台湾基因l型鸡传染性支气管炎病毒SCTW株的分离鉴定及致病性研究
鸡传染性支气管炎病毒SC株N基因序列测定与同源性分析
鸡传染性支气管炎病毒SC株N基因序列测定与同源性分析李广兴;马德星【期刊名称】《吉林畜牧兽医》【年(卷),期】2004(000)007【摘要】从我国四川省一疑似鸡传染性支气管炎(Avian infectious bronchitisvirus,IB)的雏鸡病料中成功分离到一株鸡传染性支气管炎病毒(Infectious Bronchitis Virus,IBV),命名为SC.病毒经鸡胚传代、血凝试验监测和负染电镜检查证实为IBV.自接毒鸡胚尿囊液中提取RNA后应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增得到了IBVSC株mRNA6cDNA(编码N蛋白).应用DNAstar5.06,C1ustal1.8分析软件将克隆测序的N蛋白基因与Genbank中11株国内外参考毒株进行序列比较分析和同源性分析,发现IBV SC株变异独特,明显不同于国内外参考毒株.【总页数】4页(P19-21,34)【作者】李广兴;马德星【作者单位】东北农业大学动物医学院,黑龙江,哈尔滨,150030;东北农业大学动物医学院,黑龙江,哈尔滨,150030【正文语种】中文【中图分类】S851.34+7.2【相关文献】1.鸡传染性支气管炎病毒沈阳分离株S1基因序列测定及同源性分析 [J], 刘明春;江国托;康丽娟;刘思国;赵玉军2.肾型鸡传染性支气管炎病毒X株S1基因序列的测定及同源性分析 [J], 赵宝华;李尚波;王文成;尹广东;卫广森;许崇波3.鸡传染性支气管炎病毒华南分离株核蛋白基因的序列测定及同源性分析 [J], 刘思国;江国托;康丽娟;刘忠贵;卢景良;刘明春4.3株致病性鸡大肠杆菌P型菌毛结构基因的克隆、序列测定及同源性分析 [J], 苗玉和;王文成;张贵刚5.3株新城疫山东分离株HN基因全序列测定和分析 [J], 刘栋;莫贞峰;赫静;王娟;朱剑英;牛钟相因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
鸡传染性支气管炎的研究进展
Ｉ Ｂ Ｖ）引起 的一 种急性 的高度传 染性 的呼吸 系统疾病 ，该 疾
病的主要特征 为 ：喘气 、咳嗽 、打喷嚏 、气 管哕音和流鼻 涕 （ Ｂ ｕ ｔ ｃ ｈ ｅ ｒ Ｇ Ｄ等 ，２ ０ ０ ２ ） ” 。
１ ． １ Ｉ Ｂ Ｎ、Ｊ ｉ ｌ ｉ ｎ 、Ｊ Ａ Ａ Ｓ 、Ｊ ９等 疫苗 ，这些疫 苗 主要 是预防 肾致病 性Ｉ Ｂ Ｖ，在我 国地方 Ｉ Ｂ的防治中起着重要 的作用 Ｈ 。
鸡传染性 支气管炎是 禽类最主要 的疾病 之一 ，鸡 群感染
Ｉ Ｂ Ｖ后主要表 现为蛋鸡 的鸡 蛋产量减 少甚 至停止 、蛋 的质 量 下 降 ，出现软壳 蛋或者畸形蛋 ，肉鸡增 重缓慢等 。Ｉ Ｂ Ｖ感 染 后可能导致 支原体 、大肠杆 菌等病原微 生物的继发感染 ．造 成 的经济损失尤为严重 。 ２ 鸡传染性支气管炎病毒分子生物学研究进展 疫苗在 Ｉ Ｂ Ｖ的预防中起着重要 的作 用 。特别是用 本地 区 分离 株制备的活疫苗 、多价疫 苗是防制 Ｉ Ｂ Ｖ的更 为有效的方 法 。 目前 ，常用的疫苗 主要有灭活苗 和活疫苗两类 ．它们都 含有 完整的 Ｉ Ｂ Ｖ颗粒 ，但是 ，基 因工程疫苗显示 了巨大的应 用前景 ［ ２ １ 。
毒株之 间具有较 小的 交叉保护 性甚 至无 交叉保 护性 ．因此 ．
异 ，且不 同血 清型之间交叉保护 力弱或没有 ，因而 ，采用不
Ｉ Ｂ仍是 危害世界 养禽业 的重要 疫病 之一。本文收集该病毒 分
子生物 学和免疫 学研 究进展 ，认 为基 因工程 疫苗将是 未来一
个 重要 的研 究 方 向 ，并 且会 有 广 阔的 应 用前 景
鸡传 染性 支气管 炎 （ Ａ ｖ ｉ ａ ｎ Ｉ ｎ ｆ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｕ ｓ Ｂ ｒ ｏ ｎ ｃ ｈ ｉ ｔ ｉ ｓ ，Ｉ Ｂ ）是 南鸡传 染性 支气 管炎病毒 （ Ａ ｖ ｉ ａ ｎ Ｉ ｎ ｆ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｕ ｓ Ｂ ｒ ｏ ｎ ｃ ｈ ｉ ｔ ｉ ｓ Ｖ ｉ ｒ ｉ ｉ ｓ ，
我国鸡传染性支气管炎病毒的遗传变异和进化分析
我国鸡传染性支气管炎病毒的遗传变异和进化分析作者：李玉杰盛媛魏秀丽徐恩民吴静刘娜马秀丽来源：《家禽科学》2021年第06期摘要：本研究测定了2020年以来本实验室从不同地区分离的44个IBV毒株的S1基因序列，并与参考株序列进行比较分析。
结果发现分离的44个IBV毒株共占据5个分支。
其中：第一分支为QX型，包括25个分离株，QX型分离株又分为ClusterⅠ亚分支（7个）和ClusterⅡ亚分支（18个）;第二分支为4/91型，包括12个分离株;第三分支为LDT3型，包括3个分离株;第四分支为Mass型，包括2个分离株;第五分支为TW型，包括2个分离株。
从毒株遗传进化分析结果可以看出，QX型仍是我国IBV流行的主要基因型。
关键词：传染性支气管炎病毒;S1基因;遗传变异;进化变异中图分类号：S858.31 文献标识码：B 文章编号：1673-1085（2021）6-0005-05传染性支气管炎（IB）是鸡的一种急性、高度接触性的病毒性呼吸道疾病，在国内流行甚广。
传染性支气管炎病毒（IBV）属于冠状病毒科冠状病毒属的成员之一，其基因组为单股线状正链RNA，含有3种主要结构蛋白，即纤突蛋白S、膜蛋白M和核蛋白N。
S1基因是IBV 基因组中最易发生变异的部位，其编码蛋白可诱导机体产生IBV特异的中和抗体和血凝抑制抗体，S1蛋白在进化上比M蛋白和N蛋白都表现活跃，因此可不断导致IBV新的血清型、亚型和变异株的产生，致使IBV疫苗免疫失败，给鸡传染性支气管炎的防制带来新的困难。
由于传染性支气管炎病毒血清型和变异株众多，各型之间无交叉反应或交叉反应差。
因此，对于传染性支气管炎的防控，首先需明确当地流行传染性支气管炎的血清型和变异株。
从分子水平揭示近年来IBV的变异情况以及不同毒株之间的进化关系，对我国今后开展传染性支气管炎的监测和综合防控具有重要的指导意义。
因此，本研究針对2020年以来从不同地区分离的44株IBV毒株进行S1基因序列测定，比较分析了分离毒株的遗传演化，明确流行的基因型与变异趋势，对疫苗选择和疾病防控具有参考价值。
鸡传染性支气管炎病毒分离与鉴定
与禽业技术|疫病防治鸡传染性支气管炎病毒分离与鉴定荆丽珍1冯强2李宝华3(1,山东省海阳市畜牧兽医站265100；2,烟台丹富仕饲料有限公司264000；3,山东省农广校海阳市分校265100)摘要：利用疑似鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的病鸡，取病料对其进行RT-PCR测定。
同时，注意鸡的胚胎形态变化的特点，观察是否符合生物学特征，最终表明成功分离到了鸡传染性支气管炎病毒。
关键词：鸡传染性支气管炎；病毒；分离；RT-PCR鸡传染性支气管炎是属于病毒感染而引发的急性和高度传染性疾病［1］。
因为本病是病毒性疾病，一旦爆发无特效治疗药物，易继发其他疾病继续突变新菌株，使免疫鸡和未免疫鸡都能检测岀传染性支气管炎病毒叫因此，加强对禽类疾病防控中传染性支气管炎病毒研究具有重要意义。
本试验经过发病肉鸡的组织分离检查、组织碾磨液注射鸡胚盲传，血凝实验和荧光PCR检测等辨别鉴定手段来确定养鸡场的疑似传染性支气管炎毒株。
1材料与方法1.1材料1.1.1病料病料取自某大型养鸡场，经过驻场兽医初步诊断疑似鸡传染性支气管炎的病鸡肺脏、气管、肾脏。
1.1.2鸡胚，鸡红细胞用于检测病毒血细胞凝集活性。
1.1.3主要试剂鸡传染性支气管炎病毒实时荧光定量PCR检测试剂盒、PetNAD核酸萃取试剂盒。
1.1.4主要仪器高压锅，DYY-11131A型电泳槽，微型离心机，电热恒温培养箱，PCR基因扩增仪，微型漩涡混合仪，台式高速冷冻离心机，生物安全柜。
1.2方法对送检病鸡的病料的采集和处理提纯组织上清液用移液枪注入无菌离心管中备用。
通过病毒的增殖与纯化及病毒的RT-PCR检测确定毒株性质。
2结果与分析2.1病鸡剖检结果分析在洗消室对送检病鸡剖检对传支易感肺、肾、气管等器官剪开看有无栓塞和花斑肾。
剖检结果：病鸡肾脏极度肿大，颜色苍白，呈花呈花斑样，在气管、支气管内有淡黄色黏液性渗岀物，个别病鸡有黄色干酪样栓子，气囊浑浊、肾脏极度肿胀、颜色苍白，有尿酸盐沉积呈花斑样，符合IBV的临床特征。
鸡传染性支气管炎的诊断与治疗研究
X u m u s h o u y i鸡传染性支气管炎是目前养鸡业较为常见的疾病，该病传染性强，死亡率高，对鸡的产蛋量与质量均会产生严重影响，为养殖者带来严重的经济损失。
所以针对此病必须高度重视，采取有效的措施进行预防和治疗，保证养殖业的发展。
一、流行病学特征及病因鸡传染性支气管炎属于二类传染病、寄生虫病，该病主要是由传染性支气管炎病毒引起的，属于高度接触性呼吸道疾病，传染性极高，冬春换季季节是此病的高发期，以冬季最为显著，无明显的品种差异，雏鸡更易感染此病。
经调查雏鸡日龄越小，造成输卵管的损伤率越大，影响产量越严重。
其主要临床表现是呼吸困难、咳嗽、打喷嚏，主要通过空气传播，在日常中也可通过饲料、饮水、养殖人员、养殖器具进行传播。
该病病因主要与气温有关，过冷、过热应激反应大都会引发此病，以及由于饲养密度过大，致使通风效果不佳，也易引起此病，该病在无并发症的情况下，死亡率较低，但会影响产蛋量以蛋的质量，在出现肾型时，死亡率较高。
二、临床表现1、呼吸型①雏鸡呼吸型鸡传染性支气管炎在雏鸡患病时，前期无明显症状，发病时整体鸡群会出现同时发病的情况，早期临床表现为咳嗽、流鼻涕、流泪、喘气声大、张口喘气等症状，有时会出现鸡声音嘶哑，夜间嘶哑叫声最为显著。
随着病情加重，表现为精神萎靡、食欲不振，饮水增多、缩头闭目等表现，死亡率较低，但如治疗不及时，也会出现死亡。
②产蛋鸡产蛋鸡的临床表现与雏鸡不同，表现的呼吸道症状较轻，一般只有轻微的呼吸困难、咳嗽、气促，在安静状态下会出现气管“呼噜声”，有部分鸡会出现精神不振、食欲不佳、粪便颜色改变的情况，但症状较轻，死亡率低。
但该病对产蛋鸡产蛋量有影响，起病后第二天起，产蛋量减少，7-14天最为显著，产蛋率明显下降，并出现质量问题，软蛋和畸形蛋，蛋清与蛋黄严重分离，严重影响蛋的孵化率，一般情况下，产蛋量回升与鸡的身体状况成正比，中龄鸡饲养得当可很快恢复，对于中龄母鸡产蛋量回升情况，老龄母鸡回升较慢，甚至有些老龄母鸡会很难恢复原有水平。
鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定及S1基因序列分析的开题报告
鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定及S1基因序列分析的开题报告一、研究背景及意义鸡传染性支气管炎（Infectious bronchitis，简称IB）是一种由禽传染性支气管炎病毒（Infectious bronchitis virus，IBV）引起的高度传染性呼吸道疾病，其主要临床表现为呼吸困难、鸡冠、眼睛和面部水肿、排泄物增多或减少等，对鸡的健康和养殖业的经济效益造成了很大的损失。
目前，虽然IBV可以通过疫苗预防和控制，但疫苗种类较多，不同毒株的疫苗保护效果不同，到目前为止，还没有一种完全有效的IBV疫苗，为了更好地预防和控制IBV感染，必须进一步深入研究IBV，对其分子特性和病理机理进行深入探究。
二、研究内容及目标本研究旨在通过分离IBV病毒，对其进行鉴定，并分析其S1基因序列，以期更深入地了解IBV的分子特性和病理机理，进而为研究和控制IBV感染提供科学依据和理论支持。
具体研究内容包括以下三个方面：1. 鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定：本研究将从感染鸡的上呼吸道样本中提取IBV病毒，并通过细胞培养等方法进行纯化和鉴定，确定其毒株类型。
2. S1基因的PCR扩增和测序：本研究将采用PCR技术扩增IBV病毒S1基因序列，并进行测序，获取其S1基因序列。
3. S1基因序列分析：通过对IBV病毒S1基因序列进行分析，包括启动子、终止密码子、保守位点和可变位点等，在比较其与其他IBV序列差异的基础上，研究IBV病毒的分子特性和病理机理。
三、研究方法1. 实验材料：IBV感染鸡的上呼吸道样本、细胞培养液等。
2. 实验方法：（1）IBV病毒分离鉴定：将感染鸡的上呼吸道样本进行稀释后，接种于鸡胚蛋并进行细胞培养，使用酶联免疫吸附试验（ELISA）和逆转录PCR等方法对样本中IBV病毒进行鉴定。
（2）S1基因PCR扩增和测序：采用PCR技术，合成适合的引物，对IBV病毒中的S1基因进行扩增，经过聚合酶扩增反应、纯化等步骤后，得到S1基因的PCR产物，将其进行测序。
2011-2012年鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定及S1基因序列分析的开题报告
2011-2012年鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定及S1基因序列分析的开题报告【题目】2011-2012年鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定及S1基因序列分析【研究背景】传染性支气管炎是一种由传染性支气管炎病毒引起的家禽呼吸道疾病，能够导致家禽呼吸道炎症和肺部病变。
该疾病对家禽养殖业造成了重大威胁，尤其是在冬季和春季高发期间，其致死率和感染率较高，给养殖业造成了较大的经济损失。
为了更好地控制和管理传染性支气管炎，对2011-2012年鸡传染性支气管炎病毒进行分离鉴定和S1基因序列分析是非常必要的。
【研究目的】本研究旨在对2011-2012年鸡传染性支气管炎病毒进行分离鉴定，并通过S1基因序列分析，探究病毒的分布情况、遗传特征等方面的内容，为传染性支气管炎的防治和管理提供基础资料。
【研究内容】本研究将采用细胞培养和RT-PCR技术对2011-2012年鸡传染性支气管炎病毒进行分离鉴定，同时对其S1基因进行PCR扩增、克隆测序和分析，了解病毒的遗传特征、分布情况等方面的内容。
【研究方法】采用点滴法进行鸡传染性支气管炎病毒的分离培养，并通过RT-PCR技术对病毒进行鉴定。
使用PCR扩增技术对病毒S1基因进行扩增，克隆到载体上，然后进行测序。
通过序列比对和系统进化分析，探究鸡传染性支气管炎病毒的分布情况、遗传特征等方面的内容。
【预期结果】本研究将对2011-2012年鸡传染性支气管炎病毒进行分离鉴定和S1基因序列分析，明确病毒的分布情况和遗传特征，为传染性支气管炎的防治和管理提供基础数据和理论支持。
【研究意义】随着我国畜禽养殖技术的进步和养殖规模的扩大，传染性支气管炎对家禽养殖业的危害越来越大。
本研究将为传染性支气管炎的防治和管理提供基础资料和理论支持，探究病毒的分布、遗传特征等方面的内容，为科学防控这一疾病提供借鉴。
鸡传染性支气管炎病毒的分离与鉴定
目录中文摘要 (2)Abstract (3)引言 (4)1 材料与方法 (5)1.1 材料 (5)1.1.1 病料 (5)1.1.2鸡胚、鸡红细胞 (5)1.1.3 主要试剂 (6)1.1.4 主要仪器设备 (6)1.1.5 引物 (6)1.2 方法 (7)1.2.1 病料的采集和处理 (7)1.2.2 病毒的增殖与纯化 (7)1.2.3 病毒的RT-PCR检测 (7)1.2.4 鸡胚尿囊液的血凝活性测定 (8)1.2.5 鸡胚尿囊液的RT-PCR检测 (8)）的测定 (8)1.2.6 毒株半数感染量（EID502 结果与分析 (10)2.1 病鸡剖检结果分析 (10)2.2 病毒RT-PCR检测结果分析 (10)2.3 传毒结果 (11)2.4 传代鸡胚尿囊液的血凝检测结果分析 (11)2.5 传代鸡胚尿囊液的RT-PCR检测结果 (11)检测结果分析 (11)2.6 EID502.6.1 鸡胚胚病变情况 (11)的计算结果 (12)2.6.2 EID503 讨论 (12)致谢 (14)参考文献 (15)鸡传染性支气管炎病毒的分离与鉴定动物医学专业指导老师摘要：2011年4月17日，山东省临沂某大型养鸡厂送检一批疑似感染传染性支气管炎病毒的病（死）鸡，调查得知该鸡群临床上表现咳嗽、甩鼻，食欲不振，精神不佳，脱水，排白色稀粪，爪干、消瘦等症状且死亡率高，现进行病鸡剖检，病变表现为气管出血，“花斑肾”。
采集相关病料研磨并反复冻融后，进行RT-PCR检测结果发现IBV阳性，初步诊断该鸡群发生了鸡传染性支气管炎。
将病料接种10日龄SPF鸡胚进行盲传，收集各代尿囊液进行血凝试验、RT-PCR检测，同时观察对鸡胚的致病变特征，结果发现血凝试验均呈阴性，RT-PCR结果IBV表现阳性，新城疫（NDV）、禽流感（AIV）等其他外源病毒阴性，鸡胚表现蜷缩、生长阻滞现象，符合IBV的生物学特征，表示成功分离到了1株鸡传染性支气管炎病毒。
鸡传染性支气管炎鉴别诊断要点
肾型发病鸡肾肿大、色变淡、呈花斑状
肾型发病鸡肾肿大，两侧输尿管见白色尿酸盐沉积
肾型发病鸡肾极度肿胀，两侧输尿管及整个肾见白色尿酸盐沉积
肾型发病鸡肾肿胀，输尿管和泄殖腔见白色尿酸盐沉积
肾型发病鸡胆囊肿大。内有沙泥样物
生殖型发病产蛋鸡卵泡出现充血、出血和变形
（3）、产蛋鸡卵泡充血、出血或变形，输卵管水肿。产蛋恢复后，个别：采取综合性防疫措施是防制本病发生的良策，要保持鸡舍，饲养管理用具、运动场 地等清洁卫生、实施定期消毒，严格执行隔离病鸡等防疫措施。
2、疫苗接种：疫苗使用是较为有效的防制措施，接种鸡传染性支气管炎弱毒疫苗有一定的成效。 该苗分别由两个毒株制成，H120疫苗用于初生雏鸡的首免，不同品种的鸡均可使用，在3~5日龄时 就可滴鼻或加倍剂量饮水免疫；到1~2月龄时，用H52疫苗加强免疫。H52疫苗专供1月龄以上鸡应 用，初生雏鸡不能使用。免疫期：H120苗为2个月，H52苗为6个月。也可用进口鸡新城疫、传染 性支气管炎（含肾型）二联疫苗滴鼻预防。同时还可对3日龄以上不同时期的鸡用鸡传染性支气管 炎（含肾型）油佐剂灭活苗进行皮下和肌内注射。为使种鸡将母源抗体传递给雏鸡，需要对种鸡重 复免疫，在产蛋期每10~12周一次，每羽0.5mL，免疫效果较佳，可使后代雏鸡获得一致的母源抗 体。除上述疫苗外，对种鸡蛋鸡，可在产蛋前2~4周皮下或肌内注射鸡新城疫、传染性支气管炎、 减蛋综合征三联疫苗，每羽0.5mL；此外，还有新支感（H9）三联油乳剂苗等，各地可根据实际需 要适时选用。
鸡传染性支气管炎病毒的生物学特征及分型研究进展
仓 鼠 、 鹅 及 小 鼠等 多 种 动 物 及 人 的 红
托 等 指 出 ＩＶ 和 Ｎ Ｖ之 间 干扰 是 相 互 Ｂ Ｄ
细 胞 。殷 震等认 为 其凝集 反应 是非 特
异性 的。
的 ，先 接种病 毒干 扰后 接种 病毒 的复 制 ，但 后接 种病毒 不影 响先 接种病 毒 的复制 。金 梅林等 研究 表 明 ，通过 调 整 病毒 的接 种量和 收毒 时 间可降低 对 Ｎ Ｖ的干扰作用 。 Ｄ 总 之 ，ＩＶ可 干扰 Ｎ Ｖ的增殖 已 Ｂ Ｄ 被 大多数学者所 肯定 ，并将 Ｎ Ｖ干扰 Ｄ 试 验作 为鉴定 ＩＶ分离株 的方法之一 。 Ｂ
引起 的鸡 的一种 急性 、高度 接触性 传 染病 ，可 引起鸡 呼吸道 、肾脏 、输 卵 管 、肠 道及 腺 胃等多 组织 器 官病 变 。 主要侵 害 １４周龄 的鸡 ；若雏鸡感 染 ， －
易 影 响 后 期 的 产 蛋 性 能 ， 出 现 假 母 鸡
陈 福勇认 为 胰酶本 身 和经 胰酶 处 理 的正 常尿囊 液也 能一定 程度 上凝 集 红 细胞 ，认 为磷 酯酶 Ｃ对 ＩＶ毒株 的 Ｂ 作 用有选择 性 。吴 延功 等用家 兔 Ａ型 魏 氏梭菌 培养液 （ Ｐ Ｃ 处 理 的 含 Ｌ） Ｉ Ｖ，不同毒株也会具有不 同的红细胞 Ｂ 凝 集谱 和效价 。步 志高 等推测 这种 处 理 可能 是移 去 ＩＶ表面 连接 于 一半 Ｂ 乳糖 ２３位 的唾液酸而 获得血凝 活性 。 ， 尽 管 Ｉ Ｖ的血凝性 还存 在争议 ，但 利 Ｂ 用 ＩＶ 的血 凝性 而建立 的血 凝抑制 试 Ｂ 验 （ Ｉ ，已用于 Ｉ Ｈ） Ｂ灭 活疫 苗的免 疫 效果评价 。
但 是对于 ＩＶ与 Ｎ Ｖ在鸡体 内是否存 Ｂ Ｄ
在 干扰作用 ，还有待于进一 步研究 。
鸡传染性支气管炎病毒变异株的分离及分子特征研究
ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ ８ － ０ ５ ８ ９ ． ２ ０ １ ３ ． １ ２ ． ０ ２
鸡传 染性 支气 管炎病 毒 变异株 的分 离及分 子特征 研 究
边 葶苈 ，朱林 文思 ，雷 静 ，任景 乐 ，李 烨 ，周继勇 ，廖 敏
示 ，ＷＦ ２ ０ １ １ 分 离株 与 常 见 的 参 考 病 毒 株 的 同源 性 普 遍 较 低 ，ｓ １ 基 因的 同源 性 在 ４ ９ ． ７％～８ ６ ． ０％之 间 ，并 且 与 Ｌ Ｘ ４ 、Ｓ Ａ Ｉ Ｂ Ｋ 和 Ｍａ ｓ ｓ 类 型 的病 毒株 存 在 较 大的 遗 传距 离。ＷＦ ２ ０ １ １ 是 一 株 变异 程度 比较 大 的 Ｉ Ｂ Ｖ 变异株 。
关键词 ：鸡传染性 支气管炎病毒 ；变异株 ；遗传进化分析
中 图分 类号 ：￥ ８ ５ ２ ． ６ ５ 文 献 标 识 码 ：Ａ 文章 编 号 ：１ ０ ０ ８ ． ０ ５ ８ ９ （ ２ ０ １ ３ ） １ ２ ． ０ ９ ６ ０ ． ０ ４
Ｉ ｓ ｏ ｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｎ ｄ ｍｏ ｌ ｅ ｃ ｕ ｌ ａ ｒ Ｃ ｈ ａ ｒ ａ Ｃ ｔ ｅ ｒ ｊ ｚ ａ ｔ ｉ Ｏ ｎ ｏ ｆ ａ ｎ ａ ｖ ｉ ａ ｎ ｉ ｎ ｆ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｕ ｓ ｂ ｒ ｏ ｎ ｃ ｈ ｉ ｔ ｉ ｓ ｖ ｉ ｒ ｕ ｓ ｖ ａ ｒ ｉ ａ ｎ ｔ
第３ ５ 卷 第１ ２ 期
２ ０ １ ３年 １ ２月
中 国 预 防 兽 医 学 报
Ｃ ｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ Ｊ ｏ ｕ ｎａ ｒ ｌ ｏ ｆ Ｐ ｒ ｅ ｖ ｅ ｎ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｖｅ ｔ ｅ ｉ ｒ ｎ ａ ｒ ｙ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ｅ
鸡传染性支气管炎病毒地方流行株的分离鉴定及免疫试验
突呈冠状排 列的病毒粒子 ； Ｎ Ｖ有明显的干扰作 用； 对 Ｄ 分离株 的传代物都有明显的致 鸡胚矮 小化作 用； 动物回归感 染死亡鸡肾脏病 变明显 ， 表现 肾脏肿 大、 花斑肾现 象， 输尿管 内充塞大量尿酸盐 ； 直接血凝性 ， ｌ 无 经 ％胰酶处理后 可
凝 集 鸡 红 细胞 ； 离株 对 乙醚 和氯 仿敏 感 ； 用 反 转 录一 合酶 链 式 反 应 （ Ｔ Ｐ Ｒ） 分 离毒 株 进 行 扩增 ， 分 采 聚 Ｒ —Ｃ 对 结果 均 扩 增
出特异 Ｎ基 因核酸 片断 ，以上结果表 明该分 离病毒为 ＩＶ。将该分 离株 制备 灭活苗进行免疫试验 ，试验保护率为 Ｂ
１０ 结果 显 示 了该 分 离株 具有 良好 的 免 疫 效 力。 ０ ％．
关键词 ： 鸡传染性 支气管炎病毒 ；分 离；鉴定；免疫试验 鸡传染性支气管 炎（ ｆ ｔ ｕ ｒｎｈｔ ，Ｉ）是 由鸡传 Ｉ ｅ ｉ ｓＢｏ ｃｉｓ Ｂ ｎ ｃｏ ｉ 染性支气管 炎病 毒（ｎｅｔ ｕ ｒｎ ｈ ｉ Ｖｒｓ ，ＩＶ Ｉｆ ｉ ｓＢｏ ｃｉｓ ｉ ｃｏ ｔ ｕ Ｂ ）引起
６ 酶标仪读数 ． ２
将 反 应 板 放 置 在 酶 标 仪 中先 对 空 白孑 和 Ｌ
疫 吸附试验主要是在宰前 活体采血检测 ， 能够作到及 早发现 病猪 ， 及早治疗 ， 减少发病率 ， 同时一方 面避免 了宰后检 出患 病生猪销毁造成 的经济损失 。 一方面避免了宰后误检 ， 漏检 ，
阳性 血 清 ， 由 山西 省 畜 牧 所 馈 赠 ； ＭＶ 反转 录酶 、 Ｎ 酶 均 Ａ ＲＡ
素和提高鸡的免疫力 。 而免疫仍是 防制 Ｉ Ｂ的主要手段 ， 由于
Ｉ Ｖ变 异 较 快 ， Ｖ血 清 型 的 研 究 也 需 跟 上 Ｉ Ｖ变 异 的 速 Ｂ Ｉ Ｂ Ｂ
鸡传染性支气管炎病毒的分离和鉴定
合 成 ＩＢＶ特 异 性 检 测 引 物 ， 利 用 病 毒 基 因 组 ＲＮＡ提取 试 剂 盒 提 取 第 ３代 分 离 毒 的 基 因组 ＲＮＡ， 以 ＲＮＡ 为模 板 进 行 ＲＴ－ＰＣＲ扩 增 ，ＲＴ－ＰＣＲ扩 增 体 系 为 ２×ｓｔｅｐ ｂｕｆｅｒ １２．５ Ｌ、上 下 游 引 物 各 ０．５ Ｌ、Ｐｒｉｍｅ
圈 ｈｉ 试Ｕ砷验 研芒究Ｉ１ ＪＩｕ Ｉｉｌ
２ｏ１８年 第 ４８卷 ·第 ４期
９４℃ ３０ ｓ，５５ ｏＣ ３０ ｓ，７２℃ ３０ ｓ，３０个 循 环 ；７２℃ １０ ｍｉｎ。Ｒ１ ＰＣＲ扩增 产 物经 ｌ＿１３％琼 脂 糖凝 胶 电泳检 测 网。 １．７动 物 回 归 试 验
将 第 ３代 分 离 毒 尿 囊 液 以腿 部 肌 肉 注 射 的 方 式 接 种 ＳＰＦ鸡 １Ｏ只 ，０．１ ｍＹ只 ，观 察 ＳＰＦ鸡 的 发 病 和 死 亡 情 况 ，对 死 亡 ＳＰＦ鸡 进 行 解 剖 并 观 察 病 变 特 征 。 ２ 结 果与 分析 ２．１鸡胚接种 与胚体病 变特征 观察结果
２０１８年 第４８卷 ·第 ４期
固 试 验研 究
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鸡传染性支气 管炎病毒 的分 离和鉴定
高 志 学 ，范 伟 ，梁 娟
（１．宝鸡公路动物 防癌 监督检查站 ，陕西 宝鸡 ７２１３１２；２．宝鸡 市渭 滨区神农 畜牧 畜 医站 ，陕西 宝鸡 ７２１０００）
摘 要 ：为掌握发病 鸡场的致病 原 ，将 临床 病料接 种ＳＰＦ鸡胚分 离得 到一株 病毒 ，通过胚体病 变特征 、血凝试 验 、ＲＴ－ＰＣＲ检测 、动物 回归试验等对该病毒进行 了鉴定 ，结果显示 ：病料 处理接种 鸡胚后 ４８—１４４ ｈ内鸡胚全 部 死亡 ，剖检死亡鸡胚 可见胚 体存 在蜷缩 、发 育矮小等特异性病痕 ，收获 的鸡胚尿 囊液无血凝性 ，ＲＴ—ＰＣＲ检 测 为鸡传 染性 支气管炎病 毒 阳性 ，动物回 归试验 中接种 的ＳＰＦ雏鸡 可复制 出现 鸡传染性 支气管炎的典型症状 。 关键词 ：鸡 ；传 染性 支气管炎 ；病毒 分 离；鉴定 中图分类号 ：８８５８．３１ 文献标识码 ：Ｂ 文章编号 ：１００６－７９９Ｘ（２０１８）０４—００７７—０２
鸡传染性支气管炎病毒血清学和分子生物学检测技术研究进展
试验研究ＬＩＶＥＳＴＯＣＫＡＮＤＰＯＵＬＴＲＹＩＮＤＵＳＴＲＹＮｏ．９，２０２３鸡传染性支气管炎病毒血清学和分子生物学检测技术研究进展李 倩青海民族大学预科教育学院，青海西宁８１００００摘 要 鸡传染性支气管炎病毒（ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓｖｉｒｕｓ，ＩＢＶ）是一种致病性较强的病毒，不仅严重损害鸡的呼吸道，还会对其他器官造成影响，早发现、早治疗是防治该病出现大规模传播的重要手段。
为了更好地防治该病，研究者们一直致力于建立快速准确的检测技术，特别是在血清和分子水平上。
对传染性支气管炎（ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｂｒｏｎｃｈｉ ｔｉｓ，ＩＢ）实验室检测技术的相关研究和优缺点进行了综述。
在实际检测过程中，应结合具体情况，选择正确的方法，确保测试结果的准确性。
关键词 鸡传染性支气管炎病毒；血清学检测；分子生物学检测ｄｏｉ：１０．１９５６７／ｊ．ｃｎｋｉ．１００８ ０４１４．２０２３．０９．００４ 引言鸡传染性支气管炎病毒（ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓｖｉ ｒｕｓ，ＩＢＶ）的致病性比较强，且传播范围广，传染速度快，不仅会对鸡的呼吸道和消化道产生极其严重的损害，还会对鸡群的生产性能产生影响，严重的可导致死亡。
此外，病毒还会对繁殖系统产生损害，使输卵管永久性的退化。
因ＩＢＶ血清型别较多，且各血清型别之间缺少有效的相互防护，新毒株产生时会导致机体对ＩＢＶ的免疫力降低。
为寻找快速准确的检测方法，从血清学和分子生物学方面进行研究，是防控鸡传染性支气管炎（ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓ，ＩＢ）的重要研究内容。
血清学检测技术１．１ 常用检测技术及其方法比较１．１．１ 酶联免疫吸附试验酶联免疫吸附试验（ｅｎｚｙｍｅｌｉｎｋｅｄｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔａｓｓａｙ，ＥＬＩＳＡ）法操作步骤比较简单，对于病毒的检测比较准确。
从１９７１年Ｅｎｇｖａｌｌ等人创立了ＥＬＩＳＡ技术后，ＥＬＩＳＡ因其灵敏度高、特异性强、操作简单、快速而被广泛用于各种动物病的诊断与免疫分析。
1株鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定及生物学特性研究
1株鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定及生物学特性研究宋新宇;张青;郭莉莉;窦小龙;赵鹏;郎枫;范根成【期刊名称】《中国兽医杂志》【年(卷),期】2018(054)007【摘要】为跟踪传染性支气管炎病流行情况,2015年我们从在江苏某养鸡场疑似传染性支气管炎发病鸡群采集分离到1株疑似传染性支气管炎病毒,对其进行了鉴定和生物学特性研究.结果在鸡胚上连传6代出现鸡胚典型病变,死亡鸡胚全身出血明显,未死鸡胚发育受阻,呈明显的侏儒胚、蜷缩.分离株S1基因RT-PCR扩增可见到清晰的1.7 kb左右大小的条带,与引物设计的预期结果相符,与GenBank中的IBV序列进行比对和分析,从进化树看,分离株属于IBV当前主要流行的Qx型.电镜下观察可见直径为80 ～ 120 nm,有囊膜和纤突的冠状病毒粒子;经卵磷脂酶C处理后能凝集鸡红细胞,并能特异性地被该分离株的高免血清所抑制;对热、酸碱、胰酶有一定耐受性,对脂溶剂敏感,符合鸡传染性支气管关病毒(IBV)有囊膜的特性;该分离株的最小致病量为102.0EID50.该毒株灭活苗0.25 mL/只免疫即可达到良好的免疫效果.以上结果表明,该分离株符合鸡传染性支气管炎病毒的特性.【总页数】6页(P6-11)【作者】宋新宇;张青;郭莉莉;窦小龙;赵鹏;郎枫;范根成【作者单位】动物基因工程疫苗国家重点实验室山东省畜禽动物疫苗重点实验室青岛市畜禽疫苗重点实验室青岛易邦生物工程有限公司,山东青岛266114;动物基因工程疫苗国家重点实验室山东省畜禽动物疫苗重点实验室青岛市畜禽疫苗重点实验室青岛易邦生物工程有限公司,山东青岛266114;动物基因工程疫苗国家重点实验室山东省畜禽动物疫苗重点实验室青岛市畜禽疫苗重点实验室青岛易邦生物工程有限公司,山东青岛266114;动物基因工程疫苗国家重点实验室山东省畜禽动物疫苗重点实验室青岛市畜禽疫苗重点实验室青岛易邦生物工程有限公司,山东青岛266114;动物基因工程疫苗国家重点实验室山东省畜禽动物疫苗重点实验室青岛市畜禽疫苗重点实验室青岛易邦生物工程有限公司,山东青岛266114;动物基因工程疫苗国家重点实验室山东省畜禽动物疫苗重点实验室青岛市畜禽疫苗重点实验室青岛易邦生物工程有限公司,山东青岛266114;动物基因工程疫苗国家重点实验室山东省畜禽动物疫苗重点实验室青岛市畜禽疫苗重点实验室青岛易邦生物工程有限公司,山东青岛266114【正文语种】中文【中图分类】S855.3【相关文献】1.鸡传染性支气管炎病毒ck/CH/LHB/121042毒株的分离鉴定及分子特征研究[J], 马得莹;姜磊;许丽文;刘亮亮;韩宗玺2.鸡传染性支气管炎病毒ck/CH/LHB/121042毒株的分离鉴定及分子特征研究[J], 马得莹;姜磊;许丽文;刘亮亮;韩宗玺3.台湾基因Ⅰ型鸡传染性支气管炎病毒SCTW株的分离鉴定及致病性研究 [J], 郭明萍;王富妍;吴瑞婷;邹年莉;赵扬;黄勇4.鸡传染性支气管炎病毒ck/CH/LHB/100801株的分离鉴定及分子特征研究 [J], 马会杰;刘孝珍;韩宗玺;邵昱昊;孔宪刚;刘胜旺5.鸡传染性支气管炎病毒CK/CH/LDL05Ⅱ的分离鉴定及生物学特性 [J], 马亚珍;李晓华;韩宗玺;邵昱昊;聂磊;龚利洋;张庆霞;孙怀刚;冉多良;刘胜旺;孔宪刚因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ￣． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ ８ — ０ ５ ８ ９ ． ２ ０ １ ３ ． ０ ８ ． ０ ３
台湾基 因 ｌ 型鸡 传 染性 支气 管炎 病毒 Ｓ Ｃ Ｔ Ｗ 株 的 分 离 鉴 定 及 致 病 性 研 究
郭 明 萍 ，王 富妍 ，吴 瑞 婷 ，邹 年 莉 ，赵 扬 ，黄 勇
流 行 病 学调 查 ，做 好 Ｅ ． ｃ ｏ ｌ ｉ 的 防 治 ，对 鸡 传 染性 支气 管 炎（ Ｉ Ｂ ） 的 防制 有 重要 的意 义 。 关 键 词 ：鸡传 染性 支 气 管 炎 ；禽 源 大肠 杆 菌 ；台湾 基 因 Ｉ 型 ；协 同致 病
中 图分 类 号 ：￥ ８ ５ ２ ． ６ ５ 文献 标 识 码 ：Ａ 文 章 编 号 ：１ ０ ０ ８ ． ０ ５ ８ ９ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ８ ． ０ ６ １ ３ ． ０ ５
ＧＵＯ Ｍｉ ｎｇ － ｐ ｉ ｎｇ ，Ｗ ＡＮＧ Ｆ ｕ－ ｙ ａ ｎ ，Ｗ Ｕ Ｒｕｉ — ｔ ｉ ｎｇ ，Ｚ０Ｕ Ｎｉ ａ ｎ － ｌ ｉ ，ＺＨＡ０ Ｙａ ｎ ｇ ，ＨＵＡＮＧ Ｙｏ ｎ ｇ ， 。
（ １ ． Ｃｏ ｌ ｌ ｅ ｇ ｅ ｏ ｆ Ｖｅ ｔ ｅ ｒ ｉ ｎ ａ ｒ ｙ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ｅ ， Ｓ ｉ ｃ ｈ ｕ ａ ｎ Ａｇ ｎ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ａ ｌ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ， Ｙａ ’ ａ ｌ ｌ ６ ２ ５ ０ １ ４ ， Ｃｈ ｉ ｎ ａ ；
２ ． Ａ ｎ ｉ ｍａ ｌ Ｄ ｉ ｓ ｅ ａ ｓ ｅ ａ ｎ ｄ Ｈｕ ｍａ ｎ Ｈｅ ａ ｌ ｔ ｈ Ｌ ａ ｂ ｏ ｒ ａ ｔ ｏ ｙ ｒ ｏ ｆ Ｓ ｉ ｃ ｈ ｕ ａ ｎ Ｐ ｒ ｏ ｖ ｉ ｎ ｃ ｅ ， Ｓ ｉ ｃ ｈ ｕ ａ ｎ Ａ ｇ ｎ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ａ ｌ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ， Ｙａ ’ ａ ｎ ６ ２ ５ ０ １ ４ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
第３ ５ 卷 第 ８期
２ ０ １ ３ 年 ８ 月
中 国 预
防 兽
医 学 报
Ｖｏ１ ． ３ ５． ＮＯ． ８ Ａｕｇ． ２０１ ３
Ｃｈｉ ｎｅ ｓ ｅ Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎａ ｌ ｏ ｆ Ｐｒ ｅ ｖｅ ｎ ｔ ｉ ｖｅ Ｖｅ ｔ ｅ ｒ ｉ ｎ ａ ｒ ｙ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎｅ
ｉ ｎ ｏ ｃ ｕ ｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｃ ｈ ｉ ｃ ｋ ｅ ｍｂ ｙｏ ｒ ａ ｎ ｄ ＲＴ － Ｐ ＣＲ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｔ ｈ ｅ ａ ｌ ｌ ａ ｎ ｔ ｏ ｉ ｃ ｌ ｆ ｕ ｉ ｄ ． Ｔ ｈ ｅ ｓ ｅ ｑ ｕ ｅ ｎ ｃ ｅ ａ ｎ ａ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ ｏ ｆ Ｓ １ ｇ ｅ ｎ ｅ ｓ ｈ ｏ ｗｅ ｄ ｔ ｈ ａ ｔ ｔ ｈ ｅ ｉ ｓ ｏ ｌ ａ ｔ ｅ
Ｒ Ｔ ． Ｐ Ｃ Ｒ检 测，从四川某养鸡场的发病鸡群 中分离出一株 Ｉ Ｂ Ｖ 。其 ｓ １ 基 因测序分析表 明 ，该病毒分 离株属 于台湾 基因 Ｉ 型（ Ｔ ｗ Ｉ ） Ｉ Ｂ Ｖ，命名为 Ｓ Ｃ Ｔ Ｗ 株 ，这是 中国大 陆地区首次分 离的 Ｔ ｗ Ｉ型 Ｉ Ｂ Ｖ。将该分 离株与禽源致病性
Ｉ ｓ ｏ ｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｎ ｄ ｉ ｄ ｅ ｎ ｔ ｉ ｆ ｉ ｃ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ａ Ｔａ ｉ ｗａｎ ｇ ｅ ｎ ｏ ｔ ｙ ｐ ｅ Ｉ ａ ｖ ｉ ａ ｎ ｉ ｎ ｆ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｕ ｓ
ｂ ｒ ｏ ｎ ｃ ｈ ｉ ｔ ｉ ｓ ｖ ｉ ｒ ｕ ｓ ａ ｎ ｄ ｔ ｈ ｅ ｐ ａ ｔ ｈ ｏ ｇ ｅ ｎ ｉ ｃ ｉ ｔ ｙ ｉ ｄ ｅ ｎ ｔ ｉ ｆ ｉ ｃ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ
大肠 杆 菌（ Ｅ ． ｃ ｏ ｌ Ｏ 分 别或 混 合感 染 １ ５日龄 白羽 肉鸡 以鉴 定其 致 病 性 ，结果 显 示 ：Ｓ Ｃ Ｔ Ｗ 分 离株 具 有较 强 的致 病 性 ；
而且 Ｅ． ｃ ｏ ｌ ｉ 的 混 合 感 染 可 明显 增 加 Ｓ Ｃ Ｔ Ｗ 的 发 病 率 和 病 死 率 ，使 其 组 织病 理 变化 更加 严 重 。 因此 ，加 强 Ｉ Ｂ Ｖ 的
Ａ ｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ：Ａ ｎ ａ ｖ ｉ ａ ｎ ｉ ｎ ｆ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｕ ｓ ｂ ｒ ｏ ｎ ｃ ｈ ｉ ｔ ｉ ｓ ｖ ｉ ｒ ｕ ｓ ｒ Ｉ Ｂ Ｖ ）ｗａ ｓ ｉ ｓ ｏ ｌ ａ ｔ ｅ ｄ ｆ ｒ ｏ ｍ ａ ｆ ｅ ｃ ｔ ｅ ｄ ｃ ｈ ｉ ｃ ｋ ｅ ｎ ｓ ｉ ｎ ａ ｆ ａ ｒ ｍ ｏ ｆ Ｓ ｉ ｃ ｈ ｕ ａ ｎ ａ ｒ ｅ ａ ｂ ｙ
ｂ ｅ ｌ ｏ ｎ ｇ ｓ ｔ ｏ Ｔ ａ ｉ ｗａ ｎ ｇ ｅ ｎ ｏ ｔ ｙ ｐ ｅ Ｉ（ Ｔ Ｗ Ｉ ） ｏ ｆ Ｉ Ｂ Ｖ， ｄ ｅ ｓ ｉ ｇ ｎ ａ ｔ ｅ ｄ Ｓ Ｃ Ｔ Ｗ， ｗｈ ｉ ｃ ｈ ｗａ ｓ ｉ ｆ ｒ ｓ ｔ ｉ ｓ ｏ ｌ ａ ｔ ｅ ｄ ｉ ｎ ｍａ ｉ ｎ ｌ ａ ｎ ｄ ｏ ｆ Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ． Ｔ ｈ ｅ ｎ １ ５ ｄ ａ ｙ － ｏ ｌ ｄ
（ １ ． 四 川农业 大学 动 物医 学院 ，四川 雅 安 ６ ２ ５ ０ １ ４ ； ２ ． 四川农业 大 学 动物疫 病 与人类 健康 四川 省重点 实验 室 ，四川 雅安 ６ ２ ５ ０ １ ４ ）
摘 要 ：为 分 离鉴 定 鸡 传 染性 支 气 管 炎 病 毒 （ Ｉ Ｂ ｖ ） 及 其 致 病 性 ，本 研 究 通 过 病 料 鸡 胚接 种 和 鸡 胚 尿 囊 液 的