ＥＮＤＯＣＡＲＥ，Ｃｒｙｏｃａｒｅ　ｓｙｓｔｅｍ）、监护仪（ＰＨＩＬＩＰＳ，Ｍ８００１Ａ）、麻醉呼吸机（ＭＩＤＭＡＲＫ，ＭａｔｒｘＶＩＰ　３０００Ｓｅｒｉａｌ）、开腹器械等。

１．３　方法　８头西藏小型猪分为１０％氩气冷冻组和１００％氩气冷冻组，每组４头。

麻醉后取仰卧位，沿剑突下缘在腹白线开口，切口约１５ｃｍ，分离并暴露胰腺，找准胰头部，距离十二指肠和门静脉各１ｃｍ处直视下将直径２ｍｍ的冷冻刀插入胰头部区域，且保持冷冻刀与脏面垂直，插入深度约１ｃｍ，开启氩气（冷媒）冷冻胰头。

１头猪为插针不冷冻组，麻醉、开腹手术方法同上，但仅将冷冻刀插入胰头部，不予冷冻，维持１０ｍｉｎ后拔针，关腹。

１头猪为正常对照组，麻醉下开腹，找到胰头部后不予插针，不冷冻，关腹。

１．３．１　１０％氩气冷冻组　以１０％氩气输出功率激活冷冻刀，记录冷冻中心点温度。

冷冻５ｍｉｎ后关闭氩气，用游标卡尺测量胰头部表面冷冻区域最大横径并拍照记录，开启氦气（热媒），快速复温５ｍｉｎ达到２０℃～３０℃，关闭氦气。

重复下一个循环，两个循环后关闭氦气，退出冷冻探刀。

冷冻完成后，于冷冻中心点缝一黑丝线作标记。

针孔填以浸泡凝血酶的明胶海绵。

冷冻结束后缝合包扎腹部。

１．３．２　１００％氩气冷冻组　以１００％氩气输出功率激活冷冻探刀，其他操作同１０％氩气冷冻组。

２　结果１０头实验西藏小型猪术中无死亡，均于术后３ｈ～５ｈ清醒，２４ｈ内可自行站立，术后第２天恢复正常进食及排便。

术后７ｄ存活率达１００％。

３　护理３．１　术前护理３．１．１　实验动物准备及监护　术前禁食２４ｈ、禁水１２ｈ，投喂硫酸新霉素［１００ｍｇ／（ｋｇ·ｄ）］拌料来降低肠道内微生物的数量，连用２ｄ。

术晨给予清洗，先用肥皂水擦洗全身，再用清水冲洗。

受体猪备皮范围较广，包括双耳、颈下部、四蹄内侧及整个腹部。

麻醉后取仰卧位固定，开放颈内动、静脉并连接三通，分别监测平均动脉压及中心静脉压，同时便于术中快速补液；在猪左右前肢及左下肢粘贴心电监护电极片，尾部夹以脉搏氧合探头监测心率、呼吸、血氧饱和度（ＳｐＯ２）。

实验全程应用电热毯保温。

３．１．２　麻醉　术前称重，按０．１ｍＬ／ｋｇ从耳后颈部肌肉注射速眠新Ⅱ注射液制动。

选用１Ｌ贮气囊，纯氧与异氟烷混合气体充满麻醉紧闭回路６０ｓ。

采用面罩吸入麻醉混合气体，设定氧流量为１　０００ｍＬ／ｍｉｎ，异氟烷初始浓度为３％，直至睫毛、角膜反射消失，钳夹肢体末端无反应时，仰卧位固定。

麻醉机辅助呼吸，设定呼吸频率为２０／ｍｉｎ～２５／ｍｉｎ，潮气量为１０ｍＬ／ｋｇ～１５ｍＬ／ｋｇ。

１）为广东省卫生厅医学科研基金，编号：ＷＳＴＪＪ２００９０４０１４４０１０６１９６６０２１５４７５６。

·００２１·ＣＨＩＮＥＳＥ　ＮＵＲＳＩＮＧ　ＲＥＳＥＡＲＣＨ　Ｍａｙ，２０１２Ｖｏｌ．２６Ｎｏ．５Ａ３．２　术中护理３．２．１　麻醉观察与控制　术中应保持一定麻醉深度。

麻醉过浅容易出现体动，从而影响手术操作；麻醉过深则易导致呼吸循环抑制，出现死亡。

此时护理的主要任务是监控麻醉深度，防止术中发生意外。

为此，术中对异氟烷浓度应作适当的调整，切皮开始，异氟烷吸入浓度调为２．０％～３．５％；术中调整为１．０％～１．５％维持麻醉；关腹时异氟烷浓度调低至０．５％；开始缝皮时切断异氟烷的供给，提高氧气输入量，洗肺并维持３ｍｉｎ～５ｍｉｎ，直至猪出现复苏症状，随后切断氧气供应后送复苏间单独关笼复苏。

全程予以麻醉记录。

３．２．２　生命体征的监测及护理　术中保持连续监测。

监视仪器各部分的运作情况，确保实验过程中仪器的安全运转。

密切注意猪的生命体征，１０ｍｉｎ记录１次心率、呼吸及ＳｐＯ２。

当术中发生心动过缓（心率＜４０／ｍｉｎ）时，静脉注射阿托品０．５ｍｇ；当发生低血压（收缩压＜８０ｍｍＨｇ，１ｍｍＨｇ＝０．１３３ｋＰａ）时，静脉注射麻黄碱１０ｍｇ。

适当调整氧流量，使ＳｐＯ２值维持在９５％～１００％。

用电热毯做好猪的保温措施，保证手术室环境温度维持在２５℃～２８℃，每隔１５ｍｉｎ记录１次体温。

同时保证手术期间动静脉通道畅通。

３．２．３　术中配合　不同的手术阶段采取不同的护理措施。

密切配合麻醉医师调整补液速度，冷冻前期适当加快输液速度，补充复方乳酸钠林格注射液；冷冻期严密监测门静脉、腔静脉血流动力学变化，预防回心血量骤降所致的急剧低血压、心律失常及心搏骤停，补液中可适当加入血管活性药物。

术中按照规范操作氩氦刀治疗仪，并记录冷冻中心点温度变化。

为确保冷冻实验的顺利进行，术中电热毯温度维持在３７℃左右，以防止实验西藏小型猪冷休克。

３．３　术后护理　术后护理的关键是保证实验动物顺利苏醒和预防感染。

仍处于麻醉状态的实验西藏小型猪术后取俯卧位；保持呼吸道通畅，持续给氧，输注基本维持液［８ｍＬ／（ｋｇ·ｈ）～１０ｍＬ／（ｋｇ·ｈ）］；继续监测心率、动脉血压及中心静脉压；血压稳定后撤除测压装置；待猪出现复苏症状后可切断氧气供应并送复苏间单独关笼复苏。

２４ｈ内密切观察生命体征变化。

术后自由饮水，４８ｈ给予流食，第３天起给予普食。

动物术后应进行日常护理监测：给予阿莫西林颈后肌肉注射以抗感染，用量１ｍｇ／ｋｇ，每日２次，连用３ｄ。

切口在术后第１天、第３天、第５天给予碘伏消毒，用绷带包扎直到切口愈合，密切观察切口愈合情况及有无并发感染；记录动物温度、动物的食欲、肠蠕动、排尿、排便和行为举止；动物房每日以消毒水冲洗两遍，尽量保持清洁、干燥，并使室温保持在２４℃～２６℃。

术后分别于第１天、第３天、第５天、第７天静脉采血，测淀粉酶、白介素－６、白介素－８及Ｃ反应蛋白值，评估西藏小型猪手术产生炎症效应和免疫状态。

４　讨论冷冻治疗是一种原位消融技术，其原理和基本方法是将冷冻刀插入靶组织，将局部温度迅速降低，使细胞外与细胞内产生冰晶或形成易溶性结晶体，或破坏靶组织内（或邻近）血管，影响或断绝肿瘤的营养与氧供应，达到破坏靶组织的目的［５］。

作为一种局部治疗方法，冷冻具有超越其他治疗方法的若干优点：可控性好，温差电偶直接安装在刀尖，其变温速度、时间、温度、冰球的大小与形状完全可控；定位精确，对难以手术切除的胰腺癌及肝总动脉旁转移淋巴结进行治疗可减少副损伤；手术损伤轻，安全性大，手术并发症少；操作方法多样，可在手术中、内镜下或经皮途径进行；由于大血管流动血流的温热作用，冷冻可安全地治疗临近大血管的肿瘤。

有研究指出，当温度降至－１５℃或以下时，细胞外出现不均质性冰核，当温度降至－４０℃时，细胞内便形成均质性冰晶，细胞器如线粒体和内质网因此发生不可逆性损伤，继之损伤细胞膜，最终细胞死亡［６］。

本次实验采用１０％和１００％的氩气输出功率对猪胰头冷冻，均进行两个循环，１０％氩气冷冻组在开通氩气后３０ｓ内温度到达－４０℃以下，然后冷冻温度维持在－８０℃～－１００℃，复温后１ｍｉｎ内温度上升到２０℃～３０℃，维持不变。

两个循环温度变化不大。

１００％氩气冷冻组也在开通氩气后２０ｓ内温度到达－４０℃以下，然后冷冻温度维持在－１３０℃～－１５０℃，复温后１ｍｉｎ内温度上升到２０℃～３０℃，维持不变。

两个循环温度变化不大。

两个实验组维持－４０℃以下时间差距不大。

冷冻形成冰球大小稍有变化，１０％氩气冷冻组平均冰球直径为９．７ｍｍ，１００％氩气冷冻组平均冰球直径为１０ｍｍ。

本次实验过程中对猪生命体征进行监测，对异常变化及时给予相应的处理。